LAPORAN AKHIR PRAKTIKUM KIMIA ANALISIS I METODE SPEKTROFOTOMETRI DERIVATIF (PENETAPAN KADAR TEOFILIN DALAM CAMPURAN TEOFILIN DAN

PARACETAMOL)

Oleh : Kelompok I AA. Sg. Narithi Maharani Vera Carolina Gumi Ni Putu Wahyu Pradnya Icwari Ni Made Lisna Meilinayanti (0908505038) (0908505039) (0908505040) (0908505042)

JURUSAN FARMASI FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS UDAYANA 2011

METODE SPEKTROFOTOMETRI DERIVATIF (PENETAPAN KADAR TEOFILIN DALAM CAMPURAN TEOFILIN DAN PARASETAMOL) I. TUJUAN 1. Membuat spektra dari masing-masing komponen dalam campuran 2. Menentukan panjang gelombang zero crossing 3. Membuat kurva baku dari larutan standarnya pada panjang gelombang zero crossing 4. Menetapkan kadar teofilin II. DASAR TEORI Spektrofotometri derivatif merupakan metode manipulatif terhadap spektra pada spektrofotometri ultraviolet dan cahaya tampak.Kadar larutan campuran dua zat dapat ditentukan dengan metode spektrofotometri.Namun bila tidak dipisahkan terlebih dahulu maka spektrum komponen-komponennya sering saling tumpang tindih (overlapping).Bila dikehendaki pengukuran tanpa pemisahan, dapat dilakukan dengan metode spektrofotometri ultraviolet derivatif, dimana kadarnya diukur pada panjang gelombang zero crossing.Spektra serapan normal salah satu konsentrasi dari masing-masing senyawa/komponen dibuat spektra derivat pertama, derivat kedua dan derivat ketiga dengan menggambarkan selisih absorban dua panjang gelombang berdekatan vs harga rata-rata dua panjang gelombang tersebut.Dari spektra derivat tersebut ditentukan panjang gelombang zero crossing komponen, dimana dA/d komponennya bernilai nol (Susanti, 2011). Pada spektrofotometri konvensional, spektrum serapan merupakan plot serapan (A) terhadap panjang gelombang (). Pada metode spektrofotometri derivatif, plot A lawan , ditransformasikan menjadi plot dA/d lawan e untuk derivatif pertama, dan d2A/ d2 lawan untuk derivatif kedua, dan seterusnya. Panjang gelombang serapan maksimum suatu senyawa pada spektrum normal akan menjadi zero crossing pada spektrum derivative pertama. Panjang gelombang tersebut tidak mempunyai serapan atau dA/d = 0. Metode spektrofotometri derivatif dapat digunakan untuk analisis kuantitatif zat dalam campuran dimana spektrumnya mungkin tersembunyi dalam suatu bentuk spektrum besar yang saling tumpang tindih dengan mengabaikan proses pemisahan zat yang bertingkat- tingkat.

Untuk suatu larutan yang mengandung dua komponen yang menyerap, x dan y, serapan atau absorbansi (A) diukur pada dua panjang gelombang.Ketelitian yang tinggi didapatkan dengan memilih panjang gelombang yang serapannya maksimal karena dengan pergeseran sedikit pada kurva serapan tidak menyebabkan perubahan absorbansi yang terlampau jauh.Pada metode spektrofotometri derivatif, jumlah komponen dalam campuran dapat mencapai 8 komponen dengan syarat selisih panjang gelombang maksimum antara komponen minimal 5 nm. Jika jumlah komponen dalam sampel lebih dari 3 maka untuk menghitung kadar digunakan software multikomponen yang terdapat pada alat spektrofotometer UV-Vis (Fatah, 2008). Bila panjang gelombang zero crossing masing-masing senyawa tidak sama dengan panjang gelombang pada serapan maksimumnya, maka penetapan kadar campuran dua senyawa dapat dilakukan tanpa pemisahan terlebih dahulu. Akan tetapi apabila panjang gelombang zero crossing masing-masing senyawa sama dengan panjang gelombang pada serapan maksimumnya akan terjadi pelebaran pita, sehingga kurva derivatif pertama tidak akan membantu pemisahan spektranya. Pada situasi tersebut maka dicoba derivatif kedua (Fatah, 2008). Derivasi atau pengunaan derivatif kedua dan selanjutnya akan menyebabkan terbentuknya spektrum yang lebih tinggi pada derivatif selanjutnya (gambar. 1). Dengan demikian jumlah spektrum akan bertambah karena pemecahan sejumlah puncak-puncak yang lebih terinci menjadi dua spektrum.

Gambar 1.Bentuk spektrum derivatif pertama sampai keempat suatu pita Gauss (Fatah, 2008).

