DETERMINACIN DE LA CAFEINA Y TEOBROMINA EN EL

CHOCOLATE
I. DESCRIPCIN DEL PROBLEMA

Tan importante y de vital consumo, el chocolate se convierte en un
alimento esencial, y la cantidad sugerida y mxima ideal de chocolate es de
unos 50 gramos al da. Su valor energtico favorece a la relajacin y
produce sensacin de bienestar. Los flavonoides ayudan a evitar el
congestionamiento de las arterias, por lo que ayudan a prevenir ataques al
corazn y derrames. Adems de su alto contenido energtico, el chocolate
aporta el impacto adicional del estimulante cafena y su precursor
bioqumico teobromina.
Demasiada cafena es perjudicial para muchos y algunos ni siquiera lo
toleran en pequeas cantidades. Cunta cafena hay en una tableta de
chocolate? Contiene el chocolate ms o menos cafena que el caf o las
bebidas refrescantes?

FORMULACIN DEL PROBLEMA
PROBLEMA GENERAL
- Cmo se determina el contenido en cafena de una tableta de
chocolate?
PROBLEMAS ESPECFICOS
- Contiene el chocolate ms o menos cafena que el caf o las bebidas
refrescantes?
- Cunta cantidad de cafena y teobromina existe en el chocolate?

II. OBJETIVOS
GENERAL
- Investigar como se determina el contenido en cafena y teobromina de
una tableta de chocolate
ESPECIFICOS
- Determinar la cantidad de cafena y teobromina que existe en el
chocolate blanco y negro
- Determinar si el chocolate contiene ms cafena que el caf u otras
bebidas refrescantes




III. VARIABLES
- DEPENDIENTES
Cafena y teobromina
- INDEPENDIENTES
El chocolate

IV. DISEO
HIPOTESIS GENERAL
- La cafena y teobromina se determinan mediante el cromatgrama, el
cual no se seala la presencia de estos dos compuestos.
HIPTESIS ESPECFICA
- Existe 0,392 g de teobromina y 0,050 g de cafena, en 100 g de
chocolate negro. Existe 0,010 g de teobromina y 0,0009 de cafena, en
100g de chocolate blanco.
- El chocolate contiene aun menos cafena que el caf normal y refrescos
con cafena.
V. METODOLOGIA
El anlisis de qumico de una tableta de chocolate para determinar la
cafena y la teobromina se realizaron de manera experimental, los cuales
contaron con el siguiente procedimiento experimental.
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
- El primer paso consta en pesar una cantidad homognea de chocolate,
la cual cortaremos en pequeos pedazos y la congelaremos para poner
triturarlos.
- Una vez congelado, el chocolate se vuelve quebradizo y puede
triturarse en el mortero frio.
- Las partculas obtenidas despus del triturado se trasladan a un tubo de
centrfuga, previamente tarado, de 15 ml y se pesa.
- Al tubo se aade una porcin de 10 ml de ter de petrleo, y se cierra el
tubo con un tapn.
- Se agita el tubo vigorosamente para disolver la grasa del chocolate. Se
notar que las partculas de chocolate se depositan al fondo del tubo.
- El lquido clarificado que contiene la grasa disuelta se decanta y
desecha.
- La extraccin con nuevas porciones de disolvente dos veces ms para
asegurarse que se ha eliminado la grasa del chocolate por completo.
- Para determinar la masa de chocolate desengrasado, se halla pesando
todo el tubo con el contenido, y por diferencia con la masa conocida del
tubo vaco, se halla esta.











- El siguiente paso en el procedimiento de preparacin de la muestra es
la transferencia cuantitativa del chocolate desengrasado a un matraz
Erlenmeyer, y disolver los analitos (cafena y teobromina) en agua para
proceder el anlisis qumico.
- Para pasar todo el residuo del tubo al matraz se aaden unos pocos ml
de agua pura al tubo de centrfuga y se agita, y se caliente para isolver
o suspender todo el chocolate posible.
- La suspensin del slido en el lquido se pasa del tubo a un matraz de
50 ml. Este procedimiento se repite varias veces, con nuevas porciones
de agua pura, para asegurarse que hasta la ltima partcula de
chocolate pase del tubo de centrfuga al matraz.
- Para completar la disolucin en agua de los analitos que hay en el
residuo de chocolate, se aade agua hasta un volumen de
aproximadamente 30ml.
- El matraz y su contenido se calientan en un bao e agua hirviendo para
extraer toda la cafena y teobromina del chocolate.
- Para calcular la cantidad de analito es preciso conocer exactamente la
masa total de disolvente (agua). Para ello basta saber la masa del
matraz de Erlenmeyer vaco.


























