DETERMINACION DE MICROORGANISMOS OSMOFILOS

OBJETIVO

Aprender la tcnica de la numeracin de microorganismos Osmofilos.


FUNDAMENTO

Se basa en determinar la presencia de microorganismos osmofilos en alimentos con
altas concentraciones de azcar.

Son microorganismos especializados que viven en medios hipertnicos.

Entre los osmfilos existen dos grupos: los sacarfilos y los halfilos.

Uno de los mejores ejemplos de microorganismos sacarfilos no es una bacteria, sino las
levaduras, que viven en jugos vegetales, nctares, zumos, etc. Utilizan como solutos
compatibles polioles como el sorbitol, el ribitol

PARTE EXPERIMENTAL

MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS

- placas Petri
- pipetas bacteriolgicas
- tubos de prueba
- gradilla
- mechero
- balanza
- vaso de licuadora
- pinzas
- tijeras
- estufa a 18C
- solucin Salina Peptonada
- Papa Dextrosa

Muestra: Donas

TECNICA

Preparacin de la dilucin

.
pesar 50 gramos de muestra + 450 ml de S.S.P ( homogenizar por 2minutos o 3
minutos en la licuadora)
Pipetear alcuotas de 1ml de cada una de las diluciones decimales del homogeneizado
del alimento para la preparacin de las diluciones

.


En las placa por agotamiento superficie. En el medio Agar Papa Dextrosa
Papa Dextrosa previamente ajustada a un pH 3.5. por cada 350 ml de medio agregar
4.9ml sol Ac. Tartanico al 10% en agua estril.
Transferir un 1 ml del homogeneizado y de sus diluciones a la superficie del medio
contenido en placas independientes y homogenizar cada placa en forma de ocho
lentamente.
Expresar resultados en U.F.C/g.









Agar Papa Dextrosa

En el recuento de
Colonias Tipicas
de levadura
Incubar a 18 C por 5 das
Agar Papa Dextrosa previamente ajustado de un pH
5.6 a un pH 3.5.
Por cada 350 ml de medio agregar 4.9 ml solucin
Ac Tartanico al 10 % en agua estril

1 m 1 m 1 m
Muestra: donas



RESULTADOS
Muestra: Pan
N colonias UFC/g
Incubacin a 18 C por 5 das
10
-2
5
5*10
3
U.F.C/g

10
-3
0 -
10
-4
0 -


Fig. 1 (dilucin)

Fig. 2 (dilucin)

Fig. 3 (dilucin)

Incubacin a 37 C por 24 horas


Hay crecimientos de microorganismo en 10
-2
de 5 colonias tpicas de levadura


Contar las colonias de levaduras en l cuenta colonias. Las colonias de aspecto mucoide son
confirmadas como levaduras, preparndose extensiones en lmina porta objeto con nigrosina
y observndose al microscopio.

Contar las colonias de levaduras y multiplicar por el factor de la dilucin de la muestra.
Reporte el nmero de levaduras osmofilas por gramos (u.f.c/g), El nmero de microorganismos
osmofilos en muestra de azcar lquido mayor de 10/g usualmente indican contaminacin del
equipo usado.




Interpretacin de resultados

10
-2
= 5 U.F.C

1 ml = 5 U.F.C


REPORTE DE RESULTADOS

10ml 0.01 g
1 ml 0.001 g
5 ml 0.001 g

X 1g

X = 5*10
3
U.F.C/g


Contar las colonias de levaduras en l cuenta colonias. Las colonias de aspecto mucoide son
confirmadas como levaduras, preparndose extensiones en lmina porta objeto con nigrosina
y observndose al microscopio.

Contar las colonias de levaduras y multiplicar por el factor de la dilucin de la muestra.
Reporte el nmero de levaduras osmofilas por gramos (u.f.c/g), El nmero de microorganismos
osmofilos en muestra de azcar lquido mayor de 10/g usualmente indican contaminacin del
equipo usado.


CONCLUSIONES

- El nmero de colonias en las placas es 5*10
3
U.F.C/g
, con lo que concluimos que el
nmero de microorganismos osmfilos en la DONAS
- Con los resultados concluimos que LA DONAS se encuentra en mal estado y no es
beneficio para el consumo humano...
- El medio que utilizamos es el Agar Papa Dextrosa, y el mtodo es el mtodo de
recuento en placas.
BIBLIOGRAFA


Microbiologa Alimentara: Metodologa Analtica para Alimentos y Bebidas.
Caldern y Pascual, V. 2000. 2 Edicin. Madrid. Espaa.
Geneser, F. 1986. Histologa. Editorial Mdica Panamericana. Buenos Aires.
Anlisis Cualitativo. Ray Brumbley. 1988.