Laboratorio de alimentos II equipo:

Aguilar Portillo Luis Daniel

Garca Garca Monserrat
Ruiz Samantha

250 mgcaf

mL 0.02 mL 100 mg cafena

=
( 1000
50 mL )( 1 gp . c . )
gp . c .

PRCTICA 1.

DETERMINACIN

DE LA DOSIS LETAL MEDIA DE CAFENA EN RATONES POR VA ORAL

Resumen
La cafena es un alcaloide que se encuentra
no slo en el caf, sino tambin en el t, el
cacao y algunos otros alimentos.
En los humanos, la cafena es un
estimulante del sistema nervioso central
que produce un efecto temporal de
restauracin
del
nivel
de
alerta
y
eliminacin de la somnolencia y
es
catalogada como la sustancia psicoactiva
ms consumida en el mundo.
No obstante, como todas las sustancias,
ninguna a es relativamente inocua, por lo
que en grandes dosis puede causar una
intoxicacin; para poder estimar la cantidad
de cafena que puede ser letal para un ser
humano se usan modelos de estudio, es
decir, animales lo ms parecido posible al
ser humano ( en cuanto a la respuesta de
estudio). Para este experimento se usaron
ratones
y
mediante
distintas
concentraciones de dosis por va oral, se

375 mgcaf

mL 0.02 mL 150 mg cafena

=
( 1000
50 mL )( 1 gp . c . )
gp . c .

500 mgcaf

mL 0.02 mL 200 mg cafena

=
( 1000
50 mL )( 1 gp . c . )
gp . c .

625 mgcaf

mL 0.02 mL 250 mg cafena

=
( 1000
50 mL )( 1 gp . c . )
gp . c .

busca determinar el DL50.

Datos de la muestra
Calculo de la dosis de cafena (3D)

75 mg cafena 1 Kg pc
1 g pc
x
x
x 50mL=125 mg cafena
Kg pc
1000 g pc 0.03 mL
Reajuste de dosis de cafena (2D)

125 mgcaf

mL 0.02 mL 50 mg cafena
=
( 1000
50 mL )( 1 gp . c . )
gp . c .

Clculo de dosificacin
1.

2.

3.

4.

29.9 g x

.02 mL
=.598 mL
1 g pc

34.4 g x

.02mL
=.628 mL
1 g pc

32.9 g x

.02 mL
=.658 mL
1 g pc

33.2 g x

.02 mL
=.664 mL
1 g pc

5.

35.6 g x

.02 mL
=.712mL
1 g pc

*Valor corregido, pero sin significancia (se muestran el

100

clculo para la correccin)

( n0.25
N )

Resultados
Tabla 1. Distribucin Culebra Japonesa

100

Dosis (mg agen. Xen./ Kg pc)

50
100
150
200
250
25.1( 28.0( 29.2
29.9 30.0(25
10)

31.8

18)
(

15)

32.0

4)
(

9)

33.0

32.0
33.4
34.4

31.8

30.5(11

23)

32.7

)
(

32.9(9)

33.2(

33.2(16

17)

32.9
7)

33.3

2)
(

31.4

6)
(

19)
(

(1)
(

3)
(

14)
(

13)

34.1

31.8

(5)
(

34.7

35.6

21)

13)

24)

8)

31.2

31.9
2

32.3
4

32.6

31.2(22
)
*
31.56

*Valor no significativo en el orden de los pesos.

Tabla 2. Mortandad de animales despus de

48 hrs.
Dosis

mg
Kg pc
50
100
150
200
250

Animal
es
tratado
s
5
5
5
3
5

Animal
es
muerto
s
0
0
3
2
4

%Mortanda
d
observada
0
0
60
66.66
80

Animal
es
mg tratado
Kg pc s

Extrapolando en la grfica log-probit

obtenemos los 3 valores para DL respectivos
a nuestro ensayo,

DL84= 250
DL50= 140
DL16= 55

Calculo de CHI2
2

6058

66.6668 2

8076 2

((76)(10076))

13
3

( )

=.0487

CHI 2=
GL: 3-2=1

P=0.05

CHI2critica= 3.8415

Tabla 3. Mortandad de animales despus de

graficar en hoja log-probit.
Dosi
s

=5
( 00.25
5 )

