La clula bacteriana est rodeada por una envoltura que, observada al microscopio electrnico, se presenta como una capa

gruesa y homognea, denominada pared celular. Luego en seccin (corte) se observa una estructura semejante a dos lneas paralelas separando una capa menos densa; esto corresponde a la membrana plasmtica. Entre la membrana plasmtica y la pared celular se encuentra el periplasma o espacio periplasmtico. En el interior de la membrana plasmtica se encuentra el citoplasma que est constituido por una disolucin acuosa, el citosol, en el cual se encuentran ribosomas y otros agregados de macromolculas, y en el centro se ubica la zona menos densa llamada nucleoide, que contiene una madeja de hebras difcil de resolver (distinguir) y cuyo principal componente es el ADN. La pared externa de la envoltura celular de una bacteria Gram positiva tiene como base qumica fundamental el peptidoglicano, que es un polmero de N-acetil-2-D-glucosamina, unido en orientacin -1,4 con N-acetil murmico, a ste se agregan por el grupo lactilo cuatro o ms aminocidos. Esta molcula se polimeriza gran cantidad de veces, de modo que se forma una malla especial, llamada sculo de murena. Dicho compuesto es de vital importancia para conservar la forma y darle rigidez a la clula bacteriana (si este compuesto no existiese, la clula reventara debido a su gran potencial osmtico).

Las siguientes caractersticas estn presentes generalmente en una bacteria Gram-positiva:5

Membrana citoplasmtica. Capa gruesa de peptidoglicano. cidos teicoicos y lipoteicoicos, que sirven como agentes quelantes y en ciertos tipos de adherencia. Polisacridos de la cpsula. Si algn flagelo est presente, este contiene dos anillos como soporte en oposicin a los cuatro que existen en bacterias Gram-negativas porque las bacterias Gram-positivas tienen solamente una capa membranal.

Tanto las bacterias Gram-positivas como las Gram-negativas pueden presentar una capa superficial cristalina denominada capa S. En las bacterias Gram-negativas, la capa S est unida directamente a la membrana externa. En las bacterias Gram-positivas, la capa S est unida a la capa de pptidoglicano. Es nico a las bacterias Grampositivas la presencia de cidos teicoicos en la pared celular. Algunos cidos teicoicos particulares, los cidos lipoteicoicos, tienen un componente lipdico y pueden asistir en el anclaje del pptidoglicano, en tanto el componente lipdico sea integrado en la membrana. GRAM NEGATIVA La envoltura celular de las bacterias Gram-negativas est compuesta por una membrana citoplasmtica (membrana interna), una pared celular delgada de peptidoglicano, que rodea a la anterior, y una membrana externa que recubre la pared celular de estas bacterias.4 Entre la membrana citoplasmtica interna y la membrana externa se localiza el espacio periplsmico relleno de una sustancia denominada periplasma, la cual contiene enzimas importantes para la nutricin en estas bacterias. La membrana externa contiene diversas protenas, siendo una de ellas las porinas o canales protecos que permiten el paso de ciertas sustancias. Tambin presenta unas estructuras llamadas lipopolisacridos (LPS), formadas por tres regiones: el polisacrido O (antgeno O), una estructura polisacrida central (KDO) y el lpido A (endotoxina). Las bacterias Gram-negativas pueden presentar una capa S que se apoya directamente sobre la membrana externa, en lugar de sobre la pared de peptidoglicano como sucede en las Gram-positivas. Si presentan flagelos, estos tienen cuatro anillos de apoyo en lugar de los dos de las bacterias Gram-positivas porque tienen dos membranas. No presentan cidos teicoicos ni cidos lipoteicoicos, tpicos de las bacterias Gram-positivas. Las lipoprotenas se unen al ncleo de polisacridos, mientras que en las bacterias Gram-positivas estos no presentan lipoprotenas. La mayora no forma endosporas (Coxiella burnetti, que produce estructuras similares a las endosporas, es una notable excepcin).

Hidatidosis De Wikipedia, la enciclopedia libre Saltar a: navegacin, bsqueda

Ciclo de Echinococcus granulosus La hidatidosis o equinococosis es una enfermedad parasitaria grave provocada por vermes de la clase de los cestodos del filo de los platelmintos, un gran grupo de invertebrados con muchas especies parsitas tanto en fase larvaria como adulta. Esta enfermedad est provocada por larvas de Echinococcus granulosus que, a menudo, son ingeridos en alimentos contaminados accidentalmente. Puede afectar a animales, tanto salvajes como domsticos, e incluso al ser humano. Es la enfermedad parasitaria ms importante en los pases de clima templado y en algunos casos el resultado puede ser fatal. Contenido

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1 Desarrollo y sntomas de la enfermedad 2 Profilaxis 3 Referencias 4 Vase tambin 5 Enlaces externos

[editar] Desarrollo y sntomas de la enfermedad Sugerencia: husped o parsito es el que se hospeda; hospedador es el que hospeda. Evitemos las ambigedades, aunque la RAE lo acepte. La hidatidosis, como cualquier infeccin parasitaria, sigue un ciclo relativamente complejo. En primer lugar, necesita de dos huspedes, un husped definitivo, el que posee la tenia en estado adulto, y un intermediario donde se desarrolla la tenia en estado de larva (quiste hidtico). ste es el causante de la enfermedad hidatidosis. Los huspedes definitivos son mamferos carnvoros, mientras que pueden actuar como huspedes intermediarios varias especies de herbvoros y omnvoros, entre ellos el hombre. Las heces de los huspedes definitivos juegan un papel fundamental para la expansin de la enfermedad, constituyendo el enlace entre los afectados por parsitos adultos que ya han puesto sus huevos, y huspedes intermediarios portadores de las larvas. Los huevos eclosionan en el interior del sistema digestivo del hospedador intermediario y liberan las oncoesferas que se difunden a travs de la corriente sangunea hasta que se alojan en los riones, en el hgado, huesos o en los pulmones del animal afectado, formando la forma larvaria o quistes en los que crecen miles de parsitos. El desarrollo de stos no se completa hasta que el animal es comido por su hospedador definitivo, en cuyo organismo completan su desarrollo biolgico.

