NMDA, un receptor polifactico

Jos Carlos Dvila

Probablemente existen ms estudios sobre los receptores de tipo NMDA que sobre
cualquier otro receptor en el sistema nervioso. La razn es bien sencilla, los receptores
NMDA adems de ser muy abundantes en el sistema nervioso, estn implicados en
numerosas funciones, algunas de ellas tan importantes para el buen funcionamiento
del cerebro como el aprendizaje o la memoria, mientras que en otras ocasiones estn
implicados en mecanismos de muerte neuronal o en enfermedades como la epilepsia.
Sin lugar a dudas, estas razones, entre otras, han impulsado el estudio de estos
receptores hasta cotas insospechadas.
Empecemos por el principio. El glutamato, uno de los neurotransmisores ms
abundantes en el sistema nervioso (se supone que es liberado en ms de la mitad de
las sinapsis del sistema nervioso), realiza su accin excitadora actuando sobre
receptores especficos localizados en la membrana neuronal. Hasta el momento se han
identificado varios tipos principales de receptores para el glutamato, tres de ellos son
canales inicos regulados por ligando, mientras que otros tres, denominados
receptores metabotrpicos de glutamato, no son canales inicos aunque pueden
actuar indirectamente sobre los canales inicos. A los primeros se les denomina
tambin receptores ionotrpicos ya que la unin del neurotransmisor con el receptor
provoca la apertura del canal con el consiguiente paso de los iones. Los receptores
ionotrpicos de glutamato se denominan segn la molcula agonista que los activa:
los receptores NMDA, por el N-metil-D-aspartato, los receptores de tipo AMPA, por a-
amino-3-hidroxil-5-metil-4-isoxazol-propionato y los receptores de tipo kainato, por el
cido kanico. Estos tres tipos de receptores forman canales catinicos no selectivos,
permeables tanto para el Na+ como para el K+, de manera que la unin del glutamato
sobre cualquiera de ellos provoca una despolarizacin de la membrana postsinptica
(un potencial excitador postsinptico o EPSP). A diferencia de los otros dos tipos de
receptores ionotrpicos, AMPA y kainato, el receptor NMDA posee una serie de
caractersticas distintivas que lo hacen nico entre todos los receptores ionotrpicos.
Uno de esos aspectos, quiz el ms significativo, es que el canal formado por el
receptor permite el paso de los iones Ca2+, adems del Na+ y K+, lo que implica un
incremento de la concentracin de Ca2+ intracelular en la neurona postsinptica cada
vez que el receptor se activa.
El receptor NMDA es una
protena muy compleja y
tremendamente regulada (ver
figura). Su conductancia al
Ca2+ es notablemente alta y
es sta quiz su caracterstica
ms destacable y la
responsable de muchas de
sus funciones. Otra
caracterstica especial del
receptor NMDA es que para
que el canal se abra se
necesita, adems del
glutamato, la presencia de un
co-agonista (el aminocido
glicina). Ciertas poliaminas,
al igual que la glicina,
modulan positivamente el
canal, mientras que el cinc y
un exceso de protones lo
modulan negativamente. Sin
embargo, lo ms llamativo de este receptor es que comparte caractersticas
funcionales de canales regulados por ligando y de canales sensibles al voltaje y
dependientes de uso. Esta propiedad est relacionada con el bloqueo efectivo del canal
del receptor NMDA por el ion Mg2+, cuando el potencial de membrana est prximo al
valor de reposo. Este bloqueo es eliminado transitoriamente cuando la membrana se
despolariza, por estimulacin repetitiva previa, por ejemplo.
Los receptores NMDA son complejos proteicos formados por diferentes combinaciones
de varias subunidades (denominadas NMDAR1 y NMDAR2A-2D). La subunidad
NMDAR1 posee todas las propiedades fundamentales necesarias para constituir un
canal funcional y puede estar presente en ocho isoformas diferentes. La otra familia de
protenas que contribuye a la formacin de receptores NMDA funcionales est
constituida por cuatro variantes de la subunidad NMDAR2 (NMDAR2A-2D),
codificadas por cuatro genes separados. Distintas combinaciones de la subunidad
fundamental NMDAR1 con las otras subunidades dan lugar a receptores NMDA con
propiedades funcionales diferentes, que pueden estar distribuidas en reas enceflicas
especficas y/o que pueden definir respuestas fisiolgicas o patolgicas distintas en
respuesta al glutamato.
Una gran parte de las acciones mediadas por los receptores NMDA se basa en la
regulacin del flujo de Ca2+ hacia el interior de la clula. La activacin de los
receptores NMDA permitira un rpido influjo de Ca2+, con la consiguiente elevacin
intracelular de Ca2+, lo cual disparara una cascada de sistemas de segundos
mensajeros que podra producir acciones muy diversas.
Glutamato y receptores NMDA estn involucrados en numerosas funciones dentro del
sistema nervioso. Uno de los procesos ms estudiados en el que los receptores NMDA
parecen juegar un papel clave es la plasticidad sinptica. La maduracin de los
circuitos nerviosos (establecimiento de conexiones funcionales) durante el desarrollo, y
tambin en el adulto, depende de la activacin y consolidacin de ciertas sinapsis,
mediante mecanismos de plasticidad en el que estn involucrados los receptores
NMDA. La potenciacin a largo plazo (LTP), una forma de plasticidad sinptica que
est en la base de los procesos de aprendizaje y memoria, implica la activacin de los
receptores NMDA. Tambin ha sido demostrado recientemente un papel crucial de los
receptores NMDA en los procesos de formacin de las memorias, incluida la
denominada memoria episdica, un tipo de memoria que nos permite recordar las
experiencias vividas, aunque los acontecimientos solamente ocurran una vez. Otros
estudios han demostrado un papel del glutamato a travs de su unin con receptores
NMDA en los procesos de emigracin celular.
Si bien stas y otras funciones normales dependen de la precisa activacin de los
receptores NMDA en el momento y lugar adecuados, es cierto tambin que un
desequilibrio producido por la sobreactivacin del receptor (por liberacin excesiva de
glutamato, por ejemplo) podra conducir a ciertas enfermedades como la epilepsia o a
la muerte neuronal por sobreexcitacin en situaciones de hipoxia (ver, Glutamato y
muerte neuronal excitotxica, Encuentros en la Biologa, 20).
RECEPTORES AL GLUTAMATO y AMINOACIDOS EXCITADORES
El L-Glutamato es el principal neurotransmisor excitator del sistema nervioso central de los mamferos y acta
tanto a travs de receptores acoplados a canales inicos (receptors ionotrpicos) como a receptores acoplados
a protenas G (metabotrpicos). La activacin de estos receptores es la responsable de la transmisin sinptica
excitadora y de muchas formas de plasticidad sinptica que se cree estn implicadas en los procesos del
aprendizaje y de la memoria. La sospecha de que los receptores para glutamato, especialmente los de la familia
NMDA estn implicados en desrdenes neurodegenerativos y neurotxicos, epilepsia e isquemia cerebral y la
conocida neurotoxicidad por envenamiento con cido domoico y el latirismo (producido por la ingestin del
cido |-oxalil-diaminopropinico, un anlogo del AMPA, presente en el altramuz) ha aumentado el inters en
desarrollar compuestos que puedan actuar sobre estos receptores.
Receptores ionotrpicos
El glutamato juega un importante papel en la transmisin excitadora sinptica, proceso mediante el cual las
neuronas se comunican unas con las otras. Un impulso elctrico (potencial de accin) en una de estas clulas
produce una entrada de calcio con la subsiguiente liberacin del neurotransmisor. El neurotransmisor difunde a
travs de la hendidura sinptica y se fija en los receptores de la siguiente clula. Estos receptores son por s
mismos canales inicos que se abren al ser fijado el neurotransmisor, permitiendo el paso de Na+ o Ca++ por
su centro. Este flujo de iones produce la depolarizacin de la membrana plasmtica con generacin de una
corriente elctrica que se propaga hasta la siguiente clula.
