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I.

INTRODUCCIN:

La luz es la fuente de energa fundamental para la vida en la tierra, es


una seal ambiental importante para los organismos de todos los reinos
de la vida. Aporta energa para la fotosntesis, calor y permite la visin
en microorganismos, plantas y animales, adems de jugar un papel
fundamental como seal ambiental, regulando el desarrollo y la fisiologa
de los organismos. La luz presenta distintas longitudes de onda, y no
todas afectan igual a los hongos, ya que algunas son capaces de
detectarlas pero no otras. (Corrochano, 2007)
En el reino fungi, la luz puede regular la reproduccin sexual y asexual,
que son aspectos importantes para la supervivencia y la distribucin de
la especie. La luz influye en varios procesos del desarrollo de los hongos
de diferentes maneras, esto puede afectar el metabolismo de
crecimiento, conidiacin, formacin de pigmentos, tropismo, etc.
(Betina, 1995). Segn (Montoya, 1999), las diferentes fomas de
radiacin pueden ser dainas, benficas o inocuas dependiendo del
hongo y la fuente de radiacin. El efecto de la luz sobre un hongo puede
ser morfognico (inducir o inhibir la formacin de estructuras) o no
morfognico (influir en la velocidad o direccin de crecimiento de una
estructura).
La luz regula tambin el desarrollo y comportamiento de los hongos. El
desarrollo de un hongo ocurre en varias etapas: germinacin de las
esporas, crecimiento y ramificacin de las hifas y formacin de las
estructuras reproductoras para el desarrollo y dispersin de las esporas.
Estos procesos estn regulados por muchos factores ambientales,
incluyendo la presencia o ausencia de luz. La mayora de respuestas a la
luz en hongos se deben a la luz azul, aunque tambin se conocen
respuestas a otras longitudes de onda como la luz roja o la luz del
ultravioleta. Adems de intervenir en el desarrollo de los hongos, la luz
azul acta como seal ambiental activando rutas metablicas como la
sntesis de carotenos, o dirigiendo el crecimiento de estructuras
reproductoras. La activacin por la luz de la biosntesis de carotenos
hace que algunas especies de hongos obtengan esa coloracin naranja
tpica, tambin presente, por ejemplo, en las zanahorias. La sntesis de
caroteno sirve para protegerse de la radiacin UV del sol, al igual que
nosotros sintetizamos melanina cuando nos ponemos al sol. (Rodriguez
Romero J. et al.)
Estos procesos, sin embargo, tienen implicaciones negativas a muchos
aspectos de la vida humana, pues la proliferacin incontrolada de

hongos puede conducir a enfermedades devastadora en plantas, a la


tierra y a los humanos.
Por otra parte, los hongos son esenciales para la degradacin de la
materia orgnica, en interacciones micorrizidas con las plantas y como
fuente de sustrato para los metabolitos farmacuticos de los seres
humanos. Entender el papel de seales ambientales en el desarrollo de
los hongos es vital para aumentar las ventajas y disminuir los costos. A
pesar de la importancia de la luz en el desarrollo de los hongos, todava
hay mucho que estudiar sobre el efecto, el mecanismo de percepcin y
respuesta a la misma (Idnurm, 2005).
Por otro lado, los bioplaguicidas constituyen un importante medio de
control biolgico de plagas en la agricultura, con probada efectividad en
muchos pases [Batista, 1997]. El grupo ms importante de hongos
entomopatgenos son los deuteromicetos u hongos imperfectos, en
los cuales se desconoce la fase sexual. Los gneros ms importantes son
Beauveria, Verticillium, Metarhizium, Hirsuthella y Paecilomyces
[Fernandez-Larrea, 2001]. El hongo Beauveria bassiana se ha
estudiado como agente de control de insectos de plaga pertenecientes a
diferentes rdenes. En cultivos de la agricultura urbana [Minag, 2007]
lo recomendaron para el control de varias especies de crisomlidos que
afectan a muchos cultivos hortcolas. Por otra parte, numerosas
enfermedades afectan los cultivos sembrados en canteros en
organopnicos y huertos intensivos [Castellanos et al., 2005], las
cuales requieren del empleo de fungicidas qumicos para su control, que
pueden afectar los hongos entomopatgenos que se aplican para el
control de insectos plaga. Entre los fungicidas que se recomiendan para
el control de enfermedades fngicas en la agricultura urbana se
encuentran difenoconazol, oxicloruro de cobre, mancozeb, zineb,
azoxystrobin, matalaxyl y azufre [Minag, 2007]. Estos estn
autorizados en muchos cultivos en Cuba donde se realizan tratamientos
con hongos entomopatgenos, entre ellos con B. bassiana [CNSV,
2005].
El objetivo del presente trabajo fue evaluar el efecto de la luz sobre el
crecimiento y esporulacin fngica, as como la inhibicin qumica sobre
el crecimiento fngico analizando el efecto del Lufenuron y sus posibles
modos de accin.

