KONSENTRASI LIPID PEROKSIDA HATI KELINCI

HIPERLIPIDEMIA YANG DIBERI SENYAWA

HIPOLIPIDEMIK

AULINE MULIASARI

PROGRAM STUDI BIOKIMIA

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
2009
 ii

ABSTRAK

AULINE MULIASARI. Konsentrasi Lipid Peroksida Hati Kelinci Hiperlipedimia

yang Diberi Senyawa Hipolipidemik. Dibimbing oleh SULISTIYANI dan DIMAS
ANDRIANTO.
Penyakit degeneratif merupakan penyakit pembunuh manusia terbesar di
dunia. Salah satu penyebab penyakit tersebut timbul adalah pola makan yang
menyukai masakan cepat saji (fast food) dan mengkonsumsinya secara berlebihan
sehingga terjadi hiperlipidemia. Hiperlipidemia dapat mengakibatkan peningkatan
peroksidasi lipid yang disebabkan oleh radikal bebas di dalam tubuh, seperti organ
hati. Penelitian bertujuan mengukur konsentrasi lipid peroksida hati kelinci
hiperlipidemia dan menentukan pengaruh pemberian senyawa hipolipidemik
terhadap lipid peroksida hati kelinci hiperlipidemia. Kelinci jantan galur New
Zealand White sebanyak 24 ekor dibagi menjadi empat kelompok, yaitu kelompok
I (normal), kelompok II (hiperlipidemia), kelompok III (ramuan daun jati
belanda), dan kelompok IV (lovastatin). Pengukuran konsentrasi lipid peroksida
hati kelinci menggunakan metode TBA (asam tiobarbiturat) yang mengukur
malondialdehida (MDA) sebagai produk dari reaksi peroksidasi lipid dengan
menggunakan spektrofotometer pada λ = 532 nm (Yagi et al. 1994). Hasil
penelitian menunjukkan bahwa pemberian pakan 0.5% kolesterol dan 5% minyak
kelapa dapat menimbulkan kondisi hiperlipidemia. Konsentrasi lipid peroksida
hati kelinci hiperlipidemia pada kelompok II meningkat dua kali lipat
dibandingkan dengan kelompok I. Kelompok III dan IV memiliki konsentrasi
lipid peroksida hati yang lebih rendah dibandingkan kelompok II, yaitu sebesar
58.83% dan 49.06%. Data tersebut menunjukkan bahwa ramuan daun jati belanda
dan lovastatin dapat menurunkan peroksidasi lipid.
 ABSTRACT

AULINE MULIASARI. Lipid Peroxide Concentration in The Liver of

Hyperlipidemic Rabbits Treated by Hypolipidemic Substance. Under the direction of
SULISTIYANI and DIMAS ANDRIANTO.
Degenerative disease has caused the highest mortality in the world. The disease
may occur due to our life style which prefer fast food than traditional one and
overeating resulted in hyperlipidemic. This condition will increase lipid peroxidation
caused by free radicals in the body such as in the liver. The objective of this research
is to determine the influence of hypolipidemic substance on lipid peroxide in the liver
of hyperlipidemic rabbits. Twenty four male New Zealand White rabbits were divided
into four group: group I (normal), group II (Hyperlipidemic), group III (mixture of
Jati Belanda), and group IV (lovastatin). Lipid peroxide concentration was measured
by TBA (thiobarbiturit acid) assay that measure malondyaldehida (MDA) as product
of lipid peroxidation using spectrophotometer at λ = 532 nm (Yagi et al 1994). The
result of the research showed that feeding rabbits with chow contains 0.5%
cholesterol and 5% of palm oil caused hyperlipidemic. Lipid peroxide concentration
of rabbit’s liver in group II increased two times compared with group I. Group III and
IV had lower lipid peroxide concentration of rabbit’s liver compared with group II
which is 58.83% and 49.06%. This data showed that Jati Belanda leave mixture and
lovastatin decreased lipid peroxidation in the liver.
 iv

KONSENTRASI LIPID PEROKSIDA HATI KELINCI

HIPERLIPIDEMIA YANG DIBERI SENYAWA
HIPOLIPIDEMIK

AULINE MULIASARI

Skripsi
sebagai salah satu syarat memperoleh gelar
Sarjana Sains pada
Program Studi Biokimia

PROGRAM STUDI BIOKIMIA

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
2009
 v

Judul Skripsi : Konsentrasi Lipid Peroksida Hati Kelinci Hiperlipidemia yang

Diberi Senyawa Hipolipidemik
Nama : Auline Muliasari
NIM : G44104056

Disetujui
Komisi Pembimbing

drh. Sulistiyani, M.Sc, Ph.D Dimas Andrianto, M.Si

Ketua Anggota

Diketahui

Dr. drh. Hasim, DEA.

Dekan Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam

Tanggal Lulus:
 vi

PRAKATA

Puji dan syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT atas segala rahmat,
nikmat, kekuatan, dan karunia-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan karya
ilmiah ini dengan baik dan lancar. Tema yang dipilih dalam penelitian kali ini adalah
lipid peroksida hati, dengan judul ”Konsentrasi Lipid Peroksida Hati Kelinci
Hiperlipidemia yang Diberi Senyawa Hipolipidemik”. Karya ilmiah ini disusun
berdasarkan hasil penelitian yang dilaksanakan sejak bulan Agustus hingga Desember
2008 di Laboratorium Biokimia, Departemen Biokimia FMIPA, IPB, Bogor.
Penulis mengucapkan terimakasih kepada drh. Sulistiyani, M.Sc, Ph.D dan
Dimas Andrianto, M.Si selaku pembimbing atas segala ilmu yang diberikan serta
kesabaran dalam membimbing penulis. Pada kesempatan kali ini penulis juga
mengucapkan terimakasih kepada seluruh staf Laboratorium Biokimia dan pusat studi
Biofarmaka atas bantuan serta kemudahan dalam menjalankan penelitian ini. Selain
itu penulis mengucapkan terimakasih kepada Ibunda, Uda Uki, Ade Astri, Om Woto,
Tante Saf, Om Yan, dan Tante Rina atas dukungan moril dan materil untuk penelitian
ini. Serta ucapan terimakasih penulis sampaikan kepada Aswan, Iqbal, Udin, Rangga,
Falakh, Tyas, Intan, Ela, Hanifah, Dewi, dan seluruh biokimia angkatan 41 atas
dukungan morilnya.

Bogor, September 2009

Auline Muliasari
 RIWAYAT HIDUP
Penulis dilahirkan di Jakarta pada tanggal 13 September 1985 dari pasangan
Alfian Zein, B.A (alm) dan dr. Mulyani Noekman. Penulis merupakan anak ketiga
dari empat bersaudara. Tahun 2003 penulis lulus dari SMU Negeri 42 Jakarta dan
baru pada tahun 2004 penulis lulus seleksi masuk IPB melalui Jalur Seleksi
Penerimaan Mahasiswa (SPMB) pada Program Studi Biokimia, yang saat itu masih
tergabung dengan Departemen Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan
Alam (FMIPA).
Selama mengikuti perkuliahan, penulis pernah menjadi asisten praktikum
Biokimia Umum S1 Fakultas Kedokteran Hewan serta Struktur Fungsi dan
Biomolekul S1 Biokimia pada tahun akademik 2008/2009. Penulis juga pernah
melaksanakan Praktik Kerja Lapangan (PKL) di Laboratorium Mikrobiologi
Kelompok Peneliti Biokimia Mikrob, Lembaga Ilmu Pengetahuan Alam (LIPI),
Cibinong, Bogor, selama periode Juli sampai Agustus 2007 dan menulis laporan
ilmiah yang berjudul Aktivitas Antibakteri Isolat Mikrob dari Maluku: Uji Fisik,
Alkohol, dan Total Asam Susu Pasteurisasi. Selain itu penulis pernah aktif di
organisasi kemahasiswaan, yaitu sebagai Sekertaris Departemen Sumber Daya
Manusia Community of Research and Education in Biochemistry (CREBs) pada
periode 2006/2007.
 DAFTAR ISI

Halaman
DAFTAR GAMBAR ............................................................................................. ix
DAFTAR LAMPIRAN .......................................................................................... ix
PENDAHULUAN .................................................................................................. 1
TINJAUAN PUSTAKA
Peroksidasi Lipid........................................................................................... 1
Hati ................................................................................................................ 2
Hiperlipidemia .............................................................................................. 2
Metabolisme Kolesterol ................................................................................ 3
Obat Penurun Kolesterol ............................................................................... 4
Hewan Coba .................................................................................................. 6
BAHAN DAN METODE
Bahan dan Alat .............................................................................................. 7
Metode Penelitian ......................................................................................... 7
HASIL DAN PEMBAHASAN
Masa Adaptasi dan Bobot Badan Hewan Coba ............................................ 8
Perbandingan Konsentrasi Lipid Peroksida Hati Kelinci Normal dengan
Kelinci Hiperlipidemia .................................................................................. 9
Perbandingan Konsentrasi Lipid Peroksida Hati Kelinci Ramuan Jati
Belanda dan Lovastatin dengan Hiperlipidemia ......................................... 10
SIMPULAN DAN SARAN .................................................................................. 11
DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 11
LAMPIRAN .......................................................................................................... 13
 ix

DAFTAR GAMBAR

Halaman
1 Reaksi peroksidasi .............................................................................................. 2
2 Reaksi antara TBA dengan MDA ...................................................................... 2
3 Biosintesis kolesterol .......................................................................................... 4
4 Struktur kimia lovastatin. .................................................................................... 5
5 Jati Belanda. ........................................................................................................ 5
6 Kelinci New Zealand White. ............................................................................... 6
7 Bobot badan selama adaptasi dan perlakuan. ...................................................... 9
8 Konsentrasi lipid peroksida hati kelinci normal dan kelinci hiperlipidemia..... 10
9 Konsentrasi lipid peroksida hati kelinci hiperlipidemia, ramuan & lovastatin. 10

