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Universidad Nacional Autnoma de Mxico

Facultad de Estudios Superiores Cuautitln Departamento de Ciencias Biolgicas Seccin de Bioqumica y Farmacologa Humanas

Anatoma e Histologa Humanas

Grupo: 2301

Practica N 1 Microscopia ptica, sus tcnicas y la aplicacin en Anatoma e Histologa Humana

Equipo: 7 Daz Martnez Carolina Gonzales Neria Alan Maximiliano Snchez Martnez flor Abigail

Asesores: C.D. Tais Nopal Guerrero Q.F.B. Ma. Vernica Vzquez Cianca

INTRODUCCION
El microscopio es el instrumento ms importante en la histologa debido al tamao de las estructuras analizadas. Cundo un rayo de luz atraviesa un material biolgico cambian sus caractersticas y estas modificaciones se hacen visibles mediante un sistema de lentes. Las clulas y los tejidos no coloreados pueden captarse en los microscopios como carentes de color y transparentes, porque no presentan suficiente contraste. Con la ayuda de tinciones histolgicas se logra una absorcin diferencial de luz, de modo que se visualizan las diferentes estructuras. Durante el siglo XVIII el microscopio tuvo diversos adelantos mecnicos que aumentaron su estabilidad y su facilidad de uso. Las mejoras ms importantes de la ptica surgieron en 1877, mejor la microscopa de inmersin sustituyendo el agua por aceite de cedro, lo que permite obtener aumentos de 2000. El microscopio electrnico de transmisin (TEM) fue el primer tipo de microscopio electrnico desarrollado. Utiliza un haz de electrones en lugar de luz para enfocar la muestra consiguiendo aumentos de 100.000X. Fue desarrollado por Max Knoll y Ernst Ruska en Alemania en 1931. Posteriormente, en 1942 se desarrolla el microscopio electrnico de barrido (SEM). Los avances en la construccin de microscopios se han basado en el perfeccionamiento de la ptica y la iluminacin, contando actualmente con el microscopio confocal, de fluorescencia, entre otros. (Lodish, 2002). Los tipos de microscopio ms frecuentes utilizados en el campo de la biologa son: Microscopio ptico estndar (ptico) Microscopio de barrido confocal Microscopio de inmunofluorescencia Microscopio de contraste de fases Microscopio de luz polarizada

El microscopio ptico o compuesto, el ms usado en nuestros das que tiene ms de una lente de objetivo. Los microscopios compuestos se utilizan especialmente para examinar objetos transparentes, o cortados en lminas tan finas que se transparentan. Se emplea para aumentar o ampliar las imgenes de objetos y organismos no visibles a simple vista. Existen dos parmetros sumamente importantes en un microscopio el poder de resolucin y el aumento, el factor ms significativo para una buena imagen es el poder de resolucin que es la mejor distancia necesaria para que dos partculas aparezcan como objetos separados.

La propiedad de aumento slo tiene valor prctico si se socia a un buen poder de resolucin. La capacidad de aumento de un microscopio es posible conocerla multiplicando el valor del aumento del ocular por el aumento del objetivo. El microscopio constituye un instrumento delicado, por lo que se recomienda tener los cuidados mayores. Al ser el microscopio un aparato de precisin y, por lo tanto, delicado, es muy conveniente asegurar un buen funcionamiento atendiendo siempre a las siguientes normas: 1. Para transportar el microscopio deben utilizarse siempre las dos manos, sujetndolo por el brazo con una mano y por el pie con la palma de la otra. 2. Una vez colocado el microscopio en su sitio, no debe moverse hasta que finalice la prctica. Cuando se vaya a cambiar de observador se debe mover l y no el microscopio. 3. Mover siempre suave y lentamente cualquier elemento del microscopio. 4. Nunca poner los dedos en las lentes del ocular ni del objetivo. Si se ensucian dichas lentes se limpiarn con un pao suave de algodn, sin utilizar ningn disolvente. 5. No sacar de su sitio el ocular ni los objetivos, a no ser que vayan a ser sustituidos, en cuyo caso la operacin debe realizarse lo ms rpidamente posible, para evitar la entrada de polvo. 6. Asegurarse de que el portaobjetos est bien seco cuando va a ser colocado sobre la platina. 7. Al enfocar, sobre todo con los objetivos de mayor aumento, hay que evitar que el extremo del objetivo choque con la preparacin. Para ello acercaremos el objetivo a la preparacin mirando lateralmente y luego, mirando ya a travs del ocular, enfocamos alejando el objetivo.

Por otra parte otro aspecto fundamental es la iluminacin y una buena tcnica de la misma nos permite visualizar mejor las muestras, para esto se puede emplear la la iluminacin de Kohler. Es una tcnica para iluminar uniformemente al espcimen desde una fuente de iluminacin no uniforme. Existen dos tipos de iluminacin; un mtodo en el cual la luz es trasmitida a travs del espcimen y otro mtodo, cuando la luz es reflejada desde el espcimen.

Objetivos
Aprender a utilizar el micromtrico y el micromtrico para hacer un buen enfoque, evitando que con los objetivos y la platina se pueda romper alguna muestra. Saber manejar bien el objetivo de 100x utilizando aceite de inmersin en diferentes tipos de muestras histolgicas.

Conocer el fundamento bsico del microscopio ptico, as como su funcionamiento, la composicin de su estructura, sus instrumentos de medicin, el manejo de los objetivos y el cuidado del microscopio. Conocer el microscopio estereoscpico, el fundamento fsico, as como el tipo de muestras en el cual se usa y su cuidado.

METODOLOGIA
La indicada en el Manual de Biologa celular, correspondiente a la prctica nmero 1: Microscopia ptica, sus tcnicas y la aplicacin en Anatoma e Histologa Humanas, pginas 13 y 14.

OBSERVACIONES Y RESULTADOS
Se nos proporcionaron 20 muestras procesadas histolgicamente, para ser observadas con el microscopio. De stas solamente se escogieron dos para observarlas en el microscopio.

Organo: Vejiga de gato Tincin: Hematoxilina y Eosina (H y E) Aumento: 10x Descripcin: la estructura se ve con ms detalle, pudindose visualizar reas ms coloreadas de color fucsia y otras de color rosa plido. Tambin hay presencia de estructuras pequeas de forma ovoide en la parte superior izquierda

Organo: Esfago canino Tincin: Hematoxilina y Eosina (H y E) Aumento: 40x Descripcin: slo se ve una estructura con pliegues,, su textura se ve rugosa.

Microscopio Estereoscpico Organo: corazn de pollo Tincin: Aumento: 2x Descripcin: En la imagen casi no se puede observar las formas, pero en el microscopio se lleg a notar tejidos.

ANALISIS DE RESULTADOS

CONCLUSIONES

BIBLIOGRAFIA

STARR, C., TAGGART R. (2004). Biologa la unidad y diversidad de la vida. 10 ed. Thomson: Mxico, D.F. SCHAFER, P. (1982). Conceptos bsicos de Anatoma y Fisiologa. 2 ed. Harper y Row Latinoamericana: Mxico. CORMACK, Ph.D.,H. D. (1988). Histologa de Ham. HARLA: Mxico.

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