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Problemas
INTRODUCCION
1 Hacer una lista de las sustancias que se producen por fermentacin en el pas y
de las que se importan, estableciendo cantidades en kg/ao y precio en $/kg.
2. Buscar en la literatura el diagrama de flujo para la manufactura de los
siguientes productos: alcohol etlico, cido ctrico, penicilina y a-amilasa.
3. Hacer una lista de los lugares, en el pas, donde se pueden obtener cepas
para fermentacin, especificando el nmero y las especies disponibles.
4. Listar las principales diferencias entre los organismos eucariotes y
procariotes, considerando su posible uso en fermentacin. Mencionar algunos
ejemplos de cada uno.
CRECIMIENTO MICROBIANO
Nm. de organismos
mi
012345678
)().
2Q
,35
J2()
J81
3,,
Problemas
Problemas
306
TC
(h)
(g/l)
sustrato
0.100
0.122
0.149
5.0
4.96
Tiempo
0.2
0.4
0.6
0.8
0.41
20
37
0.26
1.0
1.5
2.0
2.5
3.0
3.5
4.0
5.0
CINETICA DE FERMENTACIONES
6.0
7.0
8.0
9.0
10.0
Tiempo
(h)
0
13
30
40
64
80
90
110
130
150
Concentracin del
sustrato
Biomasa
(g/l)
(g/l)
54.5
0.2
1.1
2.0
2.8
52.0
51.0
50.2
41.0
32.0
27.0
21.0
17.2
6.0
6.3
6.32
5.94
5.1
5.2
15.0
750
1 880
2 700
3 150
3 800
4 800
5 160
Tiempo
(h)
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
1.5
2.0
2.5
particular,
3.0
3.5
4.0
5.0
6.0
7.0
dx
+ px
dt
8.0
-1 dP
dt
0.221
0.269
0.441
0.724
1.187
1.94
2.54
2.56
2.53
2.51
2.48
2.46
2.43
2.41
4.90
4.84
4.76
4.66
4.31
3.74
2.80
1.27
0
0
0
0
0
0
0
(unidades/l)
0
0.00243
0.00540
0.00901
0.0134
0.0188
0.0379
0.0693
0.121
0.205
0.330
0.459
0.714
0.966
1.22
1.46
1.71
1.95
proponga uno.
10. Suponiendo que el siguiente modelo se ajusta a una fermentacin
dt
0.181
(g/D
Concentracin
producto
Producto
(unidades/ml)
dP
307
9.0
10.0
= a/u + (3
dP
Biomasa
(g/l)
0.1
0.122
0.149
Maltosa
(g/D
5.00
4.96
4. >2
a -am lasa
(ujl)
0.243
0.540
0.181
0.221
0.269
0.441
0.724
1.187
1.94
2.54
4.84
0.901
4.76
1.34
4.66
4.31
3.74
2.80
1.27
0
1.88
3.79
2.56
0
0
6.93
12.1
20.5
33.0
45.9
71.4
2.53
2.51
2.48
2.46
2.43
0
0
0
146.0
171.0
2.41
195.0
96.6
122.0
= tt /jx + /3 x
dt
308
Problemas
Problemas
309
. 'ymk>
wi-V
l:
'
D = 0.6 h~l
100
9
11
13
0.1
0.2
0.3
0.35
0.39
8.0
24.0
16.0
13.3
12.5
11.8
8.0
7.95
7.80
0.03
0.11
0.16
_
0.29
_
0.89
1.07
E. S i
bikl/i
TRANSFERENCIA DE MASA
0.04
Calcule la velocidad de mutacin (eventos de mutacin/organismo padre-generacin). Suponga que la /j del mutante es igual que la del padre.