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman
1 Tahapan penelitian ...................................................................................................14
2 Komposisi pakan standar .........................................................................................15
3 Bobot badan kelinci ................................................................................................16
4 Hasil kurva standar TMP .........................................................................................17
5 Konsentrasi lipid peroksida hati kelinci dan cara perhitungan ...............................18
6 Analisis statistik .......................................................................................................19
 PENDAHULUAN sebelumnya, sehingga penelitian ini merupakan
penelitian lanjutan.
Penyakit degeneratif menjadi penyakit
Alviani (2007) menyatakan bahwa kelompok
pembunuh manusia terbesar di dunia. Menurut
hewan coba tikus yang diberi ramuan ekstrak
hasil survei kesehatan rumah tangga (SKRT)
daun jati belanda mampu menurunkan kolesterol
menyatakan bahwa penyakit jantung koroner
sebesar 27.56% secara nyata dibandingkan
telah menjadi penyebab kematian paling tinggi di
kelompok hiperlipidemia. Rahayu (2007)
tahun 1992, 1995, dan 2001, sedangkan menurut
menunjukkan bahwa ekstrak ramuan daun jati
WHO (World Health Organization) hingga akhir
belanda, temulawak, dan daun jambu biji pada
tahun 2005 penyakit degeneratif telah
komposisi tertentu mampu menurunkan
menyebabkan kematian hampir 17 juta orang di
konsentrasi kolesterol hati pada tikus yang
seluruh dunia. Penyakit degeneratif antara lain
hiperlipidemia. Tombilangi (2004) menyatakan
PJK (penyakit jantung koroner), diabetes melitus,
bahwa pemberian pakan kolesterol pada hewan
kanker, obesitas, dislipidemia, dan stroke. Faktor
coba kelinci dapat menaikkan konsentrasi lipid
yang menyebabkannya adalah pola makan yang
peroksida. Berdasarkan penelitian tersebut obat-
menyukai masakan cepat saji (fast food) dan
obatan dari tumbuhan mampu menurunkan
mengkonsumsinya secara berlebihan sehingga
kolesterol pada tikus dan kelinci yang diberi
terjadi hiperlipidemia.
pakan kolesterol. Penelitian sebelumnya
Hiperlipidemia merupakan suatu keadaan
menggunakan plasma darah hewan coba kelinci,
tingginya konsentrasi lipid yang ditandai dengan
sedangkan pada organ hati kelinci belum diteliti.
meningkatnya konsentrasi trigliserida, LDL (low
Berdasarkan hal tersebut, konsentrasi lipid
density lipoprotein), dan kolesterol darah
peroksida hati pada hewan coba kelinci
melebihi batas normal (pada manusia > 200
hiperlipidemia yang diberi senyawa
mg/dl) (Ganong 2001). Faktor-faktor yang
hipolipidemik belum diteliti lebih lanjut.
menyebabkan hiperlipidemia adalah obesitas,
Penelitian bertujuan mengukur konsentrasi
usia, kurang olahraga, stres, gangguan
lipid peroksida hati kelinci hiperlipidemia dan
metabolisme, gangguan genetik, dan pola
menentukan pengaruh pemberian senyawa
konsumsi makanan sehari-hari yang dapat
hipolipidemik terhadap lipid peroksida hati
meningkatkan konsentrasi lipid. Keadaan ini
kelinci hipierlipidemia.
dapat ditimbulkan karena meningkatnya
Hipotesis dari penelitian ini adalah pemberian
peroksidasi lipid yang disebabkan oleh radikal
senyawa hipolipidemik dapat menurunkan
bebas di dalam tubuh, seperti organ hati. Yagi et
konsentrasi lipid peroksida hati kelinci yang
al. (1994) menyatakan bahwa peningkatan
hiperlipidemia. Hasil dari penelitian ini
konsentrasi lipid peroksida di hati dapat merusak
diharapkan dapat memberikan informasi lebih
sel hati sehingga peroksida akan keluar dari hati
lanjut tentang korelasi antara meningkatnya
menuju pembuluh darah dan dapat merusak organ
konsentrasi lipid pada hati kelinci terhadap
atau jaringan lain. Alviani (2007) yang
konsentrasi lipid peroksida dalam hatinya yang
menyatakan bahwa konsentrasi lipid peroksida
diberi senyawa hipolipidemik.
hati tikus normal dan hiperlipidemia berturut-
turut sebesar 87.10 nmol/g bobot hati dan 523.55
nmol/g bobot hati. Selain itu, pemberian pakan
kolesterol sebesar 0.25% mengakibatkan TINJAUAN PUSTAKA
konsentrasi lipid peroksida hati tikus kelompok Peroksidasi Lipid
hiperlipidemia lebih besar lima kali dari pada
kelompok normal (Alviani 2007). Oleh karena Lipid merupakan salah satu molekul yang
itu, terdapat hubungan antara kondisi paling sensitif terhadap serangan radikal bebas
hiperlipidemia dengan konsentarsi lipid sehingga terbentuk lipid peroksida. Peroksidasi
peroksida hati pada tikus (Alviani 2007). lipid adalah reaksi yang terjadi antara radikal
Kondisi hiperlipidemia yang akan bebas dengan asam lemak tak jenuh majemuk
menyebabkan aterosklerosis ini membuat para (Polyunsaturated fatty acid, PUFA) yang
peneliti mencari obat yang ampuh untuk sedikitnya memiliki tiga ikatan rangkap (Halliwel
menurunkan kadar lipid plasma. Oleh karena itu, dan Gutteridge 1999). Peroksidasi lipid terjadi
banyak obat-obatan paten maupun dari tumbuhan diakibatkan oleh radikal bebas. Radikal bebas
yang digunakan sebagai penurun lipid. Obat- sangat labil dan reaktif sehingga mudah bereaksi
obatan paten tersebut antara lain golongan asam dengan setiap zat disekitarnya.
fibrat, resin, penghambat HMG-KoA reduktase Peroksidasi lipid merupakan rantai reaksi
(statin), dan asam nikotinat (niasin) sedangkan yang berlangsung terus menerus, sebab reaksi ini
obat-obatan dari tumbuhan antara lain jati membentuk radikal lipid bebas (R•) yang lain
belanda, temulawak, daun jambu biji, kunyit, dan sehingga peroksidasi berlangsung lebih lanjut
mahkota dewa (Dalimartha 2002). Penelitian (Halliwel dan Gutteridge 1999). Umumnya
tentang obat penurun lipid plasma telah dilakukan peroksidasi lipid dapat melalui tiga tahap reaksi,

yaitu inisiasi, propagasi, dan terminasi (Murray et
al 2001).
Reaksi peroksidasi lipid diawali dengan
pemisahan sebuah atom hidrogen oleh radikal
bebas dari suatu grup metilena (-CH2-) PUFA.
Radikal tersebut menghasilkan pembentukan
suatu radikal karbon (-•CH-) pada PUFA.
Radikal karbon ini dapat distabilkan melalui
suatu pengaturan ulang ikatan rangkap yang
menghasilkan pembentukan diena terkonjugasi.
Bila diena terkonjugasi bereaksi dengan O2 akan
terbentuk radikal peroksida lipid (ROO•).
Selanjutnya radikal peroksi lipid dapat juga
menghilangkan sebuah atom hidrogen dari
molekul lipid lainnya yang berdekatan untuk
membentuk hidroperoksida lipid dan juga
membentuk radikal karbon lainnya. Jika radikal
karbon lain tersebut bereaksi lagi dengan oksigen
maka reaksi peroksidasi lipid akan terus
berlanjut. Pembentukan endoperoksida lipid pada
PUFA yang mengandung sedikitnya tiga ikatan
rangkap akan mendorong pembentukan
malondialdehida (MDA) sebagai produk dari
reaksi peroksidasi tersebut. Mekanisme reaksi
peroksidasi lipid ini dapat dilihat pada Gambar 1.
Lipid peroksida atau lipid hidroperoksida
merupakan suatu molekul yang stabil pada suhu
fisiologis atau suhu tubuh. Kadar lipid peroksida
dapat diukur dengan metode asam tiobarbiturat
(TBA) yang mengukur adanya MDA. TBA akan
bereaksi dengan gugus karbonil dari MDA, yaitu
satu molekul MDA akan berikatan dengan dua
molekul TBA sehingga membentuk senyawa
kompleks berwarna merah (Halliwel dan
Gutteridge 1999) (Gambar 2).
Terbentuknya warna merah tersebut akan
diukur serapannya dengan spektrofotometer pada
panjang gelombang 532 nm yang sebanding
dengan tingkat oksidasi lipid. Pada reaksi ini ada
sejumlah senyawa lain yang juga bereaksi dengan
TBA, namun karena jumlahnya kecil maka bisa
diabaikan. Senyawa-senyawa itu diantaranya
adalah glukosa <0.4 mg (2.2 μmol) dan sukrosa
<8.56 mg (25.0 μmol)(Ohkawa et al. 1979). Uji
TBA ini merupakan uji yang spesifik untuk hasil
oksidasi asam lemak tak jenuh dan baik
diterapkan untuk uji terhadap lemak pangan yang
mengandung asam lemak tak jenuh (Ketaren
1986).
Gambar 1 Reaksi peroksidasi lipid (Murray et
al 2001).
2
Gambar 2 Reaksi antara TBA dengan MDA
(Halliwel & Gutteridge 1999).
Hati
Hati manusia mempunyai berat sekitar 1.5 kg
dan karena itu merupakan salah satu organ
terbesar pada manusia (Koolman 2000).
Walaupun berat hati hanya 2-3% dari berat tubuh
namun hati terlibat dalam 25-30% pemakaian
oksigen. Hati terdiri dari sel-sel parenkim hati
(hepatosit) sekitar 60% dan sel-sel endotel sekitar
30% yang membatasi sinusoid-sinusoid hati,
sisanya merupakan sel-sel pembuluh darah,
jaringan penyambung, dan saluran empedu
(Tangendjaja 1987).
Organ hati merupakan pusat dari metabolisme
dalam sebagian besar hewan. Organ ini berfungsi
dalam proses detoksifikasi senyawa toksik,
hematologik, sistem imun tubuh, berperan dalam
proses metabolisme biomolekul, dan sekresi
produk akhir metabolisme seperti bilirubin,
amonia, dan urea (Kaplan dan Pesce 1989).
Membran-membran mikrosom hati sangat rentan
terhadap peroksidasi lipid, karena membran
tersebut banyak sekali mengandung asam lemak
tak jenuh.
Proses peroksidasi lipid pada mikrosom hati
dapat berlangsung secara enzimatis dan
nonenzimatis. Proses secara enzimatis yaitu
peroksidasi lipid bergantung pada NADPH,
sedangkan secara nonenzimatis yaitu peroksidasi
lipid yang bergantung pada ion Fe3+, ion ini
berfungsi sebagai pengkompleks ADP, pirofosfat,
dan EDTA (Halliwel dan Gutteridge 1999).
Meningkatnya konsentrasi lipid peroksida
dapat menjadi awal rusaknya sel hati.
Peningkatan konsentrasi lipid peroksida lebih
jauh akan menyebabkan terjadinya nekrosis hati.
Menurut Yagi et al. (1994) apabila konsentrasi
lipid peroksida di hati meningkat, maka lipid
peroksida ini dapat merusak sel hati sehingga
peroksida akan keluar dari hati menuju pembuluh
darah dan dapat merusak organ atau jaringan lain.
Konsentrasi lipid peroksida yang meningkat pada
jaringan maupun organ dapat mengakibatkan
berbagai penyakit degeneratif, seperti penyakit
jantung koroner (PJK) dan stroke.
Hiperlipidemia
Hiperlipidemia atau hiperlipoproteinemia
adalah gangguan metabolisme yang melibatkan
peningkatan konsentrasi lipoprotein pada plasma.
Hiperlipidemia merupakan suatu keadaan

