Diagnosis Dan Diferensiasi Dari Entamoeba Infeksi Di Makkah Al Mukarramah Yang Menggunakan Antigen Deteksi Bawaan Mikroskop Dan

Tinja

Pendahuluan Amebiasis adalah infeksi organ usus dan ekstraintestinal manusia oleh protozoa parasit Entamoeba histolytica. Infeksi tanpa gejala sebelumnya dilaporkan karena non-patogenik E. histolytica strain saat ini diidentifikasi menjadi karena E. dispar [1]. Sekitar 10% dari populasi dunia terinfeksi E. histolytica baik oleh atau E. histolytica dan E. dispar. Dari kedua organisme, E. histolytica dimana 50 juta orang memiliki penyakit invasif karena E. histolytica. Infeksi ini sebagian besar terlihat di daerah tropis dan subtropis. Kematian tahunan 40,000-100,000 adalah karena E. histolytica, tempat amoebiasis sebagai penyebab utama kedua kematian akibat penyakit parasit di seluruh dunia. Prevalensi amebiasis bervariasi dengan populasi individu yang terkena, berbeda antara negara dan antara daerah dengan kondisi sosial ekonomi yang berbeda. Kadang-kadang sampai 50% dari populasi dipengaruhi dalam reservoir dikenal primer. Infeksi terjadi dengan menelan kista dari bahan yang terkontaminasi tinja seperti air dan makanan. Studi sebelumnya telah mengkonfirmasi keberadaan dua spesies genetik yang berbeda namun secara morfologis dapat dibedakan dari Entamoeba: E. histolytica dan E.dispar. Dari kedua organisme, E. histolytica adalah patogen dan agen etiologi dari kolitis amuba dan abses hati, sedangkan yang lain, E. dispar adalah spesies non-patogenik dan belum pernah berhubungan dengan penyakit. Diferensial diagnosis antara dua spesies sangat penting baik untuk keputusan pengobatan dan pengetahuan kesehatan masyarakat. WHO telah menyarankan bahwa E. histolytica harus secara spesifik diidentifikasi dan jika ada pengobatan sangat penting, sebaliknya jika E.dispar hanya di identifikasi, pengobatan tidak diperlukan. Secara tradisional, diagnosis E. histolytica infeksi telah diandalkan pemeriksaan mikroskopis dari kista atau trofozoit pada spesimen tinja segar atau tetap. E. histolytica trophozoites lebih cenderung E. dispar mengandung eritrosit tertelan. Namun, histolytica II dua organisme yang morfologis identik dalam penampilan, yang membuat identifikasi dan diferensiasi dengan mikroskop adalah tidak tepat. Selain mikroskop standar sangat memakan waktu, membutuhkan keahlian dan di terbaik hanya 60% sensitif [8, 9].Analisis isoenzyme dianggap sebagai standar referensi untuk membedakan E. histolytica dari E. dispar. Sejumlah tes telah dikembangkan selama beberapa tahun terakhir, seperti serologi metode dan sistem deteksi DNA, yang mampu membedakan E. histolytica dari E. dispar. Upaya untuk meningkatkan tes diagnostik telah dikembangkan dalam beberapa tahun terakhir. Antigen tes deteksi telah terbukti sangat berguna dalam diagnosis dari beberapa parasit infeksi, termasuk E. histolytica dan E. dispar. Sejumlah peneliti telah melaporkan deteksi antigen amuba dalam sampel tinja harus sensitif dan spesifik. Antigen berbasis ELISA memiliki banyak keuntungan yang signifikan untuk diagnosis amoebiasis. Beberapa tes yang mampu membedakan E. histolytica dari E. dispar dan memiliki kepekaan yang sangat baik dan spesifisitas. Mereka dapat preformed oleh teknisi laboratorium tidak ahli dan mikroskop mengungguli dalam potensi mereka sebagai skala