Los receptores ionotrpicos de glutamato son complejos formados por 4 o 5 subunidades y se dividen en
grupos segn su comportamiento farmaclogico:
- receptores para AMPA (acido o-amino-3-hidroxi-5-metil-4-isoxazolpropinico)
- receptores para NMDA (N-metil-D-aspartato)
- receptores para Kainato (cido 2-carboxi-3-carboximetil-4-isopropenilpirrolidina)
- receptores para Quisqualato (cido o-amino-3,5-dioxo-1,2,4-oxadiazolidina-2-propanoico)
Las subunidades de todos los receptores de glutamato comparten la misma estructura bsica. Al igual que otros
canales que permiten el paso de iones, el receptor inotrpico para glutamato posee cuatro partes hidrofficas
en la parte central de la secuencia llamadas TM-I, TM-II, TM-III y TM-IV (*). Sin embargo, a diferencia de otras
subunidades de otros receptores, la parte TM-II forma una especie de asa que se extiende en la bicapa de tal
forma que obtiene un -NH2 terminal extracelular y un -COOH terminal intracelular. Adems, mientras que en el
caso de otros receptores ionotrpicos la parte entre TMIII y TM-IV es intracelular, en el receptor para
glutamato, esta parte es extracelular y forma parte del dominio de reconocimiento del ligando. En algunas de
estas partes hidrofbicas, en particular en la M2, se sitan los denominados "puntos de edicin de RNA", as
llamados porque pueden cambiarse uno de los aminocidos por otro de estructura parecida (glutamina por
arginina; valina por isoleucina, etc). Estos pequeos cambios de aminocidos arrastran un cambio dramtico de
la conductancia inica de la subunidad.
Los receptores ionotrpicos para glutamato constituyen un grupo muy diverso de receptores (*) Estas
variaciones resultan de la transcripcin de genes diferentes (por ejemplo los receptores para NMDA NR2A-D son
transcritos a partir de 4 genes diferentes) o de modificaciones de un pre-mRNA que mediante "spliting" (cortes
y empalmes) produce variaciones sobre todo en las proximidades del terminal-NH2 y del terminal -COOH. Esta
ltima regin es importante ya que en ella se producen las interacciones protena-protena
Receptores para NMDA
Los receptores para NMDA estn formados mediante ensamblajes de subunidades NR1 (*) y NR2. Se requiere
la expresin de ambos tipos de subunidades para obtener canales funcionales. Estos receptores presentan dos
reas de reconocimiento del ligando caractersticas: el lugar de fijacin del glutamato (en la unin de una
subunidad NR1 con una subunidad NR2) y el lugar de reconocimiento de la glicina (en la subunidad NR1) .
Adems del glutamado, para que el receptor funcione correctamente, se requiere que la glicina se fije a su
punto de unin situado en la subunidad NR1.
Bajo los potenciales de reposo de la membrana, los receptores para NMDA son inactivos, debido a un bloqueo
voltage-dependiente del canal por iones magnesio. Cuando un tren de impulsos que lleva a la terminal
presinptica despolariza la clula post-sinptica, el magnesio es removido y el canal queda libre estando el
receptor activado. Los receptores para NMDA son permeables a los iones Ca2+ y a otros iones de modo que la
entrada de calcio en la clula es post-sinptica y se cree que esta seal es crucial para la inducin de la
plasticidad sinptica.
Las variaciones en estos receptores se deben a pequeas variaciones de las secuencias de aminocidos, sobre
todo en la regin COOH-terminal, siendo estas importantes en la posibilidad que tienen los diversos receptores
en asociarse a protenas-PDZ
Receptores para AMPA
Los receptores para AMPA regulan la transmisin sinptica rpida en el sistema nervioso central. Estn
compuestos por subunidades GluR1 a GluR4 que son transcritas a partir de genes diferentes. Las subunidades
GluR estn todas ellas constitudas por unos 900 aminocidos y muestran una topologa similar en las
membrana: como los dems receptores ionotrpicos para glutamato, los receptores para AMPA muestran una
regin NH2-terminal extracelular y una regin COOH-terminal intracelular (*). Se producen dos variaciones en
las secuencias de aminocidos en la regin del "flip-flop" que son pequeas (solo cambian unos pocos
aminocidos), pero con efectos considerables sobre la cintica de deensibilizacin.
Los receptores para AMPA nativos son impermeables al calcio, una funcin controlada por la subunidad GluR2.
El cambio de un aminocido de la regin TMII (glutamina Q --> Arginina R) hace que el receptor se vuelva
permeable: el punto donde esto se lleva a cabo se denomina punto de edicin Q/R. El GluR2(Q )es
permeable al calcio mientras que GluR2(R) no lo es. La mayor parte de la protena GluR2 expresada en el SNC
lo hace bajo la forma de GluR2(R), predominando los receptores para AMPA impermeables al calcio. Este
hecho, conjuntamente con la posibilidad que tienen las subunidades de GluR2 de unirse a otras protenas
intracelulares, hace que sean consideradas con los constituyentes ms importantes de los receptores para
AMPA.
