UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE MXICO

FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES CUAUTITLN

QUMICA INDUSTRIAL
LABORATORIO DE QUMICA ANALTICA III
PRCTICA 1
DETERMINACIN ESPECTROFOTOMTRICA DE AZUL DE TIMOL , MEDIANTE UNA
CURVA DE CALIBRACIN

Equipo # 2
Jimnez Cabrera Diego
Miranda Meza Francisco Javier
Prez Rubio Abraham Ulises
Ticante Estrada Ulises
Profesores:
Dalia Bonilla Martnez
21/Ago/2013

INTRODUCCIN
Un espectrofotmetro es un instrumento usado en el anlisis
qumico que sirve para medir, en funcin de la longitud de onda, la
relacin entre valores de una misma magnitud fotomtrica relativos a
dos haces de radiaciones y la concentracin o reacciones qumicas que
se miden en una muestra. Tambin es utilizado en los laboratorios de
qumica para la cuantificacin de sustancias y microorganismos.
Hay varios tipos de espectrofotmetros, puede ser de absorcin
atmica o espectrofotmetro de masa y visuales.
Este instrumento tiene la capacidad de proyectar un haz de luz
monocromtica a travs de una muestra y medir la cantidad de luz que
es absorbida por dicha muestra. Esto le permite al operador realizar dos
funciones:
1. Dar informacin sobre la naturaleza de la sustancia en la muestra.
2. Indicar indirectamente qu cantidad de la sustancia que nos
interesa est presente en la muestra.
El siguiente reporte de investigacin plasma los resultados obtenidos
en la experimentacin Determinacin Espectrofotomtrica de Azul de
Timol, mediante una curva de Calibracin .Como ya se mencion, la
determinacin del Azul de Timol se realiz por medio de curvas de
calibracin, las cuales son posibles de obtener a partir de la propiedad
usada en esta experimentacin, la Absorbancia, a travs de una serie de
diluciones de este compuesto en un intervalo de concentraciones dentro
del cual se supone est la concentracin de la muestra. Posteriormente
se colocaron en el instrumento de medicin y se obtuvieron datos que a
continuacin se grafican para as poder realizar una interpolacin y por
ende conocer la concentracin de la muestra problema.

LEY DE BEER-LAMBERT
La espectrometra UV-Vis se utiliza con mayor frecuencia en forma
cuantitativa para determinar las concentraciones de especies
absorbentes en solucin, usando la Ley de Beer-Lambert:
-

donde A es la absorbancia medida, I0 es la intensidad de la luz incidente

a una determinada longitud de onda, I es la intensidad de transmisin, L
la longitud de ruta a travs de la muestra, y c la concentracin de las
especies absorbentes. Para cada especie y longitud de onda, es una
constante conocida como absortividad molar o coeficiente de extincin.
Esta constante es una propiedad fundamental molecular en un solvente
dado, a una temperatura y presin particular, y tiene como unidades
1/M * cm o, a menudo, U/M * cm.
La absorbancia y extincin a veces son definidas en trminos de
logaritmo natural en lugar de logaritmo de base 10.
La ley de Beer-Lambert es til para la caracterizacin de muchos
compuestos, pero no sirve como relacin universal para la concentracin
y absorcin de todas las sustancias. En molculas complejas de gran
tamao, como los tintes orgnicos (Xylenol Naranja o Rojo Neutro, por
ejemplo), a veces se encuentra una relacin polinmica de segundo
orden entre la absorcin y la concentracin.
Los monocromadores son uno de los muchos dispositivo que contiene el
espectrofotmetro para realizar las lecturas de las muestras pueden ser:
-Prismas:
Son fragmentos con forma de cua de un material que permite el
paso de la luz Ej. de vidrio para trabajar en el espectro visible o cuarzo
para trabajar en el ultravioleta lejano.
-Redes de difraccin:
Son un Gran nmero de lneas paralelas situadas a distancias
entres si y son hendiduras sobre un vidrio o una superficie
metlica.Cada una de estas hendiduras se comporta como un pequeo
prisma.

