Prctica 2

Regulacin del equilibrio cido-base despus del ejercicio muscular intenso

y de la ingestin de bicarbonato de sodio


Protocolo de investigacin previo a la sesin prctica
Responda a las siguientes preguntas:

1. Por qu es importante que se mantenga constante, dentro de ciertos lmites, el pH en el organismo?
2. Cules son las fuentes de iones H+ en el organismo?
3. Cules son los sistemas reguladores que facilitan la eliminacin del H+ producido en el organismo con el fin de
mantener constante el pH sanguneo?
4. Qu sistemas amortiguadores participan directamente en la regulacin del pH sanguneo?
5. Cules son los sistemas extrasanguneos que tienden a mantener el pH extracelular?


OBJETIVOS
1. Al finalizar la prctica, el alumno constatar las actividades reguladoras del pulmn y el rin para mantener el equilibrio
cido-base en condiciones que tienden a romperlo.
2. Mediante la determinacin del pH observar la variacin de la concentracin de hidrogeniones en la orina de un individuo
que ha realizado ejercicio muscular intenso.
3. Relacionar los resultados obtenidos con los cambios metablicos originados por el ejercicio muscular intenso.
4. El alumno constatar el papel del rin en el mantenimiento del equilibrio cido-base en una situacin de alcalosis
metablica provocada por la ingestin de bicarbonato de sodio.
5. Mediante la medicin del pH, observar la variacin de la concentracin de hidrogeniones en la orina de un individuo que
ha ingerido una carga de bicarbonato de sodio.


INTRODUCCIN
Dentro de los mecanismos de regulacin de que dispone el organismo para mantener la integridad fisiolgica, aquellos
involucrados en la homeostasis del pH en los fluidos extracelulares desempean un papel crucial para la supervivencia del
individuo. En este sentido cabe sealar que, como resultado de la oxidacin de los alimentos, un humano adulto promedio
produce alrededor de 20 moles de CO2 al da, Al difundir a la sangre, gran parte de dicho gas se combina con al agua en el
interior de los eritrocitos, produciendo cido carbnico (H2CO3), reaccin que es seguida por la disociacin del H2CO3
para producir el anin bicarbonato HCO3- y un in hidrgeno (H+). Dado el carcter de cido dbil del H2CO3, la fraccin
disociada del mismo es pequea; sin embargo, considerando la gran cantidad de CO2 que produce el organismo, la
acidificacin de los fluidos extracelulares sera importante en ausencia de mecanismos reguladores. En el hombre, la
intervencin de los pulmones y los riones evita que ocurra tal acidificacin manteniendo en un nivel constante la
concentracin de H+ y, por consiguiente, del pH.
Para entender el papel que juegan ambos rganos en la homeostasis del equilibrio cido-base, debe tenerse presente que
el sistema del cido carbnico implica la participacin de un componente gaseoso o voltil (el CO2) y dos componentes no
voltiles (el HCO3- y el H+). En la sangre, el equilibrio entre dichos componentes determina el valor del pH sanguneo, que
puede evaluarse mediante la bien conocida ecuacin de Henderson-Hasselbach. En el individuo normal, dicho valor fluctua
en un promedio 7.4, siendo la sangre venosa enriquecida en CO2 ligeramente ms cida en relacin con la sangre
arterial. Ahora bien, ya que a temperatura ambiente el CO2 existe en estado gaseoso, la cantidad de CO2 disuelto en la
sangre depender de la presin parcial (PCO2) ejercida por el mismo a nivel de los alvolos pulmonares. En el humano, la
magnitud de dicha PCO2 es de aproximadamente 40 mmHg lo que se traduce en una concentracin de CO2 sanguneo de
aproximadamente 25 mM; este ltimo valor incluye no
solo el CO2 como tal, sino tambin el bicarbonato y el cido carbnico. Considerando el pH sanguneo normal y el pKa del
sistema bicarbonato-cido carbnico, la relacin [HCO3-]/ [H2CO3 + CO2] es de aproximadamente 20. Es precisamente la
PCO2 la que es controlada por los pulmones, ya que durante el proceso de la exhalacin se elimina CO2, manteniendo
constante la PCO2 en los alvolos y evitando as que aumente el nivel de CO2, disuelto en la sangre. Todo proceso o
patologa que se manifieste en una alteracin en la frecuencia y/o profundidad del proceso de inhalacin-exhalacin, dar
como resultado una
alteracin de la PCO2 alveolar aumentandola o disminuyndola, -con la siguiente modificacin del nivel de CO2 disuelto
en sangre y, por consiguiente, del pH.
Por lo que respecta a los riones, su participacin en el mantenimiento de un pH extracelular constante se da a travs de
dos mecanismos: la excrecin de equivalentes cidos (H+) hacia la orina y la regulacin de la cantidad de HCO3-
reabsorbido hacia la sangre desde el filtrado glomerular. A diferencia del intercambio gaseoso en los pulmones, los
mecanismos de regulacin renal son de largo plazo, por lo que su efecto ser manifiesto en cuestin de horas. Su
importancia se enfatiza en situaciones patolgicas donde se altera el intercambio de gases pulmonar (es decir, en la
acidosis y alcalosis respiratorias), en cuyo caso es necesario aumentar o disminuir la tasa de reabsorcin del HCO3- , o
bien en estados fisiolgicos que producen cantidades importantes de cidos orgnicos (por ejemplo, en la diabetes no
controlada o durante el ejercicio intenso) donde se incrementa la excrecin de H+ Gran parte de este ltimo aparece en la
orina acomplejado con el amoniaco en forma de in amonio (NH4+) o asociado con el fosfato en forma de fosfato
monobsico de sodio (NaH2PO4), representando este ltimo la llamada acidez titulable. En general, el pH de la orina ser
un reflejo de la produccin de cidos no voltiles por el organismo.
El resultado final de los mecanismos fisiolgicos que participan en el mantenimiento del equilibrio cido-base es el de
mantener el pH extracelular en un rango compatible con el funcionamiento adecuado del organismo.