II.
-

MATERIALES
Cultivos de:

- Trichoderma sp.
- Paecilomyces lilacilus
- Baeuveria bassiana
- Fusarium oxysporum
Papel celofn
- Transparente
- Rojo
- Verde
- Amarillo
- Azul
Cartulina negra
Corrector
Cinta Scotch

III.

MTODOS

Este trabajo se dividi en tres etapas: en la primera se determin el


efecto de los factores fsicos sobre el crecimiento fngico sobre las
colonias de Paecilomyces sp. y de Trichoderma sp., en la segunda fase
se estableci el efecto de la luz sobre la esporulacin de Trichoderma sp.
y en la tercera fase se estableci el efecto de factores qumicos,
mediante el plaguicida Lufenuron, el crecimiento de Baeuveria bassiana,
Fusarium oxysporum, Trichoderma sp. y Paecilomyces lilacilus.

EFECTOS DE FACTORES FSICOS SOBRE EL CRECMIENTO FNGICO

1. Se procedi con la siembra por puntura de: Trichoderma sp. y


Paicilomyces lilacilus, en 5 placas con medio Agar glucosa fosfato
cada uno.
2. Cada una de las placas fue rotulada.
3. Cada una de las placas se procedieron a envolverse en papel
celofn de color: transparente, rojo, verde, amarillo y azul, para
cada placa servida y sembrada.
4. Se dejaron todas las placas a las mismas condiciones (T de 37C,
durante 7 das, misma cantidad de luz y oscuridad).
5. Se realiz la medida para comparar crecimiento de las colonias
con el control, como para analizar el efecto de la luz sobre la
pigmentacin y esporulacin.

EFECTOS DE LA LUZ SOBRE LA ESPORULACIN

1. Se procedi con la siembra por puntura de: Trichoderma sp. en 3


placas con medio Agar glucosa fosfato cada uno.
2. Cada una de las placas fue rotulada.
3. Dos de las placas se procedieron a envolverse en papel celofn de
color: transparente, mientras que una tercera se forr con
cartulina negra impidiendo el paso de la luz.
4. Se dejaron todas las placas a las mismas condiciones de T. Una
de las placas forradas con papel celofn transparente se dej con
luz continua, la segunda placa forrada con papel celofn
transparente, se expuso a una luz discontinua; y la tercera placa
se expuso solo a oscuridad, evitando en lo posible que tenga
contacto con la luz todas durante 7 das.
5. Se analiz macroscpicamente la comparacin de crecimiento y
formacin de zonacin respecto al control.
EFECTOS DE
FNGICO

FACTORES

QUMICOS

SOBRE

EL

CRECMIENTO

1. Se procedi con la siembra por puntura de: Baeuveria bassiana,


Fusarium oxysporum, Trichoderma sp. y Paicilomyces lilacilus, en 2
placas con medio Agar glucosa fosfato cada uno.
2. Cada una de las placas fue rotulada.
3. Cada una de las placas se procedieron a envolverse y fueron
mandadas a encubacin a una T de 37C durante 7 das.
4. Al stimo da, se realiz la medida para comparar crecimiento de
las colonias con el control, como para analizar el efecto del
Lufenuron sobre la pigmentacin y esporulacin.
4.1
Para ello, se tom la medida de 2 radios de la placa con
su respectiva colonia, y se procedi a sacar un radio
promedio.
4.2
Se sac el % de crecimiento en comparacin de la
medida de la placa control de cada colonia obtenida.

IV.

RESULTADOS

Tabla 1. Efectos de factores fsicos sobre el crecimiento fngico de


Paecilomyces lilacilus.
Paecilomyces lilacilus

CONTROL
PAPEL CELOFN
ROJO
PAPEL CELOFN
AZUL
PAPEL CELOFN
VERDE
PAPEL CELOFN
AMARILLO

PIGMENTACIN
++
++++

CRECIMIENTO
++
++

++

++

+++

++++

Tabla 1. Efectos de factores fsicos sobre el crecimiento fngico de


Trichoderma sp.

