- Antígeno: molécula ou substância capaz de estimular o sistema
imunológico a produzir um anticorpo. Estão presentes na membrana das hemácias, onde se ligam aos anticorpos.
- Anticorpo (ou Imunoglobulina): proteína formada em resposta a um
estímulo. O contato com algo que o organismo não reconhece como próprio faz em resposta o anticorpo. Os linfócitos B transformam-se em plasmócitos (responsáveis pela fabricação dos anticorpos). Quando livre, o anticorpo é encontrado no plasma.
- O contato com algo que o organismo não reconhece como próprio
faz o anticorpo em resposta, o qual reagirá com o antígeno.
- A reação Ag-Ac é reversível e exige condições apropriadas de pH,
temperatura e especificidade para encaixe perfeito entre Ag e Ac, e qualquer mudança altera o equilíbrio, deslocando a reação por ter ligação fraca. As reações ocorrem na membrana da hemácia, onde estão os antígenos.
- Resposta primária: o primeiro contato com o antígeno origina
produção de anticorpos do tipo IgM. A exposição primária possui declínio rápido na produção de Ac.
- Resposta secundária: o mesmo antígeno entra em contato, há
produção de IgG. A produção de Ac é rápida e os anticorpos produzidos continuam na circulação por muito tempo (memória imunológica). - Princípio de ação das vacinas: no primeiro estímulo (1ª dose) ocorre a produção de IgM, no segundo estímulo o efeito é duradouro, os IgG produzidos permanecem no organismo.
- Potencial Zeta: é a força de repulsão entre as hemácias. A hemácia
apresenta carga negativa na membrana, e na ausência destas cargas elas se juntariam quando se encontrassem (bola de sabão). Em NaCl 0,9%, o Na+ é atraído pela membrana da hemácia após a dissociação e forma uma nuvem positiva ao redor de cada hemácia, o que ajuda na repulsão entre elas. No sangue, os íons fazem esse papel. Cada anticorpo chega com uma carga positiva e neutraliza uma carga negativa, e quanto mais anticorpos maior é a neutralização na membrana da hemácia e menor a força de repulsão. O anticorpo (que é positivo) atravessa a nuvem (que também é positiva) porque essa nuvem é móvel, e ainda pode-se centrifugar ou aquecer em banho maria para ajudar o Ac). Ou seja, o que diz se a reação vai ou não aglutinar é a capacidade de vencer o potencial zeta. Se o Ac neutralizar a força de repulsão aglutina, caso contrário só sensibiliza. O IgM tem mais cargas positivas e por isso neutraliza mais cargas na membrana da hemácia e tem maior potencial de aglutinação.
- O IgM é aglutinante e o IgG é sensibilizante. O IgM não passa a
barreira hemato -placentária.
- Reação positiva: anticorpo encontra o antígeno e aglutina (vence o
potencial zeta).
- Reação negativa: anticorpo não encontra o antígeno e não aglutina
- Sensibilização: ocorre quando o anticorpo encontra o antígeno mas
não ocorre aglutinação. A hemácia fica revestida de Ac mas não aglutina (não vence o potencial zeta).
- Panaglutinação: hemácias aglutinam sem a presença de anticorpos,
é uma aglutinação inespecífica que vence o potencial zeta. - Existem quase 300 antígenos na membrana das hemácias, e estes variam entre as pessoas (ex: sistema ABO). Não existe uma pessoa que tenha todos os antígenos iguais aos de outra. Isso não impede a transfusão de sangue, por exemplo, pois o sistema imune não é tão forte e, por isso, só é necessária a equivalência entre ABO e Rh (exposição primária pode ser Rh diferente na secundária a reação é rápida e violenta).
- Classificação dos anticorpos:
a) anticorpo quente: temperatura ideal de reação é de 37ºC. É
perigoso na transfusão de sangue pois o corpo possui a temperatura ideal para sua reação.
b) anticorpo frio: temperatura ideal de reação é de 12ºC
c) anticorpos naturais: são açúcares adquiridos pela alimentação,
contato com microorganismos, etc. (ex: anti-A e anti-B).
d) anticorpos imunes: produzidos por estímulo (todos os anticorpos
são imunes)
e) anticorpos irregulares: nem todas as pessoas possuem.
f) anticorpos regulares: todas as pessoas possuem (ex: anti-A e anti-
B)
g) completos: aglutinantes
h) incompletos: sensibilizantes
- Soro de Coombs: é uma anti-gamaglobulina humana (anti-
anticorpo). Pinga-se o soro de Coombs quando a hemácia estiver livre (não aglutinar) ou quando não se tem certeza se um anticorpo é aglutinante ou sensibilizante. Se após pingar o soro ocorrer aglutinação as hemácias estavam sensibilizadas. O soro de Coombs é utilizado toda vez que uma reação for negativa no primeiro momento.
- O sistema ABO é um dos mais importantes no sistema de grupos
sanguíneos. Divide os indivíduos e quatro grandes grupos: A, B, AB e O. Os Ag desse sistema estão presentes em quase todas as células do corpo e são de natureza glicolipídica e glicoprotéica. São antígenos de produção indireta (o gene produz a enzima que incorpora o açúcar e forma o antígeno): os antígenos do sistema ABO são açúcares.
Antígeno na Anticorpo no Grupo sanguíneo
hemácia plasma H Anti-A e Anti-B O
A Anti-B A
B Anti-A B
AeB Nenhum AB
- Os anticorpos do sistema ABO são classificados como naturais,
regulares, frios (mas capazes de reagir a 37ºC), apresenta predomínio de IgM e são fixadores de Complemento.
