GUA METODOLGICA

PARA LA ELABORACIN DE
ANLISIS
MICROBIOLGICOS DE
FANGOS ACTIVADOS DE
ESTACIONES
DEPURADORAS DE AGUAS
RESIDUALES

Grupo Bioindicacin Sevilla

GUA METODOLGICA PARA LA

ELABORACIN DE ANLISIS
MICROBIOLGICOS DE FANGOS ACTIVADOS
DE E.D.A.R.s
Por

Grupo Bioindicacin Sevilla

Eva Rodrguez Gonzlez (SEAFSA)
Laura Isac Oria (Universidad de Sevilla)
Natividad Fernndez Moria (SEAFSA)
M Dolores Salas Rodrguez (Itsmo94)
Carmen Jimnez Gamero (EMASESA)

NUESTRO AGRADECIMIENTO A LAS EMPRESAS Y CENTROS A LOS QUE

PERTENECEMOS, POR SU APOYO Y COLABORACIN

A nuestras familias,
por soportar estoicamente
las horas extras dedicadas
a estos estudios.
A todos aquellos que
se inicien en este campo,
tan til y apasionante.

Las exigencias ambientales de la sociedad se recogen en una legislacin cada vez ms estricta,
que necesita un reciclaje continuo de los tcnicos y la autoformacin de stos en un campo
novedoso que proporciona mejores medidas de control operacional. La Bioindicacin se muestra
como un ensayo con grandes posibilidades de futuro, ampliando las salidas profesionales de
aquellos que se acerquen a profundizar en su estudio. Se abre un campo de trabajo a las nuevas
generaciones de bilogos, como sistema ptimo de control de la depuracin y de los procesos
implicados, y los coloca en vanguardia de las distintas profesiones que abarcan este tema. Su
predisposicin y conocimientos en Biologa les ayudan a adquirir el manejo del protocolo de
manera rpida y eficiente y les permite integrar el concepto de ecosistema depurador. Por otra
parte, esta publicacin est adecuada a profesionales de otras especialidades que se adentren en el
mbito de las aguas residuales y que quieran adquirir conocimientos actuales sobre el control
biolgico de los procesos.
El objetivo de esta gua metodolgica es el de presentar un protocolo claro y prctico, que
permita a los profesionales del sector realizar los ensayos necesarios para el anlisis del fango
activado. Nos proponemos tambin posibilitar un complemento a la formacin universitaria, ms
concretamente a los futuros profesionales en el mbito de las aguas residuales. Para ello, nuestra
labor ha sido la de compilar informacin, en muchos casos desperdigada, estructurarla y
someterla a evaluacin mediante la prctica. En esta documentacin se presentan tambin
resultados y conocimientos generados por el GBS desde su formacin, en 1998.

NDICE
DEFINICIONES
1.- DEFINICIN DEL SISTEMA

INTRODUCCIN

EL ECOSISTEMA DEPURADOR

ESTRUCTURAS DEL ECOSISTEMA

LA BIOINDICACIN

BIBLIOGRAFA

2.- EL MICROSCOPIO PTICO

15

INTRODUCCIN

ELEMENTOS DEL MICROSCOPIO; PROCEDIMIENTOS

TCNICAS MICROSCPICAS

BIBLIOGRAFA

3.- TINCIONES DE ORGANISMOS

PROTOZOARIAS

BACTERIANAS

OTROS ASPECTOS

BIBLIOGRAFA

25

4.- CLAVES IDENTIFICATIVAS

INTRODUCCIN

BACTERIAS FILAMENTOSAS

PROTOZOOS

METAZOOS

BIBLIOGRAFA

36

5.- MANUAL DE TRABAJO

104

TCNICA ANALTICA

DESARROLLO INVESTIGADOR DEL IF

DESCRIPCIN DEL NDICE DE MADONI

BIBLIOGRAFA

FICHAS DE RECOGIDA Y ANLISIS DE DATOS MICROBIOLGICOS

i

6.- IMPLICACIONES ECOLGICAS; APLICACIONES PRCTICAS

INTRODUCCIN

RUTAS METABLICAS Y EFECTO DE LOS SELECTORES

BIOINDICACIN APLICADA

BIBLIOGRAFA

7.- LBUM FOTOGRFICO

INTRODUCCIN

BIBLIOGRAFA

PROTOZOOS

BACTERIAS FILAMENTOSAS

OTROS ASPECTOS

123

145

8.- EJERCICIO DE INTERCOMPARACIN DE FANGOS ACTIVOS

ii

151

FIGURAS Y TABLAS
Captulo 1
FIGURAS
Figura 1: Tratamiento convencional de las aguas residuales
Figura 2: El ecosistema depurador
Figura 3: Diversidad bitica en fangos activos
Figura 4: Relacin entre el tamao flocular y la edad de fango (Garrido et al., 1988)
Figura 5: Estructuracin de la biomasa activa en fangos activados
Figura 6: Cadenas trficas en fangos activados
TABLAS
Tabla 1: Parmetros legislados para vertidos de aguas residuales
Captulo 2
FIGURAS
Figura 1: El microscopio ptico (Microscopio ptico Zeiss Axiolab)
Figura 2: Visin al microscopio ptico bajo el objetivo 10X durante la calibracin del micrmetro
Figura 3: Uronema sp. en campo claro (A) y bajo contraste de fases (B). Uronema sp. en campo claro en un
medio adicionado con lugol (C)
TABLAS
Tabla 1: Problemas que se presentan habitualmente durante la observacin microscpica y que desencadenan en
una mala imagen
Captulo 4
FIGURAS
Figura 1: Esquema de un protozoo de la Clase Phitomastigophora
Figura 2: Euglena pisciforme
Figura 3: Euglena viridis
Figura 4: Euglena tripteris
Figura 5: Gnero Phacus
Figura 6: Gnero Trachelomonas
Figura 7: Gnero Astasia
Figura 8: Gnero Urceolus
Figura 9: Orden Peranematales
Figura 10: Esquema de un protozoo de la Clase Zoomastigophora
Figura 11: Familia Multiciliidae
Figura 12: Familia Mastigamoebidae
iii

Figura 13: Tetraminus piryformis

Figura 14: Hexamita fissa
Figura 15: Trepomonas rotans
Figura 16: Grupo Coanoflagelados
Figura 17: Grupo Anfimonadinos
Figura 18: Grupo Bodonideos
Figura 19: Esquema de un protozoo del Orden Amoebida
Figura 20: Naegleria aquatilis
Figura 21: Vahlkampfia limax
Figura 22: Chaos difflens
Figura 23: Pelomyxa palustris
Figura 24: Dinamoeba mirabilis
Figura 25: Thecamoeba verrucosa
Figura 26: Esquema de un protozoo del Orden Testacea
Figura 27: Arcella gibosa
Figura 28: Arcella vulgaris
Figura 29: Arcella hemisphaerica
Figura 30: Actinophrys sol
Figura 31: Actinosphaerium eichorni
Figura 32: Acanthocystis mimetica
Figura 33: Esquema de un protozoo de la Clase Kinetogragminophora
Figura 34: Coleps hirtus
Figura 35: Trachelophyllum pusillum
Figura 36: Spathidium opimum
Figura 37: Hemiophrys fusidens
Figura 38: Hemiophrys bivacuolata
Figura 39: Litonotus fasciola
Figura 40: Colpoda cucullus
Figura 41: Trochilia minuta
Figura 42: Trochilia uncinata
TABLAS
Tabla 1: Caractersticas morfolgicas identificativas para bacterias filamentosas
Tabla 2: Caractersticas aplicables a tinciones para identificacin de bacterias filamentosas
Tabla 3: Clave identificativa para bacterias mviles
Tabla 4: Clave identificativa para bacterias creadoras de turbidez
Tabla 5: Clave identificativa para bacterias con dimetro del tricoma superior a 1m
Tabla 6: Clave identificativa para bacterias con dimetro del tricoma inferior a 1m
Tabla 7: Clave identificativa para bacterias de aspecto ramificado
Tabla 8: Clave identificativa para bacterias que normalmente acumulan grnulos de azufre
iv

Captulo 5
FIGURAS
Figura 1: Relacin entre el rango de IF y el porcentaje de reduccin de SS (n=109)
Figura 2: Relacin entre el rango de IF y el porcentaje de reduccin de DQO (n=109)
Figura 3: Relacin entre el rango de IF y el porcentaje de reduccin de DBO (n=67)
Figura 4: Relacin entre el rango de IF y el porcentaje de reduccin de nitrgeno y fsforo (n=67)
TABLAS
Tabla1: Categoras del ndice de Fango
Tabla 2: Cuantificacin de microorganismos filamentosos (EMASESA, 1997)
Tabla 3: Valoracin del IF
Tabla 4: Relacin de datos obtenidos en el estudio de cada uno de los participantes
Captulo 6
FIGURAS
Figura 1: Rutas degradativas
Figura 2: Metabolismo del carbono en fangos activados
Figura 3: Metabolismo del nitrgeno en fangos activados
Figura 4: Metabolismo del fsforo en fangos activados
Figura 5: Metabolismo del azufre en fangos activados
Figura 6: Relacin entre el tamao flocular y los rendimientos depuradores
Figura 7: Relacin entre la carga msica y el tamao flocular
Figura 8: Aprovechamiento del sustrato por bacterias filamentosas y no filamentosas
Figura 9: Distribucin de los organismos en funcin de los MLSS y el oxgeno presente en el reactor
Figura 10: Distribucin de los organismos entre la materia orgnica del influente y el tiempo de residencia en el
reactor biolgico
Figura 11: Reparto de los porcentajes de grupos de organismos en funcin de las caractersticas operacionales
(CM y MLSS)
TABLAS
Tabla 1: Relacin de bacterias filamentosas ms comunes en fangos activados con sus asociaciones
operacionales
Tabla 2: Tipo de alimentacin de diferentes especies de protozoos en funcin del tamao de partcula
Tabla 3: Tipo de alimentacin de distintos tipos de protozoos
Tabla 4: Frecuencia de aparicin de determinados organismos en funcin del rango de DBO5 de salida
Tabla 5: Citas bioindicadoras asociadas a protozoos

Captulo 7
NOTA: Las imgenes fotogrficas pertenecientes a este captulo se han nombrado como "lminas fotogrficas"
y estn enumeradas en la introduccin de este captulo
Captulo 8
FIGURAS
Figura 1: Representacin de resultados para el ndice de Madoni, en un ejercicio interlaboratorio
TABLAS
Tabla 1: Resultados de un ejercicio interlaboratorio

vi

INTRODUCCIN
El GRUPO BIOINDICACIN SEVILLA lo componen:
EVA RODRGUEZ GONZLEZ, Licenciada en Biologa (1988-1993). Jefe de Laboratorio de la EDAR
Tablada (Sevilla). S. E. Aguas Filtradas, S.A.
LAURA ISAC ORIA, Licenciada en Biologa (1992-1997). Tesis Doctoral: Determinacin de la
Actividad biolgica en procesos biolgicos aerobios. Grupo de Tratamiento de Aguas Residuales
(Universidad de Sevilla)-EMASESA.
NATIVIDAD FERNNDEZ MORIA, Licenciada en Qumica (1983-1988). Jefe de Laboratorio de la
EDAR Copero (Sevilla). S.E. Aguas Filtrada, S.A.
M DOLORES SALAS RODRGUEZ, Licenciada en Biologa (1986-1991). Explotacin EDAR
Guadalquivir (Sevilla). Itsmo94.
CARMEN JIMNEZ GAMERO, Licenciada en Qumica (1988-1993), Tcnico de Control de Calidad en
residuales. EMASESA.
Estos profesionales, relacionados todos con el sector de la depuracin, se renen en 1998 para
formar GBS partiendo de un objetivo comn: el estudio y difusin de los ensayos microbiolgicos en
fangos activados, como sistema de control efectivo y prctico del estado de actividad del reactor.
Todos ellos aportan al grupo su experiencia adquirida a lo largo de varios aos de dedicacin
profesional a varios aspectos directamente relacionados con el campo de las aguas residuales: puestas en
marcha, control analtico y explotacin de distintas EDARs, etc. y al medio ambiente en general.
Tras recopilar y revisar una amplia informacin bibliogrfica, desarrollan sus propios protocolos
de anlisis bilogico, los cuales someten a evaluacin de forma prctica, implantndolos en el control de
diversas estaciones depuradoras. Entonces elaboran un Manual de trabajo, que mediante interlaboratorios
programados de forma peridica, someten a continua revisin. Crean una base de bioindicacin, un lbum
fotogrfico y una gua bsica de protozoos. Parte de este trabajo se encuentra publicado en revistas
tcnicas y se ha presentado en congresos de mbito nacional e internacional como ponencias, psters, etc.
El grupo contina trabajando en diversos proyectos, con el fin de seguir profundizando y
desarrollando el anlisis microbiolgico en fangos activos (www.grupobioindicacionsevilla.com).

Este documento tiene como objetivo ofrecer una gua de trabajo en la que se rena toda la
informacin de inters, segn nuestro criterio, para realizar un anlisis microbiolgico de fangos activos.
Para ello se ha elaborado material diverso y se ha recopilado informacin de distintas fuentes,
que se encuentran citadas en el texto y desarrolladas en la bibliografa de cada captulo.
Sin embargo, existen varios apartados de esta gua (tinciones, manual de trabajo y claves
identificativas), donde la influencia de determinada bibliografa nos obliga a citarla como documento base
aparte:

Curds, C. R. y Hawkes, H. A. (1975). Ecological aspects of used-water treatment. Ed.

ACADEMIC PRESS INC. (Londres).

Departamento de Agua y Saneamiento del Ayuntamiento de Madrid (1997). Manual de

laboratorio para el anlisis de aguas residuales y lodos de depuracin. Publicacin del
Exmo. Ayuntamiento de Madrid.

EGEVASA (1998). Microbiologa de la depuracin mediante fangos activos. Publicacin

de la Empresa General Valenciana de Aguas, S.A. (EGEVASA), Exma. Diputacin de
Valencia.

EMASESA (1997). Microorganismos filamentosos en el fango activo. Publicacin de la

Empresa Municipal de Abastecimiento y Saneamiento de Aguas de Sevilla, S.A.

Madoni, P. (1994). A Sludge Biotic Index (SBI) for the evaluation of the Biological
Performance of Activated Sludge Plants based on the Microfauna Analysis. Water Research
28, 1, 67-75.

Madoni, P. (1988). I protozoi ciliati nel controllo di efficienza dei fanghi attivi.

Streble, H. y Krauter, D. (1987). Atlas de los microorganismos de agua dulce. La vida en

una gota de agua. Ed. Omega, Barcelona.

GRUPO BIOINDICACIN SEVILLA

Sevilla, 28 de noviembre de 2.002

DEFINICIONES
% de reduccin: Porcentaje de eliminacin de contaminantes (SS, DQO y DBO5) en una E.D.A.R. en funcin
de las entradas y salidas a la misma.
Bacterofago: Organismo cuya alimentacin est basada en las bacterias.
Bulking filamentoso o esponjamiento: Alteracin en la sedimentabilidad de los fangos activos por crecimiento
excesivo de las bacterias filamentosas.
Bulking viscoso: Alteracin en la sedimentabilidad del fango producida por la excrecin masiva de polmeros
extracelulares, consecuencia del metabolismo estresado de las bacterias ante dficits de nutrientes.
Caractersticas macroscpicas: Caractersticas del fango activado observables a travs del ensayo de la V30.
Caractersticas microscpicas: Caractersticas del fango activado apreciables a travs de una observacin
microscpica.
CM: Carga msica; kg. de DBO5 de entrada al reactor biolgico en funcin de los MLSS disponibles
(alimento/comensales).
Crecimiento disperso: Desarrollo de bacterias libres en el espacio interflocular que generan aumentos de
turbidez en el clarificado.
Crecimiento epiftico: Crecimiento de bacterias sobre la superficie de otra, generalmente filamentosa. Puede
ser de forma transversal o en paralelo.
DBO5: Demanda biolgica de oxgeno por incubacin durante cinco das en oscuridad y a 20 C.
DQO: Demanda qumica de oxgeno por oxidacin con dicromato potsico.
Ecosistema: Unin de individuos de muchas especies, en el seno de un ambiente de caractersticas definidas e
implicados en un proceso dinmico e incesante de interaccin, ajuste y regulacin, expresable, bien como
intercambio de materia y energa, bien como una secuencia de nacimientos y muertes y uno de cuyos resultados
es la evolucin a nivel de las especies y la sucesin a nivel del sistema entero (Margalef, 1989).
Edad del fango: Relacin entre los MLSS y los slidos extrados mediante los fangos en exceso.
E.D.A.R. Estacin depuradora de aguas residuales. Equivalente a ERAR: Estacin recuperadora de aguas
residuales.
Efluente: Vertido depurado.
Escala de los saprobios: Sistema de clasificacin de los organismos en funcin del consumo de DBO5 de las

aguas donde se encuentran.

Estrategia k: Estrategia de desarrollo avanzado de determinados organismos con tasas de crecimiento bajas,
que reemplazan a los oportunistas, una vez que el sistema se ha asentado. Se caracterizan por intercambios bajos
de energa con el medio.
Estrategia r: Estrategia de desarrollo de determinadas especies, caracterizadas por su poca especializacin y su
crecimiento alto. Primeras colonizadoras de los sistemas. Especies oportunistas. Intercambios muy altos de
energa con el medio.
Eutrofizacin: Aumento del crecimiento de las algas en una masa de agua, condicionado por una entrada
excesiva de nutrientes (nitrgeno y fsforo), situacin que genera la anoxia en la zona por un alto consumo de
oxgeno o por degradacin de la propia materia orgnica aportada por las algas.
Fagotrofo: Alimentacin de tipo hetertrofo por expansin del citoplasma con el que el organismo envuelve el
alimento y lo degrada ms tarde en una vacuola digestiva.
Fango activado: Tambin se denomina licor mezcla. Contenido del tanque de aireacin o reactor biolgico,
compuesto de organismos vivos junto con el material introducido en el tanque a travs del efluente primario.
Flculo: Forma de agregacin de partculas orgnicas e inorgnicas del agua residual, junto con bacterias
formadoras de flculo y bacterias filamentosas, que se ve facilitada por la excrecin de polmeros extracelulares
microbianos. La estructura generada es capaz de diferenciarse de la fase lquida y por lo tanto promover la
separacin de fases en los decantadores secundarios.
Foaming: Generacin de espumas en el reactor biolgico o en los decantadores secundarios consecuencia del
desarrollo de bacterias filamentosas. Generalmente asociado al gnero Nocardia.
Fraccin soluble: Fraccin tanto de la DQO como de la DBO5 que se encuentra solubilizada en el medio.
Frotis: Extensin de una muestra en forma de pelcula sobre un portaobjetos.
Glicolax: Material polisacrido de excreciones bacterianas.
Gonidios: Estructuras en forma bacilar o cocal en el extremo del filamento cuando se va a producir una fase de
gemacin.
h. eq.: Habitante equivalente, definicin de la unidad terica de poblacin utilizada para el clculo de
contaminacin de las aguas residuales.
IF: ndice de fango. Obtenido a travs de una valoracin de las caractersticas macroscpicas y microscpicas
del fango activado.
Influente: Caudal de entrada a planta.
IVF: ndice volumtrico de fangos. Medida de la decantabilidad de los fangos que relaciona la V30 con los

MLSS.
Medio anaerobio: Medio dnde no existe ninguna forma de oxgeno disponible por las bacterias y el
metabolismo es fermentativo.
Medio anxico: Medio dnde no existe oxgeno disuelto, pero existe oxgeno combinado formando parte de
molculas, como los NO3, como aceptores finales para el metabolismo bacteriano.
Medio xico: Medio dnde existe oxgeno disuelto; equiparable a medio aerobio.
Nicho ecolgico: Funcin de una especie dentro del ecosistema.
Oligosaprobios: Escala de saprobiedad para aquellos organismos asociados a consumos de DBO5 de su hbitat,
bajos.
Organismo auttrofo: Organismo que se nutre slo de compuestos inorgnicos que asimila mediante el
proceso denominado fotosntesis.
Organismo hetertrofo: Organismo que slo se nutre de sustancias elaboradas por otros seres vivos. Existen
diversos tipos de heterotrofia: depredacin, parasitismo, simbiosis, saprofitismo y comensalismo.
Organismo quimiorganotrofo: Aquel que obtiene energa para sus procesos metablicos mediante una sntesis
qumica de compuestos orgnicos sencillos (hidrgeno, metano...).
Pinpoint floc: Escasa formacin flocular, por vertidos o por corresponderse con la fase de formacin, que
determina un flculo de muy pequeo tamao, "en cabeza de alfiler", con mala decantacin.
Polisaprobios: Escala de saprobiedad para aquellos organismos asociados a consumos de DBO5 de su hbitat,
altos.
Ramificacin falsa: Bacteria filamentosa que presenta ramificacin, pero se puede apreciar la discontinuidad
citoplasmtica.
Ramificacin verdadera: Bacteria filamentosa que presenta ramificacin en la que existe continuidad
citoplasmtica.
Reactor biolgico o cuba de aireacin: Tanque de grandes dimensiones dnde se encuentra un cultivo
biolgico aerobio concentrado gracias a los fangos en exceso recirculados, que se encuentra alimentado por el
agua residual y es mantenido mediante un aporte extra de oxgeno.
Rosetas: Estructura radiada en forma de flor que generan las bacterias filamentosas del azufre, cuando su
metabolismo es alto.
SS : Slidos en suspensin.

CAPTULO 1.- DEFINICIN DEL SISTEMA.

INTRODUCCIN
El proceso que se desencadena en un cauce por un aporte extra de materia orgnica y nutrientes, en
cuyo estudio ha profundizado la limnologa, es por desgracia un fenmeno de actualidad, debido al desarrollo
industrial y al crecimiento de las urbanizaciones y de las explotaciones agrcolas. Estos factores han generado
tanto la degradacin de los medios acuticos, como el aumento en la necesidad de los recursos hdricos, cada da
ms escasos.
En la naturaleza se produce una serie de transformaciones cclicas en las que intervienen los
productores primarios mediante la asimilacin del CO2 a travs de la fotosntesis, consumidores primarios y
secundarios, as como la cadena inversa de estos procesos, es decir, la descomposicin y mineralizacin de los
restos orgnicos y organismos muertos, realizada por hongos y bacterias. De hecho, se calcula que el 90 % de la
mineralizacin de los tomos de carbono orgnico es el resultado de las actividades metablicas de hongos y
bacterias (Stanier et al., 1996).
Los organismos presentes en un cauce receptor, organizados en funcin de diversas circunstancias
externas e internas, se encuentran representados en funcin del grado de madurez del sistema, el cual se
relaciona a su vez con la complejidad y organizacin de la comunidad (Margalef, 1983). Cuando se produce una
entrada de carga orgnica en un cauce receptor, estos organismos reaccionan acelerando el metabolismo
descomponedor, teniendo en cuenta, entre otros factores, la velocidad de entrada de oxgeno en el sistema. Esta
nueva situacin genera una serie de cambios de especies hacia el rango de los polisaprobios.
Tanto la marcha del proceso como la ordenacin en el espacio de comunidades saprobias a las que da
lugar esta alteracin, dependen del material orgnico de entrada, cuya concentracin se puede expresar como
DBO5 o de una manera ms general, como cantidad total de oxgeno que se requiere para su oxidacin
(Margalef, 1983). El resultado es una nueva situacin en la que, para hacer frente a la alteracin producida, se
han modificado las cadenas trficas establecidas, reducindose las interacciones.
Este proceso natural, en el que no tiene porqu intervenir la mano del hombre y que se produce
espontneamente en los cauces, es equiparable al sistema biolgico utilizado para la depuracin de aguas
residuales mediante fangos activos. En dicho sistema de depuracin, los organismos presentes en el agua
residual son empleados como inculo en un ambiente controlado, en el que se permite el desarrollo de una
biocenosis capaz de aumentar la velocidad de mineralizacin de la materia orgnica.
Este sistema de depuracin fue denominado en 1914 por Arden y Lockett como lodos activos. El
proceso de tratamiento biolgico de aguas residuales por lodos activos, persigue el desarrollo de una biomasa de
microorganismos capaz de degradar y flocular la materia orgnica (Esteban, 1989). Este cultivo biolgico en
1

suspensin, adems, puede ser separado en los decantadores secundarios del agua depurada, que ser devuelta al
cauce receptor sin prejuicios para ste, contribuyendo al mantenimiento del caudal ecolgico. Este fango
activado o cultivo biolgico, tras ser concentrado y sometido a tratamientos posteriores, puede ser reutilizado en
diversos fines.
En resumen, el tratamiento convencional de aguas residuales urbanas (Figura 1), tiene como objetivo la
biodegradacin de la materia orgnica presente en el influente (colector), a partir de un tratamiento preliminar
de tipo fsico (pretratamiento y tratamiento primario) y un proceso de depuracin biolgica en el tratamiento
secundario. En el tratamiento biolgico o secundario se produce la asimilacin de la materia orgnica a partir de
un proceso de biofloculacin y metabolizacin selectiva de nutrientes (nitrgeno y fsforo), en el que interviene
un cultivo microbiolgico constituido principalmente por bacterias, que han sido seleccionadas en el agua
residual gracias a la modificacin de los parmetros operacionales (grado de oxigenacin, agitacin, tiempo de
residencia....).

AGUA
RESIDUAL

PRETRATAMIENTO
Y
TRATAMIENTO 1

REACTOR
BIOLGICO

FANGOS 1

ESPESAMIENTO

DECANTACIN 2

AGUA
TRATADA

FANGOS 2

DIGESTIN

DESHIDRATACIN

EVACUACIN
DE LODOS

Figura 1: Tratamiento convencional de las aguas residuales urbanas. Lnea de agua (Pretratamiento, tratamientos primario y secundario).

Dentro de este sistema, en el que el oxgeno es el principal parmetro implicado en la disminucin de

los residuos orgnicos, las bacterias son las verdaderas responsables de la estabilizacin de la materia orgnica
(Glaser, 1988) y de la floculacin (Sponza, 2002), pero no por ello es menos importante el papel desarrollado
por los protozoos (Ratsak et al.., 1996).
Por tanto, se puede hablar de una extrapolacin de fenmenos naturales, si consideramos una planta
depuradora de aguas residuales como un ecosistema artificial al que se ha llevado a condiciones extremas de
entrada de materia orgnica (Madoni y Ghetti, 1981). Los microorganismos favorecidos por el ambiente local
forzado se reproducen, pero disminuyen en sus poblaciones cuando cambian las condiciones del influente, las
condiciones ambientales y/o las operacionales.
Probablemente, no va contra la ciencia sugerir que en algn lugar existen distintos microorganismos
que bajo condiciones adecuadas, pueden oxidar cualquier sustancia que tericamente pueda ser oxidada (Gale,
1952). De la misma forma, en los tratamientos biolgicos de depuracin se aprovecha la capacidad colectiva de
los microorganismos para degradar una amplia variedad de materiales orgnicos (Stanier et al., 1996).
Modificando las condiciones externas a travs de los parmetros de control del proceso, principalmente,
seleccionamos las especies adecuadas para degradar los compuestos que llegan en el agua residual, que pueden
cubrir un amplio abanico que abarca tanto compuestos muy rpidamente degradables como la glucosa, hasta
compuestos recalcitrantes. Prcticamente, podremos depurar de manera biolgica todos los compuestos
contaminantes presentes en el agua residual.

EL ECOSISTEMA DEPURADOR Y SUS IMPLICACIONES PRCTICAS

Una vez definido el sistema depurador como un ecosistema, podemos aplicar a su estudio las teoras
ecolgicas (Figura 2). Dentro de la estructura de un ecosistema, se puede distinguir el conjunto de factores
ambientales de una determinada zona (biotopo), compuesto por el oxgeno aportado, la recirculacin como
factor determinante en el mantenimiento de la biomasa activa y las caractersticas del agua residual de entrada.
Y, por otra parte, se diferencia la comunidad de los seres vivos que habitan en l (biocenosis), compuesta por los
descomponedores (bacterias, hongos y flagelados) y los consumidores (ciliados, flagelados, rizpodos y
pequeos metazoos), que establecen relaciones de competencia entre s por el alimento y la depredacin.

SS, DQO,
DBO

OXI

SS, DQO,
DBO

LUZ

NUTRIENTES

MLSS
VOLUMEN REACTOR AEROBIO

EMIGRACIONE
INMIGRACIONE

COMPOSICIN QUMICA DEL

AGUA

COMPOSICIN QUMICA DEL SUELO

RECIRCULACIN
BIOTOPO
BIOTOPO

DESCOMPONEDORES: BACTERIAS, FLAGELADOS,

HONGOS Y CILIADOS

PRODUCTORES PRIMARIOS. ALGAS Y PLANTAS

CONSUMIDORES: FLAGELADOS, CILIADOS Y

PEQUEOS METAZOOS

CONSUMIDORES PRIMARIOS: HERVBOROS

CARNVOROS: CILIADOS Y PEQUEOS METAZOOS

CONSUMIDORES SECUNDARIOS: CARNVOROS

BIOCENOSIS
BIOCENOSIS
NUTRIENTES

OXGENO

BACTERIAS

SALIDA

ANIMALES MUERTOS
Y EXCRECIONES

CONSUMIDORES SECUNDARIOS

CIL BACTERIFAGO
CONSUMIDORES PRIMARIOS
FLAGELADOS
CILIADOS

CIL OMNVORO
PRODUCTORES PRIMARIOS
CIL CARNVORO
DESCOMPONEDORES

NUTRIENTES

ECOSISTEMA
ECOSISTEMA

Figura 2: El ecosistema depurador. Equivalencia entre un sistema natural (derecha) y el ecosistema artifical generado en una
E.D.A.R. con tratamiento biolgico (izquierda). CIL: ciliados.

En general, las poblaciones bacterianas y protozoarias siguen una curva normal de crecimiento, que se
ve alterada por la influencia de otras. Este crecimiento tiene varias fases:
-

Latencia: que es el tiempo que transcurre hasta alcanzar una velocidad de crecimiento constante.

Exponencial o logartmica: dnde se alcanza una velocidad de crecimiento exponencial.

Estacionaria: el nmero de clulas viables permanece estable por limitaciones medio ambientales,
como puedan ser las concentraciones de determinados oligoelementos, aportados por las aguas
brutas y que pueden determinar el potencial enzimtico de las clulas al actar como
biocatalizadores de las funciones esenciales.

Muerte: disminuye el nmero de clulas.

4

El conjunto de curvas de crecimiento de los distintos organismos interacciona evolucionando en el

tiempo. Tomando como base la composicin del agua residual y las condiones operacionales y ambientales, se
generan interacciones trficas de nmero variable en funcin de las caractersticas de cada E.D.A.R. El estudio
de este tipo de relaciones, junto con una valoracin del estado de la biota establecida, aporta una informacin
integrada, que junto con los anlisis fsico-qumicos, contribuyen a un enfoque ms amplio de la situacin.
Por otra parte, las tendencias legislativas parecen indicar que las limitaciones para emisin de
nutrientes en un cauce receptor, se van a ampliar cada vez ms (N y P, adems de DQO, DBO y SS), de forma
que se exigir una adecuacin en todas las plantas, para conseguir los rendimientos requeridos, lo que incluir la
incorporacin de tratamientos especiales para eliminar nutrientes en las E.D.A.R.s de nueva construccin.
El compromiso de calidad de las empresas, as como la consecuente necesidad de optimizacin de los
procesos, les lleva a necesitar tcnicos expertos en lo que supondrn nuevas lneas de trabajo. Por lo tanto, la
identificacin de los grupos bacterianos implicados en estos procesos (nitrificantes/desnitrificantes y
acumuladores de fosfatos poli-P), junto con otros grupos indicadores de la buena marcha del proceso y de las
alteraciones de ste, permiten al tcnico poseer una formacin adicional que repercutir doblemente de forma
positiva: por una parte, en un beneficio medio ambiental, ya que un mejor conocimiento de los procesos permite
que estos puedan ser optimizados y, por otra parte, una ventaja para la empresa, que ser ms competitiva
respecto a otras del sector de residuales, si cuenta con este tcnico en su plantilla.

ESTRUCTURA DEL ECOSISTEMA

En el ecosistema de fangos activos, en el que la produccin de biomasa juega un papel fundamental en
el proceso de flujos de energa y ciclado de nutrientes, los protozoos, que constituyen aproximadamente el 5%
del peso seco del licor mezcla (Curds, 1973), son muy importantes en la reutilizacin de nutrientes, por tratarse
de organismos de vida muy corta (metabolismo muy alto), que adems aceleran la toma de nutrientes por las
bacterias y su reciclado posterior (Schonborn, 1992).
Se trata de relaciones ecolgicas, con las que se consigue la estabilizacin de la materia orgnica por
oxidacin biolgica. El resultado neto de la sucesin es un incremento de la simbiosis entre las especies, la
conservacin de nutrientes, el aumento en la informacin contenida y un aumento de la estabilidad (Margalef,
1989). Sin embargo, fenmenos como la tensin climtica o nutricional, pueden impedir a una comunidad
alcanzar el nivel mximo de madurez, mantenindose el ecosistema en estados intermedios o incluso inferiores
de desarrollo. Esta circunstancia es muy comn en una E.D.A.R., en la que siempre se trabaja bajo mxima
tensin, al tratarse de aguas con elevada concentracin de materia orgnica (niveles de meso o polisaprobiedad),
que incluso soportan la presencia de vertidos industriales (Esteban, 1989), y en la que, en consecuencia, se
desarrolla una microfauna de baja diversidad y alta densidad para esas pocas especies. Adems, el factor
primordial en la E.D.A.R., es el control de la calidad del vertido depurado, frente a la produccin de biomasa
como proceso fundamental del flujo de energa y el ciclado de nutrientes en el ecosistema (Schonborn, 1992).
Por lo tanto, en cada estacin depuradora nos encontraremos con una diversidad distinta, entendida sta como
una expresin de la estructura que resulta de las formas de interaccin entre los elementos de un sistema
5

(Margalef, 1989), que vendr impuesta por las necesidades operacionales y depuradoras de cada E.D.A.R. La
diversidad bitica presente en los fangos activados, est constituida fundamentalmente por los grupos de
bacterias, protozoos y pequeos metazoos (Figura 3).
Estos grupos de organismos reaccionan, junto con la materia orgnica del medio, formando estructuras
ecolgicas de menor tamao, con capacidad tanto depuradora, como diferenciadora de fases. Estas estructuras
ecolgicas mnimas se denominan flculos. Un flculo est compuesto por materia orgnica, bacterias
filamentosas y formadoras de flculo y constituye, en s mismo, el ncleo de la depuracin.
El estudio del flculo (estructura, compactacin, etc.) genera informacin sobre su desarrollo y sobre la
poblacin de bacterias filamentosas, lo que permite diagnosticar y prever el estado y rendimiento del proceso.
La concentracin de bacterias filamentosas que se encuentran en el flculo es fundamental, ya que crea el
entramado sobre el que se asientan el resto de componentes floculares. Un descenso excesivo en la
concentracin de filamentos, provoca un debilitamiento y rotura del flculo, que al ser agitado en el reactor, se
rompe y escapa con el efluente en forma de microflculo (lmina 78). En el caso contrario, una concentracin
elevada provoca un aumento de la superficie flocular, lo que dificulta la decantacin y promueve la liberacin
de slidos con el efluente (lminas 76-77). En el apartado de alteraciones de los fangos activados (Captulo 7),
se detallan los principales episodios que se pueden producir por modificaciones en la estructura del flculo.

ORGANISMOS
DEPURADORES
BACTERIAS
F OR MADORAS DE FLCULO

NO FORM DE FLCULO

FILAMENTOSAS

PROTOZOOS
FLAGELADOS
GRANDES FLAG

PEQ FLAG

AMEBAS
CON TECA

SIN TECA

CILIADOS
NAD ADOR

REPTANTE
METAZOO

ROTFERO

NEMTODO

GASTROTR ICO

ANLIDO

Figura 3: Diversidad bitica en fangos activos: Bacterias, Protozoos y Metazoos.

SSIL

En la formacin del flculo, la bacteria ms significativa, o al menos la ms ampliamente citada en la

bibliografa es Zoogloea sp. (lmina 85), perteneciente a la familia Pseudomonaceae. Sus clulas, en forma de
bastn, son Gram positivas y con un tamao de 0,5-1 m. Su nutricin es quimiorganotrofa .
Sin ser sta la nica bacteria formadora de flculo, tiene un especial inters su seguimiento por el
fenmeno de bulking viscoso o zoogloeal (lminas 64-67), que provoca cuando su proliferacin es excesiva. El
origen de este tipo de bulking reside en la utilizacin para el metabolismo celular de fuentes nutricionales
internas, consecuencia de concentraciones de nutrientes en el medio escasas (niveles bajos de nitrgeno y
fsforo) .
Estos desequilibrios pueden deberse al influente o a edades de fango excesivas. En este segundo caso,
es decir, en sistemas con elevados tiempos de retencin celular, existe un significativo reciclado de nutrientes
debido a la propia lisis celular, liberndose nutrientes al licor mixto. En general se promueve el metabolismo de
los grnulos de reserva.
Si valoramos el entramado y el estado del flculo, podemos realizar una estimacin sobre la fase de
formacin en la que ste se encuentra (Figura 4). Mientras que los flculos de mayor tamao (3 mm) y los ms
ramificados son los que predominan en edades de fango de ms de 15 das, para edades de 5 das normalmente
aparecen medidas de 500-1500 m. Si la puesta en marcha ha sido reciente, el tamao del flculo es pequeo
(50-500 m) (Garrido et al., 1988). Podemos, por lo tanto, diferenciar a grandes rasgos entre:

Fase de formacin: el flculo apenas est definido

Fase de crecimiento: el tamao medio oscila en torno a 60-90 m

Fase de desarrollo ptimo: tamao medio de flculo en torno a 1500 m

Fase de envejecimiento: flculos de tamao excesivo, mayores de 1500 m

TAMAO FLOCULAR ( m)
2000
m

1500
1000
500
0
1

DAS

Figura 4: Relacin entre el tamao flocular y la edad de fango (Garrido et al., 1988).

De esta forma, una estructura ptima de flculo se presenta con un ncleo de materia orgnica
condensada, dnde se produce un ambiente anxico y un exterior aerobio, con la consiguiente distribucin
espacio-temporal de los organismos implicados. Asociados a esta estructura, se encuentran los protozoos
ciliados, fundamentalmente reptantes y ssiles, estableciendo cadenas trficas ms o menos complejas segn el
estado y funcionamiento de la E.D.A.R.
Los distintos niveles de estudio en los que podemos dividir nuestro ecosistema partiendo de la
compartimentacin ms amplia del sistema, pueden ser (Figura 5):

Fango activado: Valorado a travs de la decantacin mediante la V30.

Espacio intraflocular y extraflocular: Valorado mediante el estudio micrscopico del fango

activado.

Flculo: Valorado en funcin de la estructura interna de ste.

En el reactor biolgico aerobio, se generarn una serie de relaciones trficas en funcin de las
caractersticas del influente y de las condiciones ambientales y operacionales. Los parmetros determinantes
dentro de las caractersticas del influente seran los nutrientes junto con la DQO y DBO5 biodegradables
(soluble y particulada) y su proporcin con las no biodegradables o inertes.
Como explotadores, debemos modificar los parmetros de operacin de forma que manteniendo los
costes y los rendimientos de depuracin, podamos generar la mayor cantidad de interrelaciones posibles, ya que
esto permitir una estabilizacin en nuestro ecosistema y un aprovechamiento mejor de los flujos de energa.
La recirculacin de fangos, mantendr una biomasa activa en el reactor, que junto con la edad del
fango, niveles de oxgeno y tiempos de residencia, permitir mantener en estado ptimo la definicin del
8

ecosistema en su unidad bsica: el flculo de fango activo. Esta estructura presenta como primer determinante
de su formacin los parmetros fijos de construccin, que limitarn en parte las relaciones, y a ellos se sumarn
las condiciones ambientales de la zona que, en principio, son ms difciles de controlar.
El siguiente paso de estudio de nuestro ecosistema, sera la divisin entre el flculo y el espacio
interflocular (Figura 5). En esta compartimentacin se encontraran los protozoos ciliados nadadores (lminas
19-21 y 23-25), flagelados (lminas 1-2) y amebas (lminas 3-9), asociados al espacio interflocular junto con
bacterias dispersas (lminas 79-80). Los organismos asociados al flculo son los ciliados reptantes, ssiles y
bacterias formadoras de flculo (lminas 81 y 85).
Las bacterias filamentosas (lminas 41-62) y los metazoos (lminas 34-40) comparten ambos
ambientes. Segn sea el estado del ecosistema, estos organismos aparecern situados en uno u otro espacio.

FLCULOS
FLAGELADOS

NCLEO
EXTERIOR
BACT FORMADORAS FLCULOS
BACTERIAS FILAMENTOSAS

CILIADO REPTANTE

CILIADO NADADOR

BACTERIAS DISPERSAS
CILIADO SSIL

BACTERIAS FILAMENTOSAS
M.ORGNICA NO FLOCULADA
ESPACIO INTERFLOCULAR

Figura 5: Estructuracin de la biomasa activa en fangos activados.

En el flculo, los ciliados reptantes llevan a cabo la eliminacin de bacterias de la superficie mediante
su ingesta (lminas 22 y 26-29), a la vez que mejoran la oxigenacin gracias a su desplazamiento sobre el
fculo, favoreciendo la transferencia de oxgeno a las zonas interiores. Las condiciones del sustrato natural de
este grupo, el flculo, van a determinar, entre otros factores, su nivel de poblacin.
Los ciliados ssiles contribuyen a dar consistencia al flculo (lminas 11-18), mejorando su
decantabilidad y disminuyendo con su alimentacin el nmero de bacterias dispersas libres en el espacio
interflocular.

El grado de madurez de un fango se puede apreciar observando la aparicin o desaparicin de los

distintos grupos de bacterias, protozoos y macroinvertebrados presentes en l (Moro y Leborans, 1988). En la
Figura 6 se esquematizan las distintas cadenas trficas que se establecen en el ecosistema de fangos activos.

METAZOOS

PROTOZOOS
PREDADORES
(CARNIVOROS)

PROTOZOOS
(PREDADOR
OMNIVORO)

PROTOZOOS
BACTERIOFAGOS

PROTOZOOS
FLAGELADOS

BACTERIAS

MATERIA
ORGANICA

Figura 6: Cadenas trficas en fangos activos.

LA BIOINDICACIN
A nivel ecolgico, el estudio de este ecosistema bajo condiciones de estrs, aporta una informacin
valiossima ante una situacin de desequilibrio (ambiental, operacional o variaciones del influente), pero no deja
de ser un estudio terico de funcionamiento. Sin embargo, si queremos aplicar este tipo de evaluacin al control
10

del proceso depurador, tenemos que encontrar tcnicas que permitan obtener informacin adicional a los
resultados aportados por los parmetros fsico-qumicos.
Es ms fcil y rpido determinar la cantidad de materia oxidable presente en un agua, que hacer un
censo de los organismos presentes (Margalef, 1983), ya que la tarea de identificacin es ardua y precisa de
conocimientos previos sobre morfologa, tinciones, etc. Sin embargo, en el estudio de la contaminacin, el uso
de indicadores biolgicos se justifica cuando el factor o agente que se desea medir, no es asequible por otros
mtodos (Margalef, 1983), como es el caso de los vertidos industriales. O simplemente, permite al operador
afrontar una situacin desde otro punto de vista, que aporte informacin para reducir las alteraciones que se
puedan producir.
Por otra parte, la legislacin en materia de aguas residuales (Directiva 91/271/CEE, RDL 11/1995 y RD
509/1996) exige unos rendimientos de depuracin que requieren de fuertes inversiones en materia de
infraestructura, para dotar a todas las poblaciones de ms de 2.000 h-eq de sistemas de depuracin. Dentro de
esta directiva se diferencian vertidos a cauces con riesgo de eutrofizacin (Tabla 1), dnde adems de los lmites
de SS, DBO5 y DQO se limitan las emisiones de nutrientes (nitrgeno y fsforo).

Tabla 1: Parmetros legislados para vertidos de aguas residuales.