Trichoderma sp.
PIGMENTACIN
+
+++
++
+++
++

CONTROL
PAPEL CELOFN ROJO
PAPEL CELOFN AZUL
PAPEL CELOFN VERDE
PAPEL CELOFN AMARILLO

Tabla 2. Efecto de la luz sobre la esporulacin sobre Trichoderma sp.

Trichoderma sp.
Zonacin

Luz continua
+/-

Luz discontinua
+

Oscuridad
-

Tabla 3. Efecto de Lufenuron sobre crecimiento fngico.

Baeuveria
bassiana
Fusarium
oxysporum
Trichoderma sp.
Pecilomyces

CONTROL
7.75 mm

50 ppm
6.25 mm

100 ppm
3.25 mm

14 mm

12.5 mm

12 mm

5 cm

3.05 cm

2 cm

1.3 cm

1 cm

0.75 cm

lilacilus
Tabla 3. Efecto de Lufenuron sobre crecimiento fngico.
CONTROL
100%

50 ppm
80.65%

100 ppm
41.94%

Fusarium
oxysporum

100%

89.29%

85.71%

Trichoderma sp.

100%

61%

40%

Pecilomyces
lilacilus

100%

76.92%

57.69%

Baeuveria
bassiana

V.

DISCUSIN

Efectos de factores fsicos sobre el crecimiento fngico


-

En comparacin con el control; el efecto de la luz roja fue


desfavorable para Paecilomyces lilacilus, pero positiva para la
pigmentacin y esporulacin. El efecto de la luz azul fue favorable
para Paecilomyces lilacilus, pero negativa para la pigmentacin y
esporulacin. El efecto de la luz verde fue no tuvo ningn efecto
para Paecilomyces lilacilus, y el efecto de la luz amarilla fue muy
favorable para Paecilomyces lilacilus, pero negativa para la
pigmentacin y esporulacin. Con lo que respecta al crecimiento, y
en comparacin con el control, se obrserv que Paecilomyces
lilacilus creci ms con color amarillo, el verde y el rojo siendo
desfavorables para el crecimiento de Paecilomyces lilacilus. Estos
resultados son consistente con otro estudio realizado con
Paecilomyces fumosoroseus donde la produccin mxima de
conidios se obtuvo con la luz blanca seguida por la luz azul, y la
produccin de conidios con luz verde y roja se da en varios
ordenes de magnitud menores. Siendo suficiente un pulso de luz
azul para inducir en la respuesta fotomorfognica medida como
produccin de conidios (Snchez-Murillo y cols, 2004).
Para Trichoderma sp. solo se hizo lectura para pigmentacin. En
comparacin al control, el efecto de la luz roja y verde fue
desfavorable para Trichoderma sp, pero positiva para la
pigmentacin. El efecto de la luz azul y amarilla fueron menos

desfavorable Trichoderma sp, pero negativa para la pigmentacin.


Este resultado es consistente con el estudio realizado en hongos
(Snchez Murillo y Cols. 2004) donde se afirm que, Trichoderma
sp. responde al espectro de luz azul, adems de la luz U.V. Adems
del estudio realizado en Trichoderma viride (Casas Flores y cols,
2004), donde la aplicacin de un pulso breve de luz azul (400480nm) a una colonia radial induce una esporulacin sincronizada
la cual produce un anillo de conidioforos de color verde en el
momento el cual la colonia fue expuesta al pulso de luz.
En estos resultados obtenidos, la luz produce cambios
fotobiolgicos o fotoqumicos al ser absorbida por una o varias
molculas. Pecilomyces lilacilus, responde a la luz azul y amarilla,
mientras que para Trichoderma sp. son la azul y amarillo; por lo
que se sugiere que deben existir receptores que absorben luz de
estas longitudes de onda.

Efecto de la luz sobre la esporulacin


-

De acuerdo a los resultados obtenidos, la luz tiene un efecto


significativo en la esporulacin en Trichoderma sp., En el
tratamiento a luz continua u oscuridad no se observa la zonacin.
Mientras que en el tratamiento a luz discontinua si se observ
zonacin. Estos resultados coinciden con otros estudios realizados
para Trichoderma viride (Kumagai y Oda, 1969) donde se afirma
que, para Trichoderma viride cuando una colonia crece en
obscuridad y es iluminada brevemente con luz azul solo la regin
cercana al micelio produce esporas apareciendo la formacin de
un anillo. Mientras, que Trichoderma viride cuando es cultivado en
completa obscuridad se obtiene micelio plano y alino (sin color), en agar
dextrosa de papa, pero crece continuamente con esporulacin bajo luz
blanca.