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
El procedimiento experimental. se tom tal cual el manual de
prcticas lo propone en cuanto a la tcnica se refiere, excepto en las
siguientes soluciones, que se describen a continuacin.a) NaOH 0.1 M.- Se pesan 0.4 g del reactivo y se aforan a 100 ml, (por
equipo).
b) Solucin Estndar (stock).- Se pesan aproximadamente exacto 20 mg
de Azul de timol se disuelven y aforan a 50ml con NaOH 0.1 M (soln. 1)
para el grupo. De esta solucin (solucin 1), tomar 3 mL y aforar a 50mL
con agua destilada.
c) Solucin problema.- Se proporcionar por el profesor, efectuando las
diluciones pertinentes para, en base a la intensidad de color de los
estndares, pueda dar lectura la cual pueda ser interpolada en la curva,
(por equipo).
2. Para construir la curva de calibracin se preparan los siguientes
sistemas, ver Tabla 1, a partir de la solucin estndar stock. Cada
dilucin es preparada tomando el volumen indicado y aforando a 10 ml.
Tabla 1. Preparacin de los sistemas para la curva de
calibracin.
Sistema

7*

Sol. Problema

Stock Azl de Timol (mL)

Aforo NaOH 0.1M

10

10

10

10

10

10

6
10

0
10

*Este sistema es el problema y se prepara de acuerdo a las diluciones

propuestas para cada equipo.
3. Calibracin del espectrofotmetro: Se realizar de acuerdo al
instructivo del equipo y/o siguiendo las indicaciones del profesor.
4. Con el sistema ms concentrado de la curva (sistema 6) se efecta el
espectro de Absorcin de Absorbancia del analito (Abs vs ). Para ello es
necesario variar la longitud de onda () en el equipo de 540 a 720 nm a
intervalos de 10 nm, calibrando despus de cada cambio de longitud de

onda; se miden la Absorbancia y el % Transmitancia del mismo sistema

para cada longitud de onda, los datos obtenidos se vacan en la tabla 2 y
se realiza la grfica.
5.-Identificar la longitud de onda de mayor absorcin, en base al
espectro de absorcin, ponerla en el equipo y calibrar. En esta longitud
se medirn todos los sistemas.
6.- Medir la absorbancia de los sistemas que conforman la curva de
calibracin, iniciando con el sistema ms diluido hacia el ms
concentrado, enjuagando la celda de lectura con el sistema siguiente;
anotar los datos en la Tabla 3.
7.- Una vez comprobada la linealidad de la curva de calibracin
mediante un anlisis de regresin lineal, se mide la absorbancia de una
solucin problema. El valor de absorbancia de la solucin problema debe
de estar dentro de los valores que se obtuvieron para la curva de
calibracin.
RESULTADOS
Tabla 1
Longitud de onda (nm)
460

A
0.11

470

0.134

480

0.171

490

0.218

500

0.272

510

0.329

520

0.406

530

0.488

540

0.58

550

0.67

560

0.778

%T
78.
2
73.
6
67.
6
60.
4
53.
5
46.
8
39.
4
32.
4
26.
4
21.
4
16.
8

570

0.88

13.
2
580
0.970
10.
8
590
1.015
9.8
600
0.845
14.
2
610
0.716
19.
2
620
0.546
28.
4
630
0.392
40.
6
640
0.247
58.
2
650
0.138
72.
8
660
0.076
84
670
0.039
91.
6
680
0.029
93.
4
690
0.014
97
700
0.009
98
710
0.007
98.
4
720
0.006
98.
6
730
.003
99.
4
- Absorbancia experimental de una solucin de Azul de Timol en NaOH
0.1M.
Grfica 1 Grfica del espectro de absorcin de Azul de Timol en
medio alcalino