PARMETRO
DBO5
DQO
SS

CONCENTRACIN
25 mg/L
125 mg/L
35 mg/L (> 10000 h-eq)

% RED MNIMO
70-90 %
75%
90%

60 mg/L ( 20000-10000 h-eq)

FSFORO TOTAL *

2 mg P/L (10000-100000 h-eq)

80%

1 mg P/L ( >100000 h-eq)

NITRGENO TOTAL *

15 mg N/L ( 10000-100000 h-eq)

70-80 %

10 mg N/L (>100000 h-eq)

(* :Limitaciones de nutrientes en zonas sensibles cuyas aguas sean eutrficas o tengan tendencia a serlo en un futuro prximo)

Ya que el objetivo de la normativa implica una relacin entre la explotacin de las depuradoras y el
mantenimiento de los sistemas acuticos, es recomendable disponer de herramientas que aporten otra visin
sobre procesos especficos, como son la eliminacin de nitrgeno (procesos de nitrificacin/desnitrificacin) y
la eliminacin de fsforo (alternancia de selectores anaerobio/anxico/xico), donde los parmetros fsicoqumicos pueden ser insuficientes.
Si a esto aadimos que en plantas pequeas las posibilidades de laboratorio y personal son escasas, se
plantea entonces como sistema alternativo adecuado, el control biolgico. Una persona especializada puede
controlar varias plantas pequeas con una dotacin de laboratorio mnima (microscopio y reactivos para
tinciones) y con un control de reducidos parmetros fsico-qumicos.

11

Este sistema lo constituira la bioindicacin, como control de las variaciones de organismos asociados a
fenmenos de causa-efecto. Valorando slo la etimologa de la palabra, podemos deducir que la bioindicacin se
trata de un estudio relacionado con la vida y con su posible aplicacin a determinar o indicar alguna
circunstancia. Esta aproximacin es bastante correcta, aunque no podemos quedarnos ah, ya que interesa que el
organismo que escojamos concurra en un margen estrecho de condiciones y que adems sea de fcil
identificacin. Esto implicara una deduccin lgica de asociacin del organismo (vegetal o animal) a una
condicin ambiental determinada.
Especies que concurrieran en un nicho superpuesto no podran ser organismos bioindicadores. Sin
embargo, si la superposicin es baja o nula, la aparicin de una especie permitir determinar un recurso sin
necesidad de realizar su anlisis. La abundancia relativa en un hbitat puede ser a menudo usada como gua para
indicar su importancia en la estructura ecolgica y el uso que hace de sus recursos.
Si tomamos la clasificacin de los seres vivos, dada su diversidad, podramos desalentarnos a la hora de
utilizar la bioindicacin como herramienta de trabajo. Sin embargo, nuestro campo esta circunscrito a unas
condiciones determinadas. Y as como los lquenes son bioindicadores de la calidad atmosfrica, los protozoos y
secundariamente el tipo de bacteria predominante, son bioindicadores de la calidad del agua depurada y del
estado biolgico de las cubas de aireacin en tratamiento convencionales, o del estado de las lagunas, biodiscos,
etc., en tratamientos no convencionales. Los estudios han demostrado claramente que la identificacin y
enumeracin de los protozoos en el licor mezcla de los fangos activos, puede proveer de una informacin rpida
de las condiciones de operacin de la planta (Al-Shahwani y Horan, 1991; Esteban et al., 1991; Madoni et al.,
1993; Salvad y Gracia, 1993; Salvad, 1994; Salvad et al., 1995).
Por lo tanto, para un buen control de las estaciones depuradoras, el estudio microscpico de los fangos
activos supone una gran ayuda, ya que aporta una visin inmediata de las condiciones imperantes.
Por lo general, la mayora de los protozoos presenta un amplio abanico de condiciones
medioambientales, sin embargo en lodos activados no se puede negar su selectividad para determinados
ambientes, existiendo numerosos estudios que utilizan a estos organismos como bioindicadores:

Protozoos como bioindicadores: Esteban (1989), Al-Shahwani y Horan (1991), Esteban et al..
(1991), Madoni et al. (1993), Salvad y Gracia (1993), Salvad (1994) y Salvad et al. (1995).

Aplicaciones prcticas al control de E.D.A.Rs: Fontei, Soprani y Struma (1987), Jenkins (1993).

Eficiencia en la depuracin: Curds y Cockburm (1970).

Estructuras ecolgicas: Pratt y Cairns (1985) y Curds (1973).

12

BIBLIOGRAFA
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13

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14

CAPTULO 2.- EL MICROSCOPIO PTICO.

INTRODUCCIN
En el estudio de una muestra de fango activo, el microscopio ptico es una herramienta indispensable
que nos va a permitir no slo la identificacin y cuantificacin de las distintas especies pobladoras (bacterias y
protozoos, principalmente), sino el conocimiento de otras caractersticas relacionadas con la estructura de la
unidad morfolgica y estructural de dicha suspensin biolgica, es decir, el flculo de fango activo. As por
ejemplo, ante la presencia de un problema de operacin de tipo biolgico que se manifestase como una
deficiente separacin slido-lquido en el clarificador, las tcnicas de identificacin de microorganismos y de
estudio de la estructura flocular, van a hacer posible el aislamiento y cuantificacin de los organismos
responsables as como el conocimiento del nivel de repercusin sobre la organizacin del flculo. sta
informacin, en ltima instancia, nos permitir catalogar el problema como crecimiento disperso, bulking
viscoso, bulking filamentoso, foaming, pin point floc o subida de fangos (Jenkins et al., 1993) y actar en
consecuencia.
Un examen microscpico de estas caractersticas requiere de distintos niveles de observacin que, entre
otros aspectos, se han de corresponder con distintas necesidades en la magnificacin. As pues, el aumento
requerido para una primera exploracin de la muestra, no ser el mismo que el necesario para la observacin en
detalle de la estructura corporal de un protozoo ciliado. La capacidad de aumento de un microscopio se
denomina magnificacin y se corresponde con la expresin:
Magnificacin= M ocular x M objetivos x M optovar (si ste existe)
En la microscopa ptica, aumentos de 1.500x estaran prximos al lmite mximo, ya que adems de la
magnificacin, existe la resolucin, es decir, aquella propiedad que permite observar dos puntos adyacentes
como unidades distintas. Si bien la magnificacin podra incrementarse prcticamente sin lmite, la resolucin
est limitada por las propiedades fsicas de la luz. En un microscopio ptico, los lmites de resolucin se sitan
en aproximadamente 0,2 m, lo que significa que dos objetos que se encuentren ms prximos que esta
distancia no pueden visualizarse como entidades distintas. El poder de resolucin est determinado por la
longitud de onda de la luz y una propiedad innata de la lente que se denomina apertura numrica, medida de la
capacidad de captacin de la luz por la lente.
En general, existe una relacin directa entre la capacidad de aumento y la apertura numrica de una
lente, ya que una lente de alto aumento presentar una alta apertura numrica. La mayora de los microscopios
poseen oculares de aumento de 10 a 15x y objetivos desde 5 a 100x aumentos. Los objetivos de 100x (de
elevada apertura numrica) requieren del empleo de aceite de inmersin para evitar la presencia de aire entre el
objetivo y la preparacin y se denominan objetivos de inmersin. Este tipo de aceites se utiliza porque tienen
una mayor apertura numrica que el aire y un mayor ndice de refraccin, lo que incrementa la resolucin. Con
15

este tipo de objetivos la distancia de trabajo distancia que queda libre entre el objetivo en uso y la
preparacin, es prcticamente nula. En general, cuanto mayor sea la resolucin del objetivo, menor ser su
distancia de trabajo.

LOS ELEMENTOS DE UN MICROSCOPIO PTICO. PROCEDIMIENTOS HABITUALES:

ILUMINACIN DE KHLER, CENTRADO DE LOS ANILLOS DE FASE, EXPRESIN DE LOS
AUMENTOS EN LA MICROFOTOGRAFA Y MICROMEDICIONES.
El microscopio ptico es un elemento indispensable en el laboratorio de una estacin depuradora
(Figura 1), que si bien no ha de ser especialmente complejo, requiere de unos elementos bsicos representados
por objetivos (5x, 10x, 20x, 40x y 100x), algunos de ellos dotados de contraste de fases, un micrmetro ocular
calibrado y equipo de microfotografa. Como material accesorio de microscopa son necesarios: una cmara de
recuento (Neubauer, Neubauer improved y/o Fuchs-Rosenthal, p ej.) para el cmputo de pequeos flagelados o
en ciertas tcnicas de cuantificacin de bacterias filamentosas, portaobjetos, cubreobjetos de varios tamaos (24
x 24 mm y 18 x 18 mm, principalmente), aceite de inmersin y solucin limpiadora para las lentes.

1. Tubos y oculares.
2. Objetivos.
3. Platina.
4. Condensador de desplazamiento
vertical.
5. Diafragma del condensador de
apertura.
6. Tornillos de centrado del
condensador.
7. Soporte del condensador.
8. Diafragma de campo.
9. Fuente de iluminacin.
10. Tornillos de agarre del condensador.
11. Mandos de enfoque.
12. Interruptor de red.
13. Regulador de la intensidad
luminosa.
Figura 1: El microscopio ptico (Microscopio ptico Zeiss Axiolab ).
Nota: al final del captulo, en la Tabla I, se recogen diversos problemas que surgen durante la observacin microscpica as como
sus soluciones.

En la descripcin de las distintas partes de un microscopio, podemos encontrarnos con los siguientes
elementos mecnicos, de iluminacin y pticos:
Platina
La platina est situada sobre el estativo o soporte y sobre ella se coloca el portaobjetos, que mediante
un sistema de traslacin dotado de mandos, podr hacerse desplazar en las dos direcciones del plano (x e y).
16

Reglas milimtricas situadas sobre la platina permiten conocer el alcance del movimiento as como la
localizacin precisa de cualquier rea de inters de la preparacin.
Mandos de enfoque
Permiten el desplazamiento en el plano vertical de la platina, alejando acercando la preparacin hacia
los elementos pticos. El enfoque macromtrico permite una aproximacin rpida a la preparacin o enfoque
grueso, mientras que el micromtrico proporciona un enfoque fino de la misma.
Fuente de iluminacin
Suele ser una lmpara halgena de bajo voltaje (6-12 v y 25-100 W), cuya luminosidad puede ser
regulada mediante un potencimetro. La iluminacin es una cuestin de especial importancia en el caso de la
microfotografa. Es recomendable controlar el haz lumnico cada cierto tiempo, lo que puede hacerse en la
revisin anual del microscopio.
Filtros
Situados sobre un portafiltros, los ms habituales son el filtro verde y el azul. Mientras que el verde se
utiliza en la ptica de contraste de fases, al aumentar el poder de resolucin, el filtro azul se emplea en campo
claro, para observar tinciones o resaltar contornos en organismos vivos.
Condensadores
Situados al pie del cuerpo principal se encuentran el condensador de campo y su diafragma, quienes
tienen como misin amplificar y colimar los rayos luminosos proyectados por la fuente luminosa. Situados en la
parte inferior a la platina se encuentran el condensador de apertura, con su diafragma y elementos de centrado.
Este condensador tiene como misin hacer converger la luz hacia la preparacin. El centrado del condensador se
realiza cerrando el diafragma de campo y llevando al centro el punto luminoso con ayuda de los mecanismos de
centrado. En algunos microscopios, adems, es necesario situar a la altura adecuada el diafragma de campo. A
continuacin se presenta un esquema de este procedimiento:
-

Elegir el objetivo 10x

Subir el condensador de apertura lo ms arriba posible y abrir su diafragma al mximo

Enfocar la preparacin

Cerrar el diafragma de campo para ver si la iluminacin est centrada

Centrar la iluminacin

Bajar el condensador de apertura hasta que se observe la forma poligonal de la imagen del
diafragma de campo
17

Abrir el diafragma de campo para iluminar completamente la preparacin

Contrastar la preparacin cerrando el diafragma de apertura hasta conseguir el contraste deseado

La colocacin exacta de los elementos de iluminacin, condensadores y diafragmas, permite obtener

una iluminacin homognea de la preparacin al mismo tiempo que eficaz para las pupilas de los objetivos. Este
procedimiento est basado en los principios de la Iluminacin de Khler.
Objetivos
Son los componentes pticos responsables de la resolucin de las imgenes. Han de estar colocados en
un orden lgico, de menor a mayor aumento, 5x, 10x, 40x y 100x. Los objetivos de campo claro y contraste de
fases se distinguen gracias a la leyenda Ph de este ltimo. En la ptica de contraste de fases, el condensador
ilumina con un anillo de luz que debe estar sintonizado (en fase) con el anillo de fases del objetivo en uso. El
procedimiento de ajuste del contraste de fases se esquematiza a continuacin:
-

Seleccionar el objetivo de fases sobre el que se quiera hacer el ajuste

A. Si el condensador es de revolver, ponerlo en la posicin Ph correspondiente

B. Si el condensador no es de revolver, abrir el diafragma del condensador de apertura al mximo
y colocar la insercin Ph correspondiente

Retirar un ocular para ver los anillos de fases, el blanco del condensador y el negro del ocular.
Situar los anillos concntricos (este paso diferir en funcin de que el condensador sea o no de
revolver)

Tanto en campo claro como en contraste de fases, los objetivos 100x requieren del empleo de aceite de
inmersin. Esto significa que tras ser utilizados, hay que retirar el aceite de la lente con un pao suave
impregnado en una solucin ter/etanol 3:1. Tambin es recomendable la limpieza de las dems lentes de vez en
cuando con esta misma solucin.
Oculares
Estn formados por dos lentes que se sitan sobre un soporte mvil que permite que sean ajustadas a la
distancia ocular del observador. Estas lentes son las encargadas de amplificar la imagen resuelta por los
objetivos, a la vez que la invierten. Uno de los oculares permite un ajuste diferencial para las dioptras de cada
ojo. En el caso de la microfotografa, la torreta es triocular, reservndose uno de los oculares (distinto de los dos
anteriores) para la adaptacin de la cmara fotogrfica. Normalmente, uno de los oculares consta de micrmetro,
es decir, un disco intercalado entre sus lentes que presenta una especie de regla con una serie de marcas
distribuidas regularmente (Figura 2).

18

Para la realizacin de micromediciones, procedimiento habitual y necesario en la identificacin

taxonmica de especies, se requiere disponer de un micrmetro ocular calibrado. La calibracin del micrmetro
se lleva a cabo mediante la alineacin del micrmetro y del portaobjetos milimetrado, procedimiento que
permite conocer, para cada objetivo, la longitud real de las distintas marcas del micrmetro (Figura 2). El
portaobjetos milimetrado es un portaobjetos especial, que tiene grabada en el centro una regla de un milmetro
de longitud con cien marcas de 0,01 mm. Esta calibracin nos va a permitir utilizar dicho micrmetro a modo de
escala para las distintas magnificaciones.
Aunque ya se explicaba anteriormente la manera de calcular la magnificacin de una preparacin,
simplemente multiplicando el factor del objetivo por el del ocular, en la microfotografa deben de efectuarse
clculos para poder referirse al aumento del positivo en papel. Mediante la realizacin de microfotografas del
portaobjetos graduado bajo las distintas magnificaciones y posterior positivado de stas, se puede obtener
referencia del tamao de elementos de inters de la preparacin sobre el papel. Y es que, en la microfotografa,
el aumento se indica con barras de una longitud determinada que, dibujadas en el papel, indican una cierta
longitud real (Figura 3).

0,0

0,0

50

100

0,5

1,0

Micrmetro ocular

1 mm
Portaobjetos milimetrado

Figura 2: Visin al microscopio ptico bajo el objetivo 10x, durante la calibracin

del micrmetro.

19

Las numerosas innovaciones tecnolgicas en los campos de la informtica y la electrnica han hecho
avanzar tambin a la microscopa. La utilizacin de nuevos accesorios como vdeo-cmaras o vdeo-impresoras
habran de ser tenidos en cuenta a la hora de hablar de los componentes del microscopio.

LAS TCNICAS MICROSCPICAS

Si anteriormente se mencionaban las distintas necesidades de magnificacin en el estudio de una
muestra, tambin es cierto que la observacin de microorganismos ms pequeos como bacterias, determinadas
estructuras de Protozoarios o la propia organizacin del flculo, que pueden ser dificultosas en campo claro, son
ms fcilmente observables con otras tcnicas microscpicas, como es el contraste de fases. Normalmente, el
equipamiento microscpico en un laboratorio de aguas residuales, tan slo cuenta con la ptica de contraste de
fases, adems de la de campo claro. Las restantes tcnicas microscpicas y otras no recogidas aqu, se utilizan
en investigacin.
El campo claro
Es la iluminacin normal mediante la cual los componentes de la muestra se visualizan gracias a las
diferencias de contraste que existen entre ellos y el medio que los rodea (Figura 3A). Las diferencias de
contraste se producen porque las clulas o elementos ms grandes, como los flculos de fango activo, absorben
o dispersan la luz en diferentes grados. Por esta razn, esta iluminacin se emplea con tinciones muestras en
las que los microorganismos son pigmentados, ya que el contraste se incrementar debido al color (Figura 3C).
El contraste de la preparacin tambin puede controlarse en campo claro con el diafragma del condensador
(diafragma de apertura).
El contraste de fases
Es una tcnica que se utiliza para estudiar preparaciones de densidades homogneas, en las que la baja
capacidad de absorcin de la luz de sus elementos (las clulas y el medio), hace que la imagen obtenida no
presente diferencias de luminosidad entre ellos. El contraste de fases permite la visualizacin de clulas sin
necesidad de tincin (Figura 3B). Este tipo de ptica se basa en el hecho de que las clulas poseen ndices de
refraccin distintos al medio y por lo tanto producen un desvo en los rayos de luz que las atraviesan, que son
retardados. Este efecto es amplificado por un anillo especial que posee el objetivo de los microscopios de
contraste de fases, lo que da lugar a la formacin de una imagen oscura con un fondo brillante.

20

Figura 3: Uronema sp. en campo claro (A) y bajo

contraste de fases (B). Uronema sp. en campo claro en
un medio adicionado con lugol para aumentar el
contraste y favorecer la fijacin (C). 400x. Barra = 40
m.

OTRAS TCNICAS DE OBSERVACIN

Campo oscuro
Es un tipo de microscopio ptico, en el que se ha modificado el sistema de iluminacin, de manera tal
que la luz incide sobre la muestra slo desde los lados. La nica luz que es capaz de entrar en el objetivo es la
que, al ser dispersada por la muestra, incide sobre el objetivo; de ah que los microorganismos se observen
brillantes sobre un fondo oscuro. La resolucin en los microscopios de campo oscuro es bastante alta, y pueden
observarse con ellos objetos de difcil visualizacin en campo claro o en contraste de fases. Se utiliza para
preparaciones con muy poco contraste (p. ejemplo sin teir), en las que la muestra se ver como un negativo
fotogrfico sobre un fondo oscuro.
Microscopa de fluorescencia
Utilizada para visualizar muestras capaces de emitir fluorescencia, ya sea debida a la capacidad que
presentan algunos microorganismos debido a ciertos componentes celulares (autofluorescencia) o mediante la
adicin de sustancias capaces de teir la preparacin (fluorocromos). En este segundo caso, la muestra estar
marcada con colorantes fluorescentes, o bien la fijacin del colorante se realiza con un anticuerpo marcado
(inmunofluorescencia). En cualquier caso, la fluorescencia se define como la propiedad que poseen algunas
sustancias denominadas fluorescentes, que bajo la accin de radiaciones de onda corta (luz ultravioleta), pueden
emitir otras radiaciones de longitud de onda ms largas denominadas de fluorescencia (radiacin visible).
21

Para que la emisin sea selectiva, los filtros de fluorescencia habrn de ser adecuados. Normalmente, se
emplea un filtro que delimita la banda de excitacin y un segundo filtro o filtro de barrera que slo deja pasar
la fluorescencia y elimina los restos de la luz de excitacin. Las tcnicas basadas en la microscopa de
epifluorescencia estn adquiriendo cada vez mayor auge gracias al desarrollo, entre otras, de las tcnicas de
estimacin de la biomasa viva y de determinacin de la actividad biolgica, de gran utilidad en el campo de los
procesos de depuracin de aguas residuales.
Contraste de polarizacin
En estos microscopios la luz es polarizada y aunque no necesita de objetivos especiales, s de un
polarizador situado entre la fuente de luz y el condensador, y de un analizador entre el objetivo y el ocular. Se
utilizan para la observacin de materiales birrefringentes, tal es el caso de algunas disciplinas como la
Mineraloga o la Petrografa.
Contraste Interferencial de Normarski
En esta tcnica se combina la luz polarizada con un principio similar al del contraste de fases, dando
como resultado una imagen similar a la aportada por un contraste de fases de gran resolucin pero con un
marcado efecto de relieve y a color. Este tipo de ptica, aunque de resultados muy satisfactorios, requiere un
equipamiento caro, constituido por accesorios como un condensador especial y prismas de polarizacin, que
hacen que su uso sea muy restringido.

22

Tabla 1: Problemas que se presentan habitualmente durante la observacin microscpica y que desencadenan en una mala imagen.
PROBLEMA
Oscuridad en la periferia

CAUSA

ACCIN

Encastre impreciso del objetivo

Cambiar de objetivo y volver a colocarlo.

Revisar el enroscado.

Desaparicin del campo de visin

Condensador demasiado bajo

La posicin ser correcta cuando se forme el

campo de visin del diafragma

Condensador no centrado o montado Centrarlo y revisar el montaje

incorrectamente
Campo

del

diafragma

demasiado Corregir apertura

cerrado
Lentes sucias

Limpieza

Lmpara no montada correctamente

Volver a montar

Combinacin inadecuada del objetivo y Revisar combinacin (sobre todo en el

condensador

contraste de fases)

Portafiltros mal situado

Corregir la posicin

Diferencia de brillos y reparto No est centrado el objetivo

inadecuado de la luz en el campo Elementos

de

de visin

condensadores

Centrarlo hasta or que se ha colocado

iluminacin, Procedimiento de iluminacin Khler (si

diafragmas

centrados

no adems se emplea la iluminacin por contraste

de fases, centrar los anillos)

Suciedad en las lentes del condensador. Limpieza. Revisar que no hay objetos

Suciedad en el campo de visin

Imagen pobre, detalles no claros

Agentes externos.

interpuestos en la trayectoria de la luz.

Condensador bajo

Corregir altura del condensador o la apertura

Apertura del diafragma muy reducida

del diafragma

Suciedad en las lentes

Limpieza

Poca

apertura

del

diafragma, Corregir la apertura del diafragma o la altura

condensador bajo

del condensador

No se usa aceite de inmersin

Emplear aceite slo con el objetivo de

Uso de aceite en objetivo inadecuado

inmersin (normalmente el objetivo 100x)

Aire en el aceite

Retirar aceite

Suciedad en las lentes

Limpieza

Preparacin mal efectuada

Comprobar

el

grosor

del

cubreobjetos,

portaobjeto y medio de inclusin o montaje (si

hubiera)
Color amarillo en la imagen

Lmpara con voltaje bajo

Imagen muy brillante

Lmpara con mucho voltaje

La imagen se desplaza cuando Defecto en los mandos de enfoque

Ajustar voltaje de la lmpara

Reparacin

vara el enfoque
Ausencia de formacin de la Distancia interpupilar inadecuada

Ajustar a la distancia ocular y corregir las

imagen binocular

dioptras

Dioptras oculares no ajustadas

Iluminacin inadecuada

23

BIBLIOGRAFA
Jenkins, D., Richard, M. G. y Daigger, G. T. (1993). Manual on the Causes and Control of
Activated Sludge Bulking and Foaming. WRC, Pretoria and USEPA, Cincinnati.
Laboratorio Central del Departamento de Saneamiento del Ayuntamiento de Madrid (1996).
Jornadas Prcticas: Observacin microscpica del fango activo: caracterizacin del flculo e
identificacin de microorganismos filamentosos. 20-24 de mayo de 1.996.
Manual de Instrucciones de Zeiss: Operating Instructions. Axiolab Microscope for transmitted
light and incident-light fluorescence.

24

CAPTULO 3.- TINCIONES.

INTRODUCCIN

Para identificar y clasificar los microorganismos presentes en nuestra muestra podemos realizar
observaciones in vivo o bien utilizar tcnicas auxiliares, como son la fijacin y la tincin. Estas ltimas sern
tiles cuando el material a observar sea necesario conservarlo durante algn tiempo, o simplemente para poner
de manifiesto estructuras difcilmente observables in vivo. Esto lo conseguimos mediante reacciones qumicas
realizadas sobre los microorganismos muertos que nos permitirn apreciar diferencias que nos ayudarn a
clasificar e identificar los microorganismos.

PROCEDIMIENTO OPERATIVO PARA LA REALIZACIN DE TINCIONES PROTOZOARIAS.

Tincin de Noland
Tincin de flagelos.
REACTIVOS:
Solucin I: 20 mg de cristal violeta + 80 mg de fenol + 20 mL de formaldehdo al 40 % + 4 mL glicerol
PROCEDIMIENTO:
1.- Mezclar una gota de solucin I con una gota de muestra en el portaobjetos
2.- Colocar un portaobjetos y observar a 100X bajo aceite de inmersin y campo claro
RESULTADOS:
Los flagelos aparecen teidos de color azul.

25

Tincin verde de metilo

Tincin diferencial de los ncleos de los protozoos.
REACTIVOS:Solucin I: disolucin de verde de metilo al 1 % (p/v) en actico al 1 %
PROCEDIMIENTO:
1.- Mezclar una gota de solucin con una gota de muestra en el portaobjeto
2.- Observar a 100X bajo aceite de inmersin y en campo claro
RESULTADOS:
Las estructuras nucleares internas aparecen coloreadas de verde

Inmovilizacin txica
Mediante esta tcnica se consigue reducir la movilidad de los organismos y favorecer as su
observacin.
REACTIVOS
1.- Solucin I: 0,5 mg de cloruro de cinc en 100 mL de agua destilada
PROCEDIMIENTO:
1.- Tomar una gota de muestra y mezclarla con una gota de solucin I
2.- Observar al microscopio
RESULTADOS:
Los organismos mviles ven retardado su desplazamiento, de forma que se pueden observar mejor

26

PROCEDIMIENTO OPERATIVO PARA LA REALIZACIN DE TINCIONES BACTERIANAS

(Ayuntamiento Madrid, 1997)
A.- TINCIONES CON MUESTRAS FIJADAS1.
Tincin de Gram
REACTIVOS:
1. Solucin I: Cristal violeta + Oxalato amnico
- Cristal violeta: 2 g + 20 mL etanol 95 %
- Oxalato amnico: 0,8 g + 80 mL agua destilada
2. Solucin II: Lugol-Yodo (mantener en oscuridad y frasco topacio)
- Yodo: 1g + 2 g yoduro potsico + agua destilada 300 mL
3. Solucin III: 10 mL Safranina +100 ml agua destilada
- Safranina al 2,5 % en etanol 95
PROCEDIMIENTO:
1.- Teir un minuto con solucin I
2.- Aclarar con agua destilada durante algunos segundos
3.- Aplicar solucin II un minuto
4.- Escurrir el exceso de colorante y aclarar con agua destilada
5.- Decolorar con etanol 95 % gota a gota durante 30 segundos
6.- Lavar con agua destilada
7.- Teir con solucin III durante un minuto
8.- Lavar con agua destilada
9.- Secar por absorcin con papel secante o filtro
10.- Observar al microscopio con objetivo de inmersin (100X)

Se realizan sobre un frotis de la muestra.

27

RESULTADOS:
Color azul-violeta: Gram +
Color rojo-rosa: Gram
CADUCIDAD DE LOS REACTIVOS:
1.- Solucin Cristal violeta: un mes
2.- Solucin Oxalato amnico: un mes
3.-Solucin I: 24 horas
4.- Solucin II: un mes

Tincin de Neisser
Tincin de grnulos de polifosfato almacenados en el interior de las bacterias, junto con el tricoma.
REACTIVOS:
1. Solucin I: 2 A + B (Mezclar 2 partes de la solucin A y una parte de B (v/v)
-A: 0,1 g de Azul de metileno +5 mL etanol 95 % + 5 mL cido actico glacial +100 mL agua
destilada
-B: 3,3 mL de Cristal violeta al 10 % en etanol al 95 % + 6,7 mL etanol 95 % +100 mL agua
destilada
2. Solucin II: 33,3 mL de Marrn Bismarck (Crisoidina) al 1 % en solucin acuosa + 66,7 mL de agua
destilada
PROCEDIMIENTO:
1.- Teir el frotis con solucin I durante 30 segundos
2.- Lavar con agua destilada durante unos segundos
3.- Teir durante 1 minuto con solucin II
4.- Aclarar con agua destilada

28

5.- Secar por absorcin con papel secante o filtro

6.- Observar al microscopio con objetivo de inmersin (100X)
RESULTADOS:
- Color azul-violeta: Neisser +
- Color marrn claro amarillento: Neisser - Color marrn oscuro en el interior del filamento en forma de grnulos: Grnulos N+
CADUCIDAD DE LOS REACTIVOS:
1.- Solucin I: un mes

Tincin de PHB (poli--hidroxibutirato)

Tincin de grnulos de PHB (grnulos lipdicos) en el interior de las bacterias.
REACTIVOS:
1. Solucin I: Negro Sudn B (IV) al 0,33 % (p/v) en etanol 60 %
2. Solucin II: Safranina al 0,5 % (p/v) en solucin acuosa
PROCEDIMIENTO:
1.- Teir el frotis con solucin I durante 10 minutos. Si se evapora, aadir ms colorante
2.- Verter el exceso de colorante y lavar con agua destilada
3.- Secar con papel secante o filtro
4.- Teir con solucin II durante 15 segundos
5.- Aclarar con agua destilada
6.- Secar con papel filtro o secante
7.- Observar al microscopio con objetivo de inmersin (100X)
RESULTADOS
29

- Grnulos intracelulares negro-azulados: PHB +

- Citoplasma rosa claro o sin teir: PHB -

B.- TINCIONES CON MUESTRAS IN VIVO

Para la realizacin de estas tinciones slo es necesario tomar una gota de licor mezcla y colocarla en un
porta, a continuacin mezclarla con una gota de la solucin correspondiente a cada tincin.

Tincin de azul de metileno

Tie los filamentos para una mejor observacin de los mismos.
REACTIVOS:
1. Solucin I: Disolver 0,5 mg de Azul de metileno por cada 100 mL de agua destilada
PROCEDIMIENTO:
1.- Mezclar una gota de fango activo en un portaobjetos con una gota de solucin I
2.- Colocar un cubreobjetos encima y observar a 100X bajo aceite de inmersin y en campo claro
RESULTADO:
Los filamentos bacterianos aparecen teidos de azul

30

Tincin de vainas
Las clulas carentes de vainas aparecern intensamente teidas de color violeta mientras que las que
posean vaina se observarn de color claro o rosceas.
REACTIVOS:
1. Solucin I: Cristal violeta al 0,1 % (p/v) en solucin acuosa
PROCEDIMIENTO:
1.- Mezclar una gota de fango activo con una gota de solucin I en un portaobjetos
2.- Colocar un cubreobjetos y observar a 100X bajo aceite de inmersin y en campo claro
RESULTADOS:
Filamentos violetas: bacterias sin vaina
Filamentos claros: bacterias con vaina

TEST REACTIVOS IN VIVO

Test de azufre
Mtodo basado en la capacidad de oxidacin de sulfuros a azufre elemental.
REACTIVOS variante 1:
Solucin I: 1 g de sulfuro sdico en 1 L de agua destilada
PROCEDIMIENTO variante 1:
1.- Colocar sobre un portaobjetos una gota de muestra y una gota de solucin I
2.- Extender con ligeros movimientos sobre el portaobjetos
3.- Secar al aire mnimo 15 minutos
4.- Colocar un cubreobjetos presionando con papel de filtro para eliminar el exceso de solucin
5.- Observar a 100X bajo aceite de inmersin y con contraste de fases

31

RESULTADOS variante 1:
- Grnulos intracelulares amarillos muy brillantes: S +
CADUCIDAD DE LOS REACTIVOS:
- Solucin 1: una semana

REACTIVOS variante 2:
Solucin I: 1 g tiosulfato sdico en 100 mL de agua destilada
PROCEDIMIENTO variante 2:
1.- Tomar una muestra de fango activo y dejarla decantar
2.- Transferir 20 mL de sobrenadante sin partculas en suspensin a un matraz
3.- Aadir 1 mL de solucin
4.- Someter a agitacin durante una noche a temperatura ambiente
5.- Observar a 100X con contraste de fase y bajo aceite de inmersin
RESULTADOS variante 2:
- Grnulos muy brillantes de color amarillo: S +
CADUCIDAD DE LOS REACTIVOS:
-Solucin 1: una semana

32

Choque lsico
Mediante este procedimiento, que rompe las clulas, se puede observar la presencia o ausencia de
vaina.
REACTIVOS:
- Solucin I: Disolucin de hipoclorito sdico al 1 % en agua destilada
PROCEDIMIENTO:
1.- Tomar 25 mL de muestra y aadir 10 mL de disolucin; agitar durante una noche
2.- Observar a 100X y bajo aceite de inmersin.
RESULTADOS:
- Filamentos donde se observen huecos de rotura de las clulas y exista continuidad del tricoma: vaina +
- Filamentos donde s existe hueco, hay rotura clara del filamento: vaina -

PROCEDIMIENTO OPERATIVO PARA LA REALIZACIN DE OTRAS TINCIONES

Tincin de Ferroina
Tincin de la materia orgnica presente en la muestra.
REACTIVOS:
- Solucin I: solucin de ferroina 0,02 N
PROCEDIMIENTO:
1.- Mezclar una gota de muestra con una gota de solucin I en un portaobjetos
2.- Colocar un cubreobjetos y observar a 100X bajo aceite de inmersin y en campo claro
RESULTADOS:
La materia orgnica aparece teida de color rojo delimitndose el ncleo flocular, pudindose apreciar su
consistencia.
33

Tincin inversa de Tinta India (Jenkins et al., 1986)

Con esta tincin se pone de manifiesto el material extracelular presente en los flculos. La presencia de
una elevada cantidad de ste, puede indicar bulking viscoso.
REACTIVOS:
- Solucin I: Nigrosina al 0,25 % (p/v) en solucin acuosa
PROCEDIMIENTO:
1.- Colocar una gota de muestra en un portaobjetos y poner cubreobjetos encima
2.- Colocar una gota de solucin I en el borde del cubre
3.- Observar el avance del frente oscuro de la nigrosina
RESULTADOS:
El avance de la tinta sobre el cubreobjetos, determina el grado de viscosidad del fango.

34

BIBLIOGRAFA
Departamento de Agua y Saneamiento del Ayuntamiento de Madrid (1997). Manual de laboratorio
para el anlisis de aguas residuales y lodos de depuracin. Publicacin del Exmo. Ayuntamiento de
Madrid.
Jenkins, D., Richard, M. y Daigger, G. (1993). Manual on the causes and control of activated sludge
bulking and foaming. 2 Edicin. Lewis Publishers. Michigan.

35

CAPTULO 4.- CLAVES IDENTIFICATIVAS.

INTRODUCCIN
En este captulo, se presentan unas claves que sirven para identificar a los organismos con mayor
transcendencia para el proceso de depuracin biolgica de las aguas residuales. A continuacin, se adjunta la
bibliografa bsica empleada para el desarrollo de dichas claves:

Bacterias filamentosas:

EMASESA, 1997.

Protozoos

Flagelados. Streble y Krauter, 1987; EGEVASA, 1998.

Amebas y Heliozoos. Streble y Krauter, 1987; EGEVASA, 1998.
Ciliados. Madoni, 1988.

Metazoos

Curds y Hawkes, 1975; EGEVASA, 1998.

36

BACTERIAS FILAMENTOSAS

37

BACTERIAS FILAMENTOSAS

La clave de filamentos se ha diferenciado en funcin de la caracterstica fsica ms notable. Por ello, su

clasificacin se presenta en seis tablas:

Bacterias mviles: Por deslizamiento o flexin.

Bacterias de aspecto ramificado: Ramificacin verdadera o falsa.

Bacterias con un tricoma mayor de 1 m.

Bacterias con un tricoma menor de 1 m.

Bacterias que acumulan grnulos de azufre normalmente.

Bacterias que generan turbidez y se presentan libres en el espacio interflocular.

Dentro de cada tabla se especifican las caractersticas necesarias para su identificacin completa. Estas
caractersticas se pueden diferenciar en funcin de varios aspectos.
Caractersticas morfolgicas:
Tabla 1: Caractersticas morfolgicas identificativas para bacterias filamentosas (Ayuntamiento de Madrid, 1997).

Forma del filamento

Recto/ligeramente curvo/torcido/irregular/enrollado/micelial

Color del filamento

Transparente/opaco/oscuro

Localizacin del filamento

Flocular/extendindose desde el flculo/extraflocular

Crecimiento epifitico

Deteccin de la aparicin y el grado

Septos celulares

Deteccin

Constricciones celulares

Deteccin

Dimensiones

Longitud/dimetro

Forma celular

Cuadrada/rectangular/oval/en tonel/discoidal/bacilar/coco

Dimensiones celulares

Longitud y dimetro

Reaccin a Tinciones:
Tabla 2: Caractersticas aplicables a tinciones para identificacin de bacterias filamentosas (Ayuntamiento de Madrid, 1997).

Tincin de Gram

Positiva/negativa/variable

Tincin de Neisser

Positiva/negativa

Grnulos Neisser

Positiva/negativa

Grnulos PHB

Positiva/negativa

Tincin vaina

Ausencia/presencia

Tabla 3: Clave identificativa para bacterias mviles (EMASESA,1997).

38

CARACTERSTICA PREDOMINANTE

MVIL

BACTERIA FILAMENTOSA

FLEXIBACTER SP.

BEGGIATOA SP.

CIANOPHICEA

TINCIN GRAM

TINCIN NEISSER TRICOMA

TINCIN NEISSER GRNULOS

TESTS GRNULOS DE AZUFRE

NO

NO

NO

OTRAS INCLUSIONES CELULARES

PHB

DIMETRO TRICOMA ( m)

1-3

2-5

LONGITUD TRICOMA (m)

20-100

100-500

100-1000

PIGMENTOS

MORFOLOGA TRICOMA

RECTOS/LIG CURVADOS

RECTOS/LIG CURVADOS

RECTOS

LOCALIZACIN TRICOMA

LIBRE

LIBRE

LIBRE

SEPTOS CELULARES VISIBLES

NO

SI

SI

CONSTRICCIONES SEPTOS CELULARES

NO

NO

SI

VAINA

NO

NO

NO

CRECIMIENTO EPIFTICO

NO

NO

NO

ANCHO CELULAR ( m)

1-3

2-5

4-8

5-15

RECTANGULAR

CUADRADAS/RECT./ EN TONEL

LARGO CELULAR ( m)
MORFOLOGA CELULAR
OTROS

MOV POR DESLIZAMIENTO

S IN SITU

Tabla 4A: Clave identificativa para bacterias creadoras de turbidez (EMASESA,1997).

CARACTERSTICA PREDOMINANTE

CREADORAS DE TURBIDEZ

BACTERIA FILAMENTOSA

Tipo 1863

TIpo 0211

Tipo 1852

TINCIN GRAM

TINCIN NEISSER TRICOMA

TINCIN NEISSER GRNULOS

TESTS GRNULOS DE AZUFRE

NO

NO

NO

DIMETRO TRICOMA ( m)

0,8-1,5

0,3-0,5

0,6-0,8

LONGITUD TRICOMA (m)

<150

<100

20-80

MORFOLOGA TRICOMA

CADENA IRREGULAR CELULAS

TORCIDOS O ENRROLLADOS

RECTOS O TORCIDOS
EXTENDINDOSE DESDE FLC

OTRAS INCLUSIONES CELULARES

LOCALIZACIN TRICOMA

LIBRE

LIBRE

SEPTOS CELULARES VISIBLES

SI

SI

SI

CONSTRICCIONES SEPTOS CELULARES

SI

SI

NO

VAINA

NO

NO

NO

CRECIMIENTO EPIFTICO

NO

NO

NO

ANCHO CELULAR ( m)

0,8

0,3-0,5

0,6-0,8

LARGO CELULAR ( m)

1,5

0,5-0,7

1-2

MORFOLOGA CELULAR

ESFRICAS, COCOIDALES

EXTREMOS REDONDEADOS

RECTANGULARES

OTROS

CELULAS TRANSPARENTES

39

Tabla 4B: Clave identificativa para bacterias creadoras de turbidez (EMASESA, 1997).
CARACTERSTICA PREDOMINANTE

CREADORAS DE TURBIDEZ

BACTERIA FILAMENTOSA

Tipo 0411

STREPTOCOCCUS SP.

BACILLUS SP.

TINCIN GRAM

TINCIN NEISSER TRICOMA

TINCIN NEISSER GRNULOS

TESTS GRNULOS DE AZUFRE

NO

NO

NO

DIMETRO TRICOMA ( m)

0,8

0,7-0,8

0,8-1

LONGITUD TRICOMA (m)

50-150

<100

20-50

MORFOLOGA TRICOMA

RECTOS, TORCIDOS, LIG CURVOS

CADENA IRREGULAR

CADENAS CELULARES

LOCALIZACIN TRICOMA

BORDE FLOCULAR

LIBRE

LIBRE

SEPTOS CELULARES VISIBLES

SI

SI

OTRAS INCLUSIONES CELULARES

CONSTRICCIONES SEPTOS CELULARES

SI

NO

VAINA

NO

NO

CRECIMIENTO EPIFTICO

NO

NO

NO

ANCHO CELULAR ( m)

0,8

0,7

0,8-1

NO

LARGO CELULAR ( m)

2-4

0,8

2-4

MORFOLOGA CELULAR

EXTREMOS REDONDEADOS

ESFRICAS

EXTREMOS REDONDEADOS

OTROS

Tabla 5A: Clave identificativa para bacterias con dimetro del tricoma superior a 1m (EMASESA, 1997).
CARACTERSTICA PREDOMINANTE

DIMETRO DEL TRICOMA SUPERIOR A 1 m

BACTERIA FILAMENTOSA

Tipo 021N

Tipo 0041

TINCIN GRAM

Tipo 0961
-

TINCIN NEISSER TRICOMA

TINCIN NEISSER GRNULOS

TESTS GRNULOS DE AZUFRE

SI

NO

NO

OTRAS INCLUSIONES CELULARES

PHB
0,8-1,4

DIMETRO TRICOMA ( m)

1-2

1,2-1,6

LONGITUD TRICOMA (m)

100-1000

100-500

40-500

MORFOLOGA TRICOMA

RECTOS, LIG CURVADOS , ENRROLLADOS

RECTOS, LIG CURVADOS

RECTOS

LOCALIZACIN TRICOMA

EXTENDINDOSE DESDE EL FLCULO

INTERIOR O LIBRES

EXTENDINDOSE DESDE FLC

SEPTOS CELULARES VISIBLES

SI

SI

SI

CONSTRICCIONES SEPTOS CELULARES

SI

NO

NO
NO

VAINA

NO

SI

CRECIMIENTO EPIFTICO

NO

-,++

NO

ANCHO CELULAR ( m)

1-2

1,2-1,6

0,8-1,4

LARGO CELULAR ( m)

0,4-3

1,5-2,5

1,5-4

MORFOLOGA CELULAR

OVALES, DISCOIDALES, CUADRADAS, RECTAN., EN

TONEL

CUADRADAS/RECTANGULARES

RECTANGULARES

A VECES CUBIERTA N+

CELULAS TRANSPARENTES

OTROS

40

Tabla 5B: Clave identificativa para bacterias con dimetro del tricoma superior a 1m (EMASESA,1997).
CARACTERSTICA PREDOMINANTE

DIMETRO DEL TRICOMA SUPERIOR A 1 m

BACTERIA FILAMENTOSA

NOSTOCOIDA L II

TINCIN GRAM

NOSTOCOIDA L III

TINCIN NEISSER TRICOMA

TINCIN NEISSER GRNULOS

TESTS GRNULOS DE AZUFRE

NO

NO

OTRAS INCLUSIONES CELULARES

PHB

PHB

DIMETRO TRICOMA ( m)

1-1,4

1,6-2

LONGITUD TRICOMA (m)

100-200

MORFOLOGA TRICOMA

TORCIDOS O ENRROLLADOS

TORCIDDOS O ENRROLLADOS

LOCALIZACIN TRICOMA

INTERIOR

INTERIOR O EXTENDINDOSE

SEPTOS CELULARES VISIBLES

SI

SI

CONSTRICCIONES SEPTOS CELULARES

SI

SI
NO

VAINA

NO

CRECIMIENTO EPIFTICO

NO

NO

ANCHO CELULAR ( m)

1,2-1,4

1,6-2

LARGO CELULAR ( m)

1,5-2

MORFOLOGA CELULAR

DISCOIDALES, OVALES

ESFRICAS, OVALES, DISCOIDALES

OTROS

RAMIFIC A VECES VERDADERA

Tabla 6A: Clave identificativa para bacterias con dimetro del tricoma inferior a 1m (EMASESA,1997).
CARACTERSTICA PREDOMINANTE

DIMETRO DEL TRICOMA INFERIOR A 1 m

BACTERIA FILAMENTOSA

NOSTOCOIDA L I

HALISCOMENOBACTER H.