- Para a transfusão de sangue a preferência é entre isogrupos. O
doador universal de plasma é o AB, pois não possui nenhum anticorpo. O tipo O é o doador universal de hemácias, pois no plasma ele tem anti-A e anti-B.Se houver incompatibilidade ABO na transfusão, em 15 minutos os rins param e as hemácias sofrem lise.
A B
AB
- Todos os tipos sanguíneos possuem o gene H ou h, ou seja, possuem
substância precursora. Essa substância precursora é transformada em antígeno Bombay (falso O, não possui Ag A, B nem H), que só pode receber sangue de outro Bombay. No grupo AB o gene H se transforma, no grupo O não ocorre transformação deste gene. O grupo O tem compatibilidade transfusional com os outros tipos pois todos os outros “já foram” do tipo O por surgirem do gene e do antígeno H. - A produção dos antígenos do sistema ABO ocorrem indiretamente:
Gene Incorpora o açúcar
A N-acetil-galactosamina
B D-galactose
H Fucose
- Os portadores dos genes Se (Sese ou SeSe) secretam os Ag A, B e H
pelas lágrimas, suor, saliva, etc. Os portadores sese não secretam os antígenos desta forma pois são Bombay.
- Sistema Rhesus (Rh): Segundo sistema mais importante e mais
complexo, com 49 antígenos identificados e diversas nomenclaturas. Os antígenos são produzidos de maneira direta (gene produz o antígeno) por dois genes: RHD e RMCE. O antígeno D é o mais importante e altamente imunogênico. Há alguns genes evolvidos: D, C, E, C, e. Quem tem o antígeno D é Rh+. Não existe dd. Os anticorpos deste sistema geralmente são IgG. • Na figura acima, os dois indivíduos do grupo o podem doar um para o outro pois um deles não possui o c, causando uma resposta imune primária, ou seja, produzirá o anticorpo anti-c. Não poderá ser feita uma segunda exposição a este antígeno, pois o indivíduo já terá os anticorpos prontos e a resposta secundária será rápida, podendo haver lise celular.
- D fraco: é um D mais fraco, ou seja, um D sem todas as subunidades
que formam o antígeno D. O D fraco é um Rh positivo. Se usarmos o soro anti-D e aglutinar é um Rh+. Se aglutinar com o soro de Coombs é um Rh positivo D fraco. Em uma transfusão, o D fraco deve receber sangue Rh-.
- Os anticorpos do sistema Rh são irregulares, imunes, quentes,
incompletos (ou sensibilizantes – IgG na maior parte). Em Rh-, os anticorpos deste sistema só aparecem após transfusão sanguínea, aborto ou gravidez, ou seja, contato com o antígeno D.
- Quanto mais vezes o receptor receber o Ag que ele não possui do
doador, maior a probabilidade do receptor criar o anticorpo contra este antígeno.
- Tipagem Rh: detecta a presença ou ausência do antígeno D. Há três
possibilidades:
1- a pessoa não possui Ag D → reação negativa (não aglutina as
hemácias)
2- a pessoa possui Ag D → reação positiva (aglutina as hemácias)
3- a pessoa possui Ag D → reação negativa → sensibilização (Ac ligou
ao Ag mas não aglutinou)
- Testes pré-transfusionais: os que devem ser feitos no doador são a
tipagem ABO direta e reversa, tipagem Rh e PAI (Pesquisa de Anticorpos Irregulares). No receptor, além destes deve-se fazer o teste de Coombs direto e o de auto-Ac. Feito isso, deve ser realizada a prova cruzada maior e menor entre os dois.
1- Tipagem ABO Direta: detecta a presença dos antígenos ABO na
membrana da hemácia.
2- Tipagem ABO Reversa: detecta a presença dos anticorpos do
sistema ABO no plasma. Sempre confirma a tipagem ABO direta. Se o paciente estiver imunodeprimido (se Ac) ele pode aparecer como um falso AB. 3- Tipagem Rh: detecta a presença do antígeno D na membrana da hemácia.
4- Teste de Coombs Direto: detecta a presença de hemácias
sensibilizadas, anemia hemolítica autoimune, doença hemolítica do recém nascido. Coloca-se o soro de Coombs junto com as hemácias do paciente em um tubo de ensaio, homogeneizando. Se aglutinar as hemácias estão sensibilizadas, então deve-se realizar uma eluição das hemácias, retirar os Ac e identificá-los. Utilizado principalmente em bebês devido à passagem de Ac da mãe para o feto pela barreira hemato - placentária e no momento do parto por causa da grande quantidade de sangue. 5- PAI (Pesquisa de Anticorpos Irregulares): feito junto ao teste de Coombs indireto, se der positivo existem anticorpos irregulares no plasma. Junta-se as hemácias comerciais (geralmente de dois frascos contendo suspensões de hemácias com antígenos conhecidos) ao plasma/soro do paciente. A identificação do Ac irregular é feita usando o painel de hemácias.
6- Pesquisa de Auto-anticorpos: usa-se a hemácia do paciente junto
com seu soro/plasma para verificação de anticorpos atuantes nas suas hemácias.
7- Prova cruzada maior: testa in vitro a compatibilidade entre as
hemácias do doador e o soro/plasma do receptor. É feito em várias fases e termina com a adição do soro de Coombs. Se der positivo (aglutinar) a bolsa não pode ser transferida.
8- prova cruzada menor: teste pouco usado, testa in vitro a
compatibilidade entre as hemácias do receptor e o soro/plasma do doador. Também é feito em várias fases e termina com a adição do soro de Coombs. Se der positivo a bolsa não pode ser transferida.
- Resultados duvidosos ou discrepantes: pode ocorrer por excesso de
Ac e causar hemólise (ocorre na tipagem ABO reversa), presença de subgrupos ou reações fracas ou negativas na tipagem ABO direta, outros anticorpos podem interferir no resultado.