Quiste de E. granulosus

Esclex de E. granulosus

Larvas de E. granulosus

Una serie de eosinfilos El sntoma ms visible de la hidatidosis es la formacin de quistes, stos pueden llegar a crecer hasta ser localizables sin necesidad de aparato mdico alguno, tambin es comn el cambio del color de la piel (ictericia) e incluso tos y dolor de garganta. Algunos se desarrollan tanto que llegan a abrirse creando abscesos que invaden tanto los rganos del animal como su corriente sangunea. En estos casos es normal que la vctima muera en pocas horas debido a un shock anafilctico; sin embargo, es posible tratarlo por medio de la ciruga. En los primeros estadios de la infestacin los quistes tienen el tamao de un grano de arena y para localizarlos es necesario recurrir a anlisis de laboratorio: muestras analizadas al microscopio si se trata de animales muertos, o ecografas y tomografas axiales computarizadas si se est tratando a pacientes vivos. En un estadio intermedio del desarrollo de la enfermedad, adems de los quistes, se produce una cantidad anmala de eosinfilos en la sangre

(como un mecanismo de defensa del husped frente a microorganismos no fagocitables), siendo localizables a travs de anlisis serolgicos. Profilaxis La prevencin de la hidatidosis es relativamente sencilla para el caso de animales domsticos o seres humanos, para ello basta con tratar al ganado con medicamentos antiparasitarios y, en el caso de mascotas o humanos, controlar el estado de los alimentos y evitar la carne cruda. En cualquier caso, en estados poco avanzados de la enfermedad tambin puede recurrirse a medicamentos especficos para desparasitar al paciente. Cuando la enfermedad est avanzada hay que recurrir a una combinacin de operaciones quirrgicas y tratamiento mdico. Dentro de la profilaxis de la enfermedad, la educacin sanitaria de la poblacin, debe tener un papel destacado y debe constar de las siguientes fases: fase inicial, fase operativa y fase de mantenimiento.1

Fase inicial. En la fase inicial de un programa, el grupo objetivo es la poblacin en general, pero hay que prestar especial atencin a los nios y jvenes en edad escolar. En esta fase deben explicarse los aspectos ms importantes, destacando la descripcin de la enfermedad y los peligros para el hombre, informando de las repercusiones econmicas, de las fuentes de infestacin y haciendo hincapi en la absoluta necesidad de cooperacin para poner en prctica un programa de control. Fase operativa. Incluye los grupos con responsabilidad en la difusin de la enfermedad, como pastores, matarifes, carniceros, amas de casa y propietarios de perros. Para conseguir estos objetivos deben emplearse medios modernos de comunicacin, a la vez que charlas, programas de radio y televisin y publicaciones en la prensa. En cualquier caso, junto con la descripcin del agente etiolgico, el ciclo biolgico, la descripcin de la enfermedad y las formas de contagio humano, hay que informar sobre la necesidad de separar los perros de los mataderos y de los peligros que supone dar vsceras crudas aparentemente sanas a los perros e incidir en algunas normas higinicas elementales: lavar las verduras crudas antes de comerlas; lavarse las manos antes de comer; no jugar con perros desconocidos o perros no tratados, etc.

Fase de mantenimiento. La dos fases anteriores deben completarse con la informacin continuada sobre la hidatidosis en la fase de mantenimiento. Cualquier programa de lucha y control contra la hidatidosis debe tener previsto un sistema de vigilancia que sirva para analizar los resultados, mediante evaluaciones peridicas y para comprobar el cumplimiento de los obejetivos propuestos. Posiblemente, el mejor indicador a largo plazo de una campaa de lucha es el control de la prevalencia de la infestacin en los animales que son hospedadores intermediarios (perros). Paralelamente a los estudios de prevalencia, conviene investigar la viabilidad y capacidad de infestacin de los protoescolex, la fertilidad de los quistes hidatdicos, etc. Como medidas complementarias de control, tienen tambin importancia las tasas de infestacin de los animales silvestres.

Preguntas frecuentes Cul es el ciclo de la Hidatidosis? El ciclo es cerrado:

del perro

Preguntas frecuentes Cul es el ciclo de la Hidatidosis?

El ciclo es cerrado:

del perro a los ovinos, bovinos y suinos; de los ovinos, bovinos y suinos al perro; y del perro al hombre

Todo comienza cuando se le da de comer al perro, achuras o vsceras con quistes hidticos (forma larvaria de la Tenia Echinococcus que contiene embriones de la tenia). -Alrededor de 7 semanas ms tarde, cada embrin contenido en esos quistes se ha transformado en una tenia adulta, madura, que mide aproximadamente de 4 a 7 milmetros de largo. -El perro al defecar expulsa -con sus materias fecales- el ltimo segmento de la tenia, que tiene en su interior aproximadamente 800 huevos microscpicos. -Estos huevos al salir al exterior contaminan el suelo, el pasto, las verduras, al agua, bebederos, as como el hocico y el pelo del perro, etc. -Los huevos no se ven a simple vista Proceso de Contaminacin del perro

La hidatidosis ha sido llamada en el hombre, la enfermedad de las manos sucias. Las personas se infectan al jugar con los perros, al acariciarlos, al beber agua, comer verduras o frutas contaminadas. Contagio Humano

-El ganado se enferma al comer pasturas o beber aguas con huevos embrionados de la tenia. -Las moscas y otros Artrpodos pueden diseminar los huevos que se encuentran adheridos a los pelos de sus patas y en su tubo digestivo. Los huevos pueden pegarse a nuestros zapatos y ropas y el viento los puede trasladar a grandes distancias. -Cada huevo de Echinococcus granulosus ingerido por el hombre o por un animal, lleva en su interior un embrin que atraviesa la pared intestinal, pasa a la circulacin y se aloja en unrgano (hgado, pulmn, rin, etc.), desarrollando all un quiste hidtico cuya membrana germinativa produce millares de embriones, es decir, "cabezas de Echinococcus granulosus". Cuando se faenan los animales y se dan vsceras con quistes hidticos a comer a los perros, stos se parasitan y as cierra el ciclo o "COMIENZA OTRA VEZ EL CICLO"

Que es la Hidatidosis? Es una efermedad parasitara, determinada por el desarrollo de las larvas (hidtides) del Echinococus granulosus en rganos y tejidos de los seres hmanos y del ganado (ovino, bobino y suino).

