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PROTEIN u&csf

Protines dans lurine et


dans le LCR
Rouge pyrogallol. Colorimtrique
Dtermination quantitative de protines totales dans
lurine et dans le LCR
IVD

CALCULS

Urine 24 h
( A)Echantillon

x 1000 x vol. (L) urine 24h = mg protines /24 h


Conserver 2-8C

(A) Modle

PRINCIPE DE LA METHODE
Les protines prsentes dans lchantillon ragissent e milieu acide avec
le rouge pyrogallol et le molybdate, en formant un complexe color.
Lintensit de la couleur forme est proportionnelle la concentration de
protines dans lchantillon test1, 2.

LCR

SIGNIFICATION CLINIQUE

CONTROLE DE QUALITE

Lurine des personnes sains ne contient pas de protines, ou en contient


en petites quantits; normalement, le glomrule vite le passage de ces
protines du sang au filtre glomrulaire.
Les altrations glomrulaires provoquent laugmentation de la permabilit
des protines plasmatiques, ce qui entrane la protinurie, qui indique la
prsence de protines dans lurine.
La prsence importante de protines indique une maladie rnale.
Des concentrations leves de protines dans le liquide cphalo-rachidien
(LCR) peuvent tre dues des infections ou une pression intracrnienne
leve1, 5, 6,
Le diagnostic clinique doit prendre en compte les donnes de laboratoire
et les donnes cliniques.

REACTIFS
R

Rouge pyrogallol
Molybdate de sodium

50 mmol/L
0,04 mmol/L

PROTEIN U &
CSF CAL

Patron primaire de dtection dalbumine/globuline


1000 mg/L

( A)Echantillon

x 1000 (modle conc.) = mg/L de protines


(A) Modle

Chaque laboratoire doit disposer de son propre contrle de qualit et dterminer


les mesures correctives mettre en place dans le cas o les vrifications ne
correspondraient pas aux attentes.

VALEURS DE REFERENCE5
Urine:

< 100 mg/24 h (chez les femmes enceintes < 150 mg/24 h)
Enfants
300 -1000 mg/L
Adultes 150 - 450 mg/L
Ces valeurs sont donnes titre dinformation. Il est conseill chaque
laboratoire de dfinir ses propres valeurs de rfrence.
LCR:

CARACTERISTIQUES DE LA METHODE
Gamme de mesures: Jusquau la limite de linarit de 4000 mg/dL.
Si la concentration de lchantillon est suprieure la limite de linarit, diluer
1/2 avec du ClNa 9 g/L et multiplier le rsultat final par 2.
Exactitude: Les ractifs SPINREACT (y) ne montrent pas de diffrences
systmatiques significatives lorsquon les compare dautres ractifs
commerciaux (x).
Les caractristiques de la mthode peuvent varier suivant lanalyseur employ.

INTERFERENCES
Ractif prt lemploi.

Hmolyse1, 2. Diffrentes drogues ont t dcrites, ainsi que dautres substances


pouvant interfrer dans la dtermination des protines3, 4.

CONSERVATION ET STABILITE

REMARQUES

Tous les composants du kit sont stables jusqu la date de premption


indique sur ltiquette, et si les flacons sont maintenus hermtiquement
ferms 2-8C, labri de la lumire et des sources de contamination. Ne
pas utiliser les ractifs en dehors de la date indique.
Indices de dtrioration des ractifs:
- Prsence de particules et turbidit.
- Absorbation (A) du blanc 598 nm 0,30.

1.

PREPARATION

2.
3.

PROTEIN U & CSF CAL: Etant donn la nature du produit, il est conseill
de le manipuler avec une extrme prudence. En effet, il peut tre facilement
contamin.
Utiliser des embouts de pipettes jetables propres pour diffuser le produit.
SPINREACT dispose de consignes dtailles pour lapplication de ce
ractif dans diffrents analyseurs.

BIBLIOGRAPHIE
MATERIEL SUPPLEMENTAIRE

1.

Spectrophotomtre ou analyseur pour les lectures 598 nm.


Cuvettes de 1,0 cm dclairage.
Equipement classique de laboratoire.

2.
3.

ECHANTILLONS
Urine de 24 h: Stable 8 jours 2-8C.
Liquide cphalo-rachidien (LCR): Stable 4 jours 2-8C

4.
5.
6.

Orsonneau JL et al. An improved Pyrogallol Red-Molybdate Method for


Determining Total Urinary Protein. Clin Chem 1989; 35:2233-2236.
Koller A. Total serum protein. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby
Co. St Louis. Toronto. Princeton 1984; 1316-1324 and 418.
Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press,
1995.
Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.

PROCEDURE
1.

2.
3.

Conditions de test:
Longueur dondes: . . . . . . . . . . . . . . . 598 nm
Cuvette:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .1 cm dclairage
Temprature . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37c/.15-25C
Rgler le spectrophotomtre sur zro en fonction de leau distille
Pipetter dans des tubes essai:

R (mL)
Modle remarque-2)
( L)
Echantillon ( L)
4.
5.

Blanc
1,0
--

Modle
1,0
20

Echantillon
1,0
--

--

--

20

PRESENTATION
Rf: 1001024
Rf: 1001025

Cont.

R: 2 x 50 mL, CAL: 1 x 2 mL
R: 2 x 150 mL. CAL: 1 x 5 mL

Mlanger et incuber 5 min 37C ou 10 min temprature


ambiante (15-25C).
Lire labsorbation (A) du patron et lchantillon, en comparaison
avec le blanc du ractif. La couleur reste stable pendant au moins
30 minutes.

BSIS29-F

13/09/13

SPINREACT, S.A./S.A.U.Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) ESPAGNE


Tel. +34 972 69 08 00 Fax +34 972 69 00 99. e-mail: spinreact@spinreact.com

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