MICROTRIX P.

TINCIN GRAM

TINCIN NEISSER TRICOMA

TINCIN NEISSER GRNULOS

TESTS GRNULOS DE AZUFRE

NO

NO

OTRAS INCLUSIONES CELULARES

NO
PHB

DIMETRO TRICOMA ( m)

0,6-0,8

0,3-0,5

0,6-0,8

LONGITUD TRICOMA (m)

100-300

20-100

100-400

MORFOLOGA TRICOMA

TORCIDOS, CURVADOS O ENRROLLADOS

RECTOS O TORCIDOS

ENRROLLADOS

LOCALIZACIN TRICOMA

INTERIOR O EXTENDINDOSE

BORDE FLOCULAR Y LIBRES

EN FLCULO Y LIBRES

SEPTOS CELULARES VISIBLES

DIFCIL VER

CONSTRICCIONES SEPTOS CELULARES

NO

NO

NO

NO

VAINA

NO

SI

NO

CRECIMIENTO EPIFTICO

NO

-,+

NO

ANCHO CELULAR ( m)

0,6

0,3

0,6

LARGO CELULAR ( m)

0,8

0,5

0,8

MORFOLOGA CELULAR

OVALES
AGUJAS IRRADIADAS

ABULTAMIENTO EN CONTORNO FILAMENTO

OTROS

41

Tabla 6B: Clave identificativa para bacterias con dimetro del tricoma inferior a 1m (EMASESA,1997).
CARACTERSTICA PREDOMINANTE

DIMETRO DEL TRICOMA INFERIOR A 1 m

BACTERIA FILAMENTOSA

Tipo 0675

Tipo 0092

TINCIN GRAM

Tipo 1701
-

TINCIN NEISSER TRICOMA

TINCIN NEISSER GRNULOS

TESTS GRNULOS DE AZUFRE

NO

NO

NO

0,5-1

0,8-1

0,7-1

OTRAS INCLUSIONES CELULARES

DIMETRO TRICOMA ( m)

PHB

LONGITUD TRICOMA (m)

50-150

<100

10-200

MORFOLOGA TRICOMA

RECTOS O LIGERAMENTE
CURVADOS

RECTOS, TORCIDOS O LIG

CURVOS

CURVADOS O TORCIDOS
TODOS SITIOS

LOCALIZACIN TRICOMA

INTERIOR

INTERIOR O LIBRES

SEPTOS CELULARES VISIBLES

SI

NO

SI

CONSTRICCIONES SEPTOS CELULARES

NO

NO

SI

VAINA

SI

NO

SI

CRECIMIENTO EPIFTICO

-,++

NO

-,++

ANCHO CELULAR ( m)

0,5-1

0,8

0,7-1

LARGO CELULAR ( m)

0,5-1

1-3,5

MORFOLOGA CELULAR

CUADRADAS

RECTANGULARES

EXTREMOS REDONDEADOS

CLAVE TINCIN NEISSER

A VECES RAMIFICACION FALSA

OTROS

Tabla 6C: Clave identificativa para bacterias con dimetro del tricoma inferior a 1m (EMASESA, 1997).
CARACTERSTICA PREDOMINANTE

DIMETRO DEL TRICOMA INFERIOR A 1 m

OTRAS CARACTERSTICAS

Tipo 1702

Tipo 1851

Tipo 0581

TINCIN GRAM

+ (LIGERO)

TINCIN NEISSER TRICOMA

TINCIN NEISSER GRNULOS

TESTS GRNULOS DE AZUFRE

NO

NO

NO

OTRAS INCLUSIONES CELULARES

DIMETRO TRICOMA ( )

0,6-0,8

0,5-0,8

0,4-0,7

LONGITUD TRICOMA ()

20-150

200-400

100-300

MORFOLOGA TRICOMA

RECTOS O TORCIDOS

RECTOS O ALGO CURVADOS

RECTOS, LIGERAMENTE CURVOS O ENROLLADOS

LOCALIZACIN TRICOMA

EXTENDINDOSE DESDE FLC

EXTENDINDOSE DESDE FLC

LIBRES

SEPTOS CELULARES VISIBLES

NO

SI/NO

NO

CONSTRICCIONES SEPTOS CELULARES

NO

NO

NO

VAINA

SI

SI

NO

CRECIMIENTO EPIFTICO

NO

-,+

NO

ANCHO CELULAR ( )

0,6

0,5-0,8

0,4

LARGO CELULAR ( )

0,8

1,7-3,5

0,7

MORFOLOGA CELULAR

RECTANGULARES

OTROS

A VECES EN MANOJOS

42

Tabla 6D: Clave identificativa para bacterias con dimetro del tricoma inferior a 1m (EMASESA, 1997).
CARACTERSTICA PREDOMINANTE

DIMETRO DEL TRICOMA INFERIOR A 1 m

OTRAS CARACTERSTICAS

Tipo 0803

TINCIN GRAM

TINCIN NEISSER TRICOMA

TINCIN NEISSER GRNULOS

TESTS GRNULOS DE AZUFRE

NO

OTRAS INCLUSIONES CELULARES

DIMETRO TRICOMA ( )

0,8

LONGITUD TRICOMA ()

50-300

MORFOLOGA TRICOMA

RECTOS, TORCIDOS O LIGERAMENTE CURVADOS

LOCALIZACIN TRICOMA

LIBRES

SEPTOS CELULARES VISIBLES

SI

CONSTRICCIONES SEPTOS CELULARES

DIFCIL VER

VAINA

NO

CRECIMIENTO EPIFTICO

NO

ANCHO CELULAR ( )

0,8

LARGO CELULAR ( )

1,5-2

MORFOLOGA CELULAR

CUADRADAS O RECTANGULARES

OTROS

Tabla 7: Clave identificativa para bacterias de aspecto ramificado (EMASESA,1997).

CARACTERSTICA PREDOMINANTE

ASPECTO RAMIFICADO

BACTERIA FILAMENTOSA

NOCARDIA SP.

SPHAEROTILUS N.

HONGOS

TINCIN GRAM

TINCIN NEISSER TRICOMA

TINCIN NEISSER GRNULOS

TESTS GRNULOS DE AZUFRE

NO

NO

NO

OTRAS INCLUSIONES CELULARES

PHB

PHB

GRNULOS

DIMETRO TRICOMA ( m)

1-1,8

3-8

LONGITUD TRICOMA (m)

10-100

100-1000

300-1000

MORFOLOGA TRICOMA

MICELIAL

RECTOS, LIG CURVADOS

LOCALIZACIN TRICOMA

EN FLCULO Y LIBRE

EXTENDINDOSE DESDE FLC

TODOS SITIOS

SEPTOS CELULARES VISIBLES

NO

SI

SI

CONSTRICCIONES SEPTOS CELULARES

NO

SI

SI

VAINA

NO

SI

NO

CRECIMIENTO EPIFTICO

NO

NO

NO

ANCHO CELULAR ( m)

1-1,8

3-8

1,5-3

5-15

LARGO CELULAR ( m)
MORFOLOGA CELULAR
OTROS

EXTREMOS REDONDEADOS
RAMIF VERDADERA

RAMIF FALSA, TIPO ARBOL

43

LIG + AL GRAM

Tabla 8: Clave identificativa para bacterias que normalmente acumulan grnulos de azufre (EMASESA, 1997).
CARACTERSTICA PREDOMINANTE

PRESENTAN AZUFRE NORMALMENTE

BACTERIA FILAMENTOSA

THIOTHRIX I

THIOTHRIX II

Tipo 0914

TINCIN GRAM

TINCIN NEISSER TRICOMA

TINCIN NEISSER GRNULOS

TESTS GRNULOS DE AZUFRE

SI

SI

NO

OTRAS INCLUSIONES CELULARES

PHB

PHB

PHB

DIMETRO TRICOMA ( m)

1,4-2,5

0,8-1,4

0,7-1

LONGITUD TRICOMA (m)

100-500

50-800

50-200

MORFOLOGA TRICOMA

RECTOS, LIG CURVADOS

RECTOS, LIG CURVADOS

RECTOS, LIG CURVADOS

LIBRE

LOCALIZACIN TRICOMA

EXTENDINDOSE DESDE FLC

EXTENDINDOSE DESDE FLC

SEPTOS CELULARES VISIBLES

SI

SI

SI

CONSTRICCIONES SEPTOS CELULARES

NO

NO

NO
NO

VAINA

SI

SI

CRECIMIENTO EPIFTICO

NO

NO

NO

ANCHO CELULAR ( m)

1,4-2,5

0,8-1,4

0,7-1

LARGO CELULAR ( m)

3-5

1-2

0,7-1

MORFOLOGA CELULAR

RECTANGULARES

RECTANGULARES

CUADRADAS

OTROS

ROSETAS Y GONIDIOS

ROSETAS Y GONIDIOS

GRNULOS S CUADRADOS

44

BIBLIOGRAFA
Departamento de Agua y Saneamiento del Ayuntamiento de Madrid (1997). Manual de laboratorio para el
anlisis de aguas residuales y lodos de depuracin. Publicacin del Exmo. Ayuntamiento de Madrid.
EMASESA (1997). Microorganismos filamentosos en el fango activo. Publicacin de la Empresa
Municipal de Abastecimiento y Saneamiento de Aguas de Sevilla, S.A.

45

PROTOZOOS

46

CLAVE DE CLASIFICACIN PARA FLAGELADOS (PHYLUM

SARCOMASTIGOPHORA, SUBPHYLUM MAASTIGOPHORA).

Gnero Euglena

Familia Euglenidae

Gnero Phacus
Gnero Trachelomonas

*Orden Euglenida
Gnero Astasia

CLASE

Familia Astasiidae

PHITOMASTIGOPHORA.

Gnero Urceolus

*Orden

Peranematales

Familia Multiciliidae
*Orden Rhizomastigida
Familia Mastigamoebidae
*Orden Polimastigida
Grupo Coanoflagelados

CLASE

*Orden Protomonadina

ZOOMASTIGPHORA.

Grupo Anfimonadinos
Grupo Bodonideos

*Orden Trichomonadina

*Orden Hypermastigida

*Orden Opalinida

47

SUBPHYLUM MASTIGOPHORA.
Los flagelados presentan normalmente uno o dos flagelos que se implantan cerca del extremo anterior de
la clula. Su alimentacin puede ser auttrofa (si bien en fangos activos no la desarrollan debido a la turbidez
que les impide realizar fotosntesis) y fagotrofas.
Su forma, movimientos y nmero de flagelos son caractersticas importantes en su sistemtica.
Presentan grandes variedades respecto a su tamao, desde 5-30 m en los zooflagelados (Clase
Zoomastigophora), hasta 40-100 m entre las euglenas (Clase Phitomastigophora).

CLASE PHITOMASTIGOPHORA
ORDEN EUGLENALES
Organismos unicelulares que nadan con flagelos. Forma alargada o en espiral. Color verdoso
consecuencia de los cloroplastos. Organismos muy plsticos.
Son hetertrofos (utilizan alimentos presintticos que absorben de forma disuelta a travs de la superficie
celular), algunas especies pueden realizar fagocitosis, pero la mayora se alimentan de bacterias, algas y algunos
pequeos protozoos.

Figura 1. Esquema de un protozoo de la Clase Phitomastigophora.

Normalmente slo tienen un flagelo, aunque a veces pueden aparecer dos o tres. Su material de reserva
es el paramilo, que toma formas definidas en cada especie. Este parmetro ayuda en su identificacin.
Familia Euglenidae
Cuerpo plstico en forma de huso. Flagelo largo y curvado hacia atrs.
Tres gneros: Euglena, Phacus y Trachelomonas.
1

Esquema tomado del libro editado por EGEVASA "Microbiologa de la depuracin mediante fangos activados".

48

GNERO EUGLENA
Presenta estras longitudinales o espirales. Una pequea vacuola contrctil. Los pirenoides pueden estar
rodeados de una cubierta de almidn. Es caracterstico la forma del quiste, ya que aparecen como puntos verdes
en el fondo de la muestra.
EUGLENA

PISCIFORME

Longitud 25 m. Clulas fusiformes, redondeadas por delante, con corta pluma terminal detrs.
Membrana finamente estriada. Flagelo de igual longitud que el cuerpo. Dos cloroplastos en forma de cintas
laterales. Figura 2.
EUGLENA

VIRIDIS

Cuerpo fusiforme de 40-65 m de largo. Cloroplastos en forma de cinta y orientados hacia un pirenoide
central. Figura 3.
EUGLENA

TRIPTERIS

Clula de seccin triangular. Cuerpo retorcido, con el extremo posterior alargado en forma de pequea
cola. Cloroplasto longitudinal que cubre casi todo el cuerpo. Estriacin de la membrana en forma de espiral.
Tamao 70-120 m. Flagelo de tamao similar al cuerpo. Figura 4.

GNERO PHACUS
Forma aplanada, esfrica, con una cubierta exterior fina y forma corporal constante. Estriacin
longitudinal.
Posee un flagelo y cromatforos discoides de color verde. Figura 5.
GNERO TRACHELOMONAS
Presentan lriga, normalmente con espinas. Color amarillo-castao, consecuencia de las deposiciones de
hidrxido frrico con un compuesto mangnico sobre la lriga. Aparece un solo flagelo, largo, engrosado en su
anclaje con una estructura en forma de collar. Dos cromatforos en forma de disco curvo. Figura 6.

Familia Astasiidae
Morfologa similar a la familia euglenoide, pero sin cromatforos.
Cuerpo muy plstico, pero sin huso alargado. Presenta dos gneros fundamentalmente:

* Gnero Astasia:
Cuerpo alargado, de forma diversa, generalmente membrana con una fina estriacin espiralada.
Figura 7.
49

* Gnero Urceolus:
Cuerpo incoloro en forma de frasco estriado. Cuello similar a un embudo. Aparentemente simulan
una botella. Pueden presentar una espina terminal y estriacin espiralada.
Su movimiento es caracterstico al reptar sobre la boca del embudo y levantan la parte superior
del cuerpo sobre el sustrato. Hetertrofos. Figura 8.

ORDEN PERANEMATALES.
Cuerpo alargado, deformable con un movimiento de desplazamiento por compresin-alargamiento. Son
muy activos con un largo flagelo, siempre hacia delante y cuyo extremo presenta mayor mvilidad y ductilidad.
Citoplasma incoloro y alimentacin hetertrofa. Figura 9.

50

CLASE ZOOMASTIGOPHORA
Organismos flagelados que no presentan cloroplastos. De pequeo tamao y de vida libre. Se alimentan
de bacterias y sustancias orgnicas en descomposicin. Presentan uno o dos flagelos que utilizan para
desplazarse en movimientos pulsantes. Forma corporal de redondeada a alargada con algunos organismos en
estructuras coloniales. La mayora presenta un solo ncleo con estructura vesicular. El enquistamiento es un
fenmeno muy comn.
Presenta 6 rdenes, de los cuales cuatro son parsitos o simbiontes (Orden Polymastigda, Orden
Trichomonadina, Orden Hypermastigda y Orden Opalinida)

Figura 10. Esquema de un protozoo de la Clase Zoomastigophora.

ORDEN RHIZOMASTIGIDA
Formas intermedias entre amebas y flagelados. Los flagelos varan en nmero de uno a varios y
pseudpodos en nmero variable.
Familia Multiciliidae
Cuerpo esfrico con pequeos pseudpodos. Entre 40-50 flagelos largos y distribuidos uniformemente
con acompaamiento de varios pseudpodos. Holozoico. Figura 11.

Familia Mastigamoebidae
Cuerpo ameboide con 1-4 flagelos y lobpodos en nmero variable. Solo un ncleo. Son de vida libre.
Holozoicos y saprozoicos. Figura 12.

Esquema tomado del libro editado por EGEVASA "Microbiologa de la depuracin mediante fangos activados".

51

ORDEN POLYMASTIGIDA
Organismos parsitos de mamferos y aves, pero que pueden aparecer en el agua residual al encontrarse
en el intestino. Clulas aplanadas de forma variable.
TETRAMITUS PIRYFORMIS
Clulas incoloras, de forma variable que se alimentan de bacterias. Presenta un largo flagelo posterior y
dos flagelos anteriores cortos junto a otro ms largo. Movimientos rotatorios. Tamao de 11-20 m. Figura 13.
HEXAMITA FISSA
Clulas ovaladas, con una terminacin en forma de espina ancha en la zona posterior. Se alimentan de
bacterias, pero tambin son saprfitos.
Los dos flagelos posteriores quedan libres hacia la zona terminal, y en la zona anterior dos grupos de tres
flagelos ms cortos a ambos lados.
Movimientos natatorios de rotacin. Tamao de 20-26 m. Figura 14.
TREPOMONAS ROTANS

Clulas ovaladas, con una mitad posterior aplanada y seccin en "s". Extremo posterior invaginado.
Bordes ligeramente curvos tambin hacia el interior corporal. Dos grupos de flagelos situados en la zona
intermedia. Dos largos, uno anterior y otro posterior y dos pequeos perpendiculares al cuerpo. Tamao de 7-25
m. Figura 15.

ORDEN PROTOMONADINA
Muchas especies parsitas, siendo clulas con uno o dos flagelos. Tres grupos principales.
* Grupo Coanoflagelados
Organismos solitarios y coloniales. Forman un pequeo embudo en la parte donde se ancla el
flagelo.
Muchos presentan un mucilago a su alrededor que atrapa las partculas, favorecido por el
movimiento rotatorio que crea un remolino que acerca las partculas alimenticias. Figura 16.
* Grupo Anfimonadinos
Organismos coloniales con envolturas gelatinosa.
Presentan de uno a dos flagelos de similar longitud, utilizando uno para anclarse a la colonia y el
otro hacia el exterior para la motilidad y la alimentacin. Figura 17.

52

* Grupo Bodonideos
Organismos unicelulares, pequeos con dos flagelos insertos en el mismo lugar, uno dirigido
anteriormente y otro posteriormente, generalmente mayor o igual a la longitud del cuerpo.
Movimientos rotatorios en zig-zag (BODO PUTRINUS) o saltando (BODO SALTANS). Figura 18.

53

FLAGELADOS
3

12

11

15

13

14

16

17

18

Figura 2: Euglena pisciforme; Figura 3: Euglena viridis; Figura 4: Euglena tripteris; Figura 5: Gnero Phacus; Figura 6: Gnero
Trachelomonas; Figura 7: Gnero Astasia; Figura 8: Gnero Urceolus; Figura 9: Orden Peranematales; Figura 11: Familia
Multiciliidae; Figura 12: Familia Mastigamoebidae; Figura 13: Tetraminus piryformis; Figura 14: Hexamita fissa; Figura 15:
Trepomonas rotans; Figura 16: Grupo Coanoflagelados; Figura 17: Grupo Anfimonadinos; Figura 18: Grupo Bodonideos

Dibujos tomados del "Atlas de los microorganismos de agua dulce."

54

BIBLIOGRAFA
CURDS, C. R. y HAWKES H. A. (1975). Ecological Aspects of Used-water Treatment. Ed. ACADEMIC
PRESS INC. (Londres).
EGEVASA (1998). Microbiologa de la depuracin mediante fangos activos. Publicacin de La Empresa
General Valenciana del Agua, S.A. (EGEVASA), de la Exma. Diputacin de Valencia.
STREBLE, H. y KRAUTER, D.(1987). Atlas de los microorganismos de agua dulce. La vida en una gota
de agua. Ed.Omega, S.A. (Barcelona).

55

CLAVE DE CLASIFICACIN PARA AMEBAS Y HELIOZOOS ( CLASE

RHIZOPODA Y ACTINOPODA)

Gnero Naegleria
Familia Vahlkampfiidae
Gnero Vahlkampfia
Familia Chaosidae
Orden Amoebida

Familia Mayorellidae
Familia Thecamoebidae

CLASE

Familia Hyalodiscidae

RHIZOPODA

Orden Testaceas

CLASE
ACTINOPODA

Orden Heliozoa

56

CLASE RHIZOPODA (AMEBAS)

Organismos unicelulares con capacidad para emitir prolongaciones de su citoplasma llamados
pseudpodos, que les permiten rodear las partculas alimenticias para su absorcin en vacuolas de digestin y
para su locomocin.
Las amebas se pueden diferenciar en funcin del tipo de pseudpodos:

En forma de dedo: Lobpodo

En forma de filamento fino: Filopodio

En forma muy ramificada: Rizopodio

Presentan cuatro rdenes:

Proteomyxida: parsitos, sin inters en fangos activados

Foraminifera: marinos, sin inters en fangos activados

Amoebida

Testacea

ORDEN AMOEBIDA.
Amebas desnudas; no presentan envoltura consistente y presentan un cuerpo muy verstil. Se distingue
la envoltura exterior del interior citoplasmtico o ectoplasma, que es ms translcido.
Al emitir un pseudpodo se puede diferenciar el endoplasma, del ectoplasma o cubierta exterior, ya que
se distingue una elongacin de ste. Dentro del interior citoplasmtico se pueden distinguir numerosas vacuolas
digestivas, formadas por invaginaciones previas del cuerpo celular. Pueden diferenciarse por su funcionalidad
en dos tipos:

pinocitosis: absorcin de lquidos

fagocitosis: absorcin de partculas o animales de mayor tamao

57

Figura 19. Esquema de un protozoo del Orden Amoebida

A estas vacuolas digestivas se les aade los enzimas digestivos que permiten la digestin de los
alimentos.
Presentan reproduccin asexual por fisin binaria y ocasionalmente mltiple. Es muy comn la fase de
enquistamienteo en periodos de situaciones adversas.
Dentro de este orden encontramos cinco familias:

Vahlkampfiidae

Chaosidae

Mayorellidae

Thecamoebidae

Hyalodiscidae

Familia Vahlkampfiidae
Forma reptante. Dos gneros: Naegleria, Vahlkamfia.
GNERO NAEGLERIA
Tamao en torno a las 30 m. Presenta pseudpodos eruptivos que se caracterizan como hinchamiento
de la zona anterior hialina. Bacterifago. Quistes uninucleados con fase flagelada (dos flagelos).
NAEGLERIA AQUATILIS
Lobopodos grandes con movimientos en forma de cinta continua. Tamao de hasta 25 m. Figura 20.

GNERO VAHLKAMPFIA
Tamao en torno a 60 m. Pseudpodos hemisfricos con abultamiento anterior de la zona hialina y en
ocasiones presenta uroide posterior. Quistes sin forma flagelada. Bacterifago.

Esquema tomado del libro editado por EGEVASA "Microbiologa de la depuracin mediante fangos activados".

58

VAHLKAMPFIA LIMAX
Tamao en torno a las 100 m de largo por 50 de ancho. La zona anterior es ms ancha que la posterior,
con desplazamientos suaves. Presenta un borde corporal ondulado y en la zona anterior una serie de pequeos
filamentos. En ocasiones puede presentar cristales en el endoplasma. Figura 21.

Familia Chaosidae
Grandes amebas con citoplasmas muy densos y ncleos granulares. Pseudpodos con placas hialinas.
Polyploidal. Tamao entre 500-200 m. Se alimenta de algas y protozoos.
CHAOS DIFFLUENS
Tamao comprendido entre 300-600 m. Muy verstil en sus movimientos, con desplazamientos del
endoplasma hacia el pseudpodo. Se alimenta de paramecios. Figura 22.
PELOMYXA PALUSTRIS
Tamao comprendido entre 1-2 mm. Es una de las amebas mayores en aguas dulces. No presenta
erupciones citoplasmticas, sino que su forma es ms o menos ovoide o circular. Presenta un interior refringente
por numerosas vacuolas y grnulos. Figura 23.

Familia mayorellidae
Pseudpodos terminados en punta.
DINAMOEBA MIRABILIS
Tamao en torno a 60-160 m. Ovalada o esfrica con pseudpodos irradiados en punta, cubiertos de
pequeos pelos citoplasmticos. Movimiento por reptacin o flotacin. Generalmente presenta una cubierta
mucilaginosa que la envuelve. Figura 24.

Familia Thecamoebidae
Estadio intermedio entre las amebas desnudas y testceas, ya que presentan una capa exterior gruesa con
pliegues longitudinales. No presentan generalmente pseudpodos. Ectoplasma con apariencia verrugosa. Se
alimentan de algas filamentosas
THECAMOEBA VERRUCOSA
Tamao en torno a 350 m. Sus movimientos son lentos por desplazamiento del ectoplasma sin llegar a
producir pseudpodos. Color amarillo. Figura 25.
59

ORDEN TESTACEAS
Presentan una envoltura rgida o teca formada por estructuras de quitina, que en algunas especies pueden
ir reforzadas por conchas o piedras superpuestas. Generalmente los pseudpodos se emiten desde una zona
determinada donde no existe la teca.
5

Figura 26. Esquema de un protozoo del Orden Testaceas.

Los gneros pueden agruparse en funcin del tipo de pseudpodo y de la teca:

Formas con lobopodos:

Teca reducida a una membrana flexible: Cochliopodium y Gocevia.

Teca parcialmente slida: Microchlamys y Pseudochlamys.

Teca quitinosa sin cuerpos extraos: Pyxidicula y Arcella.

Teca aplanada con partculas extraas: Centropyxis y Bullinularia.

Teca formada por materiales extraos: Difflugia.

Teca quitinosa, generalmente con plaquitas calcreas o de cido saliclico: Lesquereusia,

Quadrulella, Paraquadrula, Nebela, Heleoptera, Awerintzewia y Hyalosphenia.

Formas con lobopodios ramificados: Phryganella, Cryptodifflugia y Wailesella.

Esquema tomado del libro editado por EGEVASA "Microbiologa de la depuracin mediante fangos activados".

60

Formas con filopodio:

Teca totalmente reducida: Gymnophrys y Penardia.

Teca transparente con placas silceas redondeadas: Euglypha, Assulina y Trinema.

Teca curvada con placas pequeas: Cyphoderia.

Teca con grandes placas hexagonales: Paulinella

Teca con elementos silceos irregulares: Gromia y Nadinella.

Teca con dos orificios: Amphitrema.

Formas con rizpodos: Lieberkuehnia, Allelogromia y Diplophrys.

ARCELLA GIBOSA
Simetra irregular. Toscos dibujos hexagonales. Tamao comprendido entre 70-125 m de dimetro.
Figura 27.
ARCELLA VULGARIS
Forma de casco. Se alimenta de diatomeas y algas verdes. Tamao comprendido entre 100-145 m de
dimetro. Figura 28.
ARCELLA HEMISPHAERICA
Teca redondeada. Su dimetro es de unas 50 m. Figura 29

61

CLASE ACTINOPODA

ORDEN HELIOZOO
Formas similares a un sol, con un cuerpo esfrico y pseudpodos muy largos irradiados en todas
direcciones. Se alimentan de flagelados, ciliados, rotferos, algas...
Pueden unirse en ocasiones formando colonias de alimentacin que luego se disgregan tras cumplir su
cometido. A veces pueden presentar cubierta mucilaginosa. En condiciones desfavorables pueden formar
quistes. Normalmente se reproducen por biparticin, pero en casos de deficiencia alimenticia, se inicia un
proceso de reproduccin sexual que recibe el nombre de autogamia.
ACTINOPRYS SOL
El Heliozoo por excelencia. Forma esfrica de 40-50 m. Se alimenta de flagelados, ciliados, algas
conjugadas unicelulares y levaduras. Individuos jvenes a menudo agrupados en comunidades alimentarias.
Figura 30.
ACTINOSPHAERIUM EICHORNI
Numerosos pseudpodos que se contraen al ms mnimo contacto. Tamao comprendido entre 200-300
m. Figura 31.
ACANTHOCYSTIS MIMETICA
El esqueleto est formado por escamas silceas tangenciales y acculas silceas radiales. Estas ltimas se
aprecian al secarse la muestra en el cubreobjetos. Figura 32.

62

AMEBAS Y HELIOZOOS
6

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21

23

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24

25

28

27

29

31

30

32

Figura 20: Naegleria aquatilis; Figura 21: Vahlkampfia limax; Figura 22:Chaos difflens; Figura 23: Pelomyxa palustris; Figura
24: Dinamoeba mirabilis; Figura 25: Thecamoeba verrucosa; Figura 27: Arcella gibosa; Figura 28: Arcella vulgaris; Figura 29:
Arcella hemisphaerica; Figura 30: Actinoprys sol; Figura 31: Actinosphaerium eichorni; Figura 32: Acanthocystis mimetica.

Dibujos tomados del "Atlas de los microorganismos de agua dulce"

63

BIBLIOGRAFA
CURDS, C. R. y HAWKES H. A. (1975). Ecological Aspects of Used-water Treatment. Ed. ACADEMIC
PRESS INC. (Londres).
EGEVASA (1998). Microbiologa de la depuracin mediante fangos activos. Publicacin de La Empresa
General Valenciana del Agua, S.A. (EGEVASA), de la Exma. Diputacin de Valencia.
STREBLE, H. y KRAUTER, D.(1987). Atlas de los microorganismos de agua dulce. La vida en una gota
de agua. Ed.Omega, S.A. (Barcelona).

64

CLAVE DE CLASIFICACIN PARA CILIADOS.

Ciliado libre,

desprovisto de

cirros.

Ciliado
pedunculado fijo al

sustrato por un

pednculo.

*Cilios orales poco o

nada distintos al
resto.Citostoma apical
o subapical.

Clase Kinetogragminophora
(Holotricos).

*Cilios orales
distintos al resto.
Citostoma ventral.

Clase Oligohymenophora.
Subclase Hymenostomatia.
(Holotricos).

*Cilios orales
desarrollados en la
zona alrededor de la
membranela.
Citostoma opuesto a
la cavidad bucal.

Clase Polymenophora.
Orden Heterotrichida.
(Heterotricos).

*Forma adulta
privada de cilio y
dotada de largos
tentculos.

Clase Kinetogragminophora
Subclase Suctoria.
(Suctores).

*Forma privada de
tentculo. Cilios
sobresalientes en polo
anterior.
Carecen de cilios en
el resto del cuerpo.

Clase Oligohymenophora.
Subclase Peritrichia.
(Peritricos).

Ciliados dotados de
cirros, por medio
del cual se desplaza
sobre los flculos
del fango.

Clase Polymenophora.
Orden Hypotrichida.
(Hypotricos).

65

CLASE KINETOGRAGMINOPHORA.
Los miembros pertenecientes a esta clase se caracterizan por poseer unos cilios orales, slo levemente
diferentes de los somticos.
7

Figura 33. Esquema de un protozoo de la Clase Kinetogragminophora.

El citostoma es frecuentemente apical o subapical, a veces semiventral y se abre directamente en la

superficie exterior o al fondo de un atrio o vestbulo. La ciliatura oral y la somtica nunca son compuestas.
-

Subclase Gymnostomtia.
Citostoma se abre directamente al exterior en posicin apical o subapical.

Subclase Vestibuliferia.
Citostoma abierto en una cavidad vestibular en posicin apical o subapical.

Subclase Hypostomatia.
Citostoma no apical, situado sobre la superficie ventral del cuerpo.

Subclase Suctoria.

Esquema tomado del libro editado por EGEVASA "Microbiologa de la depuracin mediante fangos activados".

66

SUBCLASE GYMNOSTOMATIA.
Clave para el reconocimiento de la familia.
- Superficie del cuerpo cubierto de una densa placa. Citostoma apical. Familia Colepidae.
- Superficie del cuerpo sin placas.
*Citostoma redondo en el pice (zona ms afilada) del cuerpo. Familia Enchelydae.
*Citostoma en una grieta.
- Citostoma apical, extendido hacia un lado del cuerpo, situado sobre una cresta sin cilios.
Familia Spathidium.
- Citostoma situado a lo largo de un lado del cuerpo. Familia Amphileptidae.
Familia Colepidae.
Los miembros de esta familia tienen el citostoma en el polo anterior del cuerpo y estn dotados de
pequeas y numerosas placas situadas sobre la superficie del cuerpo. Un solo gnero est presente en los fangos
activos, el Gnero Coleps Nitzsch.
Cuerpo en forma de barril. Citostoma amplio, de seccin circular, situado en el pice del cuerpo y
rodeado de largos y delgados cilios. El polo inferior ms grueso, presenta espinas. Uno ms cilios caudales.
Una sola especie aparece en el fango activo.
COLEPS HIRTUS. (c. libre)
Longitud 40-60m. Caparazn dividido en 4 anillos transversales, con las placas principales atravesadas
por orificios arionados, asemejndose a un tonel. De 15 a 20 filas longitudinales de estrias, esto hace que
parezca un barril cuadriculado. La boca se sita en el polo anterior y est rodeada de una placa especial. En el
polo posterior tiene 3 espinas. Los cilios tienen una longitud uniforme en todo el cuerpo y en la extremidad
posterior tiene un largo cilio caudal. El macroncleo es esfrico. La vacuola contrctil se sita prxima al polo
posterior. Figura 34.
Es infrecuente esta especie en el fango activo. Su rgimen alimenticio es variado y comprende algas,
flagelados y, ocasionalmente, ciliados. Predador de protozoos. Nada velozmente y cambiando frecuentemente
de direccin. Presenta una baja tolerancia al in amonio y al amonaco y no se encuentra, por tanto, en
ambientes con altas concentraciones de este elemento. Este ciliado nadador puede estar presente en una cantidad
discreta en plantas que reciben aguas ricas en sustancia orgnica con bajo contenido en nitrgeno, como por
ejemplo un agua rica en celulosa. Su presencia en el fango activo es compatible con una buena eficacia de
depuracin.

67

Familia Enchelydae.
Algunos gneros de esta familia aparecen en tratamientos biolgicos de depuracin. El Gnero
Trachelophyllum es bastante comn en el fango activo.
GNERO THACHELOPHYLLUM.
Incluye pequeos ciliados alargados y flexibles.
En el polo anterior, que es ahusado, se abre el citostoma que contina en una larga y estrecha citofaringe
de seccin circular. Son visibles dos macroncleos esfricos, cada uno de los cuales tiene al lado un
microncleo. La vacuola contrctil se sita en posicin terminal.
Una sola especie se presenta en el fango activo.
TRACHELOPHYLLUM PUSILLUM. (c. libre)
Las caractersticas morfolgicas de este animal se corresponden a las del gnero al que pertenece.
Longitud 30-50m, cuerpo ahusado. Abunda en el fango activo. Se nutre de pequeos flagelados, bacterias y
segn algunos autores de otros ciliados. Cuando aparece junto a Aspidisca en proporciones iguales, nos indica
una buena calidad del agua tratada. Actualmente se denomina Acineria uncinata. Figura 35.

Familia Spathidiidae.
Los miembros de esta familia estn presentes en plantas depuradoras con 1 solo gnero.
GNERO SPATHIDIUM.
Ciliado con forma de frasco o de saco, comprimido ms o menos lateralmente. La regin anterior ms o
menos afilada forma un cuello truncado (incompleto, cortado). El citostoma ocupa toda la parte anterior.
Ciliatura uniforme, vacuola contrctil terminal. Algunas especies aparecen en el fango activo.
SPATHIDIUM OPIMUM. (c. libre)
Dimensiones 100-300m. Aplastado lateralmente y alargado. Polo anterior truncado, la apertura oral
presenta un labio provisto de "tricociste". Raro en el fango activo. Es predador de otros ciliados, se desplaza
velozmente. Otras especies del gnero aparecen raramente. Figura 36.

Familia Amphileptidae.
Los ciliados pertenecientes a esta familia son de forma alargada, afilado anteriormente y ms ancho
posteriormente. Estn comprimidos lateralmente, en modo que muestran normalmente al observador el lado
68

izquierdo del cuerpo. La apertura del citostoma se encuentra en la superficie ventral, que al observador le
aparece situada en el margen izquierdo.
GNERO HEMIOPHRYS.
Incluye ciliados en forma de frasco. La ciliatura del cuerpo se limita al lado derecho. La parte ventral y
convexa, presenta un largo citostoma en una hendidura.
Dos macroncleos esfricos, vacuola contrctil en gran nmero, que vara la cantidad en cada especie,
cuando aparece una sola vacuola, no se sita nunca en posicin completamente terminal. Alguna especie habita
en el fango activo.
HEMIOPHRYS FUSIDENS. (c. predador)
Longitud 80-200m, de forma esbelta. La regin anterior presenta numerosos "tricocistes". Una sola
vacuola contrctil situada en la proximidad del polo inferior del cuerpo.
Su presencia en el fango activo es espordica, en este ambiente desarrolla el papel de predador de otros
ciliados (Vorticella sp.), abunda asociado a Vorticella convallaria. Figura 37.
HEMIOPHRYS BIVACUOLATA. (c. predador)
Se observa la presencia de esta especie en el fango activo. Se distingue de la especie anterior por la
presencia de 2 vacuolas contrctiles. Ambas especies aparecen, en ocasiones, en fangos activos con largos
tiempos de permanencia.
En general, debido a la actividad predadora sobre otros ciliados, estos animales pertenecientes a este
gnero no realizan una actividad relacionada con la depuracin biolgica. Estos, no deben, por tanto, ser
incluidos dentro del grupo de los ciliados nadadores. Figura 38.
GNERO LITONOTUS.
Los ciliados de este gnero tienen caractersticas similares a los del Gnero Hemiophrys. Se distinguen
por la parte anterior, generalmente ms afilado y por la presencia de vacuola contrctil en posicin terminal.
Una sola especie aparece en el fango activo.
LITONOTUS FASCIOLA. (c. libre-predador)
Longitud 100m. Cuerpo alargado y comprimido lateralmente. Parte posterior y anterior afiladas. Parte
mediana ms gruesa. El cuerpo est cubierto en su totalidad por cilios, destacando por su tamao los de la
regin dorsal, que se disponen a forma de peine. Citostoma largo, casi un tercio del cuerpo. Dos macroncleos
esfricos en la parte media del cuerpo.

69

Es frecuente en el fango activo, especialmente en situaciones de alta carga, donde se nutren

preferentemente de otros ciliados. Su presencia en el licor mixto suele ser espordica. Precisan de una buena
oxigenacin del fango activo. Figura 39.
SUBCLASE VESTIBULIFERIA.
ORDEN COLPODIDA.
Los ciliados pertenecientes a este grupo tienen la ciliatura del vestbulo y los microcilios altamente
organizados en una cirromembranela derivada de partes de la membrana somtica.
La ciliatura somtica es tpica por la presencia de 2 "ciglia" en cada cinetosoma (cilios ramificados).
Un solo gnero se encuentra en las depuradoras.
GNERO CLPODA.
Ciliado con forma reniforme, comprimido, con borde derecho semicircular y el izquierdo bastante
convexo.
Cavidad oral situada en la parte ventral, en posicin media. El citostoma a la derecha del plano
meridiano y se abre en la cavidad del peristoma que est abundantemente ciliado. Ciliatura dispuesta de forma
no simtrica. Macroncleo esfrico, vacuola contrctil terminal.
COLPODA CUCULLUS. (c. libre)
Longitud 50-120m, normalmente 80m. La parte anterior sobrepasa al peristoma. Cubierto de 8-10
surcos. Ciliatura uniforme dispuesta en 29-34 filas. Peristoma con un profundo embudo que se inicia sobre el
borde derecho. Vacuola contrctil terminal.
En determinadas condiciones como la abundancia de alimento, el cuerpo puede asumir una coloracin
muy oscura por la abundante incorporacin de dicho alimento. Este ciliado nadador se nutre de bacterias. Su
presencia en el fango activo es muy rara. Figura 40.

70

SUBCLASES GYMNOSTOMATIA Y VESTIBULIFERA

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40

Figura 34: Coleps hirtus; Figura 35: Trachelophyllum pusillum; Figura 36: Spathidium opimum; Figura 37: Hemiophrys
fusidens; Figura 38: Hemiophrys bivacuolata; Figura 39: Litonotus fasciola; Figura 40: Colpoda cucullus.

Dibujos tomados del "Atlas de los microorganismos de agua dulce"

71

SUBCLASE HYPOSTOMATIA.
- Orden Cyrtophorida: Cuerpo aplanado dorso-ventralmente.
- Orden Nassulida: Cuerpo aplanado lateralmente.

ORDEN CYRTOPHORIDA.
Dos familias aparecen en depuradoras de aguas residuales.
- Familia Dysteriidae: Presencia de un estilo mvil en el polo posterior.
- Familia Chilodonellidae: Ausencia de estilo.
Familia Dysteriidae.
Un solo gnero se observa en el fango activo.
GNERO TROCHILIA.
Ciliado de forma ovalada, con superficie dorsal convexa y superficie ventral plana cncava. Ciliatura
presente slo en la parte ventral. Citostoma colocado en un surco cercano en el lado derecho. Parte terminal
provista de una espina mvil. Macroncleo esfrico central, dos vacuolas contrctiles.
TROCHILIA MINUTA. (c. mvil de fondo)
Longitud 30-40m ovoidal. Frecuentemente en el fango activo apareciendo en abundante nmero. Se
alimenta de bacterias. La abundancia de esta especie est asociada al desarrollo de bacterias filamentosas, de las
cuales se alimenta.
Con el movimiento del cibo arrastra flculos de fango, por ello, su comportamiento debe ser
considerado, desde el punto de vista funcional, como ciliado mvil de fondo. Figura 41

Familia Chilodonellidal.
Un solo gnero aparece en depuradoras.
GNERO CHILODONELLA.
A este gnero pertenecen ciliados de forma oval, aplanados dorsoventralmente. La superficie dorsal es
convexa, mientras que la ventral es plana. La parte dorsal anterior, que es aplanada, es atravesada por una fila
de cilios largos. El citostoma es redondo, citofaringe sobresaliente con forma de cono. Macroncleo redondo.
Una ms vacuolas contrctiles, segn la especie. Dos especies aparecen en depuradoras.

72

CHILODONELLA UNCINATA. (c. mvil de fondo)

Longitud 50-90m. Aplanado dorsoventralmente. Superficie ventral plana con 11 filas de cilios.
Superficie dorsal anteriormente plana atravesada por 1 fila transversal de cilios, posteriormente convexa y
privada de cilios. Apertura del citostoma redonda, citofaringe en forma de cuerno. Macroncleo ovalado. 2
vacuolas contrctiles.
Comn en el fango activo, se nutre de bacterias, y en caso de necesidad de diatomeas y algas. Este
flexible ciliado se mueve sobre la superficie del fango, por tanto, debe ser considerado como forma mvil de
fondo. Se asocia a la presencia de bacterias filamentosas, de las cuales suele alimentarse en este tipo de
ambiente. Figura 42.
CHILODONELLA CUCULLULUS. (c. mvil de fondo)
Dimensiones variables, de 75 a 300m de longitud, normalmente 150m. Forma del cuerpo como la de
la especie anterior, 19-20 filas de cilios ventrales, 1 fila de cilios transversales sobre la superficie dorsal.
Citostoma redondo, citofaringe en forma de cesto. Macroncleo ovoidal. De 6-8 vacuolas contrctiles.
Infrecuente en el fango activo, se nutre de diatomeas, algas, bacterias. Caractersticas etolgicas y
ecolgicas similares a la especie anterior. Figura 43.

ORDEN NASSULIDA.
- Gnero Leptopharynx: Apertura oral en parte anterior del cuerpo.
- Gnero Microthorax: Apertura oral cercana al final de la parte posterior del cuerpo.
GNERO LEPTOPHARINX.
Ciliado

aplanado

lateralmente.

Recorrido

longitudinalmente

por

surcos.

Ciliatura

dispersa,

predominando en el lado derecho. Citostoma colocado en el lado izquierdo del cuerpo, en la zona superior.
Citofaringe tubular. Macroncleo esfrico en posicin central, estn presentes dos vacuolas contrctiles. Una
sola especie aparece en el fango activo.
LEPTOPHARYNX EUGLENIVORA. (c. libre)
Longitud 25-40m. Las restantes caractersticas morfolgicas son las de su gnero. Infrecuente en el
fango activo. Este ciliado nadador se nutre de bacterias y de flagelados (Euglenceas).
ste aparece cuando en la balsa de aireacin existe una cantidad discreta de grandes flagelados (Euglena,
Peranema). En este caso ,su presencia indica una carga de entrada poco concentrada. Otras especies del gnero
pueden observarse en el fango activo, sobre todo en ocasiones con plantas ricas en materia vegetal en
descomposicin. Figura 44.