Cual es el agente etiolgico? El agente causal es el Echinococus granulosus, el cual es un parsito heteroxeno (tiene dos hespedes)_ - El perro, hesped definitivo (donde alcanza la forma adulta) y - El husped intermediario ( donde se desarrolla la fase larvaria) ganado ovino, bovino y suino y tambuin el hombre. Cul es la morfologa del Echinococus garnulosus? Es un helemito, parsito hermafrodita, de la clase platelmitois, y de orden cestode. Se caracteriza por su pe quea talla (de 7 a 14 mmm). Es husped habitual del intestino (duodeno) del perro, que se alimenta con vseras que tienen quistes hidticos. El cuerpo segementado, est formado por trres o cuatro anillos o progltidos. El primero, escolex, posee rganos de fijacin: cuatro ventosas y una doble corona de ganchos. Los anillos siguientes de diferente estructura, forman la cadena o estrbila. El ltimo progltido, contiene un tero lleno de huevos (de 500 a 800) y alcanza un tamao igual a la mitad del largo del Echinococus granulosus, es el anillo ovgero. Cul es la estructura del Echinococus granuulosus? Carece de aparato respitratorio, digestivo y locomotor. Tiene un sistema nervioso muy primitivo. Se alimenta por smosis. Posee un aparato excretor relativamente desarrollado distinto en cada progltico. El esclex da origen, por gmacin a un anillo que forma primero un aparato genital masculino, luego un femenino que despus se desprende lleno de huevos. Pero antes de cumplir toda esa transformacinm el esclex produce otro anillo que ha de realizar la misma evolucin. Es decir que el Echinococus ranulosus est formado por un scolex que genera en el mismo sitio (cuello) un anillo tras otro que se n interponiendo. El proceso, repetido, da lugar a la constancia del nmero de segmentos. El mismo anillo va cambiando de ubicacin y de estructutra en el transcurso de unos 15 das. En ese lapso el anillo madyuro se desprende repleto de huevos embrionados. A qu se llama huevo de Echinococus granulosus? Los huevos salen al exterior con las materias fecales del perro. Son recistentes a los agente atmosfricos y contaminan el suelo, los pastos, verduras y aguadas durante meses (hasta un ao o ms segn condiciones). Est constituido por un embriforo espeso y estirado, de gran resistencia y un embrin. Para proseguir su evolucin tiene que ser ingerido por un husped apropiado y eclosin se realiza al llegar a su intestino. Los jugos digetivos fragmentan la cscara y dejan en libertad al embrin hexacanto que - valiendose de los ganchos (6 en total) atraviesa la pared intestinal y por los vasos sanguneos o linfticos llega al hgado donde puede alojarse. El embrin hexacanto origina al principio una pequesima esfera blanca compacta que despus de cavita y forma una pequea vescula que a los 4 5 meses puede alcanzar el tamao de una avellana. A que se le llama fase larvaria (hidtide o quiste hidtico)? Cuando el hombre u otro husped intermediario ingiere huevos embrionados de Echinococcus granulosus adquiere la enfermedad hidtica o hidatidosis. La hidatidosis se caracteriza por el desarrollo de larvas hidticas (hidtides) en rganos o tejidos.

Caracteres morfolgicos de la larva hidtica La larva hidtica presenta el aspecto de una vescula blanca, opaca, distendida y elstica. Esta formada por la pared y el contenido. La pared est compuesta por dos membranas: - la cutcula en la parte externa y - la germinativa o prolgera en el interior que, como su nombre lo indica, da origen a los elementos

germinativos (vesculas hijas, vesculas prolgeras y esclices). El contenido, es le lquido hidtico que ocupa a presin el interior de la hidtide, es limpio como el agua de roca y contiene en suspensin la arenilla hidtica (esclices, ganchos, etc.) para llamarse Quiste hidtico se debe considerar adems de estos elementos -propios de la hidtide- una pared exterior: La adventicia formada por la reaccin del rgano parasitado que tiende a aislar la larva, como a un cuerpo extrao, enquistndola. Cul es el ciclo biolgico de la enfermedad hidtica? El ciclo es cerrado: del perro a los ovinos, bovinos y suinos; de los ovinos, bovinos y suinos al perro. Del perro al hombre. - Todo comienza cuando se le da de comer al perro, achuras o vsceras con quistes hidticos. - Alrededor de siete semanas ms tarde, cada esclice contenido en esos quistes se ha transformado en un Echinococcus granulosus adulto maduro (que mide aproximadamente de 4 a 7 milmetros de largo). - El perro al defecar expulsa -con sus materias fecales- el ltimo progltido de la estrbila (anillo ovgero) con su carga de aproximadamente 800 huevos microscpicos. Esos huevos al salir al exterior contaminan el suelo, el pasto, las verduras, el agua, bebederos, as como el hocico y el pelo del perro, etc. - Los huevos no se ven a simple vista - El hombre se enferma en contacto con el perro, al ingerir hortalizas crudas y agua contaminada. - El ganado (ovino, bovino y suino) se enferma al comer pasturas o aguas con huevos embrionados de Echinococcus granulosus adheridos a los vellos de sus patas y en su tubo digestivo. - El viento tambin puede trasladar los huevos a grandes distancias. - Cada huevo de Echinococcus granulosus ingerido por el hombre o por un animal, lleva en su interior un embrin que atraviesa la pared intestinal, pasa a la circulacin y se aloja en un rgano (hgado, pulmn, rin, etc.) desarrollando all una hidtide cuya membrana germinativa produce millares de esclices, es decir, . - Cuando se faenan los animales y se dan las vsceras con quistes hidticos a comer a los perros, se parasita, y as se cierra el ciclo o "comienza otra vez el ciclo". Las vsceras del hombre con quiste hidtico no son alimento para el perro. Si lo fueran tambin seran infectados por ese mecanismo. La hidatidosis ha sido llamada en el hombre, la enfermedad de las manos sucias. Las personas se infectan al jugar con los perros, al acariciarlos, al beber agua, comer verduras o frutas contaminadas. Cul es la situacin de la Hidatidosis en el Uruguay? Existen varios pases en el mundo con hidatidosis: Argentina, Argelia, Chile, Chipre, Grecia, Yugoslavia, en el Uruguay la infeccin ha alcanzado los ndices elevados debido:

