a hioqumica es una ciencia que se ha desarrollado con un ritmo muy acelerado en el presente siglo.

Los logros alcanzados en los ltimos aos en el conocimiento de esta ciencia han influido decisivamente en el progreso de numerosas ramas cientficas afines, en particular en las biomdicas. Muchos hallazgos de la bioqumica han incidido directa o indirectamente en la teora y la prctica mdica; por ello resulta imprescindible el dominio de los aspectos fundamentales de esta disciplina por parte de mdicos, estomatlogos, licenciados en enfermera, y en general por todo el personal profesional relacionado con la asistencia, docencia e investigacin en el campo de las ciencias mdicas. El texto fue elaborado teniendo en cuenta los intereses de las diferentes especialidades de las ciencias mdicas. De igual modo,ste puede ser de utilidad a estudiantes de cualquier otra carrera biolgica. En el Torno 1V se tratan, adems, algunos aspectos especializados de la bioqumica de inters clnico actual, lo que permite a estndiantes de am superiores y graduados de lar diferentes ramas delas ciencias mdicas complementar y aplicar conocimientos adquiridos al cursar las ciencias bsicas. Nuestros propsitos son contrihuir a mejorar la comprensin de la disciplina Bioqumica y destacar su importancia en la formacin de profesionales de las especialidades mdicas. Corresponde principalmente a nuestros estudiantes evaluar en qu medida ello se ha logrado.

'

Los autores

CONTENIDO

SECCI~N XL ESPECIFICIDADES BIOQU~~CAS

DE ALGUNOS

C A P ~ T63. UU La J sangre 1119

Composicin 1120 Protenas plasmticas 1121 Albmina 1122 Alfa globulinas 1122 Beta globulinas 1123 Gamma globulinas 1123 Fibringeno 1123 Bioqumica de los elementos formes 1124 Eritrocitos 1124 Leucocitos 1127 Plaquetas 1128 Coagulacin sangunea 1128 Va intrnseca 1130 Va extrnseca 1131 Etapa comn 1131 Formacin de trombina 1131 Trastornos de la coagulacin 1134 Regulacin del pH sanguneo 1135 Hemoglobina y metabolismo entrocitano 1136 Hemoglobina y transporte de xido ntrico 1138 Resumen 1138 Ejercicios 1139

Lpidos de la mielina 1142 Protenas de la mielina 1143 Metabolismo del sistema nervioso central 1143 Metabolismo glucdico 1143 Metabolismo de los aminocidos 1144 Metabolismo de los Ipidos 1145 Metabolismo de los cidos nucleicos 1145 Mecanismo bioqumico de la actividad neurona1 1146 Generacin y conduccin del impulso nervioso 1146 Trasmisin qumica del impulso nervioso 1148 Sinapsis 1148 Receptor de la acetilcolina 1150 Neurotrasmisores 1151 Actividad nerviosa superior 1155 Resumen 1156 Ejercicios 1157

CAP~IULO 65. Aspectos bioqunieos de la visin 1159

Crnea 1159 Cristalino 1160 Humor acuoso 1161 Humor vtreo 1161 Retina 1161 Fotoqumica de la visin 1161 Transduccin de la seal desde la rodopsina hasta la membrana plasmtica 1163 Recuperacin del estado inicial 1163 Resumen 1164 Ejercicios 1165

CAPiTZno 66. Tejido muscular 1167

Clulas del tejido muscular estriado 1168 Retculo sarcoplasmtico1168 Estmctura de las miofibrillasy sarcmeras 1169 Mecanismo de la contraccin muscular 1175

CAPiTUUI 64. Tejido nervioso 1141

Composicin del tejido nervioso 1141

Eventos en la placa motora 1175 Eventos en el retculo sarcoplasmticol176 Eventos en lasmiofibrillas 1177 Eventos en el sarcoplasma y los sarcosomas. Aporte energtico para la contraccin 1178 Estado de ttano 1178 Aspectos especiales del msculo cardaco 1179 Aspectos especiales del msculo liso 1179 El movimiento en otras clulas 1180 lnhibidores de los movimientos celulares 1181 Dktrofiasmusculares 1181 Resumen 1181 Ejercicios 1182

Placa dental 1211 Pelcula adquirida 1211 Colonizacin por microorganismos especficos 1212 Maduracin de la placa 1212 Metabolismo de la placa dental 1212 Bioqumica de las caries 1213 Principales mecanismos hioqumicos propuestos para la produccin de las caries 1214 Prevencin de la caries dental. Accin del tlor 1215 Metabolismo del tlor 1215 Mecanismo de accin 1216 Resumen 1217 Ejercicios 1218

CAP~TULO 67. Tejido adiposo 1183

Funcin biolgica 1183 Composicin qumica 1184 Formacin de depsitos de grasa (lipognesis)1184 Formacin de depsitos de grasa a partir de fuentes lipdicas 1184 F o m a n d e g r a s a i a p ~ d e h e n t e no s lipdicas1184 Kegnlacin de la formacin de los depsitosde grasa 1185 Movizacin de las grasas del tejido adiposo (lipsi) 1185 Regulacin de la liplisis 1186 Desbalances en la regulacin de la lipognesis 1186 Obesidad 1186 Peculiaridades del metabolismo en la obesidad 1188 Resumen 1189 Ejercicios 1190

C-0

68. Tejido eoneetivo 1191 Protenas de la sustancia intercelular 1191 Colgeno 1191 Elastina 1195 Otras protenas del tejido conectivo 1196 Proteoglicanos 1197 cido hialurnico 1198 Condroitn, derniatn y queratn sulfatos 1198 Heparina 1199 Metabolismo de los proteoglicanos 1199 Funciones de los proteoglicanos 1200 Resumen 1200 Ejercicios 1201

CAP~TULO 70. Requerimientos nutricionales en el ser humano 1223 Requerimientos euergticos 1223 Valor calrico de los nutrientes 1233 Requerimientos moleculares 1234 Resumen 1235 Ejercicios 1236 CAPiTULo 71. Protenas en la dieta humana 1239
Requerimientos protenicos del ser humano 1239 Factores que influyen en los requerimientos protenicos 1240 Determinacin de los requerimientos protenicos y de la dosis ioocua 1241 Valor biolgico de las protenas 1247 Determinacin del valor biolgico de una protena, basado en el balance nitrogenado 1247 Mtodo del cmputo o score 1248 Accin suplementaria de las protenas 1249 Digestibilid'ad de las protenas 1249 Utilizacin neta de las protenas 1249 Problemas de la malnutricin 1250 Kwashiorkor 1250 Marasmo nutricional1251 Resumen 1251 Ejercicios 1252

CAphno 69. Bioquhiea dental 1U)3

Saliva 1203 Composicin qumica de la saliva 1204 Accin amortiguadora del pH de la saliva 1206 Otras acciones de la saliva 1206 Composicin de los tejidos dentarios 1206 Esmalte 1206 Dentina 1208 Cemento 1209 Pulpa dentaria 1209 Factores que influyen en el metabolismo del diente 1210

C A P ~ T I72. ~ LGleidos O y Ipidos en la dieta humana 1255 Glcidos en la dieta humana 1255

Requerimientos 1255 Disponibilidad y fuentes 1256 Almacenamiento de los glcidos 1256 Alteraciones metablicas relacionadas con la ingesta glucdica 1257 Lpidos en la dieta humana 1257 Requerimientos 1257 Disponibilidad y fuentes 1258 Almacenamiento de los Ipidos 1258 Alteraciones metablicas relacionadas con la ingesta lipdica 1259 Alteraciones metablicas principales en el alcoholismo 1259 La dieta en la prevencin de algunasenfermedad crnicas 1260 Resumen 1261 Ejercicios 1262

Cmtrum 73. Vitaminas en la nutricin humana 1263

Concepto de vitamina 1263 Clasificacin 1264 Tiamina o vitamina B, 1265 Estructura qumica y funcin 1265 Fuentes y requerimientos 1265 Estado carencia11266 Rihoflavina o vitamina B, 1266 Estructura qumica y funcin 1266 Fuentes y requerimientos 1266 Estado carencial 1267 Niacina (cido nicotnico y nicotinamida) 1267 Estructura y funcin 1267 Fuentes y requerimientos 1267 Estado carencial 1268 Piridoxina o vitamina B, 1268 Estructura qumica y funcin 1268 Fuentes y requerimientos 1268 Estado carencial 1269 Biotina 1269 Estructura qumica y funcin 1269 Fuentes y requerimientos 1269 Estado carencial 1270 cido flico 1270 Estructura qumica y funcin 1270 Fuentes y requerimientos 1271 Estado carencial 1271 Cobalamina o vitamina B,, 1271 Estructura qumica y funciones 1271 Fuentes y requerimientos 1273 Estado carencial 1273 cido pantotnico 1273 Estructura qumica y funcin 1273 Fuentes y requerimientos 1274

Estado carencia11274 cido lipoico 1274 Estructura qumica y funcin 1274 Fuentes y requerimientos 1275 lnositol 1275 Colina 1275 cido ascrbico o vitamina C 1276 Estructura qumica y funcin 1276 Fuentes y requerimientos 1276 Estado carencial 1276 Retinol o vitamina A 1277 Estrnctura qumica y funcin 1277 Fuentes y requerimientos1277 Estado carencial 1277 Vitaminas D 1278 Estructura y funcin 1278 Fuentes y requerimientos 1278 Estado carencial 1279 Tocoferoles o vitaminas E 1279 Estrnctura qumica y funcin 1279 Fuentes y requerimientos 1279 Estado carencial 1279 Vitaminas K 1280 Estructura qnmica y funcin 1280 Fuentes y requerimientos 1280 Estado carencial 1281 Antagonistas vitamnicos 1281 Inactivacin de las vitaminas 1281 Resumen 1281 Ejercicios 1283

Cmfiur.0 74. Minerales en la nutrici6n humana 1285

Clasificacin de los minerales 1285 Funciones de los minerales 1286 Elementos principales o macroelementos 1286 Calcio 1286 Fsforo 1287 Sodio, cloro y potasio 1288 Magnesio 1289 Oligoelementos o elementos trazas 1290 Hierro 1290 Iodo 1291 Cobre 1292 Cromo 1293 Cinc 1294 Molibdeno 1294 Selenio 1295 Manganeso 1295 Flor 12% Silicio 1296 Cobalto 1296 Resumen 1297 Ejercicios 1298

Resumen 1345 Ejercicios 1345

CAefiu~o 7 7 . Endocrinopatias 1347

Hipofuncin hormonal 1347 Hiperfuncin Iiornional1348 Afectaciones de la respuesta hormonalen las clulas diana 1348 Endocrinopatas nis frecuentes 1350 h c i p a l e s endocriuopati.isdeo\usa hipofisaria 1350 Otros trastornos de causa hipofisaria 1353 Principales endocrinopatas relacionadas con la glndula tiroides 1354 Principales endocrinopatas relacionadas con la corteza suprarrenal1355 Trastornos del funcionamiento de la mdnla supnrrrnal1358 Principales endocrinopatas relacionadas con las gnadas 1358 Principales endocrinopatas relacionadas con las paratiroides 1361 Principales endocrinopatas relacionadas con el pncreas 1362 Resumen 1362 Ejercicios 1364

CAP~TULO 7 5 . Alteraciones metablicas de causas

mltiples 1305 Diahetes mellitus 1305 Causas 1306 Alteraciones en el metaholismo glucdico 1308 Implicaciones en otros sectores del metaholismo 1308 Complicaciones a largo plazo 1309 Encefalopata heptica 1311 Alteraciones del metaholismo del amonaco en el coma heptico 1311 Mecanismo de la toxicidad del amonaco 1312 Factores que pueden contribuir al establecimiento del coma heptico 1314 Medicamentos que pueden contribuir al estahlecimiento del coma heptico 1315 ctero 1315 Clasificacin de las ictericias 1316 Resumen 1318 Ejercicios 1320

C . 4 p i T U L o7 8 . LOSvirus 1365
Definiciones en virologa 1365 Clasificacin de los virus 1366 Tipos de simetra de las partculas virales 1366 Composicin qumica de los virus 1367 Protenas virales 1367 cido nucleico viral 1367 Lpidos virales 1368 Carholiidratos virales 1369 Multiplicacin de los virus 1369 Susceptibilidad 1369 Eventospnicipales delamultiplicacinviral 1369 Interaccin virus-clula 1374 Gentica vira11374 Tipos de mutaciones 1375 Interaccin virus-virus y virus-husped que afecta el fenotipo 1375 Ivlezcla fenotpica 1375 Interferencia 1375 Virus defectivos 1375 Integracin 1376 Infeccin persistente 1376 Patrones de la infeccin vira11376 lnteracciones de los virus tumorales con las clulas del husped 1377 Virus tnmorales y oncogenes 1377 Integracin del cido nucleico del virui tumoral en la clula husped 1377 Recuperacin de genes virales y de genes transformadores de clulas tuniorales 1377

C . 4 p i T u r . 0 7 6 . Enfermedades molenilares 1321

Fundamentos generales 1321 Alteraciones en proteinas estructurales 1323 Sndrome de Marfan 1323 Osteognesisimperfecta 1325 Alteraciones en protenas de transporte 1326 Drepanocitosis 1327 Talasemias 1329 Alteracionesen transportadores celulares 1330 Fibrosis qnstica 1330 Alteraciones en protenas receptoras 1333 Retinosis pigmentaria 1333 Raqui~mohenditdores&ntealaritaminaD 1331 Errores congnitos del metabolismo 1335 Caracterkticas generales 1335 Errores congnitos del metabolismo de los glucidos 1336 Errores congnitos del metabolismo de los Ipidos 1339 Errores congnitos del metabolismo de los compuestos nitrogenados de ba,jo peso molecular 1342 Errores latentes 1344 Deficiencia de glucosa-6-fosfato deshidrogenasa del eritrocito 1344 Alteraciones de otras protenas 1344

Mecanismos de la transformacin celular por virus 1378 Pnones 1378 Fagos 1379 Resumen 1380 Ejercicios 1380

CAP~TULO 79. Euzimologa cinica 1381

Aspectos sobresalientes de las enzimas presentes en el suero 1381 Origen 1381 Migracin 1382 Fundamentos de la determinacin enzimtica 1383 Consideraciones de inters prctico 1384 Principales enzimas de inters clnico 1385 Amilasas 1385 Lipasas 1386 Transaminasas 1386 Fosfatasas 1387 Deshidrogenasa Ictica (LDH) 1388 Colinesterasa srica (CES) 1389 Lencjnaminopeptidasa (LAR 1389 Creatina quinasa (CK) 1390 Otras enzimas sncas 1390 Enzimas en otros fluidos biolgicos 1390 Orina 1390 Lquido cefalorraqudeo (LCR) 1391 Otros lquidos corporales 1391 Diversos usos clnicos de las enzimas 1391 Resunieu 1391 Ejercicios 1393
'

males por un segmento especfico de ADN extrado de clulas cancerosas 1406 Oncogenes y proto-uncogenes 1407 Mecanismos moleculares de la transformacin 1407 Alteracin estructural de los proto-oncogenes 1407 Hiptesis de la dosis 1408 Productos de los oncogenes 1409 Genes supresores tumorales 1410 Teora multifsica de la carcinognesis 1411 Cambios poscarcinognesis 1411 Perspectivas 141 1 Resumen 1412 Ejercicios 1412

CAP~TUL~ 81. Moffognesis 1415

Concepto y reglas de la morfognesis 1415 Premisas experimentales para el estudio de la morfognesis 1417 Experimento No. 1. Desnaturalizacin reversible de una protena sencilla 1418 Experimento No. 2. Reconst~ccin de una protena oligomrica 1419 Experimento No. 3. Recoptitncin de un organelo subcelular: el ribosoma 1420 Experimento No. 4. Reconstitucin de un viriis bacteriano: el fago T, 1421 Otros ejemplos de morfognesis 1422 Perspectivas 1422 Resumen 1423 Ejercicios 1423

CAPfnno 82. Produccin de mticuerpos 1425

Conceptos bsicos 1425 Respuesta inmnnitaria 1425 Estructura de las inmunoglobulinas 1426 Premisas experimentales para la investigacin de la produccin de anticnerpos 1428 Experimento No. 1. Una estirpe o clon celular produce un solo tipo de anticuerpo 1429 Experimento No. 2. Los genes de inmunoglohulinas de las clulas embrionarias son diferentes a los de las adultas 1430 Estructura de los genes que codifican cadenas ligeras de IgG 1431 Generacin de genes funcionalesde cadena ligeras de IgG 1432 Estimulacin de la produccin de anticuerpos especficos 1432 Anticuerpos monoclonales 1433 Perspectivas 1433 Resumen 1434 Ejercicios 1435

m 80. Cncer 1401 Concepto y caractersticas 1401 La clula cancerosa y sus caractersticas 1402 Transformacin cancerosa 1402 Carcter hereditario de la transformacin 1403 Bsqueda de la alteracin primaria 1404 Premisas experimentale para investigar el cncer 1404 Cultivos de tejidos 1404 Mtodos de ingeniera gentica 1405 Experimento No. 1. Transformacinde clulas normales por ADN extrado de clulas cancerosas 1405 Experimento No. 2. Transformacinde clulas nor-

CAP~TUL~ 83. Origen de la vida 1437

Dificultades para el estudio experimental del origen de la vida 1437

Consideraciones preliminares para el estudio experimental del origen de la vida 1438 Historia natural del origen de la vida 1439 Caractersticas fundamentales de los experimentos bioqnmicos sobre el origen de la vida 1440 Experimento No. 1. Formacin abitica de precnrsores de macromolculas 1440 Experimento No. 2. Formacin abitica de macromolculas en ausencia de molde o patrn 1441 Experimento No. 3. Formacin abitica de macromolculas sobre un molde o patrn 1442 Experimento No. 4. Formacin abitiea de Ipidos complejos y vesculas membranosas 1443 Hiptesis sobre el surgimiento de las vas metablicas 1444 Algunas incgnitas adicionales 1444 Perspectivas 1445 Resumen 1446 Ejercicios 1447

CAP-

84. Evoluan molecuiar 1449 Premisas experimentalespara el estudio bioqun~ico de la evoluciu 1449 Evidencias bioqumicas del proceso evolutivo 1450 Mecanismos moleculares de la evolucin 1453 Estudio experimental de la evolucin 1454 Experimento No. 1. Evolucin molecular en organismos unicelulares 1454 Experimento No. 2. Evolucin molecular en clulas de mamferos 1455 Experimento No. 3. Evolucin de molculas aisladas 1456 Perspectivas 1457 Resumen 1457 Ejercicios 1458

CAphVLo 85. Envejecimiento 1459 Caractersticas del envejecimiento 1459 Envejecimiento celular 1460 Premisas experimentales para el estudio del envejecimiento celular 1461 Experimento No. 1. El envejecimiento celular se acompaa de una prdida de la capacidad de multiplicacin 1462 Experimento No. 2. El lmite de Hayflick es una propiedad intrnseca de las clulas 1462 Experimento No. 3. Funcin del ncleo y el citoplasma en la determinacin del lmite de Hayflick 1463 Hiptesis genticas sobre el envejecimiento celular 1464 Primera hiptesis 1464 Segunda hiptesis 1464 Tercera hiptesis 1466 Cuarta hiptesis 1466 Otras hiptesis sobre el envejecimiento celular 1466 Perspectivas 1467 Resumen 1467 Ejercicios 1468

ANEXOS

Anexo 1. Logaritmos

AnexoZ. Composicih~ aproximada de alin~entos (a partir d e lOOg de alimento bruto, crudo)*

Alimento Lechede vaca o yogur Lechedcscremada (en polvo) Leche entera (en polvo) Lechecondensada Instacereal (en polvo) Carne dcres,dcshuesada Picadillo de res con soya Came decerdo Pollo eviqceradu C o r d n , nn,lengua (promedio) Butifarraopemcaliente (pmmcdio) Carne de &cerdo, enlatada (promedio) Lunchconm?at
spam

Energa kcal 50 362 502 290 360 95 101 240 124 110 218 282 334 144 163 63 116 24 189 327
419

Protena g 3,1 38,O 26,O 8,7 25,O 17,6 15,s 14,6 13,s 15,2 13,s 16,s 12,O 1s,o 128 9,0 15,9 44 19,0 22,3 18,7

Grasa Vit. A g Pg 2,l 04 27,0 4,O %Y 2,7 13 19,6 7,0 6,3 14,O 22.5 30,O 7,s 11,O 3,O 23 0,2 9.8 1,7 34,s 21 8 267 35 3 2 2 0 42 66 0 0 0

Vit. B, me 0,03 0,32 0,30 0,08 0,46 0,06 0,17 0,32 0,04 0,07 0,23 0,47 0,35 O,O~ 0,08 0,04
0,11

Vit. B, mg 0.14 131 1,30 0,33 0,30 0.13 OJO 0,15 0,06 1,09 0,15 (u0 0,15 OJO 0,30 0,07 0,10 o,o3 0,lh 0,17 O,O~

cido flico Pg 4 25 26 10 148 4 62 2 3 2 2 2 2 3 35 2 62 3 5 106 104

Vit.

