CICLO DE KREBS

El piruvato (que viene de la glucolisis) es llevado a la matriz mitocondrial, difunde las membranas mitocondrial
y entra en la matriz, entonces allá en la matriz el piruvato descarboxila oxidativamenrte al complejo
multienzimático del piruvato deshidrogenasa y se convierte en acetil coenzima A. este complejos de piruvato
deshidrogenasa utiliza tiamina pirofosfato, NAD, FAD y lipoamida.
Entonces el acetil CoA que resulto de esa descarboxilacion puede también proceder de la beta oxidación de
los acidos grasos, del esqueleto hidrocarbonoado de ciertos aminoácidos (leucina o lisina).
Entonces ese Acetil CoA debe ser oxidado, el gupo acetilo procedente de los glúcidos, lípidos o proteínas
debe ser oxidado a través del fondo común metabólico que se llama ciclo de krebs.
El ciclo de krebs es una ruta cíclica (parte de un punto y vuelve al mismo punto), el objetivo de este ciclo es
generar coenzimas reducidas (NADH + H+ o FADH2). el proceso esta ocurriendo a través de la matriz
mitocondrila, por que los sistemas enzimáticos de las rutas metabólicos estan ubicados en la matriz
mitocondrial, a excepción de dos sistemas acolitasa y succinato deshidrogenasa que están ligados a la
membrana interna de la mitocondria.
Lo que se va a oxidar es el grupo acetilo. El acetil CoA en la primera reacción del ciclo se condensa con el
oxalacetato (el oxalacetato procede básicamente de la carboxilacion del piruvato) y produce citrato con la
salida de la coenzima A, la citrato sintasa permite la condensación; el citrato debe ser descarboxilado, no es
posible una descarboxilacion directa del citrato, por lo tanto la célula se ve obligada a reordenar el citrato para
luego si descarboxilarlo.
Entonces la aconitasa hace un reordenamiento, en la primera reacción de la aconitasa, hace una
deshidratación (elimina agua) y aparece un metabolito intermediario, sale agua y se produce Cis- aconitato y
luego entonces la misma aconitasa vuelve e incorpora los mismo elementos del agua que había sacado, pero
entonces cambia, el hidrogeno del agua lo incorpora donde antes estaba el hidroxilo y en el carbono que tenia
hidrogeno le incorpora el OH y aparece entonces un isómero el isocitrato. Ahora si se puede descarboxilar.
Entonces el isocitrato es descarboxilado oxidativamente por isocitrato deshidrogenasa, pero resulta que
primero se da la deshidrogenacion y luego la descarboxilacion.entonces cpomo es un sustrato parcialmente
oxidado el aceptor es el NAD que entra oxidado y sale reducido y se produce un compuesto intermediario que
es oxalosuccinato y ahora si el oxalosuccinato descarboxila con la misma enzima, isocitrato deshidrogenasa
y se convierte en α – cetoglutarato.
El α – cetoglutarato sigue descarboxilando oxidativamente por el complejo enzimático de α – cetoglutarato
deshidrogenasa, otra vez entra el NAD oxidado y sale reducido, sale CO2 otra vez, pero este que sale no es
del grupo acetilo, este es del oxalacetato; con esta descarboxilacion se produce succinil CoA.
El succinil CoA como es macroergico, la succinato tiocinasa transforma el succinil CoA en succinato pero
aprovecha la energía para producir GTP a partir de GDP, pero como hay que regenerar el GDP hay que
transferir el fosfato al ADP para convertir en ATP. Esta es la única fosforilación a nivel de sustrato que ocurre
en el ciclo de krebs.
Entonces el succinato se deshidrogena ahora, como esta altamente reducido, la succinato deshidrogenasa
usa como aceptador no al NAD sino al FAD produciendo fumarato.
El fumarato se hidrata a malato por medio de la fumarasa, y el malato como ya esta parciamente oxidado, la
malato deshidrogenasa regenera el oxalacetato y el aceptor es el NAD.
Entonces en la siguiente vuelta del ciclo es cuando van a salir en forma de CO2 los carbonos de la primera
molécula de acetil CoA que entro, como el ciclo no da una vuelta sino n vueltas, se están oxidando grupos
acetilos que provienen de los glúcidos, grasas o proteínas y esta generando conezimas reducidas; esas
coenzimas reducidas iran ahora a la cadena respiratoriapara liberar energía libre de gibbs, y producir en la
fosforilación oxidativa el ATP y de paso al reoxidarse la cadena respiratoria esta perpetuando el ciclo.
Por cada vuelta del ciclo se están generando 3 moleculas de NAD reducido (isocitrato deshidrogenasa, α –
cetoglutarato deshidrogenasa y malato deshidrogenasa) una de FAD reducido (succinato deshidrogenasa) y
un ATP (La nucleosido disfosfoquinasa es la enzima que hace la transferencial del ADP a ATP)