- Antes de inyectar la disolucin desconocida en un cromatgrafo para
hacer el anlisis qumico, se tiene que purificar an mas la muestra.
Para esto se pasa una porcin de los residuos de chocolate que quedan
a un tubo de centrfugo, y se centrifuga la mezcla para depositar en el
fondo del tubo la mayor parte del slido.
- El lquido sobrenadante, que an es turbio y oscuro, se filtra a travs de
una membrana de tamao de poro 0,45 micrmetros con objeto de
eliminar las partculas diminutas del slido.
- Repetir la centrifugacin y filtrado las veces que sean necesarias hasta
que la muestra se torne clara.
- Ahora pasaremos al anlisis qumico, el cual consisten en inyectar la
disolucin en la columna del cromatgrafo, para separar los
componentes de la mezcla y medir la cantidad de cada analito.
- Se inyectan unos 20 microlitros de la disolucin del extracto de
chocolate en la columna, y se vierte a una velocidad de 1,0 ml por
minuto con una disolucin preparada mezclando 79 ml de agua, 20 ml
de metanol y 1 ml de cido actico.
- Como el hidrocarburo de la superficie del slice, que contiene la
columna del cromatgrafo, es ms soluble con la cafena que con la
teobromina, la teobromina sale antes que la cafena.
- Los analitos se detectan a la salida de la columna por su capacidad de
absorber radiacin
UV. A medida que cada compuesto sale de la columna, absorbe la
radiacin emitida por la lmpara del cromatgrafo.
- La grfica de la respuesta del detector se llama cromatograma y los
picos mayores q indican esto son e teobromina y cafena.
- La cantidad de cafena y teobromina se calculara determinando el rea
debajo del pico de cada una de estas, y para eso se utiliza un
ordenador que recibe la salida del detector durante el proceso
cromatogrfico. En caso contrario se puede medir la altura de cada
pico.
- El detector debe medirse frente a concentraciones conocidas de cada
analito. De esta manera se determina la cantidad de cada analito.

VI. RECOPILACIN DE LA INFORMACIN

EL CHOCOLATE

Es el alimento que se obtiene mezclando azcar con dos productos
derivados de la manipulacin de las semillas del cacao: una materia slida
(la pasta de cacao) y una materia grasa (la manteca de cacao). A partir de
esta combinacin bsica, se elaboran los distintos tipos de chocolate, que
dependen de la proporcin entre estos elementos y de su mezcla o no con
otros productos tales como leche y frutos secos.

BENEFICIOS DEL CHOCOLATE

Estudios sugieren que un tipo especial de cacao podra ser nootrpico y
retrasar el declinamiento de la funcin cerebral que ocurre durante el
envejecimiento.
Otra investigacin indica que el chocolate puede ser efectivo para prevenir
la tos persistente. Se hall que la teobromina fue casi un tercio ms
efectiva que la codena, la medicacin lder para la tos.


El chocolate contiene una variedad de sustancias, algunas de las cuales
tienen un efecto en la qumica orgnica. Estas incluyen:
Azcar
Teobromina
Triptfano
Feniletilamina
Cafena
El chocolate es un leve estimulante para humanos principalmente debido a
la presencia de teobromina.

LA TEOBROMINA

La teobromina (C
7
H
8
N
4
O
2
, de nombre qumico 3,7-dimetilxantina o 3,7-
dihidro-3,7-dimetil-1H-purina-2,6-diona) es un alcaloide de la familia de las
metilxantinas, familia que incluye tambin a la teofilina y la cafena. En
estado puro, es un polvo blanco. Es soluble en cidos y bases, poco
soluble en agua y alcohol etlico, y prcticamente insoluble en ter etlico.
Se sabe que provoca mutaciones en bacterias y en eucariotas simples,
pero aparentemente no ocurre as en eucariotas complejas.
Esta sustancia se encuentra en la planta del cacao (Theobroma cacao),
principalmente en las semillas, las cuales contienen entre un 1% a un 4%
de sta. Al fermentar y secar las semillas, y luego procesar el extracto
obtenido, se obtiene el chocolate. El chocolate negro contiene
aproximadamente 1,5% de teobromina, esto es diez veces ms que el
chocolate con leche comn.
Produce efectos similares a las otras metilxantinas, es decir, estimulacin
del sistema nervioso central, broncodilatacin y diversos efectos
cardiovasculares; sin embargo, en los humanos no se ven estos efectos al
consumir chocolate, siendo muy raras las intoxicaciones, aunque es posible
que puede producir dolor de cabeza, inapetencia o alergias en personas
sensibles o en cantidades grandes.
En perros, gatos, hurones, cerdos, roedores, caballos y otros animales es
txica, debido a que stos la eliminan lentamente de su organismo. Se
estima que en perros la dosis letal es de 6-17 gramos de chocolate negro
(el que contiene mayor concentracin de teobromina) por cada kilogramo
de peso del animal.