C.

mg 1 3 4
1

Hierro Calcio mg mg

0 0 0 0 0 0 0 0 0 O 0 0 0

Huevo Pescados, promedio Picadillo de pescado con soya

~abmar

144 4 4

Pescado enlatado(promedio) Frijulcs(pmnediu) Man

22 0

O,OI 0,011 0,37 o,o9

o
o o

Amr~ Hiarla de maz Pastas GaUetas (promedio) Pan (promedio) Pactela Viandas (promedio)
Vegetales, hqjas proinedio) Pepinu IimicnB> Calakm Tmnatc Remolacha ZaiiahoM Otros vegetales ipromedio)

Frutas ctricas (promedio) m t a n o

Guayaba Mango Otras frntas (promedio) Jugos ctrieosnaturales (proniedio) pulpa dc f ~ h s Purde tomate
Mermelada y dulces en almbar GaNeta dulce Pasta de frutas Helado eGuarinan Siropepara refresco Azcar

146 455 310 152 231 373 893 724 718 333 65

0s 9,1 0,s 2,s 0 0

O 0,s 1,1 7,s 0,7

0,7 14,5 0,4 7,O 0 0 100,o 82,O 79,O 338 5,3

36 22 150 65 O

0,OZ 0,19 0,02 0,03 O

0,04 0,07 0,04 0,11 O

o
0 0,01 0,Ol 0,Ol 0,03

o
O 0,OZ 0,04 0,19 O,Oh

Grasas (prnmedio) Manteqnia

Mayousa Queso crema

AV&

0 712 60 437 13

* Alimento bruto

(el pesoje incluye las partes no comestibles, tales como cscara, semilla, etctera) y crudo (no cocinado). Nota. Cortesa del Instituto de Nutricin e Higiene de los Alimentos.

Anexo3. Composicin aproximada de alimentos (expresada en medidas comunes de alimentos listos para el consumo)

Alimento Leche de vaca o yogur Leche descremada (en polvo) Lecheentera(en polvo) lncheevaporada(a1S0 70) lntacereal (en polvo) Queso proceso Carne de res Picadilloderes con soya Carne de ccrdo Pullo Corazn,rin,lenpa Butifarraopcrmcaliente C a n de re4ccrdo (enlatada) Lunchmn me&
Spam

Peso de la parte Medida comestible 6 casera 1T 4 cdas 4 cdas 'h T 4 cdr3 cdas 2 cdas 3 cdas 2 cdas 2 cdas 2 cdas 1U 2 cdas 2 cuas 2 cdas 1U 2 edas 3 cdas 2 cdas 2 cdas %T '/4 T 240 24 24 120 30 45 30 45 30 30 30 50 30 30 30 50 30 45 30 30 120 40

Energa kcal

Protena g

Grasa g

cido flico lii:

Vit. C mg

Hierro Calcio mg mg

Huevo Pescados @remedio) Picadillo de pescado con soya Calanrar Ptrxadoenlatado(pmmedio) Frijula(granodrenado) Man

Amz
1Iarinadema Ptita GaUetUs (promedio) Pan (promedio) Panetcla Wandas Vcgetales,liojas (promedio) Pepino Pimiento Calabaza ton^ Ilernolacha zanahoria Otros vegetales (promedio)
1T 6 rodajas 1mediano '/2 T 1pequeo %' 1 1 mnliana '/2 T

60 50
85

100 100 100

75

100

N m p

immdaim
Tomnja Limn htabomba hnh Guanbana@ulpa) Mamey colorado p u , Guayaba Pltano Mango Meln de apta
Mcimeladay dulces en auni0ar Galleta dulce Pasta de fmks Helado "Cuarina" Meladodecaa Miel deabeja Siropepara refrcrco Azcar Crams (promedio) Mantcqiiilla Mayonesa Quesocrema Ayacate

1 mediana 1 mediuia ' / 2 mediana 1mediano '/2 T '12 mediano '/4 T ' / SU %T 1pequuia 1 mediano '/2 mediano 1T 2 cdas 2U '/2 onia
'/4

1 cda 1 cda 1 cda 1 cda

1cda

'/4

1 cda 1 cda 2 cdas mediano

cda: cucharada; T: twa; U: unidad.

Nota. Cortesa del Instituto de Nutriri6n e Higiene de loa Alirnentob.

A U ~ O 4.

Masas atmicas internacionales

Smbolo Ac Al Am Sb Ar As At S Ba Be Bk Bi B Br Nmero atmico

Masa
atmica* Elemento Lutffio Magnesio Manganm Mendele~o Memuio Motibdeno Nwdimio Nmn Nepinnio Niobio Nquel Nitrgeno

Elemento
Actinia hlumiiuo Amenao Antimonio Argn Arsnico Astato Azufre Bario B d o Berkelio Bhnto Bom Bmmo
Cadmio

Nmero Smbolo atmico

-

Masa atmica"

oro
Osmio Oxgeno Paladio

a
Ci Cf
C Ce

Caiao Cafomio Cail>ono CeiW Cesio Cinc CVmnio ~ ~ o m

M
Plaono Plomo Plutonio Polonio Pntasio llaswdinio Pmmetio Pmtaconio Radio adn Renio Rcdio Rubidin Rutwo .samario Selenio Silicio Sodio Tao Tn* Twi&o Telum Terhiu Ttanh Tono Tulio lhl lhgsteno: vase Wolframio Uianio U Vanadio V Wdframio W Xenn Xe Yodo 1 Iterhm Yh Ytrio Y

Cs
2 n

7I

a
Co ui

C o b a l t o
Cohm Columhio: vase Niohio
Cmmo

ci.

Curw
Disprosio Einsteinio

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DY Es Ec SI Sn Sr E~I Fm F

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Holmio Indio lridio Knptn

Lantano
LitU,

Ir Kr Ia Ii

* Los valores entre corchetes corresponden a las masas atmicas de las istopos ms estables conocidos.

Introduccin a la seccin
n las secciones precedentes que tratan del metabolismo de los diferentes grupos de compuestos, se estudian aquellos procesos ms generales. No obstante, en los distintos tipos de clulas tienen lugar reacciones qumicas y procesos metablicos completos que pueden ser exclusivos de un tipo celular. Estas especificidades bioqumicas son las que le confieren la especializacin a los diversos rganos y tejidos del cuerpo. En la presente seccin se agrupan en 7 captulos los aspectos bioqumicos especiales por tejidos. Se incluyen aqullos ms relevantes, toda vez que el total de particularidades bioqumicas que encontramos en nuestro organismo es en extremo extenso y, adems, no siempre de justificado inters. Lasangre es el primero de loscampos tratados en la seccin. A pesar de su especificidad, y debido a las funciones que cumple este medio, sus peculiaridades son de inters general. La sangre desempea, sobre todo, una funcin de transporte, ya sea de nutrientes, productos de excrecin, hormonas y otras sustancias reguladoras. Como consecuencia, los procesos bioqumicos que le son privativos y que le confieren la capacidad funcional que le es propia van a repercutir en muchos de los fenmenos biolgicos de todo el organismo. De ah que dentro de las cspecificidadesbioqumicas de los tejidos, las de este medio fluidosean de las que ms necesita conocer el profesional en el campo de lasalud humana. La seccin contina con un captulo sobre la bioqumica del tejido nervioso. Si en las neuronas yacen las bases materiales de la funcin biolgica ms elevada: el pensamiento humano, es razonable esperar que en estas clulas exista una enorme cantidad de transformaciones bioqumicas y de biomolculas especficas.

Tornado de Biacherniatry. Liibcrt Stryel: Cuarta ediein,J995

Desgraciadamente, queda mucho por investigar y esclarecer en cuanto a la base bioqumica de las mltiples y complejasfuncionesdeltejido nervioso. A pesar deello, las bases moleculares de la trasmisin nerviosa, la naturaleza y el modo en que realizan su funcin los diversos neurotrasmisores y las peculiaridadesdel metabolismo cerebral son algunos de los hechos conocidos en buena parte y de indiscutible inters que se exponen aqu. El fenmeno de la visin y el rgano receptor encargadode ella, el ojo, se han incluido en esta seccin por ser ricos en particularidades bioqumicas y. adems, por ser el marco apropiado para el estudio de la fotoqumicade la visin, la cual -por sus rasgos esenciales-constituye un aspecto fundamental en la comprensin de una de las formas en quese estahlecela transicin entre el mundo fisico (la energa luminosa) y el mundo vivo y consciente (el impulso nervioso originado en la retina). Si la visin, por su propia naturaleza, reclama un espacio en este marco de especificidades, por lgica, otro tanto sucede con el movimiento. En nuestro organismo ocurren diversos tipos de movimiento en relacin con protenas especiales. En el tejido muscular encontramos la expresin ms acabada de este dispositivomotriz. En el captulo dedicado a este tejido se describe la base bioqumica del movimiento musnUar. Los 3 captulos que completan la seccin tienen que ver con los tejidos aparentemente inertes. En una aproximacin superficial se puede considerar al tejido adiposo como un simple receptculo de sustancia de reserva energtica,al tejido conectivo como un esttico medio de soporte y a los tejidos dentarios, limitados de igual modo, a una funcin meramente mecnica. Por el contrario, la bioqnimica especka de estos tejidos es rica y su conocimientocontribuyemuchoa tener una visin ms real y completa de su complejidad. Los adipocitos son clulas mucho ms activas de lo que se supona al principio y el recambio metablico que constantemente se lleva a cabo en ellas es mantenido por una alta actividad de enzimas especficas. La lipognesis y la liplisis son 2 vertientes metabficas de significacin general para el organismo, que tienen su expresin cuantitativamentems significativaen el tejido adiposo. En el tejido conectivo, los proteoglicanos y las protenas estructurales que en l se encuentran no cumplen una funcin pasiva. En el captulo correspondientese expone cmo las biomolculas de la sustancia intercelular del tejido conectivo le confieren a sta sus particularidades bioqumicas funcionales. En la seccin se incluye un captulo de Bioqumica Dental, de inters especial para el estudiante de Estomatologa, en el que adems de exponer las caractersticas hioqunicas de la saliva y los tejidos del diente, se hacen consideraciones acerca de la patogenia y las posibilidades de prevencin de la caries dental, fundamentadasdesde el punto de vista molenilar.

La evolucin de los organismos unicelulares hacia la complejidad creciente de 10s pluricelulares trajo consigo el establecimiento de medios apropiados para el intercambio de sustancias de los diferentes rganos y tejidos con el medio exterior y entre ellos mismos. La sangre es el ms importante de estos medios. El plasma es el sobrenadante que resulta de la centrifugacin de la sangre, a la cual se le ha impedido coagular. En el precipitado se recolectan las clulas sanguneas. Por otra parte, un lquido amarillento se separa de la sangre coagulada: el suero sanguneo.Se diferencia del plasma en que no contiene fibringeno, protena precursora de la fibrina, que es la que constituye la estructura reticular del cogulo (Fig. 63.1). El color amarillo del suero y del plasma proviene de la bilirrubina, as como de otros pigmentos biliares y de los carotenoides. La sangre cumple, sobre todo, una funcin de transporte, ya sea de los nutnentes, los productos de excrecin,lashormonasy otras sustancias reguladoras. En muchos de estos casos dispone de molculas y basta de clulas muy especialmente evolucionadas parael transporte especficode determinado elemento. La hemoglobina y los eritrocitos son losejemplos ms evidentes en el transporte del oxgeno, pero en este captulo y en otras secciones encontraremos muchos ejemplos de transporte especializado por componentes sanguneos. Otras funciones de la sangre son la de defensa, y la regulacin trmica y de los equilibrios hdrico y cido-bsico. El volumen total de la sangre se aproxima al 8 % del peso corporal, lo que en el adultorepresenta alrededor de 5 L. En la tabla 63.1 se presentan otras caractersticasde este lquido. Son mltiples los dispositivos orgnicos que contribuyen al mantenimiento de la composicin sangunea dentro de determinados lmites compatibles con la vida. E1 sistema digestivo y los pulmones permiten incorporar las sustanciasque el organismo consume constantementepara su provisin de energa y otras necesidades. Los riones, el intestino, la piel y los pulmones aseguran los distintos modos de depurar la sangre de las sustanciasde desecho. Las clulas y las mltiples protenas sanguneas, as como las hormonas que en ella se encuentran, son producidas por diferentes rganos del cuerpo, los cuales contribuyen a mantener su composicin caracterstica. Se comprendefcilmente que de ordinario la ms sutil anormalidad en algn sitio del organismose refleja en alguna alteracin de la composicin habitual de la sangre. No en vano una muestra de ella es el medio ms socorrido en la medicina actual, para eldiagnstico y seguimiento de la mayor parte de las enfermedades.

&

Anticoagulante

Elementos Centrifugacin

b)

Centrifugacin
SUCIO.

Suero Elementos

Fig. 63.1. Separacin de los elementos formes de la sangre: a) obtencin del plasmo; b) obtencin del

lhbla 65.1. Algunas caractersticas fsicas de la sangm

Sangre

6-8 % del peso corporal 66-78 mL.kg-' peso 2 000-2 900 mL.(m"-' Densidad: 1,060 Viscosidad: 3,643
pH: 7,4

Punto de congelacin: -035 "C 40-45 7 0 delvolumen

50-60 70del volumen Slidos: 8-9 % Densidad: 1,026 Viscosidad: l,7- 2 (aguazl) Punto de congelacin: -03.5 'C Presin osmticaa37 "C:7.6 an pH: 7 4

Composian
Las clulas constituyen del 40 al 45 % del volumen total de la sangre; el volumen restante comesponde al plasma, en el que est presente una amplia gama decompuestos qumicos, cuyas concentraciones normales varan de acuerdo con el estado en que se encuentre el organismo. Naturalmente, no va a existir igual concentracin de cido

lctico, por ejemplo, en la muestra de sangre proveniente de un sujeto en reposo, que en la de uno sometido a un ejercicio intenso y prolongado. Las concenh-aciones de muchos constituyentesse afectan grandemente durante el perodo absortivo. Debido a esas variaciones, y para que los resultados tengan sipifcado vlido al establecer comparaciones, la toma de muestras de sangre debe realizarseen determinadas condiciones denidas. Lo ms comn es obtener la muestra entre las 12 y 14 h posteriores a la ltima comida y con el sujeto en reposo. En la maana,antes del desayuno, es el momento apropiado para quese den esta condiciones. Los slidos presentes en el plasma ocupan del 8 al 9 % de su volumen. La mayor Y pero aparecen decenas de otroscompuestosorgnicos. parte corresponde a I ~ protenas, En la tabla 63.2 se relacionan estos constituyentesy los rangos de sus valores normales.
mbla 63.2.

Algunos componentes orgnicos del plasma mz.dL-'

0,3-2,0 0,2-1,o 5,0-20 2,7-78 (varones) 2,0-6,4(hembras) 300-480 35-65 40-80 OJ-1,2 150-250 65-75 % del tohl 0,6-1,2 0,4-4,0 70-110 0-200 400-800 0,3-0,9 20-30 2,s-73 0,8-5,O 0,4-4,4 4,s-10,O

Sustancia
Acetona

ado acetilactico ado lctico ado rico cidos grasos libres Aminocidos Amonacn
Bilumbina

Colesterol total steres de colesterol CreaonOia k 6 h h i ~ Glucosa G m neu* Lpidostotales cido pinvieo U m
Alanina Cisona

cidoglutmiu,
GIubmb

Protenas plasmticas
Al separar las protenas del suero por electroforesisen papel o acetato de celulosa se obtienen 5 fracciones bien diferenciadas, que en el orden de mayor migracin hacia elnodo corresponden a la albmina, alfa globulinas (ala, y alfa,), beta globulinas y gamma globulinas. Una vez revelado el electroferograma se visualizan las fracciones en bandas coloreadas (Fig. 63.2b). De ste se puede obtener un grfico con la ayuda de un densitmetro. El soporte utilizado se transparenta con aceite mineral u otros medios y se coloca en el equipo, de modo seme,jante a un colormetro. La intensidad de la luz que atraviesa la muestra (en este caso, en vez de una solucin se trata de una capa delgada del soporte que se utiliz) es proporcional a la intensidad del color en cada banda y el equipo est diseado para trazar una curva correspondiente a cada banda, segn el ancho y la densidad ptica de ella (Fig. 63.2a). Con la excepcin de la fraccin de albmina, en las distintas bandas se hallan mezclas de decenas de protenas. Procedimientos ms especficos permiten separar e

Fig. 63.2. Elertroforesis de las proteinas del suero: a) grfico obtenido por densitornetria: la dirwci6n de la migracin es dc izquierda a dereelia (hacia el nodo); b) bandas de las 5 fracciones v i s i h l e ~ en electroforesis sobre papel, de la cual se obtuvo el grfico por densitornetria.

identificar las protenas individuales que componen cada fraccin. La inmunoelectroforesis aprovecha las propiedades inmunolgicas de las protenas, lo cual le confiere gran especificidad. Por este mtodo se ha identificado la mayor parte de las protenas plasmticas. En el adulto normal, el total de las protenas del plasma se encuentra en un rango de 5,7 a 8 g .dL1.A contiuuacinconsideramos, por separado,cadauna de las fracciones priucipales.

Albmina
Constituye algo ms de la mitad del total, pues su concentracin uormal vara entre 35 y 4,s g.dL-l. Est compuesta por una solacadenapolipeptdica y numerosos puentes disulfuros intracatenarios. Con un peso molecular de 66 000 D y de aproximadamente 580 residuos de aminocidos,la albmina est entre las ms pequeas de todas las protenas plasmticas y es dc las pocas que no es glicoprotenas. Sus principales funciones son 2: la relacionada con el efecto osmtico y su papel como protena transportadora de diversas sustancias.Por ser la protena m& abundante, por su pequeo peso molecular y por el hecho de poseer un total de 18cargas negativas por molcula, a pH fisiolgico de 7,4,le confieren la propiedad de ser el factor determinante en la presin onctica del plasma. El trmino se refiere precisamente al efecto osmtico que se deriva de la presencia de protenas. La albmina contribuye al efecto osmtico del plasma sanguneo con casi el 80%. Es por ello que una de las primeras manifestaciones, por sus concentraciones anormalmente bajas, es el edema que se produce como consecueucia de un incremento en el lquido intersticial, al disminuir la capacidad de retencin de agua en el lecho vascular. La causa fsica es la disminucin de la presin onctica, debida a la hipoalbuminemia. En cuanto a su funcibn de transporte, muchas sustaucias escasamente solubles en agua viajan por la sangre unidas a la molcula de albmina. Es relevante el caso de los cidos grasos que se movilizan desde el tejido adiposo hacia los tejidos perifricos, unidos fuertemente a ella; la bilirrubina, las hormona^ tiroideas y los esteroides tambin se transportan de este modo. Asmisnio lo hacen medicamentos como la penicilina y la aspirina, entre otros.

A la fraccin de las alfa, globulinas pertenecen la protena transportadora de retinol la globulina transportadora de tiroxina (TBG [ tiroxin (RBP [iptinolI>vndingproteinl), byndingglobuliii]) y la transcortina, entre otras. La RBP, que tiene afinidad por el retinol, forma un complejo con otra protena plasmtica. Se cree que ello evita la excrecin renal de la RBP libre, cuyo peso molecular es solamente de 22 000 D. La alfa-feto globulina, la protena ms abundante en el plasma del feto, se halla tambin en el lquido amnitico. Al nacimientosu concentracin cae,al tiempo que se eleva la de la albmina. En el adulto se encuentra en concentraciones muy bajas, aproximadamentede 1mg .dI?. En lasangre deembarazadas aparecen niveles elevados de esta protena, en el curso de malformaciones congnitas por defecto del cierre del tubo neural. En los casos oositivos. en los cuales se confirme la sos~echa iior ultrasonido, se determinar la alfa-feto protena en el lquido amnitico, para evitar las graves consecuencias, mediante la prctica del conse,jo gentico. En Cuba la determinacin sangunea se le realiza a todas las gestantes. La TBG y la transcortina se tratan en el captulo 60.

Con la fraccin de las alfa, globulinas migran la ceruloplasnuna, la Iiaptoglobina y variosinhibidores de proteasas. Idaceruloplasrnina transporta iones de Cu y posee 8 zonas, capaces de unirse al Cu'o al Cu2+. La deficiencia de esta proteua se observa en la enfermedad de Wilson, al acumularse cantidades elevadas de Cu2+ en el hgado y el cerebro, con el consecuente dao heptico y neurolgico. La haptoglobina, que constituye la cuarta parte de las alfa, glohulinas, forma complejos con la hemoglobina proveniente de la lisis de los eritrocitos. En el ser humanoesta protena se presentaen 3 tipos; su estructura lacomponen 2 paresdiferentes decadenas (alfa,, betaJ. Los3 tipos existentessedeben a variaciones en lassecuencias de las cadenas alfa. La alfa, macroglobulina inhibe a toda claie de proteasas y est compuesta por 2 subunidades idnticas. Al combinarse con la proteasa se hidrolizan enlaces peptdicos, lo que trae como consecuencia un cambio en la conformacin de la protena; se forma entonces un complejo proteasa-inhibidor inactivo, que ulteriorniente es incorporado por los macrfagos.