tingginya konsentrasi lipid yang ditandai dengan
meningkatnya konsentrasi trigliserida, LDL, dan
kolesterol darah melebihi batas normal (pada
manusia > 200 mg/dL) (Ganong 2001). Faktor
yang mempengaruhi hiperlipidemia adalah
obesitas, usia, kurang olahraga, stres, gangguan
metabolisme, gangguan genetik, dan pola
konsumsi makanan sehari-hari yang dapat
meningkatkan konsentrasi lipid atau kolesterol.
Makanan yang kaya akan kolesterol dan asam
lemak jenuh dapat menekan pembentukan
reseptor LDL, sehingga meningkatkan kolesterol
di dalam darah (Grundy 1991).
Hiperlipidemia dapat meningkatkan resiko
aterosklerosis, yaitu penyumbatan pembuluh
darah arteri akibat penumpukan lipid pada
dinding aorta. Jika aterosklerosis terjadi pada
pembuluh darah aorta yang mensuplai O2 ke
jantung, maka dapat menyebabkan penyakit
jantung koroner (PJK). Faktor yang
mempengaruhi patogenesis aterosklerosis adalah
hiperkolesterolemia yang disebabkan oleh
peningkatan konsentrasi lipoprotein densitas
rendah (LDL) (Schwart et al. 1993 dalam Taher
2003).
Lemak yang berupa trigliserida atau
kolesterol berasal dari bahan makanan masuk ke
dalam tubuh dan dicerna dalam usus halus.
Selanjutnya diangkut oleh kilomikron dan
dihidrolisis oleh lipoprotein lipase menghasilkan
asam lemak bebas. Hasil tersebut disimpan di
jaringan adiposa dan otot. Akibat dari reaksi
tersebut kilomikron akan mengecil dan disebut
kilomikron sisa. Kilomikron sisa akan
bersirkulasi membawa kolesterol ke hati,
kemudian diserap oleh reseptor khusus melalui
mekanisme spesific receptor-mediated
endocytosis. Kilomikron dan kilomikron sisa
merupakan lipoprotein yang mengangkut lemak
dan kolesterol yang berasal dari makanan
(eksogen).
Selain berasal dari makanan, lemak, dan
kolesterol juga dapat di sintesis oleh hati.
Kolesterol dan trigliserida diangkut dari hati ke
jaringan tubuh lainnya dengan cara hati
memproduksi VLDL (very low density
lipoprotein). Awalnya partikel VLDL
mengangkut trigliserida dari hati ke jaringan
adiposa. Seperti halnya kilomikron, selanjutnya
VLDL mengalami hidrolisis oleh lipoprotein
lipase dalam pembuluh darah dan menghasilkan
IDL (Intermediate density lipoprotein), hidrolisis
lebih lanjut menghasilkan LDL (low density
lipoprotein). Lalu partikel LDL akan
diendositosis oleh hepatosit setelah terlebih
dahulu diikat oleh reseptor LDL (Voet dan Voet
1995).
Reseptor LDL merupakan glikoprotein yang
merentangkan membran sel dan daerah
pengikatan B-100 terletak pada ujung terminal
yang tersusun. LDL akan berikatan dengan
3
reseptor dalam keadaan utuh melalui endositosis.
Kemudian LDL dipecah di dalam lisosom yang
melibatkan hidrolisis apoprotein dan ester
kolesteril yang diikuti oleh translokasi kolesterol
ke dalam sel. Reseptor tersebut tidak dihancurkan
tetapi kembali ke permukaan sel. Aliran masuk
kolesterol ini menghambat kerja HMG-KoA
sintase serta HMG-KoA reduktase dengan cara
yang terkoordinasi, dan dengan menghambat
sintesis kolesterol serta menstimulasi aktivitas
ACAT dan mengurangi sintesis reseptor LDL.
Peningkatan konsentrasi lipid peroksida
dalam tubuh dapat disebabkan oleh kondisi
hiperkolesterolemia. Saat kondisi tersebut jumlah
LDL meningkat sehingga dapat memperbesar
kemungkinan terjadinya oksidasi, sebab
ketersediaan substrat yang dapat dioksidasi lebih
banyak.
Fungsi kolesterol salah satunya sebagai
prekursor pembentukan asam empedu yang
disintesis di dalam hati. Tahap pertama dari
biosintesis asam empedu adalah reaksi 7α-
hidroksilasi terhadap kolesterol yang dikatalisis
oleh enzim mikrosomal, yaitu 7α-hidroksilase.
Reaksi ini memerlukan oksigen, NADPH, dan
sitokrom P-450 oksidase. Semakin besar
konsentrasi kolestrol plasma dalam tubuh
hiperkolesterolemia, maka semakin banyak asam
empedu yang disintesis, sehingga semakin
meningkat pula oksigen dan NADPH yang
dibutuhkan serta peningkatan aktivitas sitokrom
P-450 oksidase (Murray et al. 2001).
Sitokrom P-450 oksidase merupakan enzim
yang berperan dalam memperantarai metabolisme
retikulum endoplasmik yang menghasilkan
radikal superoksida (O2-) (Dhaunsi et al.1992
dalam Wresdiyati 2005). Oleh sebab itu, semakin
meningkatnya sitokrom P-450 oksidase, maka
radikal bebas yang dihasilkan semakin meningkat
pula. Jika produksi radikal bebas terjadi secara
berlebihan maka enzim antioksidan dalam tubuh
khususnya di organ hati seperti superoksida
dismutase (SOD) tidak mampu mengatasinya.
Hal ini akan menimbulkan kondisi stres oksidatif,
yaitu suatu keadaan yang dapat menyebabkan
terjadinya beberapa kerusakan atau kelainan baik
proses biokimia maupun fisiologi di dalam sel
akibat dari proses peroksidasi lipid.
Metabolisme Kolesterol
Kolesterol merupakan komponen terpenting
membran sel pada hewan. Umumnya kebutuhan
kolesterol sehari-hari dapat terpenuhi secara
sempurna oleh tubuh melalui sintesis di dalam
tubuh (endogen). Pada konsumsi makanan yang
beraneka ragam, kurang lebih setengah dari
kolesterol berasal dari biosintesis tubuh sendiri
yang berlangsung di dalam usus, kulit, dan
terutama dalam hati (kira-kira 50%), selebihnya
kolesterol diambil dari bahan makanan (eksogen)

(Koolman 2000). Pada manusia, secara
keseluruhan kolesterol yang digunakan setiap
harinya kurang lebih 1gram (Koolman 2000).
Biosintesis kolesterol dimulai dengan asetil-
KoA. Biosintesis kolesterol dapat dibagi menjadi
empat bagian, antara lain pembentukan
mevalonat, pembentukan isopentenil difosfat,
pembentukan skualen, dan pembentukan
kolesterol (Koolman 2000) (Gambar 3). Selain
itu, kolesterol yang berasal dari makanan akan
dialirkan melalui darah. Jika kolesterol
dihidrolisis lebih lanjut maka akan menjadi
asama empedu dan garam-garamnya (dalam hati)
dan menjadi hormon steroid (dalam kelenjar
endokrin) (Marks et al. 2000).
Awalnya biosintesis kolesterol dimulai dari
perubahan asetil KoA menjadi asetoasetil KoA
kemudian berubah menjadi 3-hidroksi 3-
metilglutaril-KoA (3-HMG-KoA). Peristiwa ini
terjadi bukan di mitokondria melainkan pada
retikulum endoplasma (Koolman 2000).
Selanjutnya 3-HMG-KoA akan direduksi
menjadi mevalonat dengan cara melepaskan
KoA. Enzim yang berperan dalam tahap ini
adalah HMG-KoA reduktase. Tahap selanjutnya,
mevalonat akan didekarboksilasi menjadi
isopentenil difosfat dengan menggunakan ATP
(adenosin trifosfat). Dengan demikian akan
dihasilkan komponen yang membentuk
isoprenoid. Isopentenil difosfat akn dibentuk
menjadi dimetilalil difosfat melalui isomerisasi.
Kedua molekul C5 ini akan berkondensasi
menjadi geranil difosfat dan melalui adisi satu
isopentenil difosfat lainnya menjadi farnesil
difosfat. Farnesil difosfat akan berubah menjadi
skualen. Selanjutnya skualen dapat diubah bentuk
menjadi siklik dan akan menghasilkan lanosterol.
Kemudian langkah selanjutnya, lanosterol akan
dilepaskan gugus metil sebanyak tiga gugus
secara oksidatif, sehingga akan terbentuk suatu
produk akhir, yaitu kolesterol. Tahap lebih lanjut
dari perombakan kolesterol atau katabolisme
kolesterol akan menghasilkan asam empedu dan
hormon steroid.
Kolesterol memiliki sifat tidak larut dalam
air. Oleh sebab itu, zat ini akan diangkut dalam
darah sebagai komponen lipoprotein darah.
Kolesterol dalam makanan diserap dari garam
empedu ke dalam sel epitel usus. Kolesterol
terkemas dalam kilomikron di usus dan dalam
VLDL di hati (Mark et al. 2000). Kilomikron di
usus akan dibawa ke darah melalui limfe.
Selanjutnya kilomikron akan berubah menjadi
asam lemak dan gliserol dengan bantuan enzim
lipoprotein lipase serta menghasilkan sisa
kilomikron. Kilomikron sisa akan berikatan
dengan reseptor di sel hati dan mengalami
internalisasi melalui endositosis. Setelah dibentuk
di hati akan berubah menjadi VLDL yang akan
disekresikan ke dalam darah selanjutnya akan
berubah menjadi IDL dan hidrolisis lebih lanjut
4
dari IDL akan menghasilkan LDL. LDL yang
terbentuk akan menyediakan kolesterol bagi
jaringan (Koolman 2000). Jika terjadi kelebihan
kolesterol di jaringan maka HDL akan membawa
kembali ke hati.
Gambar 3 Biosintesis kolesterol
Obat Penurun Kolesterol
Hipolipidemik adalah obat yang digunakan
untuk menurunkan kadar lipid plasma (Syarif et
al 2003). Tindakan menurunkan lipid plasma
merupakan salah satu tindakan yang ditujukan
untuk menurunkan risiko aterosklerosis. Obat-
obatan penurun kolesterol yang dijual secara
komersial sudah banyak jenisnya di pasaran.
Obat penurun kolesterol tersebut dapat dibagi
menjadi empat golongan, yaitu a) resin pengikat
empedu yang bekerja dengan cara mengikat asam
empedu di usus dan meningkatkan pembuangan
LDL dari aliran darah, contoh obat ini adalah
kolesteramin dan kolestipal, b) penghambat
sintesis lipoprotein yang bekerja dengan cara
mengurangi kecepatan pembentukan VLDL dan
meningkatkan HDL, contoh obat ini adalah
niasin, c) penghambat HMG-KoA reduktase atau
golongan statin yang bekerja dengan cara
menghambat secara kompetitif enzim HMG-KoA
reduktase, contoh obat ini adalah fluvastatin,
lovastatin, pravastatin, simvastatin, dan
atorvastatin, yang terakhir d) derivat asam fibrat
yang bekerja dengan cara meningkatkan aktivitas
lipoprotein lipase, contoh obat ini adalah
siprofibrat, simfibrat, bezafibrat, klofibrat,
fenofibrat, dan gemfibrosil. Pada penelitian ini
obat penurun kolesterol yang digunakan dari
golongan penghambat HMG-KoA reduktase atau
golongan statin, yaitu lovastatin.
Lovastatin
Lovastatin merupakan salah satu obat
penurun kolesterol golongan statin (Albert 1989).
Lovastatin sebagai agen hipokolesterolemik
mampu menurunkan kadar serum kolesterol,
LDL, trigliserol dan VLDL dalam darah (Albert
1989). Obat golongan ini sangat efektif untuk
mengobati hiperlipidemia karena merupakan
inhibitor kompetitif dari 3-hidroksi-3-
metilglutaril-koenzim-A (HMG-KoA) reduktase
(Goodman dan Gilmans 2001 dalam Rahayu