A que somos un pas ganadero con una alta densidad de ganado ovino. Al gran nmero de perros. A la falta de educacin para conservar la salud de la poblacin, en especial la del medio rural, y Al no cumplimiento de las normas legales.

Existen en el Uruguay aproximadamente 450.000 perros, lo que crea un grave problema mdicosanitario, por ser husped definitivo de importantes enfermedades, entre ellas la Hidatidosis. De acuerdo a datos estadsticos proporcionados por el Ministerio de Agricultura y Pesca entre el 4045% de los ovinos y entre el 50-55% bovinos que se faenan tienen quistes hidticos. Alrededor del 18% de los perros del rea rural son comederos de vsceras. La Hidatidosis incide en nuestra economa provocando la disminucin de la produccin de la carne, lana, leche y procreos. En relacin a la salud humana, alrededor de 360 personas se operan anualmente de quiste hidtico y de ellas muere promedialmente el 1,1%. La grave situacin de la infeccin hidtica en nuestro pas determin la aprobacin de la ley 13.459 de

ao 1965 por la que se declara "plaga nacional la hidatidosis humana y animal, y obligatoria la lucha para erradicarla en todo el territorio de la Repblica". Esa misma Ley crea el organismo responsable de la lucha: la Comisin Honoraria de Lucha contra la Hidatidosis y establece sus funciones y cometidos. Como todo proceso, el dinamismo y el cambio son importantes para actualizar no slo cocimiento sino tambin al aspecto legal, por lo cual mediante la nueva Ley 16.106 de 1990, se materializa la accin que debe desarrollar la Comisin Nacional. Se implementa el Programa Nacional de Lucha contra la Hidatidosis. Cules son las medidas preventivas que debemos tener en cuenta para controlar la Hidatidosis? - No alimentar a los perros con vsceras. Cuando se hace referencia a <vseras> se entiende: pulmones (bofes), hgados, bazo (pajarilla), corazn, cerebro (sesos)y riones. Los encargados de establecimientos o lugares de faena, pblicas o privadas, no pueden entregar a terceros vsceras, sin el debido contralor oficial. Los perros mayores de 3 meses de edad deben ser dosificados contra el Echinococcus granulosus bajo supervisin tcnica, con la periodicidad y segn los procedimientos que indique esta Comisin Nacional. Todo dueo o encargado de perros est obligado a proporcionar los datos que se le soliciten por la autoridad competente, en lo que tiene que ver con la tenencia de perros, su cuidado, su alimentacin, facilitar los contralores y dosificaciones correspondientes. Tambin estarn obligados a concurrir a las concentraciones vecinales de dosificacin convocadas por la Comisin Nacional, en funcin de las actividades del Programa Nacional y, en caso de que lo determine, a reducir el nmero de perros que puede poseer. En los establecimientos rurales, los propietarios o encargados estn obligados a prestar la colaboracin que se les solicite por parte de los funcionarios actuantes, facilitndoles personal para reunir y sujetar los perros, para efectuar las dosificaciones, la recoleccin de materiales, la higiene, etc. Todos los perros que se encuentren en un establecimiento, se presume que pertenecen al mismo y por lo tanto los dueos o encargados de dicho establecimiento son pasibles de las medidas sanitarias y sanciones que correspondan a cada caso. En la lucha contra la hidatidosis, la medida ms importante es: Impedir que los perros coman vsceras. A estas medidas se deben agregar otras prcticas destinadas a preservar la salud humana:

lavarse las manos despus de tocar un perro y siempre antes de comer; mantener los perros lejos de la habitacin humana, de las huertas y de las fuentes de agua; lavar con agua de OSE o hervida las ensaladas (de berros, lechugas, etc.) a chorro fuerte para provocar arrastre mecnico de los huevos de Echinococcus granulosus. Ningn producto desinfectante tiene accin sobre ellos; beber slo agua potable (OSE o hervida); no realizar matanza clandestina; permanente inspeccin veterinaria en los mataderos; y que no existan perros vagabundos.

Qu defensa tiene la poblacin? Tener informacin y estar educada para prevenir la enfermedad y preservar la salud comunitaria. No se cuenta con ningn producto capaz de matar la larva del parsito (Hidtide). Hasta el momento no se posee una vacuna contra esta parasitosis. Se han encontrado distintas drogas con variado poder equinocoquicida (accin letal sobre el Echinococcus granulosus) tales como: la Bunamidina, Mebendazole y Praziquantel, siendo esta ltima la nica eficaz para eliminar el parsito. La Comisin Nacional evalu el poder Equinocoquicida del Praziquantel, cuya efectividad sobre el Echinococcus granulosus es del 100%. Desde entonces se hizo obligatoria la administracin de este medicamento a todos lo perros, en riesgo de infeccin, en perodos regulares de tiempo. El medicamento mata todos los Echinococcus granulosus existentes en el momento de ser administrado pero no tiene accin residual ni inmuniza ni mata a los huevos del parsito.