Beta globulinas
La transferrina es su principal componente. Su funcin es el transporte de Fe". Capta2 tomos por molcula y en los sujetos normales suele estar saturada en la tercera parte de su capacidad, aproximadamente. La hemopexina, otra beta globulina,se liga al hemo y evita su eliminacin por la orina l.a protena C reactiva y la B, microglohulinatambinmigraiien esta fraccin. La funcin dela primera es desconocida; la segunda est relacionada con los fenmenos de histocompatibilidad, que regulan el mecanismo de rechazo a los trasplantes de tejido.

En estafi-accin plasmtica se hallan las inmunoglobulinas y entre ellas algunas

c~oglobulinas, que se denominan as porque se precipitan al enfriar el suero.

Se distinguen 5 grupos de inmunoglobulinas: lgM, lgG,IgA,IgD eIgE. LasIgM son las que se producen primero, en respuesta a los autgenos. Las IgG se producen despus y constituyen las principales inmunoglobulinas de la sangre. Este grupo es, adems, el nico tipo que traspasa la barrera feto-placentaria y provee de inmunidad al feto. Las IgA, que tambin se producen despus de las IgM, actan contra los microorganismos en sitios de entrada, como pueden ser los tractos respiratorio y digestivo. Las de los tipos IgD e IgE se hallan en la sangre, en concentraciones muy pequeas, y la funcin de las primeras no est del todo clara. Las IgE se unen a los basfilos y a las clulas cebadas,productores de histamina y heparina. Las IgE estn vinculadas a las reacciones de alergia. En el captulo 82 "Produccin de anticuerpos", perteneciente a la seccin XIV, se tratacon mayor amplitud la estructura y funcin de las inmunoglobulinas.

El fibringeno es una protena soluble, con peso molecular de 340 000, que se polimeriza como resultado de un proceso de protelisis parcial. La fibrina resultante de esta transformacin es uno de los principales componentes del cogulo sanguneo. Posteriormente, en este captulo se tratar la coagulacin y la funcin que realiza esta protena en ese delicado proceso.

Bioqumica de los elementos formes

Entrocitos Los glbulos rojos son de las pocas clulas cuyo tiempo de vida se conoce con certeza. Circulan en la sangre 120 dias, como promedio. Estos eritrocitosson el prodncto altamente especialirado de un rgano que existe temporalmente, conformado en un sitio del organismo, el cual recibe el nonlbre de entrn. El trmino se refiere tanto a los eritrocitos circulantes, como a la masa total de clulas eritropoyticas en la mdula sea, de las cuales se derivan aqullos. La clula pluripotencial, de la cual pueden derivarse las plaquetas, los leucocitos y los propios glbulos rojos, en un momento determinado se torna sensible a la eritropoyetina, hormona sintetizada por los riones y el hgado, y se convierte en el proiiormoblasto,clula con un enorme ncleo que abarca e1 80 % del espacio celular. Despus se diferencia por divisiones sucesivas, en diversos tipos de normoblastos. El ltimo tipo, el ortocromtico, al perder el ncleo queda convertido en el precursor inmediato de los eritrocitos: el reticulocito. Esta clula se encuentra en la sangre circulante y en 24 a 48 h va madurando. Se completa la sntesis de hemoglobina, que durante las fases previas al reticulocito ya llegaba al 80 %,y los organelos subcelulares van disminuyendo en tamao, hasta que finalmente son expulsados de la clula. Este sistema tiene capacidad en el adulto normal para producir 2,3 millones de glbulos rojos por segundo. De todo cnanto queda dicho, se comprende que el eritrocito carece de ncleo, initocondria~, lisosomas, ribosoinas, retculo endoplasmticoy aparato de Golgi. Tiene forma de disco bicncavo, de 7 micras de dimetro, con un espesor que en el centro es de 1 micra, pero en fa periferia alcanzalas 2 3 micra. Esta formaes importante parala snpervivencia de la clula, conio veremos posteriorinente.

Composicin qunica Al igual que en el resto delas clulas, el principal catibn es el K+y estn presentes el Na', el Ca" y el Mg2+; los principales aniones son el Cl; el HCO;, la hemoglobina y los fosfatos orgnicos. De estos ltiinos, el componente ms relevante es el cido 2,3 bisfosfoglicrico. La menlbrana y el citoesqueletosnbyacenteson determinantes en el inantenimiento de la forma funcional de los eritrocitos. Las diferentes proporciones de los tipidos de la membrana eritrocitaria se representan en la fignra 63.3. De ellos, el colesterol y los glicolpidos se encuentran hacia el lado externo de la hicapa lipdica, as como la mayor parte de la fosfatidilcolina y la esfingomielina, mientras que hacia el lado interno se localiza mas del 80 O/, de los fosftidos de etanolamina y de serina. Las protenas de las membranas de los eritrocitos se han separado mediante electroforesis en gel de dodecilsulfato. Hay bandas correspondientes a las proteinas integrales de la membrana y otras que son las protenas extrnsecas, las cuales se mantienen miidas no covalentemenlea las protenas integrales. Varias de estas protenas extrnsecas forman el citoesqueletosubyacente de la bicapa lipdica, determinante eii la forma que adopta el eritrocito. Las protenas extrnsecas mejor conocidas son la espectrina, de estructura y propiedades muy semejantes a la miosina del msculo; la actina, indistinguible de la actina muscular, y la ancrina. Estas protenas se disponen en un entrecruzamiento que va nnido a una protena integral de la membrana, que es la que corresponde con la banda 3 de la electroforesis en dodecilsulfato. La actina forma unos oligmeros de 10 monnieros, que se unen entre si por tetrmeros de espectrina. Estos complejos de actina y espectrina se unen a la ancrina (banda 2.1), que es la que establece la iinin a la protena iutegral de la inenihrana (banda 3) (Fig. 63.4).

Fif. 63.3. Composicin lipdica de la nicmhraiia eritrocitaria: a) (Ir<:) fosfoarilfiicerolei, (C) rule~terol,( G l ~ ) glieolipidos, (O) otros que incluye steres d c clesterul, Beidos graaos libres, sulfGtidos y triacilgliceroles; h) proporei6n de las diferentes clases de fosfoaeiigiiceroles: esfirigornielina (EM), fosfalidileuliria (FC). fosfatidiletaia,larnina(FE) y fosf;itidiiscrina(FS).

Banda 3
Fig. 63.1. Modelo del citoesquclcto y su uni6ii a la membrana plasmtiea del eritrocito. Arriba, una vista del citaesqueleto, paralela al plano de la memhrana. hhajri, vista de un curte traiisrersal que muestra la oricntaei6n de la anerina (hsnda 2.1) y la proteha integral de la memhrana (banda 3).

Tetrmero de espectnna

t
Oligmcro de

La funcin deesta armazn protenica,intimamente asociada a la membrana,no slo determina la forma del glbulo rojo, sino que permite su necesaria deformacin al pasar por capilaresniuy fmos, en los que el eritrocito adopta conformacioneselipsoidales y otras variedades. Precisamente la prdida de esta capacidad de deformacin desenipea una funcin importante en el retiro, por las clulas reticuloendoteliales del bazo y del hgado, de los hemates envejecidos. Por su parte, las protenas integrales con sectores de residuos hidrofbicos establecen uniones slidas con los hsfolpidos de la bicapa y fijan la protena a la membrana. La banda 3, a la que hicimos referencia eii su unin a la ancrina, representa el 25 % de estas protena9 integrales y es una glicoprotena. Otra glicoprotena integral es la glicoforina, que contiene 15 tetrasacridos, unidos mediante el oxgeno, y un oligosacrido por enlace N-glicosdico. Mientras la protena de la banda3 se dispone con susector NH, terminal haciaellado citoplasmtico y laporcindel COOH terminal, quecontiene los oligosacridos hacia el exterior,la glicoforina lo hace con su extremo en residuos cidos, hacia la porciii interna de k a membrana. COOH terminal,rico adein~

Aniigemenicidad de los eritroci'tos. Gmpossanguneos

Los diferentes grupos sanguneos estn determinados por la presencia -en la superficie de los eritrocitos- de diferentes antgenos. Los grupos sanguneos se reconocen por la capacidad que tienen los anticuerpos especficospara un antgeno dado, de aglutinar las clulas que lo contienen. Aunque existen 14 grupos sanguneos bieu definidos, que abarcan un aproxiniado de 100 antgenos diferentes, nos referiremos detalladamente al sistema A B O, el cual est relacionado con 3 sustancias, cuyos determinantes antignicos se representan en la columna derecha. Se puede observar que la diferencia entre estos 3 antgenos radica en la presencia delagalactosa ode la N-acetgalactosamina en el enlace alfa 1-3,unida a la penltima galactosa, o en su ausencia como ocurre con el antgeno O, de modo que los individuos con el antgeno A poseen la correspondiente enzima N-acetilgalactosamina transferasa; los del tipo B, la galactosil transferasa y los del tipo O carecen de ambas enzimas. Como los individuos reconocen sus propios antgenos, producen anticuerpos para los antgenos extraos, de suerte que los individuos tipo O producen anticuerpos para los 2 antgenos A y B; los del tipo B producen anti-A y los del tipo A, anti-B. El tipo heterocigtico AB no produce ni anti-A, ni anti-B.

Fuc a1+2

\Cal D I -w 3 Gal NAc a

/
al N A ~ a1+3

Antgeno A Fucnl-r2 \ Gal [iI+.? Gal NAc u

Gal u1

+3
Antgeno B

Fuc u1 + 2 GI DI +3 Cal NAc a

Antgciio O

Otros antigenos bien caracteri~ados son los de I,ewis, los cuales se hallan asociados con las lipoprotenas en forma de glicoesfingolpidos. Los grupos MN estin presentes en la glicoforina, mencionada anteriormente, y difieren tanto cri un aniiiiocido del sector NH, terminal, como en el glcido asociado a ese extremo. El conocido antigeno Rh an no se ha caracterizado, en cuanto a su determinante qumico especifico.

Es ohvio que el metal>olismodel glbulo ro,jo maduro se halla muy limitado, si tetiernos en cuenta que carwe de organelos intracelulares. Si bien es cierto que requiere una cantidad inenor dc energa que otras clulas, necesita de ella y de su capacidad redoctora para diferentes procesos. La niayur parte del ATPse consume para mantener las coiicentraciones de R'a+y Ca" relativamente bajas, y las de K+ elevadas eii el interior celular, en contra del gradieiite de concentracin. Por otra parte, el potencial reductor se requiere para mantener el Fe" de la hemoglobina en su estado funcional, los grupos SH eu la ben~oglohina y otras protenas al estado reducido, impresciudible para mantener la integridad de la membrana celular y del citoesqueleto. Idadegradacin anaerohia de la glucosa y la via de uxidaciii directa satisfacen tanto las necesidades ener~ticas. como el uotencial reductor. La glucosa penetra en el eritrocito por difusin facilitada, que no depende de la insulina. Adems, la iiiembrana cuenta con la actividad de ATPasas dependientes de Na' y la dependiente de Caz*. El 0,s la del total de la heinoglobiiia se convierte por autooxidaciiii en metahemoglohina (Fe3+) y en determinadas condiciones puede ser considerablemeote n i q o r por factores ambientales, entre ellos el humo de los fumadores. El NADH', producto de la etapa oxidativa de la gluclisis, es un cofactor de la metahemoglohina reductasa, eiizima que cataliza la reaccin que se contrapone al proceso referido y regeuera la desoxihemoglobina funcional. Eii la reacciii interviene, adems, el citocromo b,.

Se ha ideiitificado otra rnetaheinoglobina reductasa que trabaja coi1el NADPH', peri! su funciii tisiolgica no est clara, debido a que acta solamente en presencia de coloraiites artificiales, como el aiul de inetileno. Sin embargo, el NADPHi producido cantidades apropiadaide d u t a t i h en la \iadcoid.d~K>ndirectaseutilizaparaniantener reducido. La enzima es una flavoproteina que cataliza la reaccin siguiente:

Esta redi:ctasa constituye una proteccin contra los perxidos que se forman cuando la hemoglohina se transforma en metahemoglohina. El perxido oxida al glutatin bajo la catlisis de la gliitaiiri peroxidasa. Ya se refiri la funciii del Bcilo 2,3 hisfusfoglic6rico como modulador de la afinidad de la hemoglobiiia por ci oxgeno, y cmo se produce este metabolito en una derivacin especial de la gluclisi en el eritrocito (captulo 12).

leucocitos conforman varias lneas celulares, con caractersticas especficas que los diferencian morfolgica y funcionalmente. No obstante, en este ltimo aspecto se distinguen 2 grupos: unos con actividad fagoctica frente a organismos extraos y sustancias txicas (neutrfilos y monocitos) y los linfocitos que utilizan tanto los ,ticuerpos humorales, como otras reacciones mediadas por clulas, en contra no slo de microorganismos y sustancias extraas, sino tambin frente a las alteraciones que ocurren en clulas propias del organismo. Por lo dems, todos los tipos de leucocitos poseenlas vas metablicas comunes ala mayor parte de las clulas del organismo. LOS leucocitos con actividad fagoctica se caracterizan por detectar y seguir pdientes mnimos demolculasproducidas en los sitios de inflamacin; esta propiedad se conoce como quimiotaxis. El potencial quimiotxico de los fagocitos les permite desplazarse del torrente sanguneo a los sitios de inflamacin localizados. Otras que les permiten participar en la reaccin inflamatona son la fagocitosis, la produccin de radicales de oxgeno y la digestin intracelular. La quimiotaxis se puede definir como el movimiento dirigido de una clula, en respuesta a un gradiente qumico de concentracin. Su estimulacin da inicio a la secuencia de eventos, por los cuales las clulas fagocticas ingieren y destruyen finalmente a materias extraas. Una gama amplia de sustancias relacionadas estructuralmente estimula la quimiotaxis de los fagocitos. De estos factores quimiotxicos, los mejor caracterizados son el C5 del sistema del complemento, el factor quimiotxico inducido por cristal o CCF (crystal-induced chemostacticfactor) y el denominadofactor quimiotxico derivado de Linfocito (LDCF [lyinphocyte-derived chemotacticfactor]). El CCF, con un peso molecular de 8 400 D, es un pptido producido por los polimorfonucleares en la fagocitosisde materias cristalinas, como el urato monosdico. Estoscristales aparecen en el lquido sinovial de pacientes con hiperuricemia y gota, lo que contribuye, probablemente, a la reaccin intlamatoria en sus articulaciones. El LDCF, con un peso molecular de 12 000D, es un pptido producido por los linfocitos, una vez que han tropezado con antgenos. Un nmero de otras sustancias posee actividad quimiotxica para los leucocitos, entre ellas varios pptidos que se derivan de la fibrina. Otra clase adicional est compuesta por determinados cidos grasos, derivados del metabolismo del cido araquidnico, por ejemplo, el cido 5-hidroxi-6,8,11,14-eicosatetranoico (S-HETE), (HHT) y los leucotrienos, derivados -junto el 12-hidroxi-5,8,10-heptadecatrienoico con las prostaglandinas y los tromhoxanos- de los cidos grasos insaturados de 20 carbonos (captulos 13 y 59). Algunos leucotrienos participan en los procesos de anafilaxis, como el LTD,, que es un componente del mediador de la anafilaxis, denominado sustancia anailctica de reaccin lenta SRS-A (slow reactingsirbstance of anaphylaxis); otros como el LTB, Conducen a una pequea liberacin de las enzimas lisosomales. Poco se sabe del proceso de quimiotaxis despus de la interaccin con los receptores especficos. Sin embargo, un aumento en el flujo de Ca" hacia el interior de los fagocitos podra ser un eslabn importante. El AMPc inhibe generalmente las respuestas quimiotxicas, al igual que los agentes que incrementan sus niveles intracelulares, como las catecolaminas beta adreurgicas y las prostaglandinas de la serieE. Aparte de estimular la quimiotaxis, las sustancias efectoras, al interactuar con sus receptores,emiten otras respuestas. De estamanera,estimulan a los leucocitos a secretar enzimas lisosomales e inician la produccin de iones superxidos. Los leucocitos con actividad fagoctica tambin se caracterizan por poseer un incremento en la actividad de algunas enzimas. As, las peroxidasas leucocitarias CatdiZan la reaccin siguiente:

Aqu R es cualquier sustrato oxidable. Esta enzima es importanteen el proceso de destruccin de muchas bacterias y algunos hongos. Tambin son capaces de llevar a cabo reacciones que generan perxido de hidrgeno y el superxido (O,*) al que aludamos anteriormente,aunque estas enzimas no se han caracterizadodel todo. La produccin de energa depende de la glucliis anaembia, pero con el fenmeno de la fagocitosis se asocia un mayor consumo de oxgeno, el cual se convierte principalmente en H,O,. Paralelo a ello, se metaboliza ms glucosa por la va de oxidacin directa. Por esta razn algunos consideran que el NADPH as generado interviene en la sntesis de H,O,. Otros atribuyen el origen de este ltimo a la actividad de una oxidasa del NADH, que utiliza el producido en la gluclisis anaerobia. De cualquier manera, se conoce que la accin metablica del leucocito sobre el microorganismo patgeno vara, debido a las particularidades de ste. Algunos microorganismos requieren de O,, mientras que otros prescinden de este gas. Los hay que son sensiblesa los cidos y los hay que son acidfilos. Igualmente, no es constante la sensibilidad a la lisozima y otras enzimas entre las diferentes variedades de microorganismos.

Las plaquetas se derivan de los megacariocitos de la mdula sea y carecen de pigmentos y ncleo. Si separamos las plaquetas de la sangre, sta puede conservarse por perodos prolongados en envases siliconados; tan pronto le aadimos un extracto de plaquetas, se produce rpidamentela coagulacin. Por lo regular, las plaquetas tienen que ser activadas antes de participar en la coagulacin. La trombina, la adrenalina, elcolgeno, el ADP y algunosfactores hsticos, pueden desencadenar la activacin, la cual trae consigo cambios estructurales que permiten la liberacin de constituyentes intraplaquetarios. En la membrana plasmtica de las plaquetas existen receptores especficos para varios de los factores de la coagulacin, como el factor V y el VIII. Tambin poseen sitios de unin al fibringeno, los que por accin del ADP y de la adrenalina son expuestosdurante la agregacin plaquetaria. Las plaquetas intervienen en el fenmeno de la coagulacin sangunea que trataremos a continuacin.

Coagulacin sangunea
La hemostasis es la accin de detener un sangramiento. La aplicacin de un torniquete,el pinzamientode un vaso -que rraliza el cirujano durante una intervencin quirrgica- y la simple compresin que aplicamos en una pequea cortadura son ejemplos de esta accin. Sin embargo,el propio organismo estdotadode su mecanismo de hemostasia,elcual se desencadena por sustanciaspresentes en la sangre; este proceso se conoce como coagulacin sangunea y consiste en la conversin de la protena fibringeno en fibrina, la cual al polimerizarse conforma una malla reticular que constituye la armazn bsica del cogulo sanguneo. Es obvio que la formacinespontnea de cogulos constituira un serio problema para la supervivencia y, por el contrario,la demora o la incapacidad para su oportuna aparicin,en condiciones de hemorragia, tambin dara al traste con la vida en cuestin de minutos. De ahque el fenmeno de la coagulacin sanguneaest sujeto a influencias reguladoras de diversa ndole. Antes de producirse la transformacincmcial que da origen a la fibrina, se sucede una serie complicada de reacciones de activacin,en las cuales intervienen numerosos factores. La mayora de ellos son euzimas proteolticas en forma de sus precursores inactivos, los zimgenos, pero tambin participan iones de Caz+ y algunos fosftidos

d e glicerina. El proceso es similar a otros ya estudiados, que tienen lugar como una d e acciones enzimticas, en las que se va produciendo un fenbmeno d e amplificacin, susceptible adems d e ser regulado en muy diversos niveles. En la tabla 63.3 se resumen los diversos factores que intervienen en la coagulacin. AI exponer las distintas etapas d e este proceso, el lector podr disponer d e una fuente expedita donde identificar los participantes en cualquiera d e las fases.
~ ~ b633. l a Factores d e la coagulacin: caracterizacin

Nombre trivial (factor)

Plasma Peso molecular (mdd1,)

-

Sinopsis fnncional

Pmtenasoluble. lapmtelisis portrombinaluplieriw Zimgenodetmmbina Con fosfolpidos presentes extnnieca Iones de calcio
Unefacturedependientesdc

(N)

Pmconvertina Fadoranohemolicu (vonWiUebrand) Fador Stuart (X) Antecendenteen plasmade tmmboplastina (XI) Factor Hageman (XII)

wn)

(vnu

Quiningenode eleva. do pesomolecul~r Plasmingenu

vitamina Da fosfolpidos de lamcmbrana Protena en plasma que acelera la activacin del factor X enlaviaintnnseca Zimgenoplasmtici>del factor W a Protenaen plama que acelera laactivacin del factor IX en la va intrnseca Precursor del factor Xa que mnviertelaprotmmhinaen bvmh'ina Zimgenodd plasma que activado nor W a . activaal factor IX Zimgeno del plasma de la va introscuiiquese activa por contacto Zimgcnodctrms~utami~ queactivadoprtmmhinaenIrecrnza cnlaccsde fihrinay endureceel cogulo Zimgeno que activado y<ir trombina, inactivaa los factores V y VI11 Zimgenodecalicrcno que activa al factor XIl en la va intnnwca Protena accesoria en la activacin de factores XII g XI Zimgeno de plaimina que
dep;rdaalafibriua,yafum-

do el cw&wIn *Contenido glucidieu expresado en tanto por ciento Las primeras etapas de la coagulacin se suelen separar en 2 componentes: las vas

intraseea y extriseea. E n ambas, la activacin sucesiva d e los diferentes zimgenos

es relativamente lenta sin el concurso de los factores accesorios,los cuales multiplican la velocidad del proceso en mas de 10 000 veces. Son factores accesorios los iones de Ca", los fosfolpidos cidos que se derivan de la membrana de las plaquetas y de los tejidos daados, y los cofactores proteriicos que participan en la activacin de los ziingenos (sin ser ellos proteasas), como los factores V y V111. Para facilitar el estudio de este proceso presentamos primeramente una visin general con las transformaciones centrales, antes de describir todas las etapas con mayor detalle (Figs. 63.5 y 63.6).