2007). Lovastatin merupakan agen penurun
kolesterol yang diisolasi dari Aspergillus terreus
(Merck 2005).
Lovastatin memiliki rumus umum C24H36O5
yang berbentuk serbuk kristal non higroskopik
berwarna putih dan tidak larut dalam air akan
tetapi larut dalam etanol, metanol, dan asetonitril.
Lovastatin adalah senyawa nonpolar.
Berdasarkan strukturnya lovastatin memiliki satu
bentuk cincin lakton yang sewaktu-waktu dapat
terhidrolisis jika bereaksi dengan asam (Gambar
4). Selain itu lovastatin juga memiliki bentuk
ester dan mempunyai ikatan yang terkonjugasi.
Lovastatin sering ditambahkan unsur aditif antara
lain selulosa, laktosa, magnesium stearat dan pati.
Butilat hidroksianisol (BHA) ditambahkan dalam
lovastatin sebagai bahan pengawet (Merck 2005).
Obat golongan statin ini dapat menurunkan
biosintesis kolesterol dengan cara menghambat
secara kompetitif enzim HMG-KoA reduktase.
Enzim ini merupakan enzim yang mengkatalisis
konversi HMG-KoA menjadi mevalonat, suatu
prekursor sterol, termasuk kolesterol. Efek
tersebut dapat meningkatkan katabolisme
fraksional LDL maupun ekstraksi prekursor LDL
oleh hati, sehingga mengurangi simpanan LDL
plasma. Oleh sebab itu, ekstraksi lintas pertama
oleh hati dari obat tersebut cukup besar, maka
efek utamanya terjadi di hati (Katzung 2002).
Selain obat penurun kolesterol, dalam
penelitian ini juga digunakan senyawa bahan
alam sebagai penurun kolesterolnya. Senyawa
bahan alam saat ini sangat disukai. Obat-obatan
alami yang digunakan pada penelitian ini adalah
ekstrak daun jati belanda.
Gambar 4 Struktur kimia lovastatin.
Jati Belanda (Guazuma ulmifolia Lamk.)
Jati belanda merupakan tumbuhan yang
berasal dari Amerika beriklim tropis. Pohon jati
belanda ini mungkin didatangkan oleh bangsa
Portugis dan di tanam di Jawa sebagai peneduh.
Jati belanda atau jati londo (Jawa tengah) tumbuh
baik pada ketinggian 1-800 m di atas permukaan
laut. Klasifikasi dari tumbuhan jati belanda, yaitu
divisi Spermatophyta, subdivisi Angiospermae,
kelas Dicotyledonae, bangsa Malvales, suku
Steruliaceae, marga Guazuma, dan jenis
Guazuma ulmifolia Lamk.
Tumbuhan jati belanda ini berupa pohon
peneduh yang berada di tepi jalan dengan tinggi
5
10-20 meter. Memiliki batang yang berbentuk
bulat, keras, permukaannya kasar, banyak alur,
bercabang, dan berwarna hijau keputihan. Daun
berbentuk bundar sampai lanset, ujung daun
lancip, serta permukaan daun bagian atas berbulu.
Berbunga banyak, bentuk bunga agak ramping,
serta memiliki mahkota bunga yang berwarna
kuning. Bijinya kecil, keras, diameter ± 2 mm,
berwarna coklat muda, serta memiliki akar
tunggang (Sugati et al 1991). Bentuk tumbuhan
jati belanda dapat dilihat pada Gambar 5.
Kayu jati belanda dapat dipergunakan untuk
pembuatan kertas pada zaman dahulu namun
hasilnya tidak begitu bagus sedangkan saat ini
kayu jati belanda banyak dibuat sebagai meubel.
Daun dan kulit batang jati belanda mengandung
alkaloid, serta flavonoid, Selain itu, daunnya
mengandung saponin dan tanin. Menurut Soesilo
(1989) daun jati belanda mengandung senyawa
flavonoid, asam fenolat, tanin, steroid,
triterpenoid, dan karotenoid. Komposisi tersebut
sesuai dengan hasil penelitian Tombilangi (2004)
yang menyatakan bahwa ekstrak etanol daun jati
belanda mengandung flavonoid. Daun jati
belanda dapat bermanfaat sebagai pelangsing
tubuh, sehingga simplisia tanaman ini banyak
digunakan di dalam ramuan tradisional jamu
galian singset. Lestari dan Muhtadi (1997) yang
menunjukkan bahwa pemberian ekstrak etanol
daun jati belanda sebanyak 1 g/kg bobot badan
pada tikus hiperlipidemia mampu menurunkan
kadar kolesterolnya. Namun, hal ini berbeda pada
hasil penelitian yang dilakukan Rachmadani
(2001) menunjukkan bahwa tikus yang diberikan
ekstrak air daun jati belanda sebanyak 1 g/kg
bobot badan tidak menunjukan penurunan kadar
kolesterol.
Pemakaian rebusan daun jati belanda secara
berlebihan dapat menyebabkan iritasi usus,
sedangkan pemakaian biji tumbuhan jati belanda
secara berlebihan dapat mengakibatkan diare atau
radang usus (Hyene 1987). Rebusan biji
tumbuhan jati belanda yang dibakar dapat
digunakan sebagai obat sembelit, sedangkan jika
dicampur dengan minyak adas dapat digunakan
untuk penyakit perut kembung dan sesak nafas.
Biasanya rebusan biji tumbuhan ini digunakan
oleh masyarakat dengan cara meminumnya
seperti meminum kopi (Hyene 1987).
Gambar 5 Jati Belanda.

Hewan Coba
Kelinci (Oryctolagus cuniculus) merupakan
hewan coba yang sangat penting dan sering
digunakan untuk penelitian terutama untuk
hiperlipidemia (Gambar 6). Kelinci yang banyak
dipelihara di Indonesia saat ini berasal dari
kelinci liar di Eropa, terutama dari derah
Belanda. Menurut Malole (1989) ada dua jenis
kelinci, yaitu kelinci yang berukuran kecil
dengan berat kurang dari 2 kg yang berasal dari
Belanda dan kelinci yang berukuran besar dengan
berat rata-rata 5 kg yang berasal dari Amerika
dan Selandia Baru.
Jenis kelinci yang sering digunakan sebagai
hewan coba adalah bangsa New Zealand White,
California, Dutch Belted, dan Lops. Penelitian
yang berhubungan dengan biomedis yang erat
kaitannya dengan kegiatan seperti diagnosa,
penelitian, dan produksi umumnya menggunakan
hewan coba tersebut. Selain itu, penelitian
tentang toksisitas berbagai zat juga menggunakan
kelinci sebagai hewan coba (Malole 1989). Pada
umumnya kelinci yang berukuran besar sering
digunakan untuk produksi antiserum, sedangkan
kelinci yang berukuran kecil lebih efisien jika
digunakan untuk uji-uji kualitatif.
Kelinci memiliki kemampuan bertahan yang
tinggi dalam berbagai macam cuaca namun
perkembangannya akan lebih baik pada daerah
yang memiliki iklim sedang. Sifat kelinci sangat
unik, yaitu dapat memakan kotorannya sendiri.
Kotoran kelinci dibagi dua, yaitu kotoran yang
dikeluarkan pada siang hari dan kotoran yang
dikeluarkan pada malam hari. Kotoran yang
dikeluarkan pada malam hari terlihat lebih lunak
dan berlendir, serta banyak mengandung vitamin.
. Kelinci jantan memiliki berat badan 1.5-7.0
kg dan memiki angka harapan hidupnya antara 5-
10 tahun (Smith 1988). Kecepatan tumbuh 15-20
g/hari hingga umur 8 minggu dan 100-150
g/minggu hingga umur 26 minggu. Setiap hari
seekor kelinci minum 80-100 ml air/kg berat
badan (Smith 1988).
Kelinci sangat mudah terkena berbagai
penyakit. Ketika sudah terserang penyakit kelinci
tersebut akan sulit sembuh. Hal ini sangat
mengganggu jika terjadi saat kelinci yang
digunakan adalah untuk penelitian. Namun ada
beberapa cara untuk mencegah penyakit pada
kelinci, yaitu akomodasi yang baik, makanan
tersedia terus-menerus, dan pemeriksaan berkala.
Darah kelinci dapat diambil dari pembuluh
darah vena atau arteri telinga dengan
menggunakan jarum suntik berukuran 23-25
gauge. Selain itu, pengambilan darah dapat
dilakukan dari jantung, cara ini biasanya
dilakukan untuk mengambil darah dalam jumlah
yang sangat besar dan kelinci yang digunakan
tidak diperlukan lagi untuk penelitian yang lebih
lanjut. Saat ingin diambil darahnya, kelinci
terlebih dahulu dipuasakan kurang lebih selama
6
16-18 jam. Volume darah pada kelinci adalah 45-
80 ml/kg berat badan dengan kandungan
kolesterol normal 10-80 mg/dl volume plasma
darah (Smith 1988). Induksi obat atau senyawa-
senyawa lainnya dapat dilakukan dengan cara
subcutan atau di bawah kulit.
Kelinci yang digunakan dalam penelitian ini
merupakan kelinci galur New Zealand White.
Dalam penelitian ini pakan yang diberikan
merupakan pakan standar berbentuk pelet yang
diberi tambahan kolesterol yang berasal dari
kuning telur. Pakan yang mengandung kolesterol
tersebut dapat membuat kelinci peka, sehingga
kelinci tersebut akan mengalami penumpukan
lipid atau hiperlipidemia. Hiperlipidemia adalah
salah satu penyebab aterosklerosis.
Aterosklerosis dapat ditimbulkan oleh makanan
yang mengandung kolesterol pada spesies kelinci,
babi, kera, dan manusia (Murray et al 2000). Lain
halnya pada hewan coba tikus, anjing, dan kucing
merupakan hewan yang resisten terhadap pakan
kolesterol. Tiroidektomi atau pengobatan dengan
preparat tiourasil akan memudahkan timbulnya
aterosklerosis pada anjing dan tikus (Murray et al
2000).
Propil tiourasil (PTU) adalah zat antitiroid
yang dapat meningkatkan konsentrasi kolesterol
darah secara endogen dengan cara merusak
kelenjar tiroid. PTU akan menimbulkan kondisi
hipotiroid yang dihubungkan dengan peningkatan
konsentrasi LDL plasma akibat penurunan
katabolisme LDL. Penyebabnya, yaitu pada
hipotiroid terjadi penurunan sintesis dan ekspresi
reseptor LDL di hati, sehingga LDL banyak
beredar di plasma dan menjadi penyebab
hiperkolesterolemia (Salter et al 1991 dalam
Rahayu 2007). Oleh karena itu, hewan coba
kelinci lebih baik digunakan untuk penelitian
hiperlipidemia karena kelinci memiliki kepekaan
terhadap pemberian kolesterol sehingga
memudahkan peneliti.
Gambar 6 Kelinci New Zealand White.

