Laboratorio de Bioqumica II

Practica # 10. Determinacin de colesterol srico y HDL colesterol

Universidad Autnoma de Ciudad Jurez Instituto de Ciencias Biomdicas Licenciatura en Qumica Laboratorio de Bioqumica II Adriana Lucely Euan Ku 91883 Equipo No. 4

Introduccin Los lpidos se clasifican de acuerdo a si son saponificables o no saponificables, dentro de esta ultima clasificacin se encuentra los esteroles al cual pertenece el colesterol, este lpido se encuentra en tejidos corporales y en el plasma sanguneo de lo vertebrados. Se encuentra en altas concentraciones en el hgado, medula espinal, pncreas y cerebro. Desempea diversas funciones dentro del cuerpo humano, ya se estructural y como precursor de la vitamina D, hormonas sexuales, hormonas corticoesteroidales, sales biliares y de las balsas de lpidos 2. Debido a su insolubilidad en agua, el colesterol plasmtico solo existe en la forma de complejo llamado lipoprotenas, principalmente LDL y HDL, que tiene la capacidad de fijar y transportar grandes cantidades de colesterol; el primero se relaciona mucho con la arteriosclerosis. Las lipoprotenas plasmticas son partculas que solubilizan y transportan el colesterol en el torrente sanguneo. La funcin principal de las lipoprotenas de alta densidad o HDL en el metabolismo lipdico es la captacin y transporte de colesterol desde los tejidos perifricos al hgado en un proceso conocido como transporte reverso de colesterol (mecanismo cardioprotectivo). El HDL colesterol bajo, est asociado con un alto riesgo de enfermedad cardaca. Por este motivo la determinacin de HDL colesterol es una herramienta til en la identificacin de individuos de alto riesgo 1. La concentracin aceptada como normal de colesterol en plasma sanguneo (colesterolemia) de personas sanas es de 150 a 280 mg/dL, sin embargo varan mucho las concentraciones. Cuando la concentracin aumenta se habla de hipercolesterolemia 1.
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Objetivo Determinar la concentracin de colesterol total srico y el de HDL, y su influencia en implicaciones clnicas Materiales y reactivos Suero Solucin patrn Reactivo de colesterol Sobrenadante II Metodologa
Para preprara el sobrenadante: se tom 0.05 ml de suero + 0.05 ml de reactivo precipitante de HDL- COLESTEROL, se mezcl , se dejo reposar 5 min y se centrifug 5 min a 3000 rpm

Se prepararon 6 tubo de acuerdo a la sigueiente tabla Reactivos (ml) Suero (ml) Patrn (ml) Agua (ml) Sobrenad ante II R Colesterol (ml) Blanc o ----0.05 --2 Patrn --0.05 -----2 HDL ------0.05 2 P1 0.05 ------2 P2 0.05 ------2 P3 0.05 -------2

Todos los tubo se mezclaron y se dej que se lleve a cabo la reaccion durante 20 min y se anadi 0.2 ml de H2SO4 Todo lo anterior se realizo sobre hielo y luego se suavemente

Se leyeron las absorbancias a una longitud de onda de 640 nm

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Clculos [Colesterol T]=Abs Prob/Abs patrn x [patrn] [HDL colest.]=absProb/abs patrn x [patrn] Factor de riesgo coronario=colesterol T/HDL Resultados
Tabla 1. Absorbancias de los diferentes parmetros medidos

Parmetros Blanco Patrn HDL-colesterol Problema 1 Problema 2 Problema 3

Absorbancia 0 0.012 0.150 0.162 0.152 0.173

Los valores normales de colesterol HDL son de 40-60 mg/dL, sin embargo si los valores sobrepasan un poco, es muy aceptable debido a que las HDL son consideradas como Factor Protector, ya que es el encargado de recolectar el colesterol de los tejidos y llevarlos al hgado para su procesamiento, por otro lado estn las LDL (Low Density Lipoproten), consideradas como Factor de Riesgo y cuyos valores estn por debajo de los 140 mg/dL. Con respecto al factor de riesgo coronario, el valor es muy bajo (1.033 mg/dL) lo que indica que no se relaciona con un factor de riesgo cardiovascular, sin embargo el promedio normal en hombres es de 3.43 y en mujeres de 3.27. Conclusin El colesterol srico total tiene una utilidad comprobada en el diagnstico de hiperlipoproteinemia, arteriosclerosis, enfermedades hepticas y tiroidales. El colesterol total y el colesterol HDL, junto con una determinacin de triglicrido proveen una informacin valiosa para la prediccin de la enfermedad coronaria del corazn, y para el genotipo de lipoprotena de acuerdo a la clasificacin de Fredickson. Altos niveles de colesterol se asocian a riesgo de padecer enfermedades cardiovasculares, en especial aquel unido a las LDL (colesterol malo), en cambio el colesterol HDL (colesterol bueno) se transporta al hgado para su metabolizacin y excrecin por va biliar y por tanto no se asocia con riesgo de enfermedades coronarias.
Bibliografa 1. Ferri, Fred. Consultor Clnico de Medicina Interna: Claves Diagnosticas y Tratamientos. Editorial Ocano Mosby. Cuarta edicin. Barcelona, Espaa. 2006. Pg.421, 1271 2. Murray, Robert; Mayes, Peter A, et al. Harper, Bioqumica Ilustrada. Editorial Manual Moderno. 16 Edicin. Mxico, D.F. 2005. Pg. 125, 131.

Tabla 2. Resultado de los diferentes parmetros determinados

Parmetros Problema 1 Problema 2 Problema 3 HDL colesterol (p. 2) FRC

Resultados (mg/dL) 2491.08 2267.33 2580.58 2237.5 1.013

Discusin De acuerdo con los resultados obtenidos es posible observar que los valores de las tres muestras problemas estn mu fuera del rango normal (> 280 mg/dL) 2, debido a que hubo una falla en el equipo (espectrofotmetro) y por eso los resultados de las Absorbancias nos arrojaron valores indeseados, lo mismo que para el patrn, al salir muy baja la Absorbancia (0.012). Ver tabla 1 y 2. De acuerdo a la bibliografa los valores de referencia de colesterolemia son: por debajo de los 200 mg/dL es la concentracin deseable ya que se relaciona con un bajo riesgo de enfermedad cardiovascular, cuando los valores estn entre los 240 y 270 mg/dl hay un riesgo intermedio y, cuando es mayor a los 280 mg/dL se dice que hay un alto riesgo cardiovascular muy alto, por ello es recomendando iniciar un cambio en el estilo de vida (dieta y ejercicio) 1.

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