Objetivo: Conocer qu factores fsicos influyen principalmente en el crecimiento bacteriano.

FACTORES FSICOS Y QUMICOS QUE INFLUYEN EN EL CRECIMIENTO BACTERIANO.

Temperatura: Cada microorganismo tiene una temperatura de crecimiento adecuada. Si consideramos la variacin de la velocidad de crecimiento en funcin de la temperatura de cultivo, podemos observar una temperatura mnima por debajo de la cual no hay crecimiento; a temperaturas mayores se produce un incremento lineal de la velocidad de crecimiento con la temperatura de cultivo hasta que se alcanza la temperatura ptima a la que la velocidad es mxima. Por encima de esta temperatura ptima, la velocidad de crecimiento decae bruscamente y se produce la muerte celular.

El aumento de la velocidad de crecimiento con la temperatura se debe al incremento generalizado de la velocidad de las reacciones enzimticas con la temperatura. Se denomina coeficiente de temperatura a la relacin entre el incremento de la velocidad de reaccin y el de temperatura. En trminos generales, la velocidad de las reacciones bioqumicas suele aumentar entre 1.5 y 2.5 veces al aumentar 10C la temperatura a la que tienen lugar. La falta de crecimiento a temperaturas bajas se debe a la reduccin de la velocidad de las reacciones bioqumicas y al cambio de estado de los lpidos de la membrana celular que pasan de ser fluidos a cristalinos impidiendo el funcionamiento de la membrana celular. La muerte celular a altas temperaturas se debe a la desnaturalizacin de protenas y a las alteraciones producidas en las membranas lipdicas a esas temperaturas.

Es importante tener en cuenta que a temperaturas bajas, el metabolismo celular es lento y las clulas paran de crecer; aunque suelen morir. Sin embargo, cuando la temperatura es superior a la ptima, se produce la muerte celular rpidamente y las clulas no pueden recuperar su capacidad de divisin si baja posteriormente la temperatura. Esto permite esterilizar por calor y no por fro. Hay varios tipos de microorganismos en funcin de sus temperaturas de crecimiento mnima, mxima y ptima. Tipo de Temperatura microorganismo mnima Mesfilo Psicrfilo Psicrtrofo Termfilo 5 - 15 -5 + 5 -5 + 5 40 - 45 Temperatura ptima 30 - 45 12 - 15 25 - 30 55 - 75 Temperatura mxima 35 47 15 20 30 35 60 - 90

Los microorganismos psicrtrofos son mesfilos que pueden crecer a temperaturas bajas. Por tanto, se les puede considerar como psicrfilos facultativos. Esto es importante desde el punto de vista aplicado porque cuando se encuentran contaminando alimentos, son capaces de crecer en condiciones de refrigeracin (4 8C) y de producir infecciones en los consumidores del alimento (30 - 35 C). Desde el punto de vista clnico, los microorganismos capaces de producir infecciones en pacientes son los mesfilos y algunos psicrtrofos ya que sus temperaturas ptimas de crecimiento coinciden con las corporales.

Actividad de agua (aw): Se denomina actividad de agua a la relacin entre la presin de vapor de agua del substrato de cultivo (P) y la presin de vapor de agua del agua pura (P0). El valor de la actividad de agua est relacionado con el de la humedad relativa (HR).

El valor de la actividad de agua nos da una idea de la cantidad de agua disponible metablicamente. Por ejemplo: comparemos el agua pura donde todas las molculas de agua estn libremente disponibles para reacciones qumicas con el agua presente en una disolucin saturada de sal comn (NaCl) donde una parte importante de las molculas de agua participa en la solvatacin de los iones de la sal disuelta. En este ltimo caso, la actividad de agua mucho menor que en el primero. conforme aumenta la cantidad de solutos en el medio, disminuye su actividad de agua.

