Professional Documents
Culture Documents
2. 1. Caracteristici
Bacteriile se pot clasifica dup mai multe criterii, ns o variant util de
clasificare este clasificarea n funcie de structur i aspectul peretelui bacterian,
bacteriile putnd fi:
- rigide, cu perete dens, imobile sau mobile; unele dintre aceste bacterii pot
forma micelii (ex. bacterii din
genurile Mycobacterium, Actinomyces,Streptomyces, Nocardia); dac majoritatea
bacteriilor studiate sunt cultivabile pe medii artificiale exist i bacterii care pot fi
denumite ca parazii strict intracelulari (ex. genurile Rickettsia, Chlamydia);
- flexibile, cu perete celular subire (ex. spirochetele, Treponema spp, Leptospira
spp.);
- lipsite de perete celular (ex. bacteriile din genul Mycoplasma).
Celula bacterian este o celul procariot i are caracteristici structurale diferite
n comparaie cu celula eucariot
Forma
2. 2. 1. n funcie de form, bacteriile se pot grupa n mai multe categorii i pot
avea:
a). form cocoidal, cu diametre egale sau inegale (coci), dispuse izolat sau
grupat. Majoritarea steptococilor i stafilococii sunt sferici, enterococii sunt
ovalari, pneumococii sunt lanceolai, gonococii i meningococii pot fi reniformi.
Dispunerea bacteriilor depinde de mediul de cultur n care se dezvolt, de
vrsta culturii bacteriene, de alte aspecte fiziologice precum i de modul n care
are loc diviziunea n cursul procesului de cretere i multiplicare (planul de
diviziune).
Modul de dispunere poate fi considerat, cu anumite rezerve, caracteristic pentru
unele genuri de bacterii, de ex.:
- stafilococii sunt coci sferici dispui n grmezi (ciorchine);
- pneumococii sunt coci lanceolai dispui doi cte doi, eventual nconjurai de o
capsul comun (n diplo);
- streptococii sunt coci dispui n lanuri etc.;
b). form de bastona (bacili, rods), drepi cu capetele uor rotunjite
(enterobacterii), drepi cu capetele tiate drept (Bacillus anthracis), fuziformi, cu
ambele capete ascuite (Fusobacterium nucleatum), dispui uneori ntr-un mod
caracteristic (de exemplu n palisade, ca i scndurile dintr-un gard - bacilii
pseudodifterici);
c). aspect cocobacilar (exemplu H. influenzae, B. pertussis, B. abortus);
d). actinomicete, care n culturi tinere formeaz filamente lungi, ramificate
(asemntor mucegaiurilor); aceste filamente se fragmenteaz i rezult aspecte
bacilare (ex. Actinomyces israelli);
e). forma spiralat (bacili curbi - V. cholerae, spirili i spirochete - T. pallidum).
Unele bacterii, chiar i atunci cnd rezult prin multiplicarea unei singure celule
mam prezint un pleomorfism deosebit de accentuat (de exemplu Proteus
spp.).
n culturi vechi sau sub influena unor factori fizici, chimici, biologici, sub
tratament cu antibiotice etc., pot aprea forme modificate: filamentoase,
umflate, ramificate etc., care pot crea confuzii de diagnostic pentru examinatorul
fr experien sau care nu face o examinare innd cont de context. Dac are
loc repicarea acestora pe mediu de cultur proaspt iar examinarea ulterioar se
face la timpul potrivit (avnd n vedere durata optim de multiplicare) vor rezulta
forme tipice pentru specia respectiv.
Dimensiunile
2. 2. 2. Dimensiunile variaz n funcie de gen, specie, condiiile de mediu,
vrsta i stadiul de dezvoltare al culturii. n general bacteriile au dimensiuni
deordinul micrometrilor, de exemplu, pentru coci 0,5-2 m, iar pentru bacili 0,32/0,5-10 m. Dintre bacteriile vizibile la microscopul optic, Francisella
tularensis(discutat astzi n legtur cu posibile atacuri teroriste) poate avea
dimensiuni mici, de circa 0,3-0,6 m / 0,2 m. Rickettsiile, chlamydiile i
mycoplasmele nu sunt vizibile la microscopul optic datorit dimensiunilor foarte
mici. Flagelii pot atinge dimensiuni de pn la 10m. Formele filamentoase
rezultate dup tratamentul cu antibiotice pot depi aceast dimensiune.
Bacteriile din genulProteus pot prezenta n mod natural forme filamentoase, de
dimensiuni mari.
Dac n 1993 a fost pus n eviden Epulopiscium fishelsoni (60-800 m / 200500 m), cea mai mare bacterie cunoscut astzi este Thiomargarita
namibiensis, o proteobacterie Gram negativ, potenial vizibil cu ochiul liber
(dimensiuni ntre 100300 m i pn la 750 m). (1999)
Datorit dimensiunilor mici, bacteriile pot fi vizualizate numai cu ajutorul
microscopului, fie clasic, cu lumina transmis direct, atunci cnd utiliznd un
ocular cu o mrire de 10 i un obiectiv (de imersie) cu o mrire de 90-100 X,
se realizeaz o amplificare a dimensiunilor bacteriene de circa 900-1.000 X, fie
utiliznd alte tipuri de microscoape. Spre exemplu, utilizarea preparatelor
colorate prin metode n care marcajul se face cu subtane fluorescente va crete
puterea de rezoluie iar numrul de cmpuri investigate poate fi mai redus n
comparaie cu investigarea unui preparat colorat clasic (a se vedea capitolul
referitor la genul Mycobacterium).
Iluminarea n cmp obscur permite examinarea preparatelor proaspete i
evidenierea agentului etiologic al sifilisului (T. pallidum), agentul etiologic al
leptospirozei (Leptospira spp.), inclusiv mobilitatea acestora.
Informaii privind preparatele microscopice, executarea i colorarea frotiurilor,
tehnica examenului microscopic n diagnosticul microbiologic sunt prezentaten
anexa nr. 1.
2. 3. Componentele structurale ale celulei bacteriene
Att din punct de vedere structural ct i funcional, exist o serie de asemnri
ntre celula procariot i celula eucariot. Bacteriile prezint att elemente
structurale interne ct i structuri externe care pot i merit a fi studiate avnd
implicaii n relaiile dintre celula bacterian i organismul gazd. Exist dou
tipuri de elemente structurale, unele dintre acestea fiind ntlnite la toate speciile
de bacterii (constante), altele fiind ntlnite numai n anumite condiii i doar la
anumite specii sau tulpini bacteriene (facultative).
2. 3. 1. Structuri constante ale celulei bacteriene
Structurile constante ale celulei bacteriene sunt reprezentate de:
- perete,
- membran citoplasmatic,
Relativ recent (1989) s-a descoperit c exist i bacterii care dein cromozomi
lineari (ex. Borrelia burgdorferi). Toate speciile din genul Borrelia dein i
plasmide lineare.
Replicarea cromozomului bacterian se face printr-un mecanism semiconservativ.
Aa cum am menionat, cromozomul este unic, ns n celula care se dezvolt
rapid exist posibilitatea ca nainte ca prima replicare s se fi ncheiat s se
iniieze nc o replicare i n acest caz celula bacterian va putea fi meroploid
(doar anumite regiuni cromozomiale sunt copiate de mai multe ori) sau chiar
poliploid (tot cromozomul a fost copiat de mai multe ori). Dac replicarea
cromozomial nu este succedat de diviunea celulei (aa cum se ntmpl n mod
obinuit), putem remarca n celula bacterian existena mai multor cromozomi.
Cromozomii suplimentari (n total 2 sau 4) nu aduc o informaie genetic diferit
pentru c ei sunt copii ale cromozomului iniial (identici cu acesta).
Nucleul deine informaia genetic necesar proceselor vitale de cretere i
multiplicare.
Codonul
Din punct de vedere funcional, 3 nucleotide consecutive din structura moleculei
de ADN formeaz un codon. Codonii dein informaia genetic pentru a plasa ntro anumit secven un anumit aminoacid, n lanul polipeptidic care va fi
sintetizat la nivelul ribozomilor.
Cistronul
Cistronul reprezint o subunitate funcional a genei, capabil s determine
independent sinteza unui lan polipeptidic.
Gena
Gena structural reprezint o poriune a genomului, respectiv o anumit
secven de nucleotide dispuse liniar. Genele structurale reprezint circa 90% din
ansamblul informaiei genetice. Poart nscris n structura sa informaia genetic
necesar pentru sinteza unei proteine specifice, structurale sau funcionale
(enzime).
2. 3. 2. Structuri facultative
Structurile facultative ale celulei bacteriene sunt reprezentate de capsul, cili
(flagelii), fimbrii (pili) i spori (forme de rezisten).
2. 3. 2. 1. Capsula: structur, rol, evideniere
Numeroase bacterii sintetizeaz polimeri organici (de obicei polizaharide) care
formeaz n jurul celulei o matrice fibroas, numit glicocalix.
La unele bacterii glicocalixul ader strns de celula bacterian i
reprezintcapsula. Exist bacterii care dein o capsul bine definit, cu structur
polizaharidic (S. pneumoniae, K. pneumoniae, unele tulpini de E. coli etc) sau cu
structur polipeptidic (Bacillus anthracis etc).
La alte bacterii, glicocalixul formeaz o reea lax de fibrile care se pierde parial
n mediu i poate fi separat de corpul bacterian prin centrifugare,capsula
flexibil, care nu este vizibil la microscopul optic.
Roluri:
- factor de virulen, mpiedicnd fagocitarea bacteriei i favoriznd invazivitatea;
- rezisten fa de surfactani, anticorpi;
- permite aderarea unor bacterii (rol de adezin);
- barier protectoare fa de bacteriofagi, protozoare;
- conine substane cu specificitate antigenic (de specie sau de tip) - antigenul
K. Spre exemplu, n cazul S. pneumoniae exist peste 90 tipuri antigenice
capsulare n timp ce la E. coli sau la Klebsiella pneumoniae exist peste 80 tipuri
antigenice capsulare.
Referitor la modalitile de evideniere ale structurilor capsulare, este de
menionat c prin coloraia cu albastru de metilen sau tu de China / India, n