LA CAFEINA

La cafena es un alcaloide de la familia metilxantina, cuyos metabolitos
incluye los compuestos teofilina y teobromina, con estructura qumica
similar y similares efectos (aunque de menor intensidad a las mismas
dosis). En estado puro es un polvo blanco muy amargo..
Su frmula qumica es C
8
H
10
N
4
O
2
, su nombre sistemtico es 1,3,7-
trimetilxantina o 3,7-dihidro-1,3,7-trimetil-1H-purina-2,6-diona y su
estructura puede verse en los diagramas incluidos
Una taza de caf contiene de 80 (instantneo) a 125 (filtrado) mg de
cafena. El caf descafeinado, en Espaa, debe contener una cantidad de
cafena no superior al 0,3%. La cafena se puede conseguir tambin en
pldoras estimulantes de hasta 300 mg.

LA CROMATOGRAFA

La cromatografa es un mtodo fsico o de separacin para la
caracterizacin de mezclas complejas, la cual tiene aplicacin en todas las
ramas de la ciencia y la fsica. Es un conjunto de tcnicas basadas en el
principio de retencin selectiva, cuyo objetivo es separar los distintos
componentes de una mezcla, permitiendo identificar y determinar las
cantidades de dichos componentes.
Las tcnicas cromatogrficas
1
son muy variadas, pero en todas ellas hay
una fase mvil que consiste en un fluido (gas, lquido o fluido supercrtico)
que arrastra a la muestra a travs de una fase estacionaria que se trata de
un slido o un lquido fijado en un slido. Los componentes de la mezcla
interaccionan en distinta forma con la fase estacionaria. De este modo, los
componentes atraviesan la fase estacionaria a distintas velocidades y se
van separando. Despus de que los componentes hayan pasado por la
fase estacionaria, separndose, pasan por un detector que genera una
seal que puede depender de la concentracin y del tipo de compuesto.
Diferencias sutiles en el coeficiente de particin de los compuestos da
como resultado una retencin diferencial sobre la fase estacionaria y por
tanto una separacin efectiva en funcin de los tiempos de retencin de
cada componente de la mezcla.
La cromatografa puede cumplir dos funciones bsicas que no se excluyen
mutuamente:
Separar los componentes de la mezcla, para obtenerlos ms puros y que
puedan ser usados posteriormente (etapa final de muchas sntesis).
Medir la proporcin de los componentes de la mezcla (finalidad
analtica). En este caso, las cantidades de material empleadas son
pequeas.

VII. PRESENTACIN DE RESULTADOS

El procedimiento experimental realizado nos llev a los siguientes
resultados los cuales estn presentados en un cuadro, con su debida
desviacin estndar, al lado de cada resultado.

Tabla 1: Anlisis de chocolate negro y blanco


















ANALITO GRAMOS DE ANALITO POR 100 GRAMOS DE
CHOCOLATE
CHOCOLATE NEGRO CHOCOLATE BLANCO
TEOBROMINA
CAFEINA

VIII. DISCUSIN DE RESULTADOS
El nmero al costado de los resultados, representa la desviacin
estndar de 3 medidas replicadas por cada muestra. Esta es una medida
de confiabilidad de los resultados. La desviacin estndar debe
compararse con el valor medio al que se aplica. Si estas tres muestras
tienen resultados i dnticos, la desviacin estndar seria 0. Si la
desviacin estndar fuera muy grande, entonces los resultados no serian
muy reproducibles.
En el caso de la teobromina en el chocolate negro, la esviacin estndar
es 0,002, la cual es menor que el 1% de l a media 0,392, y por tanto
decimos que la medida es muy confiable. Para la teobromina en el
chocolate blanco, la desviacin estndar es 0,007, la cual es casi tan
grande como la media 0,010, y por tanto la medida no es confiable.
Este margen de error se puede deber a las siguientes razones:
- Los chocolates negros y blancos vienen de una misma empresa que los
fabrica, y por lo tanto es posible que haya quedado algunos residuos
de chocolate negro en los utensilios que se utilizaron para la
preparacin del chocolate blanco.
- Es posible que la muestra del chocolate blanco se contamine con la
muestra del chocolate blanco en el procedimiento analtico.

IX. CONCLUSIONES

- Se investig como se determina el contenido en cafena y teobromina
de una tableta de chocolate mediante anlisis qumico cuantitativo.
- Se determin la cantidad de cafena y teobromina que existe en el
chocolate blanco y negro, la cual resulto:








- Se determin que el chocolate contiene menos cafena que el caf y
otros refrescos con cafena.

ANALITO GRAMOS DE ANALITO POR 100 GRAMOS DE
CHOCOLATE
CHOCOLATE NEGRO CHOCOLATE BLANCO
TEOBROMINA
CAFEINA