Material proporcionado por el alumno
Vasos de vidrio, tipo Gerber de aproximadamente 100ml (al menos 6)
Orina obtenida bajo las condiciones mencionadas en el mtodo
Solucin de bicarbonato de sodio a 3%: 250 ml de agua con 7.5 g de bicarbonato de sodio (para consumir)
Papel higinico.


Material proporcionado por el laboratorio por equipo
Potencimetro.
Buffers de calibracin
Vaso de precipitado de 500mL

Parte 1
Mtodo
Un alumno por equipo desayunar o comer normalmente (evitar ingestin de jugos cidos); despus har lo que se indica
a continuacin.
1. Tomar 250 ml de agua una hora antes de la clase prctica. Vaciar la vejiga y descartar esa orina.
2. Tomar 250 ml de agua inmediatamente antes de la clase prctica.
3.-Orinar en un vaso de vidrio de aproximadamente 100 ml.
4. Ingerir 250 ml de agua.
5. Realizar ejercicio muscular intenso, como subir y bajar varias veces las escaleras de tres o cuatro pisos u correr
alrededor del campus al menos 30 minutos.
6. Obtener muestras de orina cada 15 minutos, como en el inciso 3, hasta completar por lo menos cinco muestras.
7. A cada muestra se le determinar el pH inmediatamente despus de haber sido obtenida ya que con el tiempo el pH
tiende a aumentar debido a la prdida de dixido de carbono y a que el crecimiento bacteriano produce amoniaco a partir
de la urea.

Anlisis de resultados
Una vez obtenido el valor del pH para cada una de las 5 muestras de orina, trazar una grfica de pH contra tiempo;
interpretar los resultados y discutirlos en grupo.

Parte 2
Mtodo
1. Tomar 250 ml de agua una hora antes de la clase prctica. Vaciar la vejiga y descartar esa orina.
2. Tomar 250 ml de agua inmediatamente antes de la clase prctica.
3. Orinar en un vaso de vidrio de aproximadamente de 100 ml.
4. Ingerir 250 ml de agua con 7.5 g de bicarbonato de sodio.
5. Obtener muestras de orina cada 15 minutos, hasta completar por lo menos 5 muestras.
6. A cada muestra se le determinar el pH inmediatamente despus de haber sido obtenida.

Anlisis de resultados
Una vez obtenido el valor del pH para cada una de las cinco muestras de orina, trazar una grfica de pH contra tiempo;
interpretar los resultados y discutirlos en grupo.

Cuestionario
1. Cules son las reacciones de formacin del cido carbnico (H2CO3) a partir de CO2 y H2O, y de su disociacin
para formar el ion bicarbonato? Escrbalas.
2. Escriba la ecuacin de Henderson y Hasselbalch aplicada al sistema HCO3

/H2CO3 y, con base en ella, conteste
la siguiente pregunta:
a)Cmo participan el aparato respiratorio y el rin en el control del pH sanguneo?

Reporte:
Recuerda que el reporte debe realizarse de manera individual en la bitcora. No olvides incluir el cuestionario en el
apartado de discusin de la prctica, ya que estas preguntas te permitirn enriquecer tu discusin y obtener conclusiones
apropiadas

Referencias
1. Devlin TM. Bioqumica. Libro de texto con aplicaciones clnicas. 4a. ed. Barcelona: Editorial Reverte; 2004.
2. Montgomery R. Bioqumica: casos y texto. 6a. ed. Editorial Harcourt-Brace; 1998: cap.4.
3. Villazn SA, Crdenas CO, Villazn.