El agua es un substrato en muchas reacciones bioqumicas (proteasas y lipasas, por ejemplo). Cuando no hay agua disponible, estas reacciones se detienen y el metabolismo se para. Esta falta de agua tambin detiene muchas de las enzimas que podran degradar las estructuras biolgicas. Por ello, las clulas que no crecen por falta de agua no mueren rpidamente: los sistemas de degradacin tampoco funcionan y no las degradan. Es decir: cuando un microorganismo se encuentra en un substrato con actividad de agua menor que la que necesita, su crecimiento se detiene. Esta detencin del crecimiento no suele llevar asociada la muerte del microorganismo, sino que ste se mantiene en condiciones de resistencia durante un tiempo ms o menos largo. En el caso de las esporas, la fase de resistencia puede ser considerado prcticamente ilimitada. La gran mayora de los microorganismos requiere valores de actividad de agua muy altos para poder crecer. Los valores mnimos de actividad para diferentes tipos de microorganismos son, a ttulo orientativo, los siguientes: bacterias aw>0.90, levaduras aw>0.85, hongos filamentosos aw>0.80. Como puede verse, los hongos filamentosos son capaces de crecer en substratos con actividad de agua menor (ms secos) de la que permite el crecimiento de bacterias o de levaduras. Por esta razn se puede producir deterioro de alimentos de baja actividad de agua (por ejemplo, el queso o almbares) por mohos (hongos filamentosos) y no por bacterias. En funcin de su tolerancia a ambientes con baja aw, los microorganismos que pueden crecer en estas condiciones se clasifican en halotolerantes, halfilos y xerfilos segn toleren o requieran condiciones salinas o hipersalinas, respectivamente. La reduccin de la actividad de agua para limitar el crecimiento bacteriano tiene importancia aplicada en industria alimentaria. La utilizacin de almbares, salmueras y salazones reduce la actividad de agua del alimento para evitar su deterioro bacteriano.

pH: Es un parmetro crtico en el crecimiento de microorganismos ya que cada tipo de microorganismo tiene un rango de pH en el que puede vivir adecuadamente, fuera de este rango muere.

El pH intracelular es ligeramente superior al del medio que rodea las clulas ya que, en muchos casos, la obtencin de energa metablica depende de la existencia de una diferencia en la concentracin de protones a ambos lados de la membrana citoplsmica.

El pH interno en la mayora de los microorganismo est en el rango de 6,0 a 8,0. Los rangos de pH tolerables por diferentes tipos de microorganismos son, tambin, distintos. Hay microorganismos acidfilos que pueden vivir a pH=1.0 y otros alcalfilos que toleran pH=10.0. Hay que considerar que, como consecuencia del metabolismo, el pH del medio de crecimiento suele tender a bajar durante el cultivo. Por otra parte, la bajada del pH del medio que producen ciertos microorganismos les confiere una ventaja selectiva frente a otros competidores. As, por ejemplo, las bacterias lcticas que producen grandes cantidades de cido lctico como consecuencia de su metabolismo primario reducen el pH del medio a valores inferiores a los soportables por otras bacterias competidoras (llegan a bajar el pH del medio hasta 4.5). De esta forma, las bacterias competidoras mueren y las lcticas se convierten en la poblacin dominante. La bajada del pH se puede deber a varios factores, uno de los cuales es la liberacin de cidos orgnicos de cadena corta (frmico, actico, lctico) por ciertas bacterias. En este sentido, hay que tener en cuenta que la accin bactericida de estos cidos orgnicos de cadena corta es ms potente que la debida nicamente a la bajada del pH que producen. Esto es, los cidos orgnicos de cadena corta son txicos para algunas bacterias por s mismos. El efecto letal del pH cido sobre los microorganismos tiene aplicacin en la conservacin de alimentos acidificndolos. De esta forma, la adicin de cido actico en forma de vinagre permite la conservacin de alimentos perecederos (escabeches, por ejemplo) y la produccin de cidos en el curso de fermentaciones naturales permite alargar la vida de los alimentos (coles fermentadas, por ejemplo).