14. Si un solo contaminante entra en un quimiostato, existe una probabili
dad finita de que salga del fermentador antes de dividirse. Calcule esta
probabilidad para una clula con un td de 2 h en un fermentador que opera a
las siguientes tasas de dilucin: 0.2, 0.5, 1.0 y 1.5 h-1 . -
15. Utilizando el modelo de Luedeking y Piret para la formacin de
producto dP/dt = atx /3x derive la ecuacin para el estado estacionario que
relaciona a concentracin del producto a la salida con la concentracin celular
y la velocidad de dilucin. Suponga una cintica tipo Monod. Cules son los
valores de a y 0 para la produccin de cido lctico en cultivo continuo que
se obtienen de los siguientes datos experimentales?
cido lctico
1.11
1.18
1.26
1.33
1.36
1.37
1.25
1.21
0.98
0.88
0.205
Tiempo/(h)
0.012
0.133
0.161
0.172
Numero de mutantes/ml
(i/D
0.114
200
300
(gil)
0.022
0.035
0.054
0.077
0.092
CULTIVO CONTINUO
.u
(h-1)
4m
125 m3
0.5 VVM
0.5 atm
30C
1_
Tiempo (seg)
10
20
30
40
50
60
Tensin de oxgeno
(KN/ma)
5.0
11.1
14.1
15.9
16.8
17.3
17.6
Problemas
311
310
tos:
N0Dj = 0.195
0.2 DT/Dj
a HL = 96 (ND - N0Dj)
N0
VW
/ PA 0 4
kLa (
a
kLa
/ Pe\0 -7
Mj
vs'5
N'5 (Calderbank)
Vs0-67
(Fukuda)
Problomas
312
(organismo/ml)
rw cn 2.4
0
10
O o
X 10"
1.07 X 107
(2.9 - 3.7) 107
(2.2- 3.3) 105
(7.5 - 9.5) 103
20
40
70
100
Rayos
(min)
U.V.
(seg)
313
Pmttlfiima
IR
(organismo/ml)
(3.7 - 4.4) 10"
(2.1 - 2.4) 101
(1.6 - 1.9) 107
0
3.5
4.0
(7.3
8.9)
(2.7 - 4.9)
(1.1 1.6)
(3.7 4.0)
4.5
6.0
7.0
10.0
106
10*
10*
105
121C?
b) Qu tipo de curva de inactivacin por radiacin se puede postular?
c) Se desea cuantificar Pseudomonas por plateamiento.
Cmo se asegurara de que B. subilis no se incluya en la cuenta de clulas
viables?
27. Se desea esterilizar continuamente 500 m3 de un medio que contiene
licor de cocimiento de maz para la produccin de gluconato de sodio. Un
experimento bach con 10 1 de este medio, con rpido calentamiento a la
temperatura de esterilizacin de 121C y un subsecuente enfriamiento rpido
a temperatura ambiente, requiri de 90 seg para alcanzar una probabili
dad suficientemente baja de sobrevivencia de un organismo. A qu tempera
tura se deber operar un esterilizador continuo si se desea operar con la misma
probabilidad de esterilidad en un reactor de flujo tapn con un tiempo de
residencia de 35 seg y un flujo volumtrico de 0.033 m3/seg? Como base de su
clculo, suponga que los contaminantes son esporas de Bacillus searohennophilus,cuya velocidad de muerte est dada por:
k=
a-e'rt
Tiempo
Caso I Caso I
T (C)
24
10
20
34
48
30
64
40
50
60
70
80
90
100
110
120
130
140
150
81
97
103
113
121
121
114
106
99
92
84
76
Caso III
tCQ
T(C)
28
36
48
70
121
121
105
90
78
68
60
52
47
42
37
34
26
58
90
121
121
80
48
30
18
V. 8. <
29. Se utiliza una centrfuga tubular con un radio de 2.05 in y una altura de
12 in para separar 2 lquidos con densidades de 62 lb/ft3 y 63.91 lb/ft3 . Para
obtener una separacin satisfactoria es necesario que el fluido pesado permu
nezca en la centrfuga 5.5 seg y el ligero 4.0 seg. La relacin volumtrica de los
fluidos es 1: 1 . El espesor del lquido pesado es 3/4 in.
a) Cul es la capacidad de centrfuga, expresada como galones de alimenta
cin total/minuto?
b) Determine dnde debern localizarse las dos salidas de la centrfuga.
30. Se desea aumentar la capacidad de un filtro de vaco rotatorio.
Indique, tan exactamente como le sea posible, el porcentaje de aumento de
capacidad con los siguientes cambios:
a) duplicacin de la velocidad de rotacin;
b) duplicacin de la concentracin de alimentacin;
c) duplicacin de la cada de presin, y
d) duplicacin de la distancia del espejo del lquido al fondo del cilindro.