Penentuan kadar teofilin dalam campuran teofilin dan parasetamol perlu dilakukan dengan menggunakan metode spektrofotometri derivatif karena serapan maksimum dari parasetamol dan teofilin berada pada panjang gelombang yang berdekatan. Hal ini menyebabkan terjadinya tumpang tindih (overlapping) spektrum secara total. Spektrum yang tumpang tindih menyebabkan kesulitan dalam penetapan kadar teofilin karena terganggu oleh serapan parasetamol. Metode spektrofotometri derivatif dapat digunakan untuk meningkatkan pemecahan puncak yang saling tumpang tindih tersebut sehingga teofilin dapat ditetapkan kadarnya tanpa terganggu oleh serapan parasetamol.Penetapan kadar teofilin dalam campuran parasetamol dan teofilin secara spektrofotometri derivatif dapat dilakukan dengan menggunakan metode zero crossing dan metode peak to peak(Wulandari, 2008 ). Metode spektrofotometri derivatif telah diaplikasikan secara luas di dalam kimia analisis kuantitatif, analisis lingkungan, farmasetik, klinik, forensik, biomedik, dan industri. Metode ini merupakan salah satu analisis multi komponen yang dapat dilakukan apabila: Hasil preparasi sampel tidak memungkinkan mendapatkan senyawa tunggal Tidak diinginkan pemisahan dalam preparasi sampel Spektrum zat tersebut mungkin tersembunyi dalam suatu bentuk spektrum besar

yang salingtumpang tindih dengan mengabaikan proses pemisahan zat yang bertingkattingkat. Senyawa yang akan ditentukan kadarnya memiliki absorbansi rendah dan memiliki Tekhnik ini menawarkan berbagai macam keuntungan dibandingkan dengan metode absorbansi biasa seperti dapat meningkatkan resolusi dari spektrum yang over lapping ,waktu analisis yang lebih cepat ,biaya yangdibutuhkan lebih murah dan lebih sederhana A. Metode Peak-to-Peak Spektrum serapan larutan baku teofilin dan sampel dibuat spektrum derivatif pertama. Spektrum derivatif pertama dibuat dengan memplotkan dA/d terhadap panjang gelombang (). Amplitudo diperoleh dari selisih serapan 2 panjang gelombang yang berderet teratur dibagi , dalam hal ini adalah 1 nm. Panjang gelombang peak-topeak ditentukan dari penggabungan spektrum derivatif larutan baku teofilin dan sampel. Dari hasil penggabungan spektrum derivatif tersebut, dicari daerah panjang gelombang pengaruh dapat meningkatkan nilai absorbansi.( Hayun, 2006 ).

dimana terdapat spektrum yang saling berhimpitan satu sama lain secara total yang menghasilkan puncak maksimum dan puncak minimum. B. Metode Zero Crossing Pada metode zero crossing spektra serapan normal salah satu konsentrasi dari masing-masing senyawa atau komponen dibuat spektra derivat pertama, derivat kedua dan derivat ketiga dengan menggambarkan selisih absorban dua panjang gelombang berdekatan vs harga rata-rata dua panjang gelombang tersebut. Dari spektra derivat tersebut ditentukan panjang gelombang zero crossing komponen, dimana zero crossing masing-masing zat ditunjukkan oleh panjang gelombang yang memiliki serapan nol pada berbagai konsentrasi. Apabila suatu campuran zat memiliki memiliki zero crossing lebih dari satu, maka yang dipilih untuk dijadikan analisis adalah zero crossing yang : serapan senyawa pasangannya dan campurannya persis sama, karena pada tersebut dapat secara selektif mengukur serapan senyawa pasangannya. memiliki serapan yang paling besar, karena pada serapan yang paling besar, serapannya lebih stabil sehingga kesalahan analisis dapat diperkecil (Hayun, 2006). Teofilin Teofilin (C6H8N4O2.H2O) memiliki berat molekul 198,18. Teofilin mengandung satu molekul air hidrat atau anhidrat. Mengandung tidak kurang dari 97,0% dan tidak lebih dari 102,0% C7H8N4O2 dihitung terhadap zat yang telah dikeringkan. Teofilin sukar larut dalam air, tetapi mudah larut dalam larutan alkali hidroksida dan dalam ammonium hidroksida; agak sukar larut dalam etanol, dalam kloroform dan dalam eter (Depkes RI, 1995). Teofilin memiliki nama lain Anhydrous Theophylline, 1,3-Dimethylxanthine; Teofilina dan Theophyllinum. Bobot molekul dari obat ini adalah 180,2. Rumus struktur dari teofilin dapat dilihat pada gambar di bawah ini :

Gambar 2. Rumus Struktur Teofilin 3,7-Dihydro1,3dimethyl1H-purine2,6dione Teofilin berupa serbuk kristal putih dengan titik lebur 270 - 274. 1 bagian teofilin terlarut dalam 120 bagian air, 80 bagian etanol dan 110 bagian kloroform; terlarut sebagian dalam eter; larut dalam asam encer, ammonia, dan larutan alkali hidroksida. Absorbansi teofilin pada max 270 nm dalam Larutan asam adalah sebesar 536 a sedangkan dalam larutan alkali atau basa absobansinya sebesar 650a pada max 275 nm. Kurva absorbansi teofilin pada larutan asam serta basa dapat dilihat pada gambar di bawah:

Gambar 3. Kurva Absorbansi Teofilin

Paracetamol

Paracetamol memiliki nama lain Acetaminophen atau N-Acetylpaminophenol N-(4Hydroxyphenyl)acetamide. Berat molekulnya 151,2(Anonim, 2005)

Gambar 4. Rumus Struktur Paracetamol Pemeriaan paracetamol berupa kristal putih atau terdiri dari serbuk kristal. Titik didihnya dalam air berkisar antara 169.0 sampai 170.5. Paracetamol sedikit larut dalam air dingin, sangat larut dalam air panas, larut dalam etanol, metanol, dimetilformamide, etilene diklorida, aseton, dan etil asetat; sedikit larut dalam eter dan kloroform; serta tidak larut dalam petrolium eter, pentane dan benzene.Larutan asam encer245 (A11=668a); Larutan basa encer 257 nm (A11=715a)(Anonim, 2005).

Gambar 5. Kurva Absorbansi Parasetamol

III. ALAT DAN BAHAN

A. Alat Spektrofotometer UV/VIS Kuvet Timbangan analitik Labu takar 10 ml Pipet tetes Botol vial Pipet ukur 5 ml B. Bahan Aquadest Larutan stok Parasetamol 2,26 mg/ml Larutan stok Teofilin 2,1 mg /ml IV. CARA KERJA 1. Pembuatan spektra parasetamol dan teofilin. Dibuat spektrum normal dari larutan tersebut dengan rentang panjang gelombang 220-320 nm. 2. Penentuan zero crossing. Dari spektra serapan normal yang diperoleh, dibuat spektra derivat pertama, derivat kedua dan derivat ketiga dengan menggambarkan dA d dua panjang gelombang terhadap harga rata-rata dua panjang gelombang tersebut. Dari spektra derivat tersebut ditentukan panjang gelombang zero crossing parasetamol, dimana dA d parasetamol bernilai nol. 3. Pembuatan kurva baku. Dibuat larutan baku kafein seri konsentrasi 0,75; 1,25; 1,75; 2,25; 2,75 dan 3,25 mg%. Kurva baku dibuat dengan mengukur seri kadar larutan baku kafein pada panjang gelombang zero crossing. Nilai d3A/d3 spektrum dan kadar dibuat dengan persamaan linier sehingga diperoleh persamaan y = bx + a (y = nilai d3A/d3, x = konsentrasi; b = slope; a = derau).

4. Penetapan kadar teofilin.

Larutan sampel campuran dibaca pada panjang gelombang zero crossing parasetamol. Nilai d3A/d3 spektrum kafein pada panjang gelombang zero crossing parasetamol dan dimasukkan ke dalam persamaan kurva baku teofilin.

V. Data Pengamatan dan Perhitungan

1.

Absorbansi Parasetamol dan Teofilin pada Rentang Panjang Gelombang 200-

300 nm
200 203 206 209 212 215 218 221 224 227 230 233 236 239 242 245 248 251 254 257 260 263 266 269 272 275 278 281 284 287 290 293 296 299 A Paracetamol 1.011 0.850 0.663 0.467 0.359 0.326 0.322 0.327 0.335 0.344 0.353 0.364 0.374 0.377 0.376 0.368 0.360 0.344 0.315 0.267 0.233 0.195 0.171 0.155 0.146 0.138 0.129 0.121 0.111 0.099 0.087 0.077 0.070 0.064 A Theopilin 0.999 0.983 0.917 0.752 0.569 0.433 0.352 0.315 0.289 0.264 0.245 0.214 0.182 0.165 0.162 0.165 0.172 0.183 0.207 0.248 0.279 0.311 0.33 0.337 0.336 0.326

0.306
0.27 0.218 0.155 0.106

0.079
0.066 0.059

Kurva Baku Parasetamol

Kurva Baku Teofilin

Kurva baku parasetamol vs teofilin

2. Absorbansi Larutan Baku Teofilin Konsentrasi ( g mL ) 4,5 5 5,15 5,5 6 (nm) 281 284 287 281 284 287 281 284 287 281 284 287 281 284 287 A 0,268 0,248 0,152 0,248 0,257 0,140 0,317 0,269 0,117 0,263 0,278 0,155 0,325 0,291 0,144

3.

Absorbansi Sampel Campuran Parasetamol dan Teofilin (nm) A

281 284 287 V. Perhitungan 1.

0,474 0,411 0,242

Pengenceran Larutan Parasetamol : C stok Paracetamol C larutan Paracetamol V larutan Paracetamol : 1 mg mL = 1000 g mL : 4 g mL : 10 mL

Diketahui

Ditanya

: V stok Paracetamol yang diperlukan = ... ?