Potencial redox: nos indica la capacidad del substrato para aceptar o donar

electrones, esto es: sus caractersticas oxidantes o reductoras. Uno de los factores que intervienen en el potencial redox, aunque no el nico, es la concentracin de oxgeno [O2]. Hay microorganismos que requieren ambientes oxidantes para crecer, mientras que otros necesitan ambientes reductores. El metabolismo de ambos tipos de microorganismos presenta diferencias notables. El requerimiento de condiciones oxidantes o reductoras no debe confundirse con la necesidad de presencia o ausencia de oxgeno para que se produzca el crecimiento. En general, cuando un microorganismo requiere un ambiente oxidante se dice que desarrolla un metabolismo oxidativo (o respirativo) mientras que los microorganismos

que requieren ambientes reductores (o menos oxidantes) realizan un metabolismo fermentativo. Un microorganismo es aerobio cuando necesita oxgeno para vivir y es anaerobio cuando o bien no lo necesita (anaerobios facultativos como las bacterias entricas, o como Saccharomyces cerevisiae; o anaerobios aerotolerantes como las bacterias lcticas) o cuando muere en presencia de oxgeno (anaerobios estrictos como los clostridios). Hay microorganismos que, aunque viven en presencia de oxgeno, no son capaces de utilizarlo como aceptor final de electrones y deben desarrollar un metabolismo fermentativo (los estreptococos, por ejemplo). Por otra parte, hay microorganismos que pueden desarrollar ambos tipos de metabolismo. Esto es: en presencia de oxgeno desarrollan un metabolismo oxidativo y en su ausencia, fermentativo. El rendimiento de los procesos fermentativos es menor que el de los respirativos: las bacterias y las levaduras producen menos biomasa cuando crecen fermentando que cuando lo hacen respirando. En el curso de ciertas reacciones metablicas redox se forman compuestos altamente reactivos (radicales libres, formas superxido) que pueden daar las protenas, membranas y cidos nucleicos produciendo la muerte de las clulas. Las clulas se defienden de estos compuestos reactivos mediante las enzimas de: superxido dismutasa (SOD) y catalasa. Los anaerobios estrictos carecen de SOD y de catalasa o tienen niveles muy bajos de estas enzimas de forma que no pueden sobrevivir en presencia de oxgeno. La deteccin de estas enzimas tiene valor taxonmico.

Fundamentos del control de los microorganismos

Las razones principales para controlar los microorganismos son: prevenir la transmisin de enfermedades, evitar el deterioro de los alimentos y evitar la contaminacin tanto en procesos industriales que requieran cultivos puros, como en laboratorios de diagnstico o investigacin.

Trminos importantes al hablar del control de microorganismos

Esterilizacin es el efecto de destruir toda forma de vida (un objeto esterilizado es aquel que no posee ninguna forma de vida, ni siquiera esporas) Agente antimicrobial es un compuesto por lo general qumico que mata o interfiere con el crecimiento y actividad de los microoganismos. Se clasifica de acuerdo a su aplicacin y a como acta.

1. El germicida es un agente qumico que mata los microorganismos pero no necesariamente las esporas (ejemplo el bactericida, mata bacterias, el fungicida, mata hongos y el viricida mata los virus). 2. El agente microbiosttico es uno que inhibe el crecimiento de los microoganismos, pero no los mata (ejemplo los agentes bacteriostticos, inhiben crecimiento bacterial). 3. El desinfectante es un compuesto que mata microorganismos, pero no necesariamente las esporas. Se aplica sobre objetos inanimados. 4. El antisptico es parecido al desinfectante, pero ste se puede aplicar sobre tejido biolgico (cuerpo).

Condiciones que influyen en la accin microbiana

Hay ciertos factores que tienen que ser considerados a la hora de aplicar agentes qumicos o fsicos para el control de microorganismos.