Sihtema intrnseco
L---__--_i
7

Sistema

Fig. 63.5. ELapa inicial de la coagulacin: visin general. La a de los dilerenfes factores indica su hrmn activa.

A coiitinuacin analizaremos cada una de estas 3 fases con mayor detenimiento.

, ,

Va intrwra
La iniciacin de esta va parece deberse a un fenmeno de contacto. El factor XII, glicoproteina plasmtica de una sola cadena polipeptdica, manifiesta una actividad catalitica in vitrocuando se adsorhe en superficies como el cristal, o in vivo, al colgeno o las membranas plaquetarias. El factor adsor-bido convierte la precalicrena en calicren'a y sta, que es tambin una proteasa,cataliza asn vez la activacin del factor X libre. El factor Xlla puede activar cantidades adicionales de precalicrena, en lo que constituye un proceso de activacin recproca, pero es, adems, la protcasa activadora del siguieute elementode la seciiencia: el factor XI. En este paso participa como factor accesorio el quiningeno de elevado peso molecular (HMWK [high nioleciilar weght kininogenl). Estos 2 pasos se resumen en la figura 63.7. El factor Xla, producido como hemos visto en el proceso de contacto, activa al componentesiguientede la secuencia: el factor lX, una glicoprotena de cadena simple, en su reein amino igual que el factor XII, pero que contiene Y-carhoxirlutmico -. terminal. Este factor IX puede activado, ademjs, por el factor VIlaproducido en la va extrnseca. A diferencia dc las activaciones de los factores XII y XI, consideradas

Fihnngcno -+Fibnna

' A

L'ig. 63.6. Etapa final (comn) de la coagirlacin.

~*r

anteriormente, en el caio de la conversin del factor 1X en IXa los fosfolipidos cidos y el Cab son factores accesorios que aceleran el procew de activacin.

Va ex&nsec

Activaci6n del factor X en el sistema intrnseco El factor iXa es la proteasa encargaaa de la conversin del factor X en Xa. Participan como fadores accesorios el Caz', los fosfnpid<rs y el factor Vla. Este ltimo es una gocoproteia plaantica que est ausente en la liemolia cl&ica. Su accin accmria es esamulada por la trombina, de modo que alguna trnnibina se Iu formado antes de I . En la fikwra 63.8 se activarse el factor X, lo c d facilita la funcin del fador w ilusha esta parte de la coagidacin.

0
MMWK
Fig. 63.7. Sktenia intriiireci,. Activacin dr los factores XII y X1. HhlM K : quininVgcno de elevado peso n eiglzl niolrciilsr (Iiigh rziol<~iilar kininogm).

Va eKtriseea
El factor VI1 es una glicoproteina plasmtica que posee residuos de carboxiglutmico en su regin amino terminal. La activacin de este factor puede ser el resultado de la accin cataltica de cualquiera de los 3 factores siguientes: Xa, Xlla o trombina (IIa). El factor Vlla es un zimgeno con determinada actividad cataltica; esa actividad reducida se incrementa algo, por la liberacin del factor hstico y de los fosfolpidos, despus de un dao en los tejidos. Como consecuencia, el factor VI1 puede generar pequea5 cantidades de factor Xa o de tromhina, que ya proporcionan la activacin de cantidades significativas del propio factor VII. Este factor calaliza, como vimos en el esquema general, la activacin del factor X en el sistema extrnseco. Las diversas interacciones descritas se resumen en la f i p r a 63.9.

Fc~sfolpidos
Vig. 63.8. ctivnciiin del factor X en el sistenia intrnseco.

Sistema intnnseco

Fig. 63.9. Sistema extrinsecn. Acfiraci<in del factor \'U. FI.: fi,sfolipidos; FH: factor Iiisticm

Etapa comn
Formacin de trombina
La protrombina consiste en una sola cadena polipeptidica, con un contenido glucdico de aproximadamente un 11 % de oligosacridos. La protena, la cual se

Fig. 63.10. Cainma-carboxigli~ti. mico eri la protrombina. Diez de 10s residuos del 6 al 33 eii la protrornbina humana son cidos gltarniciis carboxilados en cl carbono earnma.

sintetiza en el hgado, experimenta la formacin de una decena de y-carboxiglutmicos en la regin comprendida entre los residuos del 6 al 33. La carhoxilasa que cataliza esta reaccin se halla en la luz del retculo endoplasmatico rugoso y requiere de vitamina K como factor imprescindible.La vitamina K lahiliza el tomo de hidrgeno en el carbono gamma del cido glutmico, lo que pemiite la formacin del derivado de carboxiglutmico por ataque del CO, (Fig. 63.10). Otras protenas tambin semodificandelmismo modo,incluyendootrocfactores de la coagulacin. La activacin de la protromhina se produce en una superficie cargada negativamente y brmada por derivados lipdicos de las membranas plaquetarias o de clulas hsticas daadas. Estos lpidos,como la fosfatidil serinii, se hallan hacia el lado interno de las membranas plasmticas y es por eso que no se exponen, si no existe un dao celular. Esta localizacin del proceso de activacin en la supericic cargada negativamente es comn a todos los pasos de conversin de zimgenos. La protromhimase une alosfosfolpidos cargados negativamente,una vez que son expuestos. En la unin intervienen los residuos de y-carhoxiglutmico, con la imprescindible participacin de Caz+. El factor Xa tambin se liga a los fosfolpidos por un proceso dependiente de Caa, y mediante sus propios residuos del derivado carboxilado del glutmico. Ahora bien, la activacin acelerada de la protrombina se alcanza realmente cuando el factor Va se incorpora al complejo protrombina-Xa-Caz' (Fig. 63.11).

2
Protrombina

Fig. 63.11. Activacin de la protrornbiiia FL: fosfolpidos.

Tronibina

Pkptido amino terminal

El factor V es una cadena polipeptdica que contiene un Caz*firmemente unido, el cual es esencial en la accin del factor Va. ste no tiene actividad proteoltica y es ms bien un factor accesorio en la activacin de la protrombina. Es curioso, pero el Va es el resultado de la accin de la trombina sobre el factor V, al hidrolizar, por lo menos, 2 enlaces peptdicos. Se considera que la tromhinase vafonnando lentamente en ausencia del factor Va, y una vez que esto ocurre, ella convierte el factor V en Va, lo cual incrementa de manera notable el ntmo de su propia produccin. La activacin de la protrombina in vitro, que es catalizada por el factor Xa, se y los fosfolpidos, y por el factor Va unas 350, pero acelera unas S0 veces por el Ca2+ multiplican el ntmo de todos los componentes del complejo Caz+-fosfolpid'os-Xa-Va conversin que puede catalizar in vitro el factor Xa solo, nada menos que 20 000 veces. En resumen, el complejo produce en 1min la misma tromhina que tardara 2 semanas en Formarse por la accin del factor Xa.

El fibringeno consiste en 3 cadenas polipeptdicas diferentes, designadas alfa(a), beta(I3) y gamma(y). Latransformaanocurre en 3 pasos: primero se producela hidrlisk de un enlace peptdico en el sector amino terminal de las cadenas alfa y beta, catalizado . por la trombina. En la segunda etapa la hidrlisis de esos enlaces peptidicos hace que se expongan sitios de unin complementarios, los cuales permiten a los monmeros de fibiina almeane longitndinaimente,agregarse y precipitar en formade cogulo blando. quedalugpraicogninduro. poritimo,seformanenlawentrelasmolkulasdefibrina,lo Es la propia trombina la que activa al factor XIII, presente en el plasma y las plaquetas. Se trata de una transglutaminasa,conocidatambin como factor estabilizai~te dela fibrina FSF, la cual cataliza la formacin de enlaces covalentes entre las cadenas polipeptdicas de fibrina. Los enlaces se establecen entre diferentes molculas y participan las cadenas alfa y gamma, no aslas beta. En la figura 63.12 se muestran los 3 pasos. Fibrinyeno Fibiina

3 -

FSF

Fig. 63. 12. Actiraci6n del fihringeno. FSF: factor eslabilizante de la fihrina.

Aunque tanto el factor XIII, de origen plaquetario, como el plasmtico, son zimgenos que se activan por la accin proteoltica de la tronihina, existen diferencias en ese proceso. Mientras el FSE' plaquetario se activa directamente tras la accin peptidsica de la trombina, el plasmtico precisa de la separacin de 2 polipptidos adicionales, en un paso que depende del Caz+. Por ello, la activacin del factor VI11 plaquetario es ms rpida que la del plaimtico. En cualquier caso, FSFa es una enzima de tipo transglutaminasa que cataliza la formacin de enlaces covalentes entre las cadenas polipeptdicas de las subunidades de fibrina, como se representa a continuacin:

Enlace cniZad0

E - ( y glutamil ) lisina

Trastornos de la coagulacin
Los trastornos hemorrgicos pueden originarse por problemas de las plaquetas, fragilidad capilar, alteraciones en el mecanisnio de la coagnlacin, o por la accin de anticoagulantes. De los anticoagulantes qne actan in vivo, la heparina es el ms signitcativo y desempeauna funcin cn el control dela hemostasis; adems, es una glicoprotena de elevado peso molecular, r b a en un glicosaminoglicano particular (captulo 10); ella inhibe varias proteasas de la coagulacin y se encnentra en miichos tejidos, principalnlente en las clulas cebadas del endotelio capilar. La heparina liberada se comhina con la protena aiititrombina 111,la cual se torna activa y puede unirse e inhibir a muchos de los factores de la coagulacin: IIa, 1x8, Xa, XIa. XUa v calicrena. La accin de la heparina es cataltica, ya que despus que un comple,joantitromhina II-heparina se une e inhibe a una de las proteasas, ella sesepara y es capaz de activar otras molGculas del inhihidor. El dicumarol es un anticoagulante que se utiliza como veneno de ratas, y de manera teraputica para contrarrestar la tendencia a la formacin de tromhos; su estructura quinica es similar a la de la vitamina K.

Vitamina K,

El dicumarol bloquea la reoxidacin de la vitamina K por la enzima epxido reductasa y paraliza as el ciclo de accin de la vitamina como cofactor en la formacin de los residuos de gamnia-carho~glu~mico, en varios de los factores de lacoagulacin, incluidala protromhina. En relacin con las alteraciones en el mecanismo dela coagulacin, stas pneden ser congnitas o adquiridas. Las primeras suelen afectar nicamente a un factor de la coagulacin; las segundas pueden afectar a varios. Los trastornos adquiridos con mayor frecuencia son los secundarios a enfermedades hepticas, los cuales traen consigo una disminucin en la sntesis de los factores dela coagulacin qnedependen de la ~ t a m i n K a (n,VII,M,y X), as como del factor V y del fibringeno. En cuanto a las congnitas, su gravedad depende del grado de deficiencia del factor de la coaeulacin afectado. La hemofilia clsica. en lacual el factor \'III est ausente, puede originar sangramientos muy graves en los pacientes con menos del 1 % dela actividad normal del factor; en camhio, los pacientes que tienen el 10 % dedicha actividad no padecen hemorragias, a no ser que sufran traumas de consideracin. La hemofilia tiene una frecuencia aproximada de 1 por cada 10 O00 varones. Otros errores congnitos que afectan a diferentes factores se presentan poco.

1134

Wtornos de la coagulacin
Los trastornos hemorrgicos pueden originarse por problemas de las plaquetas, fragilidad capilar, alteraciones en el mecanismo de la coagulacin, o por la accin de anticoagulantes. De los anticoagulantes que actan in vivo, la heparina es el ms significativo y desempea una funcin en el control de la hemostasia; adems, es una glicoprotena de elevado peso molecular, rica en un glicosaminoglicano particular (captulo 10): ella inhibe varias proteasas de la coagulacin y se encuentra en muchos tejidos, principalmente en las clulas cehadas del endotelio capilar. La heparina liberada se combina con la protena antitromhina 111, la cual se torna activa y puedeunirse e inhibir a muchos de los factores dela coagulacin: IIa, IXa, Xa. Xla,Xlla y calicreua. La accin de la heparina es cataltica, ya que despus que un complejoantitrombina 11-heparina se une e inhihe a una de las proteasas, ellase separa y es capaz de activar otras molculas del inhihidor. El dicumarol es un aiiticoagulante que se utiliza como veneno de ratas, y de manera teraputica para contrarrestar la tendencia a la formacin de trombos: si1 estructura qumica es similar a la de la vitamina K.

Dicumarol

o
Vitamina K, El dicumarol hloquea la reoxidacin de la vitamina K por la enzima epxido reductasa y paraliza as el ciclo de accin de la ntaniina como cofactor en la formacin de los residuos de gamma-carbuxigluimico,en vanos de los Pactores de la coagulacin, incluida la protrombina. En relacin con las alteraciones en el mecanismode la coagulacin, stas pueden ser congnitas o adquiridas. Las primeras suelen afectar nicamente a un factor de la coagulacin; las segundas pueden afectar a varios. Los trastornos adquiridos con mayor frecuencia son los secundarios a enfermedades hepticas, los cuales traen consigo una disminucin en la sntesis de los factores dela coapulacin que dependen de la vitamina K (ll,VII,M, y X), as como del factor V y del fibringeno. En cuanto a las congnitas, su gravedad depende del grado de deficiencia del factor de la coagulacin afectado. La hemofilia clsica, en la cual el factor VIIIest ausente, puede originar sangramientos muy graves en los pacientes con menos del 1 % de laactindad normal del factor; en cambio, los pacientes que tienen el 10 % de dicha actividad no padecen hemorragias, a no ser que sufran traumas de consideracin. La hemofilia tiene una frecuencia aproximada de 1por cada 10 000 varones. Otros errores congnitos que afectan a diferentes factores se presentan poco.

Regulacin del pH sanguneo

Los sistemas amortiguadores sanguneos se hallan en el plasma y los eritrocitos. En el plasma existen 3 importantes: HCO;'/H,CO,; HPO,IIH,PO;' y proteinatlprotena. El sistema del bicarbonatolcidocarbnico es el ms esencial en el mantenimiento del pH de la sangre dentro de lmites normales. La relacin HCO;'/H,CO, del plasma es normalmente de 2011,lo cual representa un pH de 7,4. De acuerdo con la ecuacin de Handerson-Haselbach:

pH = pK

+ log

HCO;' "ZCOS 0,025 0,00125 20 + log 1

= 6,1

+ lag

= 6,1

= 6,l + log20 - log 1

= 6,l

1,3 - O = 7,4

Los sistemas del fosfato y las protenas del plasma son menos importantes, en comparacin con el buffer del bicarbonato. En los glbulos rojos hay una gran capacidad amortiguadora de los cambios de pH, en parte por las grandes cantidades de hemoglobina que contienen y en parte por el sistema del bicarbonato, tambin presente en cantidades considerables en los eritrocitos. El sistema del bicarbonato es muy eficientepara amortiguar los cambios de pH que se produciran con la constante formacin de cidos en el cuerpo, como el sulfrico, fosfrico, lctico, acetoactico, beta- hidroxibutrico y otros. Por e,jemplo, consideremoslo que sucede cuando el cido acetoactico reacciona con el bicarbonato:

o
ll

CH,- C- CH, COOH

+ HCV,

O
ll

CH,- C- CH, COO-+ H,CO,

El acetoacticohace que disminuya la concentracin de bicarbonato y aumente la de cido carbnico. El pH caera, de acuerdo con el cambio, en la proporcin HCO;M2C0,. En la realidad no ocurre as porque el H,CO, formado se elimina como C0,cuando la sangre que lo contiene llega a los pulmones: H,CO,

--

CO, + H,O

Los otros sistemasamortiguadores del organismo tienen componentes cidos que no pueden ser eliminados de esta forma. La funcin de la hemoglobina intraeritrocitaria se ejerce en conjuncin con el sistema del bicarbonato. Cuando aumenta la presin parcial de CO, en el plasma, difunde en mayor medida hacia el interior de 10seritrocitos. All la reaccin de formacin de cido carbnico es catalizada por la anhidrasa carbnica. La ecuacin qumica que vimos en el ejemplo delos pulmones, ahora se produce en sentido inverso. Con la concentracin creciente de H,CO,, la accin amortiguadora de la desempea su funcin:

El bicarbonato sale hacia el plasma, lo que favorece la relacin HCO;H,CO,. La disociacin cida de la hemoglobina presenta un pK de 73.Por ser ste el ms cercano al pH fisiolgicode 74,entre todas los sistemas amortiguadoressanguneos, le confiere as su funcin significativa en estos mecanismos de amortiguacin intrasanguneas. Los grupos imidazoles de la histidina son los determinantes, por ser el pK de este grupo el ms cercano al pH fisiolgico entre todos los grupos de los aminocidos presentes en las protenas. Adems, el pK del grupo imidazol de un residuo de histidina de las cadenas de globina, que se halla en las proximidades del sitio de unin con el oxgeno, cambia su constante de disociacin cuando la hemoglobina pasa a oxibemoglobina. El pK de ese grupo es de 6,6 en la oxihemoglobina y de 7,9 cuando la molcula se desoxigena. Como el paso a la sangre del CO, producido en los tejidos coincide con la liberacin del oxgeno por la hemoglobina, la capacidad amortiguadora de la forma desoxigenada del pigmento es tan elevada que en la sangre slo se produce una disminucin de pHequivalente aO,O3 deunidad. Por el contrario,enlasangre oxigenada de los pulmones la concentracinde CO, disminuye, y con ella la del cido carbnico, por lo que el pH tendera a subir. Estasituacin coincide con el mximo de oxigenacin de la hemoglobina, que como se ha explicado la hace ms cida y se acrecienta de nuevo su eficacia amortiguadora del pH. No es despreciable, como elemento que determina la significacin del sistema de la hemoglobina, la elevada concentracin de la mencionada protena en los eritrocitos, la cual puede llegar a1 34 % de los slidos presentes en estas clulas. Se e s h a que la capacidad amortiguadoraconjunta del sistema bicarbonato/cido carbnico y la de los eritrocitosrepresentan el 85 % del totaL

Hemoglobinay metabolsmo eritrocitario

La funcin bsica de la hemoglobina es transportar oxgenodesdelos pulmones; donde la presin de este gas es elevada, hasta la intimidad delos tejidos. All,debido al consumo celular, la presin de O, es menor y la molcula de hemoglobina lo cede, de modo que en los pulmones se verificala reaccin siguiente: Hemoglobina + O,

mientras que en los capilares histicos ocurre la reaccin inversa: Oxihemoglobina Hemoglobina

Oxihemoglobina

+ O,

Fuente: Stryer L.: Bioqumiea, 2da. edicin, Editorial Revert, S.A., 1982. Fig. 63.13. Tetrmera de la molcula de hemoglobina. En este modelo a baja resolucin de la hemoglobi"a, las cadenas alfa se presentan en verde, las heta en morado y las grupos hemo en rojo.

