IMVIC • INDOL • ROJO DE METILO • VOGES PROSKAUER • CITRATO DE SIMMONS
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Medio SIM • INDOL • ACIDO SULFIDRICO • MOVILIDAD
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SIM INDOL • Para identificar el Indol, el medio tiene peptonas, y el aminoácido triptófano el cual si las bacterias tienen la enzima triptofanasa hace que se libere el indol (grupo funcional del triptofano). • Si se libera el indol, éste reacciona con Paradimetil Benzaldeido (Kovac) • Color Rojo positivo • Color Amarillo Negativo (no se liberó indol porque la bacteria no tiene triptofanasa)
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SIM ACIDO SULFHIDRICO H2S • El medio tiene tiosulfato, el cual libera ácido sulfhídrico que es un gas. Éste reacciona con la Sal de Hierro y forma un precipitado negro que es sulfuro ferroso. • Color Negro Positivo (debido al precipitado) • Sin precipitado Negro Negativo.
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SIM MOVILIDAD • Movilidad Negativa: Si la cepa crece solo en la picadura es inmóvil.
• Movilidad Positiva: Si crece en todo el
medio, es móvil.
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MR - VP • Es un caldo glucosado
• PRUEBAS QUE SE REALIZAN:
• ROJO DE METILO • VOGES PROSKAUER
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MR - VP ROJO DE METILO • Algunas bacterias obtienen energía de la glucosa del medio. Se forma piruvato (ácido piruvico) y toma diferentes vías: • algunas bacterias fermentan (se usan en productos lácteos) • otras forman alcoholes (levaduras) • Otras utilizan el ciclo de krebs. • En otras hay vías que producen ácidos mixtos. Eduardo Bermudez Chavez 8 MR - VP ROJO DE METILO • Las que producen ácidos mixtos, acidifican el medio (bajan el pH) • Estas bacterias son rojo de metilo positivas. • POSITIVO Color Rojo • NEGATIVO Color Amarillo
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MR - VP VOGES PROSKAUER • Esta prueba se utiliza para ver la producción de Acetoína (Acetil Metil Carbinol) • Se le agregan 6 gotas de Alfa Naftol que es un catalizador. • Al agregar 3 gotas de sosa o potasa reacciona con la Acetoìna y forma un precipitado: • POSITIVO Color ROJO • NEGATIVO Amarillo, café, oscuro. (dependiendo la antigüedad del reactivo) Eduardo Bermudez Chavez 10 AGAR CITRATO (CIT) • Este medio no tiene carbohidratos • Tiene Azul de Bromotimol como Indicador • La prueba es para ver si la bacteria utiliza como fuente de carbonos al citrato, el cual se encuentra en el ciclo de krebs. • El medio tiene Citrato de Sodio y Sal de Amonio. • Si utiliza el citrato Ver resultados en el bisel (porque es en el ciclo de krebs, oxidativo): • POSITIVO Color Azul • NEGATIVO Color Verde (original) Eduardo Bermudez Chavez 11 CIT • También puede cambiar de color i utiliza la sal de amonio (NH4), porque se alcaliniza el medio:
• Color Azul Cit POSITOVO (pH Acalíno)
• Color Verde Cit NEGATIVO (Neutro) • Color Amarillo Cit NEGATIVO (ácido)
• Puede no cambiar de color, pero si hay
crecimiento es positivo, ver otras pruebas. Eduardo Bermudez Chavez 12 TSI • Tiene Glucosa, lactosa, sacarosa, azufre, y sal de hierro.
• Se realizan las pruebas:
• Fermentación de glucosa • Fermentación de lactosa • Ácido sulfhídrico • Gas de Glucosa Eduardo Bermudez Chavez 13 TSI • Color original sin sembrar: Rojo (Naranja) • Gas de Glucosa positivo Formacion de burbuja pequeña o botado del medio. • H2S positivo Precipitado Negro.
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TSI • FERMENTACION DE CARBOHIDRATOS • Fondo Amarillo Glucosa + • Bisel Rojo Lactosa - , Sacarosa –
• Bisel Amarillo y Fondo Amarillo GLuc + Lac +
y Sac+.
• El medio tiene 1 g de glucosa, 10 gramos de
lactosa y 10 gramos de sacarosa, por litro. Eduardo Bermudez Chavez 15 LIA • Este medio, tiene peptonas y aminoácidos (lisina). • Se realiza la prueba: • H2S (mismo fundamento) • Descarboxilación de Lisina. (o desaminación) • La prueba consiste en buscar la enzima lisina descarboxilasa de ciertas bacterias la cual descarboxila a la Lisina (aminoacido).
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LIA (Descarboxilación de Lisina) • Al descarboxilar queda solo la amina (putresina o cadaverina). La cual da al medio un pH alcalino. • POSITIVO Color Morado (alcalino) • NEGATIVO Color Amarillo (ácido). • Cuando hay mucho ácido el bisel también es amarillo.
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LIA (Desaminación de Lisina)
• proteus no descarboxila, solo desamina y se
forma: • Un ácido débil que reacciona con la sal de hierro y forma complejo naranja. • Y un amonio que alcaliniza el medio y da un color morado. • En conjunto se forma un color púrpura o rojo en el bisel. • (solo en proteus que es lisina -) Eduardo Bermudez Chavez 18 MIO El Medio tiene: • Color Original Morado (ligeramente Alcalino) o Blanco (muy alcalino) • Glucosa (original pH >7, cuando se utiliza la glucosa el pH vuelve a 6.5) • Tiene púrpura de Bromocresol como indicador.
PARA VER • Movilidad (mismo fundamento) • Indol (mismo fundamento) • Descarboxilacion de Ornitina (ODC)
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MIO Descarboxilacion de Ornitina • La ornitina descarboxilasa es una enzima que actúa a pH 6.5 • Si la bacteria tiene ésta enzima descarboxila al aminoacido ornitina y también se desamina al mismo tiempo. • Los productos son CO2 + H2O + AMINA (putresina o cadaverina) los cuales son compuestos alcalinos. Eduardo Bermudez Chavez 20 MIO Descarboxilación de Ornitina • Debido a los productos alcalinos se alcaliniza el medio y los resultados son: • Positivo Color Morado (Alcalino) • Negativo Amarillo (ácido)
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CALDO MALONATO (MAL) Malonato • El fundamento es igual al citrato. • Para ver si utiliza al malonato como fuente de carbonos.
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CALDO UREA • Caldo Original Color Amarillo • TIENE • Rojo fenol como indicador • Peptonas • Carbohidratos como fuente de C. • UREA
• FUNDAMENTO: Ver la hidrólisis de la urea.
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UREA • Ver si la bacteria tiene la enzima Ureasa que hidroliza la urea y produce amoniaco. • Si se produce Amoniaco es Positivo. • Positivo Rojo o Rosa Mex (Alcalino). • Negativo Color Amarillo(Acido).
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AGAR FENILALANINA FAD • Ver la desaminación de la Fenilalanina (aminoácido). • Algunas bacterias tienen la enzima fenilalanina desaminasa, que actua sobre la fenilalanina. • Se produce acido fenil pirúvico. • Este reacciona con el cloruro férrico. Y da coloración verde. • Positivo Color Verde • Negativo Color Amarillo (original). Eduardo Bermudez Chavez 25 FOTOS DE RESULTADOS