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Fundamento agares
1. TSI
Agar
Simmons
Citrato
Agar
SIM
Medio
Cepas mviles: producen turbidez del medio, que se extiende mas all de la lnea
de
siembra.
Cepas inmviles: el crecimiento se observa solamente en la lnea de siembra.
Cepas SH2 positivas: ennegrecimiento a lo largo de la lnea de siembra o en todo el
medio.
Cepas SH2 negativas: el medio permanece sin cambio de color.
Cepas indol positivas: desarrollo de color rojo luego de agregar el reactivo de
Kovacs
o
de
Erlich.
Cepas indol negativas: sin cambio de color.
5. MR-VP
Medio
Medio utilizado para la realizacin del ensayo de Rojo de Metilo y Voges Proskauer.
Es
particularmente
til
para
la
clasificacin
de
enterobacterias.
Fundamento
En el medio de cultivo, la pluripeptona aporta los nutrientes necesarios para el desarrollo
bacteriano
y
la
glucosa
es
el
hidrato
de
carbono
fermentable.
La glucosa puede ser metabolizada por los microorganismos, a travs de distintas vas
metablicas. Segn la va utilizada, se originarn productos finales cidos (cido lctico,
cido actico, cido frmico), o productos finales neutros (acetil metil carbinol).
a-Prueba
de
del
pruebas
rojo
bioqumicas
de
metilo:
Aadir unas gotas de una solucin de rojo de metilo al 0.04%, observar el color del
medio.
b-Prueba
del
Voges
Proskauer:
Prueba del Voges Proskauer: aadir 0,6 ml de alfa naftol al 5% en alcohol etlico absoluto y 0.2 ml
de hidrxido de potasio al 40% a 2.5 ml de cultivo. Agitar vigorosamente el tubo, y dejar a
temperatura ambiente durante 10-15 minutos. Observar el color de la superficie del medio.
Fundamento
7. Caldo glucosa:
USO Medio desarrollado por Casellas para estudiar simultneamente la movilidad,
reacciones de oxidacin y fermentacin de glucosa y la reduccin de nitratos a nitritos o
gas nitrgeno libre por bacilos Gram negativos de fcil desarrollo. Permite diferenciar
especies bacterianas.
FUNDAMENTO En el medio de cultivo, la peptona y el extracto de carne aportan nutrientes
para el desarrollo bacteriano. El cloruro de sodio mantiene el balance osmtico, la glucosa
es la fuente de energa y el azul de bromotimol es el indicador de pH. El nitrato de potasio
es el sustrato de la enzima nitrato reductasa. El bajo contenido de agar, otorga la
propiedad de ser un medio semislido que permite determinar la movilidad bacteriana y
tambin la distribucin de los productos cidos en la superficie, profundidad o en todo el
medio de cultivo. El metabolismo de la glucosa puede ser fermentativo u oxidativo. En
ambos casos se acidifica el medio y se produce el viraje del indicador azul de bromotimol
del color verde al amarillo. La movilidad se evidencia por el enturbiamiento del medio o por
crecimiento que difunde mas all de la lnea de siembra del microorganismo en estudio. La
reduccin de nitratos a nitritos o gas nitrgeno por medio de la enzima nitrato reductasa,
es un proceso de oxidacin por el cual el nitrato proporciona oxgeno para ser usado como
aceptor de electrones. El nitrito presente en el medio puede detectarse con el agregado de
los reactivos Griess A y Griess B por la formacin de un compuesto diazoico coloreado. Si
se observan burbujas en el medio, stas corresponden a nitr- geno gaseoso, ya que el
nitrito intermediario inhibe las decarboxilaciones.
INTERPRETACIN DE LOS RESULTADOS Observar la movilidad y el color del medio de
cultivo. Luego realizar el ensayo para determinar la reduccin de nitratos.
Movilidad Resultado positivo: presencia de turbidez que se extiende mas all de la lnea de
siembra.
Resultado negativo: solo se observa turbidez en la lnea de siembra. Color del medio:
metabolismo de la glucosa: Microorganismos oxidativos: color amarillo en la superficie del
medio de cultivo (parte superior del tubo). Microorganismos fermentadores: color amarillo