Si el perro vuelve a comer vsceras con quistes hidticos, despus de haber sido medicamentado, vuelve a infectarse. La dosificacin se realiza por va oral o inyectable con una dosis nica de 5mg. por kilo de peso del perro. Glosario de trminos Accin patgena: capacidad de un agente infeccioso de producir enfermedad. Cestodes: platelmintos endoparsitos, con rganos de fijacin limitados al extremo anterior. Cuerpo acintado generalmente dividido en segmentos. Cumplen su ciclo evolutivo en dos huspedes como mnimo. Esclex: prominencia que, provista de rganos adherentes presentan los cestodos en uno de sus extremos. Vulgarmente recibe el nombre de cabeza. Etiologa: causa de las enfermedades. Helminto: gusano. Nombre de parsitos intestinales. Hermafrodita: que posee los dos sexos: masculino y femenino. Larva: fase del desarrollo de varios animales, que se diferencia del estado adulto por la forma y el estado de vida. Morfolgico: referente a la forma y a sus transformaciones. Osmosis: fenmeno fsico consistente en el paso recproco de lquidos de diferente densidad a travs de una membrana porosa que los separa. Platelmintos: animales invertebrados de cuerpo aplanado, ms largos que anchos. Profilaxis: conjunto de medidas preventivas destinadas a evitar las enfermedades. Progltido: cada uno de los segmentos de una tenia, e excepcin del esclex. Transmisin directa: es la transferencia directa e inmediata del agente infeccioso a una puerta de entrad receptiva para que se pueda llevar a cabo la infeccin en el hombre (tocar, besar, por rociado directo de gotitas en conjuntivas y mucosas de nariz y boca al estornudar, toser, salivar, hablar etc.) Vector: dcese del organismo o cuerpo inanimado que transporta y transmite el germen de una enfermedad. Vscera: cada uno de los rganos contenido en las principales cavidades del cuerpo (pulmones, hgado, corazn, bazo, rin, etc.).

TINCION GRAM La tincin de Gram o coloracin de Gram es un tipo de tincin diferencial empleado en microbiologa para la visualizacin de bacterias, sobre todo en muestras clnicas. Debe su nombre al bacterilogo dans Christian Gram, que desarroll la tcnica en 1884. Se utiliza tanto para poder referirse a la morfologa celular bacteriana como para poder realizar una primera aproximacin a la diferenciacin bacteriana, considerndose Bacteria Gram positiva a las bacterias que se visualizan de color moradas y Bacteria Gram negativa a las que se visualizan de color rosa o rojo.

Recoger muestras. Hacer el extendido en espiral. Dejar secar a temperatura ambiente. Fijar la muestra con metanol durante un minuto o al calor (flameado 3 veces aprox.) Agregar azul violeta (cristal violeta o violeta de genciana) y esperar 1 min. Todas las clulas gram positivas y gram negativas se tien de color azul-purpura. Enjuagar con agua. Agregar lugol y esperar entre 1 minuto. Enjuagar con agua. Agregar acetona y/o alcohol y esperar 4 segundos (parte critica de la coloracion) Enjuagar con agua. Tincin de contraste agregando safranina o fucsina bsica y esperar 1-2 min Este tinte dejar de color rosado-rojizo las bacterias Gram negativas. Enjuagar con agua.

Para observar al microscopio ptico es conveniente hacerlo a 100x con aceite de inmersin

Explicacin El cristal violeta(colorante catinico) penetra en todas las clulas bacterianas (tanto Gram positivas como Gram negativas) a travs de la pared bacteriana. El lugol es un compuesto formado por I2 (yodo) en equilibrio con KI (yoduro de potasio), el cual est presente para solubilizar el yodo, y acta de mordiente, haciendo que el cristal violeta se fije con mayor intensidad a la pared de la clula bacteriana. El I2 entra en las clulas y forma un complejo insoluble en solucin acuosa con el cristal violeta. La mezcla de alcohol-acetona que se agrega, sirve para realizar la decoloracin, ya que en la misma es soluble el complejo I2/cristal violeta. Los organismos Gram positivos no se decoloran, mientras que los Gram negativos s lo hacen. Para poner de manifiesto las clulas Gram negativas se utiliza una coloracin de contraste. Habitualmente es un colorante de color rojo, como la safranina o la fucsina. Despus de la coloracin de contraste las clulas Gram negativas son rojas, mientras que las Gram positivas permanecen azules. La safranina puede o no utilizarse, no es crucial para la tcnica. Sirve para hacer una tincin de contraste que pone de manifiesto las bacterias Gram negativas. Al trmino del protocolo, las Gram positivas se vern azul-violceas y las Gram negativas, se vern rosas (si no se hizo la tincin de contraste) o rojas (si se us, por ejemplo, safranina). Esta importante coloracin diferencial fue descubierta por Hans Christian Gram en 1884. En este mtodo de tincin, la extensin bacteriana se cubre con solucin de uno de los colorantes de violeta de metilo, que se deja actuar durante un lapso determinado. Se escurre luego el exceso de violeta de metilo y se aade luego una solucin de yodo, que se deja durante el mismo tiempo que la anterior; despus se lava el portaobjetos con alcohol hasta que ste no arrastre ms colorante. Sigue a tal tratamiento una coloracin de contraste, como safranina, fucsina fenicada diluida, pardo Bismarck, pironin B o hasta inclusive verde de malaquita. Algunos microorganismos retienen el colorante violeta, an despus de tratarlos con un decolorante, y el color no se modifica al aadir ste; otros pierden con facilidad el primer tinte, y toman el segundo. Los que fijan el violeta, se califican de grampositivos, y los que pierden la primera coloracin y retienen la segunda, de gramnegativos. Basndonos pues, en la reaccin Gram, podemos clasificar a los microorganismos en uno de los dos grupos. Los colorantes de p-rosanilina son los que mejores resultados dan en la coloracin Gram. Los representantes ms usados de este grupo son violeta de metilo y violeta cristal o de genciana. En realidad, violeta de metilo es el nombre atribuido al compuesto tetrametil-p-rosanilina. El matiz de color de la p-rosanilina se intensifica al aumentar el nmero de grupos metilo en la molcula; por consiguiente, de los tres grupos, el tono ms oscuro es la hexametil-p-rosanilina (violeta cristal), y el tinte ms ligero, la tetrametil-p-rosanilina (violeta de metilo). Los nombres violeta de metilo 3R, 2R, R, B, 2B, 3B, etc., se refieren al nmero de grupos metilo contenidos. La letra R indica matices rojos, y la letra B, tonos azules. El violeta de cristal contiene seis grupos metilo, y se considera como el mejor colorante primario para teir por el mtodo de Gram. La facultad de las clulas para tomar la coloracin Gram no es propia de toda sustancia viviente, sino que se limita casi en absoluto a hongos y bacterias. As vemos que las clulas de plantas y animales superiores no conservan la primera coloracin; los mohos se tien con cierta irregularidad; los grnulos de micelios propenden retener el colorante. La reaccin de Gram no es infalible ni constante; puede variar con el tiempo del cultivo y el pH del medio, y quiz por otras causas Tcnica de la coloracin gram [editar] Fijar un frotis