Receptores para kainato
Los receptores para kainato constituyen un grupo diferentes de los receptores para NMDA y AMPA aunque
comparten con estos una serie de propiedades estructurales, Estn formados mediante ensamblaje multimrico
de tres subunidades GluR5-7, KA1 y KA2. Estas subunidades de pueden clasificar en dos grupos en funcin de
su afinicdad hacia el kainato:
- subunidades de baja afinidad (GluR5, GluR6 y GluR7). Presentan un 70% de homologa
- subunidades de alta afinidad (KA1 y KA2). Presentan un 68% de homologa entre s
Como los dems receptores ionotrpicos para glutamato, poseen una regin NH2-terminal extracelular y una
regin COOH-terminal intracelular. El dominio transmembrana TM-II forma parte del poro del canal inico y
como en el caso de otras subunidades es un punto de edicin de RNA. Sin embargo, en el caso de los
receptores para kainato, el dominio transmembrana TM-I tambin es un punto de edicin de RNA (*)
Las subunidades GluR5 y GluR6 han sido clonadas construyndose con ellas receptores recombinantes
homomricos cuyas propiedades electrofisiolgicas han sido estudiadas cuando se lleva a cabo una edicin de
RNA en el dominio M-II cambiando la glutamina (Q) por arginina (G). Como se muestra en la figura, esta
sustitucin ocasiona la formacin de una especie de anillo en el poro del canal con una carga positiva
disminuyendo las conductancias de los cationes Na+, K+ y Ca+2 y de las poliaminas, al mismo tiempo que se
origina una conductancia al Cl-
Los receptores para kainato han sido clsicamente implicados en la epileptognesis. Durante mucho tiempo, se
ha utilizado como modelo farmacolgico de la inyeccin intraperitoneal de kainato como modelo de crisis del
lbulo temporal.
El descubrimiento de nuevos y selectivos agonistas y antagonistas del kainato y el desarrollo de ratones
transgnicos para estos receptores han permitido recientemente avanzar en el conocimiento de la funcin de
estos receptores. Se sabe actualmente que los receptores para kainato estn sinpticamente activados y que
son necesarios para la induccin de la potenciacin a largo trmino (LTP) en el hipocampo. Fuera del
hipocampo, los receptores de kainato juegan un importante papel en la plasticidad sinptica de la corteza
somatosensorial. Durante la potenciacin a largo trmino, aumenta la transmisin sinptica regulada por los
receptores AMPA, mientras que se reduce la transmisin sinptica de los receptores para kainato.
Receptores para glutamato metabotrpicos
Los receptores metabotrpicos para glutamato (mGlu) son receptores acoplados a protenas G que han sido
divididos en tres grupos (*) a partir de la similitud en sus secuencias, sus propiedades farmacolgicas y los
mecanismos de seales intracelulares que desencadenan. Los receptores del grupo I est asociados a las
seales del calcio intracelular y la fosfolipasa C (PLC) mientras que los receptores de los grupos II y III estn
acoplados negativamente a la adenililciclasa.
Conjuntamente con el receptor para GABAB, los receptores mGlu forman la segunda superfamilia de
receptores acoplados a protenas G (la primera familia es la de los receptores de tipo adrenrgico). Ambas
superfamilias de receptores muestran una estructura con 7 dominios transmembrana, los receptores mGlu son
mucho ms grandes y los agonistas se unen a la regin NH2-terminal
Receptores para GABA
El GABA (cido -aminobutrico) es el principal neurotransmisor inhibitorio del sistema nervioso central. Existen
dos tipos de receptores para GABA, los GABAA que son miembros de la superfamilia de receptores ionotrpicos
(entre los que se encuentra los receptores para la glicina y los o-adrenrgicos) y los GABAB pertenecientes a la
superfamilia de los receptores acoplados a las protenas G. Recientemente, se ha informado de la existencia de
un tercer tipo de receptor para GABA, el llamado GABAC con unas propiedades farmacolgicas diferentes,
aislado de neuronas retinianas.