Concentracin del agente qumico Mientras ms concentrado est el agente qumico, ms rpido se destruirn los organismos.
Intensidad del agente fsico Cuanto ms intenso es el agente fsico (calor o radiacin ) ms rpidamente mata a los micoorganismos. Tiempo de exposicin A mayor tiempo de exposicin, mayor es el nmero de organismos destruidos. Temperatura A mayor temperatura se acelera la destruccin de los organismos. Nmero de organismos Mientras mayor sea el nmero de microorganismos, ms tiempo se requiere para destruirlos. Clase de organismo Las clulas vegetativas (las que estn metabolicamente activas) son ms suceptibles que la esporas bacteriales. Estado fisiolgico de las clulas Mientras ms viejas sean las clulas, ms rpido se destruyen.

Naturaleza del medio ambiente Algunos ambientes desfavorecen la destruccin rpida de los microorganismos, como por ejemplo los medios viscosos.
Factores fsicos para el control de los microorganismos

Temperatura

La temperatura es de suma importancia para el crecimiento de los organismos. A medida que aumenta sta por encima de la temperatura ptima de crecimiento, mayor es la velocidad de muerte de los microorganismos. Es por ello que altas temperaturas se usan en el control microbiolgico. Las temperaturas altas pueden aplicarse de dos formas: calor hmedo (con agua) o calor seco. El calor hmedo es mucho ms eficiente que el calor seco, ya que este acta mediante la coagulacin de las protenas celulares, por otro lado el calor seco destruye la clula por la oxidacin de agentes qumicos de la clula.

Formas de aplicacin de calor hmedo

1. Vapor a presin Es el calor en forma de vapor saturado a presin, es el agente de esterilizacin ms prctico y ms seguro. El autoclave es el instrumento que se utiliza para aplicar vapor a presin regulada. Se aplica a una temperatura de 121C durante 15 minutos con 20 libras de presin. El autoclave se utiliza para esterilizar substancias, cierto tipo de cristalera y otros. Productos como grasas o aceites no se deben esterilizar en el autoclave pues el vapor no penetra bien. 2. Tindalizacin o esterilizacin fraccionada Algunas substancias no pueden calentarse a temperaturas mayores de 100C, ya que su composicn puede alterarse. Para esos casos se utiliza este mtodo que consiste en calentar el material a 100C tres das consecutivos con periodos de incubacin entre ellos, de manera tal que las substancias vuelven a enfriarse. Esto ayuda a destruir las esporas que estn presentes, ya que germinan en los intrvalos de enfriamiento y se destruyen como clulas vegetativas al subir la temperatura a 100C. 3. Agua hirviendo Los materiales contaminados que se tratan con agua hirviendo no quedan esterilizados, slo desinfectados. 4. Pasteurizacin Es un tratamiento de calor controlado el cual es por debajo de los 100C. El proceso puede ser de 63C por 30 minutos, a 71C por 15 segundos o el proceso con temperaturas extremas que es 141 C por 2 segundos. La pasteurizacin no destruye todos los organismos.

Formas de aplicacin de calor seco

1. Horno Es el instrumento usado para la aplicacin del calor seco y se usa cuando no se quiere que los materiales queden humedecidos por vapor. 2. Incineracin La incineracin de materiales destruye los microoganismos. Se usa para esterilizar las agujas de inocular y otros materiales, adems es una forma de destruir cadveres. Contrario al calor, las temperaturas bajas o el fro no desnaturalizan las protenas. Las bajas temperaturas hacen que la reproduccin de los microoganismos se detenga, pero no las

mata. Se dice que las temperaturas bajas son microbiostticas, mientras que las temperaturas altas son microbicidas.

Desecacin

La falta de agua detiene los procesos vitales en los microorganimos, por lo cual el crecimeinto se detiene. La desecacin se logra evaporando el agua presente para lo cual se usa aire caliente. La preservacin de alimentos por secado an se utiliza. Esta tcnica tiene un efecto microbiosttico, pues detiene el crecimiento bacterial, pero no mata los organismos. De hecho los microoganismos pueden preservase por secado. Cuando se seca junto con congelacin el proceso se llama liofilizacin.