73

GNERO MICROTHORAX.
Ciliados pequeos y aplanados, provistos de una delicada armadura a forma de quilla ms menos
ahusada anteriormente y redondeada posteriormente. Citostoma ventral en la parte inferior del cuerpo, carece de
citofaringe. Macroncleo esfrico. Dos vacuolas contrctiles. Una sola especie en el fango activo.
MICROTHORAX SULCATUS. (c. libre)
Longitud 30-40m. Las dems caractersticas morfolgicas son las del gnero al cual pertenece. Bastante
raro en el fango activo. Fagocita bacterias y flagelados. Este ciliado nadador se observa sobre todo en fangos
ricos en partculas vegetales en descomposicin. Figura 45.

SUBCLASE SUCTORIA.
ORDEN SUCTORIDA.
Los miembros pertenecientes a este grupo no poseen cilios u otros rganos mviles para su
desplazamiento en la fase adulta. Durante la fase joven poseen cilios y nadan libremente.
Los miembros de este orden se caracterizan por la presencia de numerosos tentculos, por medio de los
cuales capturan otros animales, principalmente ciliados, de los que se alimentan. Los tentculos pueden estar
dispersos por la superficie del cuerpo, o bien, agrupados en haces.
El estudio taxonmico del grupo requiere el conocimiento del proceso reproductivo, de todas formas est
limitada su presencia en el fango activo a pocas especies y es posible una identificacin, en base a la morfologa
del estado adulto.
La presencia de este animal en el fango activo indica, en trminos generales, un largo tiempo de
retencin del fango. La actividad predadora sobre otros ciliados limita su importancia en el proceso biolgico de
depuracin, por esta razn los suctores, aunque ssiles, no deben ser incluidos en ninguno de los tres grupos
funcionales.
-

Tentculos distribuidos sobre todo el cuerpo. Cuerpo de forma esfrica. Gnero

Podophrya.

Tentculos dispuestos en poco espacio. Cuerpo no esfrico, ms piriforme.

*

Cuerpo envuelto en una lrica. Gnero Acineta.

Cuerpo no envuelto en una lrica. Gnero Tokophrya.

74

GNERO PODOPHRYA.
PODOPHRYA FIXA. (c. predador)
Suctor de forma esfrica. Dimetro 10-50m. Numerosos tentculos distribuidos por toda la superficie
del cuerpo. Pednculo poco ms largo que el cuerpo, estriado transversalmente. Macroncleo esfrico en
posicin ms o menos centrada y una vacuola contrctil en la parte anterior.
Frecuente en el fango activo. Asociado a una baja calidad del efluente. Frecuentemente se encuentra con
alta edad del fango. Figura 46.
PODOPHRYA MAUPASI. (c. predador)
Dimetro 40-50m. Parecido a Podophrya fixa, se diferencia de l por un nmero inferior de tentculos,
y por la presencia de una sutil capa gelatinosa que envuelve el cuerpo. Frecuente en el fango activo. Figura 47.
GNERO ACINETA.
ACINETA CUSPIDATA. (c. predador)
Dimensiones 30-50m. Lrica en forma de copa, apoyada sobre un corto pednculo. Dos haces de
tentculos se disponen en la parte superior. Ncleo redondo, situado en la zona inferior. Figura 48.
Infrecuente en el fango activo. A veces, pegado al fango, aparece otra especie. Acineta foetida. Su
rgimen alimenticio est condicionado por la presencia de ciliados holotricos e hipotricos que succiona con los
tentculos. Aparecen en los fangos activados de aireaciones prolongadas, con alta edad del fango, con buenas
calidades del agua tratada.
ERIACINETA S.P. (c. predador)
Cuerpo celular envuelto por un caparazn aplanado. De forma muy variable, ms estrecho en la base,
donde se apoya en un corto pednculo. Por la hendidura anterior de caparazn salen dos grupos de tentculos
terminados en una especie de botn. stos son retrctiles, extendindolos y contrayndolos continuamente.
Segn la forma presentan entre 1 y 8 vacuolas contrctiles. Tamao 65-450 m, sin embargo los que suelen
aparecer en depuradoras, tienen un tamao que oscila entre 80 y 150 m.
Frecuente en fangos activos. Suelen aparecer en condiciones de elevada edad del fango y baja carga. Su
presencia es compatible con buenos niveles de depuracin.
GNERO TOKOPHRYA.
TOKOPHRYA QUADRIPARTITA. (c. predador)
Longitud 50-70m. Forma de pirmide cuadrangular ms o menos redondeada. Cuatro haces de
tentculos en los ngulos de la superficie anterior. Pednculo rgido de longitud 2-4 veces la del cuerpo.
Macroncleo ovalado, situado en el centro del cuerpo. Vacuola contrctil situada en la regin anterior.
75

Frecuente en el fango activo. Predador de ciliados nadadores y reptantes. Es indicador de situaciones con
alta edad del fango, baja carga y buenos rendimientos de depuracin. Figura 49.
TOKOPHRYA INFUSIONUM. (c. predador)
Tiene forma de pirmide invertida, semejante a un corazn, con un corto pednculo con estriacin
transversal y longitudinal. Los tentculos salen de la regin frontal y se hallan agrupados en dos haces. El
macroncleo oval est situado en el centro del cuerpo y la vacuola contrctil est unida a la superficie celular
por canales permanentes. Tamao 60m.
Es indicador de situaciones con alta edad del fango, baja carga y buenos rendimientos de depuracin.
TOKOPHRYA LEMNARUM. (c. predador)
Suctor de cuerpo esfrico provisto de un largo pednculo. Presenta los tentculos limitados a la mitad
anterior del cuerpo, agrupados en dos haces. Cada tentculo est atravesado por un fino canal. El macroncleo
est situado en la posicin central y es esfrico, situndose una vacuola contrctil en la parte anterior. Tamao
70 m.
En los procesos de depuracin, aparece en las mismas circunstancias que T. quadripartita y T.
infusionum.

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SUBCLASES HYPOSTOMATIA Y SUCTORIA

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Figura 41: Trochilia minuta; Figura 42: Trochilia uncinata; Figura 43: Chiledonella cucullulus; Figura 44:
Leptopharynx euglenivora; Figura 45: Microthorax sulcatus; Figura 46: Podophrya fixa: Figura 47: Podophrya
maupasi; Figura 48: Acineta cuspidata; Figura 49: Tokophrya quadripartita.

Dibujos tomados del "Atlas de los microorganismos de agua dulce". "

77

CLASE OLIGOHYMENOPHORA.

SUBCLASE HYMENOSTOMATIA.
Los miembros de esta subclase se caracterizan por poseer una cavidad bucal bien definida, incluyendo
membranela. El rea bucal se sita en la superficie ventral del cuerpo, generalmente cerca del rea anterior.
10

Figura 50. Esquema de un ciliado de la Clase Hymenostomatia.

Cavidad bucal bien definida y profunda en la superficie ventral:

* Presencia de Tricocisti: Suborden Peniculina.
* Ausencia de Tricocisti: Suborden Tetrahymenina.

Cavidad bucal poco profunda:

* Membrana paraoral prominente: Suborden Pleuronematina.
* Membrana paraoral reducida: Suborden Philasterina.

SUBORDEN PENICULINA.
Un solo gnero aparece en depuradoras.
GNERO PARAMECIUM.
Los ciliados pertenecientes a este gnero tienen forma ovalada o de puro, con ciliatura repartida
uniformemente por todo el cuerpo, destacando un penacho de cilios ms largo en el polo posterior del cuerpo,
cavidad oral (vestbulo) profunda y ligeramente oblicua, que se abre en el peristoma. En el peristoma se sita
una membranela rodeada de dos grupos de caractersticos cilios.
Macroncleo elipsoidal, uno ms microncleos. 1 2 vacuolas contrctiles. Tienen en el cuerpo
numerosos "tricocistes", que, en caso de necesidad, pueden ser expulsados. Algunas especies aparecen en
depuradoras.

10

Esquema tomado del libro editado por EGEVASA "Microbiologa de la depuracin mediante fangos activados".

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PARAMECIUM CAUDATUM. (c. libre)

Longitud 180-300m. Forma de torpedo, la extremidad posterior ligeramente ahusada, que porta un
penacho de largos cilios. Cuerpo de seccin circular. Macroncleo grueso y central, 1 microncleo, 2 vacuolas
contrctiles provistas de canales radiales.
Se alimenta de bacterias. Este ciliado nadador es raro en el fango activo. Su presencia indica que se trata
de un fango joven sometido a cargas muy fuertes. Figura 51.
PARAMECIUM BURSARIA. (c. libre)
Tambin es raro en el fango activo y se observa en situaciones anlogas. Se diferencia del anterior
porque el cuerpo tiene una forma ms achatada y redondeada y el tamao es menor, 90-150 m.
Es comn en acumulaciones de agua con poca cantidad de fango activo y prcticamente sin oxigenacin.
Es fcil encontrarlos en reactores fuera de uso. Viven en simbiosis con algas verdes unicelulares.

SUBORDEN TETRAHYMENINA.
Los ciliados pertenecientes a este grupo son de dimensiones pequeo-media. La ciliatura oral es
generalmente reducida.
-

Con un largo cilio caudal: Gnero Sathrophilus.

Sin un largo cilio caudal:

*Una sola fila de cilios parten debajo de la apertura oral. Gnero Colpidium.
*Dos filas de cilios parten debajo de la apertura oral. Gnero Tetrahymena.
*Siete filas de cilios parten debajo de la apertura oral. Gnero Glaucoma.

GNERO SATHROPHILUS.
Los miembros de este gnero tienen el cuerpo ovalado y comprimido. Cavidad oral en el primer tercio
anterior del cuerpo, cercano al margen derecho del cuerpo. Macroncleo en zona central.
SATHROPHILUS PUTRINUS. (c. libre)
Dimensin 30-50m ovoidal, aplanado. Se nutre de bacterias dispersas.
En el fango activo, aparece de forma discreta durante la primera fase de colonizacin del reactor. Su
presencia en un fango bien formado indica que existe una carga muy fuerte o un tiempo de retencin muy breve.
Figura 52. A veces aparece en el fango activo SATHROPHILUS OVIFORMIS.
GNERO COLPIDIUM.
Ovoidal, con ciliatura uniforme dispuesta por un nmero variable de filas. Citostoma pequeo triangular,
situado cerca del polo anterior sobre el lado derecho. Bajo la apertura oral parte una sola fila de cilios.

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COLPIDIUM COLPODA. (c. libre)

Longitud de 100-150m. Ovoidal reniforme. Ciliatura dispuesta sobre 55-60 filas de cilios. Sutura preoral curvada sobre la derecha. Macroncleo esfrico, vacuola contrctil en la zona inferior.
Se alimenta de bacterias y flagelados. Ciliado nadador infrecuente en el fango activo. Especie ligada a la
primera fase de localizacin llegando con el influente a la E.D.A.R. Su presencia se produce cuando la carga es
excesiva. Figura 53.
COLPIDIUM CAMPYLUM. (c. libre)
Especie similar a la anterior, diferencindose de sta en que la sutura pre-oral no es curvada.
Ambas especies se observan habitualmente en el fango en exceso, asociadas a Glaucoma scintilaus,
Tethrahymena pyriformis Paramecium trichium. Figura 54.
GNERO TETRAHYMENA.
Pequeo ciliado periforme, con ciliatura uniformemente dispuesta sobre 20 filas. Citostoma pequeo,
ligeramente ahusado, dotado de una cresta sobre el margen derecho. Dos filas de cilios parten de la cavidad
oral.
TETRAHYMENA PYRIFORMIS. (c. libre)
Longitud 30-50m, ovoidal, ahusado anteriormente. Cavidad oral profunda. Macroncleo central,
vacuola contrctil terminal.
Se alimenta de bacterias dispersas. Infrecuente en el fango activo. La presencia de esta especie nadadora
se relega a la fase inicial del proceso de depuracin, cuando el cultivo es joven y est en vas de formacin.
Normalmente su presencia indica un bajo tiempo de retencin del licor mixto una sobrecarga con escasa
oxigenacin. Figura 55.
GNERO GLAUCOMA.
Ciliado de forma ovoidal o elipsoidal con ciliatura uniforme dispuesta a lo largo de 30-40 filas. Cavidad
oral dispuesta ms menos transversalmente. Cercano al polo anterior, portando una cresta sobre el borde
derecho. De la cavidad oral parten siete filas de cilios.
GLAUCOMA SCINTILLANS. (c. libre)
Longitud de 40-80m, elipsoidal, ligeramente aplanado ventralmente. Apertura oral dotada de una
membrana ondulante. Macroncleo esfrico situado en posicin central, vacuola contrctil en el ltimo tercio
inferior del cuerpo.
Se nutre de bacterias dispersas. Raro en el fango activo. Presenta una elevada tolerancia al dficit de
oxgeno. Figura 56.

80

SUBORDEN PLEURONEMATINA.
GNERO CYCLIDIUM.
Pequeo ciliado de forma ovoidal, provisto de una larga cerda caudal. Peristoma situado sobre el lado
derecho del cuerpo y provisto de una membrana que forma una larga cavidad entorno al citostoma. Ciliatura
dispersa a lo largo del cuerpo, macroncleo esfrico, vacuola contrctil ms menos terminal.
CYCLIDIUM GLAUCOMA. (c. libre)
Longitud 15-30m. Ovoidal con extremidad ligeramente truncada. Polo superior libre de cilios, polo
inferior dotado de un largo cilio caudal. Diez filas de cilios a lo largo del cuerpo. Membrana ondulante larga.
Macroncleo esfrico situado sobre la mitad anterior. Vacuola contrctil terminal. Se mueve mediante rpidos
saltos, alternados con periodos en los que permanece completamente quieto. Se nutre de bacterias.
Es infrecuente en el fango activo. Aparece durante las primeras fases de colonizacin, siendo indicador
cuando aparece en un cultivo establecido, de una carga fuerte o un tiempo corto de residencia. Figura 57.

SUBORDEN PHILASTERINA.
-

Cuerpo alargado, ovoidal, poco aplanado. Un solo largo cilio caudal.

*

Endoplasma granuloso, muy oscuro. Vacuola contrctil hacia la mitad del cuerpo. Gnero
Dexiotricha.

*
-

Endoplasma no granuloso. Vacuola contrctil en el polo posterior. Gnero Uronema.

Cuerpo aplanado, discoidal. Ms cilios caudales. Gnero Cinetochilum.

GNERO CINETOCHILUM.
Pequeos ciliados de forma discoidal, aplanados. Ciliatura dispuesta sobre la superficie ventral. Cavidad
oral en la mitad inferior del cuerpo. Largo cilio terminal.
CINETOCHILUM MARGARITACEUM. (c. libre)
Longitud 15-45m; de forma ovoidal, aplanado. Ciliatura slo sobre la superficie ventral. 3-4 largos
cilios caudales. Cavidad oral situada en la regin inferior derecha del cuerpo. Macroncleo esfrico ms
menos central. Vacuola contrctil subterminal. Se alimenta de bacterias. Ciliado nadador frecuente en el fango
activo.
Presenta una baja tolerancia al amonaco libre y en general a los compuestos nitrogenados. Compatible
con una buena depuracin. Figura 58.

81

GNERO DEXIOTRICHA.
DEXIOTRICHA COLPIDIUPSIS. (c. libre)
Ciliado de forma ovalada ligeramente truncada por la extremidad superior. El cuerpo est uniformemente
cubierto de cilios y presenta un largo cilio caudal. Cavidad oral subapical, una fila de cilios corre
transversalmente a la extremidad derecha del peristoma. Longitud 50-65m, ovoidal, ciliatura dispuesta sobre
30-34 filas de cilios. Peristoma formado por un complejo sistema de membranelas. Macroncleo esfrico,
central; vacuola contrctil en el ltimo cuarto inferior del cuerpo.
Se mueve rpidamente en el licor mezcla. Se alimenta de bacterias y flagelados. Raro en el fango activo.
Aparece en la puesta en marcha del proceso y cuando se producen sobrecargas del mismo.
DEXIOTRICHA CENTRALIS. (c. libre)
Especie con aspecto arrionado, lateralmente comprimida. Presenta una fila de cilios oblicua desde la
mitad del cuerpo hasta el borde derecho de la foseta bucal. Los otros cilios se distribuyen de manera dispersa
por todo el cuerpo. La boca se encuentra en la zona ventral. Se alimenta de bacterias. Tamao 30-45m.
Habitual en situaciones de alta carga msica.

GNERO URONEMA.
Ciliado de forma ovoidal ms menos alargado, ligeramente aplanado y carece de cilios en el polo
anterior. Cavidad oral en el lado ventral de la parte superior del cuerpo y provisto de una pequea membrana.
Macroncleo esfrico. Vacuola contrctil terminal, un largo cilio caudal.
URONEMA NIGRICANS. (c. libre)
Longitud de 21-29m, ovoidal, cuerpo alargado y ligeramente comprimido anteriormente. 11-12 filas de
cilios recorren el cuerpo. Cavidad oral alargada, situada debajo del polo anterior en posicin ventral. Membrana
ondulante a lo largo del margen derecho de la cavidad oral. Vacuola contrctil terminal. Macroncleo esfrico
en posicin central. Nada a grandes saltos.
Se alimenta de bacterias. Ciliado nadador infrecuente en el fango activo. Ecologa similar a Sathrophilus.
Figura 59.

82

SUBCLASE HYMENOSTOMATIA
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Figura 51: Paramecium caudatum; Figura 52:Sathrophilus putrinus: Figura 53: Colpidium colpoda; Figura 54:
Colpidium campylum; Figura 55: Tetrahymena pyriformis; Figura 56: Glaucoma scintillans; Figura 57: Cyclidium
glaucoma; Figura 58: Cinetochilum margaritaceum; Figura 59: Uronema nigricans.

11

Dibujos tomados del "Atlas de los microorganismos de agua dulce"

83

SUBCLASE PERITRICHIA.
A este grupo pertenecen los ciliados que constituyen normalmente la componente ms significativa de la
microfauna del fango activo. La subclase se subdivide en un solo orden (Peritrichida) el cual, a su vez, se
subdivide en dos subrdenes (Sessilina y Mobilina).
12

Figura 60. Esquema de un ciliado de la Subclase Peritrichia

Los ciliados pertenecientes al suborden Mobilina, escasean normalmente en el cultivo de depuradoras.

SUBORDEN SESSILINA.
Son ciliados ssiles con forma de copa, que se agarran al sustrato por medio de un delgado pednculo.
Carecen de ciliatura somtica y estn dotados de cilios slo en torno al polo apical, en el cual se abre el
citostoma. Pueden ser individuales coloniales. El pednculo puede ser rgido contrctil. La contractibilidad
del pednculo es debido a la presencia de mionema en el interior del mismo. El macroncleo tiene forma de
cinta. La vacuola contrctil se sita en posicin subapical.
Los individuos ssiles pueden producir formas libres nadadoras (Telotroco) que carecen de pednculo y
provistos posteriormente de un anillo de cilios. Los telotrocos son producidos en mayor nmero cuando la carga
es muy baja y el tiempo de retencin del fango muy alto.

12

Esquema tomado del libro editado por EGEVASA "Microbiologa de la depuracin mediante fangos activados".

84

Forma libre: Estudio del Telotroco.

Forma ssil:
*

Presencia de una lriga dentro de la cual se sitan 1 2 individuos. Familia Vaginicolidae.

Lrica ausente:
- Pednculo contrctil. Familia Vorticellidae.
- Pednculo no contrctil:
- Presencia de un oprculo epistomal en el pice superior. Cuerpo casi nunca contrctil.
Familia Opercularidae.
- Oprculo no presente. Cuerpo contrctil. Familia Epistylididae.

Familia Vorticellidae.
-

Individuos coloniales, varios individuos se unen con sus pednculos a un pednculo principal.
*Mionema de los pednculos unidos entre s, de forma que toda la colonia se mueve junta.
Gnero Zoothamnium.
*Mionema de los distintos pednculos no conectados entre s, de forma que cada individuo se
contrae autnomamente. Gnero Carchesium.

Individuos solitarios, por el pednculo cada organismo se agarra al sustrato. Gnero Vorticella.

GNERO ZOOTHAMNIUM.
ZOOTHAMNIUM PYGMAEUN. (c. fijo)
Peritrico colonial. Contraccin simultnea de todos los organismos de la colonia. Estos animales se
nutren de bacterias. Son frecuentes en el fango activo. Figura 61.
ZOOTHAMNIUM MUCEDO. (c. fijo)
Es la otra especie que aparece en el fango activo. Estos prozoos se asocian a una buena depuracin y a
un efluente de alta calidad. Figura 62.
GNERO CARCHESIUM.
CARCHESIUM POLYPINUM. (c. fijo)
Longitud 80-140m. La colonia puede alcanzar un tamao superior al milmetro. Forma de campana con
peristoma amplio. Macroncleo con forma de "C". Pelcula externa no estriada. Los mionemas de cada

85

individuo no estn unidos entre s. El mionema se contrae en espiral. Se nutre de bacterias. Infrecuente en el
fango activo.
Estos ciliados se caracterizan por consumir una gran cantidad de oxgeno, por lo que su presencia est
ligada a una buena oxigenacin. Aparecen casi exclusivamente en las cubas de aireacin con media carga, as
como en CBR, rara vez en sistemas de fuerte carga y aireacin prolongada. Figura 63.
GNERO VORTICELLA.
VORTICELLA CAMPANULA. (c. fijo)
Es la especie ms grande de las que integra el gnero Vorticella. Longitud 50-160m, anchura 35100m. Pednculo 250-350m. Forma de campana con regin peristomal muy ancha. Cuerpo ligeramente
estriado transversalmente. Citoplasma con numerosos grnulos de reserva que son refractantes y oscuros.
Macroncleo en forma de "C". El pednculo es muy grueso y se contrae en espiral. Es muy similar a V.
convallaria, de la que fcilmente se distingue por su enorme tamao, el grosor del pednculo y la presencia de
grnulos de reserva.
Se nutre de bacterias. Es raro en el fango activo. Aparece en forma solitaria sin construir colonias.
Suelen indicar un empeoramiento en la calidad del flculo, mostrndose este ms disgregado y producindose
una ligera prdida del mismo en los decantadores. Figura 64.
VORTICELLA CONVALLARIA. (c. fijo)
Longitud 30-120m, lo ms habitual suele ser 80m anchura 35-70m. Longitud del pednculo 100500m. Se distingue de Vorticella campanula por poseer un cuerpo ms esbelto, el citoplasma ligeramente
amarillo y por no poseer grnulos refractantes. Peristoma ligeramente arqueado. Estras transversales fcilmente
observables. Vacuola alimentaria de contorno ovalado. Se alimenta de bacterias.
Es frecuente en el fango activo, se suele encontrar asociado a ASPIDISCA CICADA. Si se presenta
dominando al resto y en nmero alto, es ndice de un fenmeno transitorio debido a una fuerte extraccin de
fango de la balsa. En la situacin que ms abunda es con media carga. Puede constituir la fauna dominante de
un fango activo, sobre todo cuando el fango no est muy bien floculado, apareciendo muy disperso, por ello
puede haber una constante y ligera prdida de flculos en los decantadores. Figura 65.
VORTICELLA MICROSTOMA. (c. fijo)
Esta bacteria tiene forma de peonza. Longitud 35-83m, anchura 22-50m, longitud del pednculo hasta
400m. Peristoma estrecho 12-25m, cuerpo ligeramente estriado, macroncleo dispuesto longitudinalmente.
Presenta una vacuola contrctil cercana a la abertura oral y numerosas vacuolas digestivas de forma esfrica.
Se nutre de bacterias y flagelados. Es frecuente en el fango activo. Indicador de bajo rendimiento de
depuracin debido, casi siempre, a carencia de oxgeno. Frecuente en la fase de arranque o rearranque de la
planta. Al alimentarse tambin de algas unicelulares, suele ser frecuente en lagunas aireadas. Figura 66.

86

VORTICELLA STRIATA. (c. fijo)

Longitud 20-50m, anchura 15-40m, longitud del pednculo 20-300m. De forma similar a Vorticella
microstoma, pero diferenciada de sta por las estras del cuerpo mucho ms marcadas y por la posicin del
macroncleo transversal y rodeando a la citofaringe.
Se nutre de bacterias. Infrecuente en el fango activo. Su presencia se asocia a una buena oxigenacin del
fango. Figura 67.

Familia Vaginicolidae.
Presencia de membrana lriga que engloba a 1 2 individuos con sin pednculo, presenta un cuerpo
alargado en forma de trompa. La extremidad apical, donde se sita la apertura oral, sale de la lriga cuando el
animal est completamente extendido. Un solo Gnero aparece en el fango activo, GNERO VAGINICOLA..
VAGINICOLA CRISTALLINA. (c. fijo)
Longitud 100-200m, lriga incolora de forma cilndrica, redondeada en la base. Generalmente la lriga
hospeda dos individuos alargados que se nutren de bacterias y flagelados.
No es tpica de depuradoras. La presencia, infrecuente, de ste ciliado se asocia casi siempre a efluentes
poco concentrados diluidos. Aparecen en sistemas de aireacin prolongada con muy baja carga y tiempos de
retencin muy altos. Figura 68.

Familia Operculidae.
OPERCULARIA COARCTATA. (c. fijo)
Longitud 45-50m. Longitud del pednculo 50-100m. Forma alargada, macroncleo curvado y situado
en el centro del cuerpo. Pednculo de la colonia no estriado longitudinalmente, no segmentado, que se ramifica
de forma dicotmica al formar la colonia. Colonia muy numerosa, generalmente de 4-6 individuos. Se alimenta
de bacterias. Es normal en el fango activo.
La presencia de una cantidad importante de este ciliado, indica una imperfecta depuracin biolgica
acompaada de valores de oxgeno disuelto muy bajos. Esta situacin es caracterstica de condiciones
transitorias como el aumento repentino de carga orgnica. Un fango colonizado casi exclusivamente por esta
especie es ndice de un vertido txico (sales metlicas) procedente de alguna industria. Figura 69.
OPERCULARIA MNIMA. (c. fijo)
En esta especie el pednculo, que es lo empleado para distinguirlo de las dems especies, es corto
segmentado y estriado longitudinalmente.

87

OPERCULARIA MICRODISCUM. (c. fijo)

Longitud 76-90m. La colonia puede alcanzar 500m. Disco peristomal pequeo, cerca de 1/5 del
dimetro del cuerpo. Pelcula externa ligeramente estriada. Pednculo estriado longitudinalmente. Macroncleo
con forma de anillo que envuelve la citofaringe. Se alimenta de bacterias.
Frecuente en el fango activo. Especie muy resistente al dficit de oxgeno, se desarrolla, sobre todo, en
fangos muy concentrados, poco aireados con recirculacin lenta. Figura 70.

Familia Epistylididae.
EPISTYLIS PLICATILIS. (c. fijo)
Es la especie del GNERO EPISTYLIS, ms frecuente en el fango activo. Longitud 100m. Longitud de la
colonia hasta 3 mm. Forma alargada, disco peristomal ligeramente arqueado. La parte basal de un individuo
contrado, se presenta con un caracterstico pliegue. Macroncleo en posicin oblicua de forma tal que rodea la
citofaringe. Pednculo no estriado ni segmentado. Se alimenta de bacterias. Comn en el fango activo. Su
presencia es un hecho normal en un fango maduro.
La longitud de los pednculos varia en base a la concentracin de los fangos en la cuba, siendo largos en
concentraciones bajas y cortos cuando estn muy concentrados. Este microorganismo se encuentra
generalmente en condiciones de media carga y en depuradoras con aireacin prolongada. Presentan cierta
resistencia a vertidos puntuales con fuerte contaminacin, por lo que suelen ser indicativos de contaminacin
industrial. Su proliferacin en un momento dado, puede ser indicativo de alguna alteracin en el proceso,
variacin brusca de carga, vertidos puntuales.....
Figura 71.
En el fango activo es frecuente la presencia de EPISTYLIS URCEOLATA, de dimensiones variables
entre 120-190 y con el pednculo estriado longitudinalmente. Figura 72.
Otras especies observadas en el fango activo son: EPISTYLIS POLENICI (A) y EPISTYLIS
THIENEMANNI (B).

88

SUBCLASE PERITRICHIA
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Figura 61: Zoothamnium pygmaeun; Figura 62: Zoothamnium mucedo; Figura 63: Carchesium polypinum; Figura
64: Vorticella campanula; Figura 65: Vorticella convallaria; Figura 66: Vorticella microstoma; Figura 67: Vorticella
striata; Figura 68: Vaginicola cristallina; Figura 69: Opercularia coarctata; Figura 70: Opercularia microdiscum;
Figura 71: Epistylis plicatilis; Figura 72: Epistylis urceolata.

13

Dibujos tomados del "Atlas de los microorganismos de agua dulce"

89

CLASE POLYMENOPHORA.
SUBCLASE SPIROTRICHIA.
Los ciliados pertenecientes a esta subclase se caracterizan por un gran desarrollo de la ciliatura oral con
una zona alrededor de la membranela. Dos rdenes se observan en el fango activo.
14

Figura 73. Esquema de un ciliado de la Subclase Spirotrichia

Ausencia de cirros, ciliatura comn uniforme por toda la superficie del cuerpo. Orden Heterotrichida.

Presencia de cirros. Orden Hypotrichida.

ORDEN HETEROTRICHIDA.
-

Cuerpo muy alargado, cilndrico, ligeramente comprimido. Gnero Spirostomum.

Cuerpo contrctil, como una trompa. Gnero Stentor.

GNERO SPIROSTOMUM.
Ciliado alargado, de forma cilndrica, muy aplanado, de color amarillo oscuro. Peristoma rodeado por
una corta membranela. Vacuola contrctil terminal amplia. Dimensin variable de 150m a 2 mm, segn la
especie.
SPIROSTOMUM TERES. (c. libre)
Longitud de 150-400m. Peristoma transcurre por un tercio de la longitud del cuerpo. Macroncleo
ovalado, vacuola contrctil terminal. Se alimenta de bacterias, flagelados y algas. Cuando nada avanza
lentamente porque retrocede rodando a lo largo del propio eje longitudinal del cuerpo. Infrecuente en el fango
activo.
Especie de baja tolerancia al amonaco. Su presencia en el fango activo siempre es indicadora de un
influente poco concentrado. Figura 74.
14

Esquema tomado del libro editado por EGEVASA "Microbiologa de la depuracin mediante fangos activados".

90

GNERO STENTOR.
A este grupo pertenecen ciliados muy contrctiles, que poseen una forma subesfrica (contraccin) de
trompa (extensin). La membranela que rodea el peristoma forma un crculo casi cerrado. La vacuola contrctil
se sita junto al citostoma.
Tiene la capacidad de fijarse al suelo con la extremidad inferior del cuerpo, al cual excreta una masa
gelatinosa. El endoplasma asume coloracin diversa dependiendo de la especie. Sin capacidad de natacin, su
movimiento se reduce a contraerse y dilatarse y a hacer girar sus cilios peribucales.
STENTOR ROESELI. (c. fijo)
Longitud 0,5-1mm. Aspecto de trompa. Muy contrctil. Endoplasma de color gris. Superficie del cuerpo
esparcida por grupos de largos cilios. Macroncleo nastriforme. Regin posterior cubierta por una espesa
envoltura gelatinosa. Raro en el fango activo.
Su presencia se asocia a plantas que funcionan correctamente, pero que estn alimentadas por agua con
una carga muy dbil. Por su capacidad de fijarse al suelo deben ser incluidos entre los ciliados ssiles. Figura
75.
STENTOR S.P. (c. fijo)
Tamao 1-2mm. Poco abundante en los fangos activos de depuradoras. Se suelen encontrar en lagunas
de maduracin, fijado sobre plantas acuticas o sustratos relativamente estables y en CBR.

ORDEN HYPOTRICHIDA.
A este grupo pertenecen ciliados que tienen la ciliatura somtica sobre la zona ventral del cuerpo
formada por cirros. Estos cirros colocados en la superficie ventral se distribuyen de la siguiente forma: frontal
ventral, transversal, marginal y caudal.
La zona alrededor de la membranela es muy prominente en la regin oral. El cuerpo est aplanado dorsoventralmente y frecuentemente presenta una pelcula rgida. Tres familias se observan en el fango activo.
-

Cirros marginales ausentes del lado derecho. Generalmente ausentes reducidos a 1-3 cirros en el lado
izquierdo.
* Zona alrededor de la membranela reducida a dos pequeos y distintos grupos. Familia
Aspidiscidae.
* Zona alrededor de la membranela bien desarrollada y prominente. Familia Euplotidae.

Cirro marginal siempre presente, al menos con una fila de 20 ms en cada lado. Familia
Oxytrichidae.

91

Familia Oxytrichidae.
-

Cuerpo flexible: Gnero Tachysoma.

Cuerpo rgido: Gnero Stylonychia.

GNERO TACHYSOMA.
TACHYSOMA PELLIONELLA. (c. mvil de fondo)
Longitud 65-85m. Forma elipsoidal alargada. 8 cirros frontales, 5 ventrales, 5 transversales muy largos,
2 filas de cirros marginales en cada lado. Vacuola contrctil en la regin mediana del lado izquierdo. Dos
macroncleos.
Se alimenta de bacterias, flagelados y algas. Raro en el fango activo. La presencia de esta especie mvil
de fondo indica, en general, un influente poco concentrado. Figura 76.
GNERO STYLONYCHIA.
STYLONYCHIA PUTRINA(A). (c. mvil de fondo)
Longitud 125-145m. Cuerpo rgido, aplanado, alargado de forma ovalada. Lado derecho e izquierdo
ms menos similares. 8 cirros frontales, 5 ventrales, 5 transversales y 3 caudales bastante visibles. Dos
macroncleos.
Este ciliado mvil de fondo se alimenta de bacterias y flagelados. Raro en el fango activo. A veces, es
posible observar en el fango la presencia de STYLONYCHIA MYTYLUS, especie similar a sta. Figura 77.

Familia Euplotidae.
Un solo Gnero Euplotes se observa en el fango activo.
GNERO EUPLOTES.
EUPLOTES AFFINIS. (c. mvil de fondo)
Longitud 40-70m, forma elipsoidal, aplanado dorso-ventralmente. En la parte anterior se observa un
collar de cirros que se dirigen hacia el citostoma. Superficie ventral con 9 cirros fronto-ventrales, de los cuales 2
estn en el margen derecho. 5 cirros transversales y 4 caudales situados hacia el lado izquierdo.
Macroncleo en forma de cinta dispuesto en forma de "3". Estrechamente ligado al flculo del fango,
donde se alimenta de bacterias y flagelados. Frecuente en el fango activo, sobre todo durante la fase transitoria
de colonizacin. Con frecuencia aparece junto a Aspidisca cicada, indicando una buena eficacia de depuracin.
Especie mvil de fondo.
Puede ser confundido con EUPLOTES CRENOSUS, tambin frecuente en el fango activo. Figura 78.
92

EUPLOTES PATELLA. (c. mvil de fondo)

Longitud 80-145m. Forma discoidal ligeramente alargada, plano convexo, peristoma amplio de forma
triangular. Superficie ventrales con 9 cirros fronto-ventral, 5 cirros transversales y 4 caudales. Macroncleo en
forma de "C".
Se alimenta de bacterias, algas, ciliados y flagelados. Raro en el fango activo. Especie mvil de fondo
asociada a plantas con carga muy baja. Figura 79.

Familia Aspidiscidae.
Dos especies pertenecientes al Gnero Aspidisca viven comnmente en plantas depuradoras.
GNERO ASPIDISCA.
ASPIDISCA CICADA. (c. mvil de fondo)
Dimensiones 25-40m, de forma redondeada, provisto de una pelcula rgida, superficie dorsal convexa
y provista de 6 finas estrias similares a costillas, superficie ventral plana, portando 7 cirros fronto-ventrales y 5
transversales. La cavidad oral se abre en la parte posterior del margen izquierdo. Macroncleo en forma de cinta
doblada en "C". Vacuola contrctil cercana al margen derecho.
Esta especie, como todos los Hypotrichi que se describen, vive sobre el flculo del fango sobre el cual se
aposta en espera de alimento (bacterias dispersas), luego forma parte del grupo funcional de ciliados mviles de
fondo. Muy comn y abundante en el fango activo. Abunda en asociacin con Vorticella convallaria. La
presencia masiva de esta especie indica condiciones de estabilidad, asociado a una buena eficacia de depuracin
biolgica. Figura 80.
ASPIDISCA LYNCEUS. (c. mvil de fondo)
Longitud 30-50m. Caractersticas morfolgicas y comportamiento muy similar a Aspidisca cicada. Se
distingue de sta por poseer la superficie dorsal lisa y sin surcos. Se alimenta de bacterias. Infrecuente en el
fango activo. Figura 81.

93

CLASE POLYMENOPHORA
15

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79

Figura 74: Spirostomum teres; Figura 75: Stentor roeseli; Figura 76: Tachysoma pellionella; Figura 77:
Stylonychia putrina; Figura 78: Euplotes affinis; Figura 79:Euplotes patella; Figura 80: Aspidisca cicada; Figura
81: Aspidisca lynceus.

15

Dibujos tomados del "Atlas de los microorganismos de agua dulce"

94

BIBLIOGRAFA
CURDS, C. R. y HAWKES H. A. (1975). Ecological Aspects of Used-water Treatment. Ed. ACADEMIC
PRESS INC (Londres).
EGEVASA (1998). Microbiologa de la depuracin mediante fangos activos. Publicacin de La Empresa
General Valenciana del Agua, S.A. (EGEVASA), de la Exma. Diputacin de Valencia.
STREBLE, H. y KRAUTER, D. (1987). Atlas de los microorganismos de agua dulce. La vida en una gota
de agua. Ed.Omega, S.A. (Barcelona).
MADONI, P. (1988). I protozoi ciliati nel controllo di efficienza dei fanghi attivi.

95

METAZOOS

96

METAZOOS

CLASE NEMATODOS.
Los nematodos se encuentran ampliamente distribuidos tanto en ambientes acuticos como terrestres.
En general, los nematodos de forma libre son muy similares en cuanto a apariencia. Presentan un cuerpo
cilndrico que se estrecha en ambos extremos (cuerpo fusiforme), con una longitud media en la mayora de las
especies de 0,5-3 mm. La boca se encuentra rodeada por papilas y se contina en una faringe musculosa que
desemboca en el ano. Se alimentan de bacterias, materia orgnica y pequeos organismos. Son indicadores de
elevadas edades de fango.
De los 10 rdenes reconocidos por Goodey slo estn presentes en plantas de aguas residuales:
Rhabditida, Enoplida (Tobrilus, Tripyla, Monochus), Dorylaimida (Dorylaimus), Araeolaimida (Plectus) y
Monhysterida (Monhystera). Las especies de los cuatro ltimos rdenes mencionados slo se observan rara vez
en las aguas residuales y son principalmente invasores casuales de los biotopos vecinos. Varias especies del
orden Rhabditida son representantes habituales de las plantas de tratamiento de aguas residuales. Los
componentes del orden Rhabditida se caracterizan por la posesin de un bulbo farngeo terminal y la ausencia
de glndulas caudales.
16

Figura 82. Estructura general de un nematodo y los principales tipos presentes en las aguas residuales. (A) Rhabditinae; (B) Diplogasterinae.
Abreviaturas: st = estoma; mb = bulbo farngeo medial, tb = bulbo farngeo medial, i = intestino, t = testculo, ov = ovario, v = vulva, b =
bursa. Tipos de estoma: Diplogasterinae: 1 = Mononchoides, 2 = Paroigolaimella, 3 = Diplogasteritus. Rhabditinae: 4 = Rhabditoodes.
Araeolaimida: 5 = Plectus. Monhysterida: 6 = Monhystera. Enoplida: 7 = Tobrilus. Dorylaimida: 8 = Dorylaimus.

16

Ecological aspects of used-water treatament, de Curds y Hawkes, Academic Press,1975.

97

Dos subfamilias, Rhabditinae y Diplogasterinae (Figura 82), ambas pertenecientes a la familia

Rhabditidae, contienen los principales representantes. Las caractersticas distintivas de estas dos subfamilias
son: Rhabditinae se puede reconocer por un bulbo farngeo medial sin valvas, un bulbo terminal con valvas, un
estoma tubular y una estructura llamada bursa (la cutcula falta en la cola del macho). Los principales gneros
que pertenecen a esta subfamilia son Rhabditis, Pelodera, Rhabditoides, Caenorhabditis, Mesorhabditis y
Rhabditonema, todos ellos observados en aguas residuales.
En la familia Diplogasterinae la colocacin de las valvas farngeas es de manera opuesta a la de
Rhabditinae, pues en ella el bulbo medial presenta valvas pero no en el bulbo farngeo. El estoma es variable,
pero en muchos gneros son de gran tamao y provistos de dientes. La estructura del estoma es la mejor
caracterstica diferencial de los distintos gneros, tales como Mononchoides, Diplogasteritus, Paroigolaimella,
Demaniella, Fictor, Butlerius y Rhabditolaimus.

CLASE ROTATORIA (ROTFEROS)

Organismos de mayor tamao que los protozoos (50-500 m). Poseen un aparato digestivo complejo,
que se caracteriza por presentar un rgano triturador llamado mstax. En funcin a la alimentacin y al grupo de
rotferos, la morfologa del mstax puede variar, presentndose ste como un carcter importante para la
taxonoma.
17

Figura 83.(a) Lecane sp.; (b) Notommata sp.

(c) Philodina sp.; (d) Habrotrocha sp.

La alimentacin de las especies ms habituales en los sistemas de fangos activos se desarrolla o bien
mediante filtracin de bacterias dispersas o materia orgnica particulada (de la misma forma que los ciliados
peritricos ssiles), proceso que se ve fcilitado por la fijacin al sustrato con el pie, o bien la alimentacin se

17

Ecological aspects of used-water treatament, de Curds y Hawkes, Academic Press,1975.

98

lleva a cabo ingiriendo pequeas porciones de flculos, consumiendo igualmente bacterias y materia orgnica.
En general, son indicadores de elevadas edades de fango.
Segn Voigt (1957), la clase Rotifera puede subdividirse en tres rdenes, de los que Seisonidae est
constituido por organismos marinos. Los otros dos, Bdelloidea y Monogononta estn ampliamente
representados en los procesos de tratamiento de aguas residuales, aunque en diferentes proporciones.
Bdelloidea est formado por cuatro familias, tres de las cuales se han encontrado en procesos de fangos
activos.
Monogononta est formada por once familias de las cuales la mayora son planctnicas, aunque dentro
de este grupo pueden encontrarse formas fijas al sustrato, reptantes (que recuerdan a Bdelloidea) y formas
totalmente libres. Este grupo est representado en todo el proceso de depuracin. Bdelloidea (p. ej. Philodina)
tiene un pie bien desarrollado con 0-4 dedos (Figura 83). Aunque son capaces de nadar, propulsados por la
agitacin de la corona de cilios, su mtodo habitual de movimiento es como el de un organismo reptante. Son
capaces de soportar largos periodos de desecacin; algunos Bdelloideos producen un quiste de proteccin
cuando las condiciones ambientales son adversas. Algunos permanecen en estado de enquistamiento durante
largos periodos de 3-4 aos. Este grupo est particularmente bien adaptado para sobrevivir en lugares de
condiciones ambientales cambiantes.
18

Figura 84 (a) Brachionus calcyfolius, (b) Keratella cochlearis, (c) Asplanchna sp., (d) Filinia longiseta

Monogononta abarca gneros que presentan todas las posibilidades en cuanto al desarrollo del pie.
Puede estar completamente ausente (Keratella cochlearis, Asplanchna sp. Figura 77); reducido y empleado
principalmente para adherirse ms que para desplazarse (Brachionus sp.) o el pie es empleado principalmente

18

Ecological aspects of used-water treatment de Curds y Hawkes, Academic Press, 1975.

99

para desplazarse (Lecane sp., Notommata sp.; Figura 2). La familia predominante de Monogononta es
Brachionidae, particularmente el gnero Brachionus (especie de pie reducido), que presenta cinco de las siete
especies de esta familia. En el fango activo, donde hay mucho material en suspensin, la familia predominante
de Monogononta es Lecanidae. Aunque slo sea morfolgicamente, esta familia recuerda a Brachionidae, pues
el gnero ms importante en las plantas de tratamiento de aguas residuales, Lecane, hace gran uso del pie
durante la locomocin. Este rotfero es el reptante ms frecuentemente hallado sobre las superficies de piedras o
de algas filamentosas.