Perhitungan : Dilakukan pengenceran sebanyak 2 kali, yaitu terlebih dahulu dibuat larutan paracetamol dengan konsentrasi 100 g mL Diketahui : C stok Paracetamol C larutan Paracetamol V larutan Paracetamol C stok Paracetamol 1000 g mL : 1 mg mL = 1000 g mL : 100 g mL : 10 mL C larutan Paracetamol 100 g mL 100 g .10ml mL 1000 g mL 1 mL . V larutan Paracetamol . 10 mL

. V stok Paracetamol = . V stok Paracetamol = V stok Paracetamol = V stok Paracetamol =

Pengenceran kedua: Diketahui : C stok Paracetamol C larutan Paracetamol V larutan Paracetamol C stok Paracetamol : 100 g mL : 4 g mL : 10 mL C larutan Paracetamol . V larutan Paracetamol

. V stok Paracetamol =

100 g mL

. V stok Paracetamol = V stok Paracetamol = V stok Paracetamol =

4 g mL 4 g .10ml mL 100 g mL 0,4 mL

10 mL

Jadi, untuk membuat larutan paracetamol dengan konsentrasi 4 g mL dipipet larutan paracetamol 100 g mL sebanyak 0,4 ml, kemudian diencerkan dengan aquadest hingga 10 ml. 2. Pengenceran Larutan Teofilin : C stok Teofilin C larutan Teofilin V larutan Teofilin Ditanya Perhitungan : Dilakukan pengenceran sebanyak 2 kali, yaitu terlebih dahulu dibuat larutan teofilin dengan konsentrasi 100 g mL : 1 mg mL = 1000 g mL : 4 g mL : 10 mL

Diketahui

: V stok Teofilin yang diperlukan?

Diketahui

: C stok Teofilin C larutan Teofilin V larutan Teofilin

: 1 mg mL = 1000 g mL : 100 g mL : 10 mL = = C larutan Teofilin 100 g mL . . V larutan Teofilin 10 mL

C stok Teofilin 1000 g mL

. .

V stok Teofilin V stok Teofilin

V stok Teofilin V stok Teofilin Pengenceran kedua: Diketahui : C stok Teofilin C larutan Teofilin V larutan Teofilin C stok Teofilin 100 g mL . .

= =

100 g

mL 1000 g

.10ml

mL 1 mL

: 100 g mL : 4 g mL : 10 mL = = = = C larutan Teofilin 4 g mL 4 g .10ml mL 100 g mL 0,4 mL . . V larutan Teofilin 10 mL

V stok Teofilin V stok Teofilin V stok Teofilin V stok Teofilin

Jadi, untuk membuat larutan teofilin dengan konsentrasi 4 g mL dipipet larutan teofilin 100 g mL sebanyak 0,4 ml, kemudian diencerkan dengan aquadest hingga 10 ml.

3.

Penentuan absorbtivitas molar teofilin : Amax teofilin Tebal kuvet (b) C Teofilin : 0,337 : 1 cm : 4 g mL

Diketahui

Ditanya Jawab

: Absorbtivitas molar teofilin () = ? : A = b c = =

0,337 1cm 4 g

mL

= 0,08425 mL g cm

4.

Penentuan konsentrasi larutan seri baku teofilin

Konsentrasi larutan dibuat agar tidak terlalu pekat atau terlalu encer, sehingga dibuat larutan yang memberikan absorbansi 0,434 Diketahui : A Tebal kuvet (b) teofilin Ditanya Jawab : Cteofilinketiga ? : A = b c C= = A b : 0,434 : 1 cm
:

0,08425 mL g cm

0,434 1cm 0,08425 cm - 1 ml/g

= 5,15g/ml Dibuat satu seri larutan baku teofilin dengan konsentrasi :4,5 g/ml; 5g/ml; 5,15 g/ml; 5,5 g/ml; 6 g/ml

5.

Pengenceran Untuk Pembuatan Seri Larutan Baku Teofilin : C stok Teofilin V larutan baku teofilin : 100 g mL : 10 mL

Diketahui

Ditanya V stok Teofilin

: V stok Teofilin yang dipipet ?

Perhitungan : - konsentrasi 1 = 4,5 g/ml C stok Teofilin . V stok Teofilin = C Teofilin dalam Sampel . V Sampel

100 g mL

V stok Teofilin V stok Teofilin V stok Teofilin

Jadi, volume yang dipipet dari larutan stok teofilin 100 g mL adalah 0,45 mL. V stok Teofilin - konsentrasi 2 = 5 g/ml C stok Teofilin 100 g mL . . V stok Teofilin V stok Teofilin V stok Teofilin V stok Teofilin = = = = C Teofilin dalam Sampel 5 g mL 5 g .10ml mL 100 g mL 0,5 mL . . V Sampel 10 mL

= 4,5 g mL 4,5 g .10ml mL = 100 g mL = 0,45 mL

10 mL

Jadi, volume yang dipipet dari larutan stok teofilin 100 g mL adalah 0,5 mL. V stok Teofilin - konsentrasi 3 = 5,15 g/ml C stok Teofilin 100 g mL . . V stok Teofilin V stok Teofilin V stok Teofilin V stok Teofilin = = = = C Teofilin dalam Sampel 5,15 g mL 5,15 g .10ml mL 100 g mL 0,515 mL . . V Sampel 10 mL