besar alat skrining dalam studi epidemiologi, seperti situasi wabah yang ditularkan melalui air . Sejumlah produk yang tersedia secara komersial dan telah dievaluasi. Tes ini berkisar sensitivitas 66,3-100% dan spesifisitas 92,6-100% [5, 9, 13, 14, 17]. Dua dari kit sering digunakan adalah Triase parasit enzim immunoassay panel dan TechLab Entamoeba histolytica II . Parasit enzim immuno assay Panel Trias. Parasit enzim immunoassay Triase Panel (Triage) (BIOSITE Diagnostik) adalah enzim kualitatif immunoassay panel untuk mendeteksi Entamoeba histolytica / E. dispar, Giardia lamblia dan Cryptosporidium parvum dalam segar atau beku. Single Strip immunochromatographic dilapisi dengan antibodi monoklonal E. histolytica khusus untuk / E. dispar antigen 29 kDa dan untuk antigen dari Giardia lamblia dan Cryptosporidium parvum. Antigen dari klinis sampel yang spesifik untuk parasit ketiga dan amobil pada membran menggunakan tertentu antibodi. Sebuah konjugat antibodi-enzim kemudian mengikat ke situs spesifik pada antigen tersebut. Antigen yang terdeteksi setelah penambahan substrat oleh formasi dari bar warna di daerah yang berbeda tergantung pada parasit ini dan menunjukkan pada perangkat tes sebagai biruhitam Garis. Para TechLab (Blacksburg, Virginia) Entamoeba kit spesifik dan sensitif untuk mendeteksi E. histolytica dalam tinja. Ini uji deteksi antigen menangkap dan mendeteksi Gal / GalNAc lektin parasit dari sampel tinja. Berbagai penyelidikan telah dilakukan untuk menentukan prevalensi infeksi parasitentro-di Arab Saudi. Penelitian mengungkapkan bahwa E. histolytica infeksi adalah salah satu patogen secara signifikan yang umum ditemui protozoa. Tingkat prevalensi yang dilaporkan adalah beragam menurut penduduk dipertimbangkan dan lokasi geografis.Prevalensi tertinggi ditemukan dicatat selama survei rumah tangga di Riyadh (30,3%)[19]. Sementara, sebuah penelitian yang dilakukan mantan di Riyadh melaporkan revalensi rendah (16,83%) di antara pasien yang datang rumah sakit atau klinik kesehatan. Tingkat prevalensi antara anakanak sekolah (5,2%) di Al-Qasim Asiah [21]; (4,1%) di Abha (Asir) (2,9) di Makkah akhirnya(6,8%) terdeteksi kalangan anak-anak sekolah asimtomatik, sedangkan (14%) dilaporkan antara anak-anak sekolah di Jeddah diarrhoeic. Metodologi diagnostik diterapkan dalam studi ini terutama didasarkan pada mikroskop standar. Tidak ada studi sebelumnya dibedakan antara E. histolytica dan E. dispar, karena itu tidak mengatasi kejadian yang sebenarnya dan prevalensi E.histolytica dan E. dispar. Prevalensi relatif dari E. histolytica dan E. dispar belum sepenuhnya dikenal di Arab Saudi. Tujuan dari penelitian ini adalah membedakan antara E. histolytica yang patogen dan non-patogenik E. dispar dan untuk menentukan angka kejadian mereka di antara kelompok tertentu dengan menggunakan kit deteksi antigen komersial, Triase Mikro Parasit Panel dan The TechLab bersama dengan mikroskop standar. HASIL Sebanyak 156 spesimen tinja dikumpulkan, tujuh puluh enam (48,7%) adalah perempuan dan delapan puluh (51,3%) adalah laki-laki. Berdasarkan pemeriksaan mikroskopis, 120(76,9%) sampel adalah positif untuk infeksi parasit; 64,8% (101) adalah untuk Entamoeba histolytica / E. dispar, 1,9% [3], Giardia lamblia, 1,9% [3], Cryptosporidium spp. dan parasit lain 8,3% [13] (Tabel 1). Tidak ada infeksi campuran terdeteksi. Tes Triase akurat terdeteksi 99 (63,5%) sampel positif, 93 (59,6%) E. histolytica / E. dispar kompleks, 3 (1,9%) Giardia lamblia dan 3 (1,9%) Cryptosporidium spp. Kedua teknik positif pada 93 (59,6%) sampel

untuk E. histolytica / E. dispar. Sampel positif untuk Giardia lamblia dengan mikroskop juga positif dengan kit parasit Triase panel. Juga tiga sampel positif untuk Cryptosporidium spp. menggunakan dimodifikasi asam-cepat pewarnaan terdeteksi positif menggunakan kit parasit Triase panel. Perbandingan E.histolytica / E. dispar sampel terdeteksi oleh Mikroskopi dan Trigonometri diringkas dalam (Tabel 3). E. histolytica diferensiasi antara dan E. dispar dilakukan dengan menggunakan ELISA TechLab. Pengujian menunjukkan bahwa hanya 4 (tiga perempuan dan satu laki-laki) 2,6%, sampel positif untuk antigen E. histolytica. Perbandingan mikroskop dan teknik ELISA menunjukkan bahwa E.histolytica terdeteksi pada 4, yang menunjukkan bahwa sisa 89 (44 lakilaki, 45 perempuan) adalah E. dispar.