La molcula de hemoglobina es un tetrmero constituido por 2 cadenas alfa, 2 cadenas beta y el grupo prosttico hemo, cuyasntesis se trat en el captulo 58. Las 2 cadenas alfa (de 141 aminocidos cada una) q las 2 beta (con 146 aminocidos) se asocian y cada una de las 4 cadenas posee un &upo hemo, alojado en un bolsn interno de su estructura. La totalidad de la molcula adopta una forma globular, como se puede apreciar en el modelo de la figura 63.13. En cada bolsn el anillo porfirnico coplanar queda orientado con los grupos vi~10,dispuestos demanera que interactencon los grnpos apolaresde los aminocidos circundantes. Adems de esta interaccin apolar, el otro medio de fijacin entre el hemo y las globinas est constituidopor el enlace covalente coordinado que se establece entre el hierro del hemo y el nitrgeno de un anillo imidazlico de una histidina. Los grupos de cido propinico quedarn expuestos hacia la superficie de la molcula. La conversin de la hemoglobina en oxihemoglobina se debe a la fijacin reversible de la molcula de O,, especficamentepor el tomo de hierro en forma de Fe2+, que ocupa el centro del hemo. Este hierro central establece 6 enlaces de coordinacin: 4 de ellos con los nitrgenos de los anillos pirrlicos del propio hemo,

uno ya referido que se establece con un residuo de histina prxima a este y la sexta valencia de coordinacin, que es ocupada por una molcula de H,O. El O, penetra en el bolsn donde se halla colocado el grupo hemo y desplaza la molcula de H,O de la sexta valencia de coordinacin del ion ferroso. El ambiente hidrfobo, con una baja constante dielctrica que prevalece en el bolsn, impide que el oxgeno oxide al ion. Lametahemoglobina es una ferriprotoporfirina idntica a la hemoglobina, pero poseesu toniude hierro en un estado deoxidacin deFeu(frrico). En estar condiciones no es capaz de intercambiar 0,y se anula su funcin.La conversin espontnea de una determinada cantidad de hemoglobina en metahemoglobina origina la necesidad de que el eritrocito disponga de mecanismosenzimticos, referidosanteriormente, capaces de reducir a la metahem@obina. Existen agentes qnmicos que propician la formacin de la metahenioglohina, entre ellos los nitritos, las sulfonamidas y los salicilatos. Veamos la relacin que existe entre el metabolismo del eritrocito y la funcin de la hemoglobina. La afinidad de la hemoglobina pura en disolucin por el oxgeno es tal, que lo cedera a los tejidos con mucha dificultad.La hemoglobina intraeritrocitaria no se comporta as, pues tiene una menor afinidad por el oxgeno, lo suficiente como para quecontinesaturndoseenel parnquima pulmonar,perono tanta quelo retenp al pasar por los tejidos perifricos. Esto se debe al efecto de un metaholito, el cido 2,3 bisfosfoglicrico (DPG), lo cual se puede apreciar en la figura 63.14. Se conoca como peculiaridad del metabolismo eritrocitario la presencia de grandes cantidades del cido 2,3 bisfosfoglicrico, del qne en otras clulas slo se hallaban aenzima bisfosfo@ceromutasa resulta muy activa en el eritrocito cantidades mnimas. I y convierte considerables cantidades del cido 1,3 bisfosfoglicrico, metabolito intermediario de la gluclisis (captulo 44), en cido 2,3 bisfosfoglicrico. Actualmente se sabe que el DPG provoca cambios conformacionales en la hemoglobina, que determinan su influencia en la anidad por el oxigeno. Estos camhios sonde naturaleza alostrica y se ha podido localizar el sitio y la forma en que el DPG interacta, como modificador alostrico, en la molcula de hemoglobina (Fig. 63.15). Un DPG interactha con una molcula de hemoglobina, de manera que su sitio alostricose conformapor el tetrmero completo. Este metabolito refuerza la estmctura cuaternaria de la hemoglobina por enlaces cruzados ( a travs de l mismo) entre las cadenas beta. En la oxigenacin el DPG se desplaza porque la cavidad central es demasiado pequea; como consecuencia, para pasar de desoxihemoglobina a oxihemoglobina, en presencia de DPC, deben romperse los enlaces cruzados adicionales y en su ausencia no; es por ello que el DPG disminuye la afinidad de la hemoglobina por el oxgeno. El significado clnico del DPG no es despreciable. La sangre almacenada en los medios convencionales, como el de cido ctrico-dextrosa, tiene una afinidad mayor por el oxgeno. Ahora sabemos que la afinidad aumenta con el tiempo de almacenamiento, porque van disminuyendo las existencias de DPG desde 4 3 mM a menos de 0,s mM en slo 10 das. Si se le da a un paciente un gran volumen de esta sangre,la cantidad de oxgeno desprendida en sus tejidos puede quedar comprometida. Es cierto que los glbulos rojos, una vez transfnndidos, pueden recuperar sus niveles de DPG en unas 24 h, pero ste puede ser demasiado tiempo para un enfermo crtico. No es posible restituir el nivel de DPG al aadirloa la sangre, porque el compuesto noatranesalamembrana del eritrocito; sin embargo,sse puede evitar que los erihocitos almacenados experimenten la deplecin de sus existencias de DPC. Si al medio se le adiciona inosina, es decir, el nuclesido de la hipoxantina, esta molcula no cargada puede atravesar la membrana de los hemates. En el interior de la clula la inosina queda convertida en DPG por una seriede reacciones. De hecho, el nnclesidose ha utilizado para preservar la integridad funcional de la sangre almacenada. En diversos estudios se ha comprobado la funcin del DPG en la adaptacin a grandes alturas. Si una persona asciende hasta una altitud de miles de metros, su afinidad por el 0,decrece, al tiempo que aumentan los niveles deDPG enlos eritrocitos.

Fig. 63.14. E s t r u c t u r a del DPG. Este metaholito disminuye la afinidad de la Iicmoglohina por cl ouigeno.

Centro de unin del DPG

Fuente: Slryer L.: Hioquniiea, Zda. edicin. l<ditorial Rerrrt, S.A., 1982. Fig. 63.15. Sitio de unibri para el DPG en la Iicmoglebina. El I i i p r de unin sc halla en la cavidad central de la ilesoxihcmoglohina.

Hemoglobina y transporte de xido ntrico

El xido ntrico (ON) intervieneen la regulacin de la presin y el flujo sanguneos, y relaja la musculatora lisa de los vasos sanguneos, entre otras muchas funciones, como son las siguientes:
1.Relaja la musculatura lisa de los vasos sanguneos. 2. lnhibe la agregacin y adhesin plaquetarias. 3. Interviene en la relajacin del cuerpo cavernoso y el fondus gstrico. 4. Mecanismo de defensa en macrfagos. 5. Implicado en mecanismos de memoria y aprendizaje. 6. Modnlador del estado de vigilia en el sistema nervioso central (SNC). 7. Como mediador en la percepcin del dolor. 8. Mediador intracelular de agentes orexignicos en el SNC.

En estudios experimentalesen ratas se hacomprobado que la hemoglobina de la sangre arterial contiene ON, unido a sus residuos de cistena (ON-S),en mucha mayor proporcin que la sangre venosa. Se ha sugeridoun ciclo de transporte de ON para la hemoglobina,semejanteal de CO, y O, y basado tambin en cambios conformacionales de la protena.

Resumen
La sangre es el medio ms importante que result de la evolucin en el intercambio de sustancias entre los diferentes rganos y tejidos de los organismos mulocelulares con el medio exterior y entre ellos mismos. La fase lquida es el suero o plasma, segn baya coagulado o no. En la fase slida se encuentran las clulas sanguneas. La sangre cnmple una funcin de transporte, de defensa, de regulacin trmica y de los equilibrios bdrico y cido-bsico. En la composicin del plasma hay de 6 a 8 g de protena por 100 mL (o de 6 a S gldL). EUas se separan por electroforesis en las fraccionesde albmina, alfa,, alfa,, beta globulinas, fibringeno y gamma globulinas. La albmina cumple una funcin de transnorte de diversas sustancias v. ",adems. contribuve mucho a la presin coloidosmiica En las otras &acciones estn presentesmezelas demltiples protenas con diferentes propiedades y funciones espeecas. Los elementos formes son los eritrdtos, los leueocitos y las plaquetas. Los primeros son clulas especializadas en el transporte de oxgeno y cuentan con altas concentraciones de hemoglobina en su interior. La integridad de la membrana y la forma de estos corpsculos es bsica para que cumplan su funcin de manera eficaz. La especificidadde los grupos sanguneos radira en componentes glucdicos de la membrana eritrocitaria. El metabolismo de los eritrocitos tiene numerosas peculiaridades, ya que son clulas m n t e s de ncleo, mitocondrias, ribosoma y den& organelos. La gluclisis anaerobia y la va de oxidacin directa de la glucosa son sus fuentes de energa y potencial reductor; este ltimo es vital para mantener la integridad de su membrana. Los leucoeitos se espeeialwan en la funcin de defensa y su metabolismo, en parte, responde a esta capacidad. Destaca la alta actividad de enzima que generan pemado y O;-. Las plaquetas se derivan de los megacariocitos, en cuyas membranas existen receptores especficos para varios de los factores de la coagulacin. La coagulacin consiste en una serie complicada de reacciones de activacin, mayormente de emhmw proteolticas en forma de sus precursom inactivos, que cubnhmmn laconversin del fibringeno enfibrina Tambin participan iones Caz*

y algunos fosftidos de glicerina. Comprende una va intrnseca, una extrnseca y la etapa comn, en la cuai se activa la pmtrombina y se origina la trombina, que es la determinante en la transformacin del fibringeuo en el cogulo de fibrina. En la regulacin del pH sanguneo participan varios sistemas amorgnadores. De ellos, el sistema del bicarbnnato/cido carbnico es el ms importante en el mantenimiento del pH de la sangre, dentro de Lmites normales. La funcin de la hemoglobina intraeritrocitaria se ejerce en conjuncin con el sistema del bicarbonato. La molcula de hemoglobina cede en los tejidos el 0,que ha captado en los pulmones. El O, se une a la sexta valencia de coordinacin del F e del hemo; por tanto, cada molcula de hemoglobina es capaz de transportar 4 molculas de O,. La metahemoglobina es la hemoglobina no funcional con el hierro en forma fmca Ve). El cido 23 bisfosfogcrico se forma en la gluclisis eritroeitaria en grandes cantidades,por la accin de una bisfasfogiiceromutasa;su unin con la hemoglobina favorece la conformacin esiable de la desoxihemoglobiua, mediante enlaces cruzados entre las cadenas beta. Como consecuencia, disminuye la anidad de la hemoglobina por el oxgeno y contribuye as a que el gas sea cedido a los tejidos. La hemoglobina parece liberar en los tejidos extrapulmonares xido ntrico, que contribuye a modular la presin y el flujo sanguneos.

E j e r c i c i o s
1.Si en el sndrome nefrtico se producen cuantiosas prdidas de albmina por la orina, ;cul ser unamanifestacion visiblede este trastorno y por qu? 2. ;Cuntas y cules son l a ?protena?plasmticai que transportanhierro en una u otra forma? 3. Considere si las necesidades metablicas de un fumador son iguales o no a las de los no fumadores. Fundamente su respuesta. 4. Analice comparativamentelas consecuencias de la hipoxia en el metabolismo del eritrocito y del leucocito (granulocito). 5. ;Existen puntos de contacto o interaccin entre la? va? extrnseca e intrnseca de la coagulacin? ;Cules son? 6. Hemos visto que en la conversin de la protrombina en trombina existe una gran diferencia en la velocidad, si la activacin se lleva a cabo por el factor Xa slo o si se trata del complejo Ca"-Fosfolpido-Xa-Va. Postule 2 mecanismos que justifiquen la mayor eficiencia del comple,jo. 7. ;Intervienen los glbulos rojos en la capacidad amortiguadora de los cambios de pH? En caso afirmativo, explique cmo lo hacen y en caso de que su respuesta sea negativa, analice los sistemas plasmticos.

El tejido nervioso tiene una composicin y funcin muy especializadas. Se sabe de su metabolismoy del fenmeno de la conduccin del impulso nervioso, pero apenas se conoce la natnraleza bioqumica defunciones como la memoria o la propia conducta. Alrededor de12 5 L7o del peso corporal corresponde a este tejido. De esta cantidad, el encfalo es el mayor contribuyente a esa masa total, que en el adulto es, aproximadamente, de 1400 g, mientras que el resto de los nervios y la mdula espina1 no llegan a los 200 g. El tejido nervioso es peculiar en su composicin; Urna la atencin la gran cantidad de lpidos, que es mucho mayor que la de cualquier otro tejido, si exceptuamos el adiposo. La composicin del cerebro vara ampliamente con la edad. En el cerebro de un adulto encontramosms lpidos, pero menos cantidad de %wa, protena,compuestos orgnicos solubles y minerales que en el de un nio. El inters hioqumico de este te,jido no slo radica en su composicin, sino en la base molecular de la conduccin nerviosa, especialmente la trasmisin sinptica, la naturaleza de los diversos nenrotrasmisores y, por supuesto, las caractersticas del metabolismo cerebral. En el futuro se tendr una visin ms clara de la correlacin entre determinados aspectos bioqumicos y el psiquismo, los estados de nimo, etc. Actualmente, la accin de los psicofrmacos sugiere que esa relacin existe y no es de poca importancia.

Composicin del tejido nervioso

Las protenas constituyen alrededor de140 % del peso seco del cerebro. Dentro de las protenas caractersticas de este tejido podemos sealar los proteolpidos, que son abundantes en las vainas demielina; stos se diferencian de las lipoprotenas por su a n encontrado 2 protenas que parecen ser especficas insolnbilidad en agua. Tambin se h del tejido nervioso, pues su concentracin en el cerebro es ms de 1000 veces mayor que en otros rganos. stas se denominan S-100 y 14-3-2, y estn presentes en las clulas gliales y las nenronas, respectivamente. La protena S-100, que recibi esta denominacin por ser soluble en soluciones saturadas de sulfato de amonio, posee 3 subunidades,con un pesomolecular de7 000 D cada una. Ella se une a 2 Caz+ por molcula y tiene un alto contenido de cido glutmico y asprtico. Por otra parte, la 14-3-2se halla en la sustancia gris y se sabe que es una enolasa especfica de la neurona.

La concentracin de aminocidos libres en el cerehro es miicho ms elevada que en la mayora de los otros tejidos. El cido g l u t h i c o es el ms abundante, seguido por los cidos asprtico, N-acetil asprtico, la glutamina J. el cido gamma amino butrico. En cuanto a los glcidos,el aspecto ms notable es el bajo contenido en glucgeno del tejido cerebral, que es solamente del 0,l %. Los Ipidos constituyen cerca del 50 % del peso seco del tejido nervioso y su proporcin en lasustancia blanca? la mielina es mayor que en la gris. Con excepcin de las grasas neutras, el tejido nervioso contiene representantes de todas las clases de Lpidos en concentracin variable. En 1965,J. S. O'BrieBpublic un estudio detallado de la composicin lipdica del lbulo frontal del cerebro en sujetos de diferentes edades. En la tabla 64.1 se presentan los datos correspondientes a las edades de 10 meses, y de 9 y 55 aos respectivamente. lsbla 64.1. Contenido lipdico normal del lbulo frontal Lipidos individuales: purcenQje molar de Ipidos totales Tejido Lpidos tatales (% del peso seco) Colesterol Fosfatidil etanolamina Fosfa tidil senna Fostatidil colina Esfingomie. lina Cerebr& sidos Cerebr& sidos Ceramida

SO,'^
Sujeto de 10 meses

Su.vtaocia
gris

36,4

24,7

43

Sustancia
blanca

494

14,4

36

blielina

78,O

12,7

4,9

Sujeto de 9 aos

Sustancia
pri9

37,6

20,l

64

Sushcia
blanca

66,3

11,2

6,3

Mielina

78.0

12,8

48

Sujeto de 55 aos

Sustancia grU Sustancia

bknca

39,6

19,4

4~

64,6

103

63

blielina

78,U

84

4,4

Lpidos de la miena
Los m o n a y las dendritas del sistemanerviosoperifrico, los nervios de la sustancia blanca del SNC y los cuerpos celulares de las clulas en los ganglios sensitivos estn cubiertos por una capa de mielina.

Los Ipidos dela mielinaascienden a ms delas dos terceras partes del total delos Ipidos de la sustancia blanca. La mielina contiene colesterol, fosftidos de glicerina y galactolpidos. El ms abundante es el colesterol en proporcin molar, que duplica a los galactolpidos. Los fosftidos de glicerina, en proporcin intermedia entre ambos, se Iiallan predominantemente como fosfatidil etanolamina. Los cerebrsidos son los galactolpidos ms abundantes. Aunque el contenido de la esfingoinielina en el cerebro es bajo,en lamielina delos nervios perifricos es mucho mayor y con la edad tambin aumenta en el cerebro. Los plasmalgenos se encuentran principalmente como fosfatidil etanolamina; los cidos grasos libres, por su parte, son escasos. Los que forman parte de los fosftidos de glicerina son, sobre todo, el cido oleico y pequeas cantidades de poliinsaturados. En los ganglisidos predomina el cido esterico. La composicin de la inielina cambia durante el desarrollo. Los galactob'pidos aumentan en un 50 %.Los &teres de colesterol, quese encuentran en estadiostempranas del desarrollo, desaparecen al madurar la mielina; por cierto, que en algunas enfermedades persisten, como en la esclerosis mltiple.

Protenas de la mielha
El 80 % del contenido protenico de la mielina lo ocupan 2 protenas: un proteolpido y una protena bsica. sta, con un PI de 10,6, responde por el 30 % del total de protenas de la mielina. Tiene un peso molecular de 18 000 y es una sola cadena polipeptdica, de 170 aminocidos de secuencia conocida. Esta protena ha suscitado el inters de los investigadores, pues cuando se le inyecta a animales de experimentacin provoca una enfermedad denominada encefalomielitis alrgica experimental. En ella se presentan cambios que recuerdan la desmielinizacin de la esclerosismltiple en seres humanos, por lo cual se ha empleado como modelo experimental de dicha enfermedad. La otra protena abundante no se ha caracterizado suficientemente:se trata de un proteolpido cido. Las 2 protenas mencionadas son protenas integrales de la inembraua iriieluica.

Metabolismo del sistema nervioso central

Metabolismo glucdico La dependencia por la glucosa, o sustancias que puedan convertirse en ella para el metabolismo cerebral, es bien conocida. En estudios con glucosa marcada se ha coniprobado que el 90 % se iiietabuliia por la va glucotitica g el ciclo de Krebs. El 10 % restante puede convertirse en aminocidos, Ipidos, cidos nucleicos y protenas. El cerebro tiene una maquinaria glucoltica muy eficiente. La actividad de hexoquinasa es 20 veces mayor que la de los otros tejidos. En general, la capacidad glucoltica excede las posibilidades del ciclo de los cidos tricarboxlicos, ya que la actividad de la isoctrico deshidrogenasaes mxima a los niveles normales de utilizacin de glucosa durante el reposo. En circunstancias especiales, como el perodo prenatal y neonatal, y en ayuuo de ms de 3 das, el cerebro puede metabolizar cido acetilactico. La va del fosfoglucnico,tambin activa en todas las clulas cerebrales, provee los NADPH para la sntesis de los cidos grasos y esteroides. Si consideramos el escaso contenido de glucgeno que posee el cerebro, de apenas 0,l %, se comprenden las graves consecuencias de la hipoglicemia para este rgaiio. El coma -y aun daas irreparables- sobrevienen despubde breves perodos de hipoglicemia exhPma.

A partir de la glucosa se sintetiza en el cerebro el mioinositol, que es requerido para la formacin del fosfatidil inositol.

Metabolismo de los amino6ddos

El metabolismo aminoacdico cerebral comparte la mayora de las v a generales, e incluso slo carece de la carbamilfosfato sintetasa, de entre las enzimas de la ureognesis, pero, adems, posee rasgos propios muy distintivos. Las tres cuartas partes del caudal disponible de aminocidos libres corresponden a los aminocidos dicarboxilicos y sus derivados; el glutmico es el preponderante. En la figura 64.1 se presentan las relaciones metablicas en que intervienen estos aminocidos y sus derivados.

Oxalactico

Mlico

.(
I

a - cetoglutrico

Glutatin
Fig. 64.1. Aspectos del metabolismo ecrebral dc Iris aininocidor. Se observan algunas de las reacciones en que estn implicados los ainiiiscidos dirarhoxilicos y sus derivados.

cido glutjmico

y - guanidobutrico

y - aminobutneo

Hornocarnosina

1 1
Glutamina

lb

Semialdelido succnico

f l l J

y - hidroxi-

butrico
d

Succinil COA t - Succnico

Fumrico t -

Los sistemas de transporte de aminocidos al cerebro son diferentes para los diversos grupos. Existen, por lo menos, 2 distintos para aminocidos neutros y otros sistemas nara los bsicos v los cidos. En el cerebro existe una gran cantidad de L-glutmico descarboxasa que cataliza la formacin del cido gamma aminobutrico (GARA). El GABA es escaso en otros tejidos; adems de sn funcin como neurotrasmisor, que analizaremos ms adelante, se transamina con el alfa cetoglutrico en el sistema nervioso y rinde glutmico y semialdehdo succnico. Este ltimo, oxidado a cido succnico, puede incorporarse al ciclo de Krebs, va succinil-COA. Esta derivacin sustrae del 10 al 20 % del alfa-cetoglutrico del mencionado ciclo. Por supuesto, que el cido gliitmico participa en otras reacciones de transaminacin, que le conectan con el ciclo de Krehs a travs del a-cetoglutrico. El glntmico desempea una funcin especial en relacin con la eliminacin del amonaco cerebral. El NH, endgeno que proviene casi exclusivamente de la reaccin de la desaminasa del cido adenilico: AMP
. IMP+ NH,

y aqul que entra al cerebro, proveniente de otros tejidos, sc convierte en glutamina, que es el medio de que dispone el rgano para desembarazarse del amonaco.

En cuanto al destino anahlico de los aminocidos, en el cerebro existe una intensa sntesis de protena%El recambio de lai protenas, incluso en las terminaciones nerviosas, es rpidn y el suministro llega a travs del flujo de transporte a lo largo del d . La vida media de una enzima tan importante como la colina acetil transferasa es de apenas 5 das. Sin embargo, el ritmo de la sntesis de protena decrece con la edad.