Jadi, volume yang dipipet dari larutan stok teofilin 100 g mL adalah 0,5 mL. - konsentrasi 4 = 5,5 g/ml C stok Teofilin 100 g mL . . V stok Teofilin V stok Teofilin V stok Teofilin V stok Teofilin = = = = C Teofilin dalam Sampel 5,5 g mL 5,5 g .10ml mL 100 g mL 0,55 mL . . V Sampel 10 mL

Jadi, volume yang dipipet dari larutan stok teofilin 100 g mL adalah 0,55 mL. - konsentrasi 5 = 6 g/ml C stok Teofilin 100 g mL . . V stok Teofilin V stok Teofilin V stok Teofilin V stok Teofilin = = = = C Teofilin dalam Sampel 6 g mL 6 g .10ml mL 100 g mL 0,6 mL . . V Sampel 10 mL

Jadi, volume yang dipipet dari larutan stok teofilin 100 g mL adalah 0,6 mL.

6.

Penentuan Panjang Gelombang Zero Crossing a. Diketahui

dA d

: 1 2 A1 A2 : dA d

= 200 nm = 203 nm = 1,011 = 0,850

Ditanya

Perhitungan :
dA A2 A1 = d 2 1

dA 0,850 1,011 = d 203 nm 200 nm dA 0,161 = d 3 nm

dA = -0.053666667 nm 1 d Diketahui Ditanya : 1 = 200 nm 2 = 203 nm :

Perhitungan :

=
=

1 + 2 2
200 nm + 203 nm 2

= 201,5 nm
ratarata 201.5 204.5 207.5 210.5 213.5 216.5 219.5 222.5 225.5 228.5 231.5 234.5 237.5 240.5 243.5 246.5 249.5 252.5 255.5 258.5 261.5 264.5 267.5 270.5 273.5 276.5 279.5 282.5 285.5 288.5 291.5 294.5 297.5

A Paracetam ol
1.011 0.850 0.663 0.467 0.359 0.326 0.322 0.327 0.335 0.344 0.353 0.364 0.374 0.377 0.376 0.368 0.360 0.344 0.315 0.267 0.233 0.195 0.171 0.155 0.146 0.138 0.129 0.121 0.111 0.099 0.087 0.077 0.070

DA I Paracetamol -0.053666667 -0.062333333 -0.065333333 -0.036000000 -0.011000000 -0.001333333 0.001666667 0.002666667 0.003000000 0.003000000 0.003666667 0.003333333 0.001000000 -0.000333333 -0.002666667 -0.002666667 -0.005333333 -0.009666667 -0.016000000 -0.011333333 -0.012666667 -0.008000000 -0.005333333 -0.003000000 -0.002666667 -0.003000000 -0.002666667 -0.003333333 -0.004000000 -0.004000000 -0.003333333 -0.002333333 -0.002000000

Dengan cara yang sama, diperoleh :

Pada derivat pertama tidak diperoleh nilai nol, maka dihitung derivat kedua dari absorbansi paracetamol

Kurva derivat pertama paracetamol vs teofilin

Perhitungan deivat kedua parasetamol b.

2 Derivat kedua d A

d2

Diketahui

: = -0.053666667 =-0.062333333 1 = 200 nm 2 = 203 nm

Ditanya Perhitungan :

2 :d A

d2 =?

d2A d2

d 2 A - 0.06233333 3 (-0.0536666 67) = d2 (203 nm) 2 (200 nm) 2

d 2 A 0,002333334 nm 1 = d2 1,209 nm 2
d2A = 0,007,13813068 7 nm 3 d2

Dengan cara yang sama, dihitung turunan pertama dan kedua dari setiap konsentrasi di atas. Sehingga didapat derivat pertama dan kedua sebagai berikut.

 ratarata 201.5 204.5 207.5 210.5 213.5 216.5 219.5 222.5 225.5 228.5 231.5 234.5 237.5 240.5 243.5 246.5 249.5 252.5 255.5 258.5 261.5 264.5 267.5 270.5 273.5 276.5 279.5 282.5 285.5 288.5 291.5 294.5 297.5

A Paracetamol
1.011 0.850 0.663 0.467 0.359 0.326 0.322 0.327 0.335 0.344 0.353 0.364 0.374 0.377 0.376 0.368 0.360 0.344 0.315 0.267 0.233 0.195 0.171 0.155 0.146 0.138 0.129 0.121 0.111 0.099 0.087 0.077 0.070

DA I Paracetamol -0.053666667 -0.062333333 -0.065333333 -0.036 -0.011 -0.001333333 0.001666667 0.002666667 0.003 0.003 0.003666667 0.003333333 0.001 -0.000333333 -0.002666667 -0.002666667 -0.005333333 -0.009666667 -0.016 -0.011333333 -0.012666667 -0.008 -0.005333333 -0.003 -0.002666667 -0.003 -0.002666667 -0.003333333 -0.004 -0.004 -0.003333333 -0.002333333 -0.002