Con la ayuda de un mechero, flamear un asa bacteriolgica y esperar que enfre un poco. Tomar el asa (previamente flameada) y con sta tomar un poco de muestra.

Una vez obtenida una pequea cantidad de la muestra (con el asa), hacer que sta tenga contacto con una lmina portaobjetos, la cual servir para depositar la muestra contenida en el asa. Con el asa (conteniendo la muestra) sobre la lmina portaobjetos, proceder a realizar la extensin de la muestra en el portaobjetos mediante movimientos giratorios (dar vueltas con el asa) sobre la lmina, de tal forma que al terminar la extensin, tengamos como producto una espiral en la parte media de la lmina. Esperar que seque al aire libre o ayudarse con la llama de un mechero para fijar la muestra, teniendo en cuenta que el calor no debe ser directo (slo se pasa por la llama), puesto que el calor excesivo puede cambiar la morfologa celular de las bacterias a observar. El calor deseable es aqul en el que el portaobjetos sea apenas demasiado caliente para ser colocado sobre el dorso de la mano.

[editar] Tincin Con violeta cristal, violeta de genciana, azul de metileno o en todo caso tinta china utilizando una cantidad suficiente de dicho colorante sobre la muestra, como para lograr cubrirla por completo. Se deja actuar al colorante por 1 minuto. Esta tincin de 1 minuto est dada para trabajar a una temperatura ambiente de 25 C. [editar] Enjuague Al transcurrir el minuto, se debe enjuagar la lmina conteniendo la muestra con agua corriente. Para realizar el lavado, se debe tener en cuenta que el chorro de agua NO debe caer directamente sobre la muestra, sta debe caer sobre la parte superior de la lmina que no contiene muestra. El chorro debe ser un chorro delgado, aproximadamente de medio a un milmetro de espesor. Tambin el enjuague se debe realizar poniendo la lmina portaobjetos en posicin inclinada hacia abajo... La solucin de cristal violeta, se recomienda sea al 1% [editar] Mordiente Una vez enjuagado el portaobjetos, se aplica como mordiente yodo o lugol durante 3 minuto ms. El mordiente es cualquier sustancia que forme compuestos insolubles con colorantes y determine su fijacin a las bacterias. [editar] Decoloracin Pasado el minuto de haber actuado el mordiente, el frotis se decolora con etanol al 75 %, etanol al 95 %, acetona o alcohol-acetona, hasta que ya no escurra ms lquido azul. Para esto se utiliza el gotero del frasco del decolorante. Se van aadiendo cantidades suficientes del decolorante, hasta lograr que ste salga totalmente transparente, es decir, hasta que ya no escurra ms lquido azul. [editar] Lavado y secado Lavar con agua para quitar los residuos de decolorante y esperar que seque la lmina al aire libre o con la ayuda de la llama de un mechero de la forma anteriormente descrita. [editar] Tincin de contraste Una vez que la lmina ya sec, procedemos a teir nuevamente, pero esta vez se va a utilizar un colorante de contraste como por ejemplo la safranina, dejar actuar durante 1 minuto. [editar] Nuevo enjuague Pasado el minuto correspondiente, se procede a enjuagar la lmina con agua, se escurre el agua sobrante y se seca en la forma anteriormente descrita. De esta manera, ya tendremos listo el frotis para su respectiva observacin microscpica.

[editar] Bacterias resistentes a la tincin Gram La siguientes bacterias de naturaleza grampositiva, tien como gramnegativas:

Mycobacterias (estn encapsuladas). Mycoplasmas (no tienen pared). Formas L (prdida ocasional de la pared). Protoplastos y esferoplastos (eliminacin total y parcial de la pared, respectivamente).

[editar] Utilidades En el anlisis de muestras clnicas suele ser un estudio fundamental por cumplir varias funciones:

Identificacin preliminar de la bacteria causal de la infeccin. Utilidad como control calidad del aislamiento bacteriano. Los morfotipos bacterianos identificados en la tincin de Gram se deben de corresponder con aislamientos bacterianos realizados en los cultivos. Si se observan mayor nmero de formas bacterianas que las aisladas hay que reconsiderar los medios de cultivos empleados as como la atmsfera de incubacin.