El receptor GABAA
El receptor GABAA est formado por cinco subunidades agrupadas circularmente formando un canal para
el cloro (*). Se observan reas para la unin del GABA y de agonistas o antagonistas competitivos, para la
unin de alcohol, benzodiazepinas, barbitricos, picrotoxina y esteroides anestsicos rodeando al poro que
constituye el canal de cloro. Hasta el momento, han sido clonadas al menos 6 tipos de subunidad o, 3 |, 3 , 1
o, 1 c, 1 t, 1 u y 3 del sistema nervioso central de los mamferos y dependiendo de la composicin de sus
subunidades, los receptores muestran diversas propiedades farmacolgicas y electroqumicas. Recientes
estudios inmunoqumicos han demostrado que los subunidades individuales tienen una amplia distribucin a lo
largo de todo el SNC. La expresin de diversas subunidades en la misma neurona sugiere la existencia de un
amplio nmero de subtipos del receptor GABAA. Como la mayoria de los receptores GABAA contiene 2 subunidades o, dos |
y una (aunque en pocas ocasiones se encuentran unidades o|o, o|c, o|t, o| u homoligomeras ) pueden existir
hasta 500 diferentes receptores GABAA en el cerebro, siendo tan abundantes como los receptores a pptipos o a
la 5-HT
La unin del GABA al su receptor postsinptico ocasiona la apertura del canal de cloro, producindose
una hiperpolarizacin de la membrana celular, con una reduccin del potencial de accin. El resultado neto es
una estabilizacin de la neurona
El receptor GABAB
La estructura del receptor GABAB es similar a la de los receptores mGlu, es decir poseen las siguientes
caractersticas:
- - Una regin extracelular bastante larga que lleva el NH2-terminal y que contiene el rea de unin del
ligando
- - 7 dominios transmembrana hidrfilos
- - una regin que lleva el COOH-terminal
El receptor GABAB fue clonado en 1997. Se sabe que a partir de un slo gen se expresa un producto llamado
GABABR1a/b con una variante por spliting denominado GABABR2. Se requiere la dimerizacin de ambos
subtipos para conseguir un receptor funcional. Como en otros receptores, las variantes obtenidas por "spliting"
(cortes y empalmes) ocasiona un buen nmero de variantes (hasta 18 subtipos denominados o1-3, |1-3, -1-3,
o, c, t y 1-3). El receptor GABAB acta sobre canales de Ca++ y K+ a travs de su acoplamiento a protenas G
y de sistemas de segundos mensajeros y es activado por el Baclofen
El receptor GABAC
El receptor para GABAC ha sido el ltimo en ser identificado en neuronas retinianas. A diferencia de los
receptores GABAA no es activado por la bicucullina y a diferencia de los GABAB no es modulado por el Baclofen.
Al parecer los receptores GABAC estn formados for subunidades siendo homoligomricos y tienen
propiedades espaciales y funcionales diferentes de las de los receptores GABAA y para glicina que tambin
abundan en las clulas bipolares de la retina de los mamferos. En particular, son unas 10 veces ms sensibles
que los GABAA a los agonistas fisiolgicos, muestran una conductancia baja y tiempos de apertura bastante
largos. Muestran una alta selectividad para el Cl
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Receptores para glicina
La glicina es un aminocido neutro cuya distribucin est mucho ms localizada que la del GABA. La glicina
inhibe la descarga de las neuronas motoras de la mdula espinal y del tronco enceflico, pero slo tiene un
dbil efecto sobre las neuronas de la corteza cerebral. Ms de un 50% de las sinapsis inhibitorias en la mdula
espinal usan la glicina como inhibidor, utilizando el GABA las restantes.
La glicina es sintetizada por la serina hidroximetiltransferasa (*) , una enzima presente en las mitocondrias de
las neuronas motoras de la mdula a partir de la serina, almacenndose en las vesculas sinpticas. Una vez
liberada en la hendidura sinptica, la glicina es eliminada rpidamente por transportadores especficos. Las
mutaciones en algunas de estas transportadoras provoca la acumulacin de glicina en el lquido cefalorraqudeo
y en la sangre dando origen a la hiperglicinemia no cetsica, una enfermedad neonatal caracterizada por
retraso mental, consulviones y somnolencia.