M&abolismo de los ipidos

De los diferentes Ipidos que abundan en el cerebro, la fosfatidilcolina y los fosftidosde inositol son los que experimentan un rpido recambio. El colesterol se sintetiza solamente en las edades tempranas de la vida, durante el cmimiento. La hidroximetil-glutaril-CoAreductasa (captulo 53) va disminuyendo en el cerebro marcadamente, en la medida en que aumenta la edad, por lo que el rgano vaperdiendolacapacidad para sintetirarelrsteroide. No obstante, se puede demostrar .aun en el adulto- una peqne'a actividad residual de la enzima. La va de sntesis de los fosfoglicridos tan~poco difiere de las estudiadas en el metabolismo general (captulo 52). A partir de la glucosa se sintetizan cidos grasos, pero tambin son fuentes el acetilactico,el ctrico e incluso el acetilasprtico. En cuanto a los esfingolpidosen general, los conocimientos que se tienen de su metabolismo (captulo 52) son realmente el resultado de investigaciones con hornogenizadosdecerebro.En el captnlo 76, que se tratan las enfermedadesmoleculares o errores congnitos del metabolismo, se exponen afecciones por acumulacin de Ipidos, que daan al cerebro y son consecuenciade deficienciasen enzimas catablica~ de estos compuestos. Los cambios temporales en el ritmo metahlico no son un fenimeno privativo del colesterol; la sntesis de los cerebrsidosy snlftidos es mucho ms rpida en el cerebro, en el perodo de desarrollo, que coincide con la mielinizacin. La cantidad de ganglisidos, los cuales a diferencia de los anteriores predominan en la neurona, se duplica desde el nacimiento hasta la adultez. Estos compuestos abundan, sobre todo, enla terminal del axn,en la fraccin de los sinaptosomas (ver ms adelante).

Metabolismo de los dcidos nucleims

No hay sntesis de novo de las bases pirimidnieas en el cerebro porque carece de carbamilfosfato sintetasa, primera enzima en esta va de sntesis. Por otra parte, el tejido cerebral forma rpidamente A!iP, a p t u d e la uridina. El UMPse convierte en UTP y CTP. Para las purinas s existe la va denovo; no obstante, la va de recuperacin tambin tiene una significacinimportante en la produccin de purhas y sus derivados. Todas las purinas y pirimidinas comunes y sus nuclesidos atraviesan la barrera hemato-encefca y entran en el cerebro. Como en los dems tejidos, los cidos nucleicos conservan y trasmiten la informacin genica. Hace ya varias dcadas se dieron evidencias de que en la estabilizacin de conexiones sinpticas, que se establecen como consecuencia de experiencias repetidas, estn involucradas estas molculas informacionales (ARN), pero posteriormente no ha habido adelantos significativos en esta rea. Lo cierto es que sobre esta cuestin, crucial en la compremin del funcionamiento del sistema nervioso para la incorporacin de la experiencia de una manera estable e integrada, se conocen aspectos del desarrollo y control de las conexiones interneuronales, pero, como veremos msadelante,se ignora la basemolecular de ellos.

Mecanismo bioqunico de la actividad neurona1

Lo concerniente al impulso nervioso y sus diferentes formas de trasmisin se domina con profundidad y detalles, algunos de los cuales se exceden de los marcos de este libro. Los sensorreceptores, que transforman diferentes clases de estmulo en impulsos nerviosos, tambin han sido fundamentalmente comprendidos en su funcin de transduccin de energa. Las funciones superiores, o al menos fenmenos de nivel inferior, que puedan sugerir actividades integrativas y de asociacin en la interaccin neuronal,las cuales podran ser la base de cualidades bien complejas de la conciencia y su relacin con la experiencia, se han demostrado y aclarado, en parte, en los ltimos aos; sin embargo, las evidencias bioqumicas, que podran explicar la gnesis de estos fenmenos, son escasas y en ocasiones contradictorias.

Generacin y conduccin del impulso nervioso Las ncuronas son clulas muy alargadas que conducen seales elctricas; lo cun~n es que la seal se reciba y conduzca en las dendritas y el cuerpo celular, y se trasmita a lo largo del axn corno un potenciai de accin, que ser traspasado a otras clulas por medio de las sinapsis, sitios en los cuales la seal elctrica pasa a la otra clula en forma de neurotrasmisores qumicos. En el tejido nervioso, adems de las neuronas se encuentran las glas, que son clulas no condoctoras con una funcin de soporte. Como se estudi en el captulo 20, existe uiia diferencia de potencial a lo largo de la membrana plasmtica de la clula en reposo, el cual asciende a unos 75mV (negativo al interior); ello se debe a diferentes hechos: 1.La concentracin de K'es de20 a50 veces mayor adentro que afuera,no obstante que la membrana es ms bien permeable al K*. 2. El Cl; abundante afuera, penetra muy lentamente, pero los otros aniones importantes adentro, como los cidos nucleicos y las protenas, no pueden abandonar el interior. 3. La permeabilidad para el Na+,cuyaconcentracin afuera es ms de 10 veces la del interior, es slo la vigsima parte (1120) de la del K'. El potencial existe porque los K+tienden a abandonar la clula hacia el exterior, debido al gradiente de concentracin; no obstante, ellos de,jan tras sun exceso de aniones, de modo que se produceuna carga elctrica negativa. El fenmeno inverso por la tendencia a entrar los iones Na', que dejara11en el exterior una carga neta negativa, contribuyemuy poco, yaquela membrana en reposo es escawuentepermeable al Na'. Por otra parte, la salida pasiva de K+y la ms lenta entrada de Na'acabarian por equilibrar las concentracioues de ambos iones adentro y afuera de la membrana. La ATPasa dependiente de Na' y K' (captulo 20) se ocupa de mantener esas diferencias de concentracin y estabilizar el potencial de reposo. Es la misma enzima, presente en las otras clulas del organismo, la que efecta el intercambio de 3 Na* hacia afuera por 2 K+hacia adentro. Se trata de un bombeo de sodio y potasio contra sus gradientes de concentracin, a expensas de la energa de hidrlisis del ATP.

Potencial de accin
Si de pronto la memhranase hiciera muy permeable al Na', tantola diferencia de concentracin como el gradiente elctrico haran penetrar un torrente de estos iones, los cuales llegaran hasta invertir la diferencia de potencial. Esto es justamente lo que

sucede cuando un estmulo provoca la multiplicacin por 100 de la permeabilidad para el Na'. Como resultado la diferencia de potencial puede variar de -75 a +30 mV y ya no hay potencial de reposo porque se ha producido un potencial deaccin. El cambio en la permeabilidad al Na' es determinante; analicemos cmo se 1 paso regulado de iones se establece a travs de los diferentes canales que produce. E existen en la membrana (captulo 20). En el desencadenamiento de un potencial de accin son decisivos los canales de sodio, regulables por voltaje. En genera1,un canal regulable por voltaje es el que se abre y se cierra como respuesta a los cambios de voltajea travs de la membrana. Desde el punto de vista bioqnmico, y en trminos de la relacin estructura-funcin, con los datos actualmente disponibles es posible concebir nn modelo general para estos canales. Aunque los cambios de voltaje del orden de los 50 mV que un estmulo efectivo provoca parecen insignificantes, no hay que olvidar queel grosor de la membrana es slo de 5 nm, asque el gradiente de voltaje es de 100 000 Vlcm. Como consecuencia, las protenas de la membrana estn expuesta? a uncampoelctricomuy grande. Ya sabemos que las proteinas poseen grupos car~ados en sus superficies y enlaces polarizados entre sus tomos, de modo que un campo elctrico est ejerciendofuerza enlaestruchiramolecular. En o p o s i c i 6 n , l a n la estructura probablemsestable son mayores y por lo general alcanzan acontrarrestai- esa influencia esterna. Es de suponer que los canales regulables por voltaje estn constituidos por protenas que evolucionaron con una particular sensibilidad estructural al campo elctrico, de modo que poseyendo un nmero determinado de conformacionesestables, la transicin entre ellas se favorece por cambios bruscos del canipo elctrico de su entorno. Naturalmente, las diferentes conformaciones pueden servir o no de canal a un ion especfico, o ms sencillamente, existiran conformaciones con el canal cerrado y conformaciones con el canal abierto. Volvamos al comportamiento especifico de los canales de sodio regulahles por voltaje, segn estudios experimentales comprobados. Al potencial de reposo (-70 mV), los canales estn cerrados. Si se hace menos negativo, digamos UmV, y la clula se mantiene en este estado de despolarizacin, entonces se abren los canales y un torrente de Na' entra, empujado por la gran concentracin del exterior. Este flujo es miximo 112 ms despus de producirse la variacin en el volta,je, pero no se mantiene aunque la clula an est despolarizada, sino que cae abruptamente a cero en pocos milisegundos, lo que quiere decir que el canal se abre fugazmente para cerrarse de nuevo. La membrana de la neurona contiene muchos miles de canales de sodio, regidables por voltaje. Mediciones hechas por distintas tcnicas concuerdan en que los miles de canales abren, no exactamente a la vez, cuando la memhrana se despolariza. Ellos estn cerrados o abiertos individualmente, segn la ley del todo o nada. No obstante, la corriente deNa' que atraviesa la membrana y genera el potencial de accin,elcual se registra en un pcrfliso (Fig. M.2),es lasuma de lascorrientes que fluyen con algn leve y azaroso asincronismmo en los miles de canales. Cada canal acabado de cerrar se mantiene en un estado peculiar diferente al inicial, pues ya no responde comoal principio a subsiguientes camhios del potencial negativo. El canal se torna sensilile otravezcuandoel voltaje ha recuperado su valor original y ha transcurrido un periodo de recuperacin deunos milisegundos. Como consecuencia, el canal de Na' regulable por voltaje puede adoptar, por lo menos, 3 estados conformacionales, que se representan en la figura 64.3. Al estudiar el canal de sodio regulable por voltaje hemos visto la causa de que la permeabilidad al Na' decline despus de producirse un potencial de accin; entonces la bomba de Na', L a ATPasa, restaura las condiciones origjuales; lodo esto dura apenas 1ms. Si el estmulo alcanza un determinado umbral, se desencadena toda la secuencia, lo que responde nuevamente a la ley del todo o nada.

Fiicnte: Illiert H et al.: \ioleculnr Biology o l t l i e <'ell. N e r l o r k a n d IAondeii:Garland Publishing Iiie., 1983. Fig. 61.2. Registros de 116 corrientes a tr.1\i.i de tanalcs de Na' rcgulahles por rolta,je. Se utiliz aria cCliila einhrionaria de iiiriulo dc rata. El registro superior corresponde al total de la serri6n de nrnnhraTia; se ohrerrs q u e &ta se despolariz cri el arto. A continuacin se muestran 3 registres de repeticiones separadas del rrperiniento. Cada pico del tliija de rui.rientr representa la apertura de un calid, crcepti, cn el primer rcgistro; donde 2 canales se iihricron rirnultWriearnrnte ) se produ,jo por un corto perodo una rorriente del dohlr de intensidad (4 picoarnperii,~.en vez de 21. La figurade nhqjo representa L a wnia de las corricntei en 144 repetiiionrs del experimento.

Observemos una caracterstica notable: todos los pasos de la fase ascendente del potencial de accin son espontneos, una vez iniciados; es durante la fase descendente que se emplea la energa de hidrlisis del ATP para redistribuir los iones a las condiciones de reposo.

Propagacin
Al producirse un potencial de accin en un sitio de la membrana, si colocamos electrodos a diferentes distancias y a lo largo de la fibra nerviosa, se registrarn los mismos cambios observados en la localizacin inicial. El potencial se propaga a una velocidad de 30 a 50 mls en las fibras gruesas sin mielina y de 1 a 10 in/s en las delgadas; es que el torrente de Na*, que penetra por la despolarizacin local, provoca que la corriente se propague a las vecindades, con una intensidad suficiente para sobrepasar el umbral de excitacin, lo que desencadena a su vez un nuevo potencial de acciu en esa regin cercana. Este proceso continua a lo largo de la fibra. En las fibras mielinizadas existen espacios peridicos sin mielina, los ndulos de Ranvier, que es doude seencuentran prcticamente todos los cauales de sodio reylables por voltaje del axn, mieiitras que estn casi ausentes en los segmentos cubiertos por mielina. Cuando un potencial de accin se dispara en un ndulo, se despolarizan las regiones vecinas como en las fibras desmielinizadas, pero los segmentos cubiertos en las mieliniaadas no son excitables, debido a la ausencia de los canales necesarios, y como estn tan aislados no se produce escape de corriente a travs de la membrana. Siu embargo, como tienen las propiedades adecuadas de un cable elctrico, las corrientes asociadas con el potencial de accin se diseminan eficazmente y alcauzan el ndulo prximo; es una conduccin a saltos de ndulo en ndulo. El resultado de la mielinizacin trae consigo 2 ventajas: mayor rapidez en la conduccin y ahorro de energametablica,porque la excitacin activa se liinitaa las pequeas zonas de los ndulos de Ranvier.

no inactivo Rpido

Abierto

Inactivo
Fuente: Alhert B et al: Molecinlar Kiology of the Cell. New Yorli and Londoii: Garland Puhlialiing Iiic., 1983. Fig. 64.3. Transronformaein dc los eanales de Na* regulablcs por voltaje. Los canales de Na' regulnbles por voltaje tienen, por lo nienos, 3 cstados coiihrniacioriales diferentes. Enla ilustracin se representan esay conformaciones y su capacidad funcional para el trasiego de Na*.

'ikasmisin qumica del impulso nervioso

Cuando el impulso nervioso llega al final de la fibra, no ha servido de nada esta propagacin, si la seal se queda ah; lo que ocurre en realidad es que -aunque en la mayora de las veces no hay continuidad fsica con el eslabn siguiente- la seal pasa de aleuna manera a otra clula.," va sea del msculo csaueltico o del involuntario. a otra fibra nerviosa, auna glndula secretora e incluso directamente al cuerpo celular de otra neurona. Esta unin funcionaltiene su base estructural, la cual recibe el nombre de sinapsis.
L,

La ms conocida y estudiada es la del terminal de una neurona motora con la fibra n~uscular, y por tauto es la que nos sirve para detallar las caractersticas del modelo general. Posteriormente trataremos algunas variantes particulares y eii el epgrafe sipuienteconcentraremosnuestra atencinenotras sustanWasneurotrasmisoras,distintas de la acetilcolina, que es la que opera en la sinapsis neuromuscular (captulo 66). En trminos generales, entre la terminacin pre y postsinptica hay un espacio que hace necesaria la intervencin de un mediador qumico. Existen iustancias excepcionales en las cuales la separacin es slo de 2 nm y la seal pasa elctricamente. El neurotrasmisor qumico es liberado desde el terminal presinptico por un proceso de exocitosis, provocado por la entrada del Ca"'. La exocitosis parece quc involiicra a una protena: la sinapsina 1, de 75 000 D, que es sustrato de quinasa de

protenas, dependiente de AMPc. La activacin de la sinapsis promueve la fusin de la vescula a la membrana. El neurotrarmisor difunde por el espacio intersinpticoy llega al terminal postsinptico. All se une a receptores especficos, que son protenas del tipo de los canales abiertos por ligandos. Estos cambios de permeabilidad desencadenan el impulso nervioso, pero la trasmisin cesa rpidamente por la elmiiacin del neurotrasmisor a travs de diferentes mecanismos, segn el caso de que se trate. Los pasos de la trasmisin sinptica se representan en la figura 64.4. Prdida por difusin desde la hendidura sinptica Liberacin dc 1d acetilcolina por exocitosis en la membrana presinptica
AA

Acetilcolinestarasa

l .

1 l

+ R uAR

(cerrados)

t , AR:"

(abierto)

Se abre el rceeptor al uiiirreic 2 molculas de acetilcolinn. Fig. 64.4. Esquema dc los procesos inveliierados cn In trasmisin siiiiptica rolinrgira. A (acelilcoh a ) ; R (receptor de acetiieoliiia en la niembraiia postsinpticn).
*:

cido actico +colina Las ventajas operacionales han sido las determinantes de que el estudio de las sinapsis se haya realizado desde 1950 en la unin neuromuscular. Ya en 1930 se supo que la acetilcolina era liberada al estimular un nervio motor y que esta sustancia provocaba, a su vez, la contraccin en la fibra muscular. En general, la acetilcolina y los neurotrasmisores se hallan colectados en las vesculas sinptica~, situadas en el extremodel axn, cerca de la membrana presinptica. El potencial de accin se propaga a lo largo del axn, como hemos visto, por la apertura y el cierre de los canales de Na*. Cuando el impulso elctrico alcanza la terminacin presinptica del axn, determina la apertura de los canales de Ca" regulables por voltaje, lo cual permite la entrada de este ion. El aumento en la concentracin de Caz+da lugar a que las vesculas se fusionen con la membrana presinptica y viertan su contenido de acetilcolina en la hendidura sinptica. La cantidad de vesculas que descargan su contenidoaumenta ahmptameiitc en la medida en que se incrementa la concentracin de Caz' en el interior del terminal axnico. Tan solo una elevacin del 20 % en la concentracin del ion es capaz de duplicar la velocidad de Liberacin del neurotrasmisor. La duracin del potencial de accin que llega al extremo presinptico influye en el tiempo que los canales pernianecen abiertos al Caz+ y, por tanto, la liberacin del neurotrasmisor ser muy sensible en su intensidad a la magnitud de la seal. Ello tiene significacin y leconfiereuna caracterstica de ms diversidad ala tramisin sinptica, en comparacin con la trasmisin elctrica. Las vesculas que contienen acetilcolinamiden unos 40 nm de dimetro. Existen miles de ellas en un terminal tpico, de las cuales solamente unas 200 300 se rompen por exocitosis, en respuesta a un potencial de accin. Cada vescula que vierte su contenido en la hendidura sinptica provoca un pequeo cambio de voltaje en la clula postsinptica. La estimulacin del nervio, de ordinario,originala ruphuxdesnficientes vesculascomopara desplarizarlameml~rana de laclulamuscular ms all del umbral y se dispara un potencial de accin. En el terminal pmtsinptico la seal qumica se convierte en potencial de accin, mediante los canales regulables por ligandos. Estas protenas son las transductoras en toda sinapsis g son relativamente insensibles al potencial de membrana, contrario alos canales regulahles por voltaje. El que opera con la acetilcolina como ligando se conoce bien.
~ ~ C O Y ~ I U IU ~ U% U I[~~ C~ J ~ d

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1149

Receptor de la aeetilcolina El receptur de la acetilcolina es una glicoproteia con peso molecular de 250 000 D; su molcula es un pentmeru (@'y@ Corrnado por 4 cadenas polipeptdicas, una de las cuales se encuentra por par en cada molcula y es la que posee el sitio para la acetilcolina, de ah que el receptor se una a 2 acetilcolina por molcula. lgual que los canales que se abren por voltaje, en este tipo de canal regulable por ligando existen vanas conformacionet posibles y la presencia del ligando favorece una rpida transicin Iiacia el estado abierto. En la conformacin abierta el canal tiene una abertura en el extremo extracelular de 2 3 nm y se va estrechando hasta 0,65 nm de dimetro en el interior celular. Pueden pasar el Na*, el K+ o el Ca", ya que tienen poca especificidad entre los cationes, siempre que quepan en el canal. En realidad,a partir de la clulaen reposo transita poco K', pues el gradiente elctrico compensa al de concentracin, ya que estn en sentidos opuestos. El Na', sin embargo: es impulsado por ambos gradientes hacia el interior. Al Caz+ le sucede lo mismo, pero su concentracin extracelular es mucho ms baja que ladel Na'. En resumen, la apertura del canal del receptor de acetilcoliiia trae consigo una entrada significativa de cationes,principalmente Nai, lo que origina la despolarizaciii de la memlirana. El receptor, una vez que se combina a la acetilcolina, mantiene su canal abierto por un tiempo de 1ms. La acetilcolina es eliminada de 2 formas: por simple difusin y por hidrlisis catalizada por la enzima acetilcolinesterasa, la cual est fijada por un polipptido colagenoide a la lmina basal que existe entre el terminal presinptico del axn y la membrana de la clula muscular. Mucho han ayudado dconucinuentudelah.asmisiuqumica del impulsonervioso las preparaciones de sinaptosomas,obtenidas por homoge~zacin de cerebro o mdula espinal. La trituracin rompe los terminales nerviosos, cuyas membranas se sellan y da11 lugar a la formacin de unos organelos artificiales, los cuales se pueden aislar por centrifugacin diferencial. Con frecuencia,un tiaginento de la membrana postsinptica se adhiere al exterior del sinaptosoma. Estos artefactos mantienen las concentraciones normales de Na' y K', y conservan un potencial de 60 mV negativo al interior. A continuacin consideraremos importantes v.ariaciones funcionales que existen en otras sinapsis. Ms que de la diferencia en la naturaleza del neurotrasmisor, las caractersticas propias de distintas sinapsis dependen del receptor para ese neurotrasniisor. As, hay receptores cuyo canal se abre a iones negativos peqiieos (como el CI-)y su apertura determina el paso del ion al interior, bajo el impulso de su gradiente de concentt.acin, pero esto hace que el potencial se haga ms negativoaun en el interior que el potencial de reposo y, por tanto, dificultar la excitacin posterior de este terminal posttinptico. As que la trasmisin qumica de un potencial de accin, que sea transducido por este tipo de canal u receptor, trasmite un efecto de inhibicin a la clulapostsinptica. Este es el caso del receptor para el GABA. El hecho dequc lodeterminante mel meptor,puedesernis rlarameniedemostrado, cuando vemos que un mismo neurotrasmisor puede originar seales distintas. En Ia propia acetilcolina, cuyo receptor muscular hemos estudiado con algn detalle, su seal es de inhibicin en el msculo cardaco, purqne all su receptor es diferente. Otra variante que encontramos en diferentes sinapsis es el mecanismo mediante el cual se elimina el neurotrasmisor. Eii ocasiones, a falta de Iiidrolasas especficas -adems de la simple difusin- existen protenas transportadoras que se encargan de snstraer el compuesto hacia el terminal presinptico o hacia clulas gliales de los alrededores. Finalmente, otra variacin significativa en la trasmisin neuroqumica es la de los neurutrasmisores que actiian a travs de segundos mensajeros intracelulares, al

igual que las hormonas. Tenemos el conocido ejemplo del AMPc, generado por la a&nilciclasa (receptor de adrenalina, dopamina, etc.), que activa una protena quinasa, la cual en determinadas clulas nerviosas fosforila protenas que son canales de iones y cuyasfonnasfosioriiada y desfosforiladacorrespondena los estados abiertos y cerrados del canal.