DA II Paracetamol -0.0000072 -0.0000024 0.0000236 0.0000198 0.0000075 0.0000023 0.0000008 0.0000002 0.0000000 0.0000005 -0.0000002 -0.0000017 -0.0000009 -0.0000016 0.0000000 -0.0000018 -0.0000029 -0.0000042 0.0000030 -0.0000009 0.0000030 0.0000017 0.0000015 0.0000002 -0.0000002 0.0000002 -0.0000004 -0.0000004 0.0000000 0.0000004 0.0000006 0.0000002 0.0000006

Kurva derivate kedua parasetamol dan teofilin

7. Kurva Baku Derivat Kedua Teofilin a. Derivat pertama dA d g

Konsentrasi 4,5 Diketahui

mL

: 1 = 281 nm 2 = 284 nm A1 = 0,268 A2 = 0,248 : dA d

Ditanya

Perhitungan :
dA A2 A1 = d 2 1

dA 0,248 0,268 = d 284 nm 281 nm dA 0,02 = d 3 nm dA = 0,0067 nm 1 d

Diketahui

: 2 = 284 nm 3 = 287 nm A2 = 0,248 A3 = 0,152 : dA d

Ditanya

Perhitungan :
dA A3 A2 = d 3 2

dA 0,152 0,248 = d 287nm 284 nm dA 0,096 = d 3 nm dA = 0,032 nm 1 d

2 Derivat kedua d A

b.

d 2

g Konsentrasi 4,5 Diketahui :

mL

= -0,0067 =-0,032 1 = 281 nm 2 = 284 nm Ditanya

2 :d A

d2 =?

Perhitungan :

d2A d2
d2A - 0,032 (-0,0067) = 2 d (284 nm) 2 (281 nm) 2

d 2 A 0,0253nm 1 = d2 1,695 nm 2
d2A = 0,014946 nm 3 2 d

Dengan cara yang sama, dihitung turunan pertama dan kedua dari setiap konsentrasi di atas. Sehingga didapat derivat pertama dan kedua sebagai berikut.

Konsentrasi

(nm) 281 284 287 281 284 287 281 284 287 281 284 287 281 284 287 A 0.268 0.248 0.152 0.284 0.257 0.14 0.317 0.269 0.117 0.263 0.278 0.155 0.325 0.291 0.144

Derivate pertama -0.0067 -0.0320 -0.0090 -0.0390 -0.0160 -0.0507 0.0050 -0.0410 -0.0113 -0.0490

Derivate kedua -0.000014946

4.5

-0.000017699

-0.000020452

5.15

-0.000027139

5.5

-0.000022222

2 8. Kurva baku konsentrasi terhadap d A

d2

Karena hubungan linear hanya ditunjukkan oleh data kesatu sampai keempat, maka untuk menetapkan kadar, dibuat kurva kalibrasi untuk ketiga data tersebut
Konsentrasi

Turunan Kedua

mL
-0.000014946 -0.000017699 -0.000020452 -0.000027139

4.5 5 5.15 5.5

Kurva kalibrasi teofilin

Dik : r = 0,894 a= 3,993 x 10-5 b = -1,19 x 10-5 persamaan y = -1,19 x 10-5x +3,993 x 10-5 s

9.

Persamaan Kurva Baku Teofilin d2 dan x = konsentrasi

2 y = -1,19 x 10-5x +3,993 x 10-5; dimana y = d A

Derivat pertama dan kedua sampel Diketahui : 1 = 281 nm 2 = 284 nm 3 = 287 nm A1 = 0,474 A2 = 0,411 A3 = 0,242 Ditanya
2 : d A

d 2

Perhitungan : a. Derivat pertama dA d Derivat pertama (i) Perhitungan :

dA A2 A1 = d 2 1

dA 0,411 0,474 = d 284 nm 281 nm dA 0,063 = d 3 nm dA = 0,021 nm 1 d Derivat pertama (ii)

dA A3 A2 = d 3 2

dA 0,242 0,411 = d 287nm 284nm

dA 0,169 = d 3 nm dA = 0,0563 nm 1 d
2 Derivat kedua d A

b.

d2

Diketahui

: = -0,021 = -0,0563 1 = 281 nm 2 = 284 nm

Ditanya Perhitungan :

2 :d A

d2 =?

d2A d2

d2A - 0,0563 (-0,021) = 2 d (284 nm) 2 (281 nm) 2

d 2 A 0,0353 nm 1 = d2 1695 nm 2 d2A = 0,00002084 6 nm -3 2 d

10. Teofilin Dalam Sampel Diketahui : Persamaan y = -1,19 x 10-5x +3,993 x 10-5

d2A y= = -0,000020846 d 2
Ditanya y : Kadar teofilin dalam sampel (x) = -1,19 x 10-5x +3,993 x 10-5 = -1,19 x 10-5x +3,993 x 10-5 = 6,0776x 10-5 = 5,10723 Perhitungan :

0,00002084 6
1,19 x 10-5x x

Jadi, kadar teofilin dalam sampel adalah 5,10723 g mL 11. Perolehan kembali Perolehan kembali= Kadar sebenarnya x 100% Kadar teoritis = 5,10723 x 100% 6,0 = 85,1205 %

VI.