A partir de la tincin de Gram pueden distinguirse varios morfotipos distintos: Los cocos son de forma esfrica. Pueden aparecer aislados despus de la divisin celular (Micrococos), aparecer por pares (Diplococos), formar cadenas (Estreptococos), o agruparse de manera irregular (Estafilococos). Los bacilos poseen forma alargada. En general suelen agruparse en forma de cadena (Estreptobacilos) o en empalizada. Tambin pueden distinguirse los espirales, que se clasifican en espirilos si son de forma rgida o espiroquetas si son blandas y onduladas. Si por el contrario, poseen forma de "coma", o curvados, entonces se los designa vibrios. [editar] Fundamentos de diferenciacin de Gram positivo y Gram negativo Los fundamentos de la tcnica se basan en las diferencias entre las paredes celulares de las bacterias Gram positivas y Gram negativas La pared celular de las bacterias Gram positivas posee una gruesa capa de peptidoglucano, adems de dos clases de cidos teicoicos: Anclado en la cara interna de la pared celular y unido a la membrana plasmtica, se encuentra el cido lipoteicoico, y ms en la superficie, el cido teicoico que est anclado solamente en el peptidoglucano (tambin conocido como murena) Por el contrario, la capa de peptidoglucano de las Gram negativas es delgada, y se encuentra unida a una segunda membrana plasmtica exterior (de composicin distinta a la interna) por medio de lipoprotenas. Tiene una capa delgada de peptidoglicano unida a una membrana exterior por lipoprotenas. La membrana exterior est hecha de protena, fosfolpido y lipopolisacrido. Por lo tanto, ambos tipos de bacterias se tien diferencialmente debido a estas direrencias constitutivas de su pared. La clave es el peptidoglicano, ya que es el material que confiere su rigidez a la pared celular bacteriana, y las Gram positivas lo poseen en mucha mayor proporcin que las Gram negativas. La diferencia que se observa en la resistencia a la decoloracin, se debe a que la membrana externa de las Gram negativas es soluble en solventes orgnicos, como por ejemplo la mezcla de alcohol/acetona. La capa de peptidoglucano que posee es demasiado delgada como para poder retener el complejo de cristal violeta/yodo que se form previamente, y por lo tanto este complejo se escapa, perdindose la coloracin azul-violcea. Pero por el contrario, las Gram positivas, al poseer una pared celular ms resistente y con mayor proporcin de peptidoglicanos, no son susceptibles a la accin del solvente orgnico, sino que este acta deshidratando los poros

cerrndolos, lo que impide que pueda escaparse el complejo cristal violeta/yodo, y manteniendo la coloracin azulviolcea. [editar] Causas que alteran la tincin de Gram

I: Edad de la bacteria. II: Errores del operador. III: Uso de antibiticos

A pesar de la gran utilidad del la tincin de Gram, este mtodo debe ser valorado con precaucin, ya que la reaccin puede variar segn la edad de las clulas y la tcnica empleada, por ella junto a la muestra deben teirse controles con grampositivas y gramnegativas.

MORDIENTE La mayora de los colorantes son compuestos orgnicos que tienen alguna afinidad especfica por los materiales celulares. Muchos colorantes utilizados con frecuencia son molculas cargadas positivamente (cationes) y se combinan con intensidad con los constituyentes celulares cargados negativamente, tales como los cidos nucleicos y los polisacridos cidos. Ejemplos de colorantes catinicos son el azul de metileno, el cristal violeta y la safranina. Otros colorantes son molculas cargadas negativameute (aniones) y se combinan con los constituyentes celulares cargados positivamente, tales como muchas protenas. Esos colorantes incluyen la eosina, la fucsina cida y el rojo Congo. Otro grupo de colorantes son sustancias liposolubles; los colorantes de este grupo se combinan con los materiales lipdicos de la clula, usndose a menudo para revelar la localizacin de las gotculas o depstos de grasa. Un ejemplo de colorante liposoluble es el negro Sudn. Algunos colorantes teirn mejor slo despus de que la clula haya sido tratada con otra sustancia qumica, que no es un colorante por s mismo. Esta sustancia se denomina mordiente; un mordiente habitual es el cido tnco. El mordiente se combina con un constituyente celular y lo altera de tal modo que ahora s podr atacar el colorante.

cocos Gram negativos (Neisseria gonorreae)

BACILOS GRAM POSITIVOS

Aerobios o Formador de esporas: Bacillus: B. anthracis. B. cereus. o No formadores de esporas: Corynebacterium (catalasa positivo). C. diphtheriae. C. ulcerans. C. pseudotuberculosis. C. jeikeium. C. ureolyticum. C. striatum: flora habital de la piel, rara vez patogeno. C. amycolatum: idem al anterior. Arcanobacterium (catalasa negativo). A. haemolyticum. A. pyogenes. A. bernardiae. Nocardia: N. del complejo asteroides. N. brasiliensis. N. otitidis caviarum. Rhodococcus. R. equi. Gordona. Tsukamurella. Actinomadura. Streptomyces somaliensis. Tropheryma whippelii. Listeria monocytogenes. Lactobacillus. Erysipelothrix rhusiopathiae. Anaerobios o Clostridium. o Actinomyces (ramificados). COCOS GRAM NEGATIVOS

En pareja (diplococos) y oxidasa positiva: o Neisseria. N. gonorrhoeae. N. meningitidis. o Moraxella. M. catarrhalis. BACILOS GRAM NEGATIVOS

Fermentadores (en TSI): o Oxidasa Negativos: Escherichia coli.

Klebsiella. Salmonella: S. typhi. S. paratyphi A y B. S. choleraesuis. S. typhimurium. S. enteritidis. Shigella. Proteus mirabilis. Serratia marcescens. Citrobacter. Enterobacter. Providencia. Morganella. Yersinia. Edwarsella. Oxidasa Positivos: Vibrio: V. cholerae. V. mimicus. V. damsela. Otros. Plesiomonas shigelloides. Aeromonas.

