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BIOLOGIA CELULAR
ORGANIZACIÓN SUBCELULAR
INTRODUCCION
Las células aparecieron sobre la tierra hace 3,5 billones de años, probablemente
debido a la agregación espontánea de moléculas. Las primeras células eran
relativamente simples y pequeñas, similares a los organismos que actualmente
conocemos como procariontes. Luego aparecieron las células eucariontes, más
grandes y de organización más compleja, que hoy forman parte de animales y
plantas.
Las Mitocondrias son muy similares a las bacterias tanto en tamaño como en
forma. Contienen su propio DNA, sintetizan proteínas y pueden reproducirse al
dividirse en dos, por lo que se cree que provienen de la simbiosis de una célula
eucarionte primitiva con un organismo procarionte, que correspondería a una
mitocondria primitiva. Estos organelos son responsables de los procesos de
respiración celular y producción de energía.
Los Cloroplastos, al igual que las mitocondrias, también tendrían un origen
simbiótico. Se encuentran sólo en los organismos capaces de realizar la
fotosíntesis, como las algas verde-azules y las plantas. Los cloroplastos
corresponden a plastidios que contienen clorofila, y están rodeados de una
membrana doble. Además, contienen un elaborado sistema de membranas en su
interior en el cual se encuentra el aparato fotosintético propiamente tal.
Así como un tejido puede ser separado en las células que lo constituyen, con las
técnicas adecuadas la célula puede separarse en los diferentes organelos y
macromoléculas que la componen. Una de las técnicas más utilizadas para tal
propósito es el Fraccionamiento Subcelular, que permite obtener componentes
celulares aislados, en grandes cantidades y con alto grado de pureza. Esta
técnica fue desarrollada entre otros por Alberte Claude y Christian Duve entre
1940 y 1950, y consiste en la separación de los componentes de la célula en base
a su tamaño y densidad.
ACTIVIDA PRACTICA
OBJETIVOS
Las pellas obtenidas corresponden a los organelos que han sedimentado, éstos se
resuspenden y se guardan para el resto de los análisis bioquímicos, mientras que
los sobrenadantes se vuelven a centrifugar.
EXPERIMENTO Nº 1:
Usted recibirá un trozo de hígado que ha sido previamente perfundido (lavado) con
suero fisiológico (NaCl 0,15 M) para eliminar los restos de sangre ya que los
glóbulos rojos interfieren en la observación de organelos. Con él siga atentamente
las siguientes instrucciones:
Succinato Succinato DH
Fumarato + 2 H+ + 2 e-
EXPERIMENTO Nº 3
1 Blanco 1 mL 1 mL 1 mL - - -
2 Fracción 1mL 1 mL 1 mL 1 mL - -
nuclear
3 Fracción 1mL 1 mL 1 mL - 1 mL -
mitocondrial
4 Fracción 1 mL 1 mL 1 mL - - 1 mL
microsomal
OBJETIVO
Enfoque la zona que desea observar con el objetivo seco de aumento mayor (40
X). Sin bajar la platina ni cambiar la preparación de posición, gire el revólver
portaobjetivos de modo que quede en una posición intermedia entre el objetivo
mayor seco y el de inmersión. El objetivo de inmersión corresponde al aumento
de 100X, y tiene una inscripción que dice “oil”.
BIBLIOGRAFIA
• Molecular Biology of de Cell. Alberts, Bray, Lewis, Raff Roberts & Watson.
3ra ed., 1994, Garland Publishing Inc. , New York & London.