Animal
es
muerto
s

%Mortanda
d
observada

%Mortanda
d esperada

50

100

5*

150

60

58

200

66.66

68

250

80

76

La CHI2experimental es menor que la

CHI2critica, por lo que consideramos los
datos homogneos y la recta es
satisfactoria.
Calculo de S

DL 84 DL 50
250 140
+
+
DL 50 DL 16
140 55
S=
S=
=2.1655
2
2

Calculo de fDL50
S

fD L50=S N
fD L50=2.1655

fD L50=2.1655

2.1655
13

2.1655
13

=1.5916

=1.5916

la DL50 reportada en la literatura (127 mg/kg

p.c.), podemos decir que la diferencia
observada entre estos dos valores se ve
influida por factores como la cantidad de
animales tratados como poblacin de
estudio, la dosificacin utilizada, y el
correcto manejo de animales de laboratorio
(refirindonos a la forma correcta de
administrar bien las dosis en cada ratn).

Obtencin de lmites

mg
Kgpc
Lmite inferior=
=87.96 mg /Kgpc
1.5916
140

Cuestionario Final

De acuerdo al DL50 obtenido, Cmo

clasificara a la cafena?

La dosis letal media que se obtuvo de

manera experimental es de 140 mg/kg p.c
por lo tanto, la clasificacin de la cafena en
los agentes xenobiticos para un ratn
macho por va oral se ubica en altamente
140 mg
txico, esto quiere decir, que se necesita
Lmite superior=
x 1.5916=222.824 mg/ Kgpc
Kg pc
relativamente una cantidad baja de
miligramos de la sustancia para que mueran
estos animales.

Por lo tanto, la DL50 va oral para ratn macho obtenida

experimentalmente es de: 140 mg de cafena/ Kg pc
(87.96-222-824 mg/Kg pc)

Anlisis de resultados
Tambin podemos notar que en la tabla tres
se muestra el porcentaje de mortalidad
observada (que se obtiene de un clculo con
los valores obtenidos) y la mortalidad
esperada (proveniente de la recta graficada
en la hoja log-probit) son muy similares
entre s (aumentan de valor conforme se
aumenta la dosis administrada), esto se
debe principalmente a la dependencia de la
dosis administrada, a mayor dosis del
xenobitico, aumenta
el porcentaje de
mortalidad.
Con base a la DL50 experimentalmente
obtenida (que es de 14 0mg/kg p.c.) contra

Si el estudio de toxicidad aguda se

realizara
por
va
intraperitoneal,
Cambiara el valor de DL50? Justifique
su respuesta.
Si el estudio de toxicidad se realizara por
otra va, el valor de la DL 50 cambiara
indudablemente,
esto
se
debe
principalmente a que la va de absorcin del
xenobitico es diferente, por lo tanto; el
tiempo que tarde en llegar al rgano blanco
tendr repercusin en
un efecto txico
rpido o lento. Adems, depender de la
dosis y del vehculo que se use para llevar al
xenobitico.
Conclusiones
La DL50 de la cafena en ratones, por va oral,
la consideramos una toxicidad aguda ya que
al momento de administrar una dosis,

esperamos una respuesta drstica en un

periodo corto de tiempo (refirindonos al
dao que puede presentarse por una
exposicin a determinada dosis nica
administrada) de un xenobitico.

volver a llevar a cabo el experimento o

consultar los datos de otros analistas para
tener datos a comparar.

Con base en lo anterior descrito podemos

decir que, la dosis letal media de cafena en
ratones
por
va
oral
obtenida
experimentalmente es de 140 mg/Kg p.c.,
se clasifica dentro de la categora de
altamente txico para agentes xenobiticos
para ratn en por va oral.

Bibliografa

Tambin se concluye que la diferencia entre

las DL50 experimental y terica reside
principalmente en la inexperiencia con el
trato de animales de laboratorio. Y, aunque
la diferencia es tan solo de 13 unidades,
para una mayor confiabilidad se recomienda

Ensayos
toxicolgicos
para
la
evaluacin de sustancias qumicas en
agua y suelo. La experiencia en
Mxico.
Patricia Ramrez Romero,
Ania Mendoza Cant. Mxico 2008, 1
Edicin. SEMARNAT/ INE
Toxicologa
fundamental,
Manuel
Repetto Jimenz, Guillermo Repetto
Kuhn, 4 edicin, editorial Daz de
Santos, 2009; pginas consultadas
38-42