314
Problemas
31. Un filtro de hoja con 20 ft2 de superficie dio los siguientes resultados
a 50 psi:
Tiempo
(minutos)
15
30
45
60
90
Volumen
filtrado (ft3)
100
163
213
235
258
incompresible.
a) Determine la resistencia especfica de la pasta y la longitud equivalente
de tela de filtro.
32. Cul es la capacidad en galones/min de una centrfuga que opera en las
siguientes condiciones:
Dimetro del rotor
24 in
Espesor de la capa lquida
3 in
Altura del rotor
16 in
Velocidad
1 000 rpm
Gravedad especfica del lquido
1.3
Gravedad especfica del slido
1.6
Viscosidad del lquido
3 cP
Tamao de partcula
30 i
PROTEINA UNICELULAR. ASPECTOS GENERALES
33. Se ha aislado una bacteria que utiliza metano como fuente de carbono.
Se propone usar un fermentador de 3 litros de volumen lquido en cultivo continuo
(I) - 0.2 h"1 y x = 10 g/1) para la produccin de biomasa. Los resultados
preliminares indican:
YCh4 =0.3 g
clulas/g
CH4,Yq =
0.4 g clula/g 02
Se lia estimado que las actividades crticas del metano y de oxgeno disueltos
son:
Actividad crtica para metano
0.05 atm
Actividad crtica para oxgeno
0.02 atm
HI fermentador se airea a 1.5 VVM con aire (20.9% 02, 79.1% N2) que se
mezcla con metano puro. El coeficiente de transferencia para el fermentador a
1.5 VVM es:
N(rpm)
kLa(h~l)
400
200
350
900
2500
500
700
1100
311
Problomns
316
Problemas
disear una planta que produzca 10 000 ton/ao de biomasa (C. utilis Ys =
0.5). Para ello se emplea bagazo de caa (70% celulosa), que ser hidrolizado
con celulasa de T. viride, producida por un sistema de cultivo continuo de dos
tanques en serie. Despus la enzima es preconcentrada e inyectada a un tanque
de hidrlisis continua de donde pasa finalmente al fermentador. Con tanques
de 400 1 se obtuvieron los siguientes datos:
317
Prnhlomns
(gf
24
25
5
10
q
(h V
0.096
0.105
0.20
0.0532
(n/1)
(K/l)
Productividad
(K/I-It)
9.4
4.4
0.871
6.24
18.0
12.0
0.91
0.47
0.25
0.52
0.162
SQ- S
y-
0.512
0.59
0.34
No reportado.
Fermentador de produccin
ae enzima
Actividad enzimtica
(h "V
(g/D
(g/l)
(h-1)
(unidades/ml)
0.10
0.15
0.20
0.25
0.27
5.0
5.0
4.6
0.1
0.1
0.1
2.0
3.8
0.0125
0.015
0.0185
0.02
2.4
2.05
3.4
3.0
TECNOLOGIA ENZIMAT1CA
2.6
2.54
1.44
0.025
30 h
40 h
39.14
50.21
75.32
57.60
64.98
73.11
77.54
81.97
81.97
85.66
89.35
81.97
88.61
90.83
94.52
6 X 10"3 M
101
200 1/h
3.5 X 104
unidades/1
300 unidades/mg
8 g/1
Mol de penicilina
hidrolizada por
minuto
ProhlonuH
318
Cules pueden ser las causas de las diferencias entre ambos tipos de opera
cin?
(das)
Enzimas
usadas*
(unidades)
Proceso en
columna
Proceso en
batch
30
60
90
1 221
488
488
5.13
5.13
5.13
0.82
0.33
0.33
44. La siguiente tabla presenta los datos obtenidos al adsorber una enzima
A en DEAE-Sefadex en una columna; despus se midi su actividad en dife
rentes condiciones.
carga
MM/h)
1 500
3 000
4 500
6 000
7 500
9 000
**
***
Actividad de
Adsorcin
de la
enzima
Componente
Harina do soy
Aceite do soya
Malta
Dextrosa
Almidn
Tiempo de
operacin *
Cantidad*
de enzima
310
SV = 4
SV = 6.7
SK = 5
100
65
53
43
100
88
80
90
87
86
78
67
76
74
65
71
64
85
87
70
69
63
62
61
la enzima
en la columna
nMfh***
2 953
4 040
3 799
3 920
3 739
3 678
columna?