BAHAN DAN METODE
Bahan dan Alat
Hewan percobaan yang akan digunakan
adalah kelinci jantan galur New Zealand White
yang sehat, berumur 4 bulan, dan mempunyai
aktivitas normal, dengan bobot 3- 4 kg. Semua
kelinci diperoleh dari PT. Indo Anilab, Bogor.
Pakan standar kelinci berupa pelet yang
didapat dari Balai Penelitian Ternak, Ciawi,
Bogor. Pada pakan ditambahkan kolesterol yang
didapat dari kuning telur dan minyak kelapa.
Selain itu, pakan saat perlakuan ditambahkan
lovastatin dan ekstrak ramuan yang diperoleh dari
Pusat Studi Biofarmaka (PSB) LPPM IPB.
Kandang yang digunakan adalah kandang
individual yang dialasi dengan penyaring
kotoran. Selain itu kandang juga dilengkapi
dengan tempat minum dan makan.
Bahan-bahan yang digunakan adalah bahan
uji TBA antara lain NaCl dingin 0.9%, KCl
dingin 1.15%, sodium dodesil sulfat (SDS) 8.1%,
NaOH 1 M, asam asetat 20%, asam tiobarbiturat
(TBA) 1.0% dalam pelarut asam asetat 50%,
akuades, n-butanol:piridin (15:1 v/v), serta
1,1,3,3-tetrametoksi propana (TMP) sebagai
larutan standar.
Alat-alat yang digunakan adalah alat-alat
gelas, mikropipet, syringe, neraca analitik,
vorteks, penangas air, kuvet, spektrofotometer
gyneses, homogenizer, pH meter, pengaduk
magnetik dan sentrifus klinis.
Metode Penelitian
Hewan Coba dan Rancangan Percobaan
Hewan coba yang digunakan adalah kelinci
New Zealand White berjenis kelamin jantan,
sehat, dan beraktivitas normal. Kelinci sebanyak
24 ekor dibagi menjadi empat kelompok yang
masing-masing terdiri dari 6 ekor kelinci. Kelinci
diadaptasikan selama dua minggu dengan diberi
pakan standar sebelum diberi pakan perlakuan
agar cara hidup dan makanannya menjadi
seragam. Pada minggu ketiga, kelinci diberi
pakan sesuai dengan kelompoknya masing-
masing.
Kelompok kelinci ditentukan berdasarkan
kesamaan bobot badannya. Ada empat kelompok
kelinci, yaitu kelompok I (normal), kelompok II
(hiperlipidemia), kelompok III (ramuan jati
belanda), dan kelompok IV (lovastatin).
Kelompok I diberi pakan standar, kelompok II
diberi pakan kolesterol, kelompok III diberi
pakan perlakuan (campuran pakan kolesterol dan
ramuan jati belanda), dan kelompok IV diberi
pakan kolesterol yang telah bercampur dengan
lovastatin (dosis 0.57 mg/kg BB). Seluruh
kelompok akan diberikan makan dengan
pakannya masing-masing setiap pagi hari dari
7
minggu ke-3 hingga minggu ke-10 dan diberi
minum akuades. Kelompok normal diberi pakan
standar sebanyak 150 g/ekor/hari; kelompok
hiperlipidemia diberikan pakan kolesterol, yaitu
campuran pakan standar, 0.5% kolesterol dari
tepung kuning telur dan 5% minyak kelapa
sebanyak 150 g/ekor/hari; kelompok perlakuan
diberi pakan dengan campuran pakan kolesterol
dan ramuan daun jati belanda sebanyak 80
g/ekor/hari pada pagi hari, kemudian pada sore
harinya diberi pakan dengan campuran pakan
kolesterol sebanyak 70 g/ekor/hari; kelompok
lovastatin diberi pakan dengan campuran pakan
kolesterol dan lovastatin sebanyak 80 g/ekor/hari
pada pagi hari dan 70 g/ekor/hari pakan
kolesterol pada sore hari.
Pembuatan Ekstrak Ramuan Daun Jati
Belanda
Daun jati belanda dicuci bersih dan
dikeringkan dalam oven. Setelah kering, bahan
tersebut diekstraksi dengan pelarut etanol 70%
secara maserasi. Hasil dari maserasi tersebut
diuapkan dengan rotary evaporator. Campuran
ekstrak etanol daun jati belanda dicampurkan
dengan bahan lainnya yang dibuat sesuai
formulasi dari PSB.
Pembuatan Pakan Kolesterol
Pakan kolesterol yang digunakan dalam
penelitian ini dibuat dari kuning telur ayam.
Pakan kolesterol dibuat dari 0.5% kolesterol (dari
kuning telur ayam), 5% minyak kelapa, dan
pakan standar sampai 100%. Pakan standar di
dapat dari Balai Penelitian Ternak Ciawi, Bogor.
Semua bahan dicampur merata dan dibentuk
menjadi seperti pelet.
Tepung kolesterol dibuat dari kuning telur
ayam yang dikeringkan dengan metode Momuat
et al (2001) yang telah dimodifikasi. Rebus telur
ayam selama 30 menit atau sampai matang,
kemudian kuning telurnya dipisahkan dari putih
telurnya. Kuning telur yang telah matang,
dilumatkan diatas loyang sampai menjadi bubuk.
Kemudian diratakan tipis diatas loyang dan
dikeringkan dalam oven pada suhu 65 °C selama
24 jam. Bubuk kuning telur yang telah kering
diblender agar semakin halus.
Pembuatan Pakan Ramuan Jati Belanda
Pakan yang akan digunakan merupakan
pakan kolesterol yang ditambahkan dengan
ramuan daun jati belanda pada komposisi
tertentu. Semua bahan tersebut dicampurkan
secara merata dan dibentuk seperti pelet. Dosis
tidak dapat disebutkan karena terkait dengan
kepentingan hak paten dari mitra industri yang
bekerjasama dalam penelitian ini.
 8

Pengukuran Lipid Peroksida (Yagi 1994) HASIL DAN PEMBAHASAN

Kurva standar dibuat dengan menggunakan
larutan stok pereaksi 1,1,3,3-tetrametoksi Masa Adaptasi dan Bobot Badan Hewan Coba
propana (TMP) 6 M yang diencerkan dengan
Bobot badan kelinci dibagi menjadi dua, yaitu
akuades menjadi 0.75, 1.5, 3.0, 6.0, dan 9.0 μM.
bobot badan selama adaptasi dan bobot badan
Larutan masing-masing konsentrasi dipipet
selama perlakuan. Selama masa adaptasi semua
sebanyak 4 ml ke dalam tabung reaksi. Lalu
kelinci pada setiap kelompok perlakuan
masing-masing tabung ditambahkan 1 ml TBA
mengalami kenaikan bobot badan, walaupun
1.0% dalam pelarut asam asetat 50%, dipanaskan
hanya diberikan pakan standar. Bobot badan rata-
di penangas air mendidih pada suhu 95 °C selama
rata kelinci selama masa adaptasi pada minggu
60 menit, kemudian didinginkan pada suhu
pertama dan kedua nilainya ditunjukkan pada
kamar. Selanjutnya pada masing-masing tabung
Tabel 1. Dari nilai tersebut bobot badan rata-rata
ditambahkan 1.0 ml akuades dan 5 ml n-
kelinci selama masa adaptasi berkisar 3 kg.
butanol:piridin (15:1 v/v), diaduk dengan vorteks,
Berdasarkan uji ANOVA, bobot badan kelinci
lalu disentrifugasi pada kecepatan 3000 rpm
selama masa adaptasi tidak berbeda nyata
selama 15 menit. Lapisan atas yang terbentuk
(P<0.05). Artinya, bobot badan kelinci selama
pada larutan diambil, lalu serapannya diukur pada
minggu pertama dan kedua adaptasi diperoleh
panjang gelombang 532 nm dengan
hasil yang tidak nyata atau tidak signifikan
spektrofotometer.
pengaruh bobot badan terhadap kelompok
Pengukuran kadar lipid peroksida hati
perlakuannya.
dilakukan pada akhir perlakuan. Sebanyak 1-2 g
Hal tersebut bisa terjadi karena pada awal
hati disimpan dalam larutan NaCl dingin 0.9%.
adaptasi, kelinci selama dua minggu
Hati segar dibuat 10%b/v homogenat hati dalam
diadaptasikan dengan lingkungan. Selain itu,
larutan KCl dingin 1.15%. lalu diambil sebanyak
kelinci diberikan kandang individual serta
0.1 mL homogenat ke dalam tabung reaksi.
diberikan pakan standar dan minum pada setiap
Selanjutnya ke dalam tiap tabung ditambahkan
kelinci. Hal ini dilakukan agar kelinci terhindar
0.2 mL SDS 8.1% dan 1.5 mL asam asetat 20%,
dari stres dan mengamati kondisi kelinci tersebut
serta diatur pHnya dari 2.5 menjadi pH 3.5 oleh
apakah masih dapat dipergunakan selama
NaOH 1 M dengan menggunakan pH meter.
penelitian. Pakan standar yang diberikan pada
Kemudian ditambahkan 0.7 mL akuades dan 1.5
setaip kelinci sebanyak 150 gram/ekor.
mL TBA 1.0% dalam pelarut asam asetat 50%
Penimbangan hewan coba dilakukan setiap dua
dan dipanaskan ke dalam penangas air mendidih
minggu sekali dan sebelum melakukan
pada suhu 95 °C selama 60 menit. Setelah
penimbangan kelinci dipuasakan terlebih dahulu.
dipanaskan selanjutnya didinginkan pada suhu
Hal ini dilakukan untuk mengecek kondisi kelinci
ruang. Lalu tiap tabung ditambahkan 1 mL
tersebut baik dalam hal kesehatan dan kebersihan
akuades dan 5 mL n-butanol:piridin (15:1 v/v),
selama berlangsungnya penelitian.
diaduk dengan vorteks, disentrifus pada
Bobot badan rata-rata kelompok I, II, III, dan
kecepatan 4000 rpm selama 10 menit,dan diambil
IV dari minggu ke-2 hingga minggu ke-10
lapisan atasnya, lalu diukur serapannya dengan
nilainya dapat dilihat dalam Tabel 2. Maka,
spektrofotometer pada panjang gelombang 532
berdasarkan tabel dibawah ini rata-rata bobot
nm.
badan kelinci, yaitu sebesar 3 kg. Bobot badan
tersebut tidak jauh berbeda dengan bobot badan
Analisis Statistik (Mattjik & Sumertajaya
selama adaptasi. Berdasarkan pengujian statistika
2000)
tidak ada perbedaan yang nyata dalam bobot
Hasil yang didapatkan dianalisis dengan
badan kelinci selama perlakuan terhadap
menggunakan rancangan acak lengkap (RAL).
kelompok perlakuannya. Selama perlakuan bobot
Model rancangan tersebut adalah:
badan kelinci mengalami kenaikan, namun pada
Yij = μ + τi + εij
kelompok IV yang diberikan lovastatin terlihat
Keterangan:
mengalamin sedikit penurunan pada minggu
μ = pengaruh rataan umum keenam (Gambar 7)(P<0.05).
τi = pengaruh rataan ke-i, i=1, 2, 3, 4
εij = pengaruh galat perlakuan ke-i dan Tabel 1 Bobot badan kelinci selama adaptasi
ulangan ke-j, j= 1, 2, 3, 4, 5,6,7,8
Kelompok Bobot badan Bobot badan
Yij = pengamatan perlakuan ke-i dan ulangan
minggu-1 minggu-2
ke-j
Data yang telah diperoleh dianalisis dengan
(kg) (kg)
ANOVA (analysis of variance) pada selang I 3.03±0.53 3.12±0.45
kepercayaan 95% dan taraf α 0.05, uji lanjut II 2.93±0.53 3.13±0.50
yang digunakan adalah uji Duncan. Semua data III 3.06±0.37 3.17±0.31
dianalisis dengan program SAS. IV 2.98±0.50 3.16±0.45