ANLIDOS.
Filum Annelida
Clase Oligochaeta
Orden Plesiopora
1.

Aelosomatidae.

Aelosoma hemprichi y Aelosoma variegatum

19

Figura 85 Aelosoma variegatum

Anlido de aspecto vermiforme, de cuerpo segmentado y provisto de haces de sedas (3-4) o quetas en
cada segmento en la zona dorsal. Como la mayora de los oligoquetos, son de los organismos ms grandes
presentes en el sistema de fangos activos, con un tamao de 1,5-4 mm. Es caracterstico en este microorganismo
la presencia de abundantes vacuolas de color rojizo o amarillento que contienen sustancias oleosas. Es habitual,
tal que el resto de los oligoquetos, en procesos con elevadas edades de fango y durante etapas de nitrificacin.
Se alimentan de detritus, bacterias y algas.

19

Esquema tomado del libro editado por EGEVASA "Microbiologa de la depuracin mediante fangos activados".

100

2.

Enchytraeidae.

Enchytraeus albidus
Enchytraeus buchholzi
Enchytraeus coronatus
Enchytraeus minutus
Lumbricillus rivalis
Lumbricillus lineatus
Fredericia sp.
Buchholzia appendiculata
3.

Naididae.

Nais simplex
Pristina foreli
Chaetogaster langi
Pristina idrensis
Nais elinguis
Nais variabilis
4.

Tubificidae

Tubifex tubifex
Limnodrilus udekemiamus
5.

Lumbriculidae

Lumbriculus variegatus
Orden Opisthopora
6.

Lumbricidae

Eisenia foetida representa la sub-familia Eiseninae. Cuatro especies de Lumbricidae

son:
Dendrobaena rubida
Eiseniella tetraedra
Lumbricus castaneus
Lumbricus rubellus
Clase Hirudinea
Orden Gnathobdellidae
7.

Hirudidae

Haemopsis sanguisuga
Orden Pharyngobdellidae
8.

Erpobdellidae

Trocheta subviridis

101

CLASE GASTROTRICHA (GASTROTRICOS)

Organismos pluricelulares de tamao comprendido entre 70-500m, de aspecto ms prximo al de los
ciliados que a los dems metazoos habituales en un sistema de fangos activos. De cuerpo flexible, se diferencian
de los ciliados por poseer un extremo posterior terminado en dos apndices o prolongaciones (furca).
Como los dems metazoos, indican edades de fango elevadas.
20

Figura 86: Chaetonus laroides las espinas que recubren el cuerpo carecen de puntas secundarias. Sobre el tercio
medio y posterior del cuerpo se disponen grandes espinas en 7 hileras longitudinales. Las espinas de la cabeza y
del cuello son 4 veces ms cortas; las espinas de la base cara dorsal llegan hasta la base de los dedos. 186-200
m.

20

Ecological aspects of used-water treatment de Curds y Hawkes, Academic Press, 1975.

102

BIBLIOGRAFA
CURDS, C. R. y HAWKES H. A. (1975). Ecological Aspects of Used-water Treatment. Ed. ACADEMIC
PRESS INC. (Londres).
EGEVASA (1998). Microbiologa de la depuracin mediante fangos activos. Publicacin de La Empresa
General Valenciana del Agua, S.A. (EGEVASA), de la Exma. Diputacin de Valencia.
STREBLE, H. y KRAUTER, D.(1987). Atlas de los microorganismos de agua dulce. La vida en una gota
de agua. Ed.Omega, S.A. (Barcelona).

103

CAPTULO 5.- MANUAL DE TRABAJO.

TCNICA ANALTICA
Generalidades
El informe biolgico establecido consta de 4 "hojas de trabajo" o "fichas de recogida y anlisis de datos
microbiolgicos", en las que por una parte se establece una evaluacin de la calidad del fango como ndice de
fango (IF) (1"Evaluacin macroscpica y microscpica del fango activado"), y por otra, se realiza una
valoracin de la biota, tanto en el mbito de bacterias filamentosas (2"Evaluacin de las bacterias filamentosas")
como de protozoos (3"Evaluacin de la microfauna"). De la integracin de estas tres hojas de trabajo se obtiene
la ltima, en la que se concluye sobre la calidad previsible del agua de salida, as como la estabilidad biolgica
del sistema (4"Evaluacin final del fango activado").
Se sobreentiende que se poseen unos conocimientos mnimos sobre el manejo del microscopio
(Captulo 2) y de muestras de fango activado. Igualmente, se requiere de un adiestramiento suficiente como para
reconocer los diferentes grupos funcionales de protozoos (Captulo 4).
Campo de aplicacin
Este sistema est diseado para poder obtener, de una forma lo ms metdica posible, una informacin
complementaria a los anlisis fsico-qumicos, que permita mejorar la toma de decisiones respecto a los
parmetros operacionales de una E.D.A.R. convencional y conocer las causas de las alteraciones del proceso que
se puedan producir.
Fundamento
El anlisis se realiza sobre muestras in vivo del fango activado de una E.D.A.R. a la que se le pueden
realizar tres tipos de anlisis: sobre muestra viva, sobre muestra viva con colorante o sobre muestra fijada y
teida.
Procedimiento operativo de tratamiento y conservacin de las muestras
Preparacin del microscopio.
1.- Realizar ajuste Khler.
2.- Ajuste de anillos para contraste de fases.
3.- Limpieza de objetivos y portaobjetos con solucin ter/etanol 3:1.
4.- Utilizar filtro azul para observar tinciones o resaltar contornos en organismos vivos.
104

5.- Utilizar filtro verde para contraste de fases y resaltar tinciones Gram y Neisser difciles de determinar.
Toma de muestras.
1.- Utilizar botes de plstico limpios de 2.000 mL.
2.- Toma de muestras a profundidad determinada y fija.
3.- Punto de muestreo fijo y en zona de mxima homogeneidad del fango.
4.- Dejar siempre el bote de muestreo de su contenido vaco.
5.- Fijar inmediatamente una submuestra con Lquido de Bowin (5 mL Bowin por cada 100 mL de muestra).
6.- Conservar la muestra en nevera a 4 C cuando se vaya a observar despus de 24 horas y hasta un mximo de
48 horas.
Tratamiento de las muestras.
1.- Muestras in vivo.
* Para observacin de la muestra sin alterar, aadir directamente una gota (25-50 L) sobre un portaobjetos
y colocar encima un cubreobjetos.
* Para inmovilizar organismos y observar estructuras visibles sin necesidad de tincin, colocar la gota sobre
el portaobjetos, poner un cubreobjetos y prensar suavemente.
2.- Muestras fijadas.
* Estudio cuantitativo de organismos.
* Observacin de las estructuras de los organismos tal y como estaban en el momento de tomar la muestra.
3.- Muestras teidas.
* Para resaltar estructuras especficas que no se observan fcilmente en la muestra in vivo.
Procedimiento operativo.
1.- Agitar con suavidad la muestra para homogeneizar cuando se quieran observar las caractersticas del flculo
o cuando se quiera realizar un anlisis cuantitativo.
2.- Dejar decantar y tomar la muestra de la porcin sedimentada cuando se quiera estudiar diversidad de
organismos.

105

3.- Tomar entre 25 y 50 L con una micropipeta con punta de boca ancha, depositarlos en un portaobjetos
(previamente desengrasado) y colocar encima un cubreobjetos. Para recuentos, cambiar la punta de la
micropipeta entre rplicas, se trata de una fuente de error muy habitual.
4.- Proceder al anlisis microscpico de la preparacin utilizando los distintos objetivos. El de 100x u objetivo
de inmersin emplea aceite y se utiliza para observar estructuras en detalle.
5.- Observar al menos de 2-3 preparaciones de la muestra.
6.- Se recomienda como complemento el anlisis de los MLSS, V30 e IVF.
Interferencias
La muestra debe ser lo ms reciente posible y se debe realizar su anlisis cuanto antes. En caso de
retraso es necesario mantenerla refrigerada a 4 C.
Si el anlisis es de protozoos, no debe retardarse ms de 24 horas. Si por el contrario es de bacterias
filamentosas, este margen puede ampliarse, hablando la bibliografa de un margen de hasta 6 das.
Es preferible siempre realizar el anlisis cuanto antes, a fin de evitar variaciones en la composicin
bitica del fango y cambios en la estructura del flculo.
Procedimiento operativo para cada hoja de trabajo
1.- Evaluacin de la calidad de un fango biolgico: Niveles macroscpicos y microscpicos.
En esta hoja se han definido una serie de parmetros considerados de inters para establecer las
caractersticas ms generales de un fango, los cuales permiten obtener un estudio simplificado de la muestra,
que genera en funcin de las caractersticas macro y microscpicas de sta, un valor denominado ndice de
fango (IF).
El IF est directamente relacionado con los porcentajes de reduccin de SS, DQO y DBO de la
E.D.A.R., proporcionando la posibilidad de obtener un histrico de valores de calidad biolgica de forma rpida,
comparable y de protocolo sencillo, a partir de la puntuacin de una serie de caractersticas del fango
macroscpicas (observables a travs de la V30) y microscpicas (observables a travs de un objetivo de 10x). El
valor final, comprendido entre 0-100, define la calidad del fango.
A nivel macroscpico (sobre la V30):
-

Turbidez

Flculos en suspensin en el clarificado

Sedimentabilidad del fango

106

Olor
A nivel microscpico:

Forma del flculo

Tamao del flculo

Estructura y textura del flculo

Cobertura de la masa de fango sobre la circunferencia de un objetivo de 10x

Presencia de filamentos en el flculo y en disolucin

Diversidad de protozoos

Todas estas observaciones se han de realizar con un objetivo de 10x y, al menos, sobre 2 preparaciones
distintas de la muestra, que ser homogenizada previamente con suavidad. Con ayuda de una pipeta Pasteur, se
toma un pequeo volumen de la suspensin biolgica, se deposita sobre un portaobjetos y se coloca encima un
cubreobjetos. La informacin que se deduce de las observaciones microscpicas, junto con la obtenida durante
el ensayo de decantacin en probeta o V30, permiten otorgar un valor final de puntuacin que permitir evaluar
la calidad del fango, al encontrarse dicha puntuacin divida en distintas categoras.
Tabla 1: Categoras de ndice de Fango

NDICE DE FANGOS
0-20 psimo
20-40 malo
40-60 regular
60-80 bueno
80-100 ptimo

2.- Evaluacin del desarrollo de bacterias filamentosas en un fango activo.

La identificacin bacteriana se realizar fundamentalmente sobre el filamento dominante y el
secundario segn la clasificacin que se detalla en el Captulo 4, dnde quedan recogidas las bacterias en
funcin de su caracterstica ms significativa:

bacterias mviles

bacterias creadoras de turbidez

bacterias con tricoma superior a 1 m

107

bacterias con tricoma inferior a 1 m

bacterias de aspecto ramificado

bacterias que presentan azufre normalmente

La proliferacin total de filamentos se valorar como en el manual Microorganismos filamentosos en

el fango activo (Tabla 2), en funcin de la abundancia relativa, principalmente, de los filamentos dominante y
secundario, aunque dejando constancia de la presencia de otras filamentosas que, por su abundancia, se
consideren de inters.

Tabla 2: Cuantificacin de microorganismos filamentosos (EMASESA, 1997).

VALORACIN DE FILAMENTOS EN FUNCIN DE LA ABUNDANCIA RELATIVA

VALOR

ABUNDANCIA

SIGNIFICADO

NUMRICO
0

Ninguno

Pocos

Hay filamentos pero se observan slo en algunos flculos

Alguno

Se ven filamentos en los flculos, pero no en todos ellos

Comunes

Se observan filamentos en todos los flculos pero en pequea

cantidad (1-5 filamentos por flculo)

Muy comunes

Se observan filamentos en todos los flculos, pero con una

densidad media (5-20 por flculo)

Abundantes

Hay filamentos en todos los flculos y con densidad alta

(>20/flculo)

Excesivos

Filamentos presentes en todos los flculos; hay ms

filamentos que flculos.

Paralelamente, se pueden realizar dos aproximaciones ms exactas de la cantidad de filamentos: una

valoracin semicuantitativa en la que se contabiliza el nmero de filamentos observados que interceptan la
circunferencia del objetivo de 40x, para la cual la muestra debe estar teida con cualquier tincin in vivo; o una
valoracin cuantitativa de los m/mL de filamentos segn el recuento de los cortes en la diagonal de la cmara
Neubauer improved a 20x, para la que la muestra debe estar in vivo. La metodologa de este ltimo
procedimiento, que viene expuesta con ms detalle en Arniz et al. (1999), requiere de la realizacin de cuatro
rplicas de la muestra, en la que se cuentan los cortes de los filamentos sobre la cuadrcula definida en los 16
cuadrados de la diagonal de la cmara, valor que hay que multiplicar por el factor 37,12. La media del nmero
de cortes por el factor valora los m/mL de filamentos. Esta tcnica no es adecuada para Nocardia sp.
108

Ambos sistemas no son comparativos, siendo ms exacto el recuento sobre la cmara Neubauer
improved. En cualquier caso, estos sistemas pueden servir de referencia si se practican de forma metdica en la
E.D.A.R., al detectar la proliferacin de bacterias filamentosas y las oscilaciones en la frecuencia de stas.
3.- Evaluacin de la microfauna presente en fangos activos. Valoracin cuantitativa. ndice bitico de
Madoni e ndice de Biodiversidad de Shannon-Weaver.
En esta hoja de trabajo se pretende valorar la diversidad de la microfauna presente mediante la
aplicacin del ndice de Madoni (Madoni, 1994) e ndice de Biodiversidad de Shanon (Margalef, 1981), as
como identificar y cuantificar los organismos presentes (protozoos y metazoos).
De estos organismos, se han clasificado y tabulado los ms comunes en aparicin para simplificar el
trabajo. La observacin se har a 10x/40x aumentos sobre volmenes de 25 L y dos rplicas.
La metodologa a seguir es la establecida por Madoni para el clculo del ndice Bitico (Madoni,
1994), complementado con el reparto porcentual de los organismos y el ndice de Biodiversidad de ShannonWeaver (H).
H = - (Pi (log2 Pi))
dnde,
Pi = n organismos SPA/ n total organismos
SPA = especie A

4.- Evaluacin total del fango activo: Conclusiones.

En esta ltima hoja de trabajo se recogen las conclusiones parciales de cada una de las hojas anteriores,
de forma que puede obtenerse una visin clara de la calidad del fango y de la calidad previsible del agua de
salida, as como de los parmetros de los cuales son bioindicadores los organismos presentes.

DESARROLLO INVESTIGADOR DEL IF

Para la elaboracin de este ndice, paso previo lo constituy la seleccin de aquellos parmetros que
definieran y valoraran las caractersticas generales del fango. A continuacin, se estableci un periodo de
contraste de resultados de algo ms de un ao que permiti someter a estudio el ndice elaborado. Igualmente,
esta etapa del estudio posibilit la unificacin de criterios para los componentes del grupo, requisito
indispensable para la obtencin de resultados comparables.
Los parmetros seleccionados para constituir el IF, denominados caractersticas macro y
microscpicas, se encuentran recogidos en la Tabla 3 junto con las distintas variantes, con las que dichas
caractersticas quedaron definidas. Como caractersticas macroscpicas se entienden aquellas observables a
simple vista, extradas del aspecto del fango activado y del clarificado de la V30. Como caractersticas
109

microscpicas se definen aquellas otras observables a travs del microscopio bajo un objetivo de 10X. Respecto
a estas ltimas, aclarar que las observaciones deben realizarse al menos por duplicado y con la muestra viva (sin
teir). Las identificaciones bacterianas se han realizado en base al manual Microorganismos filamentosos en el
fango activo (EMASESA, 1997) y apoyadas en distintos artculos que tratan el tema (Eikelboom, 1975; Surez,
1993; Laboratorio Central del Dep. de Saneamiento del Ayto. de Madrid, 1996; Moro, 1998).
Tabla 3: Valoracin del IF.

CARACTERSTICAS MACROSCPICAS
Turbidez

Alta

Media

4,5

Baja
Flculos en suspensin

Alta

Media

4,5

Baja
Sedimentabilidad

9
9

Alta

4,5

Media
Olor

Forma

Baja

Agradable

Desagradable

CARACTERSTICAS MICROSCPICAS
Regular
Irregular

Tamao

Grande
Medio
Pequeo

4
0
4
7
0

Estructura

Compacta
Media
Abierta

18
9
0

Textura

Fuerte
Dbil

4
0

Cobertura

< 10%
10-50%
>50%

0
7
3,5

Filamentos en flculos

>20
5-20
<5

0
7
14

Filamentos en disolucin

Alta
Baja

0
3

Diversidad de Protozoos

<7 especies
4-7 especies
<4 especies

13
7
0

NDICE DE FANGO

TOTAL

Como se observa en la Tabla 3, las caractersticas macroscpicas presentan como valor mximo de
puntuacin 30 unidades sobre el valor del IF. Las caractersticas microscpicas, en cambio, presentan un
mximo de puntuacin de 70, puntos al considerarse que eran stas las que definan con mayor exactitud el IF.
La suma de puntuaciones para ambos grupos de caractersticas se traduce en un valor final de ndice de fango,
del que se definen cinco categoras, cada una de las cuales alude a una calidad distinta del fango (Tabla 1).
110

Las caractersticas macroscpicas y microscpicas se detallan a continuacin:

Caractersticas macroscpicas:
Turbidez: caracterstica macroscpica del fango activado que valora la turbidez del clarificado de la V30
como:

Alta: aproximadamente mas de 40 NTU.

Media: aproximadamente entre 40-15 NTU.

Baja: aproximadamente menos de 15 NTU.

Flculos en suspensin: caracterstica macroscpica observable en el clarificado de la V30 que valora la

concentracin de microflculos en suspensin como:

Alta: abundancia de microflculos.

Media: presencia de microflculos.

Baja: prcticamente ausencia de microflculos.

Sedimentabilidad: caracterstica macroscpica observable en la manta de fango decantada en la V30 que

valora la velocidad de sedimentacin como:

Alta: la mayor parte del fango decanta en los 10 primeros minutos del ensayo y el fango esta muy
compactado.

Media: la mayor parte del fango decanta entre 10-20 minutos y se observa un ligero
esponjamiento.

Baja: la mayor parte del fango decanta despus de 20 minutos y se observa un claro
esponjamiento.

Olor: caracterstica macroscpica del fango activado que se define como agradable o desagradable,
indicando este ltimo, situaciones como septicidad, presencia de vertidos, etc.
Caractersticas microscpicas:
Forma: caracterstica que define la morfologa externa del flculo como regular si aparece de forma
redondeada e irregular si difiere de esta configuracin.
Tamao: caracterstica que determina el tamao medio del flculo, medido entre las distancias mas alejadas
de ste (Departamento de Agua y Saneamiento del Ayuntamiento de Madrid, 1997). Se definen tres
tamaos:
111

Pequeo: tamao menor de 150 m.

Medio: tamao entre 150 y 500 m.

Grande: tamao mayor de 500 m.

Estructura: caracterstica que define la constitucin interna del flculo (Departamento de Agua y
Saneamiento del Ayuntamiento de Madrid, 1997), establecindose tres tipos:

Compacto: no existen prcticamente huecos en la estructura interna del flculo.

Medio: se detectan algunos huecos.

Abierta: existen bastantes huecos dentro del flculo que rompen la unidad interna.

Textura: caracterstica que alude al grado de cohesin entre las partculas que forman el flculo,
establecindose las categoras fuerte y dbil en funcin de la ausencia o presencia de disgregacin de
los flculos, respectivamente, tras puncin sobre el cubreobjetos (Departamento de Aguas y Saneamiento
del Ayuntamiento de Madrid, 1997).
Cobertura: caracterstica que valora si la unin de todos los flculos presentes en el ocular de 10x cubren
menos del 10 % de su superficie, del 10-50 % o ms del 50 %.
Filamentos en el flculo: caracterstica que cuantifica el nmero de filamentos observables a 10x que
sobresalen de la superficie del flculo. Se definen tres categoras:

Menos de 5 filamentos por flculo.

Entre 5-20 filamentos por flculo.

Ms de 20 filamentos por flculo.

Filamentos en disolucin: caracterstica que cuantifica la existencia de filamentos libres entre los espacios
interfloculares del licor mezcla. Si son observables ser baja mientras que si se observan normalmente
ser alta.
Diversidad de protozoos: caracterstica que cuantifica el nmero de especies distintas que son detectables a
10x. Se definen tres rangos:

Menos de 4 especies.

De 4-7 especies.

Ms de 7 especies.

112

Tras el perodo de contraste y una vez establecidos los criterios generales de valoracin, se pas a un
periodo de recopilacin de datos fsico-qumicos en distintas depuradoras, en las que el IF se implantara de
forma sistemtica. El objetivo de esta fase del trabajo lo constitua el estudio del IF, en funcin de las
caractersticas del influente y las calidades del efluente. El rea de estudio se localiz en cuatro E.D.A.R.s de la
ciudad de Sevilla, que trabajan a media y alta carga y estn dotadas de fangos activos en el tratamiento
biolgico. En cada una de ellas, adems de la aplicacin del IF en el anlisis de las caractersticas del fango, se
recopilaron los datos referentes a SS, DQO, DBO5, N y P tanto del agua de entrada a la depuradora, como a la
salida. Los anlisis de estos ltimos se realizaron segn los Mtodos Normalizados (APHA, AWWA, WPCF,
1992).
Del periodo de estudio en planta se obtuvieron 109 datos, los cuales aparecen reflejados en la Tabla 5,
y a los que se realiz un anlisis estadstico de correlaciones. En tal estudio se pretenda buscar una posible
relacin entre el valor del IF y los parmetros que definen la calidad del efluente (SS, DQO, DBO5, N y P).

Tabla 4: Relacin de datos obtenidos en el estudio de cada uno de los participantes.

TOTAL DATOS
Participante 1

10

Participante 2

38

Participante 3

13

Participante 4

19

Participante 5

29

El anlisis de los datos demostr la imposibilidad de obtener una relacin directa entre el ndice de
fango y los SS, DQO, DBO5, N y P del agua de salida. En cambio, cuando los datos fueron agrupados segn la
categora de ndice, se pudo encontrar, tal y como se muestra en las figuras 1-4, una relacin directa entre los
porcentajes de reduccin de SS y DQO respecto al IF, si bien esta relacin se hace ms palpable para el caso de
los slidos en suspensin (Figura 1) que para la DQO (Figura 2). Es necesario aclarar que no han aparecido
valores de IF psimo, con lo que no se ha podido corroborar esta relacin de proporcionalidad entre el IF y el
porcentaje de reduccin de SS y DQO en todo el rango de valores del IF.
Tal y como se observa en la Figura 3, la relacin establecida entre la DBO5 y el ndice de fango parece
no estar tan clara, al no detectarse diferencia significativa entre los porcentajes de reduccin, una vez que los
ndices de fangos sobrepasan el intervalo de puntuacin de 0-20 (calidad psima). No se ha podido encontrar
explicacin a esta falta de proporcionalidad entre la calidad del fango estimada mediante el IF y el porcentaje de
reduccin de DBO5. Sin embargo, la extrema variabilidad y escasa reproducibilidad de esta determinacin
(APHA, AWWA, WPCF, 1992), junto con la inferioridad de datos aportados respecto a los SS y DQO, hacen
que este resultado haya de tomarse con precaucin. Reflexiones similares se pueden hacer con respecto a los
113

datos de reduccin de Nitrgeno y Fsforo, en los que los resultados obtenidos estn adscritos a tres categoras
de fango (malo, regular y bueno) y los mtodos analticos variaron de un laboratorio a otro tanto para el
Nitrgeno (Nessler y Destilacin sobre brico) como para el Fsforo (Molibdovanadato y Ascrbico). Por lo
tanto, si bien la tendencia es a una mejora gradual de los porcentajes de reduccin de ambos nutrientes frente al
aumento de puntuacin del ndice, las diferencias ms claras se encuentran entre la categora malo y el resto
(Figura 4). Estos resultados, por tanto, habran de ser tomados con reservas, ya que parece conveniente ampliar
el banco de datos antes de determinar la tendencia ms clara posible.

% Reduccin SS

95
90
85
80
75
70
20-40

40-60

60-80

80-100

Rango de IF

Figura 1: Relacin entre el rango de IF y el porcentaje de reduccin de SS (n= 109).

% Reduccin DQO

100

90

80

70
20-40

40-60

60-80

80-10

Rango de IF

Figura 2: Relacin entre el rango de IF y el porcentaje de reduccin de DQO (n = 109).

% Reduccin DBO

100

90

80

70

20-40

40-60

60-80

80-100

Rango de IF

Figura 3: Relacin entre el rango de IF y el porcentaje de reduccin de DBO (n = 67).

114

% Reduccin N y P

45
40
35
30
25
20
15
10
5
0

P
N

20-40

40-60

60-80

Rango de IF
Figura 4: Relacin entre el rango de IF y el porcentaje de reduccin de nitrgeno y fsforo (n = 67).

Durante el estudio fue curioso observar como cada planta presentaba un valor medio de IF
caracterstico de ella y distinto al de las dems, segn el cual, un distanciamiento de dicho valor se traduca en
anomalas en el funcionamiento normal de la planta, entendidas stas como empeoramientos en los rendimientos
de depuracin. Como parte de este comportamiento particular de cada una de las plantas, se encuentran las
distintas respuestas de las caractersticas macro y microscpicas ante aumentos o disminuciones en los valores
de los contaminantes en el agua de llegada; comportamientos que en algunas ocasiones han resultado
contrapuestos.
El parmetro IF parece ser un buen sistema de control rpido para obtener un ndice biolgico y una
aproximacin a los rendimientos de depuracin en las E.D.A.R.s. En general, podemos hablar de la definicin
de ndice de Fango (IF) como un parmetro indicador de la eficacia de la reduccin de la DQO y los SS en las
E.D.A.R.s, tomndose con reserva las relaciones que mantiene con la DBO5, nitrgeno y fsforo. Una
observacin general del fango activado, que puede durar unos veinte minutos, nos proporcionar idea del estado
de ste y de la respuesta esperable de la E.D.A.R.

115

DESCRIPCIN DEL NDICE MADONI (Madoni, 1994).

Desarrollo
Visu preliminar: 50 L o 1 gota de pipeta Pasteur de la muestra, para valoracin cualitativa de las especies
presentes
Recuento de pequeos flagelados: 25 L (2 rplicas) a 200X con la cmara de Fuchs-Rosenthal en la diagonal
completa (16 cuadrados)
Recuento de organismos: 25 L (2 rplicas) a 100x

Datos a tener en cuenta

Es recomendable utilizar cubres de 18 x 18 mm para evitar la desecacin de la muestra
Organismos a considerar en el recuento: grandes flagelados, tecamebas y metazoos
Organismos no considerados: Amebas desnudas, algas, crustceos...
En los ciliados coloniales se contabiliza cada organismo
Los organismos detectados en el visu, pero no en el recuento, tienen una abundancia de uno
No es necesario identificar a nivel de especie en flagelados, rotferos y nematodos
No afectan al porcentaje de grupos funcionales los ciliados carnvoros y suctores

Resultados
Grupo dominante
Densidad de la microfauna en nmero de individuos/mL
Nmero de especies detectadas
Recuento de pequeos flagelados
ndice bitico de fango: SBI
Clase de Madoni correspondiente al valor de SBI

116

BIBLIOGRAFA
APHA, AWWA, WPCF. (1992). Mtodos normalizados para el anlisis de aguas potables y
residuales. Ed. Daz de Santos, Madrid.
Arniz, C., Jimnez, C. y Estvez, F. (1999). Determinacin rpida de microorganismos
filamentosos en fangos activos. Tecnologa del Agua 193, 102-107.
Departamento de Aguas y Saneamiento del Ayuntamiento de Madrid (1997). Manual de
laboratorio para el anlisis de aguas residuales y lodos de depuracin. Publicacin del Exmo.
Ayuntamiento de Madrid.
EMASESA, Departamento de Aguas residuales (1997). Microorganismos filamentosos en el fango
activo.
Eikelboom, D. H. (1975). Filamentous organisms observed in activated sludge. Wat. Res. 9, 365388 .
Laboratorio Central del Departamento de Saneamiento del Ayuntamiento de Madrid (1996).
Observacin microscpica del fango activo: caracterizacin del flculo e identificacin de
microorganismos filamentosos. Jornadas Prcticas del 20-24 de mayo de 1.996.
Madoni, P. (1994). A sludge biotic index (SBI) for the evaluation of the biological performance of
activated sludge plants based on the microfauna analysis. Wat. Res. 28, 1, 67-75.
Margalef, R. (1981). Ecologa. Ed. Omega, Barcelona.
Moro, P. (1998). Aparicin de organismos filamentosos en fangos activos. Ingeniera Qumica,
Junio, 97-106.
Surez, J., Llorente, V. y Mogolln, T. (1993). Microorganismos filamentosos en las E.D.A.R.s.
Ingeniera Qumica, Enero, 146-151.

117

FICHAS DE RECOGIDA Y ANLISIS DE DATOS

MICROBIOLGICOS:

1.- Evaluacin macroscpica y microscpica del fango activado.

2.- Evaluacin de las bacterias filamentosas.
3.- Evaluacin de la microfauna.
4.- Evaluacin final del fango activado.

118

GRUPO BIOINDICACION SEVILLA

EVALUACIN DEL FANGO

fecha:

Cdigo de muestra:

CARACTERSTICAS MACROSCPICAS
RELLENAR CON VALORACIN
TURBIDEZ

FLC EN SUSPENSIN

SEDIMENTABILIDAD

OLOR

ALTA
MEDIA
BAJA
ALTA
MEDIA
BAJA
ALTA: V30=0,6*V5
MEDIA : 0,6V5<V30<0,75V5
BAJA: V30> 0,75*V5
AGRADABLE
DESAGRADABLE

0
4,5
9
0
4,5
9
9
4,5
0
3
0

MACRO:

CARACTERSTICAS MICROSCPICAS
RELLENAR CON VALORACIN
FORMA
TAMAO

ESTRUCTURA

TEXTURA (por puncin)

COBERTURA

FIL EN FLCULO

FIL EN DISOLUCIN
DIV PROTOZOOS

0-20: PSIMO

REGULAR
IRREGULAR
GRANDE
MEDIO
PEQUEO
COMPACTA
MEDIA
ABIERTA
FUERTE
DBIL
<10 %
10-50 %
>50 %
>20 fil/floc
5<*<20 fil/floc
<5 fil/floc
ALTA
BAJA
>7 SP
4-7 SP
<4 SP

20-40: MALO

4
0
4
7
0
18
9
0
4
0
0
7
3,5
0
7
14
0
3
13
7
0

40-60: REG

MICRO:

IF:

60-80: BUENO

80-100: PTIMO

* SE REALIZARN AL MENOS 2 VISUS

* OBSERVACIN POR 100 X
* MACROSCOPA SOBRE V30
* SOLO SE RELLENAN LAS CASILLAS AMARILLAS

OBSERVACIONES:

BACTERIAS HELICOIDALES
FIBRAS ORGNICAS
ZOOGLOEA sp.
PARTCULAS INORGNICAS
BURBUJAS
COLOR
HINCHAZN
ESPUMAS

119

GRUPO BIOINDICACION SEVILLA

EVALUACIN DE LA MICROFAUNA

fecha:

Cdigo de muestra:

IDENTIFICACION SEGN MANUAL DE EMASESA

CATEGORIA NUMRICA
FILAMENTO DOMINANTE
FILAMENTO SECUNDARIO
OTROS FIL DE INTERS
EFECTO SOBRE EL FLCULO

RECUENTOS RELACION DE FILAMENTOSAS

N CORTES N CORTES/N CAMPOS OBSERVADOS
1 DIAGONAL

* EL N DE FILAMENTOS OBSERVADOS QUE

INTERCEPTAN CON LA CIRCUNFERENCIA DEL
OCULAR DE 40 X
* MUESTRA TEIDA CON CUALQUIER TINCIN
* 1 DIAGONAL SON 16 CAMPOS

2 DIAGONAL

0
RELACIN DE FILAMENTOS (IRF):

#DIV/0!

TCNICA DE RECUENTO EN DIAGONAL CMARA Neubauer improved:

RPLICAS
1
2
3
4

RECUENTO m / mL DE FILAMENTOS
0
0
0
0
m / mL de FILAMENTOSAS

* RECUENTOS A 20 X
* MUESTRA IN VIVO

RECUENTOS DE FILAMENTOS EN FUNCIN DE LA ABUNDANCIA RELATIVA

VALOR NUM
0
1
2
3
4
5
6

ABUNDANCIA
NINGUNO
POCOS
ALGUNOS
COMUNES
MUY COMUNES
ABUNDANTES
EXCESIVOS

SIGNIFICADO
HAY FILAMENTOS PERO SE OBSERVAN SOLO EN ALGUNOS FLCULOS
SE VEN FILAMENTOS EN LOS FLCULOS PERO NO EN TODOS ELLOS
FILAMENTOS EN TODOS LOS FLCULOS, DE 1-5 FIL / FLCULO
FILAMENTOS EN TODOS LOS FLCULOS, DE 5-20 FIL / FLCULO
FILAMENTOS EN TODOS LOS FLCULOS A DENSIDAD ALTA
FILAMENTOS EN ENORME CRECIMIENTO

OBSERVACIONES:

120

GRUPO BIOINDICACION SEVILLA

EVALUACIN DE LA MICROFAUNA

Flagelados
Amebas

GRUPO
pequeos *
grandes
con teca
sin teca
Carnvoro
nadador

Carnvoro suctor
C
I
L

Bacterifago
nadador

I
A
D

Bacterifago
reptante

O
S
Bacterifago
ssil

Metazoo

SPP

fecha:

OBS.

1cont

2cont

Cdigo de muestra:
ind/mL

ind/L

% ind/L

% GRUPO FUNC.

Litonotus
Amphileptus
Hemiophrys
otros
Acineta
Podophrya
Tokophrya
otros
Colpoda
Uronema
Tetrahynema
Paramecium
Colpidium
Glaucoma
otros
Aspidisca
Acineria
Euplotes
Oxitrichia
Stentor
otros
Carchesium
Epistylis
Opercularia
V. microstoma
V. convallaria
Zoothanium
Otros
Otros
Rotferos
Nematodos
Anlidos
N total sp

Densidad (N total ind/L)

NDICE DE MADONI
SBI:
CLASE:

ND SHANON (bit)
GRUPO DOMINANTE:
* RECUENTO DE PEQ FLAG
En este orden : Peq.flag**// Cil.nad.bact.// V. microst// Operc spp.//
Si f<10, peq. flag/ml <50000
// Cil. Ssiles (>80%)// Cil rept+Cil ssi+tecamebas.
Si f>10, peq. flag/ml >50000
** >100 en diagonal completa de cmara Fuchs-Rosenthal
NOTA1 : No se consideran para el N total de individuos
NOTA 2: Si existen organismos distintos a los que aparecen en la tabla; sustituirlos en el listado.
TABLA PARA LA DETERMINACIN DEL NDICE BITICO (MADONI, 1994)
GRUPO DOMINANTE Y
NMERO TOTAL DE UNIDADES TAXONMICAS DE LA MICROFAUNA Y NMERO DE PEQUEOS FLAGELADOS
DENSIDAD TOTAL
(F), CONTADOS EN LA DIAGONAL DE FUCHS-ROSENTHAL.
GRUPO
DENSIDAD
>10
ENTRE 8-10
ENTRE 5-7
<5
DOMIN
(ind/mL)
F<10
10<F<100
F<10
10<F<100
F<10
10<F<100
F<10
10<F<100
6
>10(EXP 6)
10
8
9
7
8
6
7
5
<10 (EXP 6)
9
7
8
6
7
5
6
4
5
>10(EXP 6)
9
7
8
6
7
5
6
4
<10 (EXP 6)
8
6
7
5
6
4
5
3
4
>10(EXP 6)
7
5
6
4
5
3
4
2
<10 (EXP 6)
6
4
5
3
4
2
3
1
3
>10(EXP 6)
6
4
5
3
4
2
2
1
<10 (EXP 6)
5
3
4
2
3
1
2
0
2
>10(EXP 6)
5
3
4
2
3
1
1
0
<10 (EXP 6)
4
2
3
1
2
0
0
1
>10(EXP 6)
4
3
2
1
<10 (EXP 6)
3
2
1
0
1: PEQUEOS FLAGELADOS NADADORES (>100 EN DIAGONAL F-R)

4: OPERCULARIA spp

2: CILIADOS NADADORES BACTERIFAGOS

5: CIL SSILES>80 %, NO SIENDO OPERCULARIA Y V. MICROSTOMA ABUNDANTES

3: VORTICELLA MICROSTOMA

6: CIL REPTANTES+SSILES+ Y/O TECAMEBAS

121

GRUPO BIOINDICACION SEVILLA

EVALUACIN FINAL DEL FANGO ACTIVADO

fecha:

Cdigo de muestra:

CONCLUSIONES
PSIMO

MALO

REGULAR

BUENO

VALORACIN CALIDAD FANGO

VALORACIN AGUA DE SALIDA
VALORACIN DE LA ESTABILIDAD DEL SISTEMA

DECANTABILIDAD Y ESTADO FLOCULAR

IF:

BACTERIAS FILAMENTOSAS

DOMINANTE:

SECUNDARIO:

OTROS:

EFEC SOBRE FLCULO:

CATEGORA NUMRICA:

RELACIN FILAMENTOS:

IRF

m/mL

MICROFAUNA PROTOZOARIA

PARMETROS ASOCIADOS
0

SBI:

I SH:

0
CALIDAD PREVISIBLE DEL AGUA TRATADA

REPARTO PORCENTUAL
GRANDES FLAGELADOS
AMEBAS
CIL NADADORES

#####

CIL REPTANTE

DATOS REALES DE SALIDA:

CIL SSIL

SS

METAZOOS

DBO

PARMETROS ASOCIADOS

122

DQO

PTIMO

CAPTULO 6.- IMPLICACIONES ECOLGICAS;

APLICACIONES PRCTICAS.

INTRODUCCIN
Las especies de ciliados que viven en aguas residuales, pueden sobrevivir en un amplio abanico de
condiciones (Curds y Cockburm, 1970). Prcticamente, todos los autores coinciden en que los protozoos son el
grupo rey de la bioindicacin y en que contribuyen al consumo de materia orgnica y bacterias libres,
consiguindose reducciones considerables de la DBO5 y de las concentraciones bacterianas de E. coli en un 50
%. La vida media de E. coli fue estimada en 16 horas en ausencia de protozoos y en 1,8 horas en presencia
(Curds, 1973).
Se identifican ms de 200 especies de protozoos en aguas residuales (Curds, 1975), de las cuales 33 son
flagelados, 25 rizpodos, 6 actinpodos y 160 ciliados, con una densidad de 10.000 clulas/mL (Madoni, 1984),
aunque solamente la mitad de ellas se encuentra con cierta frecuencia (Curds y Cockburn, 1970; Madoni y
Ghetti, 1981).
Resumiendo, podemos decir que el papel de los protozoos en la depuracin es:
-

Consumir directamente materia orgnica y poblaciones bacterianas.

Favorecer la estabilidad del flculo.

Estar directamente envueltos en la cadena alimentaria como paso entre niveles trficos,
transformando la materia orgnica de pequeo tamao en partculas mayores accesibles a otros
organismos.

Para conocer mejor el entramado ecolgico existente y las tendencias de desarrollo, es necesario
controlar el ciclado de materia y energa del reactor, as como el movimiento de los nutrientes. En este sentido,
las bacterias desempean un papel crucial. Desde el punto de vista de la depuracin, las bacterias se pueden
equiparar a pequeas procesadoras de la materia orgnica por medios bioqumicos, cuyo metabolismo est
controlado por diversos factores externos e internos. Y adems de los protozoos, es tambin posible considerar
determinadas bacterias filamentosas, como indicadoras de situaciones alteradas en el reactor aerobio.

RUTAS METABLICAS Y EFECTO DE LOS SELECTORES

Antes de iniciar el recorrido por los ciclos de nutrientes, debemos conocer que herramientas poseen las
bacterias para realizar su metabolismo. Dichas herramientas quedan definidas en la Figura 1.

123

CATABLICA

PRODUCCIN ENERGA

ANABLICA

PRODUCCIN MATERIAL CELULAR

DEGRADATIVAS

PRODUCTO FINAL LIBERADO AL EXTERIOR

VAS

METABOLISMO RUTAS

BIOSNTESIS DE PRODUCTOS INTERMEDIOS

BIOSNTESIS DE PRODUCTOS FINALES

FORMACIN METABOLITOS DE RESERVA

FORMACIN DE METABOLITOS SECUNDARIOS

EXCRECIN AL EXTERIOR

Figura 1: Rutas degradativas (Pares y Juarz, 1997).

La presencia o ausencia de oxgeno provoca reacciones de degradacin de la materia orgnica, de

forma que el aceptor de electrones en la cadena respiratoria sea el oxgeno (respiracin aerbica u xica1) o los
nitratos (respiracin anxica) y en el caso de ausencia total de oxgeno, se desencadenan las reacciones de
fermentacin (respiracin anaerobia). Los principales ciclos implicados en el sistema de fangos activos son:

Ciclo del Carbono (Figura 2).

Ciclo del Nitrgeno (Figura 3).

Ciclo del Fsforo (Figura 4).

Ciclo del Azufre (Figura 5).

OXIA
VA CATABLICA

CO2 + OTROS PRODUCTOS (LIBERACIN DE NUTRIENTES)

RESIDUOS PARTICULADOS
VIA ANABLICA

PRODUCCIN DE NUEVAS CLULAS

Figura 2: Metabolismo del carbono en fangos activados.

La definicin de "respiracin en presencia de oxgeno" en castellano se corresponde con el nombre respiracin aerobia/aerbica; sin
embargo, dado que en la literatura tcnica se cita como xica, por influencia del ingls, se mantendr esta nomenclatura.

124

OXIA / NITRIFICACIN

N2 ( DESNITRIFICACIN / ANAEROBIOSIS)

NH4/ N ORG

NO2

NO3

MATERIAL CELULAR

MATERIAL CELULAR/ NH4 ( RESPIRACIN ANXICA)

Figura 3: Metabolismo del nitrgeno en fangos activados.

OXIA
P ORGNICO

MATERIAL CELULAR
-

PO4

POLMEROS DE RESERVA

ANOXIA

ANAEROBIOSIS
Figura 4: Metabolismo del fsforo en fangos activados.

OXIA / ANOXIA
S

2-

0
3

SO

SO4

H2S

SO3

ASIMILACIN CELULAR

ANAEROBIOSIS

Figura 5: Metabolismo del azufre en fangos activados.

125

Una vez definidas las principales rutas metablicas y sus necesidades respecto al oxgeno, podemos
aplicar estos conocimientos a la seleccin bacteriana. Las bacterias utilizarn una u otra va, en funcin de las
disponibilidades y la relacin entre O2/C/N/P.
Las condiciones con las que llega el agua residual al tratamiento biolgico, van a ser determinantes
para la microfauna que se desarrolle en los fangos activados, aunque sta presenta amplios mrgenes de
tolerancia (Esteban, 1989).
En un sistema de depuracin convencional, las bacterias utilizan el oxgeno como sustrato base del
metabolismo, oxidando los productos de desecho presentes en las aguas residuales para conseguir la energa y la
materia prima necesarias para formar sus metabolitos, tanto para el mantenimiento como para la reproduccin.
As, en este proceso la seleccin est dirigida, fundamentalmente, hacia las bacterias aerobias, que adems,
gracias a su capacidad de formar flculos, aglomeran la materia orgnica. Sin embargo, las reducciones de
nutrientes para este tipo de procesos no son altas y pueden variar en un amplio rango, dependiendo de la
actividad metablica del reactor aerobio. El objetivo final de este proceso, a parte de la oxidacin biolgica de la
materia orgnica, es la reduccin de sta mediante la separacin de fases, operaciones ambas que consiguen
reducciones superiores al 90 % en DBO5.
El control microbiolgico sobre este tipo de reactores estriba en la identificacin de las bacterias,
principalmente de bacterias filamentosas y formadoras de flculo.
Los desequilibrios se pueden producir en dos frentes, fundamentalmente, mal o escaso reparto del
oxgeno y/o parmetros operacionales no correctos. En ambos casos las bacterias tienden a buscar soluciones y
metabolismos alternativos (respiracin por nitratos, metabolismo del azufre, etc.), situacin que puede
seleccionar bacterias filamentosas, ms eficientes y adaptativas ante situaciones de estrs, que las formadoras de
flculos (lminas 83, 84, 76-77, 81 y 85).
Situaciones similares se establecen ante desequilibrios nutricionales, producidos por influentes
alterados por vertidos industriales o parmetros operacionales mal programados. La rpida respuesta de estas
bacterias filamentosas se debe a que la mayora puede reproducirse con relativa facilidad, de forma que si las
condiciones del medio no son adecuadas, pueden fragmentarse y generar explosiones demogrficas cuando tales
condiciones sean las adecuadas.
Este tipo de problemas ocasionado por las bacterias filamentosas (bulking, foaming...), puede atajarse
por medios mecnicos y qumicos (lavadores de espumas, adicin de reactivos...) y, preferentemente, intentando
conocer el factor que desencadena el desequilibrio de la estructura trfica en en nuestro sistema. Es por lo tanto
indispensable conocer bien los ciclos nutricionales y los niveles de oxigenacin de nuestro reactor, para explicar
la biota establecida. En muchos casos esto no es posible y el razonamiento es a la inversa, en funcin del
organismo presente y de su concentracin, se estima el estado del reactor.
Existen varios parmetros operacionales que son interesantes de controlar como indicadores de la
actividad bacteriana (Surez, 1997):
126

Carga flocular: Nivel de carga asimilable instantneamente en el licor mezcla (mg DQO soluble/ g
SS)

Capacidad de bioabsorcin: Cantidad de materia orgnica que puede ser internalizada en funcin
del tiempo (mg DQO/ g MLSS).

Rendimiento del selector: Rendimiento en reduccin de materia soluble en el reactor

(Bioabsorcin/ carga flocular).

Si a nuestro sistema convencional le aplicamos selectores especficos con ciclos combinados

anaerobio/anxico/xico, entonces el control microbiolgico se hace imprescindible, ya que en estos sistemas se
seleccionan grupos especficos para conseguir la eliminacin del nitrgeno (ciclo anxico/xico) y la
eliminacin del fsforo (ciclo anaerobio/xico). Esto permite reducciones de nutrientes segn la legislacin con
valores superiores al 80 %.
De manera esquemtica, los principales procesos implicados en cada selector se pueden resumir como
sigue, teniendo en cuenta que la alternancia de oxgeno favorece el sentido de los procesos de nitrificacin y
desnitrificacin y que en estos procesos un parmetro fundamental es el control de los nitratos presentes en la
recirculacin en el nivel anxico.

Reactor anaerobio: Las bacterias Poli-P asimilan DQO fcilmente biodegradable. Al no existir
nitratos ni oxgeno utilizan el metabolismo fermentativo y liberan ortofosfatos al medio.

Reactor anxico: Se generan procesos de desnitrificacin. Las bacterias hetertrofas eliminan

materia orgnica gracias a los nitratos.

Reactor aerobio: Las bacterias Poli-P utilizan los polifosfatos como fuente de energa (previa
liberacin), eliminndose por estraccin del fango. Se realizan procesos de nitrificacin.

Las bacterias poli-P juegan un papel fundamental, al realizar una liberacin de ortofosfato al medio
anaerobio para asimilar la DQO fcilmente degradable y utilizar en el reactor aerobio el fsforo previamente
liberado como fuente de energa. Ya que la velocidad de asimilacin es mayor que la de liberacin previa, el
balance final es el de reduccin de fsforo en el agua y su retirada en los fangos.
Una vez llegados a este punto, es necesario aplicar todos los conocimientos biolgicos adquiridos sobre
el ecosistema para ayudarnos a interpretarlo. Para ello es muy til conocer la bibliografa especializada, en la
que se citan asociaciones de determinados organismos a causas especficas. Estas observaciones, si bien son
muy interesantes, siempre hay que tomarlas con precaucin, ya que en un ecosistema las respuestas no son
normalmente causa-efecto, si no que el entramado ecolgico implica muchos factores y es necesario conocer la
situacin global para tomar una decisin.
Las citas obtenidas en la bibliografa nos pueden aportar una idea que aplicaremos a nuestro
ecosistema. En muchos casos los datos pueden ser contradictorios, debido, por ejemplo, a la versatilidad de los
127

organismos, o a que no se han tenido en cuenta determinados factores para realizar esta asociacin. Es por
ejemplo el caso de Nocardia sp. (lminas 52 y 53), que normalmente aparece asociada a edades de fango
bastante altas (10 das), pero que en muchos casos se encuentra en edades inferiores (3-4 das) debido a
desequilibrios nutricionales que la hacen ms competitiva; o la razn estriba en que se desarrolla en ambientes
especiales como son las espumas, que mantienen edades superiores al resto del reactor.
Los factores que regulan la aparicin de un organismo particular, necesitan una investigacin ecolgica
histrica (Pratt y Cairns, 1985). Por lo tanto, hemos de intentar tener siempre una visin panormica del sistema,
anando todos los factores analizados por separado de forma que confluyan en un puzzle bien encajado.
Por otra parte, siempre hemos de tener en cuenta que estamos trabajando con organismos y que los
tiempos de respuesta no son inmediatos. Si aplicamos una modificacin operacional a nuestro sistema, debemos
permitir la aclimatacin de los organismos a la nueva situacin antes de valorar el cambio.
Cada E.D.A.R. y en ella cada reactor biolgico, se comporta como un ente nico que podemos abstraer
y analizar en cada uno de sus factores, pero que para su comprensin es necesario eliminar las ideas
preconcebidas e integrar todos los datos.
El anlisis de una comunidad nos refleja los datos integrados de un sistema, mientras que los anlisis
qumicos no (Salvad, 2000). Si nos aproximamos por primera vez al estudio de un fango, una valoracin de los
organismos presentes y de la estructura trfica, nos informar de la estabilidad de la comunidad biolgica
presente y de la madurez del fango, en funcin de la presencia o ausencia de los distintos grupos de bacterias,
protozoos y metazoos. El estudio puede seguir una serie de pasos, que se encuentran recogidos en las "fichas de
recogida y anlisis de datos microbiolgicos" (captulo 5) pero el orden que se siga o la importancia de cada uno
va a depender del observador.
Como ya se ha comentado, el agua residual entrante viene cargada de bacterias libres y algunos
protozoos, pero con la formacin del fango, bacterias formadoras de flculo, ciliados nadadores, reptantes y
ssiles sern los que se establezcan en el sistema, a la vez que se forma una masa orgnica, que permanece ms
o menos constante, si las condiciones ambientales no se alteran.
La observacin microscpica de las muestras permitir descubrir que grupos son los predominantes. Si
estudiamos el entramado y estado del flculo, podremos apreciar en que fase de desarrollo se encuentra nuestro
reactor. Se define como flculo ptimo aquel que se encuentra en torno a 1.500 m de dimetro y con l se
consiguen los mejores rendimientos de depuracin (Garrido et al, 1988). A medida que aumenta el tamao
flocular y alcanza el dimetro de flculo ptimo, los rendimientos, tal como se puede apreciar en la Figura 6,
aumentan.

128

RELACIN ENTRE EL TAMAO FLOCULAR Y LOS RENDIMIENTOS DEPURADORES

% RED

100
80
60
40
20
0
30

90

350

1500

m
RENDIMIENTO DBO (%)

RENDIMIENTO DQO (%)

RENDIMIENTO SS (%)

Figura 6: Relacin entre el tamao flocular y los rendimientos depuradores (Garrido et al, 1988).

Las desviaciones de valores respecto a la macroscopa, indican problemas en la decantabilidad que

deben investigarse a fondo en funcin de las caractersticas microscpicas. De hecho, existen relaciones entre el
tamao flocular y parmetros operacionales como la carga msica (Garrido et al, 1988) o la edad del fango.
La evolucin del tamao flocular respecto a la CM se puede apreciar claramente en la Figura 7, dnde
el tamao flocular sube notablemente frente a CM bajas.

kg DBO/g MLSS

RELACION ENTRE EL TAMAO FLOCULAR Y LA CM

1,5
1
0,5
0
30

90

350

1500

Figura 7: Relacin entre la CM y el tamao flocular (Garrido et al, 1988)

Sin embargo, esta relacin es orientativa, ya que se encuentra en funcin de la planta, siendo el
operador quien determine el tamao ptimo.
En relacin a la estructura flocular, habra que citar la proliferacin de las bacterias filamentosas, ms
adaptables frente a desequilibrios nutricionales que las formadoras de flculo (N/DBO5: 0,035-0,05 y P/DBO5:
0,007-0,01). Las bacterias filamentosas son favorecidas por alteraciones en las concentraciones de oxgeno,
puesto que captan mejor el oxgeno que las floculantes al tener ms superficie y son favorecidas tambin por
129

ciertas concentraciones de sutrato (Figura 8). En cuanto a la concentracin de sustrato, es sabido que las
bacterias filamentosas, en general, se desarrollan ms rpidamente a bajas concentraciones que las bacterias que
forman las colonias de Zoogloea sp. (Moro y Leborans, 1988).

APROVECHAMIENTO DEL SUSTRATO POR BACTERIAS FILAMENTOSAS Y NO

FILAMENTOSAS

CONCENTRACIN DE ALIMENTO

VELOCIDAD DE CRECIMIENTO NF

VELOCIDAD DE CRECIMIENTO F

Figura 8: Aprovechamiento del sustrato por bacterias filamentosas y no filamentosas. (Moro y Leborans, 1988)

Como ya se ha comentado, los organismos filamentosos ocupan, a baja concentracin, un papel

fundamental en la formacin del entramado adecuado para el desarrollo del flculo. Un crecimiento excesivo
provoca alteraciones en la relacin superficie/volumen del flculo que, o bien hacen ascender el fango activo, o
provocan la disgregacin flocular que libera microflculos que enturbian el efluente.

BIOINDICACIN APLICADA
Existe mucha bibliografa al respecto, asocindose cada bacteria a determinadas condiciones de
explotacin (Tabla 1).
Tabla 1: Relacin de bacterias filamentosas ms comunes en fangos activados con sus asociaciones operacionales. (EMASESA, 1997).

ESPECIE

CARACTERSTICAS

FILAMENTOS

PRESENTAN
ESTRATEGIAS
EVOLUTIVAS
OPORTUNISTAS,
POR
FRAGMENTACIN DEL FILAMENTO. EL CRECIMIENTO SOBRE UN FILAMENTO
EN PARALELO SE DEBE A GRANDES CONCENTRACIONES DE CRECIMIENTO
DISPERSO, POR MALA FLOCULACIN O POR EDADES EXCESIVAS DE FANGO.
ALTOS NIVELES DE CRECIMIENTO EPIFTICO INDICAN CRECIMIENTO LENTO
DEL FILAMENTO.

TIPO 0041

DISGREGACIN FLOCULAR EN AGUAS RESIDUALES URBANAS Y PUENTES

INTERFLOCULARES EN AGUAS DE ORIGEN INDUSTRIAL. ALTAS EDADES DE
FANGO Y BAJAS CARGAS MSICAS. DEFICIENCIA DE NUTRIENTES (N Y P)/
DESEQUILIBRIOS NUTRICIONALES.

130

TIPO 0092

DISGREGACIN FLOCULAR, BAJA CARGA MSICA Y ALTAS EDADES DE

FANGO. ENTRADAS DE CARGAS ORGNICAS ALTAS EN EL INFLUENTE.

TIPO 0211

CRECIMIENTO DISPERSO, AGUAS INDUSTRIALES MAYORITARIAMENTE.

TIPO 021N

ALTOS IVF. CRECIMIENTO RPIDO. AGUAS SPTICAS CON ENTRADAS DE

SULFUROS Y CIDOS ORGNICOS. RESIDUOS INDUSTRIALES DEFICIENTES EN
NITRGENO Y BAJAS CARGAS MSICAS EN INFLUENTES CON AZCARES Y
CIDOS ORGNICOS FCILMENTE UTILIZABLES. DQO SOLUBLE DE ENTRADA
A CUBAS BASTANTE ALTA. BAJA CONCENTRACIN DE OXGENO.
DESEQUILIBRIOS NUTRICIONALES

TIPO 0411

CRECIMIENTO DISPERSO, AGUAS INDUSTRIALES.

TIPO 0675

DISGREGACIN FLOCULAR EN AGUAS RESIDUALES URBANAS Y PUENTES

INTERFLOCULARES EN INDUSTRIALES. ALTAS EDADES DE FANGO Y BAJAS
CARGAS MSICAS. DEFICIENCIA DE NUTRIENTES O DESEQUILIBRIOS
NUTRICIONALES.

TIPO 0803

BAJA CARGA MSICA Y DEFICIENCIA DE NUTRIENTES.

TIPO 0961

PUENTES INTERFLOCULARES QUE PROVOCAN MALA SEDIMENTACIN DEL

FANGO. BAJA CARGA MSICA. CONCENTRACIONES ALTAS DE OXGENO.
DISMINUYE SU METABOLISMO CON ALIMENTACIN INTERMITENTE.

TIPO 1701

ESTRUCTURA DIFUSA EN EL FLCULO, CON CRECIMIENTO EPIFTICO. BAJA

CONCENTRACIN DE OXGENO. DESNITRIFICA HASTA NITRITO. SI EL

TIPO 1851

PUENTES INTERFLOCULARES. BAJA CARGA MSICA. PRESENTA COMO

CARACTERSTICA LA APARICIN DE UNA V30 PARTIDA. SE DESARROLLAN
EN CUBAS SOBRECARGADAS.

TIPO 1852

CRECIMIENTO DISPERSO, AGUAS INDUSTRIALES.

TIPO 1863

CRECIMIENTO DISPERSO. BAJA CONCENTRACIN DE OXGENO DISUELTO, O

TRAS CLORACIONES PERIDICAS. DEFICIENCIA NUTRICIONAL, ALTA CARGA
MSICA.

BACILLUS

NO CAUSAN PROBLEMAS DE SEDIMENTACIN DEL FANGO, ASOCIADOS A

CRECIMIENTO DISPERSO, PROVOCANDO TURBIDEZ EN EL EFLUENTE.

BEGGIATOA SP.

ALTA CARGA ORGNICA Y SEPTICIDAD. ABUNDAN EN SISTEMAS DE

TRATAMIENTO DE CULTIVOS FIJOS.

FLEXIBACTER SP.

NO CAUSAN PROBLEMAS DE SEDIMENTACIN EN EL FANGO. PROVOCAN

TURBIDEZ EN EL EFLUENTE.

HALISCOMENOBACTER
HYDROSSIS

BAJOS NIVELES DE OXGENO DISUELTO, BAJA CARGA MSICA Y

DEFICIENCIA DE NUTRIENTES/DESEQUILIBRIOS NUTRICIONALES. GENERA
MICROFLCULOS EN EL EFLUENTE. MAL INDICADOR POR ADAPTARSE A
DIVERSAS CONDICIONES.

MICOTRIX PARVICELLA

DECANTACIN LENTA, BAJA CARGA MSICA, BAJA CONCENTRACIN DE

OXGENO DISUELTO Y BAJAS TEMPERATURAS. MUY RESISTENTE AL CLORO,
NECESARIO TRATAR LOS REBOSES. LA AIREACIN CONTINUADA RETARDA
SU CRECIMIENTO. VERTIDOS QUMICOS.

NOCARDIA SP.

DISGREGACIN FLOCULAR, PRESENTA CUBIERTA CREA PUDINDOSE

FORMAR UNA SUSPENSIN EN MEDIO LQUIDO QUE CAUSA LA APARICIN DE
ESPUMAS. ATRAPAN BURBUJAS DE AIRE. BAJA CARGA MSICA, ALTAS
EDADES DE FANGO Y ALTAS TEMPERATURAS.
DESNITRIFICA HASTA NITRITO.

131

NOSTOCOIDA LIMICOLA

BAJOS VALORES DE CARGA MSICA, BAJA CONCENTRACIN DE OXGENO

DISUELTO. INDICIOS DE VERTIDOS INDUSTRIALES. CRECE CON VERTIDOS DE
ALMIDN.

SPHAEROTILUS NATANS

FORMA PUENTES INTERFLOCULARES. IVF ALTOS. BAJAS CONCENTRACIONES

DE OXGENO DISUELTO. SOPORTA BIEN ALTERNANCIAS DE CARGAS POR SU
CAPACIDAD DE ACUMULAR GRNULOS DE GRASA. CRECIMIENTO INHIBIDO
POR ALTAS CONCENTRACIONES DE HIERRO. DESNITRIFICA HASTA NITRITO.
SOPORTA BIEN LAS DEFICIENCIAS DE NITRGENO/ DESEQUILIBRIOS
NUTRICIONALES.
SE DESARROLLA CON ENTRADAS DE CARGA FCILMENTE DEGRADABLES.

STREPTOCOCCUS

GENERAN TURBIDEZ EN EL EFLUENTE.

THIOTHRIX SP.

FORMAN PUENTES INTERFLOCULARES. CONDICIONES DE SEPTICIDAD CON

INFLUENTES RICOS EN SULFUROS Y CIDOS ORGNICOS. DEFICIENCIAS DE
NITRGENO. ALTAS CONCENTRACIONES DE SULFUROS EN PRIMARIOS.
DESNITRIFICA HASTA NITRATO. DESEQUILIBRIOS NUTRICIONALES. PUEDEN
DESAPARECER LOS GRNULOS DE AZUFRE TRAS UNA CLORACIN. SI
APARECEN MUCHAS ROSETAS Y GONIDIOS INDICA UN METABOLISMO MUY
ACTIVO. TIEMPO DE GENERACIN EN TORNO A LAS DOS HORAS.

Por lo tanto, en fenmenos de alteracin en la sedimentabilidad del fango, debemos controlar y

verificar, entre otros, los siguientes parmetros operacionales, que podremos relacionar con el filamento
presente:

INFLUENTE

Control de caudales entrantes: Caudales punta

Relacin de nutrientes: C/N/P

Verificacin de vertidos o aguas spticas

Estudio de las fracciones solubles (DQO y DBO5)

En casos extremos, valoracin de oligoelementos

OPERACIONALES

Control de reparto y concentracin de oxgeno en el reactor

Control de MLSS y caudales recirculados

Control de la edad de fango y CM tericas y reales

Control de la carga flocular y la actividad del reactor

132

Control del balance de masa de retorno de planta

Control de sobrenadantes punta de los distintos equipos, que puedan aportar sustratos parcialmente
digeridos

Con relacin a los protozoos presentes en el medio, se ha demostrado que el papel de los ciliados es
fundamental en el proceso de depuracin, al funcionar como filtros que eliminan las bacterias dispersas del
agua; en una hora, un protozoo puede filtrar las partculas contenidas en un volumen 105 veces superior al de la
clula (Salvad, 2000).
Su estudio puede abordarse desde muy distintos enfoques (alimentacin, reproduccin, interacciones
trficas, contaminantes...), que van a permitir valorar el fango en funcin de su actividad y biomasa. As por
ejemplo, la forma de alimentacin de los protozoos puede ayudarnos a estimar el tamao medio de partculas
presentes en el medio (Tabla 2).
Estos organismos, que desarrollan su ciclo biolgico en presencia de bacterias y de materia orgnica del
medio, juegan un importante papel dentro de la estructura y estado de formacin flocular, sobre los sustratos del
medio y sobre la relacin entre depredadores (Tabla 3).
Tabla 2: Tipo de alimentacin de diferentes especies de protozoos en funcin del tamao de partcula (Pratt-Cairns, 1985)

ALIMENTO

TAMAO DE PARTCULA

ORGANISMO (GNERO)

NUTRIENTES MINERALES DISUELTOS

0,5 m

Chlamidomonas, Cryptomonas, Bodo, Monas, Cyclidium

BACTERIAS Y DETRITUS
BACTERIAS, ALGAS Y DETRITUS

DIVERSO

Stentor

MATERIA ORGNICA DISUELTA

DIVERSO

Astasia

ROTFEROS Y PROTOZOOS

>10 m

Didinium, Sctinophrys, Acineta

Tabla 3: Tipo de alimentacin de distintos tipos de protozoos (Pratt y Cairns, 1985).

PROTOZOO

HBITAT

ALIMENTO

Opercularia microdiscum

ssil

bacterias

Carchesium polypinum

ssil

bacterias

Vorticella convallaria

ssil

bacterias

Chilodonella uncinata

nadador

filamentos,algas,bacterias

Opercularia coarctata

ssil

bacterias

Vorticella octava

ssil

bacterias

Cinetochilum margaritaceum

reptante

bacterias

Vorticella microstoma

ssil

bacterias

Trachelophyllum pusillum

nadador/reptante

carnvoro

Vorticella alba

ssil

bacterias

Euplotes moebiusi

reptante

bacterias

Vorticella fromentelli

ssil

bacterias

133

En general, parece que la mayor cantidad de especies se encuentra entre cargas msicas de 0,3,
aumentando las poblaciones de ciliados ssiles y nadadores a medida que dicha CM aumenta. Los ciliados
reptantes van a codominar con los ciliados fijos en rangos de 0,2-0,4 de CM, disminuyendo su nmero a medida
que aumenta la CM. IVFs en torno a 400 (mL/g) impiden el desarrollo adecuado de ciliados reptantes, ya que la
formacin de flculos en estos rangos de IVF es escasa, factor ste determinante para el desarrollo de este
grupo.
Podemos establecer una relacin entre los grupos predominantes y factores operacionales tales como
CM, MLSS, etc., lo que nos permitira valorar el estado de las comunidades y optimizar el rendimiento del
proceso, en funcin del porcentaje de los grupos mayoritarios. Podemos hilar ms fino al definir las especies
presentes y relacionarlas con sus condiciones ecolgicas ptimas de desarrollo: en funcin del tipo de
organismo presente podemos estimar la DBO5 de salida (Pratt y Cairns, 1985). Organismos como Euplotes sp.
se encuentran asociados a DBO5 de efluente muy bajas (Tabla 4), mientras que el grupo de los flagelados se
asocia a concentraciones altas.
Tabla 4: Frecuencia de aparicin de determinados organismos en funcin del rango de DBO5 de salida (Pratt y Cairns, 1985).
FRECUENCIA DE APARICIN (%) EN FUNCIN DBO (mg O2/L)
ORGANISMO

0-10

10-20

21-30

MS 30

Vorticella convallaria

63

73

37

22

Vorticella fromentelli

38

33

12

Carchesium polypinum

19

47

12

Aspidisca cicada

75

80

50

56

Euplotes patella

38

25

24

Flagelados

37

45

Mediante anlisis de correlaciones se puede llegar a conclusiones que relacionan parmetros como el
oxgeno, MLSS, materia orgnica de entrada o tiempo de residencia, con determinados organismos. Esta
informacin permitir establecer un sistema de asociaciones entre comunidades bsicas, secundarias y
asociadas.
La Figura 9 representa la relacin existente para algunos organismos en funcin de los MLSS y el nivel
de oxgeno presente en el reactor. Oscilaciones severas en la curva de crecimiento total de los protozoos ciliados
y el estado de floculacin, aparecen asociados con drsticas reducciones de oxgeno en el reactor (Madoni,
1984).
Asociaciones similares se pueden realizar entre la materia orgnica del influente y el tiempo de
residencia (Figura 10).

134

RELACIONES DE DISTINTOS PROTOZOOS FRENTE A VARIACIONES DE

OXGENO Y CONCENTRACIN DE SLIDOS EN LAS CUBAS

OXGENO
Amebas
Rotifero
Euplotes sp.

Aspidisca sp.
V. convallaria
MLSS
V. microstoma

Nematodos

Euglena sp.
Figura 9: Distribucin de los organismos en funcin de los MLSS y el oxgeno presente en el reactor.

135

RELACIONES DE DISTINTOS PROTOZOOS FRENTE A VARIACIONES DE

MATERIA ORGNICA Y EL TIEMPO DE RESIDENCIA

MO

Oligoquetos
Aspidisca sp.
Hemiophrys sp.
V. microstoma
Trachelophyllum sp.
Arcella sp.

TR

Chilodonella sp.
V. convallaria
Litonotus sp.
Carchesium sp.
Peranema sp.
Zoothamnium sp.
Figura 10: Distribucin de los organismos entre la materia orgnica del influente y el tiempo de residencia. TR: tiempo de residencia. MO:
materia orgnica.

136

Se confirma la distribucin de las distintas especies con sus adaptaciones especficas en las diversas
clases de ambiente (Madoni, 1981). La cantidad de alimento presente en el medio determina el nmero de
individuos que podr mantener nuestro ecosistema.
Esta distribucin de alimentos y su modificacin posterior en funcin de la colonizacin establecida, se
puede seguir claramente en una fase de puesta en marcha de una E.D.A.R. Podemos valorar la estabilizacin del
fango en funcin del desarrollo de los organismos presentes en l. Se puede hablar de tres fases de colonizacin
(Madoni y Ghetti, 1981), en las que los protozoos flagelados constituyen uno de los primeros grupos de
protozoos que se ven reemplazados por los ciliados nadadores. Ms tarde, aparecen los hipotricos como
Aspidisca sp. y finalmente se establecen los ciliados ssiles (Curds, 1982).
Podemos establecer, en trminos generales, las siguientes etapas, en las que se incluye la fase de
envejecimiento o degradacin del fango:

Colonizacin. Aparecen multitud de flagelados, ciliados nadadores libres que son consumidores de
bacterias dispersa y materia orgnica: Peranema trichophorum, Bodo sp, larvas trocforas,
Tetrahymena sp...

Fango Joven. La actividad de los protozoos cambia la dinmica de estructuracin de la materia

orgnica presente, siendo sta una fase de preformacin flocular. Disminuye el nmero de
flagelados y ciliados libres, apareciendo la fase de dispersin de los peritricos: Vorticella
microstoma, Uronema sp, larvas trocforas...

Fango maduro. Se ha modificado totalmente la estructura del ecosistema en funcin del efecto de
los organismos presentes en l, de forma que la materia orgnica junto con las bacterias dispersas
se encuentra aglutinada en los flculos, sectorizando la alimentacin de los distintos organismos.
Los ciliados peritricos e hipotricos cobran fuerza en el reparto porcentual de organismos,
regulando el nmero de bacterias dispersas y favoreciendo la floculacin: Arcella hemisphaerica,
Aspidisca cicada, Zoothamnium simplex, Vorticella elongata, Zoogloea ramigera, Vorticella
sepulcreti, Acineta cuspidata...

Fango envejecido. El aumento de poblacin junto con la degradacin del ambiente, provocan un
desplazamiento de las comunidades hacia organismos superiores (metazoos), que rompen las
estructuras establecidas (flculos) y dispersan la materia orgnica y las bacterias. Se generan
medios ricos en glicolax, consecuencia del metabolismo bacteriano. Abundancia de Rotferos y
metazoos.

La sucesin temporal de los distintos tipos de protozoos presentes indica el grado de madurez del
fango, que puede resultar alterado por factores externos al desarrollo de la sucesin, como pueden ser la entrada
de vertidos txicos.

137

Se confirma la subclase de los peritricos como una de las ms importantes en los procesos aerobios
(Curds, 1982), ya que estos organismos, adems de optimizan sus costes energticos de alimentacin,
contribuyen a la separacin de fases.
Se produce un desplazamiento en las estrategias de colonizacin de los microorganismos que ira,
desde altas concentraciones de sustrato y tasas especficas de crecimiento (estrategia r), a condiciones limitadas
de sustrato con adaptaciones especficas (estrategia k).
La presencia de flculos determina, en muchos casos, la tasa de crecimiento de los distintos ciliados, lo
que condiciona tambin la abundancia relativa de un organismo en particular. Esta distribucin de la abundancia
relativa indica a menudo su importancia en la estructura ecolgica del hbitat (Curds, 1982).
Las poblaciones se expanden o retraen como respuesta a condiciones como la abundancia de alimento.
La actividad frente al alimento entre los protozoos puede apreciarse, en determinados casos, con el nmero de
vacuolas digestivas presentes en los organismos; este efecto es muy claro en Tetrahymena pyriformis, en la que
se detectan claramente las vacuolas digestivas. Pero al igual que se modifican los grupos de ciliados presentes
en el medio en funcin del tiempo o la abundancia de alimento, stos favorecen modificaciones en su entorno.
La actividad reproductora tambin nos puede informar sobre el estado de actividad del medio. Esta fase
es muy obvia en casos de alteraciones o arranque del reactor. Durante estos periodos las especies de protozoos
de talla pequea se reproducen ms rpidamente y aparecen como grupo dominante. Los organismos sedentarios
tienen un periodo de divisin celular ms largo que los libres, ocupando las formas reptantes una posicin
intermedia (Salvad, 2000). Por otra parte, los ciliados peritricos, que viven fijados al flculo, presentan larva
trocfora (libre nadadora) que se puede fijar a cualquier superficie. La presencia abundante de larvas trcoforas
y una alta actividad por parte de stas, indica fenmenos de actividad y reproduccin consistentes, mientras que
fenmenos de enquistamiento se pueden asociar a situaciones de estrs, como pueden ser la reduccin de
oxgeno o entrada de txicos. En ste ltimo caso, habra que aclarar que no todos los organismos responden de
igual manera a una concentracin de txico. En general, los protozoos son ms sensibles que las bacterias a los
compuestos txicos (Esteban, 1989), con lo que podemos utilizarlos como indicadores de vertidos industriales.
En el caso de C. campyllum, su poblacin est limitada por la concentracin de detergentes de entrada a las
balsas de aireacin (Esteban, 1989), mientras que otros ciliados presentan mayor resistencia.
Es muy importante controlar y valorar los efectos del cloro en los ciliados, ya que este agente
desinfectante se utiliza en muchos casos como control qumico de fenmenos de crecimiento filamentoso. En
este caso, la sensibilidad de los protozoos frente al cloro se mide estudiando los porcentajes de supervivencia
para distintos tiempos de contacto (Esteban, 1989). La cloracin controlada de los caudales recirculados en el
reactor biolgico presenta una limitacin, en tanto que la comunidad biolgica no se debe destruir. Se debe
sopesar la eliminacin de filamentos, frente a la destruccin de la comunidad protozoaria. Empleando la
observacin microscpica durante la operacin de cloracin en planta, podemos obtener la dosificacin
adecuada para conseguir nuestro propsito. La observacin microscpica nos permitir valorar la forma celular,
locomocin y generacin de quistes de forma que encontremos la situacin ms apropiada.
138

Un parmetro operacional muy relacionado con los protozoos es la CM (Figura 11). Curds y Cockburm
(1970) sealan la necesidad de este estudio y consideran que puede ser estimada la relacin entre MLSS y CM
en funcin de los porcentajes de los grupos protozoarios presentes.

BAJA

ALTA

NO FORMACIN FLOCULAR

MLSS

CM

BUENA
SEDIMENTACIN

FLAGELADOS
NADADORES
AMEBAS
SSILES
ROTFEROS
REPTANTES
NEMATODOS

ROTURA FLOCULAR
ALTA

BAJA

Figura 11: Reparto de los porcentajes de grupos de microorganismos en funcin de las caractersticas operacionales.

Cuando el fango presenta buena actividad biolgica codominan los ciliados fijos con los reptantes,
complementndose en sus diferentes hbitos alimenticios. En situaciones de variaciones de carga o extracciones
fuertes de fangos, son los reptantes las poblaciones ms afectadas, por su situacin en la interfase del flculo.
En la bibliografa existen numerosas citas que relacionan los ciliados (Tabla 5) con determinadas
circunstancias. Se han recogido algunas de las ms significativas:

139

Tabla 5: Citas sobre bioindicacin asociadas a protozoos.

ESPECIE

CARACTERSTICAS

ABUNDANCIA DE FLAGELADOS Y FANGO INESTABLE, PURGAS INTERMITENTES; PRIMERAS FASES DE FORMACIN.

CILIADOS NADADORES
ACINETA CUSPIDATA

ASOCIADO AL DESARROLLO DE CILIADOS HOLOTRICOS E HIPOTRICOS.

AIREACIN PROLONGADA, ALTA EDAD DE FANGO. BUENAS CALIDADES DE
AGUA TRATADA.

AMEBAS DESNUDAS

FENMENOS DE ANAEROBIOSIS, RENDIMIENTOS POBRES EN PROCESOS DE ALTA

CARGA.

AMEBAS TESTCEAS

LODOS CON BAJA CARGA ORGNICA. POSIBLES PROCESOS DE NITRIFICACIN,

BUENA OXIGENACIN.

AMPHILEPTUS SP.

ALTAS CONCENTRACIONES DE OXGENO.

ASPIDISCA CICADA

BUEN RENDIMIENTO DEPURADOR EN PROCESOS DE BAJA Y MEDIA CARGA.

CARCHESIUM POLYPHINUM

BUENA CALIDAD DEL EFLUENTE.

CARCHESIUM SP.

GRANDES NECESIDADES DE OXGENO. MEDIA CARGA.

CHILODONELLA UNCINATA

ASOCIADO A BACTERIAS FILAMENTOSAS, DE LAS QUE SE ALIMENTA.

CILIADOS LIBRES DOMINANTES

FASE DE COLONIZACIN DEL FANGO, FALTA DE OXGENO, ALTA CARGA.

CINETOCHILUM MARGARITACEUM BAJA TOLERANCIA AL AMONIACO Y EN GENERAL A LOS COMPUESTOS

NITROGENADOS. BUENA DEPURACIN.
COLEPS HIRTUS

PREDADOR DE PROTOZOOS, BAJA TOLERANCIA AL AMONIO Y AL AMONIACO.

BUENA DEPURACIN.

COLPIDIUM SP.

PRIMERA FASE COLONIZACIN FANGO. CARGAS EXCESIVAS. ASOCIADO A

GLAUCOMA SCINTILAUS, TETHRAHYMENA PYRIFORMIS Y PARAMECIUM TRICHIUM.

COLPODA SP.

BAJAS CONCENTRACIONES DE OXGENO; ALTAS DE AMONIO.

CYCLIDIUM GLAUCOMA

PRIMERAS FASES DE COLONIZACIN. CARGA FUERTE. CORTO TIEMPO DE

RESIDENCIA.

DEXIOTRICHA COLPODIUPSIS

FASES DE PUESTA EN MARCHA. SOBRECARGAS DEL PROCESO.

EPISTYLIS SP.

MEDIA CARGA O AIREACIN PROLONGADA. LIGERA RESISTENCIA A VERTIDOS

PUNTUALES.

EUPLOTES SP.

BUENA CALIDAD DEL EFLUENTE. ASOCIADA A PLANTAS DE CARGA MUY BAJA.

LIGADO ESTRECHAMENTE A LA BUENA FORMACIN DEL FLCULO.

GLAUCOMA SCINTILLANS

ELEVADA TOLERANCIA AL DFICIT DE OXGENO.

GRANDES
DOMINANTES

FLAGELADOS AFLUENTES CON POCA CARGA ORGNICA.

HELIOZOOS

AGUAS RELATIVAMENTE LIMPIAS. BAJOS MLSS EN CUBAS.

HEMIOPHRYS BIVACUOLATA

ALTOS TIEMPOS DE PERMANENCIA DE FANGOS.

HEMIOPHRYS FUSIDENS

ASOCIADO A VORTICELLA CONVALLARIA COMO SU PREDADOR.

LEPTOPHARYNX EUGLENIVORA

ASOCIADO A ALTAS CONCENTRACIONES DE GRANDES FLAGELADOS. CARGA DE

ENTRADA POCO CONCENTRADA. NORMAL EN PLANTAS CON MATERIAL DE
ENTRADA DE VEGETALES EN DESCOMPOSICIN.

140

LITONOTUS SP.

CONCENTRACIONES DE OXGENO DE MS DE 1 ppm. SITUACIONES DE ALTA

CARGA.

NEMATODOS

ALTOS TIEMPOS DE RETENCIN; A ALTAS CONCENTRACIONES INDICA

DEGRADACIN DEL FANGO ACTIVO.

OPERCULARIA SP.

RESISTENTE AL DFICIT DE OXGENO. FANGOS MUY CONCENTRADOS, POCO

AIREADOS O CON RECIRCULACIONES LENTAS. DEPURACIN IMPERFECTA.
VERTIDOS TXICOS.

PARAMECIUM SP.

FANGO MAL OXIGENADO. FANGO JOVEN SOMETIDO A CARGAS FUERTES.

PEQUEOS
DOMINANTES

FLAGELADOS ESCASA CONCENTRACIN DE BACTERIAS FORMADORAS DE FLCULOS. FANGO

JOVEN. PERIODO TRANSITORIO POR SOBRECARGA, BAJA CONCENTRACIN DE
OXGENO, ENTRADAS DE MATERIAS FERMENTADAS.

PERIACINETA/ TOKOPHRYA SP.

ALTA EDAD DE FANGO Y BAJA CARGA. BUENOS NIVELES DE DEPURACIN.

PODOPHRYA FIXA

BAJA CALIDAD DE EFLUENTE, ALTAS EDADES DE FANGO.

ROTIFEROS

A BAJA CONCENTRACIN
OXIGENADOS.

SATHROPHILUS
OVIFORMIS

FANGOS

ESTABLES,

BIEN

FLOCULADOS

PUTRINUS/S PRIMERAS FASES DE COLONIZACIN. CARGAS FUERTES O TIEMPOS DE

RETENCIN BREVES.

STENTOR SP.

FUNCIONAMIENTO CORRECTO. PLANTAS ALIMENTADAS CON CARGAS MUY

DBILES.

SUCTORES

ALTO TIEMPO DE RETENCIN, FASE PREVIA DE PROLIFERACIN DE NADADORES.

CARNVOROS.

TETRAHYMENA/URONEMA SP.

FENMENOS DE FLOCULACIN; PROCESOS TRANSITORIOS DE ESTABILIZACIN

DEL FANGO ACTIVO. BAJO TIEMPO DE RETENCIN. ESCASA OXIGENACIN.

TRACHELOPHYLLUM PUSILLUM O REPTANTE. EN PROPORCIN SIMILAR CON ASPIDISCA, INDICA BUENA CALIDAD
ACINERIA UNCINATA
DEL AGUA TRATADA.
V SEPULCRETI/V ELONGATA

FANGO ESTABILIZADO.

VAGINICOLA SP.

EFLUENTES POCO CONCENTRADOS O DILUIDOS. AIREACIN PROLONGADA CON

MUY BAJA CARGA Y TIEMPOS DE RETENCIN ALTOS.

VORTICELLA CAMPANULA

EMPEORAMIENTO DE LA CALIDAD DEL FLCULO. FANGO MS DISGREGADO,

PRDIDAS EN DECANTACIN.

VORTICELLA CONVALLARIA

ASOCIADO CON ASPIDISCA CICADA EN FENMENOS

EXTRACCIN DE FANGOS EN LAS BALSAS. MEDIA CARGA.

VORTICELLA ESTRIATA

BUENAS CONDICIONES DE OXIGENACIN.

VORTICELLA MICROSTOMA

SITUACIONES TRANSITORIAS, CONCENTRACIONES ESCASAS DE OXGENO.

SUSTANCIAS TXICAS; PRIMERA FASE DE COLONIZACIN DEL LODO.

ZOOTHAMNIUM SP.

BUENA DEPURACIN Y EFLUENTES DE ALTA CALIDAD.

141

TRANSITORIOS

DE

Concluyendo, los trabajos experimentales han demostrado que los protozoos ciliados son esenciales
para la produccin de una buena calidad del efluente (Salvad, 2000). Una concentracin alta de ciliados, con
suficiente diversidad, puede ser indicativa de la alta eficacia del proceso. As, en plantas con gran abundancia y
diversidad de protozoos ciliados (>3.000 clulas/mL), con un mnimo de 6-8 especies de ciliados (Salvad,
2000), se consiguen buenos efluentes. Adems, es necesario establecer los entramados entre los distintos grupos
y valorar el sistema como un ecosistema dnde todas las partes participan. No obstante, si bien los protozoos
son buenos indicadores de la marcha del proceso, si existen alteraciones floculares debido a la proliferacin
masiva de bacterias filamentosas, se puede reducir la capacidad bioindicadora de estos organismos.
Es necesario conocer todas las posibilidades bioindicadoras de los organismos presentes y, junto con el
dato de densidad poblacional, valorar el papel representado en el ecosistema, y a partir de ah tomar una
decisin sobre las medidas a adoptar en el proceso.

142

BIBLIOGRAFA
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Pratt, J. R. y Cairns, J. (1985). Functional groups in the protozoa: Roles in differing ecosystems. J.
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Salvad, H. (2000). La microfauna en el tratamiento biolgico de aguas residuales mediante fangos
activados. Curso Microbiologa de los fangos activados. Universidad de Barcelona. Formaci
Continuada Les Heures.

143

Surez, J. (1997). La seleccin biolgica como mtodo de control del esponjamiento producido por
microorganismos filamentosos. Curso Microorganismos filamentosos en el fango activo. EMASESA,
Departamento de Aguas Residuales (1997).

144

CAPTULO 7.- LBUM FOTOGRFICO.

INTRODUCCIN
En este captulo se presenta una coleccin de lminas fotogrficas en las que se recogen imgenes de
protozoos, bacterias filamentosas y diversas circunstancias relacionadas con la observacin microscpica de un
fango activado.
Puesto que este material fotogrfico ha sido desarrollado con distintos sistemas de microfotografa tales
como cmaras fotogrficas, videocmaras, etc. y sometido posteriormente a un tratamiento de escaneado,
reduccin o ampliacin de tamao, la nica referencia en cuanto a tamao es la magnificacin empleada.
Lminas fotogrficas
Protozoos

Pequeos flagelados (lmima 1)

Peranema sp. (lmima 2)

Ameba desnuda (lmima 3)

Ameba desnuda (II) (lmima 4)

Arcella sp. (lmima 5)

Arcella sp. (II) (lmima 6)

Centropyxis sp. (lmima 7)

Centropyxis sp. (II) (lmima 8)

Cryptodifflugia sp. (lmima 9)

Heliozoo (lmima 10)

Vorticella convallaria (lmima 11)

Vorticella convallaria (II) (lmima 12)

145

Vorticella microstoma (lmima 13)

Vorticella microstoma (II) (lmima 14)

Epistylis sp. (lmima 15)

Opercularia sp. (lmima 16)

Vaginicola crystalina (lmima 17)

Vaginicola sp. (lmima 18)

Chilodonella sp. (lmima 19)

Chilodonella sp. (II) (lmima 20)

Litonotus sp. (lmima 21)

Trachelophyllum pusillum (Acineria uncinata) (lmima 22)

Paramecium caudatum (lmima 23)

Uronema sp. (lmima 24)

Uronema sp. (II) (lmima 25)

Stentor sp. (lmima 26)

Stentor sp. (II) (lmima 27)

Euplotes sp. (lmima 28)

Aspidisca cicada (lmima 29)

Suctorio (lmima 30)

Metacineta sp. (lmima 31)

Tokophrya sp. (lmima 32)

Podophrya sp. (lmima 33)

Rotaria sp. (lmima 34)

Philodina sp. (lmima 35)

Lecanus sp. (lmima 36)

146

Gastrotrico (lmima 37)

Nemtodo (lmima 38)

Aelosoma variegatum (lmima 39)

Tubo seminfero de anlido (lmima 40)

Organismos filamentosos

Tipo 0092 (lmina 41)

Tipo 021N (lmina 42)

Tipo 021N (II) (lmina 43)

Tipo 0041 (lmina 44)

Tipo 0675 (lmina 45)

Nostocoida limicola II (lmina 46)

Nostocoida limicola II (II) (lmina 47)

Nostocoida limicola III (lmina 48)

Thiothrix I (lmina 49)

Thiothrix II (lmina 50)

Thiothrix II (II) (lmina 51)

Nocardia sp. (lmina 52)

Nocardia sp. (II) (lmina 53)

Microthrix parvicella (lmina 54)

Microthrix parvicella (II) (lmina 55)

Sphaerotilus natans (lmina 56)

Sphaerotilus natans (II) (lmina 57)

Flexibacter sp. (lmina 58)

147

Flexibacter sp. (II) (lmina 59)

Tipo 1863 (lmina 60)

Bacillus sp. (lmina 61)

Beggiatoa sp. (lmina 62)

Hongo (lmina 63)

Otras observaciones microscpicas

El fenmeno de bulking viscoso (I) (lmina 64)

El fenmeno de bulking viscoso (II) (lmina 65)

El fenmeno de bulking viscoso (III) (lmina 66)

El fenmeno de bulking viscoso (IV) (lmina 67)

Proliferacin bacilar en el licor mezcla (lmina 68)

Biofilm en decantadores secundarios (lmina 69)

Biofilm en decantadores secundarios (II) (lmina 70)

Biofilm en decantadores secundarios (III) (lmina 71)

Diatomeas (lmina 72)

Diatomeas (II) (lmina 73)

Oocystis sp. (lmina 74)

Spirulina (lmina 75)

Evolucin del bulking filamentoso (lmina 76)

Evolucin del bulking filamentoso (II) (lmina 77)

Estructura flocular dispersa (lmina 78)

Crecimiento disperso local (lmina 79)

Crecimiento disperso (lmina 80)

148

Bacterias de crecimiento intraflocular (lmina 81)

Bacterias helicoidales (lmina 82)

Flculo con bacterias nitrificantes (lmina 83)

Bacterias del azufre (lmina 84)

Colonias de Zoogloea sp. (lmina 85)

Restos vegetales (lmina 86)

Fango activo de oxidacin total (lmina 87)

Influentes de depuradora, Chamaephypan sp. (lmina 88)

Influentes de depuradora (II), Flexibacter sp. (lmina 89)

Influentes de depuradora (III), Espirilos (lmina 90)

Influentes de depuradora (IV), Cyanophiceas (lmina 91)

Influentes de depuradora (V), Cyanophiceas (lmina 92)

Influentes de depuradora (VI), Thiocapsa sp. (lmina 93)

149

BIBLIOGRAFA
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Empresa General Valenciana del Agua, S.A. (EGEVASA), de la Exma. Diputacin de Valencia.
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activo. Publicacin de la Empresa Municipal de Abastecimiento y Saneamiento de Aguas de Sevilla,
S.A. (EMASESA).
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Streble, H. y Krauter, D. (1987). Atlas de los microorganismos de agua dulce. La vida en una gota de
agua. Ed.Omega, S.A. (Barcelona).

150

PROTOZOOS EN EL FANGO
ACTIVO.

SUBPHYLUM MASTIGOPHORA
Clase Phitomastigophora
Orden Euglenida
Clase Zoomastigophora
Orden Kinetoplastida
SUBPHYLUM SARCODINA
Clase Heterolobosea
Orden Schizopyreniida
Clase Lobosea
Subclase Gymnamoebia
Orden Euamoebida
Familia Amoebida
Familia Hartmannellidae
Subclase Testacealobosia
Orden Arcellinida
Suborden Arcellina
Familia Arcellidae
Suborden Difflugina
Familia Difflugidae
Clase Filosea
Orden Gromiida
Suborden Euglyphina
Familia Euglyphidae
Clase Heliozoa

PHYLUM SARCOMASTIGOPHORA

PROTOZOOS

SISTEMTICA

Clase Kinetofragminophora
Subclase Gymnostomatia (Litostomatea)
Orden Prostomatida
Suborden Prodorontina
Familia Colepidae
Orden Haptorida
Familia Spathidiidae
Familia Trachelophyllidae
Orden Pleurostomatida
Familia Amphileptidae
Subclase Vestibuliferia
Subclase Hypostomatia
Orden Nassulida
Orden Cyrtophorida
Familia Chilodonellidae
Subclase Suctoria
Orden Suctorida
Suborden Exogenina
Familia Podophryidae
Suborden Endogenina
Familia Acinetidae
Familia Tokopryidae
Clase Oligohymenophora
Subclase Hymenostomatia
Orden Hymenostomatida
Suborden Tetrahymenina
Familia Tetrahymenidae
Familia Glaucomidae
Familia Turaniellidae

PHYLUM CILLIOPHORA

Clase Oligohymenophora
Subclase Hymenostomata
Orden Hymenostomatida
Suborden Peniculina
Familia Parameciidae
Orden Scuticociliatida
Suborden Philasterina
Familia Uronematidae
Familia Loxocephalidae
Familia Cinetochilidae
Suborden Pleuronematina
Orden Astomatida
Subclase Peritrichia
Orden Peritrichida
Familia Vorticellidae
Familia Epistylididae
Familia Operculariidae
Familia Vaginicolidae
Clase Polymenophorea
Subclase Spirotrichia
Orden Heterotrichida
Familia Spirostomatida
Familia Metopidae
Orden Hypotrichida
Familia Oxytrichidae
Familia Aspidiscidae
Familia Euplotidae

PHYLUM CILLIOPHORA (continuacin)

SISTEMTICA segn Microbiologa de la depuracin mediante fangos activos de EGEVASA, 1998.

Clase Polichaeta
Clase Oligochaeta
Clase Hirudinea

PHYLUM ANELLIDA

PHYLUM NEMATODA

Orden Bdelloidea
Familia Adinetidae
Familia Philodinidae
Orden Ploimida
Familia Brachionidae
Familia Dicranophoridae
Familia Lecanidae
Familia Notommatidae

PHYLUM ROTIFERA

Orden Macrodasioideos
Orden Quetonoideos

PHYLUM GASTROTRICHA

METAZOOS

METAZOOS

CILIADOS

RHIZPODOS

FLAGELADOS

ROTFEROS
GASTROTRICOS
NEMTODOS
ANLIDOS

PERITRICOS
HOLOTRICOS
ESPIROTRICOS
SUCTORIOS

AMEBOIDES
TECAMEBOIDES
HELIOZOOS

ZOOFLAGELADOS
EUGLENFITOS

NDICE

EUGLENFITOS

ZOOFLAGELADOS

FLAGELADOS:

GNERO. Bodo, p. ej.

ORDEN. Kinetoplastida.

CLAVE IDENTIFICATIVA. El pequesimo tamao y el movimiento.

ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS.

LMINA 1

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Aparecen en las fases iniciales de colonizacin de un fango activo. No obstante, si aparecen en fangos de cierta
madurez indican un empeoramiento en el estado de depuracin del sistema.

ALIMENTACIN. Carecen de cloroplastos o estructuras fotosintticas, por lo que se les considera hetertrofos.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

TAMAO. 5-12 m.

MOVIMIENTOS LOCOMOTORES. Movimientos espasmdicos.

FORMA CORPORAL. Redondeado o alargado con uno o dos flagelos.

CARACTERSTICAS FUNCIONALES

CLASE. Zoomastigophora.

GRUPO. Protozoo Sarcomastigophora (Mastigophora).

CARACTERSTICAS TAXONMICAS

In vivo

400x . Campo claro.

Organismo: Pequeos flagelados.

ZOOFLAGELADOS

GNERO.Peranema sp.

ORDEN. Euglenida.

CLAVE IDENTIFICATIVA. Desplazamiento del flagelo y plegamiento del

cuerpo.

ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS.

LMINA 2

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Carga orgnica dbil y baja oxigenacin en el reactor. No obstante, compatibles con buenos rendimientos en la
depuracin.

ALIMENTACIN. Hetertrofo.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

TAMAO. 40-70 m.

MOVIMIENTOS LOCOMOTORES. Desplazamiento del flagelo en el

sentido del desplazamiento, del que tan slo el extremo distal serpentea.

FORMA CORPORAL. Cuerpo alargado y fcilmente deformable.

CARACTERSTICAS FUNCIONALES

CLASE. Phitomastigophora.

GRUPO. Protozoo Sarcomastigophora (Mastigophora).

CARACTERSTICAS TAXONMICAS

In vivo

400x . Campo claro.

Organismo: Peranema sp.

EUGLENFITOS

HELIOZOOS

TECAMEBOIDES

AMEBOIDES

RHIZPODOS:

GNERO. Amoeba.

ORDEN. Euamoebida.

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Bajos rendimientos; a elevadas concentraciones implica la entrada de vertidos difcilmente degradables.

ALIMENTACIN. Prcticamente omnvora (bacterias, protozoos, etc.).

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

LMINA 3

CLAVE IDENTIFICATIVA. Se distingue la capa hialina en los pseudpodos,

no tienen teca.

ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS. Pseudpodos; un solo ncleo granular.

TAMAO. 300-600 m.

MOVIMIENTOS LOCOMOTORES. Mediante pseudpodos en la direccin

del movimiento.

FORMA CORPORAL. Polipoidal con pseudpodos.

CARACTERSTICAS FUNCIONALES

CLASE. Lobosea (Gymnamoebia).

GRUPO. Protozoo Sarcomastigophora (Sarcodina).

CARACTERSTICAS TAXONMICAS

In vivo

400x . Contraste de fases.

Organismo: Ameba desnuda.

AMEBOIDES

In vivo.

400x. Campo claro.

Organismo: Ameba
(continuacin).

desnuda

LMINA 4

AMEBOIDES

GNERO. Arcella.

ORDEN. Arcellinida (Arcellina).

CLAVE IDENTIFICATIVA. Abertura central con proyecciones, cuerpo

interior visible.

ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS. Testa exterior y pseudpodos.

TAMAO. 45-200 m.

LMINA 5

OBSERVACIONES. Dentro de este gnero existen tres especies similares en cuanto a su aspecto. A. vulgaris, A. hemisphaerica y A. discoides. La principal
diferencia estriba en la vista de perfil de cada una de ellas. en forma de casco (A. vulgaris), con forma semiesfrica (A. hemisphaerica) y muy aplanada (A. discoides).
El tamao oscila entre 100 -145 m de dimetro y 50-70 m de altura.

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. En general, buenos rendimientos de depuracin; a elevadas concentraciones indica fenmenos de nitrificacin.

ALIMENTACIN. Otros protozoos.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

MOVIMIENTOS LOCOMOTORES. A travs de pseudpodos.

FORMA CORPORAL. Pequea, redondeada; cobertura rgida.

CARACTERSTICAS FUNCIONALES

CLASE. Lobosea (Testacealobosia).

GRUPO. Protozoo Sarcomastigophora (Sarcodina).

CARACTERSTICAS TAXONMICAS

In vivo.

400x . Contraste de fases.

Organismo: Arcella sp.

TECAMEBOIDES

In vivo.

LMINA 6

400x . Campo claro, Campo claro y Contraste de

fases, respectivamente.

Organismo: Arcella sp.

TECAMEBOIDES

GNERO. Centropyxis.

ORDEN. Euamoebida.

CLAVE IDENTIFICATIVA. Espinas de la teca.

ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS. Cobertura con grnulos minerales,

LMINA 7

OBSERVACIONES. Es caracterstica de estas tecamebas las prolongaciones a modo de espinas que le sobresalen. Su identificacin a nivel de especie se realiza en
funcin del nmero de espinas externas y de su localizacin. As, C. aculeata presenta entre 2 y 8 espinas en la parte posterior, con aparicin o no de espinas en la
parte anterior. C. discoides presenta espinas dispuestas irregularmente. Tamao 120-180 m .

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Buena calidad de depuracin.

ALIMENTACIN. Algas verdes, diatomeas, algas filamentosas, flagelados y ciliados.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

TAMAO. 50-260 m.

coloreada marrn y con espinas testceas .

MOVIMIENTOS LOCOMOTORES. Por pseudpodos.

FORMA CORPORAL. Testa esfrica u ovoide.

CARACTERSTICAS FUNCIONALES

CLASE. Lobosea (Gymnamoebia).

GRUPO. Protozoo Sarcomastigophora (Sarcodina).

CARACTERSTICAS TAXONMICAS

In vivo

200x. Campo claro.

Organismo: Centropyxis sp.

TECAMEBOIDES

In vivo

400x. Contraste de fases y campo claro,

respectivamente.

Organismo: Centropyxis sp.

LMINA 8

TECAMEBOIDES

GNERO. Cryptodifflugia.

ORDEN. Arcellinida (Difflugina).

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Elevada edad celular y no por ello relacionada con buenos rendimientos en la depuracin.

ALIMENTACIN.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

LMINA 9

CLAVE IDENTIFICATIVA. Es una tecameba de pequeo tamao.

ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS. Pseudpodos lobulados.

TAMAO. 10-20 m.

MOVIMIENTOS LOCOMOTORES. Mediante pseudpodos.

FORMA CORPORAL. Caparazn cristalino en cuyo interior se distingue el ncleo.

CARACTERSTICAS FUNCIONALES

CLASE. Lobosea (Testacealobosia).

GRUPO. Protozoo Sarcomastigophora (Sarcodina).

CARACTERSTICAS TAXONMICAS

In vivo

1000x . Campo claro.

Organismo: Cryptodifflugia sp.

TECAMEBOIDES

OBSERVACIONES. Aunque existen especies de heliozoos que son ssiles, la mayora se encuentra libre en el medio acutico, arrastradas por la corriente.

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Con escaso significado, son habituales en procesos de fangos activos muy poco concentrados.

ALIMENTACIN. Predadores de algas, ciliados y flagelados.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

LMINA 10

CLAVE IDENTIFICATIVA. Axopodios radiales que le confieren

aspecto estrellado.

ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS. Axopodios (pseudpodos largos y finos)

orientados de forma radial; ncleo excntrico.

TAMAO. 20-60 m.

MOVIMIENTOS LOCOMOTORES. Ausentes, son arrastrados por corrientes

CLASE. Heliozoa.

FORMA CORPORAL. Esfrica e hialina y rodeada de axopodios.

CARACTERSTICAS FUNCIONALES

GRUPO. Protozoo Sarcomastigophora (Sarcodina).

CARACTERSTICAS TAXONMICAS

In vivo

400x . Campo claro.

Organismo: Heliozoo.

HELIOZOOS

SUCTORIOS

ESPIROTRICOS

HOLOTRICOS

PERITRICOS

CILIADOS:

GNERO. Vorticella.

ORDEN.Peritrichida.

CLAVE IDENTIFICATIVA. Pednculo fino y forma acampanada.

ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS. Vacuola contrctil prxima al citostoma y

OBSERVACIONES. Este organismo es gregario, encontrndosele fcilmente formando pseudocolonias (siguiente fotografa).
LMINA 11

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Asociado a condiciones de buena aireacin en el reactor pero cuando aparece en pequeas proporciones se
le asocia a condiciones transitorias; no obstante son compatibles con una buena depuracin. Puede aparecer como organismo dominante ante condiciones de mala
floculacin.

ALIMENTACIN. Bacterifago.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

TAMAO. 30-120 m.

abundantes vacuolas alimentarias; ncleo nastriforme.

MOVIMIENTOS LOCOMOTORES. Ausencia (organismo ssil).

FORMA CORPORAL. Acampanada y esbelta con pednculo alargado (100-500 m).

CARACTERSTICAS FUNCIONALES

ESPECIE. Vorticella convallaria.

CLASE. Oligohymenophora (Peritrichia).

GRUPO. Protozoo Cilliophora.

CARACTERSTICAS TAXONMICAS

In vivo

400x. Campo claro.

Organismo: Vorticella convallaria.

PERITRICOS

Vorticella convallaria no forma colonias, pero por lo general vive en grupos parecidos a stas, es decir, es
una especie gregaria.

OBSERVACIONES:

In vivo

100x. Contraste de fases.

Organismo: Vorticella convallaria.

LMINA 12

PERITRICOS

FAMILIA. Vorticellidae.
ESPECIE. Vorticella microstoma.

ORDEN. Peritrichida.

GNERO. Vorticella.

anchura que el cuerpo; pednculo fino de aprox. 6 veces la longitud del cuerpo.

borde del peristoma; ncleo claramente diferenciable.

LMINA 13

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Organismo polisaprobio; efluentes de baja calidad; habitual en el proceso de fangos activos. Tambin se le
atribuye el carcter de mal indicador por la versatilidad de ambientes en que se desarrolla, aunque en general suele hacerlo en fangos en formacin.

ALIMENTACIN. Bacterias libres.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

TAMAO. 35-83 m.

CLAVE IDENTIFICATIVA. Constriccin en zona anterior al peristoma de menor

ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS. Grnulos en el endoplasma; estriacin en el

FORMA CORPORAL. Campana invertida con pednculo fino anclado al sustrato. MOVIMIENTOS LOCOMOTORES. Ausencia (organismo ssil).

CARACTERSTICAS FUNCIONALES

CLASE. Oligohymenophora (Peritrichia).

GRUPO. Protozoo Cilliophora.

CARACTERSTICAS TAXONMICAS

In vivo

400x. Contraste de fases.

Organismo: Vorticella microstoma.

PERITRICOS

In vivo

400x. Contraste de fases.

Organismo: Vorticella microstoma.

LMINA 14

PERITRICOS

FAMILIA. Epistylididae.

ORDEN. Peritrichida.

duos de forma independiente. Pednculo estriado longitudinalmente.

TAMAO. 70-90 m; las colonias pueden ser de has ta 2-3 mm.

NOTA. Al punzar una colonia de Epistylis, la retraccin no es comn, sino independiente para cada individuo sin que exista repliegue en los pednculos.

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Media carga; proliferan con determinados vertidos industriales.

ALIMENTACIN. Bacterias libres.

LMINA 15

CLAVE IDENTIFICATIVA. La colonia no es contrctil, pero si los indivi-

ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS.Labio y boca igual de anchos que el cuerpo.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

MOVIMIENTOS LOCOMOTORES. No existen (organismo ssil)

FORMA CORPORAL. Organismo colonial; pednculo ramificado.

CARACTERSTICAS FUNCIONALES

GNERO. Epistylis.

CLASE. Oligohymenophora (Peritrichia).

GRUPO. Protozoo Cilliophora.

CARACTERSTICAS TAXONMICAS

Verde de metilo

400x . Campo claro.

Organismo: Epistylis sp.

PERITRICOS

FAMILIA. Operculariidae.

ORDEN. Peritrichida.

individuos de la colonia; a nivel especies, el pednculo es una caracterstica diferenciadora;

estrechamiento en la parte superior del cuerpo sin forma de embudo.

bloquea el citostoma.

TAMAO. 45-50 m.

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Oxigenacin insuficiente en el reactor; si su aparicin es masiva, indica condiciones cambiantes; si la
colonizacin del fango es casi exclusiva de este organismo, indica influentes industriales.

ALIMENTACIN. Bacterias libres.

LMINA 16

CLAVE IDENTIFICATIVA. Presencia de oprculo; incapacidad de contraccin de los

ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS. Disco peristomal con forma de oprculo que

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

MOVIMIENTOS LOCOMOTORES. Ausentes (organismo ssil).

FORMA CORPORAL. Cuerpo alargado y ms estrecho en la parte superior.

CARACTERSTICAS FUNCIONALES

GNERO. Opercularia.

CLASE. Oligohymenophora (Peritrichia).

GRUPO. Protozoo Cilliophora.

CARACTERSTICAS TAXONMICAS

In vivo

400x. Campo claro.

Organismo: Opercularia sp.

PERITRICOS

FAMILIA. Vaginicolidae.
ESPECIE. Vaginicola crystallina.

ORDEN. Peritrichida.

GNERO. Vaginicola.

CLAVE IDENTIFICATIVA. Presencia de la lriga con dos individuos

interiores que normalmente presentan distinto tamao.

ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS. Lriga cnica anclada al sustrato.

LMINA 17

NOTA sobre el Gnero Vaginicola. Este organismo presenta el extremo posterior fijado a la base de un caparazn llamado lriga de aspecto alargado y cilndrico
que es la estructura que se fija al sustrato. Una misma lriga puede albergar a uno o dos individuos con capacidad contrctil, que se sujetan al caparazn mediante
un corto pednculo. Los individuos pueden albergar en su citoplasma varias zooclorelas.

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Buenos rendimientos en la depuracin; asociado a bajas cargas msicas y altos tiempos de retencin celular.

ALIMENTACIN. Bacterias.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

TAMAO. 55-70 m.

MOVIMIENTOS LOCOMOTORES. No existen (organismo ssil).

FORMA CORPORAL. Caparazn externo con dos individuos en su interior ssiles.

CARACTERSTICAS FUNCIONALES

CLASE. Oligohymenophora (Peritrichia).

GRUPO. Protozoo Cilliophora.

CARACTERSTICAS TAXONMICAS

In vivo

200x . Contraste de fases.

Organismo: Vaginicola crystalina

PERITRICOS

In vivo

400x. Contraste de fases.

Organismo: Vaginicola sp.

LMINA 18

PERITRICOS

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Indicador de bajo tiempo de residencia de fangos.

ALIMENTACIN. Bacterias y algas.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

LMINA 19

aspecto de gorra si se mira de perfil.

redondeado y numerosas vacuolas contrctiles.

TAMAO. 25-70 m.

CLAVE IDENTIFICATIVA. Pico sobresaliente del cuerpo celular;

ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS. Citofaringe caracterstica; macroncleo

cuerpo aplanado y ciliado por la parte ventral (base deslizante).

FORMA CORPORAL. Forma ovalada, con pico dbilmente sobresaliente curvado;

CARACTERSTICAS FUNCIONALES
MOVIMIENTOS LOCOMOTORES. S

FAMILIA. Chilodonellidae.

ORDEN. Cyrtophorida.

GNERO. Chilodonella.

CLASE. Kinetofragminophora (Hypostomatia).

GRUPO. Protozoo Cilliophora.

CARACTERSTICAS TAXONMICAS

In vivo

100x. Contraste de fases.

Organismo: Chilodonella sp.

HOLOTRICOS

In vivo

400x. Campo claro.

Organismo: Chilodonella sp.

LMINA 20

HOLOTRICOS

GNERO. Litonotus.

ORDEN. Pleurostomatida.

CLAVE IDENTIFICATIVA. ciliacin somtica a la derecha;

2 macroncleos y un microncleo; vacuola contrctil terminal.

ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS. Cuello en forma de pico con citostoma lateral .

TAMAO. 80-100 m.

LMINA 21

OBSERVACIONES. Los cilios laterales as como la forma en botella son caractersticos de este gnero.Tres especies son L. fasciola (100 m de tamao; ms
esbelto que L. lamella), L. lamella (200 m de tamao) y L. cygnus (un cuello muy largo, de hasta 500 m ; de rara aparicin).

concentraciones. A elevadas concentraciones indican deterioro del sistema.

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Altas concentraciones de oxgeno, bajas concentraciones de H2S; estabilidad ecolgica si aparecen a bajas

ALIMENTACIN. Carnvoro de ciliados y flagelados.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

MOVIMIENTOS LOCOMOTORES. Nadador potente.

FORMA CORPORAL. Forma de botella alargada y aplanada.

CARACTERSTICAS FUNCIONALES

CLASE. Kinetofragminophora (Gymnostomatia).

GRUPO. Protozoo Ciliophora.

CARACTERSTICAS TAXONMICAS

Verde de metilo para la tincin de ncleos

400x . Campo claro.

Organismo: Litonotus sp.

HOLOTRICOS

FAMILIA. Trachelophyllidae.
ESPECIE. Acineria uncinata (anteriormente Trachelophyllum pusillum).

ORDEN. Haptorida.

GNERO. Trachelophyllum.

CLAVE IDENTIFICATIVA. Vacuola terminal contrctil; dos macroncleos

citofaringe estrecha de seccin circular.

ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS. Ciliacin bucal alargada y claramente visible;

dos macroncleos esfricos (cada uno con microncleo prximo); vacuola contrctil.

LMINA 22

NOTA. El Profesor Paolo Madoni (Universidad de Parma, Italia) ha informado de que Trachelophyllum pusillum se denomina en la actualidad Acineria uncinata,
incluyndose en el grupo de los ciliados reptantes y no de los nadadores libres.

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Fangos en estado de trnsito; beta-mesosaprobio.

ALIMENTACIN. Bacterifago.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

TAMAO. 40-50 m.

MOVIMIENTOS LOCOMOTORES. Nadador activo/ reptante.

FORMA CORPORAL. Cuerpo elongado en forma de botella muy flexible.

CARACTERSTICAS FUNCIONALES

CLASE. Kinetofragminophora (Gymnostomatia).

GRUPO. Protozoo Cilliophora.

CARACTERSTICAS TAXONMICAS

In vivo

400x . Contraste de fases.

Organismo: Trachelophyllum pusillum

(Acineria uncinata)

HOLOTRICOS

FAMILIA. Parameciidae.
ESPECIE. Paramecium caudatum.

ORDEN. Hymenostomatida (Peniculina).

GNERO. Paramecium.

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Presencia espordica en fangos en formacin, con carga alta y buena oxigenacin.

ALIMENTACIN. Bacterifago.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

LMINA 23

CLAVE IDENTIFICATIVA. Depresin que se entiende desde el extremo

anterior hasta el vestbulo oral; extremo posterior fusiforme.

ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS. dos vacuolas pulstiles estrelladas;

cilios alargados en extremo posterior; macroncleo y microncleo

TAMAO. 180-300 m.

MOVIMIENTOS LOCOMOTORES. Nadador, trayectorias helicoidales.

FORMA CORPORAL. Forma esbelta, alargada con extremo posterior fusiforme.

CARACTERSTICAS FUNCIONALES

CLASE. Oligohymenophora (Hymenostomatia).

GRUPO. Protozoo Cilliophora.

CARACTERSTICAS TAXONMICAS

In vivo

400x . Campo claro.

Organismo: Paramecium caudatum.

HOLOTRICOS

LMINA 24

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Buena calidad de salida del efluente. Cuando est presente en altas densidades indica buena depuracin por
reduccin de DQO, DBO y NH4 .

ALIMENTACIN. Bacterifago.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

TAMAO. 30-50 m.

vacuola terminal contrctil; macroncleo esfrico.

ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS. Ciliaciones laterales densas y largo cilio caudal; CLAVE IDENTIFICATIVA. Largo cilio caudal y vacuola contrctil.

FORMA CORPORAL. Ovalada y arrionada.

MOVIMIENTOS LOCOMOTORES. Rpidos y en todas direcciones.

GNERO. Uronema.

ORDEN. Scuticociliatida (Philasterina).

CARACTERSTICAS FUNCIONALES

CLASE. Oligohymenophora (Hymenostomatia).

GRUPO. Protozoo Cilliophora.

CARACTERSTICAS TAXONMICAS

In vivo

400x . Campo claro.

Organismo: Uronema sp.

HOLOTRICOS

In vivo

400x .Contraste de fases.

Organismo: Uronema sp.

LMINA 25

HOLOTRICOS

GNERO. Stentor.

ORDEN. Heterotrichida.

CLAVE IDENTIFICATIVA. Su capacidad de extenderse y de adquirir la

forma de trompeta (anclada por su parte posterior) con un volumen 4 veces
mayor que la forma contraida (sin anclar al sustrato).

ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS. Ncleo celular en forma de collar de cuentas;

pigmentos en grnulos pigmentarios que le confieren color verde-azulado;
corona ciliar rodeando el rea peristomtica.

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Presente en sistemas de depuracin de bajas cargas orgnicas.

ALIMENTACIN. Partculas en suspensin.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

LMINA 26

se contrae y dilata, pero no es nadador.

tras la ingesta de agua, que se distribuye en vacuolas por todo el cuerpo.

TAMAO. 1-2 mm.

MOVIMIENTOS LOCOMOTORES. Durante la fase de estado contraido

FORMA CORPORAL. Muy contrctil ,cambiando de redonda a forma de trompeta

CARACTERSTICAS FUNCIONALES

CLASE. Polymenophorea (Spirotrichia).

GRUPO. Protozoo Cilliophora.

CARACTERSTICAS TAXONMICAS

In vivo.

100x . Campo claro.

Organismo: Stentor sp.

ESPIROTRICOS

Stentor sp. durante la fase contrada (A) e instantes antes de pasar a la fase
extendida (B).

In vivo.

100x . Campo claro.

Organismo: Stentor sp.

LMINA 27

ESPIROTRICOS

GNERO. Euplotes.

ORDEN. Hypotrichida.

se distinguen bien los cirros ventrales.

que se dirige hasta cerca de la zona de cirros transversales.

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Buen bioindicador, asociado a efluentes de buena calidad.

ALIMENTACIN. Bacterifago.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

LMINA 28

CLAVE IDENTIFICATIVA. Sus movimientos y la vista de perfil, en la que

ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS. Campo peristomtico y zona de membranelas

TAMAO. 80-150 m.

MOVIMIENTOS LOCOMOTORES. Rpidos, a saltos y de forma rotatoria.

FORMA CORPORAL. Lado ventral aplanado y lado dorsal poco abombado.

CARACTERSTICAS FUNCIONALES

CLASE. Polymenophorea (Spirotrichia).

GRUPO. Protozoo Cilliophora.

CARACTERSTICAS TAXONMICAS

In vivo

400x . Campo claro.

Organismo: Euplotes sp.

ESPIROTRICOS

GNERO. Aspidisca.

ORDEN. Hypotrichida.

CLAVE IDENTIFICATIVA. Los cinco cirros transversales que emplea

para desplazarse como si fueran patas.

ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS. Costillas en el lado dorsal y cirros en el lado

ventral.

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Buen biondicador, al ser caracterstico de fangos bien estabilizados.

ALIMENTACIN. Bacterifago.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

LMINA 29

y nadan en los espacios libres.

motrices.

TAMAO. 25-40 m.

MOVIMIENTOS LOCOMOTORES. Deslizamiento rpido sobre flculos

FORMA CORPORAL. Lado dorsal abombado y ventral aplanado con cirros

CARACTERSTICAS FUNCIONALES

ESPECIE. Aspidisca cicada.

CLASE. Polymenophorea (Spirotrichia).

GRUPO. Protozoo Cilliophora.

CARACTERSTICAS TAXONMICAS

In vivo

400x . Campo claro.

Organismo: Aspidisca cicada.

ESPIROTRICOS

MOVIMIENTOS LOCOMOTORES. No existe (organismo ssil).

CLASE. Kinetofragminophora (Suctoria).

as como su nmero.

OBSERVACIONES. Ciliados caractersticos por la ausencia de cilios y de estructuras bucales que sustituyen por tentculos para alimentarse. Los gneros ms
comunes son Tokophrya y Acineta, ambos con tentculos agrupados. Podophrya presenta tales tentculos distribuidos por todo el cuerpo.

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Edades avanzadas de fango. Al ser los ltimos eslabones de la cadena alimentaria, indican estabilidad
ecolgica.

ALIMENTACIN. Otros protozoos, al ser carnvoros.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

TAMAO.60-300 m.

cilios.

LMINA 30

ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS. Fascculos similares a tentculos; no presentan CLAVE IDENTIFICATIVA. Forma corporal y agrupacin de los fascculos.

FORMA CORPORAL. Cuerpo en forma cnica.

CARACTERSTICAS FUNCIONALES

ORDEN. Suctorida.

GRUPO. Protozoo Cilliophora.

CARACTERSTICAS TAXONMICAS

In vivo

100x . Contraste de fases.

Organismo: Suctorio.

SUCTORIOS

FAMILIA. Acinetidae.

ORDEN. Suctorida (Endogenina).

LMINA 31

CLAVE IDENTIFICATIVA. Lriga en maza, caparazn no comprimido

a diferencia con las especies de Acineta.

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Asociado a altos tiempos de residencia con poblaciones asociadas de ciliados nadadores.

ALIMENTACIN. Carnvoro.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

TAMAO. 60-700 m

ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS. Fascculos distribuidos en 4 grupos .

FORMA CORPORAL. Cuerpo celular redondeado con pednculo medianamente largo. MOVIMIENTOS LOCOMOTORES. No.

CARACTERSTICAS FUNCIONALES

GNERO. Metacineta.

CLASE. Kinetofragminophora (Suctoria).

GRUPO. Protozoo Cilliophora.

CARACTERSTICAS TAXONMICAS

In vivo

100x . Contraste de fases.

Organismo: Metacineta sp.

SUCTORIOS

GNERO. Tokophrya.

ORDEN. Suctorida (Endogenina)

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Alta edad de fangos en condiciones alfa y beta-mesosaprobias.

ALIMENTACIN. Carnvoro.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

TAMAO. 40-60 m.

LMINA 32

CLAVE IDENTIFICATIVA. Ausencia de lriga; fascculos de tentculos.

ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS. Macroncleo central; tentculos

tanto en fascculos agrupados como sin agrupar.

MOVIMIENTOS LOCOMOTORES. No.

FORMA CORPORAL. Piramidal con pednculo corto

CARACTERSTICAS FUNCIONALES

CLASE. Kinetofragminophora (Suctoria).

GRUPO. Protozoo Cilliophora.

CARACTERSTICAS TAXONMICAS

In vivo

400x . Campo claro.

Organismo: Tokophrya sp.

SUCTORIOS

FAMILIA. Exogenina.

ORDEN. Suctorida.

estriado transversalmente; tentculos dispersos por la superficie corporal.

vacuola contrctil; nunca presentan lriga; macroncleo esfrico.

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Elevados tiempos de retencin celular; beta-mesosaprobio.

ALIMENTACIN. Carnvoro.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

LMINA 33

CLAVE IDENTIFICATIVA. Pednculo poco ms largo que el cuerpo y

ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS. Fascculos terminados en botn; una sola

TAMAO. 50-70 m.

MOVIMIENTOS LOCOMOTORES. No.

FORMA CORPORAL. Esfrica, con pednculo ligeramente ms largo y estriado.

CARACTERSTICAS FUNCIONALES

GNERO. Podophrya.

CLASE. Kinetofragminophora (Suctoria).

GRUPO. Protozoo Cilliophora.

CARACTERSTICAS TAXONMICAS

In vivo.

400x . Campo claro.

Organismo: Podophrya sp.

SUCTORIOS

ANLIDOS

NEMTODOS

GASTROTRICOS

ROTFEROS

METAZOOS:

FAMILIA. Philodinidae.

ORDEN. Bdelloidea.

o ms.

en forma alargada; dos manchas oculares en zona dorsal; 3 dedos.

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Elevadas edades de fango, buena calidad del agua tratada.

ALIMENTACIN. Detritus.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

LMINA 34

CLAVE IDENTIFICATIVA. Forma bucal alargada y pie con 5 elementos

ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS. Pie con 5-6 elementos y estructura bucal

TAMAO. 250-1.000 m.

MOVIMIENTOS LOCOMOTORES. Por plegamientos.

FORMA CORPORAL. Alargada; color pardo, cubierto de detritus.

CARACTERSTICAS FUNCIONALES

GNERO. Rotaria.

FILUM. Rotifera.

GRUPO. Metazoo.

CARACTERSTICAS TAXONMICAS

In vivo

100x . Campo claro.

Organismo: Rotaria sp.

ROTFEROS

FAMILIA. Philodinidae.

ORDEN. Bdelloidea.

CLAVE IDENTIFICATIVA. Pie con 3-4 elementos.

ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS. Dos manchas oculares; cutcula torcica fina

LMINA 35

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. La presencia de Philodina en los sistemas de depuracin biolgica est condicionada por la edad del fango
que deber ser alta y la carga dbil (condiciones caractersticas de la aireacin prolongada).

ALIMENTACIN. Detritvora.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

TAMAO. 100-500 m.

y lisa y 4 dedos en el pie.

MOVIMIENTOS LOCOMOTORES. Por plegamiento.

FORMA CORPORAL. Ms ancha que Rotaria.

CARACTERSTICAS FUNCIONALES

GNERO. Philodina.

FILUM. Rotifera.

GRUPO. Metazoos.

CARACTERSTICAS TAXONMICAS

In vivo

400x . Campo claro.

Organismo: Philodina sp.

ROTFEROS

FAMILIA. Lecanidae.

ORDEN. Ploimida.

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Procesos muy estabilizados; en nmero controlado indican eficiencia en la depuracin.

ALIMENTACIN. Bacterias.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

TAMAO. 200-300 m.

CLAVE IDENTIFICATIVA. Su aspecto globoso o redondeado;

ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS. Pie corto con 1-2 dedos (para sujecin).

un solo elemento libre terminado en 1-2 dedos.

MOVIMIENTOS LOCOMOTORES. Contraccin

FORMA CORPORAL. Cuerpo redondeado con caparazn externo en dos placas

CARACTERSTICAS FUNCIONALES

GNERO. Lecane sp.

FILUM. Rotfera.

GRUPO. Metazoo.

CARACTERSTICAS TAXONMICAS

In vivo

200x . Campo claro.

Organismo: Lecanus sp.

LMINA 36

ROTFEROS

GNERO. Chaetonus.

ORDEN. Quetonoideos.

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Edades avanzadas de fango.

ALIMENTACIN. Protozoos, diatomeas, algas y detritos.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

TAMAO. 70-500 m.

LMINA 37

CLAVE IDENTIFICATIVA. Dos prolongaciones muy caractersticas en la zona

ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS. Cuerpo cubierto por pelos.

caudal con forma de dedos o espinas.

MOVIMIENTOS LOCOMOTORES. Muy activo por deslizamiento y retorcimiento.

FORMA CORPORAL. Porcin ceflica claramente definida

CARACTERSTICAS FUNCIONALES

FILUM. Gastrotricha.

GRUPO. Metazoo.

CARACTERSTICAS TAXONMICAS

In vivo

200x . Campo claro.

Organismo: Gastrotrico.

GASTROTRICOS

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Elevada edad de fangos.

ALIMENTACIN. Predadores de protozoos.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

LMINA 38

CLAVE IDENTIFICATIVA. Gusano plano de importante tamao.

ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS. Son organismos complejos (tejidos).

TAMAO. 0,5-2 mm.

MOVIMIENTOS LOCOMOTORES. Por deslizamiento y retorcindose.

FILUM. Nematoda.

FORMA CORPORAL. Gusano plano.

CARACTERSTICAS FUNCIONALES

GRUPO. Metazoos.

CARACTERSTICAS TAXONMICAS

In vivo

100x . Campo claro.

Organismo: Nematodo.

NEMTODOS

FAMILIA. Aelosomatidae.

CLASE. Oligochaeta.

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Altas edades de fango; buenos rendimientos en la depuracin.

ALIMENTACIN. Bacterias, algas y detritus.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

TAMAO. 1,5-4 mm.

LMINA 39

CLAVE IDENTIFICATIVA. Gusano de gran tamao rodeado de quetas.

ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS. Vacuolas de color rojo; quetas dorsales

agrupadas en penachos de 3 o 4.

MOVIMIENTOS LOCOMOTORES. Muy activos, se retuercen por los flculos.

FORMA CORPORAL. Vermiforme.

CARACTERSTICAS FUNCIONALES

ESPECIE. Aelosoma variegatum.

FILUM. Anellida .

GRUPO. Metazoo.

CARACTERSTICAS TAXONMICAS

In vivo

100x . Campo claro.

Organismo: Aelosoma variegatum.

ANLIDOS

TUBO SEMINFERO DE ANLIDO.

Tamao de aproximadamente 250 m de largo.

Cristal violeta

200x . Campo claro.

Tubo seminfero de anlido.

LMINA 40

BACTERIAS FILAMENTOSAS
EN EL FANGO ACTIVO.

FORMA CELULAR. Rectangulares (si se ven).

RESPUESTA TINCIONES. G -, N + y grnulos N - .

LOCALIZACIN. Variable

TAMAO CELULAR (ancho/largo, m) . 0,8-1.

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Baja carga msica y elevada edad de fangos. Este filamento es causa de disgregacin flocular.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

CLAVE IDENTIFICATIVA. Respuesta positiva a la tincin de Neisser.

LMINA 41

OTRAS CARACTERSTICAS DE INTERS (MOVILIDAD, RAMIFICACIONES, CRECIMIENTO ASOCIADO/EPIFTICO, VAINA, SEPTOS CELULARES,
ASOCIACIN ROSETA/GONIDIO). No presenta vaina, ni ramificaciones, ni movilidad. Septos celulares no visibles, al igual que las constricciones celulares.

GRNULOS (AZUFRE y PHB). S - y PHB - .

TAMAO FILAMENTO (m ). 0,8-1 , Longitud < 100.

FORMA DEL FILAMENTO. Rectos, torcidos o ligeramente curvados

CARACTERSTICAS MORFOLGICAS Y ESTRUCTURALES

Neisser.

400x. Campo claro.

Organismo: Tipo 0092.

FILAMENTOS

FORMA CELULAR. Ovales, discoidales, cuadradas, rectangulares, en tonel.

RESPUESTA TINCIONES. G -, N - y grnulos N + (a veces) .

LOCALIZACIN. Extendindose desdeel flculo.

TAMAO CELULAR (ancho/largo, m) . 1,0-2,0/ 0,.4-3,0.

LMINA 42

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Son muchas las condiciones que se asocian a este filamento, tales como aguas residuales spticas, influentes
industriales deficientes en nitrgeno, bajas cargas msicas acompaadas de sustratos fcilmente degradable, etc.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

CLAVE IDENTIFICATIVA. Es un filamente muy largo y robusto, con septos celulares siempre visibles.

OTRAS CARACTERSTICAS DE INTERS (MOVILIDAD, RAMIFICACIONES, CRECIMIENTO ASOCIADO/EPIFTICO, VAINA, SEPTOS CELULARES,
ASOCIACIN ROSETA/GONIDIO). Septos celulares visibles con constricciones.

GRNULOS (AZUFRE y PHB). S + y PHB +.

TAMAO FILAMENTO (m ). 1,0-2,0, Longitud 100-1.000 .

FORMA DEL FILAMENTO. Rectos, ligeramente curvados o enrollados.

CARACTERSTICAS MORFOLGICAS Y ESTRUCTURALES

Gram.

1000x. Campo claro.

Organismo. Tipo 021N.

FILAMENTOS

In vivo y Gram, respectivamente.

1000x. Campo claro.

Organismo. Tipo 021N.

LMINA 43

FILAMENTOS

FORMA CELULAR. Cuadrada, rectangular.

RESPUESTA TINCIONES. G variable, N - y grnulos N variable.

LOCALIZACIN. Interior o libre (dependiendo de la naturaleza del influente).

TAMAO CELULAR (ancho/largo, m) . 1,2-1,6 / 1,5-2,5.

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Asociado a altas edades de fango y bajas cargas msicas.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

CLAVE IDENTIFICATIVA. Se diferencia del Tipo 0675 en que este ltimo es ms pequeo.

LMINA 44

OTRAS CARACTERSTICAS DE INTERS (MOVILIDAD, RAMIFICACIONES, CRECIMIENTO ASOCIADO/EPIFTICO, VAINA, SEPTOS CELULARES,
ASOCIACIN ROSETA/GONIDIO). Crecimiento epiftico muy importante que incluso puede provocar una cubierta Neisser positiva. Septos celulares visibles sin
constricciones. Vaina.

GRNULOS (AZUFRE y PHB). S - y PHB -.

TAMAO FILAMENTO (m ). 1,2-1,6 , Longitud 100-500.

FORMA DEL FILAMENTO. Rectos, ligeramente curvados.

CARACTERSTICAS MORFOLGICAS Y ESTRUCTURALES

Gram.

400x. Campo claro.

Organismo. Tipo 0041.

FILAMENTOS

FORMA CELULAR. Cuadrada.

RESPUESTA TINCIONES. G variable, N - y grnulos N + a veces.

LOCALIZACIN. Interior.

TAMAO CELULAR (ancho/largo, m) . 0,5-1,0/0,5-1,0.

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Ocasionan disgregacin flocular y puentes intefloculares. En plantas de aguas residuales urbanas indican
elevada edad de fango y baja carga msica. En sistemas que reciben aguas residuales industriales indican desequilibrios nutricionales.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

CLAVE IDENTIFICATIVA.

LMINA 45

OTRAS CARACTERSTICAS DE INTERS (MOVILIDAD, RAMIFICACIONES, CRECIMIENTO ASOCIADO/EPIFTICO, VAINA, SEPTOS CELULARES,
ASOCIACIN ROSETA/GONIDIO). Crecimiento epiftico variable. Septos celulares visibles sin constricciones. Vaina.

GRNULOS (AZUFRE y PHB). S - y PHB - .

TAMAO FILAMENTO (m ). 0,5-1 , Longitud 50-150.

FORMA DEL FILAMENTO.Filamentos rectos o ligeramente curvados.

CARACTERSTICAS MORFOLGICAS Y ESTRUCTURALES

In vivo.

1000x. Contraste de fases.

Organismo. Tipo 0675.

FILAMENTOS

RESPUESTA TINCIONES. G variable, N variable y grnulos N - .

TAMAO CELULAR (ancho/largo, m) . 1,2-1,4/1,0

LMINA 46

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Baja Carga msica, oxgeno disuelto a baja concentracin; pueden estar asociados tambin con la afluencia de
aguas residuales industriales.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

CLAVE IDENTIFICATIVA. Filamento en rosario de tamao considerable.

OTRAS CARACTERSTICAS DE INTERS (MOVILIDAD, RAMIFICACIONES, CRECIMIENTO ASOCIADO/EPIFTICO, VAINA, SEPTOS CELULARES,
ASOCIACIN ROSETA/GONIDIO). Sin ramificaciones, sin vaina y sin crecimiento epiftico. Septos celulares visibles as como las constricciones en dichos septos.

GRNULOS (AZUFRE y PHB). S - y PHB +

FORMA CELULAR. Oval, esfrica o discoidal.

medida).

TAMAO FILAMENTO (m ). 1,0-1,4, Longitud 100-200 (difcil

LOCALIZACIN. Interior o extendindose del flculo

FORMA DEL FILAMENTO. Torcidos o enrrollados.