Si la columna fuese de 90 mi (con similitud geomtrica y SV de 4), qu
datos esperara usted obtener?
BALANCE DE MATERIA Y ENERGIA EN FERMENTACION
Manteca de coco
Sales
Medio A
(i/0
Medio II
33
(k/D
30
3
1
0.01
25
1
0.01
10
50
KM
S
mM
V observada
0.25
0.333
0.50
0.18
0.30
0.35
mtA/min
1.0
0.48
2.0
0.80
4.0
0.82
Problemas
320
Problnmaa
P/min
A
mM
sin inhibidor
1.5
2.0
3.0
4.0
0.21
0.25
0.28
0.33
0.44
0.40
8.0
16.0
40 mM del
inhibidor
0.08
0.10
0.12
0.13
0.16
0.18
Moles de cido
pirvico formado
en 20 minutos
Concentracin
de fosfato de
piridoxal X 10* M
0.150
0.200
0.275
0.315
0.340
0.350
0.360
0.20
0.40
0.85
1.25
1.70
2.00
8.00
Determine la constante de Michaels-Menten para la enzima D-serina dehidratada con respecto al fosfato de piridoxal.
TRATAMIENTO DE AGUAS POR METODOS BIOLOGICOS
53. Una pequea industria produce agua con un DBO de 1 g/1. Las auforidades locales van a tratar el agua y cobrarn con base en la descarga de
DBO/da. Las caractersticas del agua son:
(asto
321
= 10 0001/h
DBO =
1 g/|
nx = -2h"'
ks =35 mg/l
Se cuenta con dos tanques para el pretratamiento de las aguas. Uno de ellos tiene
un volumen de 10 000 1 y el otro de 40 000 1. Suponiendo que ambos tanques
tienen un mezclado ideal, determine:
a) el orden ptimo de colocacin de los tanques en serie;
b) la concentracin de salida de los dos tanques en serie, y
c) la mejor decisin para la industria si la operacin y el mantenimiento de
los tanques es de $ 100/1 000 1-da y la autoridad local cobra a razn de
$ 30/kg BOD que se descargue.
54. En un tanque de tratamiento de aguas de 100 000 I se lleva a cabo una
Tiempo
(min.)
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
1500
3 000
5 000
7000
0
0.71
1.36
1.94
2.47
2.95
3.38
3.78
0
1.36
2Al
3.38
4.13
4.74
0
1.83
3.22
4.26
4.13
4.45
4.74
5.24
5.65
5.99
6.26
6.48
5.05
5.65
6.10
6.44
6.70
6.90
7.04
2.11
3.62
4.71
5.50
6.06
6.46
6.76
6.46
7.12
7.22
Problamos
322
Problemas
no contiene microorganismos.
10 000 mg/1
para recirculacin
105 1/h.
Flujo de recirculacin
Experi
mento
(Ntn)
(mgSo
/ s
<
\ < / \
DBO )
800
2
3
750
750
750
\ /[ * \)
mg DBO I mg SSLM
100
50
30
20
/
1 200
1 500
1 000
1 000
/
t
SVI \
(mi)
250
15
40
175
80
110
l-da I\
1 320
975
440
350
da
960
600
200
150
Velocidad
del impulsor
(rpm)
Velocidad de
absorcin de O 2
(mM/l-h)
Potencia medida
(kW-h/kg levadura)
16.7
19.4
23.7
21.8
26.3
27.8
39.0
0.475
0.615
0.572
0.528
0.589
0.615
0.610
50
70
85
50
70
85
85
Flujo diaire
(m'/h)
200
200
200
320
320
320
600
mg
\gSSLM) \
10
50
( F*x>\
(QA
1(mgOj SSLM
323
S0 = 85 mg DBO/l
S = 30 mg DBO/l
X= 3 000 mg SSLM/1
949.6
49.6
327.7
27.7
203.8
26.0
491.2
43.2
273.6
26.5
170.2
20.7
627.8
37.3
216.6
24.1
139.7
18.7
475
318
28
163.9
20.9
101.9
17.0
108.7
31.6
17.0
68.23
15.3
Prob/omus
Problemas
324
32b
Tiempo
1
&~
1
Oxigeno
dsuelto
(ppm)
0
10
5.2
5.2
5.2
5.2
4.7
4.2
3.7
3.1
2.6
2.0
1.5
20
30
40
50
60
70
80
90
100
110
120
130
150
160
1 VVM
3 litros
300 rpm
muestras
num.
