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PRÁCTICA Nº 07
Detección del Salmonella
ASIGNATURA :
DOCENTE :
ALUMNO :
CICLO :
2007 - II
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PRÁCTICA Nº 07
DETECCIÓN DE SALMONELLA
I. Introducción:
II. Objetivos:
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III. Materiales:
IV. Procedimiento:
- Como en este caso la muestra a estudiar han sido huevos crudos de gallina se
toman diez de estos y se los reparte equitativamente en dos frascos grandes
estériles (al introducirlos se los rompe).
- Luego se le agrega 225 mL de caldo lactosado (enriquecimiento no selectivo).
- Los frascos se los envía a estufa a 30 ºC por 24 h.
- Pasado el tiempo, se preparan los tubos conteniendo 10 mL de los medios de
enriquecimiento selectivo (dos con caldo selenito y dos con caldo tetrationato).
- Se inocula 1 mL de la muestra anterior a cada uno de los tubos y luego se los
separa, un par de tubos (C. selenito y C. tetrationato) van a incubación a 37 ºC y
el otro par de tubos van a 42 ºC y ambos por 24 h.
- Pasado el tiempo de incubación, se siembran de cada uno de los tubos en placas
con agar S-S. Éstas se incubarán a 37 ºC por 24 h.
- Luego, se realizarán a las colonias características, las pruebas bioquímicas
necesarias para su identificación.
Muestra: Huevos
30 ºC x 24 h.
1 mL Enriquecimiento
1 mL selectivo
Incubar por 24 h.
37 ºC 42 ºC
Luego se
siembran en agar
SS
Se incuba a 37 ºC
por 24 h
Pruebas bioquímicas
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V. Resultados:
- De los tubos con caldo selenito y caldo tetrationato sembrados se los envió a
incubación, cada uno a sus temperaturas respectivas por 24 h. Pasado ese
tiempo, se vio resultados:
- De los tubos obtenidos se sembró por agotamiento y estría en placas con agar S-
S. Se las incubó a 37 ºC por 24 h, pasado el tiempo se observó los resultados.
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- Como se puede observar, se obtuvieron colonias negras, características de
Salmonella productora de H2S. Se escogió una de estas colonias y se le realizó
las pruebas bioquímicas respectivas.
PRUEBA RESULTADO
Indol Negativo
Rojo de metilo Positivo
Voges Proskawer Negativo
Citrato Positivo
LIA Positivo, ++
VI. Preguntas:
- ¿Con qué finalidad se siembra en agar tetrationato y selenito y por qué se incuba
a 37 y 42 ºC?
- Las bacterias del género Salmonella tienen una Tº óptima de 35 a 37 ºC, por
su característica como patógeno humana, pero tiene un rango de crecimiento
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de 7º a 54 º C, por lo cual se la incuba tanto a 37º como a 42 ºC para eliminar
del medio a bacterias competidoras como por ejemplo E. coli que tiene una
Tº de crecimiento máximo de 45 ºC. Entonces, usamos la Tº como una forma
de seleccionar y diferenciar a la bacteria.
Agar Salmonella-Shigella
Citrato de fierro
Extracto de carne 5g 8.5 g
amoniacal
Proteosa de peptona 5g Verde brillante 0.0003 g
Lactosa 10 g Rojo neutro 0.025 g
Bilis de buey
8.5 g Agar 13 g
desecada
Citrato de sodio 8.5 g Agua destilada 1 000 mL
Tiosulfato de sodio 8.5 g
• I enterica • IV houtenae
• II salamae • V S. bongori, ya incluida en una
• IIIa arizonae especie distinta
• IIIb diarizonae • VI indica
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1. Salmonella spp. adaptadas a vivir en el ser humano, entre ellas, S. typhi, S.
paratyphi A, B y C;
2. Salmonella spp. adaptadas a hospederos no humanos, que circunstancialmente
pueden producir infección en el hombre, entre ellas, S. dublin y S. cholerae-suis;
3. Salmonella spp. sin adaptación específica de hospedero, que incluye a unas 1800
serovariedades de amplia distribución en la naturaleza, las cuales causan la
mayoría de las salmonelosis en el mundo.
VII. Referencias: