Klostridit

Klostridit
- suuria grampositiivisia anaerobisia sauvoja

- itimuodossa kestvt happea, kuivuutta,

pakastamista ja keittolmptiloja
- maaperss ja lmminveristen suolistossa
- aiheuttavat ruoan, ympristn ja pistettvien
huumeiden vlityksell tarttuvia myrkytyksi ja
toksiinivlitteisi infektioita

A. Clostridium botulinum
1. klassinen botulismi
2. imevisbotulismi
3. haavabotulismi
B. Clostridium perfringens
1. klassinen ruokamyrkytys
2. enteritis necroticans

C. Clostridium tetani
1. jykkkouristus
D. Clostridium difficile
1. Clostridium difficile assossioitunut ripuli (CDAD)

A. Clostridium botulinum
1. Klassinen botulismi
- ruokamyrkytys, riskielintarvikkeita erityisesti liha, kala, tyhjipakatut
tuotteet sek kotona siltyt tuotteet
- Clostridium botulinum eritt proteiinieksotoksiinia, joka on voimakkain
tunnettu myrkky (tappava annos: 0,1 ng/kg)

- neurotoksiinit syntetisoidaan inaktiivisena polypeptideina eli

protoksiineina (koko 150 kDa), jotka aktivoituvat, kun proteaasi pilkkoo
polypeptidiketjua
-C. botulinum jaetaan seitsemn serotyyppiin A-G kasvun aikana
tuottamiensa toksiinien antigeenisten ominaisuuksien perusteella, tyypit A,
B, E ja F aiheuttavat botulismia ihmisille
- mys muutamat muut klostridilajit (C. butyricum, C. barati) voivat tuottaa
samoja toksiineja kuin C. botulinum

Toimivassa muodossa botulinumtoksiini voi sitoutua

hermoston lihasliitoksiin ja est vlittjaine
asetyylikoliinia sisltvien vesikkelien irtoamisen. Koska
lihas ei saa en minknlaisia viestej hermosolulta, lihas
halvaantuu.

- toksiini imeytyy elimistn mahalaukussa ja ohutsuolessa, mist se

levi koko kehoon, voi imeyty mys hengitysteitse
oireet alkavat 12-36 h kuluttua ruoan nauttimisesta
- botulismin ensimmisi oireita ovat uupumus, heikkous,
oksentaminen, sitten puhe- ja nielemisvaikeudet sek nkhirit
- hengityksen lamaantuminen voi lopulta johtaa kuolemaan
- kuolleisuus tautiin on n. 65 %, kehittyneiss maissa n. 10 %
- riskiryhm: vaarallinen kaikille
- yhdenkin henkiln sairastuminen botulismiin tulkitaan epidemiaksi
taudin vakavan luonteen takia

2009
Syyskuun alussa todettiin Ranskassa kolmella samaan
perheeseen kuuluvalla henkilll Clostridium botulinum -

bakteerin aiheuttama botulismi, jonka lhteeksi epiltiin

Suomesta ostettua lmminsavusiikaa. Tyhjipakattu kala
oli ostettu itsuomalaisesta vhittiskaupasta elokuun
lopussa, kuljetettu lentokoneella Ranskaan
yksityishenkiln toimesta ja syty kaksi viikkoa

myhemmin viimeisen kyttpivn. Matkan ajan kalaa

oli silytetty kylmlaukussa

tuntemattomassa lmptilassa 14 tunnin ajan ja tmn

jlkeen kotona jkaapissa. Ennen ruokailua kalaa ei

ollut kuumennettu.

2006
Clostridium botulinum aiheutti heinkuussa 2006 yhden
epidemian, jossa sairastui kaksi henkil samasta

perheest. Vlittjelintarvikeena oli

todennkisesti lmminsavusiika, joka oli ostettu
pakattuna paikallisesta marketista. Kalan viimeinen
kyttpiv oli viikon pst symisajankohdasta. Kalan
alkupermaa oli Kanada, se oli toimitettu Suomeen

pakastettuna. Sulatus ja savustus sek valmiin tuotteen

pakkaus tapahtui kotimaisessa laitoksessa.