CARACTERSTICAS MORFOLGICAS Y ESTRUCTURALES

Neisser.

Aumentos. 1000x . Campo claro.

Organismo.Nostocoida limicola II.

FILAMENTOS

Neisser y Gram, respectivamente.

Aumentos. 1000x . Campo claro.

Organismo.Nostocoida limicola II.

LMINA 47

FILAMENTOS

FORMA CELULAR. Esfricas, ovales, discoidales.

RESPUESTA TINCIONES. G variable, N variable y grnulos N -.

LOCALIZACIN. Interior o extendindose del flculo.

TAMAO CELULAR (ancho/largo, m) . 1,6-2/1,5-2

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Bajos valores de la carga msica, residuos industriales y bajas concentraciones de oxgeno.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

CLAVE IDENTIFICATIVA. La reaccin positiva a la tincin Neisser, su gran tamao y el replegamiento.

LMINA 48

OTRAS CARACTERSTICAS DE INTERS (MOVILIDAD, RAMIFICACIONES, CRECIMIENTO ASOCIADO/EPIFTICO, VAINA, SEPTOS CELULARES,
ASOCIACIN ROSETA/GONIDIO). Septos celulares visibles con constricciones. Ausencia de vaina.

GRNULOS (AZUFRE y PHB). S - y PHB + .

TAMAO FILAMENTO (m ). 1,6-2 , Longitud difcil medida.

FORMA DEL FILAMENTO. Torcidos o enrrollados

CARACTERSTICAS MORFOLGICAS Y ESTRUCTURALES

Neisser.

1000x. Campo claro.

Organismo. Nostocoida limicola III.

FILAMENTOS

FORMA CELULAR. Rectangular.

RESPUESTA TINCIONES. G variable, N - y grnulos N + a veces .

LOCALIZACIN. Extendindose desde el flculo.

TAMAO CELULAR (ancho/largo, m) . 1,4-2,5 / 3,0-5,0.

LMINA 49

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Condiciones de septicidad, influentes ricos en sulfuros y cidos orgnicos, as como condiciones de deficiencia
de nitrgeno.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

CLAVE IDENTIFICATIVA. Presencia de grnulos de azufre durante la observacin de la muestra in vivo.

OTRAS CARACTERSTICAS DE INTERS (MOVILIDAD, RAMIFICACIONES, CRECIMIENTO ASOCIADO/EPIFTICO, VAINA, SEPTOS CELULARES,
ASOCIACIN ROSETA/GONIDIO). Septos celulares visibles sin constricciones. Vaina. Pueden aparecer gonidios y rosetas.

GRNULOS (AZUFRE y PHB). S + y PHB + .

TAMAO FILAMENTO (m ). 1,4-2,5, Longitud 100-500

FORMA DEL FILAMENTO. Rectos, ligeramente curvados.

CARACTERSTICAS MORFOLGICAS Y ESTRUCTURALES

In vivo.

400x. Campo claro.

Organismo.Thiothrix I.

FILAMENTOS

FORMA CELULAR. Rectangular.

RESPUESTA TINCIONES. G -, N - y grnulos N + a veces.

LOCALIZACIN. Extendindose desde el flculo.

TAMAO CELULAR (ancho/largo, m) . 0,8-1,4/1,0-2,0.

LMINA 50

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Se pueden presentar en medios ricos en azufre, pues pueden emplear el H2S como fuente de energa oxidable.
La acumulacin del azufre es transitoria y tiene lugar cuando el medio contiene sulfuro. Despus de que se ha utilizado completamente el sulfuro del medio. El S
almacenado es oxidado a sulfato. Es un organismo bioindicador de condiciones spticas, influentes ricos en sulfuros o cidos orgnicos, as como reboses en planta de
mala calidad.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

CLAVE IDENTIFICATIVA. Grnulos de S siempre visibles tras el test.

OTRAS CARACTERSTICAS DE INTERS (MOVILIDAD, RAMIFICACIONES, CRECIMIENTO ASOCIADO/EPIFTICO, VAINA, SEPTOS CELULARES,
ASOCIACIN ROSETA/GONIDIO). Septos celulares visibles sin constricciones. Vaina. Pueden aparecer rosetas y gonidios.

GRNULOS (AZUFRE y PHB). S + y PHB + .

TAMAO FILAMENTO (m ). 0,8-1,4, Longitud 50-800.

FORMA DEL FILAMENTO. Rectos, ligeramente curvados.

CARACTERSTICAS MORFOLGICAS Y ESTRUCTURALES

Prueba del azufre (mtodo del tiosulfato sdico).

1000x. Contraste de fases.

Organismo. Thiothrix II.

FILAMENTOS

LMINA 51

Prueba del azufre (mtodo del tiosulfato sdico).

1000x. Contraste de fases.

Organismo. Thiothrix II.

FILAMENTOS

FORMA CELULAR. Micelial.

RESPUESTA TINCIONES. G +, N - y grnulos N + .

LOCALIZACIN. En flculos y libre.

TAMAO CELULAR (ancho/largo, m) . 1,0.

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Edades de fango elevadas y condiciones de buena aireacin (al tratarse de un organismo aerobio estricto).

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

CLAVE IDENTIFICATIVA. Presencia de ramificaciones verdaderas.

LMINA 52

OTRAS CARACTERSTICAS DE INTERS (MOVILIDAD, RAMIFICACIONES, CRECIMIENTO ASOCIADO/EPIFTICO, VAINA, SEPTOS CELULARES,
ASOCIACIN ROSETA/GONIDIO). Presencia de ramificaciones verdaderas (continuidad citoplasmtica).

GRNULOS (AZUFRE y PHB). S - y PHB +.

TAMAO FILAMENTO (m ). 1,0, Longitud 10-100

FORMA DEL FILAMENTO. Micelial.

CARACTERSTICAS MORFOLGICAS Y ESTRUCTURALES

Gram.

1000x. Campo claro.

Organismo. Nocardia sp.

FILAMENTOS

Neisser.

1000x. Campo claro.

Organismo: Nocardia sp.

LMINA 53

FILAMENTOS

FORMA CELULAR.
RESPUESTA TINCIONES. G +, N - y grnulos N +.

LOCALIZACIN. En flculo y libres.

TAMAO CELULAR (ancho/largo, m) . 0,6-0,8.

LMINA 54

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Bajas cargas msicas, bajas concentraciones deoxgeno disuelto, influentes ricos en grasas, bajas temperaturas
y pH>7 (siendo el ptimo pH 8).

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

CLAVE IDENTIFICATIVA. Filamentos Gram positivos que se encuentran enrrollados intraflocularmente o en los espacios interfloculares.

OTRAS CARACTERSTICAS DE INTERS (MOVILIDAD, RAMIFICACIONES, CRECIMIENTO ASOCIADO/EPIFTICO, VAINA, SEPTOS CELULARES,
ASOCIACIN ROSETA/GONIDIO). No presenta ni movilidad, ni ramificaciones, ni vaina ni septos celulares visibles.

GRNULOS (AZUFRE y PHB). S - y PHB +.

TAMAO FILAMENTO (m ). 0,6-0,8, Longitud 100-400.

FORMA DEL FILAMENTO. Enrollados.

CARACTERSTICAS MORFOLGICAS Y ESTRUCTURALES

Gram.

1000x. Campo claro.

Organismo: Microthrix parvicella.

FILAMENTOS

Neisser.

1000x. Campo claro.

Organismo. Microthrix parvicella.

LMINA 55

FILAMENTOS

FORMA CELULAR. De extemos redondeados.

RESPUESTA TINCIONES. G -, N - y grnulos N -.

LOCALIZACIN. Extendindose desde el flculo.

TAMAO CELULAR (ancho/largo, m) . 1,0-1,8/1,5-3,0.

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Bajas concentraciones de oxgeno disuelto y alternancia de la carga orgnica.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

CLAVE IDENTIFICATIVA. La presencia de falsas ramificaciones proporcionan a este organismo apariencia de rbol.

LMINA 56

OTRAS CARACTERSTICAS DE INTERS (MOVILIDAD, RAMIFICACIONES, CRECIMIENTO ASOCIADO/EPIFTICO, VAINA, SEPTOS CELULARES,
ASOCIACIN ROSETA/GONIDIO). Falsas ramificaciones que le confieren apariencia de rbol. . Septos celulares visibles con constricciones. Vaina.

GRNULOS (AZUFRE y PHB). S - y PHB +.

TAMAO FILAMENTO (m ). 1,0-1,8 , Longitud 100-1000.

FORMA DEL FILAMENTO. Recto o ligeramente curvado.

CARACTERSTICAS MORFOLGICAS Y ESTRUCTURALES

Gram.

1000x. Campo claro.

Organismo. Sphaerotilus natans.

FILAMENTOS

In vivo.

400x. Contraste de fases .

Organismo. Sphaerotilus natans.

LMINA 57

FILAMENTOS

FORMA CELULAR.
RESPUESTA TINCIONES. G -, N - y grnulos N -.

LOCALIZACIN. Libre.

TAMAO CELULAR (ancho/largo, m) . 1,0.

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Asociado a fenmenos de crecimiento disperso.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

CLAVE IDENTIFICATIVA. Filamento mvil con constriccin central.

LMINA 58

OTRAS CARACTERSTICAS DE INTERS (MOVILIDAD, RAMIFICACIONES, CRECIMIENTO ASOCIADO/EPIFTICO, VAINA, SEPTOS CELULARES,
ASOCIACIN ROSETA/GONIDIO). Se deplaza lentamente o mediante flexin. No presenta septos celulares visibles, aunque existe una nica constriccin en la
parte media del filamento. Ausencia de vaina.

GRNULOS (AZUFRE y PHB). S - y PHB +.

TAMAO FILAMENTO (m ). 1,0, Longitud 20-100.

FORMA DEL FILAMENTO. Recto, ligeramente curvado.

CARACTERSTICAS MORFOLGICAS Y ESTRUCTURALES

In vivo.

400x. Campo claro.

Organismo. Flexibacter sp.

FILAMENTOS

Gram, Neisser y PHB, respectivamente.

1000x, 1000x y 1000x. Campo claro.

Organismo. Flexibacter sp.

LMINA 59

FILAMENTOS

FORMA CELULAR. Esfrica, cocobacilar.

RESPUESTA TINCIONES. G -, N - y grnulos N + a veces.

LOCALIZACIN. Libre.

TAMAO CELULAR (ancho/largo, m) . 0,8-1,5.

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Bajas concentraciones de oxgeno disuelto. No obstante, ante un episodio de cloracin en planta pueden
aparecer en grandes densidades. Influente con elevados valores de DBO.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

CLAVE IDENTIFICATIVA. Cadena irregular de clulas relativamente corta con reaccin Gram - (a diferencia con estreptococos).

LMINA 60

OTRAS CARACTERSTICAS DE INTERS (MOVILIDAD, RAMIFICACIONES, CRECIMIENTO ASOCIADO/EPIFTICO, VAINA, SEPTOS CELULARES,
ASOCIACIN ROSETA/GONIDIO). Septos celulares visibles con constricciones.

GRNULOS (AZUFRE y PHB). S - y PHB -.

TAMAO FILAMENTO (m ). 0,8-1,5, Longitud < 150.

FORMA DEL FILAMENTO. Cadena irregular de clulas.

CARACTERSTICAS MORFOLGICAS Y ESTRUCTURALES

In vivo.

1000x. Contraste de fases.

Organismo. Tipo 1863.

FILAMENTOS

FORMA CELULAR. De extremos redondeados.

RESPUESTA TINCIONES. G variable, N - y grnulos N - .

LOCALIZACIN. Libre.

TAMAO CELULAR (ancho/largo, m) . 0,8-1,0/2,0-4,0.

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Crecimiento disperso que provoca turbidez. Alternancias en la carga.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

CLAVE IDENTIFICATIVA. Cadenas irregulares de clulas con forma cocobacilar o bacilar con extremos redondeados.

LMINA 61

OTRAS CARACTERSTICAS DE INTERS (MOVILIDAD, RAMIFICACIONES, CRECIMIENTO ASOCIADO/EPIFTICO, VAINA, SEPTOS CELULARES,
ASOCIACIN ROSETA/GONIDIO). Septos celulares visibles.

GRNULOS (AZUFRE y PHB). S - y PHB -.

TAMAO FILAMENTO (m ). 0,8-1,0, Longitud 20-50.

FORMA DEL FILAMENTO. Cadena de clulas.

CARACTERSTICAS MORFOLGICAS Y ESTRUCTURALES

Gram.

1000x. Campo claro.

Organismo. Bacillus sp.

FILAMENTOS

FORMA CELULAR. Rectangular.

RESPUESTA TINCIONES. G variable, N - y grnulos N +.

LOCALIZACIN. Libre.

TAMAO CELULAR (ancho/largo, m) . 1,0-3,0/4,0-8,0.

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Alta carga orgnica y septicidad.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

CLAVE IDENTIFICATIVA. Es un filamento mvil de importante longitud, que en in vivo presenta cierto color verdoso.

LMINA 62

OTRAS CARACTERSTICAS DE INTERS (MOVILIDAD, RAMIFICACIONES, CRECIMIENTO ASOCIADO/EPIFTICO, VAINA, SEPTOS CELULARES,
ASOCIACIN ROSETA/GONIDIO). Mviles por deslizamiento. Septos celulares visibles.

GRNULOS (AZUFRE y PHB). S + y PHB - .

TAMAO FILAMENTO (m ). 1,0-3,0, Longitud 100-500.

FORMA DEL FILAMENTO. Recto, ligeramente curvado.

CARACTERSTICAS MORFOLGICAS Y ESTRUCTURALES

In vivo.

400x. Campo claro.

Organismo. Beggiatoa sp.

FILAMENTOS

FORMA CELULAR. Rectangular.

RESPUESTA TINCIONES. G -, N - y grnulos N - .

LOCALIZACIN.

TAMAO CELULAR (ancho/largo, m) . 3-8/5-15.

LMINA 63

OBSERVACIONES. Son organismos no fotosintticos. Presentan una organizacin biolgica altamente diferenciada, con una estructura vegetativa denominada
micelio con capacidad de crecer indefinidamente mediante filamentos que se llaman hifas. Obtienen energa por respiracin o fermentacin de materiales solubles
presentes en su ambiente, aunque hay algunos que son parsitos y otros predadores. En general, los hongos presentes en aguas residuales seran los Phycomicetos
acuticos. Son un grupo muy variado.

PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. No suelen ser organismos dominantes en un sistema de fangos activos, pero cuando aparecen suelen hacerlo
asociados a la presencia de vertidos industriales. La proliferacin de estos organismos puede propiciar la aparicin de fenmenos de esponjamiento en el fango.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS

CLAVE IDENTIFICATIVA. Ramificaciones verdaderas.

OTRAS CARACTERSTICAS DE INTERS (MOVILIDAD, RAMIFICACIONES, CRECIMIENTO ASOCIADO/EPIFTICO, VAINA, SEPTOS CELULARES,
ASOCIACIN ROSETA/GONIDIO). No presentan motilidad, ni vaina, ni crecimiento epiftico. Ramificaciones verdaderas. Septos celulares y constricciones.

GRNULOS (AZUFRE y PHB). S - y PHB ?

TAMAO FILAMENTO (m ). 3-8, Longitud 300-1000.

FORMA DEL FILAMENTO. Micelial.

CARACTERSTICAS MORFOLGICAS Y ESTRUCTURALES

In vivo

Aumentos. 400x . Contraste de fases.

Organismo. Hongo.

Organismo Filamentoso

OTROS ASPECTOS RECOGIDOS EN

LA OBSERVACIN MICROSCPICA
DE UN FANGO ACTIVO.

NDICE
EL FENMENO DE BULKING VISCOSO
PROLIFERACIN BACILAR EN EL LICOR MEZCLA
BIOFILM EN DECANTADORES SECUNDARIOS
EVOLUCIN DEL BULKING FILAMENTOSO
ESTRUCTURA FLOCULAR DISPERSA
CRECIMIENTO DISPERSO LOCAL
CRECIMIENTO DISPERSO (alguna observacin)
BACTERIAS DE CRECIMIENTO INTRAFLOCULAR
BACTERIAS HELICOIDALES
FLCULOS CON BACTERIAS NITRIFICANTES
BACTERIAS DEL AZUFRE
COLONIAS DE ZOOGLOEA
RESTOS VEGETALES
FANGO ACTIVO DE OXIDACIN TOTAL
OBSERVACIONES MICROSCPICAS CORRESPONDIENTES A INFLUENTES DE
DEPURADORA

EL FENMENO DE BULKING
VISCOSO.
La generacin de bulking viscoso es ocasionada por una
proliferacin excesiva de la bacteria Zoogloea sp., responsable de la excrecin
de material extracelular tipo polmero que confiere al fango un aspecto mucoso
de difcil decantabilidad. Este problema aparece, o bien por un mantenimiento
de edades excesivas de fango en el reactor, o bien por entradas puntuales de
materia orgnica muy degradable (tipo cidos orgnicos) que ocasionan una
degradacin inmediata y la consiguiente liberacin del material intracelular,
que proporciona al fango un aspecto gelatinoso. Dicho aspecto gelatinoso
puede percibirse al microscopio ptico como un halo alrededor del flculo,
visible claramente en la tincin Neisser (diapositiva siguiente).
La eliminacin mediante flotado es fundamental para conseguir
regenerar el fango.

BULKING VISCOSO

100x. Campo claro.

Tincin Neisser.

Material intracelular que en la tincin Neisser se percibe como un halo

alrededor del flculo.

LMINA 64

BULKING VISCOSO

El Test de Tinta India indica el grado de material extracelular

existente en el medio. Como puede observarse en A, el avance de la tinta se ve
impedido por esta sustancia.
En B, mediante este mismo test y siguiendo el sentido de la flecha, se
observa la evolucin en el tiempo del fenmeno de bulking viscoso hacia una
situacin de normalidad en una estacin depuradora.

LMINA 65

BULKING VISCOSO

100x. Campo claro.

In vivo.
Aspecto de una muestra de fango
activo con bulking viscoso.

Otra caracterstica de este fenmeno es el desarrollo de bacterias

filamentosas de los Tipos 0041 y 0675. Ambas son Gram variables, Neisser
negativas y grnulos Neisser positivas (a veces), presentando tambin
crecimiento epiftico en edades muy avanzadas de fango.

LMINA 66

BULKING VISCOSO

100x. Campo claro.

Tincin PHB.

El Test PHB muestra la existencia de muchos grnulos de PHB, tanto en el

medio como en el interior celular.
LMINA 67

PROLIFERACIN BACILAR EN EL LICOR MEZCLA.

400x. Campo claro.

In vivo.

La entrada a planta frecuente de mucha materia orgnica disuelta, puede provocar

crecimiento disperso de bacterias no asociadas al flculo como fenmeno adaptativo. Al
encontrarse en forma libre son ms competitivas, al disponer ms fcilmente de la materia
orgnica disuelta en el medio.
Esta situacin puede venir a veces propiciada por altos tiempos de retencin en los
decantadores primarios.
LMINA 68

BIOFILM EN DECANTADORES
SECUNDARIOS.
El estudio peridico de la capa de organismos que se fija en la
superficie del vertedero de los decantadores secundarios o del canal de
cloracin, nos puede proporcionar informacin sobre la comunidad que
normalmente se asienta sobre esta zona y detectar la influencia de vertidos
industriales.

Aumento. 200x. Campo claro.

In vivo.

LMINA 69

BIOFILM EN DEC. 2arios

Organismo: Oscillatoria putrida.

100x. Campo claro.
In vivo.

CARACTERSTICAS TAXONMICAS
GRUPO. Cyanophyta (algas azules).

CLASE.

ORDEN. Nostocales.

GNERO. Oscillatoria.

ESPECIE. Oscillatoria putrida.

CARACTERSTICAS FUNCIONALES
FORMA CORPORAL. Filamento de color verde amarillento

MOVIMIENTOS LOCOMOTORES. Si

ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS. No

CLAVE IDENTIFICATIVA. Grnulos refringentes en las separaciones de las clulas

TAMAO. Clulas de 8-20m de largo y 2-3 m de ancho

CARACTERSTICAS ECOLGICAS
ALIMENTACIN. Auttrofa.
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Organismo polisaprobio que se desarrolla sobre restos vegetales en descomposicin.
LMINA 70

BIOFILM EN DEC. 2arios

Organismo: Oscillatoria putrida

400x. Campo claro.
In vivo.

LMINA 71

BIOFILM EN DEC. 2arios

DIATOMEAS.

100x .Campo claro.

In vivo.

CARACTERSTICAS TAXONMICAS
GRUPO. Chrysophyta.

CLASE. Bacillanophyceae (diatomeas, algas silceas).

ORDEN. Pennales (Naviculaceae).

GNERO. Navicula.

CARACTERSTICAS FUNCIONALES
FORMA CORPORAL. En huso.

MOVIMIENTOS LOCOMOTORES. Si.

ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS. Rafe central.

CLAVE IDENTIFICATIVA. Cuerpo central algo dilatado transversalmente, estras

transversales finas y radiales.

TAMAO. 20-60 m

CARACTERSTICAS ECOLGICAS
ALIMENTACIN. Auttrofa.
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Se desarrolla en aguas muy ricas en materia orgnica (alfa-mesosaprobio).
LMINA 72

BIOFILM EN DEC. 2arios

DIATOMEAS

100x y 200x, respectivamente.Campo claro.

In vivo.

LMINA 73

BIOFILM EN DEC. 2arios

OOCYSTIS (ALGA VERDE).

100x .Campo claro.

In vivo.

CARACTERSTICAS TAXONMICAS
GRUPO. Chlorophyla (algas verdes).

ORDEN. Chlorococcales.

FAMILIA. Oocystaceae.

GNERO. Oocystis.

CARACTERSTICAS FUNCIONALES
FORMA CORPORAL. Colonia redondeada con extremos alargados,

MOVIMIENTOS LOCOMOTORES. No.

ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS. Cloroplastos interiores; envoltura

CLAVE IDENTIFICATIVA. Por su carcter colonial y su forma exterior.

de la colonia marcadamente engrosada en ambos extremos.

TAMAO. Clulas de 10-15 m.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
ALIMENTACIN. Auttrofa.
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Se desarrolla en aguas muy ricas en materia orgnica (alfa-mesosaprobio).
LMINA 74

BIOFILM EN DEC. 2arios

SPIRULINA (CIANOBACTERIA).

Organismo. Spirulina .
200x . Campo claro.
In vivo.

CARACTERSTICAS MORFOLGICAS Y FUNCIONALES

FORMA CORPORAL. Extremos redondeados y forma en espiral (helicoidal).

MOVIMIENTOS LOCOMOTORES. S, deslizantes.

ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS. Cloroplastos que le confieren color verde.

CLAVE IDENTIFICATIVA. Forma en espiral mvil.

TAMAO.Variable segn la especie; de 4-20 m de largo.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS
ALIMENTACIN. Eubacteria fotosinttica del grupo de Oscillatoria.
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Aguas contaminadas con bajos ndices de turbidez; bajas concentraciones en SSLM; caracterstica de aguas
salinas.

LMINA 75

EVOLUCIN DEL BULKING

FILAMENTOSO.
El bulking debido a la proliferacin de bacterias filamentosas puede
generarse por muy diversos motivos, desde problemas operacionales hasta
vertidos en el influente o desequilibrios nutricionales. La evolucin desde un
estado de normalidad hasta el de un episodio de bulking en planta, puede
apreciarse mediante la observacin microscpica diaria.
Un recuento de filamentos (normalmente expresado como m/mL de
fango activo) realizado de forma peridica, permite tener un histrico sobre
dicho valor y conocer las variaciones a lo largo del tiempo.
En las diapositivas siguientes se muestra una secuencia de fotos en la
que se percibe claramente la evolucin de un fango activo hacia una situacin
de bulking filamentoso.

Evolucin del bulking f.

Evolucin del bulking filamentoso.

400x. Campo claro.
Tincin Gram.
A

A Estructura flocular normal; B y C Estructura flocular con baja concentracin de filamentos.

LMINA 76

Evolucin del bulking f.

D Fango colonizado por una alta concentracin de bacterias filamentosas.

E, F y G Fango totalmente disgregado por una excesiva colonizacin de filamentosas.
LMINA 77

ESTRUCTURA FLOCULAR DISPERSA.

100x. Campo claro.

Tincin Gram.

La formacin de un buen flculo precisa de un ncleo de materia

orgnica con una concentracin apropiada de filamentosas, sobre las que se
depositan bacterias y ms materia orgnica de forma que sta pueda ser
degradada.
Al comienzo de una explotacin es comn que se produzca el
fenmeno de pin-floc (no formacin de la estructura flocular), pero con el
aumento de la edad del fango se generar un flculo de dimensiones
apropiadas. Purgas excesivas, puntas de caudal altas o vertidos incontrolados
pueden provocar este fenmeno en una cuba ya estabilizada.

LMINA 78

CRECIMIENTO DISPERSO LOCAL.

400x. Campo claro.

Tincin Gram.

LMINA 79

CRECIMIENTO DISPERSO.

200x y 400x, respectivamente. Campo claro.

Tincin Gram.

En una muestra en la que predomina el crecimiento disperso, se pueden

observar agrupaciones de bacterias tal y como las que se observan en estas figuras,
recordando a algunas variantes del crecimiento de algunas bacterias filamentosas tales
como el crecimiento epiftico, adherido o agrupado.

LMINA 80

BACTERIAS DE CRECIMIENTO INTRAFLOCULAR.

200x. Campo claro.

Tincin Gram.

Bacterias Gram positivas y Gram negativas dentro de flculos de fango activo. Son
organismos de forma cocal o bacilar siempre presentes en el fango activado.

LMINA 81

BACTERIAS HELICOIDALES.

Bacterias helicoidales.
400x .Contraste de fases.
In vivo.

LMINA 82

FLCULO CON BACTERIAS NITRIFICANTES.

Organismo:Flculo con bacterias nitrificantes.

100x. Campo claro.
Tincin Gram.

LMINA 83

BACTERIAS DEL AZUFRE.

100x. Campo claro.

In vivo

Las bacterias del azufre captan este elemento del agua tratada y lo
incorporan a su sistema de reserva para utilizarlo en anaerobiosis.
La pelcula que se forma sobre la pared del decantador sirve de
soporte para las bacterias del S fijas (Thiopedia, Thiocystis, etc.). Mientras
que las filamentosas se deslizan sobre la superficie (Beggiatoa). Son
organismos habituales de ambientes polisaprobios.
LMINA 84

COLONIAS DE ZOOGLOEA.

Organismo:Colonia de Zoogloea spp.

digitiforme.
400x. Campo claro.
Tincin Gram.

CARACTERSTICAS MORFOLGICAS Y FUNCIONALES

FORMA CORPORAL: Muclago gelatinoso de muchas bacterias.

MOVIMIENTOS LOCOMOTORES: No.

ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS: Forma bacilar; Gram negativa.

CLAVE IDENTIFICATIVA: Forma digitiforme.

TAMAOL: Colonias de hasta 1,5 mm.

CARACTERSTICAS ECOLGICAS
Eubacteria Aerobia Gram - .
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Fangos de poca edad, en formacin. Aportes de aguas de origen industrial.
OBSERVACIONES. Agrupaciones de bacterias (Gram -) gracias a la capacidad de secrecin de muclago, hecho que les permite permanecer unidas. Pueden crecer
en forma digitiforme o ramificada. Su proliferacin puede provocar bulking zoogleal si bien una concentracin moderada de estas bacterias ayuda a la formacin del
flculo durante las primeras fases de la puesta en marcha de un reactor biolgico.

LMINA 85

RESTOS VEGETALES.

Traqueida vegetal.
200x. Campo claro.
In vivo.

Cuando es habitual en la observacin microscpica, es que procede de influentes a la

depuradora.

LMINA 86

FANGO ACTIVO DE OXIDACIN TOTAL.

200x .Campo claro.

In vivo.

Flculo caracterstico de una depuracin por oxidacin total. Fango muy mineralizado.

LMINA 87

OBSERVACIONES MICROSCPICAS
CORRESPONDIENTES A INFLUENTES DE
DEPURADORA.
El estudio microbiolgico de las muestras de influente puede
proporcionarnos informacin de la biota que normalmente entra en
la planta, de tal forma que, si en la observacin microscpica
existiera alguna irregularidad, el vertido anmalo podra ser
detectado.
A continuacin se muestran una serie de imgenes tomadas sobre
agua bruta llegada a la depuradora.

Influentes depuradora

Organismo. Cianobacteria Chamaephypan sp.

100x. Campo claro.
In vivo.

CARACTERSTICAS MORFOLGICAS Y FUNCIONALES

FORMA CORPORAL. Redondeada; cocal
ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS. Cloroplastos; color verdoso

MOVIMIENTOS LOCOMOTORES. Si
CLAVE IDENTIFICATIVA. Color y reaccin a tinciones

TAMAO. 5-20 m.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
Eubacteria fotosinttica unicelular; con divisin por gemacin.
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Entrada en el agua residual generalmente procedente de un foso sptico; bajas concentraciones de SSLM.

LMINA 88

Influentes depuradora

Organismo. Bacteria del tipo Flexibacter sp.

100x. Campo claro.
In vivo.

CARACTERSTICAS MORFOLGICAS Y ESTRUCTURALES

FORMA DEL FILAMENTO. Bacilo alargado, ligeramente curvado, con constriccin.

TAMAO FILAMENTO. 20-100 m.

LOCALIZACIN. Libre

FORMA CELULAR.

TAMAO CELULAR (ancho/largo, m) .

RESPUESTA TINCIONES. G -, N - y grnulos N -.

GRNULOS (AZUFRE y PHB). S - y PHB -.

OTRAS CARACTERSTICAS DE INTERS (MOVILIDAD, RAMIFICACIONES, CRECIMIENTO ASOCIADO/EPIFTICO, VAINA, SEPTOS
CELULARES, ASOCIACIN ROSETA/GONIDIO). Eubacteria deslizante.
CLAVE IDENTIFICATIVA. Bacilo mvil, alargado, ligeramente curvado, con constriccin central o apical

CARACTERSTICAS ECOLGICAS
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Condiciones de aerobiosis, en general .

LMINA 89

Influentes depuradora

Organismo: Espirilos.
100x. Campo claro.
In vivo.

CARACTERSTICAS MORFOLGICAS Y ESTRUCTURALES

FORMA. Forma bacilar, flexible.

TAMAO. 14, m largo

LOCALIZACIN. Libre.

RESPUESTA TINCIONES. G -

OTRAS CARACTERSTICAS DE INTERS (MOVILIDAD, RAMIFICACIONES, CRECIMIENTO ASOCIADO/EPIFTICO, VAINA, SEPTOS

CELULARES, ASOCIACIN ROSETA/GONIDIO). Presencia de vaina, movimiento en espiral.
ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS. Flagelos (de difcil observacin).
CLAVE IDENTIFICATIVA. Forma y movimiento.
CARACTERSTICAS TAXONMICAS
GRUPO. Spirillum.
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Eubacteria aerobia, quimiohetertrofa y micrfila estricta, por lo tanto caracterstica de condiciones de baja
oxigenacin .

LMINA 90

Influentes depuradora

Organismo. Cyanophiceas.
100x. Campo claro.
In vivo.

CARACTERSTICAS TAXONMICAS
GRUPO .Eubacteria fotosinttica, denominada Cianobacteria, Cianofcea o alga azul.
CARACTERSTICAS FUNCIONALES
FORMA CORPORAL. Filamento grueso de extremos redondeados.

MOVIMIENTOS LOCOMOTORES. S, por deslizamiento.

ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS. Cloroplastos de color verdoso.

CLAVE IDENTIFICATIVA. Movimiento y color.

TAMAO. 100-1.000 m
CARACTERSTICAS ECOLGICAS
ALIMENTACIN. Auttrofa.
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Asociados a entradas de aguas procedentes de fosos spticos.

LMINA 91

Influentes depuradora

Organismo. Cyanophiceas.
100x. Campo claro.
In vivo.

LMINA 92

Influentes depuradora

Bacteria del Azufre Thiocapsa

100x. Campo claro.
In vivo.

CARACTERSTICAS TAXONMICAS
GRUPO. Eubacteria fotosinttica; bacterias rojas del Azufre
CARACTERSTICAS FUNCIONALES
FORMA CORPORAL. Cocos cbicos o esfricos

MOVIMIENTOS LOCOMOTORES.

ESTRUCTURAS ESPECIALIZADAS. Individuales o en paquetes

CLAVE IDENTIFICATIVA. Presencia de S intracelular

CARACTERSTICAS ECOLGICAS
PARMETROS BIOINDICADORES ASOCIADOS. Crecimiento quimioautotrfico en condiciones de baja concentracin de oxgeno con S como aceptor de
electrones.

LMINA 93

CAPTULO 8.- EJERCICIO DE INTERCOMPARACIN DE

FANGOS ACTIVOS.

INTRODUCCIN
Los laboratorios de aguas residuales deben trabajar con mtodos estandarizados para los anlisis
biolgicos de los fangos activos, de forma que se pueda definir la capacidad ptima de medida, entendida sta
como la incertidumbre de medida ms pequea que un laboratorio puede conseguir (ENAC, 1998).
Para conseguir este objetivo y unificar criterios, se realizan ejercicios interlaboratorio de fango activo
con muestras de distintas caractersticas, con resultados muy satisfactorios.
Los ejercicios de intercomparacin entre laboratorios son una herramienta bsica, sobre todo en anlisis
de tipo microbiolgico, para unificar criterios debido a la alta densidad de microorganismos por mililitro y a la
gran dispersin de valores que pueden ocasionar pequeas diferencias en la metodologa de anlisis de los
fangos activos. As pues, estos ejercicios ofrecen la oportunidad de comparar los resultados y mtodos con los
dems laboratorios participantes, con objeto de detectar errores sistemticos y eliminar este tipo de
desviaciones.
Organismos de acreditacin y certificacin, tanto en el mbito nacional como internacional,
recomiendan la participacin en este tipo de ejercicios interlaboratorios, no slo para validar los mtodos, sino
para demostrar la calidad de los resultados de forma continuada.
En la actualidad se impone la necesidad de garantizar la fiabilidad de los resultados frente a clientes
internos y externos de la empresa. Este tipo de actividades genera confianza, tanto para los clientes habituales
como para futuros clientes, sobre todo a la hora de abrir mercado.
La participacin en estos ejercicios ofrece la asistencia a las reuniones, normalmente anuales, en las
que se ofrece un interesante foro de encuentro de profesionales del sector, en el que se debaten las
particularidades de las muestras y las incidencias del anlisis. Generalmente, se propone la sistemtica de los
ejercicios para el siguiente ao, abierta a comentarios y posibles modificaciones que puedan proponer los
participantes.
En definitiva, estos ejercicios constituyen un importante elemento de ayuda a la mejora de la calidad
interna de un laboratorio.
Al definir un interlaboratorio para fangos activos, debemos tener en cuenta varias ideas generales:
1.- La incertidumbre de medida es un parmetro asociado a la medicin, que caracteriza la dispersin
de los valores que pueden atribuirse razonablemente al mesurando (ENAC, 1998). Para fangos activos, la
dispersin de los datos es muy elevada y el esfuerzo de sistematizacin y contraste debe ser muy alto.
151

2.- Se deben definir los mesurandos, entendidos stos como las magnitudes particulares objeto de una
medicin (ENAC, 1988). En el caso particular de los fangos activos, podra estar representado por el IF, ndice
de Madoni, Identificacin de filamentos....
El ejercicio es recomendable que conste de varios apartados, donde se recojan los distintos enfoques de
los anlisis:
-

Valoracin del IF

Valoracin de las bacterias filamentosas

Valoracin de la comunidad protozoaria

Valoracin general de la calidad del fango

Si bien los laboratorios pueden inscribirse slo en los apartados que deseen comparar y afianzar.
Ser necesario disponer de un microscopio con objetivos de 10X 20X, 40X y 100X as como del
material para su uso (portaobjetos, cubreobjetos), probeta de 100 mL, cmara de Fuchs-Rosenthal, cmara de
Neubauer y reactivos y material necesario para las tinciones Neisser, Gram, test de azufre y PHB.
Deber proporcionarse una referencia de la metodologa de anlisis a seguir, donde se describa el
procedimiento para cada unos de los apartados, as como la preparacin de reactivos y uso de materiales
necesarios para rellenar los formatos. En caso de usar distinta metodologa, deber indicarse en el apartado
observaciones.
Para asegurar la confidencialidad, cada participante recibir un cdigo en la entrega de muestra, que
tendr carcter permanente a lo largo de todo el circuito de ejercicios interlaboratorio del ao y ser
imprescindible para la identificacin de los resultados de cada laboratorio. No se incluirn los resultados que no
posean dicho cdigo. No se facilitar informacin del resto de laboratorios que no sean el propio.
Referente a la seleccin de la muestra objeto de anlisis, en fechas prximas al envo de la muestra, se
realizar un estudio previo de las muestras de las balsas de aireacin, de varias depuradoras de aguas residuales
urbanas o con poco aporte industrial. Con anterioridad, se habr solicitado por escrito al responsable de cada
E.D.A.R. permiso y habr sido concedido, para efectuar el citado sondeo. En caso de seleccionar su depuradora,
se requiere el beneplcito para extraer un mayor volumen de muestra, que se homogeneizar y dividir entre los
participantes, con la salvaguardia del anonimato del origen de la muestra. Se seleccionar aquella muestra que el
organismo organizador considere interesante y representativa de situaciones reales, o que en su caso lo estime
adecuado.
En cuanto a la preparacin de la muestra, se obtendr un volumen suficiente de fango activo de una
depuradora de aguas residuales annima, que garantice un volumen mnimo por participante, unos 300 mililitros
en botes de plstico estriles de cierre hermtico, con aproximadamente un tercio de su capacidad de cmara de
152

aire para evitar la anoxia durante el transporte. Es importante contar con un servicio de mensajera que garantice
la entrega en destino, como muy tarde, al siguiente da de la toma de muestra, para evitar alteraciones en la
misma. Previo a la distribucin de muestras, se realizar una homogeneizacin del volumen total. Tras el
envasado, se efectuar un estudio de homogeneidad de muestras, para garantizar esta propiedad. El bote ir
etiquetado con el cdigo de participante, el nmero del ejercicio y la fecha de envasado.
El anlisis de las caractersticas macroscpicas y microscpicas del fango y el anlisis de protozoos,
debern realizarse inmediatamente a la recepcin de la muestra y a lo sumo al siguiente da del envasado de la
misma. El anlisis de filamentos debe realizarse tambin en ese plazo, pero puede demorarse un par de das
siempre que se fijen frotis de forma adecuada. Deber indicarse la fecha de anlisis de cada bloque. Se
recomienda que, una vez recibido el bote con la alcuota de fango activo a analizar, se destape y someta a
agitacin suave durante algunos minutos. En cualquier caso, se destapar el bote y homogeneizar suavemente
antes de cada uno de los anlisis propuestos, evitando derrames y agitaciones bruscas que puedan alterar o
destruir la representatividad de la muestra, la estructura y cohesin flocular.
El envo para cada participante constar del bote continente de la muestra, unas placas refrigerantes y
las hojas de trabajo a rellenar. En el caso de la primera entrega, se adjuntar documentacin que indique el
cdigo de participante.
En un plazo mximo fijado a partir de la fecha lmite de entrega de resultados (suele ser 15 das
hbiles), se enviar a cada participante un informe detallado que incluir los resultados, los mtodos y los datos
tcnicos y estadsticos mediante tablas y grficos ilustrativos. Con los resultados de los laboratorios se proceder
a la conversin logartmica (evaluacin de la microfauna) y al tratamiento tcnico y estadstico de los mismos.
En cada ejercicio y para cada parmetro se calcular la media, desviacin tpica, coeficiente de variacin e
intervalo global de cada uno de los ndices de biocalidad implicados. Es conveniente valorar tambin los
porcentajes de la agrupacin de los resultados, el valor mximo y mnimo de fluctuacin de los datos y la
medida de tendencia central o moda (Pola, 1993).
Ejemplo 1: Tabla de recogida de resultados para un interlaboratorio:
Tabla 1: Resultados de un ejercicio interlaboratorio
MUESTREO

12/11/02

PARTICIPANTE

MACROSCOPIA

21

25,5

26

26

25,5

MICROSCOPIA

43

43

43

50

43

INDICE DE FILAMENTOS

64

68,5

69

75,5

68,5

CATEGORIA DE FILAMENTOS

4,5

FILAMENTO DOMINANTE

MICROTHRIX

MICROTHRIX

MICOTHRIX

MICROTHRIX

MICROTHRIX/1701

FILAMENTO SECUNDARIO

1701/NOSTOCOIDA

1701/ NOSTOCD LIM II

1701/NOSTOC III

021N

NOSTOCOID/HALISCOM

EFECTO FLOCULO

DISGREGACION

DISGREGACION

OTROS FILAMENTOS

NOCARDIA/HALISCOM

REL FIL (IRF)

1,32

m/ml FILAMENTOS

770,24

DENSIDAD ( org/l) * EXP 6

2,86

4,38

3,23

3,04

4,6

INDICE DE SHANON

2,83

2,79

2,65

2,46

2,56

INDICE DE MADONI

10

10

10

10

CLASE MADONI

NUMERO DE ESPECIES

12

13

12

10

13

GRUPO DOMINANTE

SESIL/REPTANTE

SESIL/REPTANTE

SESIL/REPTANTE

SESIL/REPTANTE

SESIL/REPTANTE

DISGREGACION
HALISCOMENOBC

1,87

1,55

OBSERVACIONES

153

021N
1,68

Ejemplo 2: Resultados del ndice de Madoni de 10 laboratorios participantes.

Lab.1- 4

Lab.6- 4

Lab.2- 3

Lab.7- 3

Lab.3- 4

Lab.8- 4

Lab.4- 4

Lab.9- 4

Lab.5- 5

Lab.10- 4

xi
Media

X=

X= 3,9
n

siendo x el dato de cada participante y n el nmero de datos (en este caso, 10)
(xi X)2
Desviacin tpica S=

S = 0,57
n 1

S
Coeficiente de variacin CV = 100

CV = 14,6%
X

Intervalo o rango R= xmax x min .

R=2

154

ndice de Madoni
20%

10%

70%

Figura 1: Representacin de resultados para el ndice de Madoni, en un ejercicio interlaboratorio.

Cada participante recibir un certificado que acredite su participacin en el circuito. No es competencia

del organismo organizador del ejercicio de intercomparacin, el estudio individual de cada participante y mucho
menos entrar en valoraciones concretas y recomendaciones. La participacin en este tipo de ejercicios debe
implicar una autoevaluacin crtica y personal de cada laboratorio.
Se suele proponer una media de tres ejercicios anuales, repartidos ms o menos homogneamente a lo
largo del ao, evitando los meses centrales del verano y fiestas nacionales en los das inmediatamente siguientes
al envo, debido a la premura del anlisis. El calendario de los ejercicios debe comunicarse en el boletn
informativo previo a la inscripcin, para que cada participante contraste las fechas con posibles fiestas locales y
disponibilidad de su personal en la fecha.
Despus del tercer ejercicio y antes del final de ao, se convocar a todos los participantes para asistir a
la reunin final. Se comentarn y evaluarn los resultados e incidencias del circuito. En esa reunin se
presentar y comentar la propuesta para el circuito del siguiente ao. Es interesante alentar la asistencia a este
tipo de reuniones donde se convocan profesionales con inquietudes en el mismo campo. Es aqu donde se
plantean las dificultades encontradas en la identificacin y recuento de organismos y en general, de cada bloque
analtico. Se aclaran dudas, se pueden proponer alternativas complementarias a tcnicas usadas, se estudian las
observaciones planteadas por los participantes (annimos) en cada anlisis, etc. En definitiva, se gesta la
unificacin de criterios de los profesionales del anlisis aplicado en este tipo de muestras.

155

ESQUEMA DE ORGANIZACIN DE UN EJERCICIO INTERLABORATORIO

1.

Divulgacin del ejercicio de intercomparacin (analtica y calendario).

2.

Recepcin de solicitudes de participacin.

3.

Seleccin de la muestra a analizar. Envo de la muestra y documentacin.

4.

Recepcin de boletines de datos. Anlisis de resultados.

5.

Envo de informe de resultados a los participantes.

6.

Reunin final.

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BIBLIOGRAFA
ENAC (1998). Expresin de la incertidumbre en las calibraciones. CEA-ENAC-LC/02. 1-24.
Pola, A. (1993). Aplicacin de la estadstica al control de calidad. Editorial Morcombo S.A. Barcelona.

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