Terapia genic

Dr. hab. m. Viorel Nacu

Terapia genic este o metod indreptat
reduce alterarea informaiei genetice
celulare, aplicabil n tratamentul leziunilor
prin transfer genetic, a codurilor factorilor
specifici de cretere, n celule difereniate
sau celule progenitoare.
Pentru expresiea genetic, ADN-ul
transferat trebuie s ajung la nucleu,
unde poate fi transcris.
Dup aceasta, ARN-ul generat este
transportat n afara nucleului, servind ca
matrice pentru producerea, n ribozomi, a
proteinelor, cum ar fi factori de cretere.
http://en.wikipedia.org/wiki/Gene_therapy
Pentru livrarea materialului genetic n
celule pot fi utilizai vectori virali i nevirali.
Sistemele de livrare non-virale includ
liposomi, ADN dezgolit i liganzi ADN,
care sunt mai uor de produs, posednd o
toxicitate i imunogenitate mai mic, ns
eficiena de livrare a lor este umbrit de
rata sczut a reuitei.
MALADII
MONOGENENICE
MENDELIENE
1 GENE => 1
DISORDER
<10% of all human
diseases
Frequency less 2% Its
childhood disease
Environmental factors
havent influence to
progress of monogenic
disease
POLIGENICE
MULTIFACTORIALE
COMPLEXE
SOME GENES with mutations
or/and other polymorphisms =>
ONE DISEASE .
Lions share is >90% great
Min 1 Pair for 1 Person
LIFESTOCK, ENVIROMENTAL
FACTORS HAVE GREAT
INFLUENSE TO THEDISORDER
DEVELOPMENT
locus
nlocuirea genelor defecte responsabile de
maladie.
Ce este terapia genic?
Inducerea produciei unor proteine terapeutice
care la implantare n organism, de exemplu ar
stimula producerea interferonului pentru a ditruge
viruii hepatitei C
Depistare i distrugerea unor celule defecte
cum ar fi celula canceroasa sau HIV
Terapia genic poate fi clasificat n
dou tipuri:
Terapia genic a celulelor
Germinale.
n cazul terapiei genetice germinale, celulele germinale, de
exemplu, sperma sau oocitul, sunt modificate prin
introducerea de gene functionale, care sunt de regul
integrate n genomul lor.
Aceast nou abordare, teoretic, ar trebui s fie foarte
eficient n combaterea tulburrilor genetice i maladiilor
ereditare. Cu toate acestea, multe jurisdicii interzic acest lucru
pentru aplicarea pe fiine umane, cel puin pentru prezent din
considerene etice sau tehnice.
Terapia genic somatic
n terapia genic somatic, genele
terapeutice sunt transferate n celulele
somatice ale pacientului. Oricare modificare i
efectele obinute vor fi limitate doar n cadrul
unui pacient i nu va fi motenit de
descendenii pacientului sau generaiile mai
trzii.
Livrarea genelor n esuturi e posibil prin
manipulare in vivo i ex vivo.
Factorii pot fi injectai direct n esutul-gazd
in vivo sau celulele din esutul lezat sunt
scoase, prelucrate genetic in vitro i
reinjectate n esutul afectat.
Livrarea indirect este mai puin
periculoas, deoarece ingineria genic are
loc n afara organismului, n condiii
controlate.
Ex vivo, factorii de cretere pot fi livrai prin
celule endogene, capabile s rspund la
stimuli i s ia parte la procesul de
vindecare a esutului traumatizat.
Terapia genetic poate reprezenta o terapie
de ultima ans pentru afeciuni severe cum
ar fi malignizrile sau distrofia muscular
Duchenne.
Vectorii virali, integrndu-se n genomul
celulei, comport riscul unor mutageneze
inserionale. Posibila reglare anormal a
creterii celulare, toxicitatea, datorat
supraexpresiei cronice a proteinelor factorului
de cretere, dezvoltarea malignizrii sunt
consecinele teoretice ale terapiei genice,
cazuri reale nefiind nregistrate.
Terapia genic n restabilirea cartilajului
Tehnicile de transfer genic aplicabile clinic n tratamentul
leziunilor osteocondrale deocamdat lipsete. Studiile
efectuate au demonstrat capacitatea condrocitelor de a
fi transduse cu gene markeri in vivo i in vitro.
Condrocitele transduse cu gena -galactozidazei sunt
capabile s se agae de cartilaj i s exprime genele
pn la 7 saptmni.
Prima livrare cu succes a genelor potenial terapeutice
s-a fcut prin administrarea genei TGR- n articulaiile
porcuorului de guineea Hartley, folosind un vector
adenoviral.
Cu toate c s-a nregistrat un progres evident n
tratamentul genic, el nu poate fi, deocamdat,
considerat o tehnic stabilit
Distribuirea protocoalelor clinice de transfer genic aprobate,
sau Transmise autoritilor responsabile n America de Nord i
Europa
- clinical protocols approved
by or submittedto regulatoryauthorities
in North Americaand Europe
---------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Disease Number Vector Number
of of
protocols protocols
---------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Cancer 216 Rv 159
Infectious diseases 24 Ad (adenovirus) 58
Monogenic diseases 49 AAV 4
Cardivascular diseases 8 Poxviruses 19
Rheumatoid arthritis 2 HSV (herpes simple virus) 1
Cubital tunnel syndrome 1 Naked DNA 16
----------------------------------------
Total 300 Lipids 40
----------------------------------------
In vivo transfer 144 Gene gun 1
Ex vivo transfer 156 Electroporation 1
Naked RNA 1
--------------------------------------------------------
Total 300
-------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Vectori
Virusi ARN (Retrovirusi)
1. Murine leukemia virus (MuLV)
2. Human immunodeficiency viruses (HIV)
3. Human T-cell lymphotropic viruses (HTLV)
Virusi ADN
1. Adenoviruses
2. Adeno-associated viruses (AAV)
3. Herpes simplex virus (HSV)
4. Pox viruses
Vectori non virali
1. Liposomes
2. Naked DNA (histone free)
3. Liposome-polycation complexes
4. Peptide delivery systems
Transfer non viral al genelor:
Liposome;
Plazmid ADN dezgolit;
Pistol pentru gene;
Electroporarea
Mulumesc pentru atenie