Tabel 2 Bobot badan kelinci selama perlakuan
Kelompok
Minggu-2
I 3.12±0.51
II 3.23±0.51
III 3.05±0.24
IV 3.16±0.29
4 minggu dan kelompok kolesterol 1% selama 12
B o b o t B a d a n (K g )
3
2
1 Lovastatin
0 Hiperlipidemia
-4 -2 0 2 4 6
Minggu Ke-
Kurva Bobot Badan Selama Percobaan
Gambar 7 Bobot badan selama adaptasi dan
perlakuan.
Hal tersebut dapat terjadi karena pemberian
pakan pada setiap kelompok berbeda dengan
awal adaptasi. Pakan yang diberikan masih dalam
jumlah 150 gram/ekor, namun ada perbedaan
pada kelompok yang diberikan lovastatin dan
ramuan jati belanda. Pada kelompok lovastatin
dan ramuan pakan yang diberikan secara dua
tahap dengan perbandingan 80 gram/ekor dan 70
gram/ekor pada setiap harinya. Hal ini mungkin
berpengaruh terhadap stres kelinci terhadap
lingkungannya.
Penelitian yang dilakukan oleh Alviani
(2007) menyatakan bahwa setelah pemberian
pakan kolesterol tinggi bobot badan tikus
meningkat sebesar 25% secara nyata
dibandingkan saat kondisi adaptasi sedangkan
bobot badan tikus normal meningkat sebesar 13%
secara tidak nyata dibandingkan dengan keadaan
adaptasi. Namun secara statistika pada kelompok
perlakuan (pemberian ekatrak daun jati belanda),
bobot badan hingga akhir percobaan tidak
berbeda nyata dibandingkan dengan kelompok
hiperlipidemia selama perlakuan (Alviani 2007).
Perbedaan tersebut terjadi karena penelitian
yang dilakukan Alviani memakai hewan coba
tikus sedangkan penelitian ini menggunakan
hewan coba kelinci. Selain itu, kolesterol yang
dipakai dalam penelitian ini sebesar 0.5%
sedangkan penelitian Alviani memakai 0.25%
serta hewan coba tikus diinduksi dengan PTU
terlebih dahulu untuk membuat hewan model
menjadi hiperlipidemia sehingga terjadi stres
pada tikus. Dalam penelitian lain yang dilakukan
oleh Kainuma (2006) menyatakan bahwa tidak
ada perbedaan yang signifikan dalam bobot
badan kelinci putih jepang antara kelompok
normal, kelompok kolesterol 1% selama 8
9
Bobot badan (kg)
Minggu-4 Minggu-6 Minggu-8 Minggu-10
3.18±0.50 3.19±0.48 3.21±0.45 3,25±0.39
3.30±0.37 3.28±0.39 3.27±0.35 3.28±0.52
3.13±0.34 3.11±0.31 3.06±0.39 3.17±0.34
3.03±0.29 2.87±0.39 3.02±0.32 3.19±0.35
minggu. Penelitian tersebut mendukung hasil
penelitian yang dilakukan ini, meskipun ada
perbedaan antara lain pemberian jumlah
Normal
kolesterol dan jenis kelinci yang digunakan.
Hiperlipidemia
Perbandingan Konsentrasi Lipid Peroksida
Ekstrak Hati Kelinci Normal dengan Kelinci
8 10
Salah satu perlakuan yang bisa digunakan
untuk memicu terjadinya lipid peroksida adalah
dengan mengurangi konsumsi vitamin E, vitamin
C, dan β-karoten serta kondisi hiperglikemia
(Winarsi 2007). Dalam penelitian kali ini, untuk
menstimulasi terjadinya lipid peroksida
digunakan cara diet lemak tinggi atau
hiperkolesterolemia.
Pemberian pakan kolesterol 0.5% menaikan
konsentrasi lipid peroksida hati sebesar 209.20%
dibandingkan dengan konsentrasi lipid peroksida
hati normal atau meningkat dua kali lipat
dibandingkan normal. Konsentrasi lipid
peroksida hati kelinci normal dan hati kelinci
hiperlipidemia berturut-turut sebesar
109.763±41.48 nmol/g bobot hati dan
339.382±86.66 nmol/ g bobot hati (Gambar 8).
Berdasarkan uji statistika, nilai tersebut secara
nyata sangat berpengaruh atau sangat signifikan
jika dibandingkan antara nilai lipid peroksida
hiperlipidemia dengan normal. Maka pemberian
pakan standar yang ditambahkan kolesterol 0.5%
dan minyak kelapa 5% mempengaruhi kenaikan
lipid peroksida hati. Hal ini sesuai dengan
penelitian yang dilakukan Alviani (2007) bahwa
konsentrasi lipid peroksida hati kelompok
hiperlipidemia yang diberi pakan kolesterol
sebesar 0.25% lebih besar lima kali secara
bermakna dari pada kelompok normal. Selain itu,
Kainuma (2006) menyatakan bahwa tingkat lipid
peroksida pada jaringan hati kelompok kolesterol
1% selama 12 minggu lebih tinggi dari kelompok
kolesterol 1% selama 8 minggu ataupun
kelompok normal. Berdasarkan penelitian
tersebut semakin lama waktu pemberian diet
lemak tinggi maka konsentrasi lipid peroksida
pada jaringan hati akan semakin meningkat.
Senyawa lipid peroksida lebih banyak
didalam jaringan jika dibandingkan dengan
didalam darah (Yagi et al 1994). Hal ini sesuai
dengan penelitian Adji (2004) yang menyatakan
bahwa konsentrasi lipid peroksida darah dalam

keadaan normal sekitar 0.46 ng/ml. Selain itu,
penelitian Kainuma (2006) menyatakan bahwa
tingkat lipid peroksida plasma kelompok
kolesterol 1% selama 8 minggu lebih besar
daripada kelompok kolesterol 1% selama 12
minggu maupun kelompok normal. Jika
dibandingkan dengan lipid peroksida dalam hati,
nilai konsentrasi lipid peroksida darah jauh lebih
kecil. Hal ini terjadi karena terdapat senyawa
radikal bebas seperti radikal hidroperoksil
(HO2•), radikal superoksida (O2•) dan hidroksil
radikal (OH•) yang dibentuk dalam sel sebagai
senyawa antara dari reaksi transport elektron di
mitokondria sel hati sehingga akan lebih mudah
menyerang jaringan ekstrahepatik (Winarsi
2007).
500 A Konsentrasi lipid peroksida pada hati kelinci
k o n s e n tra s i L P O
400
( n m o l/g )
300
200 B diberikan lovastatin sebesar 49.06% jika
100
0 secara statistika nilai tersebut secara nyata dapat
normal hiper
kelompok
Gambar 8 Konsentrasi lipid peroksida hati
kelinci normal dan kelinci
hiperlipidemia.
Perbandingan Konsentrasi Lipid Peroksida
Hati Kelinci Ramuan Jati Belanda dan
Lovastatin dengan Hiperlipidemia
Perlakuan terhadap kelinci yang diberi diet
lemak tinggi akan mengakibatkan kelinci menjadi
hiperlipidemia. Oleh karena itu, kelinci tersebut
akan diberikan senyawa yang akan menurunkan
kadar lemak tersebut antara lain ramuan daun jati
belanda dan lovastatin.
Konsentrasi lipid peroksida hati kelinci yang
diberikan ramuan daun jati belanda sebesar
139.722±25.79 nmol/gram bobot hati (Gambar
9). Penurunan konsentrasi lipid peroksida hati
kelinci tersebut sebesar 58.83% secara nyata
dibandingkan konsentrasi lipid peroksida hati
kelinci hiperlipidemia. Hal ini tidak sesuai
dengan penelitian yang dilakukan oleh Alviani
(2007) yang menyatakan bahwa penurunan
konsentrasi lipid peroksida hati yang diberi
ramuan ekstrak daun jati belanda dengan satu kali
dosis dan dua kali dosis tidak berbeda nyata
dengan kelompok hiperlipidemia. Perbedaan ini
terjadi karena penelitian terdahulu menggunakan
hewan coba tikus sedangkan saat ini
menggunakan kelinci. Hal ini mungkin terjadi
karena tikus tidak memiliki kantung empedu
sehingga kolesterol yang menumpuk di hati akan
dibuang melalui usus ke fesesnya, sedangkan
10
kelinci memiliki empedu maka kolesterol yang
menumpuk di hati akan dihidrolisis lebih lanjut
menjadi asam empedu.
Penurunan konsentrasi lipid peroksida ini
menunjukkan bahwa ramuan daun jati belanda
mampu menurunkan lemak sehingga ramuan
daun jati belanda terbukti efektif untuk
menurunkan oksidasi lipid pada hewan coba
tersebut. Hal ini didukung oleh penelitian
Mahendra (2005) menyatakan bahwa jati belanda
memiliki efek farmakologis seperti menghentikan
diare dan peluruh lemak. Penurunan konsentrasi
lipid peroksida ini mungkin terjadi karena
adanya senyawa-senyawa bioaktif yang
terkandung didalam daun jati belanda seperti
tanin, steroid, flavonoid, musilago yang mampu
menurunkan lipid dalam darah.
yang diberikan lovastatin sebesar 172. 893±37.26
nmol/gram bobot hati (Gambar 9). Penurunan
konsentrasi lipid peroksida hati kelinci yang
dibandingkan dengan hiperlipidemia. Artinya,
menurunkan konsentrasi lipid peroksida hati
kelinci. Hasil tersebut sesuai dengan penelitian
Jorge (2005) yang menyatakan bahwa obat
golongan statin mampu menurunkan secara nyata
lipid peroksida dari LDL teroksidasi maupun
normal. Maka, menurunnya konsentrasi lipid
peroksida hati seiring dengan fungsi obat
golongan statin yaitu menurunkan kolesterol
LDL dan trigliserda dalam tubuh. Penurunan
konsentrasi lipid peroksida yang dibarengi
dengan menurunnya lemak didalam tubuh ada
kaitannya dengan fungsi lain obat golongan statin
dalam hal ini lovastatin yaitu mengurangi stres
oksidatif. Hasil penelitian ini mendukung
penelitian yang dilakukan Rosenson (2004) yang
menyatakan bahwa obat golongan statin mampu
mengurangi pembentukan superoksida-NADPH
melalui cell line turunan monosit di dalam kultur
serta mampu mengurangi tingkat radikal
superoksida yang efeknya hanya dapat
diterangkan secara parsial oleh suatu
pengurangan dalam kolesterol LDL.
500
450 A
400
konsentrasi LPO (nmol/g)
350
300
250
B
200
B
150
100
50
0
hiper ramuan lov
k elom pok
Gambar 9 Konsentrasi lipid peroksida hati
kelinci hiperlipidemia, ramuan dan
lovastatin.