Segun diferentes pruebas bioquimicas los dividimos en: COCOS +

Catalasa positivos: o Bacitracina Resistente: Staphilococcus: Coagulasa positivo: Staphilococcus aureus Coagulasa negativos: Novobiovina sensible: Staphilococcus epidermidis. Staphilococcus hominis. Staphilococcus haemoliticum. Staphilococcus lugdunensis. Novobiovina resistente: Staphilococcus saprophyticus. o Bacitracina Sensibles: Cloruro de Na+ 6,5 % positivo: Micrococcus. Cloruro de Na+ 6.5 % negativo: Stomatococcus.

COLORACION ZIEHL La tincin de Ziehl-Neelsen (BAAR) es una tcnica de tincin diferencial rpida y econmica, para la identificacin de microorganismos patgenos, por ejemplo M. tuberculosis.

Fue descrita por primera vez por dos mdicos alemanes, Franz Ziehl, un bacterilogo y Friedrich Neelsen, un patlogo Fundamento Las paredes celulares de ciertos parsitos y bacterias contienen cidos grasos (cidos miclicos) de cadena larga (50 a 90 tomos de carbono) que les confieren la propiedad de resistir la decoloracn con alcohol-cido, despus de la tincin con colorantes bsicos. Por esto se denominan cido-alcohol resistentes. Las micobacterias como M. tuberculosis y M. marinum y los parsitos coccdeos como Cryptosporidium se caracterizan por sus propiedades de cido-alcohol resistencia. La coloracin clsica de Ziehl-Neelsen requiere calentamiento para que el colorante atraviese la pared bacteriana que contiene ceras. Al suspender el calentamiento y enfriar con agua, provoca una nueva solidificacin de lo cidos grasos de modo que el colorante ya no puede salir de las bacterias. Por otro lado, el calentamiento aumenta la energa cintica de las molculas del colorante lo cual tambin facilita su entrada a las bacterias. Las bacterias que resisten la decoloracin son de color rojo y la que no se ven de color azul, ya que se utiliza azul de metileno como tincin de contraste. [editar] Tcnica Esta tcnica puede realizarse tanto en muestras histolgicas como citolgicas. [editar] Variante histolgica Para demostrar la presencia de BAAR en cortes de tejido en parafina.Los reactivos necesarios para su realizacin son los siguientes: 1. cido peridico 58% 1. carbol fucsina de Ziehl (fucsina fenicada). Preparar mezclando en el orden dado: 1. 0,5 g fucsina bsica 2. 50 cc agua destilada 3. 5 cc etanol absoluto 1. 1. 28,5 g cristales de fenol derretidos 2. hematoxilina 3. alcohol cido 1%: 1. alcohol de 35 2. cido clorhdrico El procedimiento es el siguiente: 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. desparafinar e hidratar los cortes cido peridico 5%, 10 min lavar con agua destilada fucsina fenicada, 15 min decolorar en alcohol cido al 50% lavar con agua destilada hematoxilina, 10 min azulidificar con, por ejemplo, carbonato de litio deshidratar, aclarar y montar preparaciones

[editar] Resultados BAAR: rojo.

Ncleos: azul semiamarillo. [editar] Variante clsica o "en caliente" sta y la siguiente variantes son para preparaciones citolgicas. 1. Hacer un frotis de la muestra. 1. La fijacin al calor asegurar de que el frotis quede adherido al portaobjetos. Un frotis muy delgado puede darle resultados falsamente negativos y un frotis muy grueso puede desprenderse del portaobjetos durante la tincin. 2. Utilizando pinzas, coloque los portaobjetos en una gradilla de tincin con los extendidos hacia arriba. Nunca tia ms de 12 portaobjetos a la vez. 2. Dejar el frotis sobre el puente de tincin. 3. Aplicar fucsina-fenicada. 1. Deje que el colorante permanezca sobre los portaobjetos durante 5 minutos. Mantenga el calor durante este perodo. 4. Calentar con un mechero hasta la emisin de vapores (3-5 minutos). 1. Se requiere el tiempo adecuado para que la fucsina fenicada penetre y tia la pared celular de la bacteria. No deje que hierva o se seque el colorante. 2. Lave suavemente el colorante de cada portaobjetos con agua corriente fra hasta que toda la tincin libre quede lavada. Lave suavemente de manera que el extendido no se barra del portaobjetos. Retire el exceso de agua. 5. Decolorar con alcohol-cido. 1. Cubra cada portaobjetos con la solucin decolorante, tal como alcohol cido y mantngalo sobre el portaobjetos durante 7 minutos. Si no se decolora suficientemente, el contenido del esputo que no son bacilos TBC puede permanecer teido. Enjuague con agua una vez ms los portaobjetos y quite el exceso de agua. Si los portaobjetos an estn rosa, aplique una cantidad adicional de la solucin decolorante de 1 a 3 minutos. 6. Aplicar azul de metileno (1 minuto). 1. Aplique la solucin de contraste, azul de metileno, durante 1 minuto. 7. Enjuagar con agua 1. Vuelva a enjuagar con un leve chorro de agua e incline cada portaobjetos hasta drenar el exceso de agua. Finalmente, coloque cada portaobjetos en una gradilla a que sequen al aire. 8. Ahora coloquele una pequeita gota de aceite de inmersin y haga la observacin al microscopio con 100 x 100 [editar] o en "fro" 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. Hacer un frotis. Dejarlo en el puente de tincin. Aplicar fucsina-fenicada (solucin con fenol y mayor concentracin de fucsina). Dejar en vasos coplin durante 20 minutos. Decolorar con alcohol acido. Lavar con agua del grifo. Contrastar con azul de metileno

[editar] Algunos microorganismos cido-alcohol resistentes

Mycobacterium: fuertemente cido-alcohol resistentes.1 Nocardia y Actinomices: dbilmente cido-alcohol resistentes.2 Parsitos coccdeos (Cryptosporidium) de muestras [fecales].3

CARMAN 3-F 25-11-09