PEMBAHASAN Pada praktikum ini dilakukan penetapan kadar teofilin dalam campuran parasetamol dan teofilin dengan menggunakan metode spektrofotometri derivatif, di mana pada metode ini kadar teofilin dapat ditentukan dengan membaca larutan sampel pada panjang gelombang zero crossing. Digunakan metode spektrofotometri derivatif karena serapan maksimum dari paracetamol dan teofilin berada pada panjang gelombang yang berdekatan.Spektrum yang tumpang tindih menyebabkan kesulitan dalam penetapan kadar teofilin karena terganggu oleh serapan paracetamol. Metode spektrofotometri derivatif ini digunakan untuk meningkatkan pemecahan puncak yang saling tumpang tindih tersebut sehingga teofilin dapat ditetapkan kadarnya tanpa terganggu oleh serapan paracetamol. Praktikum ini diawali dengan membuat larutan standar paracetamol dan larutan standar teofilin dengan kadar 4 g/ml masing-masing sebanyak 10ml dari larutan stok 1 mg/ml. Dilakukan proses pengenceran sebanyak 2 kali, untuk menghindari kesalahan pemipetan karena volume pemipetan yang sangat kecil, maka pertama- tama dibuat larutan standar paracetamol 100 g/ml dari larutan stok paracetamol 1mg/ml dan larutan standar teofilin 100 g/ml dari larutan stok teofilin 1mg/ml masing-masing sebanyak 10 ml. Selanjutnya, dari masing-masing larutan tersebut dibuat larutan standar parasetamol 4 g/ml dan larutan standar teofilin 4 g/ml masing-masing sebanyak 10 ml. Kemudian, masingmasing larutan standar tersebut dibaca absorbansinya pada rentang panjang gelombang 200 300 nm karena panjang gelombang maksimum parasetamol dan teofilin terletak pada rentang tersebut. Berdasarkan pustaka, absorbansi maksimum parasetamol terletak pada panjang gelombang 245 nm dalam pelarut asam dan 257 nm dalam pelarut basa sedangkan absorbansi maksimum teofilin terletak pada panjang gelombang 270 nm dalam pelarut asam dan 275 nm dalam pelarut basa. Pada praktikum ini didapatkan absorbansi maksimum parasetamol yaitu 0,377 terletak pada panjang gelombang 239 nm dan absorbansi maksimum teofilin yaitu 0,337 terletak pada panjang gelombang 269 nm. Hasil yang didapat ini berbeda dengan pustaka dapat disebabkan oleh kondisi percobaan pada literatur berbeda dengan kondisi percobaan yang dilakukan oleh praktikan.

Selanjutnya dari spektra larutan standar parasetamol dan teofilin diturunkan spektrum derivatif dari kurva normal parasetamol dan teofilin. Ditentukan derivatif pertama untuk absorbansi parasetamol dan teofilin. Dari data derivatif tersebut selanjutnya dibuat grafik dA/d paracetamol dan dA/d teofilin terhadap harga rata rata 2 panjang gelombang yang berdekatan untuk menentukan zero crossing. Dari grafik ternyata tidak diperoleh harga untuk zero crossing maka perlu ditentukan derivat 2 dari absorbansi parasetamol dan absorbansi teofilin dan dibuat grafik d2A/d2 paracetamol dan teofilin terhadap harga rata rata 2 panjang gelombang. Dari nilai derivat kedua yang didapat ternyata terdapat 3 derivat bernilai nol yaitu pada panjang gelombang 224 nm, 242 nm dan 284 nm. Dari ketiga nilai derivat tersebut ditentukan satu nilai zero crossingnya berdasarkan nilai derivat yang tidak terletak pada panjang gelombang maksimal parasetamol, karena jika zero crossing ditentukan pada panjang gelombang parasetamol maka nilai absorbansi yang didapat pada pengukuran absorbansi teofilin justru nilai absorbansi parasetamol. Selanjutnya dilihat dimana nilai derivat kedua parasetamol yang memberikan nilai terbesar pada derivat kedua teofilin, itulah yang digunakan sebagai zero crossing. Dari grafik diatas didapatkan zero crossing pada 284 nm karena paracetamol memberikan nilai absorbansi 0,111 sedangkan teofilin memberikan nilai absorbansi sebesar 0,218, perbedaan absorbansi kedua senyawa tersebut dinilai cukup besar dibandingkan dengan absorbansi paracetamol dan teofilin pada panjang gelombang lainnya. Setelah diperoleh panjang gelombang zero crossing paracetamol, maka dibuat kurva baku teofilin atau kurva kalibrasi yang bertujuan untuk menguji apakah hukum Lambert Beer masih berlaku pada panjang gelombang zero crossing yang diperoleh. Serapan teofilin pada panjang gelombang maksimum digunakan untuk mencari absorbtivitas molar teofilin sehingga diperoleh absortivitas molar teofilin sebesar 0,08425 mL g cm . Selanjutnya ditentukan konsentrasi teofilin pada absorbansi 0,434 sebab pada absorbansi tersebut memberikan kesalahan pengukuran yang terkecil. Dari perhitungan didapatkan konsentrasi teofilin pada absorbansi 0,434 sebesar 5,15 g ml sehingga dibuat rentang variasi konsentrasi larutan teofilin sebagai berikut: 4,5 g ml ; 5 g ml ; 5,15 g ml ; 5,5 g ml ; dan 6 g ml .