SIMPULAN DAN SARAN
Perlakuan selama 10 minggu dengan
pemberian pakan kolesterol menaikan konsentrasi
lipid peroksida hati kelinci hiperlipidemia secara
nyata sebesar 209.20% dibandingkan dengan
normal atau dua kali lipat meningkat
dibandingkan normal. Konsentrasi lipid
peroksida hati kelinci yang diberikan ramuan
daun jati belanda dan lovastatin berturut-turut
sebesar 58.83% dan 49.06% dibandingkan
dengan hiperlipidemia. Hasil tersebut
menunjukkan bahwa kedua perlakuan tersebut
dapar menurunkan peroksidasi lipid dan memiliki
aktivitas antioksidan.
Senyawa bioaktif dari ramuan daun jati
belanda perlu diteliti lebih lanjut. Hal ini perlu
dilakukan agar dapat mengetahui dengan pasti
senyawa yang berperan penting dalam
menurunkan konsentrasi lipid peroksida hati
kelinci hiperlipidemia.
DAFTAR PUSTAKA
Mattjik AA, Sumertajaya M. 2000. Perancangan
Percobaan dengan Aplikasi SAS dan
Minitab Jilid I. Bogor: IPB Press.
Adji P. 2004. Daya antioksidasi saponin akar
kuning (Archangelisia flava(L)Merr) sebagai
mekanisme hepatoproteksi pada tikus yang
diberi parasetamol. [Skripsi]. Bogor:
Departemen Kimia FMIPA IPB.
Alviani. 2007. Khasiat ramuan ekstrak daun jati
belanda terhadap peroksidasi lipid hati tikus
hiperlipidemia. [Skripsi]. Bogor:
Departemen Biokimia FMIPA IPB.
Aryantha IP, Widayanti S, Yuanita. 2004.
Eksplorasi fungi deuteromycetes
(Aspergillus sp. dan Penicillium sp.)
penghasil senyawa antikolesterol lovastatin.
[Laporan Penelitian]. Bandung: FMIPA ITB.
Astawan M. 2009. Cegah Hipertensi dengan Pola
Makan. [terhubung berkala]
http://www.depkes.co.id/artikel.html [6
April 2009].
Albert AW. 1989. Lovastatin. Cardiovascular
Drugs Reviews VII. 7: 89-109.
Cantarow A. 1962. Clinical Biochemistry. St.
Louis: SN.
Dalimartha S. 2002. Resep Tumbuhan Obat untuk
Menurunkan Kolesterol. Jakarta: Penebar
Swadaya.
Ganong WF. 2001. Buku Ajar Fisiologi
Kedokteran. Ed-20. Djauhari
Widjajakusumah, penerjemah. Jakarta: EGC.
11
Terjemahan dari: Review of Medicinal
Physiology.
Grundy SM. 1991. Multifactorial etiology of
hypercholesterolemia: Implication for
prevention of coronary heart disease.
Arterioclerosis and thrombosis. 11: 1619-
1635.
Halliwel B, Gutteridge JMC. 1999. Free Radical
in Biology and Medicine. Ed-3. New York:
Oxford University.
Hyene K. 1987. Tumbuhan Berguna Indonesia.
Jilid III. Jakarta: Badan Penelitian dan
Pengembangan Kehutanan Indonesia.
Jorge PAR, Almeida EA, Ozaki MR, Jorge M,
Carneiro A. 2005. Effects of atorvastatin,
fluvastatin, pravastatin, and simvastatin on
endothelial function, lipid peroxidation, and
aortic atherosclerosis in hypercholesterolemic
rabbits. J Cardiology 84:4.
Kainuma et al. 2006. Cholesterol-fed rabbit as a
unique model of nonalcoholic, nonobese,
non-insulin-resistant fatty liver disease with
characteristic fibrosis. J Gastroenterol
41:971-980
Kaplan LA, Pesce AJ. 1989. Clinical Chemistry.
Ed-3. New York: Mosby Tear Book.
Katzung BG. 2002. Farmakologi Dasar dan
Klinik. Jakarta: Salemba Medika.
Terjemahan dari: Basic and Clinical
Pharmacology.
Ketaren S. 1986. Minyak dan Lemak Pangan.
Jakarta: UI Pr.
Koolman J, Rohm KH. 2000. Atlas Berwarna dan
Teks Biokimia. Wanandi S, penerjemah.
Jakarta: Hipokrates. Terjemahan dari: Color
Atlas of Biochemistry.
Lestari, Muchtadi. 1997. Uji aktivitas
antihiperlipidemia daun jati belanda
(Guazuma ulmifolia Lamk.) pada tikus
[laporan penelitian]. Bandung: Universitas
Padjajaran.
Lehninger AL. 1982. Dasar-dasar Biokimia Jilid
II. Thenawidjaja M, penerjemah. Jakarta:
Erlangga. Terjemahan dari: Principles of
Biochemistry.
Mahendra B. 2005. 13 Jenis tanaman Obat
Ampuh. Jakarta: Penebar Swadaya.
Marks DB, Marks AD, Smith CM. 2000.
Biokimia Kedokteran Dasar: Suatu
Pendekatan Klinis. Pendit Bu, penerjemah;
Suyono J, Sadikin V, Mandera LI, editor.
Jakarta: EGC. Terjemahan dari: basic
Medical Biochemistry: A clinical Approach.
 12

Malole MB, Pramono SU. 1989. Penggunaan Taher A. 2003. Peran fitoestrogen kedelai sebagai
Hewan-hewan Percobaan di Laboratorium. antioksidan dalam penanggulangan
Bogor: IPB Pr. aterosklerosis. [tesis]. Bogor: Sekolah
Pascasarjana IPB.
Merck. 2005. Tablets Mevacor® (Lovastatin).
USA: Merck&Co. Tangendjaja A. 1987. Buku Ajar Patologi Klinik.
Jakarta: Universitas Tarumanegara.
MIMS Annual. 2004. Indonesia Index of Medical
Specialties. Ed-16. Indonesia: United Soesilo S. 1989. Vadamekum Bahan Obat Alam.
Business Media. Jakarta: Direktorat Jendral Pengawasan Obat
dan Makanan.
Muhilal. 1991. Teori radikal bebas dalam gizi
dan kedokteran. Cermin Dunia Kedokteran Tombilangi AK. 2004. Khasiat ekstrak daun jati
73: 9-11. belanda (Guazuma ulmifolia Lamk.)
terhadap kadar lipid peroksida darah kelinci
Murray RK, Granner DK, Mayes PA, Rodwell
yang hiperlipidemia. [skripsi]. Bogor:
VW. 1999. Biokimia Harper. Ed ke-24.
Departemen Kimia FMIPA IPB.
Hartanto A, penerjemah. Jakarta: EGC.
Terjemahan dari: Harper’s Biochemistry. Voet D, Voet JG. 1995. Biochemistry. New York:
J Wiley.
Momuat LI, Sulistiyani, Khomsan A, Sajuthi D.
2001. Minyak sawit mempercepat regresi Winarsi H. 2007. Antioksidan Alami dan Radikal
aterosklerosis aorta pada kelinci Bebas. Yogyakarta: Kanisius
hiperkolesterolemia ringan, tetapi tidak pada
[WHO] World Health Organization. 2009.
yang hiperkolesterolemia berat. Media Gizi
Cardiovascular disease.
Keluarga 25: 26-34.
http://www.who/programmesandproject/card
Ohkawa H, Ohishi N, Yagi K. 1979. Assay for iovasculardisease [14 Apr 2009].
lipid peroxide in animal tissue by
Wresdiyati T, Astawan M. 2005. Deteksi secara
thiobarbituric acid reaction. Anal Biochem.
imunohistokimia antioksidan superoksida
95: 351-358.
dismutase (SOD) pada jaringan tikus
Rachmadani. 2001. Ekstrak air daun jati belanda hiperkolesterolemia yang diberi pakan
(Guazuma ulmifolia Lamk.) berpotensi rumput laut. [laporan penelitian]. Bogor:
menurunkan kadar lipid darah tikus strain FKH IPB.
wistar. [skripsi]. Bogor: Jurusan Kimia
Yagi K. 1994. Lipid peroxides and related
FMIPA IPB.
radicals in clinical medicine. Di dalam: Free
Rahayu YS. 2007. Khasiat ekstrak ramuan daun Radicals in Diagnostic Medicine. Amstrong
jati belanda terhadap konsentrasi kolesterol D, penyunting. New York: Plenum Pr.
hati tikus yang hiperlipidemia. [skripsi].
Yomes AT. 2006. Sifat prooksidan dan
Bogor: Departemen Biokimia FMIPA IPB
antioksidan vitamin C dan teh hijau pada sel
Rosenson RS. 2004. Statins in atherosclerosis: khamir Candida sp. berdasarkan peroksidasi
lipid-lowering agents with antioxidant lipid. [skripsi]. Bogor: Departemen Kimia
capabilities. J Atherosclerosis 173: 1-12. FMIPA IPB.
Sayogya AP. 2002. Efek senyawa antioksidan
Bioligical Response Modifier (BRM™)
terhadap kadar lipid peroksida hati tikus.
[skripsi]. Bogor: Departemen Kimia FMIPA
IPB.
Sugati S, Syamsuhidayat, Hutapea JR. 1991.
Inventaris Tanaman Obat Indonesia (I).
Jakarta: Balai Penelitian dan Pengembangan
Kesehatan RI.
Smith JB, Mangkoewidjojo S. 1988.
Pemeliharaan, Pembiakan, dan Penggunaan
Hewan Percobaan di Daerah Tropis.
Jakarta: UI Press.
Syarif et al. 2003. Farmakologi dan Terapi.
Jakarta: UI Press
LAMPIRAN
 14

Lampiran 1 Tahapan penelitian

HEWAN
PERCOBAAN
KELINCI
BERJUMLAH 24
EKOR

NORMAL HIPERLIPIDEMIA HIPERLIPIDEMIA HIPERLIPIDEMIA

+ +
N=6 N=6 LOVASTATIN EKSTRAK
N=6 N=6

PENGAMBILAN DARAH
SELAMA 10 MINGGU

PEMBEDAHAN ORGAN
HATI

ANALISIS LIPID PEROKSIDA

HATI

ANALISIS STATISTIKA
 15

Lampiran 2 Komposisi pakan standar

Komposisi pakan standar kelinci (Rb-12)

Pakan Standar
Komposisi
(% AKG)
Karbohidrat 28,14
Lemak 8,71
Protein 17,01
Serat kasar 12,00
Abu 22,94
Air 11,20
Kalori (kkal) 259,00
 16

Lampiran 3 Bobot badan kelinci (kilogram)

Kelompok Normal
Adaptasi Perlakuan
No Kelinci
-4 0 2 4 6 8 10
12 3,10 3,20 3,00 2,90 2,80 3,05 3,10
13 2,50 2,50 2,70 2,60 2,70 2,55 2,60
18 3,80 3,80 4,00 4,00 4,00 3,95 3,80
22 3,50 3,40 3,40 3,50 3,50 3,30 3,40
53 2,60 2,90 2,90 3,00 3,05 3,20 3,30
55 2,70 2,90 3,00 3,10 3,10 3,20 3,30
Rataan 3,03 3,12 3,17 3,18 3,19 3,21 3,25
Stdev 0,53 0,45 0,47 0,50 0,48 0,45 0,39

Kelompok
Hiperlipidemia
Adaptasi Perlakuan
No Kelinci
-4 0 2 4 6 8 10
11 3,40 3,60 3,60 3,70 3,60 3,50 3,50
16 3,70 3,00 4,00 3,80 3,90 3,85 3,90
17 2,80 3,80 2,80 2,90 3,00 2,90 2,90
21A 2,30 2,60 2,80 3,00 2,90 3,00 Dibedah
24 2,50 2,60 2,80 3,10 3,10 3,10 2,80
52 2,90 3,20 3,40 3,30 3,15 3,25 Dibedah
Rataan 2,93 3,13 3,23 3,30 3,28 3,27 3,28
Stdev 0,53 0,50 0,51 0,37 0,39 0,35 0,52