INHIBIDORES DEL CICLO DE KREBS

El clico tiene 3 inhibidores clásicos: Fluoracetato, Arsenito, malonato.
El fluoracetato en forma de fluor acetil CoA reacciona con el oxalacetato y produce fluorcitrato, pero el
fluorcitrato la aconitasa no lo reconoce y se paraliza el ciclo.
El arsenito que es la forma trivalente del arsénico inhibe todos aquello compuestos multienzimaticos que usan
lipoamida como coenzima, y en el caso del ciclo el que usa lipoamida es el complejo enzimático de α –
cetoglutarato deshidrogenasa. Pero ojo la piruvato deshidrogenasa también usa lipoamida y también es
inhibida por el arsenito pero esa primera reacción ocurre intramitocondrialmente pero no hace parte del ciclo,
pero también es inhibda por el arsenito.
El arsenito inhibe piruvato deshidrogenasa, α – cetoglutarato deshidrogenasa, alfa cetoacidos de
cadenaramificada deshidrogenasa que tiene que ver con la catabolia de leucina, isoleucina y valina.
El malonato es inhibidor competitivo de la succinato deshidrogenasa.

REGULACIÓN DEL CICLO

Primero el aporte de sustratos (acetil CoA y oxalacetato), un punto importante en el aporte de sustratos lo
juega el complejo multienzimatico de la piruvato deshidrogenasa, ella es la que transofrma piruvato a Acetil
CoA, aquí el NAD entra oxidado y sale reducido. La piruvato deshidrogenasa es inhibida por sus productos
(Acetil CoA y NAD reducido). Cuando intramitocondrialmente aumente los niveles de Acetil CoA y NAD
reducido, baja la actividad de la piruvato deshidrogenasa y se frena la velocidad del ciclo por que no se
produce acetil CoA. Además ella es regualda covalentemente también, asi que la piruvato deshidrogenasa
existe en dos formas: una forma carente de fosofato y otra desfosforilada, entonces resulta que el cambio
conformacional es inducido por una protein quinasa pero esta protein quinasa es dependiente de ATP y calcio,
no de AMPc. Cuando el ATP aumenta intramitocondrialmente la protein quinasa sew activa y ella fosforila a la
piruvato deshidrogenasa inactivandola. La desfosforalizacion de la enzima es catalizada por fosfoproteínas
fosfatasa, entonces esta fosfoproteínas fosfatasa es dependiente de calio y de magnesio; cuando se activa la
fosfoproteínas fosfatasa lo que hace es desfosforilar la piruvato deshidrogenasa activándose, y si ella se
activa, aumentando la producción de Acetil Coa y a su vez la velocidad del ciclo.
Pero resulta que las enzimas propias del ciclo también pueden ser reguladas. La citrato sintetasa es inhibida
por exceso de succinil CoA, de citrato (producto), NAD reducido, ATP y Acil CoA de cadena larga.
Otro punto de regulación isocitrato sintasa, inhibido por exceso de NAD reducido y ATP; estimulado por
exceso de NAD oxidado y ADP.
Y luego el complejo de α –cetoglutarato deshidrogenasa uqe también es inhibido por el producto de la reacción
uqe es succinil CoA y por exceso de NAD reducido..
Entonces que estamos viendo allí, que los metabolitos que indican a la célula defecto energético NAD oxidado,
ADO, Pi, etc. operan como estimuladores. Y los metabolitos que indican exceso de energía son inhibidores.
Pero además el ciclo esta regulado por la cadena respiratoria, por que si la cadena respiratoria se paraliza, no
ocurrirá la reoxidacion de las enzimas para que se pueda perpetuar el ciclo. Otro punto entonces es la
velocidad de la cadena respiratoria.
Entonces los inhibidores de la cadena respiratoria también van a inhibir al ciclo por que el impiden a la célula
respirar, si la célula no reoxida las enzimas frena el ciclo, por que se cae la disponibilidad de NAD oxidado y
FAD oxidado y el ciclo se paraliza.
El ciclo juega un papel dual (antibolico): una catabólico por que permite la oxidación de glúcidos, lípidos
proteínas y anabólico o de síntesis por que el ciclo permite que le sean sustraído metabolitos para usarlos
como sustratos en rutas biosintetica. Por ejemplo se puede sustraer del ciclo succinil CoA para utilizarla como
sustrato junto con la glicina en la biosíntesis del hemo. Resulta que la biosíntesis del hemo se inicia con
acciones de succinil CoA y glicina, la delta aminolevulinato sintasa hace que se produzca un complejo que es