Ya hemos visto detalladamente cmo funciona este neurotrasmisor a nivel molecular, al servirnos de la sinapsis neuromuscular como modelo ms conocido:

Existen 2 categoras de receptores para la acetilcolina, aparte de lo que henios analizado en cnanto al efecto excitador o inhibidor de los receptores del msculo esqueltico y del corazn,respectivamente. Estas 2 categoras se distinguen porque en nn caso la nicotina reproduce los efectos de la acetilcolina (msculo esqueltico y ganglios del sistema autnomo) y en los otros es la muscarina (en los msculos lisos y el cerebro). Se denominan sinapsis nicotnicas y muscarnicas. La inyeccin de receptores nicotnicos origina la foimacin de anticuerpos contra esta protena, que reaccionan contra los receptores propios del animal de eapeiinientacin. Lasc'onsecnenciassonextraordiiiariamentesemcjantes ala observado en la miastenia gravis (captulo 76). La acetilcolina se sintetiza en una reaccin catalizada por la enzima colina acetiltransferasa (CAT), abundante en los sinaptosomas de zonas en las que existe neurotrasmisin colinrgca: Colina + Acetil-COA

--

Acetilcolina + CoA-SH

La acetilcolinesterasa (enzima que la degrada) se ha aislado de mltiples fuentes. Se trata de una mezcla de olig~nerns, principalmente un tetrinero de snhunidades idnticas,que es una glicoprotenacon un peso mulecular de 75 000 D. Cada subonidad posee un ccntrnactivo, capaz de transformar 16 molcula^ del sustrato por milisepndo, a su velocidad mxima. El centro cataltico de la enziina se une al nitrgeno cuaternario de la acetilcolina; es un centro aninico y en l inter\ienen residuos de Iiistidina y serina; se asenieja a los de algunas proteaias. Primero se forma un enlace covalente entre el grupo hidroxilo de la serina y el carbn electroflico del grupo carbonilico del sustrato. La colina es liberada y queda acetilado el sitio activo, el cual se hidroliza y se descarga el ion acetato. Compuestos como la prostiginina y la fisostigmina, capaces de unirse al sitio cataltico, es decir, compuestos cuaternarios, son inhibidores competitivosde la enzima. Estos conocimientos han permitido la bsqueda de compuestos que contrarresten la inhibicin: un grupo fuertemente catinicoy auna suficientedistancia intramolecular de un grupo nucleoflico. De los varios compuestos preparados, el metilioduro de 2-piridina aldoxina ha probado ser el ms efectivo.

N
1

CH, Metilioiluro dc 2- piridiiia aldoxinil

Se ha utilizado in vivocomo antdoto en los envenenamientos por fluorofosfato, presente en insecticidas y herbicidas de uso agrcola. La acetilcolina se halla en las neuronas motoras de la mdula espina1 y en el ncleo de los nervios craneales motores, en relacibn con sil funcin trasmisora en las uniones nenromusculares, pero tambin se encuentra en las vas intrnsecas del SNC: ganglios basales y proyecciones ascendentes al hipocampo y a la corteza cerebral. Las drogas que bloquean los receptores para la acetilcolina afectan funciones cognoscitivas y de la memoria.

Las catecolaminas que actan como ueurotrasmisoras en el SNC son 3: la noradrenalina, la adrenaiina y la dopamina El sistema adrenrgico est menos distribuido que los otros 2 y est limitado a grupos celulares del romboencfalo, que se proyectan a otras estructuras del tallo denso de incrvacibnadrenalnica enceflicoy al hipotlamo. Un grupo particular~nente en ncleos del tracto solitariodebe desempear unafuncibn importante en el control de la presin arterial. Idanoradrenalina se encuentra en casi todas las reas del cerebro y de la mdula espinal. El cuerpo estriado es inervado por un sistema que contiene dopamina y qne se origina en un grupo grande de clulas dopaminrgicas de la parte compacta de la sustancia nigra. Un grupo de fibras dopaminrgicas inervan el ncleo amigdaloide y otras reas de la corteza. Estos neurotrasmisores actan mediante receptores relacionados con la adenil ciclasa y por tanto con el AMPc, como segundo mensajero, en este caso de una seal nerviosa. La fnncibn de las catecolaminas en el cerebro sigue siendo enigmtica y se ha especulado en cuanto a su relacin con determinadas enfermedades neurolgicas y psiquitricas. En nuestro pas se han realizado trasplantes de mdula suprarrenal a zonas del encfalo y se ha conseguido obtener una notable mejora en casos de enfermedad de Parkinson. Este trasplante, que prende con relativa facilidad, libera catecolaminas en la zona de implantacin y se refiere que ello trae consigo la mejora clnica de los pacientes. Las funciones de estos neurotrasmisnres en el sistema nervioso autbnomo pueden revisarse en cualquier texto de Fisiologa.

Se forma por hidroxilacibn y descarboxilacin del aminocido triptbfano. El paso limitante en su sntesis es el catalizado oor la hidroxilasadel tri~tfano.lacual se halla en las neuronas, unida al retculo endoplasmtico y al aparato de Golgi. La serotonina que est libre en el citoplasma es oxidada por la enzima monoamino oxidasa, de la membrana externa mitocondrial. E1 aldehido que se obtiene de esta reaccin se oxida posteriormente a cido hidroxi-indolactico y como tal aparece en la orina. La semimina opera en diversas regiones del SNC. Del ncleo dorsal de la lnea media del tallo central se proyectan fihras (especialmente densas en serotonina) a mochos sitios del cerebro anterior, entre ellos el hipotlamo, el ganglio basal y el haz medio. Tambin descienden fibras que se proyectan a las astas ventral y dorsal de la mdula espinal. stas parecen estar relacionadas con el control de la sensibilidad al dolor y podran cstar involucradas, de lleno, en la accibn analgsica de la morfina y otros opiceos. Aunque la funcin de la5 fibras del cerebro anterior no est del todo clara, algonas evidencias siigieren que este sistema ocupa un lugar determinante en el control del

ciclo sueo-vigilia.Otros indicios tamhin asocian este mediador con los mecanismos de control de la temperatura y la conducta agresiva.

De los neurotrasmisores inhihitnrios, ste es el mejor caracteriiado. Es el producto de la reaccin catalizada por la 1,-glutmicodescarboxilasa:

COOH CH CH,- CH; C O O H > COZ+ CH,- CH; CAZCOI-1

I

N",
cido glutmico

I N", cido yaminobutrico

A propsito de las variaciones en el modelo general de las sinapsis, se trat el mecanismo por el cual el receptor de GABA produce la hiperpolarizacin, al aumentar la permeabilidad al CI'. El GABA es tamhin el ejemplo de un neurotrasmisor que se retira del espacio postsinptico mediante un mecanismo de transporte propio; posteriormente una transaminasa especfica cataliza su reaccin con el cido alfa cetogliitrico y rinde glutmico y semialdebdo succnico, el cual al oxidarse se incorpora al ciclo de Krebs como cido succnico. De la distribucin de las fibras en que participa este neurotrasmisor inhibitorio, slo diremos que el GABA puede intervenir en casi un tercio de todas las sinapsis del cerebro de mamferos. La significacin funcional de estas sinapsis inliil~itorias se evidenciar cuando tratemos las bases generales de la funcin superior del SNC, al final del captulo.

La glicina es el trasmisor inhibitorio en la mdula espina1y en gran parte del tallo cerebral. En el terminal presinptico existe un sistema de transporte para la glicina. La inhibicin se obtiene al igual que con el GABA, por aumento de la permeabilidad al Ck. La eshicnina produce sus efectns, entre ellos convulsiones, porque se une al receptor de la glicina. La toxina del veneno de las abejas, la apamina, hace lo mismo.

El cido glutmico y el asprtico son, cuantitativamente, los neurotrasmisores de excitacin m& importantes en el cerebro. Los que hemos relacionado con anterioridad aparecen en una fraccin pequea de la9 sinapsis cerebrales. El glutmico administrado localmente provoca trasmisin de impulsos en CI cuerpo estriado, el cerebelo, el hipotlamo, la corteza cerebral y el hipocampo.

Wrtnalmente, todas las hormonas peptidiois tambin existen en diferentesregiones del SNC. Otros pptidos, adems, se han identificado como "sospechosos" de ser neurotrasmisores. En el cuadro 64.1 relacionamos 32 pptidos, que se han encontrado en neuronas y terminales nerviososdel SNC en mamferos.

Cuadro 64.1.

Neuropptidos Pptidos opioides Dinofia Beta-endofina Met-encefalina Leu-encefalina Kiotofii Liberadores hormonales hipotalamicos Factor liberador de la hormona luteieizante(LHRF) Sumatastalina Factor liberador de tirotropina CBHRF) Pptidos diversw Bombesina Brarliquinllia Camosina Neuropptido Y Neumtensina Proctolina

Pptidos hiposarios Corticotropioa(ACTI-n Hormona del crecimiento (GH) Lipotmpina Hunnona esmulante de los alfamelanocitos(alfa-MSH) Ohitona Vasopresina Hormonas circulantes Angiotensina Caicitunina Glucagn Insuiina Hormonas del intestino
Polipptidopancdticoa~~o

Colecistoquinina (CCK) GaFtrina Moolina Polipptidopancretico Seuetina SustanOaP Polipptidovasoactivo intestinal (VIP)

Parece claro que cada uno de los neuropptidos se utiliza en numerosas, aunque relativamente pequeas, rea5 de clulas diseminadas en todo el cerebro. La carnosllia (beta-alanilliistidina) y la amerina (beta-alanil-NJ-metil-histidina) fueron encontradas por primera vez en el msculo, pero estn presentes en el cerebro, en una concentracin que se acerca a los 200 y 150 mg/l00 g de tejido, respectivamente. Tngase en cuenta que la concentracin de cido glutmico es de 40 mg/g de tejido. Los factores liberadores de las hormonas de la anterohipfisis estn involucrados; as, por ejemplo, se ha podido comprobar que el factor liberador de tirotropina, el cual se halla ampliamente distribuido en el SNC, potencializa la accin de la acetilcolina en algiiuas neurooas de la corteza y, adems, antagoniza los efectos de los barbitricos. En elcerebro de ratas entrenadas para evitar la oscuridad,se acunmlaun pptido de 15 residuos de aminocidos, el cual se denomina escotofobina; se afirma que su administracin a ratas provoca una respuesta de esas caractersticas, aunque no hayan sido entrenadas. En esta breve seleccin no podemos omitir los pptidos opioides (endornas). Se les conoce as porque se unen a los mismos receptores a los que se ligan los opiceos (morfitia, naloxona, etc.) y comparten algunas de las propiedades farmacolgicas de la nioifina. Los que se descubrieron primero fueron 2 polipptidos: Tir-Gli-Gli-Feu-Met Encefalina-metionina Tir-Gli-Gli-Fen-Leu Encefalina-leucina

Las encefalinas se distribuyen por todo el encfalo, pero la mayor capacidad de fijacin est en los terminales nerviosos del cerebro medio y del tlamo, donde se renen los haces conductores de la sensacin dolorosa; tambin en la amgdala, que como se sabe tiene que ver con la sensacin de bienestar. Al igual que los upiceos, las encefalinas inhiben la &\<dad neurona1 porque disminuyen la permeabilidad al Na', presumiblemente actuando de manera directa en los canales de Na', regulahles por

ligando. Despus del descubrimiento de estos 2 pentapptidos, se ha descrito una enorme variedad de endorfmas naturales. Las secuencias aminoacdicas de las encefalinas se encuentran presentes en pptidos ms largos, extrados de la Iupfisis. Posteriormente los pptidos mayores, las endofinas, tambin se detectaron en clulas nerviosas. La secuencia de la encefalina-met se halla en la protena beta-lipotropina, de 91 aminocidos, presente en la adenohipfisis. Los residuos del 61 al 91 de esta proteina corresponden a la beta-endorfina y del 61 al 77, a la gamma-endorfina, que han sido halladas en el hipotlamo y la neurohipfisis. Estas endofinas poseen una marcada actividad; ellas son de 12 a 100 veces ms activas que las encefalinas. Se ha podido establecer que mientras las endorfmas son el resultado de laprotelisis de la beta-lipotropina, las encefalinas se sintetizan por otra va. Una proencefalina (con un peso molecular de 40 000 a 50 000 DI, que contiene las secuencias de las &&liias, se ha aislado de las glndulas suprarr&ales. Los pptidos intestinales gastrina, colecistoquinina y otros, tambin se han localizado en sectores del SNC. En resumen, se sabe que la administracin directa de pequeas cantidades de los diversos neuropptidos en el cerebro desencadena una gran variedad de respuestas, entre ellas efecto analgsico (endoiiinas), actividad locomotora (sustancia P), conducta sexual femenina, mejor retencin de tareas aprendidas (vasopresina)y los otros ejemplos que hemos discutido antes. Hastatanto nose identifiquen los receptores especcos paraestos neur~~asniisores, no se tendr una visin clara de la funcin que desempea cada uno de ellos en la trasmisin sinptica en el SNC, o en su modulacin.

Actividad nerviosa superior

Hemos estudiado la base qumica de la trasmisin del impulso nervioso y de las conexiones sinpticas. La manera en que se procesan los millones de seales e interconexiones, de modo que el organismo recoja todo ese caudal de estmulos y lo organice, enlo que resulta una informacin coherente del mundo exterior y del medio interno, ante la cual reacciona con movimiento, pensamientos, emocin, segn el caso, y de ordinario con los 3 tipos de respuestas simultneamente, es un problema de otra envergadura y quizs el problema ms complejo que se plantear jams: el mecanismo ntimo del funcionamiento de la mente humana. La visin simplificada de un axn que trasmite su seal a una fibra muscular o a una terminacin dendntica, que nos sirvi para estudiar la bioqumica de la sinapsis, debe ampliarse ahora. El cuerpo de la neurona motora de la mdula espinal, e igual sucede con los millones de neurona en el propio cerehro, se encuentra casi completamente cubierto por sinapsis que traen informacin de miles de otras vas. En esos miles de sinapsis unas sern excitatorias,mientras que otras sern inhihitorias. Varias de ellai, contiguas, sesumarn espacialmente. La sumatoria temporal tanibin es posible. La seal eferente que enviar o no esa neurona, en un momento dado,ser el resultado de la sumatoria de todo el cmulo de senales excitatorias einhibitorias que estn arribando a ella. Ese potencial resultante en la membrana del cuerpo neurona1 es el denominado gran potencial postsinSpticn(GPP). Su magnitud determina la frecuencia con que esa neurona enviar potenciales de accin. Ello se logra mediante canales especiales,que se localizau en la base del axn. Esta codificacin del GPP en diversas frecuencias requiere la participacin de 3 canales diferentes para el K' y uno para el Caz'. Estos canales hacen que la frecuencia con que la neurona se dispare sea proporcional al estmulo, el cual llega a ella en h r m a de GPP. No siempre las tenninaciones dendnticas comunican en el sentido aferente. Exkten no pocas sinapsis en las cuales las dendritas conducen estmulos a otra clula, sobre todo en neuronas que estn situadas cerca, dentro deunos milmetrosde distancia o menos. Otro elemento a tener en cuenta es que la distribucin de los canales de iones se moditica por distintos factores. Por ejemplo, la estimulacin elctrica o la denenacin producen cambios radicales en la distribucin de la proteina receptora de acetilcolina en la clula muscnlar.

Bncoaijufmniicn esp~iailimda

1155

La medicacin de la protena de los canales est5 asociada a la memoria imlediata. Esto se estableci en un caracol marino que retiraba su anIena,si se le tocaba el sifu. Cuandn se toca el sifn repetidamente, el animal se hahita: ignora el estimulo y apenas retira la antciia. Se ha descubierto quela habituacin se dehe a modificaciones en la protena de los canales de CaZ', de modo que la eutrada del ion se reduce y se liberan menos neurotrasmisores de las vesculas presinpticas. Por otra parte, el sistema de conexiones nerviosas es programado a grnssnmodo. El sistema se va ajustando progresivamente: la estimulaciiipuede determinar si una sinapsis se consolida o se elimina. De esta forma, al excitar la neurona, los estmulos externos influyen en el desarrollo del patro de coiiexiones nerviosas. Incluso, las neuronas que no desarrollan conexiones, mueren. E1 mecanismo se desconoce, pero se especula que en la clula diana existe11 molculas, las cuales llegan por va axonal al cuerpo celular de la neurona emisora y aseguran as su supervivencia. De no establecerse la conexin, estas molculas no llegarn y la clula no sobrevivir mas all de cierto tiempo. Estudios hechos en cerebros intactos han arrojado luz sohre lo siguiente: las neurona que se estimulan sincrnicamente tienden a mantener y reforzar sus mutuas sinapsis en la clula postsinptica que comparten. Aqullas que no se estimulan sincrnicamente tienden a competir, hasta que la neurona postsinptica es controlada por una sola de ellas. Por tanto, el patrn de las coiiexiones que se desarrolla en el cerebro refleja, de algn modo, las asociaciones regulares entre los eventos del muudo exterior. Estos hallazgos, que comienzan a sugerir de qu forma la experieucia exterior imprime su Iiuella material eu lai estructuras y conexiones del sistema nervioso, carecen iirtualmente de algn conocimientoacerca de sus mecanismos moleculares. Quizs la solucin futura de eshs incgnitas bioquimicas sea el paso decisivo, todava por dar, en ellargo camino haciala comprensin delas fuiicioues superiores del SNC. En cuanto a las emociones, si bien se ignoran los mecanismos, se ha venido recopilando informacin que relaciona determinados ueurotrasmisores con diferentes estados de nimo. Estos datos provienen tanto de experimentos con aniniales, como de los estados afectivos anormales en seres humanos; aqunos bastar un ejemplo: En su famoso monlogo, el melanclico Hamlet se explica que el ser humano soporte el infortunio, por el temor al desconocido sueo de la muerte. "Quin querra llevar tan duras cargas, gemir y sudar hajo el peso de una vida afanosa, si no fuera por el temor de un algo, despus de la muerte? Fausto, sin embargo, se,justificaante R'efistfeles por su irresolocibn para poner fin a sus das, en los atractivos de la vida: "...maldigo esa fascinacin que se apodera del alma y la extrava y la impele a continuar viviendo en estasombra averoa...Maldito el jugo balsmico del racimo, el amor y sus hechizos, y la esperanza, y la fe, y, sobre todo, la paciencia!" Recientemente, al analizar los casos extrenios de suicidio, investigadores suizos informaron que las personas con estados depresivos, que presentahan niveles de serotoniua inusualmente bajos, tenan 10 veces ms probabilidades de suicidarse que las que presentaban niveles elevados. Quin les iba a decir a Shakespeare y a Goetheque la diferencia entre un suicida y un estoico estriba quizs en la mayor o menor cantidad de unas cuanta molculasde 5-hidroxitriptrinuna?

Resumen
El tejido nervioso posee una composicin qumica caracterizada por su alto mntenido lipdico y por sus variaciones con la edad. Dos protenas especficas se han haiiado en este tejido: la S-100 en las $as y la 14-3-2 en las neuronas. El alto contenido en aminocidos libres, especialmente los aminocidos dicarboxiims y sus derivados, es otra peculiaridad del tejido nemosn.