Kelompok Lovastatin
Adaptasi Perlakuan
No Kelinci
-4 0 2 4 6 8 10
6 3,15 3,10 3,00 3,00 2,90 3,00 3,10
7 3,40 3,60 3,40 3,00 2,60 2,80 3,00
8 3,10 3,00 3,10 3,10 3,10 3,20 3,20
20 3,70 3,80 3,60 3,60 3,60 3,65 3,80
21B 2,30 2,50 2,80 2,70 2,70 2,70 2,70
48 2,60 3,30 3,30 3,00 2,40 2,90 3,40
50 2,60 2,80 2,90 2,80 2,80 2,90 3,10
Rataan 2,98 3,16 3,16 3,03 2,87 3,02 3,19
Stdev 0,50 0,45 0,29 0,29 0,39 0,32 0,34

Kelompok Ramuan Jati

Belanda
Adaptasi Perlakuan
No Kelinci
-4 0 2 4 6 8 10
10 3,25 2,80 2,70 2,60 2,65 2,50 2,60
14 3,00 3,30 3,10 3,10 2,90 2,80 3,00
15 2,90 3,10 3,20 3,10 3,10 3,00 3,30
19 3,70 3,70 2,80 3,60 3,50 3,30 3,20
47 2,80 3,00 3,20 3,00 3,10 3,15 3,30
49 2,70 3,10 3,30 3,40 3,40 3,60 3,60
Rataan 3,06 3,17 3,05 3,13 3,11 3,06 3,17
Stdev 0,37 0,31 0,24 0,34 0,31 0,39 0,34
 17

Lampiran 4 Hasil kurva standar TMP

25/11/2008
Konsentrasi A kurva standar
A1 A2
(µM) rataan
1,400
0.00 0.000 0.000 0.000
1,200
0.75 0.093 0.099 0.096 1,000
1.50 0.157 0.173 0.165

absorbansi
0,800
3.00 0.244 0.337 0.291 0,600 y = 0,1316x - 0,0212
R2 = 0,9948
6.00 0.579 0.727 0.653 0,400
0,200
9.00 1.019 1.202 1.111
0,000
-0,2000,00 2,00 4,00 6,00 8,00 10,00

konsentrasi (µM)

29/11/2008
Konsentrasi A
A1 A2 kurva standar
(µM) rataan
0.00 0.000 0.000 0.000 2,000
0.75 0.139 0.152 0.146

absorbansi
1,500
1.50 0.199 0.288 0.244 1,000 y = 0.2072x - 0.0025
3.00 0.464 0.615 0.540 0,500 R2 = 0.9983
6.00 0.631 1.295 0.963 0,000
9.00 1.396 1.831 1.614 0,00 5,00 10,00

konsentrasi (µM)

4/12/2008
Konsentrasi A kurva standar
A1 A2
(µM) rataan 1,600
y = 0,1594x - 0,0402
0.00 0.000 0.000 0.000 1,400
R2 = 0,9933
1,200
0.75 0.097 0.090 0.094 1,000
absorbansi

1.50 0.176 0.171 0.174 0,800

0,600
3.00 0.367 0.363 0.365 0,400
6.00 0.943 0.990 0.967 0,200

9.00 1.378 1.399 1.389 0,000

-0,2000,00 2,00 4,00 6,00 8,00 10,00

konsentrasi

5/12/2008
Konsentrasi A kurva standar
A1 A2
(µM) rataan 1,800
0.00 0.000 0.000 0.000 1,600
y = 0,1785x - 0,0299
R2 = 0,9912
1,400
0.75 0.094 0.092 0.093 1,200
absorbansi

1.50 0.243 0.233 0.238 1,000

0,800

3.00 0.532 0.526 0.529 0,600

0,400
6.00 0.936 0.933 0.935 0,200
0,000
9.00 1.641 1.640 1.641 -0,2000,00 2,00 4,00 6,00 8,00 10,00

konsentrasi
 18

Lampiran 5 Konsentrasi lipid peroksida hati kelinci dan Cara Perhitungan

Normal   Hiperlipidemia    
[LPO]  [LPO] 
No Kelinci  A  No Kelinci  A 
(nmol/g)  (nmol/g) 
55  0.194  146.93 
11  0.502  397.57 
12  0.140  122.49 
17  0.530  418.84 
18  0.102  50.43 
16  0.617  412.30 
53  0.131  90.14 
24  0.530  256.99 
13  0.502  161.25 
21a  0.352  213.95 
7  0.126  87.34  52  0.571  336.64 
rata‐rata  0.199  109.763  rata‐rata  0.517  339.382 
SD  0.15  41.48  SD  0.09  86.66 

Ramuan jati  Lovastatin      
belanda     
[LPO] 
No Kelinci  A 
(nmol/g) 
No Kelinci  A  [LPO] (nmol/g) 
6  0.256  124.76 
8  0.330  160.47 
15  0.261  188.96  20c  0.331  202.18 
14  0.212  135.52  22  0.281  174.17 
47  0.278  135.38  48  0.308  189.30 
10  0.280  136.34  50  0.323  227.85 
49  0.202  129.92  21b  0.270  131.52 
19b  0.230  112.21  rata‐rata  0.300  172.893 
rata‐rata  0.244  139.722  SD  0.03  37.26 
SD  0.03  25.79
Contoh perhitungan:
Dari persamaan garis kurva standar y = 0.1316x – 0.0212
Misal absorbansi sampel 0.140, maka 0.140 = 0.1316x – 0.0212
X = 1.2249

Bobot hati ditimbang = 51.1506 gram

Volume total homogenat hati = 511.5060 ml (10% b/v)
Volume total homogenat hati yang digunakan 0.1 ml

Konsentrasi lipid peroksida dalam nmol/g:

= C(μM) x vol. tot hom hati (ml)/ vol. hom hati yang digunakan
Bobot hati (g)
= 1.2249 μM x 511.5060 ml/ 0.1 ml = 122.49 nmol/gram
51.1506 gram
 19

Lampiran 6 Analisis statistik

Bobot badan selama adaptasi

Hasil Analisis Ragam

The GLM Procedure

Class Level Information

Class Levels Values

KELOMPOKKELINCI 4 ekstrak hiperlip lovastin normal

NOKELINCI 7 1234567

ADAPTASI 2 12

Number of Observations Read 56

Number of Observations Used 56

Hasil Analisis Ragam

The GLM Procedure

Dependent Variable: RESPON

Source DF Sum of Squares Mean Square F Value Pr > F

Model 31 58567142.86 1889262.67 36.13 <.0001

Error 24 1255000.00 52291.67

Corrected Total 55 59822142.86

R-Square Coeff Var Root MSE RESPON Mean

0.979021 8.337062 228.6737 2742.857

Source DF Type I SS Mean Square F Value Pr > F

KELOMPOKKELINCI 3 2003928.57 667976.19 12.77 <.0001

NOKELINCI 6 42584642.86 7097440.48 135.73 <.0001

NOKELINCI(KELOMPOKK) 18 13716071.43 762003.97 14.57 <.0001

ADAPTASI 1 231428.57 231428.57 4.43 0.0461

KELOMPOKKEL*ADAPTASI 3 31071.43 10357.14 0.20 0.8967

 20

Lanjutan lampiran 6
Source DF Type III SS Mean Square F Value Pr > F

KELOMPOKKELINCI 3 2003928.57 667976.19 12.77 <.0001

NOKELINCI 6 42584642.86 7097440.48 135.73 <.0001

NOKELINCI(KELOMPOKK) 18 13716071.43 762003.97 14.57 <.0001

ADAPTASI 1 231428.57 231428.57 4.43 0.0461

KELOMPOKKEL*ADAPTASI 3 31071.43 10357.14 0.20 0.8967

Tests of Hypotheses Using the Type III MS for NOKELINCI(KELOMPOKK) as an Error

Term

Source DF Type III SS Mean Square F Value Pr > F

KELOMPOKKELINCI 3 2003928.571 667976.190 0.88 0.4716

 
Bobot badan selama perlakuan

The SAS System

The GLM Procedure

Class Level Information

Class Levels Values

KELOMPOK KELINCI 4 ekstrak hiperlip lovastin normal

NOKELINCI 7 1234567

PERLAKUAN 4 1234

Number of Observations Read 112

Number of Observations Used 112

 21

Lanjutan lampiran 6
The SAS System

The GLM Procedure

Dependent Variable: RESPON

Source DF Sum of Squares Mean Square F Value Pr > F

Model 39 117800178.6 3020517.4 158.19 <.0001

Error 72 1374821.4 19094.7

Corrected Total 111 119175000.0

R-Square Coeff Var Root MSE RESPON Mean

0.988464 4.935133 138.1837 2800.000

Source DF Type I SS Mean Square F Value Pr > F

KELOMPOKKELINCI 3 2140178.57 713392.86 37.36 <.0001

NOKELINCI 6 82792187.50 13798697.92 722.64 <.0001

NOKELINCI(KELOMPOKK) 18 32540133.93 1807785.22 94.67 <.0001

PERLAKUAN 3 40535.71 13511.90 0.71 0.5506

KELOMPOKKE*PERLAKUAN 9 287142.86 31904.76 1.67 0.1120

Source DF Type III SS Mean Square F Value Pr > F

KELOMPOKKELINCI 3 2140178.57 713392.86 37.36 <.0001

NOKELINCI 6 82792187.50 13798697.92 722.64 <.0001

NOKELINCI(KELOMPOKK) 18 32540133.93 1807785.22 94.67 <.0001

PERLAKUAN 3 40535.71 13511.90 0.71 0.5506

KELOMPOKKE*PERLAKUAN 9 287142.86 31904.76 1.67 0.1120

 22

Lanjutan lampiran 6
Tests of Hypotheses Using the Type III MS for NOKELINCI(KELOMPOKK) as an Error
Term

Source DF Type III SS Mean Square F Value Pr > F

KELOMPOKKELINCI 3 2140178.571 713392.857 0.39 0.7584

 
Lipid peroksida hati kelinci

Hasil analisis Ragam

The GLM Procedure

Class Level Information

Class Levels Values

treat 4 ekstrak hiperlip lovastat normal

Number of Observations Read 28

Number of Observations Used 28

Hasil analisis Ragam

The GLM Procedure

Dependent Variable: kons LPO(nmol/gr)

Source DF Sum of Squares Mean Square F Value Pr > F

Model 3 221008.2925 73669.4308 30.59 <.0001

Error 24 57805.1102 2408.5463

Corrected Total 27 278813.4027

R-Square Coeff Var Root MSE kons Mean

0.792675 25.77031 49.07694 190.4399

Lanjutan lampiran 6
 23

Source DF Type I SS Mean Square F Value Pr > F

treat 3 221008.2925 73669.4308 30.59 <.0001

Source DF Type III SS Mean Square F Value Pr > F

treat 3 221008.2925 73669.4308 30.59 <.0001

Hasil analisis Ragam

The GLM Procedure

Duncan's Multiple Range Test for kons

Alpha 0.05

Error Degrees of Freedom 24

Error Mean Square 2408.546

Number of Means 2 3 4

Critical Range 54.14 56.87 58.61

Means with the same letter are

not significantly different.

Duncan Grouping Mean N Treat

A 339.38 7 hiperlip

B 172.89 7 lovastat

C B 139.72 7 ekstrak

C 109.76 7 normal