ANALISIS Kebanyakan penelitian epidemiologi yang diidentifikasi infeksi Entamoeba histolytica di Arab Saudi dilakukan tanpa pembedaan spesies terpisah, E. histolytica dan E. dispar. Hal ini mungkin karena ketidakmampuan, di masa lalu, untuk membedakan E. histolytica dari lebih umum, tetapi non-patogenik, Entamoeba dispar. Sebagai E. histolytica dan E.dispar tidak dapat dibedakan dengan mikroskop rutin. Oleh karena itu, ada kebutuhan nyata untuk melakukan penelitian yang membedakan dua spesies Entamoeba. Penelitian ini merupakan penelitian pertama kali menggunakan kit deteksi antigen komersial untuk memperkirakan proporsi antara E. histolytica dan E. dispar di Arab Saudi di samping untuk mikroskopi rutin. Dalam studi ini, E. histolytica positif / E. dispar yang tinggi dengan mikroskop dan Triasekit parasit panel, 64,8% dan 59,6% masingmasing. Triase tes menunjukkan sensitivitas dan spesifisitas secara keseluruhan baik untuk E. dispar / E. histolytica, Giardia dan Cryptosporidium. Namun, di antara 55 Triage-negatif, 8 diidentifikasi positif untuk E.dispar / E. histolytica dengan pemeriksaan mikroskopis. Demikian pula ELISA kurang sensitif dibandingkan mikroskop oleh Gonin dan Trudel [6], sedangkan sensitivitas yang lebih tinggi dilaporkan [17], yang menemukan bahwa Entamoeba ELISA lebih sensitif dan spesifik daripada mikroskop dibandingkan dengan budaya sebagai standar emas. Tidak diragukan lagi, pemeriksaan mikroskopis langsung memiliki keuntungan yang murah dibandingkan dengan tes antigen deteksi. Namun, identifikasi akurat parasit amuba sebagian besar tergantung pada kemampuan kinerja microscopist dan interpretasi. Hasil pemeriksaan mikroskopis. Oleh karena itu dapat berbeda antara studi sesuai dengan pengalaman staf serta teknik yang digunakanuntuk diagnosis terutang kepada kesulitan dalam membedakan E. histolytica / E. dispar dari amebae sejenis lainnya atau artefak. Banyak laboratorium juga menderita dari penurunan jumlah staf keahlian baik. Lebih dari diagnosis E.histolytica / E. dispar dan positif palsu telah dilaporkan mikroskopis. Perbedaan ini mungkin juga disebabkan oleh jumlah patogen pada tinja: tinja dengan rendahnya jumlah kista, menurut produsen ELISA beberapa spesimen dapat memberikan

reaksi yang lemah yang tidak meyakinkan. Hal ini mungkin disebabkan sejumlah faktor seperti keberadaan zat mengikat atau menonaktifkan enzim dalam kotoran. Dengan kondisi tersebut, spesimen harus diuji ulang atau spesimen segar harus diuji. Para TechLab E. histolytica tes II mengungkapkan bahwa E. dispar dengan mikroskop dan uji Triase hanya 4 (4,3%) adalah E. histolytica positif. Hal ini menunjukkan bahwa 89(95,7%) sisanya pasien E. dispar. Temuan penelitian ini konsisten dengan yang sebelumnya dilaporkan [26-30]. Mereka menunjukkan tingginya insiden infeksi E. dispar. Entamoeba adalah (non-patogen amuba) dalam populasi. Penelitian ini juga menunjukkan bahwa E. histolytica spesifik ELISA menunjukkan untuk menjadi metode yang sensitif dan spesifik untuk diferensiasi cepat dari dua spesies. Kemampuan untuk membedakan E.dispar dari E. histolytica harus digunakan untuk mendiagnosis kasus dugaan untuk mengurangi jumlah pasien yang perlu dirawat.

KESIMPULAN Para TechLab E. histolytica tes II mengungkapkan bahwa E. dispar dengan mikroskop dan uji Triase hanya 4 (4,3%) adalah E. histolytica positif. Hal ini menunjukkan bahwa 89(95,7%) sisanya pasien E. dispar. Temuan penelitian ini konsisten dengan yang sebelumnya dilaporkan [26-30]. Mereka menunjukkan tingginya insiden infeksi E. dispar. Entamoeba adalah (non-patogen amuba) dalam populasi. Penelitian ini juga menunjukkan bahwa E. histolytica spesifik ELISA menunjukkan untuk menjadi metode yang sensitif dan spesifik untuk diferensiasi cepat dari dua spesies. Kemampuan untuk membedakan E.dispar dari E. histolytica harus digunakan untuk mendiagnosis kasus dugaan untuk mengurangi jumlah pasien yang perlu dirawat.