Efecto de factores qumicos sobre el crecimiento fngico


-

El fungicida qumico Lufenuron, manifest algn nivel de toxicidad


con
respecto
a
la
inhibicin del
crecimiento
micelial
sobre Beauveria bassiana, Fusarium oxysporum, Trichoderma sp y
Pecilomyces lilacilus. Siendo est relacionada con la concentracin
aplicada a cada medio de cultivo con su respectiva colonia
sembrada. A una concentracin de 50 ppm, Trichoderma sp. fue la
ms afectada llegando su crecimiento solo hasta el 61%, los
cultivos de Baeuveria bassiana y Paecilomyces lilacilus le
siguieron, con un crecimiento mximo de 80.65% y 76.92%,
mientras que Fusarium oxysporum, fue la que mayor crecimiento
tuvo a esa concentracin de plaguicida con el 89.29%. A una

concentracin de 150 ppm, las colonias ms afectadas fueron la


de Baeuveria bassiana con 41.94% y Trichoderma sp. con el 40%;
seguida de Paecilomyces lilacilus con el 57.69% y por ltimo la de
Fusarium oxysporum con 85.71%.
Los presentes resultados indican que debe tenerse cuidado al
aplicar este plaguicida en reas sometidas a tratamientos
con Beauveria bassiana, ya que afectaron el crecimiento micelial
del hongo, la conidiognesis y la germinacin de los conidios. Esto
puede deberse a que el Lufenurn, una benzoilurea de plaguicidas,
inhibe la produccin de quitina en los insectos. Sin quitina, una
pulga larval nunca se va a desarrollar una cscara exterior dura
( exoesqueleto ). Con sus rganos internos expuestos al aire, el
insecto muere de deshidratacin poco despus de su nacimiento o
desde
la
muda.
Lufenurn
tambin
se
utiliza
para
combatir hongos infecciosos, ya que las paredes celulares de los
hongos son aproximadamente un tercio de la quitina y al no tener
una forma de reparar el dao constante que se est haciendo a su
pared celular, reduce el tamao de su colonia, matando a las
clulas fngicas, haciendo de este un excelente antifngico de
amplio espectro (Vaughter, 2005).
Existe una caracterstica importante, la HETEROCARIOSIS, que
consiste en la co-existencia de diferentes clases de ncleos en un
mismo individuo, su activacin depender distintamente segn las
condiciones desfavorables del medio, segn las cuales ser el
ncleo que se exprese. La variabilidad que resulta de la
heterocariosis y de la recombinacin sexual permite la rpida
adaptacin de los hongos a vencer la accin del plaguicida; esta
caracterstica se hace presente en Fusarium oxysporum, pudiendo
ser una de las razones por la cual el hongo no fue muy afectado
por el Lufenuron. La permeabilidad, es otro gran factor por el cual
un hongo puede volverse tan o ms resistente a un qumico.
Pudiendo ser el caso entre Fusarium oxysporum y Trichoderma.
Otro factor muy importante, sera la volatilizacin de los qumicos,
que al disiparse rpidamente del ambiente, no restringiran el
crecimiento fngico siendo su tiempo de uso menor. Adems otros
factores, como los bypass y el producto inhibido, que pueden
aumentar la resistencia a un hongo frente a un qumico.
Si se hubiera dado el caso que en uno de nuestros hongos, hubiera
crecido an ms que el control, se podra deducir que el hongo
est utilizando al qumico Lufenuron como un sustrato.

VI.

CONCLUSIONES

Se demostr que la luz tiene un efecto significativo en el


crecimiento y/o pigmentacin y esporulacin de Paecilomyces
lilacilus y Trichoderma sp.
El mayor efecto de la luz se observ con la luz amarilla y azul.
La luz afecta el desarrollo de Trichoderma sp, al cultivar el hongo
en presencia de luz continua y discontinua se obtuvo una mayor
esporulacin y zonacin, mientras que en completa obscuridad la
esporulacin y zonacin fue escasa.
Lufenuron se clasific como txico para Beauveria bassiana y
Trichoderma sp., mientras que para Fusarium oxysporum y
Paecilomyces lilacilus se clasific como ligeramente txicos.

VII. BIBLIOGRAFIA:
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Paecilomyces fumosoroseus. Microbiology. 150: 311-319.
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http://buy-lufenuron.com/lufenuron.pdf.

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