Diukur absorbansi dari kelima seri larutan teofilin tersebut pada panjang gelombang yang menghasilkan panjang gelombang zero crossing, yaitu pada panjang gelombang rata-rata 285,5 nm namun pengukuran absorbansi dilakukan pada tiga panjang gelombang yaitu 281 nm, 284 nm dan 287 nm. Didapatkan nilai absorbansi dari masing-masing variasi konsentrasi larutan tersebut pada panjang gelombang 281 berturut-turut sebesar 0,268; 0,284; 0,317; 0,263 dan 0,325. Kemudian nilai absorbansi dari masing-masing variasi konsentrasi larutan tersebut pada panjang gelombang 284 berturut-turut sebesar 0,248; 0,257; 0,269;0,278; dan 0,291. Sedangkan, nilai absorbansi dari masing-masing variasi konsentrasi larutan tersebut pada panjang gelombang 287 berturut-turut sebesar 0,152; 0,140; 0,117; 0,155; dan 0,144. Selanjutnya ditentukan konsentrasi larutan sampel, sehingga dibuat kurva kalibrasi teofilin dari pengukuran absorbansi masing-masing variasi konsentrasi larutan pada panjang gelombang 281 nm, 284 nm dan 287 nm dan dicari nilai regresi untuk menentukan kurva baku teofilin tersebut memenuhi hukum Lambert Beer atau tidak. Persamaan regresi linier teofilin yang diperoleh adalah y =-1,19 . 10-5x +3,993.10-5 dengan nilai regresi 0,894. Dari nilai regresi yang diperoleh maka dapat disimpulkan bahwa kurva kalibrasi teofilin tersebut memenuhi hukum Lambert Beer dan selanjutnya kadar sampel dapat ditentukan menggunakan kurva kalibrasi tersebut. Pengukuran nilai absorbansi sampel dilakukan pada pada panjang gelombang 281 nm, 284 nm dan 287 nm dan diperoleh niai absorbansi berturut-turut sebesar 0,474; 0,411; dan 0,242. Nilai absorbansi sampel teofilin tersebut dimasukkan ke dalam persamaan regresi linear yang diperoleh dan didapatkan kadar teofilin dalam sampel yaitu sebesar 5,1 g/ml. Hasil ini mendekati kadar sampel yang diketahui yaitu 6 g ml sehingga persentase perolehan kembalinya adalah 85,1205%. Nilai kadar sampel yang didapat berbeda dengan nilai kadarsampel teofilin yang sebenarnya, hal ini mungkin disebabkan oleh nilai koefisien regresi linier yang kurang bagus yaitu 0,894 sehingga kadar teofilin yang didapat dari persamaan linier nilainya berbeda dengan kadar sesungguhnya.

DAFTAR PUSTAKA Anonim. 2005. Clarkes Analysis of Drug and Poison. London: Pharmaceutical Press. DepKes RI.1995.Farmakope Indonesia Edisi IV. Jakarta : Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Fatah, A.M. 2008. Pemanfaatan Spektrofotometri Derivatif Untuk Penetapan Kadar Dekstrometorfan Hidrobromida Dalam Tablet Obat Batuk. Available at : www.i-lib.ugm.ac.id/jurnal/detail.php?dataId=7138 : Saturday, April 2nd 2011, 11:35. Last Opened

Hayun, Harianto dan Yenti. 2006. Penetapan Kadar Triprolidina Hidroklorida dan Pseudoefedrina Hidroklorida dalam Tablet Anti Influenza secara Spektrofotometri Derivatif. Available at Last Opened : http://jurnal.farmasi.ui.ac.id/pdf/2006/v03n02/hayun0302.pdf : Saturday, April2nd 2011, 11:25.

Susanti, N.M.P., I.N.K. Widjaja., N.P.L. Laksmiani. 2011. Petunjuk Praktikum Kimia Analisis. Bukit Jimbaran : Jurusan Farmasi FMIPA Universitas Udayana. Wulandari, D., Regina D. F., Christine P. 2008. Penetapan Kadar Teofilin Dalam Campuran Parasetamol, Salisilamida, dan Teofilin Secara Spektrofotometri Derivatif. Available at : http: // usd.ac.id/06/publ_dosen/far/devi.pdf : Saturday, April2nd 2011, 10:30. Last Opened