el Delta aminolevulinato y a partir de esre se genera el hemo.
Si nosotros le extraemos metabolitos al ciclo para usarlo como sustrato en rutas biosinteticas y no rellenamos
de metabolitos al ciclo entonces cabe la probabilidad que el ciclo se afecta en su velocidad. Para eso existen
reacciones anapleroticas (de relleno): piruvato carboxilasa, Piruvato a oxalacetato y rellena el ciclo por aquí.
Otra reacción es la cataliza por la fosfoenol piruvato carboxiquinasa que transforma fosfoenol piruvato en
oxalacetato.
Otra reacción es la que cataliza L-glutamato deshidrogenasa transforma glutamato en α –cetoglutarato,
desamina oxidativamente al glutamato.
LANZADERA ASPARTATO - MALATO
El oxalacetato a nivel citosolico entra a formar por una malato deshidrogenasa citosolica en malato. El
problema es que estos equivalente de reducción están siendo producidos en el citosol celular y hay que
llevarlos a la matriz mitocondrial.
Los equivalentes de reducción se entregan al oxalacetato y es convertido en malato, el malato aislado por u
sistema de transporte mitocondrial entra del citosol a la matriz y en la matriz la entra de malato es
compensada con la salida de α –cetoglutarato, osea que para que el malato pueda entrar, debe salir del
citosol α –cetoglutarato. El malato deshidrogena usando una malato deshidrogenasa intramitocndrial, entonces
el NAD entra oxidado y sale reducido. Los equivalentes de reducción que estaban en el citosol ahora están en
la matriz y entonces el malato se transforma en oxalacetato.
En el citosolo: el oxalacetato se convierte en malato para eso necestio que el NAD entre reducido y salga
oxidado, y ese NAD fue el que produjo el gliceraldehido 3P deshidrogenasa, entonces se perpetuar el proceso
glicolitico en condición de aerobiosis.
Ahora si el malato entra a la membrana y usando a la malato deshidrogenasa se convierten en oxalacetato en
la matriz, y el NAD entra oxidado y sale reducido.
Pero como el oxalacetato no es permeable a las membranas el no puede salir al citosol otra vez, entonces la
célula lo transamina, por medio el oxalacetato aspartato aminotransferasa fosfato piridoxal se transamina a
aspartato pero para que se transamina a aspartato necesita el concurso de glutamato que proviene del citosol
y que llega a la matriz ayudado por un sistema de transpoorte, entonces el glutamato le da el grupo amino al
oxalacetato y lo convierte en aspartato pero el glutamto se convierte en α –cetoglutarato, que es precisamente
el que sale para compensar la entrada de malato.
El aspartato sale de la matriz al citosol, la salida de aspartato al citosol la compensa la entra de glutamato.
Ahora en el citosol se invierte la reacción entonces el aspartato se transamina aspartato aminotransferasa
fosfato piridoxal para eso necesita del α –cetoglutarato que salió, cuando el aspartato le entre el grupo amino
al α –cetoglutarato lo convierte en glutamato y el se ocnvierte otra vez en oxalacetato cerrando el ciclo.
Se mantiene en equilibrio lo que hay citosolicamente con lo que hay intramitocondrialmente.
El objetivo ha sido llevar los equivalentes de reducción producidos en el citosol a la matriz mitocondrial.

LANZADERA DEL α – GLICEROL FOSFATO

El objetivo va hacer el mismo.
La dihidroxiacetona fosfato es convertida enm glicerol 3P usando una glicerol 3P deshidrogenasa citisolica que
esta ligada al NAD, entonces se oxida y los equivalente de reducción los tiene el glicerol 3P. Aquí en la
membrana esta ubicado un sistema enzimático que es glicerol 3P deshidrogenasa de membrana con el centro
activo mirando al citosol, que poasa que el glicerol 3P no tiene por que entrar, el es deshidrogenado y vuelto a
convertir en dihidroxiacetona fosfato. Y del lado interno la enzima esta ligada al FAD acepta los electrones y
sale reducida. Glicerol 3P deshidrogenasa de membrana esta ligada al FAD y no al NAD, entonces los
qeuivalentes de reducción quedan en la membrana interna en forma de FAD reducido.

Hay células que prefieren lanzadera de malato aspartato como las células hepáticas pero hay otras que
prefieren lanzadera de α- glicerol fosfato como en el caso del cerebro.