Presin osmtica
La pared celular de las bacterias las protege de cambios en la presin osmtica del medio, pero si la presin osmtica externa es mucha, el organismo puede morir; esto sucede si las concentraciones de solutos en el medio en que crece el organismo son extremos. Altas concentraciones de sal interrumpen los procesos de transporte a travs de la membrana y desnaturalizan las protenas.

Radiacin
Ciertas formas de radiacin pueden matar los microorganismos. 1. Radiacin ionizante Los rayos X y gamma tienen un gran poder de penetracin y matan los microorganismos formando iones txicos. Estos iones afectan toda la bioqumica de la clula. Las esporas bacteriales son ms resistentes a los diferentes tipos de radiacin. 2. Luz ultravioleta (UV) La luz UV no tiene poder de penetracin, por lo que es til para matar microorganismos en las superficies. Las radiaciones de luz UV ms germicidas son las de largo de onda de 260 nm. El principal modo de accin de la luz UV es la formacin de dmeros de timina en la molcula de DNA. La luz UV se utiliza para: esterilizar salas de hospitales, para el mantenimiento de cuartos aspticos para el envasado de medicinas en la industria farmacutica y para el tratamiento de superficies contaminadas en la industria de alimento y de leche. Ondas ultrasnicas (sonicacin) En general, los microorganismos suspendidos en un lquido y somedtidos a la accin de ondas ultrasnicas de altas intensidades (20,000 ciclos/seg.) durante cierto tiempo se destruyen porque se rompe la pared celular y se pierde el contenido de la clula.

Filtracin

La filtracin se emplea para esterilizar lquidos o soluciones que se afectan si se les aplica calor (sueros, algunas enzimas, vitaminas, antibiticos). Generalmente se usan filtros que tienen unos poros de 0.2 micras de dimetros. Los poros de este tamao retienen las bacterias, pero no los virus.

FACTORES FISICOS Y QUMICOS QUE ALTERAN EL CRECIMIENTO MICROBIANO.

FACTORES FISICOS Y QUMICOS QUE ALTERAN EL CRECIMIENTO MICROBIANO. Efecto de la temperatura sobre el crecimiento La temperatura es uno de los factores ms importantes que afectan al crecimiento y a la supervivencia de los microorganismos. A temperaturas muy fras o muy calientes los microorganismos no crecern. Pero los valores absolutos de estas temperaturas mnimas o mximas varan mucho entre los microorganismos diferentes y por lo general reflejan el rango de temperatura media de su hbitat natural. Temperaturas cardinales La temperatura ejerce dos tipos de efectos opuestos sobre los organismos vivos. A medida que se eleva la temperatura, las reacciones qumicas y enzimticos de la clula son ms rpidas y el crecimiento se acelera. En consecuencia dentro de un cierto margen, un aumento de temperatura supone un incremento en el crecimiento y en el metabolismo hasta un punto que tienen lugar las reacciones de inactivasin. Por encima de tal punto, las reacciones celulares caen rpidamente a cero. As para cada organismo existe una temperatura mnima por debajo de la cual no es posible el crecimiento, una tempera optima a la que se produce el crecimiento ms rpido y una temperatura mxima por encima de la cual no es posible el crecimiento. La temperatura optima esta siempre mas cerca de la mxima que de la mnima. Estas tres temperaturas que se llaman temperaturas cardinales o fundamentales, generalmente son caractersticas de cada tipo de organismos, pero no son complementamente fijas, pues pueden ser ligeramente modificados por otros factores del ambiente, en particular por la composicin del medio. La temperatura mxima de crecimiento de un organismo determinado refleja probablemente la inactivacin de una o ms protenas en la clula. Las temperaturas cardinales o fundamentales de diferentes microorganismos difieren muchos entre s; algunos muestran temperaturas optimas tan bajas como 4C y otros tan altas como ms de 100C, no hay ningun microorganismos que tenga todo este intervalo de temperaturas que para el caso de unos organismos