Vanhempia epidemioita
1981 kaksi saksalaisturistia sairastuivat sytyn
silykemaksapasteijaa

1999 yksi henkil sairastui siian mdist

Botulismin hoito:
- trivalentti ABE-antitoksiini (annettava ennen oireiden
alkua)
- ruoansulatuskanava tyhjennetn
- suolistoon jneet bakteerit hvitetn penisilliinill
- respiraattorihoito
- ennustus sit huonompi mit nopeammin oireet ilmenevt
- toipuminen voi kest kuukausia
- odotetaan uusien hermo-lihasliitosten muodostumista

- pienin annoksina puhdistettua botulinumtoksiinia voidaan

kytt keskushermostoperisten lihaston stelyhiriihin
liittyvien tautien hoidossa, kosmeettinen kytt, biologinen
sodankynti

2. Imevisbotulismi
- C. botulinum tuottaa toksiinia vauvan ruoansulatuskanavassa (n. 80
itit /g)

- riskielintarvikkeita hunaja, vihannekset ja hedelmt

- alle puolivuotiaat herkempi saamaan imevisbotulismin;
kehittymtn suolistofloora ja ruoansulatuskanavan korkeampi pH
mahdollistavat bakteeri-itiiden kasvun ja toksiinin tuoton suolistossa
- oireita ummetus, lihasten veltostuminen, itkun vaimeus
- oireet ovat yllttvn lievi, ja kuolleisuus vain muutama prosentti,
aiheuttaa ktkytkuolemia

- tehohoidolla saadaan yleens pelastettua

3. Haavabotulismi
- C. botulinumin itiit psee haavaan, jossa ne itvt

- taudinkuva muistuttaa jykkkouristusta

- suonensisisten huumeiden kytt
- tapauksia havaittu Amerikassa, Euroopassa harvinainen

CLOSTRIDIUM BOTULINUM
Hiirill tehtv analyysi

CLOSTRIDIUM BOTULINUM

PCR/PFGE/ELISA
M. Lindstrm Suomessa tutkinut menetelm:
kytettn 4 primeriparia, jotka ovat
spesifisi botuliinin neurotoksiineille A, B, E tai
F. Neljn serotyypin samanaikainen tunnistus
mahdollinen.
ELISA valmis pivss kun toksiinia nytteess
Toimintakykyisten solujen kasvatus ja toksiinia
tuottavien geenien tunnistus PCR:ll

B. Clostridium perfringens
1. Klassinen ruokamyrkytys

- C. perfringensin tyyppi A:n erittm enterotoksiini viime

vuosina yleisin raportoitu ruokamyrkytysten aiheuttaja
Suomessa
- riskielintarvikkeita liha ja kala, eptydellisesti kypsennetyt,
hitaasti jhdytetyt, liian korkeassa lmptilassa silytetyt ja
eptydellisesti kuumennetut elintarvikkeet
- taudin aiheuttava annos 10^6 - 10^8 solua
- itmisaika 8-24 h

- C. perfringens solut lisntyvt ruoassa, osa soluista kuolee mahan

happamuudessa, mutta jotkut solut silyvt elossa ohutsuoleen, jossa
ne alkavat lisnty
- kun bakteerisolu itii, muodostuu myrkytyksen aiheuttavaa CPEenterotoksiinia, jos kannassa on sit koodaava cpe-geeni (vain 5 %
kannoista)
- CPE-toksiini vahingoittaa ohutsuolen pinnan epiteelisoluja
tekemll reiki solukalvoihin, jolloin pienet molekyylit kuten anionit,
kationit ja orgaaniset hapot vuotavat ulos
- oireita vatsakivut, pahoinvointi ja voimakas ripuli, jotka kestvt 1-2
piv, vanhuksilla C. perfingens voi aiheuttaa pitkittynytt ripulia
- enterotoksiini voidaan osoittaa ulosteesta

2. Enteritis necroticans (pigbel)

- Clostridium perfingens tyyppi C:n erittm enterotoksiini voi aiheuttaa vakavan enteritis
necroticansin (kuolioinen suolistotulehdus)
- ruoasta saadut bakteerit erittvt toksiinia, mik
johtaa paralyysiin, verenpurkaumiin ja alueellisiin
kuolioihin varsinkin ohutsuolessa
- oireet: oksentaminen, ripuli, kovat vatsakivut,
verenvuoto

- harvinainen

Clostridium perfringens

Clostridium perfringens maljaus

TSC Agar (Tryptose Sulfite

Cycloserine Agar)

tuottaa mustia peskkeit

sykloserini est muiden bakteerien
kasvua

polymyksiini ja kanamysiini lisksi

bakteeriflooran estoon

TSC

Clostridium perfringens PCR ja mikroarray

Mikroarray-tekniikka, jossa vasta-aineilla

tunnistetaan C. perfingens toksiinit

C. Clostridium tetani
1. Jykkkouristus eli tetanus
- C. tetani tuottaa kahta myrkky, tetanoslysiinia ja
tetanospasmiinia, joista jlkimmist sanotaan
tetanustoksiiniksi
- tetanustoksiini hermomyrkky ja toiseksi vahvin myrkky
botuliinitoksiinin jlkeen