(mi)
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
\ ii
YS
4.4
4.5
Tiempo
Oxigeno
(segundos)
disuelto
(ppm)
30
40
Volumen de
tiosulfato usado
(mi)
50
60
70
80
21
20.7
20.35
20
19.7
90
100
110
120
130
140
150
160
170
180
190
19.3
19.0
18.7
18.7
18.7
3.7
3.7
3.7
3.7
3.7
3.7
3.2
1.8
0.8
0.15
1.7
2.41
Se introduce aire
2.9
3.2
3.3
3.41
3.52
3.59
3.61
Cul es el k( a?
64. Usando el mtodo del balance de U2 en un fermenladr de 9 litros, u
29C que opera n 120 rpm se obtuvieron los siguientes datos para 0.5 VVM.
Vv
Se reinici la aeracin
0.5 N
0
20
Volumen de
29C
30C
Muestra
3.8
4.2
140
0.9
2.8
CtrfL
jfv-'
Se cort el uirc
Vi
n
-
lili
Problemas
326
'"t 4f
Tiempo
fermentacin
en el aire de salida
Oxigeno diselto
(ppm)
(%)
0
1
2
3
4
5
6
7
21
20.95
20.90
20.85
5-90
5.85
5.70
5.42
5.00
4.40
3.72
2.80
1.65
8
9
1.28
10
11
12
1.35
1.92
Determine el valor de
20.70
. .
'
20.55
20.40
20.10
19.60
18.90
18.50
18.70
19.30
Indice analtico
kLa.
65. Haga usted una revisin bibliogrfica de los diferentes soportes que han
sido utilizados para la inmovilizacin de la glucosa isomerasa. Indique sus
caractersticas fsicas (tamao de poro, densidad, etc.) y qumicas (solubilidad,
grupo reactivo, etc.) y proponga el que usara usted.
66. Investigue cules son los mtodos de inmovilizacin ms usados cuando
se piensa montar columnas de escala industrial. Cules son los criterios que se
deben seguir en estos casos?
67. Si se pudiera sintetizar un soporte "ideal", qu caractersticas pedira
usted, tanto fsicas como qumicas? De los soportes que conoce, tiene
alguno esas caractersticas? Cul?
68. Para una reaccin del tipo:
Acido
ctrico, 36
glutmico, 1 11
nucleico, 135, 136
orgnico, 22, 133
Acilasa, 23, 196
Actividad celuloltica, 190
Adsorcin, 196
Aeracin, 59
consumo de energa, 269
nmero de, 275
Aerobacter aerogenes, 34, 61, 65, 67, 69,
72, 124
A. cloacae, 36
Agentes
floculantes, 134
mutagnicos, 59
qumicos, 176
Agitacin, 59
consumo de energa, 269-279
Aislamiento, tcnicas, 20
Alcaligenes, 164
Alcalino-fosfatasa, 199
Alcoholes, 22
Amilasa 23. 201
Aminocidos, 22, 133
1,-aminoacidacilasa, 201
-aminocido oxidasa, 199, 214
Aminogruma, 157
Arilsulfatasa, 199
Arrhenius, ecuacin, 34, 234
Asparaginasa, 214
Aspergillus, 32, 165
A. niger, 34, 83, 159
Atrapamiento, tcnica, 196
Autocatlisis, 65
B
Bacillus cereus, 124
B. lincheniformis, 24, 1 24
B. megaterium, 120, 124
B. mycoides, 120, 124
B. natto, 120
B. stearothermophilus, 120
B. sub tlis, 94, 118, 120, 124
B. thermoacidurans, 1 20
Bagazo, en la produccin de SCP, I 79
Bafies, 87. 89
Bernoulli, teorema de, 277
Biomasa (ver protena microbiana)
Calor hmedo, en la esterilizacin. 1 16
Calor seco, en la esterilizacin, 1 16
Candida 32, 165
C. intermedia, 94
C lipolytica, 158
C. tropicalis, 158
C milis 34. 37. 83, 94, 105, 158, 178,
191
|327|