determinado suele ser de unos 30C aunque algunos presentas margenes de temperatura ms amplios que otros. Clases de microorganismos segn la temperatura Cuatro grupos de microorganismos con relacin a su temperatura optima: psicrofilos con temperatura optimas bajas; mesofilos con temperaturas optimas moderadas; termofilos con altas temperaturas optimas; e hipertermofilos con temperas optimas muy elevadas. Los mesofilos se encuentran en animales de sangre caliente y en medios acuticos y terrestres de latitudes templadas y tropicales. Los psicrofilos y los termofilos se encuentran en ambientes muy fros o calientes respectivamente. Los hipertermofilos son tpicos de ambientes concretos extremadamente calientes como fuentes termales, geisers y fuentes hidrotermales submarinas. Crecimiento microbiano a bajas temperaturas Los hbitat normales de muchos microorganismos puede ser extremadamente calientes o extremadamente fros. Tales microorganismos se conocen como extremofilos y han evolucionado hasta crecer de modo optimo en esas condiciones. Ambientes fros Estos ambientes fros son raramente estriles y se encuentran microorganismos vivios creciendo a cualquier temperatura baja en la que aun exista agua liquida. Incluso en muchos materiales congelados existen normalmente pequeas zonas microscopias con agua liquida donde los microorganismos pueden metabolizar y crecer. Microorganismos psicrofilos y psicotolerantes Un psicrofilo puede definirse como un organismo que tiene una temperatura optima de crecimiento de 15C o inferior, una temperatura mxima 20C y una temperatura mnima de 0C pero tiene temperaturas optimas de 20 40C se llaman psicrotolerantes. Los psicrofilos se encuentran en ambientes permanentemente fros como regiones polares y sus sedimentos marinos y mueren rpidamente si se exponen a temperatura ambiente normal. Los microorganismos psicrotolerantes tienen una distribucin mucho ms amplia que los psicrofilos y se pueden aislar de suelos y aguas en climas templados as como de carnes, leche y productos derivados, sidra y vegetales y fruta almacena bajo refrigeracin (4C). Los psicrotolerantes crecen mejor a temperaturas 20 40C.

Congelacin A pesar de la capacidad de algunos organismos para crecer a bajas temperaturas, existe un limite por debajo del cual es imposible la reproduccin. El agua pura se congela a 0C y el agua de mar a 25C, pero la congelacin no es un proceso homogneo e incluso a temperaturas mas bajas existen depsitos microscpicos de agua no congelada. Aunque la congelacin evite el crecimiento microbiano no causa necesariamente la muerte celular, el medio de suspensin de las clulas afecta su sensibilidad al fri. Crecimiento microbiano a altas temperaturas La vida microbiana crece bien en ambientes con elevada temperatura incluso en el agua hirviendo. Por encima de 65C solo viven las formas procariotas de vida pero en esas condiciones existe una enorme diversidad de microorganismos pertenecientes a Bacteris y Archea. Ambientes con temperaturas altas Los microorganismos cuya temperatura optima esta por encima de 45C se llaman termofilos y aquellos que esta por encima de 80C son los hipertermolfilos. Muchas fuentes termales tienen temperaturas prximas a la ebullicin y las fuentes hidrotermales submarinas pueden alcanzar los 150 500C. Las fuentes hidrotermales del fondo de los ocanos tienen temperaturas de 350C o superiores. Aunque en algunas fuentes termales es variable en otras es muy constante con variaciones de 1 2C en varios aos, adems estas fuentes tienen composiciones qumicas y valores de pH diversos y en general contienen niveles suficientes de nutrientes que permitan el crecimiento de poblaciones de quimioorganotrofos y quimiolitrofos. Hipetermofilos en fuentes termales Los estudios ecolgicos de estos organismos que viven en fuentes termales en ebullicin demuestran que las velocidades de crecimiento son notablemente rpidas y con tiempo de generacin inferiores a 1 hora.. algunos de estos hipertermofilostos presentas temperaturas optimas superiores a 100C. Termofilos Muchos termofilos tempera optima de 45 80C se presentan en fuentes termales y otros ambientes clidos. En fuentes termales a medida que el agua hirviendo emerge se desborda de las orillas y se aleja de la fuente se enfra gradualmente de temperatura, a lo largo de este gradiente crecen varios microorganismos con diferentes especies que crecen