Espectro de absorcin del azul de timol en medio alcalino

1.2
1
0.8
0.6

nm (max)
Absorcion

0.4
0.2
0

Tabla 2. Resultados obtenidos para la curva de calibracin

Sistema
Concentraci
A
%T
[ppm]
n [M]
1
8.8298*10^-5
0.492
32.2
41.1998
2
1.7659*10^-4
0.656
22.2
82.3968
3
2.6489*10^-4
0.835
14.8
123.5976
4
3.5319*10^-4
1.015
9.6
164.7984
5
4.4149*10^-4
1.160
7.6
205.9992
6
5.2978*10^-4
1.33
4.6
247.1953
Problema
2.4299*10^0.855
13.8
113.3791
4
34

Grfica 2

Curva de calibracin
1.4
1.2
1
0.8
0.6
0.4
0.2
0

f(x) = 0.17x + 0.33

R = 1

Absorvancia

[M]

A=f(M de azul de timol)

Grfica 3

Curva de calibracin
35
30
25
20
15
10
5
0

f(x) = - 5.34x + 33.87

R = 0.93

-log T

[M]

-logT= f(M de azul de timol)

Clculo de la concentracin de azul de timol de la muestra problema

Con el dato obtenido de absorbancia y con ayuda de la curva de
calibracin y la ecuacin de la misma calculamos la concentracin de
azul de timol en la muestra problema.
A = 1507[M a. de timol + 0.4888
Si la absorbancia es de 0.833
Sustituyendo en la ecuacin
[M a. de timol] = (.833-0.4888)/1507
[M a. de timol] =2.4299*10-3
Tomando en cuenta que la solucin se diluy 1:10ml
(2.4299*10-3x10ml)/1ml = 0.024299M
La concentracin de la solucin problema es 0.024299M
ANLISIS DE RESULTADOS
En la grfica 1 podemos observar que hay un punto de mxima
absorbancia a los 590nm, esto quiere decir que a la longitud de onda de
590nm emitida por el espectrofotmetro se tiene la mayor absorbancia
por parte del azul de timol diluido en NaOH a una concentracin de
0.1M.
En la grfica 2 observamos la curva de calibracin de Absorbancia
en funcin de la concentracin de azul de timol, podemos ver que tiene
una tendencia lineal y tiene una proporcionalidad directa en sus
variables, dada por la ecuacin mencionada en la parte superior.
En la grfica 3 observamos la curva de calibracin de Absorbancia
en funcin del menos logaritmo de la transmitancia, esta tambin tiene
una tendencia lineal y tiene una proporcionalidad indirecta en sus
variables, dada por la ecuacin mencionada en la parte superior.
Observamos que la absorbancia y la transmitancia son valores
relacionados el uno con el otro, pero indirectamente, cuando un valor
aumenta el otro disminuye y viceversa, ambos son dadtso directos
dados por el espectrofotmetro y teniendo uno, podemos obtener el otro
con la siguiente ecuacin
A=-logT/100

CONCLUSIONES
El uso del espectrofotmetro como instrumento de medicin en la
qumica analtica es muy til, adems porque el principio del instrumento es
muy parecido al de otros como el espectro de absorcin atmica, colormetro,
fluormetro, etc. se realiza una curva con mediciones de concentraciones
conocidas, para despus realizar la medicin de la muestra problema e
interpolar el valor a la curva realizada.
Como en toda tcnica analtica el buen uso de los instrumentos de
medicin es imprescindible para obtener resultados confiables en todo
momento, esto se logra siendo cuidadoso y utilizando el material de la manera
correcta, pipetas y matraces volumtricos principalmente.
Los objetivos de la presente prctica se cumplieron satisfactoriamente,
debido a que fuimos capaces de realizar el espectro de absorcin de una
especia para despus realizar la curva de calibracin correspondiente para la
misma especie, obteniendo un resultado congruente con los datos y la tcnica
realizada.

BIBLIOGRAFA
Harris, D. C. (2007). Anlisis Qumico Cuantitativo. Barcelona Espaa:
Revert.
Skogg, D. A. (2008). Principios de anlisis instrumental. Mexico: Cengage
Learning Editores.