- bakteeri voi joutua haavaan, jossa se alkaa lisnty

anaerobisissa olosuhteissa
- infektio on paikallinen, mutta toksiini levi
verenkierron ja lymfakierron vlityksell sek suoraan
hermosikeit pitkin selkytimeen ja aivorunkoon

- toksiini vaikuttaa keskushermoston

hermosynapseihin ja motorisiin
ptelevyihin, est inhiboivien
vlittjaineiden (esim. glysiini)
vapautumiseen, jolloin lihaksen
relaksaatio estyy ja seuraa
lihaskouristuksia
- itmisaika pivist kuukausiin
- alussa lihaskouristuksia haavan
lhell, levi leuan lihaksiin ja
kaikkialle tahdonalaisiin lihaksiin

- jykkkouristus johtaa
hoitamattomana lhes aina
kuolemaan, hoidettujen kuolleisuus
10-30 %
- ehkistn rokotuksilla

Clostridium tetani

C. tetani levinneisyys

Clostridium tetani mritys

Geeniteknisesti IgG-ELISA:lla mritetn IgG luokan
vasta-aineilla

Hiiritesti

Clostridium tetani, hiiritesti

Hiirelle vasempaan takajalkaan ruiskutettu

tetanus toksiinia

Clostridium difficile (4000-6000 tapausta/v)

Eristys CDS (CLOSTRIDIUM DIFFICILE

SELECTIVE) agarilla, joka sislt D-cycloserinia ja
Cefoksitinia

Clostridium difficile

Clostridium difficile -associated diarrhea

(CDAD)
Diagnostisia testej CDAD:in
mrittmiseksi on markkinoilla. Ne
perustuvat toksiinin B (cytotoxin assay)
tai toksiinien A and B (immunoassay)
geenitekniseen mritykseen.

Pikatesti: Clostridium difficile Toxin A detection

of C.DIFFICILE TOXIN A in faeces with
Rapydtest

10 15 min.

Lhteet:

Austin, J.W. ja Dodds K.L. 1997. Clostridium botulinum. Teoksessa: Food Microbiology. ASM Press. Sivut 288-304.
Hielm, S. Klostridit, maan hiljaiset. Teoksessa: M. Salkinoja Salonen (toim.). Mikrobiologian perusteita. Mikrobiologian
julkaisuja 49/2000. Mikrobiologian osasto, Soveltavan kemian ja mikrobiologian laitos, Helsingin yliopisto. Sivut 652655.
Jousimies-Somer, H. ja Ristola, M. 2003. Clostridium-lajit. Teoksessa: P. Huovinen (toim.). Mikrobiologia ja
infektiosairaudet. Kirja 1. Kustannus Oy Duodecim. Sivut 228-236.
Madigan, M.T. 2003. Brock Biology of Microorganism. Pearson Educational.

Opas elintarvikkeiden ja talousveden mikrobiologisista vaaroista. EVI- EELA Opas 1/2003. Sivut 37-44.
McClane B.A. 1997. Clostridium perfringens. Teoksessa: Food Microbiology. ASM Press. Sivut 305-326.

Salkinoja-Salonen, M. Klostridien toksiinit. Teoksessa: M. Salkinoja Salonen (toim.). Mikrobiologian perusteita.

Mikrobiologian julkaisuja 49/2000. Mikrobiologian osasto, Soveltavan kemian ja mikrobiologian laitos, Helsingin
yliopisto. Sivut 548-549.

Kuvat:
http://www.agen.ufl.edu/~chyn/age2062/lect/lect_25/FG19_012.GIF
http://wwwuser.gwdg.de/~hbruegg/ct/tetanus2.gif
http://www.agen.ufl.edu/~chyn/age2062/lect/lect_25/FG19_011.GIF

Lhteet
Lindstrm, Miia; Keto, Riikka; Markkula, Annukka; Nevas, Mari; Hielm,
Sebastian; Korkeala, Hannu. Multiplex PCR Assay for Detection and

Identification of Clostridium botulinum Types A, B, E, and... Applied &

Environmental Microbiology, Dec 2001, Vol. 67 Issue 12, p5694, 6p, 4
charts, 1bw; (AN 6063605)

http://www.cfsan.fda.gov/~ebam/bam-17.html
www.google.fi