en los diferentes rangos de temperatura. Estudiando la distribucin de las especies en tales gradientes y examinando las fuentes termales y otros ambientes termales a diferentes temperaturas en distintas partes del mundo es posible determinar los limites superiores de temperatura para cada clase de organismo. A partir de esta informacin se ha llegado a la conclusin de que: 1. en general los organismos procariontes son capaces de crecer a temperaturas mas elevadas que los eucariontes. 2. los mas termofilos de todos los procariontes son algunas especies de Archea. 3. los organismos no fototrpicos son capaces de crecer a temperaturas mas elevadas que las formas fototrpicas. Crecimiento microbiano a pH alto y a pH bajo La acidez o alcalinidad de una solucion se expresa por su pp. en una escala en que la neutralidad es pH. 7. los valores de pH por debajo de 7 son cidos y os mayores de 7 son alcalinos. pH. y crecimiento microbiano Cada organismo tiene un rango de pH dentro del cual es posible el crecimiento y normalmente posee un pH optimo bien definido.. la mayora crece en un margen de pH de 2- 3 unidades. La mayoria de los amientes naturales tien un valor de pH entre 5 y 9 y los microorganismos con pH obtimo de esten orden son los mas comunes. Los organismos que crecen mejor a bajo pH constituyen un tipo de extremofilos llamdos acilofilos. El grupo de los hongos son mas acidofilos que las bacterias, muchos hongos crcen en forma obtima a pH 5 o inferior e incluso algunos crecen bien a pH 2. Algunas bacterias son acidofilas. De hecho algunas bacterias son acidofilas estrictas incapaces de crecer a pH neutro. Entre las bacterias acidofilas estrictas se encuentran varias especies de Thiobacillus algunos generos de Archea como Sulfolobus, Thermoplasma y Ferroplasma. El factor ctrico mas importante para el carcter acidofilo es la estabilidad de la membrana citoplasmtica. Cuando el pH es neutro la membrana citoplasmtica de las bacterias muy acidofilas se disuelve y las celulas se lisan lo que sugiere que para que la membrana citopliasmatica sea estable se requiern altas concentraciones de iones hidrgeno. Unos cuantos extremofilos presentan un pH obtimo de crecimiento muy elevado a veces tan alto como pH 10 se denominan alcalofilos. Los microorganismos

