PRCTICA 5

CULTIVO DE HONGOS FILAMENTOSOS Y LEVADURIFORMES

INTRODUCCIN
Los hongos son organismos eucariotas de mayor tamao que las bacterias, se
distinguen de otros eucariontes como los animales por ser inmviles, y de las
algas y plantas por carecer de pigmentos fotosintticos.
Tienen nutricin hetertrofa, es decir, dependen de nutrientes orgnicos que son
solubilizados por sistemas enzimticos especficos y son absorbidos a travs de
su pared celular y membrana plasmtica. Estos organismos pueden ser
unicelulares (levaduras) o multicelulares (filamentosos), sin embargo, tambin
existen hongos dimrficos principalmente patgenos que se presentan en las dos
formas alternativamente (levaduriformes y filamentosos).
Las levaduras son de forma esfrica u oval, estn ampliamente distribuidas en la
naturaleza; frecuentemente se encuentran formando una cubierta polvosa fina
sobre frutos y hojas. Las levaduras se reproducen asexualmente por gemacin, un
proceso por el cual brota una protuberancia o yema de una clula madre que
posteriormente se separa como clula individual.
El cuerpo o estructura vegetativa caracterstica de los hongos filamentosos
(mohos) se denomina talo, generalmente constituido de hifas ramificadas que
forman el micelio. Las hifas de algunos hongos presentan tabiques transversales o
septos, aunque en el caso de los zygomycetes las hifas no presentan estos septos
y se les conoce como hifas cenocticas.
Las hifas normalmente se desarrollan a parir de esporas aunque tambin pueden
originarse a partir de fragmentos de otras hifas y crecen gracias al depsito de
nuevos materiales en su extremo, ramificndose con mucha frecuencia hasta
producir una maraa de filamentos que constituyen el micelio.
OBJETIVO

Conocer e identificar algunos aspectos de la morfologa microscpica de los

hongos filamentosos mediante la tcnica de microcultivo y examen directo de las
mismas.
CONOCIMIENTOS PREVIOS
Tipos de hongos microscpicos
Estructuras fngicas
Tcnicas de siembra y observacin de organismos fngicos

MATERIAL
Placas de agar dextrosa saboraud
Glicerina al 5%
Varillas de vidrio en forma de U
Portaobjetos
Cubreobjetos.
Asas de siembra
Pinzas
Bistur
REACTIVOS Y/O SOLUCIONES
Solucin salina estril al 0.9%
Lugol
Azul de metileno
EQUIPO
Microcoscopio
PROCEDIMIENTO
Preparacin del microcultivo
1.-En un caja de petri vaca colocar una varilla de vidrio en forma de U, encima de
esta un portaobjetos y 2 cubreobjetos.
2. Una vez preparado este sistema, colocar con mucho cuidado la placa en un
cilindro de metal para su posterior esterilizacin.

3 Una vez que se han esterilizado el sistema tomar de una caja de agar
Sabouraud y cortar cuadrados de aproximadamente 1 cm por lado, colocarlos en
cada extremo del portaobjetos del sistema antes preparado.
4. Una vez realizado el procedimiento anterior tomar un asa de siembra en forma
de L e inocular por picadura en cada uno de los lados del cuadro del agar la
muestra proporcionada.
5. Colocar un cubreobjetos sobre el agar y aadir la solucin de glicerina estril a
las cajas de perti con la varilla en forma de U, hasta alcanzar 2/3 de la misma.
6. Tapar las cajas e incubar a 30 C durante una semana.
7. Observar al microscopio los microcultivos desarrollados despus de 7 das de
incubacin, para esto colocar una gota de lugol en un extremo del portaobjetos y
en el otro una gota de solucin salina. Poner por cada gota un cubreobjetos y
observar al microscopio.
Observacin de Muestra Directa
1. Colocar en el portaobjetos una pequea gota de lugol y con un asa en forma de
L tomar una asada de la muestra analizar, homogeneizar y cubrir con un
cubreobjetos. observar al microscopio con objetivo de 10x y 40 X
2. A modo de comparacin repetir el

procedimiento pero utilizando azul de

metileno.
3. En ambos casos colocar un cubreobjetos y observar al microscopio.
RESULTADOS
De acuerdo a lo observado y al esquema presentado en la parte final de esta
prctica reportar la morfologa de los hongos observados.
Reportar de igual manera las caractersticas macroscpicas, como color y
aspecto, de la muestra observada.
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OBSERVACIONES
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Figura 6. Ejemplos de morfologas fngicas caractersticas