alcalofilos se encuentran por lo general en hbitat muy bsicos como lagos sodicos y suelos muy carbonatados. Algunos microorganismos alcaloficos extremos son tambien halofilos y la mayor parte de estos pertenen al dominio Archea. Algunos alcaloficos tienen aplicacin industrial porque producen enzimas hidroliticas como proteasas y lipasas que funcionan bien a pH alcalino y se usan como aditivos de los detergentes domesticos. pH intracelular El pH intracelular debe permanecer proximo a la neutralidad para evitar la destruccin de las macromoleculas cellulares que son sensibles al acido o al alcali. En los acidofilicos o alcolofilicos extremos el pH intracelular puede variar algunas unidades respecto a la neutralidad, pero en la mayoria de los microorganismos cuyo pH optimo para el crecimiento esta entre 6 y 8 (neutrofilios), el citoplasma o permanece neutro o muy prximo a la neutralidad. En el acidofilo el pH intracelular es 4.6 y en los alcalofilos extremos se ha logrado medir un pH intracelular de hasta 9.5. Tampones Se aaden con frecuencia a los medios de cultivo microbianos sustancias amortiguadoras denominas tampones a fin de mantener el pH relativamente constante, para valores de pH prximos a la neutralidad (pH 6- 7.5). Efectos osmticos sobre el crecimiento microbiano La disponibilidad del agua se expresa en teminos fisicos como la actividad del agua. La actividad del agua abreviadamente aw es el cociente entre la presion del vapor de aire en equilibrio con una sustancia o solucion y la presion de vapor de agua pura a la misma temperatura. Los valores de aw varian entre 0y 1 . la actividad de agua de terrenos agrcolas oscila generalmente entre 0.90 y 1. El agua difunde desde una region con alta concentracin de agua hasta una region con menor concentracin de agua por el proceso denomina osmosis. En la mayoria de los dos casos el citoplasma de una celula tiene euna concentracin de soljutos mayor que el medio por lo que el agua tiende a entrar dentro de la celula dicindose entonces que existe un balence de positivo. Cuando una celula esta en un medio de baja actividad de agua, existe una tendencia de agua a salir de la celula.

En la naturaleza los efectos osmoticos tiene interes principalmente en habitat con altas concentraciones de sales. El agua de mar contiene un 3% de NaCl ademas de pequeas cantidades de otros minerales y elementos. Los microorganismos marinos generalmente tienen una dependencia especifica del ion sodio ademas de tener un crecimiento optimo al valor de actividad de agua propio del agua de mar, tales microorganismos se llaman halofilos. El crecimiento de los halofilos requiere almenos de algo de NaCl, pero el optimo varia con el organismo; asi se usan los terminos halofilos discretos y halofilos moderados para describir a los halofilos con requerimientos bajos (1.6%) y moderados (6- 15%) de NaCl respectivamente. Los organismos halotolerantes pueden soportar alguna reduccin en el valor aw del medio pero generalmente crecen mejor en ausencia de solutos aadidos. Los organismos capaces de crecer en ambientes muy salinos se llaman halofilicos extremos y segn las especies requieren 15 30% de NaCl para su crecimiento optimo. Los organismos capaces de crecer en ambientes con alta concentracin de azucares se denominas osmofilos y aquellos capaces de crecer en ambientes muy secos se llaman xerfilos. Clase de microorganismos en relacin al oxigeno Los microorganismos son muy variados en cuanto a la necesidad y tolerancia del oxigeno, se puede dividir en varios grupos dependiendo del efecto del oxigeno. Los aerobios son especies capaces de crecer a tensiones de oxigeno normales (el 21% del aire es O2) y muchos incluso pueden tolerar concentraciones mas elevadas de oxigeno. Los microaerofilos por el contrario son aerobios que pueden usar el O2 solo cuando esta presente a niveles mas bajos que en el aire, normalmente a causa de su limitada capacidad para respirar o porque contiene alguna molcula sensible al oxigeno. Muchos aerobios son facultativos lo que significa que en condiciones nutritivas y de cultivo aporopiadas pueden crecer tanto en condicines aerbicas como anaerbicas. Algunos microorganismos no pueden respirar O2; tales organismos se llaman anaerobios. Existen dos clases de anaerobios: Las anaerobios aerotolerantes, que toleran el oxigeno y crecen en su presencia aunque no pueden usarlo.

Los anaerobios estrictos; que son inhibidos o incluso mueren en presencia del oxigeno. Puede deberse que son incapaces de eliminar algunos productos txicos que se originan en el metabolismo del oxigeno. La anaerobiosis estricta ocurre en tres clases de microorganismos: una amplia variedad de procariotas, unos cuantos hongos y unos cuantos protozoos. BIBLIOGRAFA Brock, Biologa de los microorganismos, Pearson Prentice Hall, Mxico 2004, 151 165 pp.