El metabolismo es aerobio fundamentalmente v utiliza la elucosa como -principal combustible. En el metabolismo de los aminocidos existen vas relacionadas con las funciones especficasde las neuronas, sobre todo para la sntesis de neurotrasmisores como el GABA, la serotonina y las catecolaminas. El impulso nervioso se convierte en potencial de accin, susceptible de propagarse por toda la fibra, en virtud de protenas especializadas que responden a pequeos cambios de voltaje, abriendo canales a ciertos iones, comnmente el Na', y de esta forma se anula o invierte el potencial de reposo. La trasmisin qumica se logra por protenas similares que no responden a cambios de voltaje, sino a la unin a ellas de sus ligandos especficos. Los Ligandos, liberados en el terminal presinptico, son los neurotrasmisores; existen decenas de ellos. La acetilcolina, adrenalina, dopamina, serotonina y quizs algunos neuropptidos son los principaies neurotrasmisores excitatorios. El GABA y la &&a son, sin dudas, los neurotrasmisores inhibitorios ms importantes. Las funciones superiores del SNC constiiuyen, probablemente, el problema cientfico de ms alta complejidad. En el procesamiento de la informacin, la integracin a travs de interconexiones neuronales es un hecho establecido. Los cuerpos de las neuronas estn cubiertos por d e s de conexioues sinpticas, de modo que si una neurona dispara un potencial de accin a lo largo de su axn, es el resultado de la integracin de cientos de impulsos excitatorios e inhibitorios que arriban a sta. Incluso, la frecuencia de esos potenciales ser proporcional a la magnitud del efecto sumatono de las seales que llegan a eUa y cuyo multado es el Llamado gran potencial postsinptico. De otra parte, las ramif~caciones dendrticas, en ocasiones, tambin cnmunican haeia neuronas vecinas. Todos estos son elementos que dan idea de las bases del procesamiento superior de la informacin. La experiencia exterior, a travs de la esOmulacin repetida o de su ausencia, modifica las protenas receptoras de los neurotrasmisores y puede, adems, reforzar o eliminar conexiones. Las sinapsis en una neurona, provenientes de diferentesvas, pueden comper entre ellas o reforzarse, segn sus estnulos se asocien en el tiempo o no. En consecuencia, el plano de los circuitos ueuronales se estructura, al menos parcialmente, en relacin con la experiencia exterior, aunque se ignoran los determinantes bioqnmicos de esta dinmica. En la esfera afectiva s se viene descifrando la relacin entre las distintas emociones y estados de nimo, y los diferentes ueurotrssmisores,fund~mentalmente por el estudio de las psicopatas afectivas.

Ejercicios
1. Proporcione un dato bioqomico que explique la eficiente capacidad glucoltica del cerebro. 2. Exprese la significacinde la alta actividad de la L glutmico descarboxilasaen el tejido nervioso. 3. ,Atravs de qu va se elimina el NH, cerebral? 4. Explique la funcin de los canales de Na+regulables por voltaje en la generacin de un potencial de accin. 5. Cite 3 caractersticasque expresen lo constante en los neurotrasniisores. 6. Cite 3 caractersticas que ilustren lo variable de los neurotrasmisores. 7. Cul es el mecanismo que hace que los neurotrasmisoresGABA y glicina comuniquen seales inhibitnrias? 8. Mencione 2 hechos qne evidencien la influencia que ejerce la interaccin con el medio exterior sobre las estructuras y conexiones nerviosas.

El ojo es un rgano altaniente especializado. A diferencia de otros extemceptores, los receptores de la visin se localizan, desde el punto de vista anatmico, junto a otras estruchiras y conforman un rgano par: los ojos. E1 inters bioqumicose centra, por unaparte,en la composicin qumica y en el metabolismo peculiar de sus diferentes estructuras, y por otra, en el fenmeno de la fotoqumica de la visin. En esta funcibn nerviosa diferenciadase manif~estan reacciones qumicas muy especiales, que se hallan en el centro de la conversin de un estmulo luminoso en un impulso nervioso, susceptible de ser iiitegrado en la sensacihn visual. Los aspectos que acahamos de mencionar sern objeto de atencin en este captulo, es decir, la composicin qumica de las principales estructuras del ojo: la crnea, el cristalino, el humor acuoso, el humor vtreo y la retina, as como los fundamentos bioqumicos de la funcin del ojo humano, tal y como se han podido establecer hasta el momento.

Crnea
La crnea se conipone de varias capas; su constitucin es predominantemente de protena colgena. En ella el estroma es transparente, ya que las fibras de colgeno son finas y estn distribuidas de manera uniforme. Por el contrario, las fibrillas de la esclertica, que son mayores, varan en dimetro y no se encuentran dispuestas en una forma regular, lo cual le confiere opacidad. Entre las fibras se disponen las molculas de los glicosamiiioglicanos, principalmente el queratosulfato 1 (captulos 10 y 68). La unidad repetitiva del queratosulfato es un disacridoformadopor galactosa y N-acetilglucosamha sulfatada. En el tipo 1, el heteropolisacrido se une a la protena a travs de luna asparagina ligada a la N-acetilglucosamina. El ordenamiento en la disposicin de las fibrillas del estroma se mantiene por la fuerza expansiva de los glicosaminoglicanos diseminados entre ellas. La cara interna de la crnea, una capa simple de clulas, posee un dispositivo de transporte activo de agua del estroma hacia el exterior. La manera en que esta bomba acta no se conoce del todo, pero parece que el ion bicarbonato esta involocrado en el flujo. El epitelio que cubre la superficie externa es inultiple, impermeable y constituye una barrera a la entrada de lgrimas en la crnea. Su abundante inervacin parece ser

fundamentalmente colinrgica, por la alta actividad de acetilcolincsterasa y colina acetiltransferasa que posee. La caraclerstica ms sobresaliente del metabolismo en la crnea es que aproximadamente el S0 % de la glucosa sigue la va de oxidacin directa. I51 cousumo de O, es alto, de manera que el inetabolismo corneal es bastante activo. El humor acuoso es la fuente quesuniinistra los nutrientes en general, pero el oxgeno, adems, puede provenir directamente del aire, dado que por su solubilidad eu los lpidos es capaz de atravesar el epitelio o capa externa de la crnea.

El cristalino est constituido por un epitelio simple, dispuesto en la superficie anterior, cuyas clulas se han diferenciado. En la medida en que el rgano se va desarrollando, las clulas fibrosas ms antiguas se desplazan hacia el interior; es as como se forma el ncleo del cristalino del adulto. El cristalino carece de irrigacin sangunea y de inervacin. Se nutre por difusin a partir del humor acuoso y se halla envuelto en una cpsulaconstituida por colgeno, particularmente rico en residuos de hidroxilisina glicosilada. Del cristalino se han aislado3 protenas solubles en agua: cristalina alfa, beta y gamma, que constituyen el 90 % del total de protenas; son exclusivasde este tejido y han sido bien caracterizadas. La actina (captulo 66) constituye del 1al 2 % de las protenas.se supone que participe en el proceso de acomodacin,en virtud del cual la curvatura del cristalino se modifica para enfocar los objetos cercanos. El nietabolismo del cristalino es ms bien reducido. Tiene lugar la gluclisis, as como la va oxidativa delhsfogluconato. En este tejido existen sistemm de transporte activo de aminocidos, glucosa y algunos iones. En las zonas superficiales del cristalino se halla el ATP, mientras que en la parte central prevalece la fosfocreatina y relativamente poco ATP, lo cual es comprensible dado que el ncleo est distante de la glucosa y del oxgeno provenientes del humor acuoso, y en consecuencia requiere de una forma "dmacenable" de compuesto rico en s necesario en la parte superficial. energa, como lo es la fosfocreatina. Esto no e El cristalino es rico especialmenteen agentes reductores. Contiene un aproximado de 30 mg de cido ascrbico por 100 g de tejido, casi 20 veces la concentracin plasmtica. Es tambin una fuente abundante de glutatin (600 nigg' tejido). En relacin con lo anterior, se ha observado que en las prutenz del cristalino se manifiesta un incremento en la oxidacin de residuos de cistena y metionina, asociado a las cataratas del anciano. La oxidacin de la metionina por medio del perxido de hidrgeno conduce a la formacin del sulfxido y la sulfona correspondientes:
COOH
l

COOH
l

COOH
l

H,hLC-H
I

H,N-C-H
I

H,N-C-H
l

y?.
S - CH3

CH2
1 l

CH,
1

CHZ

CH: O=S=O
l l

S=O
l

CHj

CH,

Metionina

Sulfxido

Sulfona

Las cataratas son la expresin fundamentaldetrastornos hioqunicos del cristalino. En l se acumulan fructosa y sorhitol, si existe diabetes mellitus; la concentracin de ATPdisminuye, as como la sntesis de protenas. Es de suponer que esto responde al compromiso del metabolismo glucdico, propio de esta enfermedad.

En la galactosemia (captulo 76) se acumula dulcitol igalactitol), el producto de la reduccin del monosacrido galactosa. La concentracin elevada de dulcitol (en la galactosemia) y de sorbitol (en la diabetes mellitus) incrementa la osniolaridad del cristalino 5 esto conduce a la distorsin de qu estructura fibrosa.

Humor acuoso
El humor acnoso llena la cmara antcrior del oju,mantiene la tensin intraocnlar necesaria para la visin y nutre la crnea y el cristalino, que son avasculares. lil volumen en el ser humano es de unos 0,25 mL y la concentracin de protenas es ha,ja (alrededor de 0,05 g.dJ;'). La concentracin de los principales iones no difiere marcadamente de la del plasma. El pH a tmibin similar, como se puede observar en la tabla 65.1.
mbla 65.1. Algunos datos comparativos dc la compo,$icin del pla.s~na v . el Itiinior

acuoso (lassustancias difu.si/~lesse expresan en inEq/L) pH Humor acuoao

Plamia
7,4

Na'
140

K'
47 4,s

Ca"
3,s 5,0

CI 108

IW,C - Protenas
28 28

SOnig/dL
6,s g/dL

7,35-7,45 144

103

Humor vtreo
La cmara posterior del ojo est llena de humor vtreo, el cual contiene un gel (cuerpo vhw) de cido hialurnico, dentro de una a n n w h de colgeno. El intercambio de solutos tiene lugar con la sangre a travs de la retina, aunque existe tambin nn intercambio ms limitado con el humor acuoso.

Retina
La retina es la parte fotosensible del ojo y es. adems, un tejido singiilar desde el punto de vista metablico: el consumo ms alto de O, por peso seco de te,jido cn todo el cuerpo es el que tiene lugar en la retina. La gluclisis aerobia y la va de oxidacin directa de la glucosa son muy xtivas.De hecho, la gliic6lisis parcce ser esencial para la funcin de las clidai retinimas. La adminish.acin skttmica de ioduacetato (inhihidor de la gluclisis) ejerce un efecto txico especfico en la retina. Existen 2 tipos de cliilas fotorreceptoras en la retina humana: los conos y los bastones. Los conos son funcionales a la luz intensa y brillante, mientras que los bastones lo son a la luz tenue y a la penumbra. Animales como la lechuza poseen solamente receptores tipo bastones en su retina. En la especie humana, la mayor concentracin de conos se encuentra en la porcin central de la retina. mientras que en la zona perifrica predominan los bastones. Las 9 capas de la retina son transparentes; el epitelio pigmentado subyacente le confiere un fondo oscuro.

Fotoqunica de la visin
La esencia de este fenmeno es la transformacin de la luz que llega a la retina en otra forma de energa. Una funcin clave en este proceso la desempea una protena

termolbil: la rodopsina, con un peso molecular de 35 x 10"D. Esta protena tiene un amplio rango de absorcin en la regin visible del espectro, con un mximo a 500 nm, lo que concuerda con los estimados de la curva de sensibilidad de la visin humana en la luz brillante. Bajo la accin de la luz,la rodopsina se disocia en la protenaopsina y retina1,un comuuesto carotenoidc.,aiie es el aldelido dc la vitamina A. El retinal, con mltiples dobles enlaces, puede adoptar diferentes configuraciones. El ismero todo-trans y el 11-cisson pertinentes en esta discusin.

11- cis relindl

( 1 1 - cis) rodopsina,,,, 7

H+

Metarrodopsina,,, 1 1

NRO cida

,,,,

pH > 7,7

pH < 5,5
t

isomerasa

NRO 365 Alcalina

Trans - retinal + opsiiiit

Fig. h5.1. Etapas cn la riariiii de la rodoosina. Loa iiihiidicea indican CI pico dc nijxima absorcin dc luz por cada interincdiario. El primero, prclurnirrodopsinn o balliorndopsina,, contiene traria-rdinal. N R O retinilopsina, er el internirdiario en el &al el enlace retinaiopsina es una Ibase de Schiff, canhia de d o r ron variaciones del pH v se Iiidrolizn espontneamente en upsina y franr-retirial.

La rodopsina es el coniplejo formado por la proteha opsina, iinida covalentemente al 11-cis retinol. Cuando la luz impresiona en la retina, el complejo se rompe y rinde opsina y t r a s retinal, el cual es incapaz de mantenerse unido a la proteina. Este ltimo, por ser el compuesto que responde a la luz, con un cambio en la disposicin espacial de sus tomos (cis-trans), es el grupo absorbente de luz, denominado cromforo. Las transformaciones que experimenta la rodopsina tras la absorcin de un Iiaz luminoso se han podido estudiar por observaciones a baja temperatura. Se describen varios intermediarios de la rodopsina, con diferentes mximos de absorcin, antes de que se fornien los 2 productos de su disociacin; cste es un proceso endergnico. El fotn absorbido suministra la energa necesaria. En los 20 picosegundos posteriores a la absorcin del fotn se forma prel~~miiiorrodopsina, el primer intermediario, por isomerizacin de un doble enlace. Los pasos que le siguen tienen lugar espontneamente (Fig. 65.1). La diferencia entre opsina g rodopsina no es nicamente la presencia del cis retinol en la seguuda. Existen evidencias de que la conformacin de la protena es diferente cuando est libre, que cuando est furniando el iomple,jo. La rodopsina es una protena intrnseca de la membrana de los discos del segmento externo de los bastones (Fig. 65.2). Ella representa ms de la mitad del total de las protenas presentes en una columna de 1000 a 2 000 discos apilados, a lo largo del eje mavor del segmento externo. Cada disco es un saco cerrado en miuiatura. Las molculas de rodopsina se localizan en la membrana,perpendicularmenteal vector de la luz incidente. Los lpidos son, en su mayora, fosfoglicridos,con un alto contenido de cidos grasos insaturados. I,a velocidad y magnitud del cambio de potencial e intensidad de la corriente se determinan por el nmero de fotones absorbidos por bastn. Alrededor de 30fotones por bastn provocan una respuesta semimxima y alrededor de 100 produciran la respuesta mxima. Est claro que estos fenmenos elctricos son ocasionados por el cambio conformacional de la rodopsina activada.
u

En los bastones la transduccin del estmulo luminoso en un impulso nervioso requiere la participacin de 7 protenas principales:
l. Rodopsina. 2. Protena del canal activado por Na'. 3. T m d u c i n s 4. Fosfodiesteraia del GMPc. 5. Guanil ciclasa. 6. Recuperina. 7. Arrcslina.

TransduMn de la seal desde la rodopsina hasta la membrana plasmtica

La membrana plasmtica que rodea al segmento externo, donde Se encuentran los discos,contiene una protena que constituye un canal de Na' activado por GMPc. En la penumbra estos Anales de sodio se mantienen abiertos por la unin a ellos de molculas de ese nucletido, asque el estado de polarizacin de la membrana tiene una relacin directa con la concentracin de GMPc. La activacin de la rodopsina cierra los canales de sodio en la membrana plasmtica. Los discos de los bastones estn separados completamente de la membrana plasmtica, de modo que la seal generada como resultado de la activacin de la rodopsina por la luz debe viajar a travGs del citoplasma hacia la membrana plasmtica o hace? para efectuar la hiperpolarizacin. ~ C n i lo Laopsina activadapor laluz seune ala transducina (T).Se tratade un heterotrimero (a R y) de la familia de las protenas G (captulo 59). En la oscuridad, la transducina tiene unido GDP a la subunidad a; cuando el complejo (T)-GDP se une a la opsina adivada (Oa) se produce una reaccin de intercambio con GTPpara dar Oa-(T)-GTP. Launin de la opsina provoca la disociacin de la subunidad a, que entonces activa a una fosfodiesterasade GMPc (FDE), la cual hidroliza al GMPc, con lo que desciende la concentracin de ste en el citosol (Fig. 65.3). Como consecuenciadel descenso en la concentracin del GMPc, el nucletido se disocia de la protena de los canalesde Na* en la niemhrana, lo que hace questos se cierren. Es as que la seal pasadesde la membrana de los discos hasta la membrana plasmtica, y la seal luminosa se convierte en impulso nervioso. La seal puede ser graduada en intensidad. El efecto neto de la luz es reducir la velocidad de apertura de los canales de sodio. Si esta velocidad disminuye momentneamente, la concentracin de Na'dentro de los bastones se reduce, lo que conduce a la hiperpolarizacin.
Aparato de Gol@
Retculo

Reeuperaci6n del estado iniaal

Los canales de Na* tambin son permeables al Caz+,de modo que cuando se cierran, se inhibe la entrada normal de calcio. La cada en la concentracin citoplasmtica del Caz*estimula la guanil ciclasa, que revierte los niveles de GMPc a la situacin inicial, antes de que el estmulo luminoso se produzca. En la activacin de la guanil ciclasa por el descenso del Ca" intracelular interviene la protena reeuperina que, a diferencia de la calmodulina, se inactiva cuando tiene de modo que la recuperina estimula la Caz*unido y se activa cuando est libre de Caz+, ciclasa cuando los niveles de calcio bajan, despus de la respuesta a la luz. Existen otros procesos que llevan al cese de la cascada excitatoria. La subunidad a de la transducina (nT) tiene actividad de GTPasa, que hidroliza a GDP el GTP unido a ella. De esta forma se separa (aT) de la fosfodiesterasa y se inactiva esta ltima. La ) para subunidad a puede reasociarse con el complejo restante de la transducina (11 Y recuperar la forma ntegra de la protena (a B y).

Fuente: Stryer L.: Bioclieiiiistry. Jta. edirin, W.H. Freenian and Compaii). 1995, Fig. 65.2. Oiaqrama esquemtico de una clula fotocensihle de la retina: a) eii la figura se sealan las distintas partes de la roiiforiiiacin especial de estas rlulas: b) micrografia elrrtrnicn del segmenta externo que mue5tra el apilamirnto de los discos.

GMPc + H 2 0 --+ 5 GMP + H'

Eig. 65.3. 4etivaeiii de 1 s foifodicsterasa rlel GMPc en los hastmes de la relina. Se rcprescntan kia pasos d e las intcraccioiirs protriniras que culminati en la eclirarin de la fosfodicrlcra. T (transducina); R (rodopsina); Oa (opsina activada): FUE (fosfodiesterara).

Por otra parte, la opsina activada es sustrato de una quinasa de rodopsina y la arrestina,una protena soluble de 48 000 D, se une a la rodopsina fosforilada e inliibe su capacidad de seguir activando ala transducina y por medio de sta a lafosfodiesterasa. En sntesis,los niveles de GMPcse restablecen por la accin de la recuperina, que estimula a la guanil ciclasa, y por la inactivacin de la rodopsina, por accin combinada dela quinasa y arrestina. En los conos tiene lugar la visin de los colores y para dar una explicacin de ello se supuso que, por lo menos, deban existir 3 pigmentos diferentes en stos. sta es la leona tricromtica de Yonng-Helmholtz,bayada en que para obtener la gama cromtica que percihe el o,jo humano se requiere una mezcla de luz nionocronitica de, por lo menos, 3 longitudes de onda: azul, verde y rojo. Lasmedidas del espectro en conos lmmanos, antes y despus de exponerlos ala luz, revelaron que existen efectivamente3 pigmentos diferentes, cada uno presente en conos individuales. Los mximos de absorcin para cada pigmento son de 430 nm (azul), 540 nm (verde) y 575 nni (rojo). Estos Iiallargos concuerdan con la teora tricromtica. Los pigmentos ya iluminados se regeneran, si se incuban con 11-cis retinol en la oscuridad, de n~odo que diferentes opsinas se combinan con el mismo retinol en los 3 pigmentos fotosensibles. Laceguera a los colores (daltonismo)es una enfermedad Iiereditaria,en la cual se carece de sensibilidad para uno de los colores primarios. Como consecuencia, se trata deuna enfermedad molecular, en la quc el compuesto afectado es una de las 3 opsinas, normalmente presente en los conos. Las opsinas del ro,jo y el verde se codifican por genes localizados enel cromosoma X,mientras que el de la opsina para el azul se halla en un autosoma.

Resumen
La crnea est constituida principalmente por fibras de la protena colgena; entre ellas se disponen molculas de glicosaminoglicanos. El epitelio que cubre su superficie externa, con abundante inewacin, es impermeable a las lgrimas. 0del metabolismo elucdico ocurre oor la va de oxidacin directa de la El 50 9 glucosa. El humor acuoso es la fuente que le suministra los nutientes. El cristalino, un epitelio simple de clulas diferenciadas en la superficie exterior, carece de inervacin e irrigacin. Las cristalinas alfa, beta y gamma son 3protenas

aisladm exclusivamente de este tejido. A pesar de que su metabolismo es reducido, cuenta con sistemas de transporte activo para aminocidos, glucosa e iones. Es rico en agentes reductores como el cido ascrbico y el glutatin. Las cataratas son la enpresin fundamental de los trastornos bioqumicos del cristalino. La cmara anterior del ojo est ocupada por el humor acuoso, del cual se nutren el cristalino y la crnea. En la cmara posterior se halla el humor vtreo, el cual intercambia solutos con la sangre, a travs de la retina. El cido hialurnico, en una armazn de colgeno, es el componente fundamental de este fluido viscoso. La retina es el tejido de ms alto consumo de 0, por peso seco en el cuerpo humano. Tanto la gluclisis aerobia, como la va de oxidacin directa, son muy activas. Existen 2 tipos de clulas fotorreceptoras en la retina humana: los conos y los bastones, que funcionan a la luz intensa y brillante, y a la luz tenue, respectivamente. La esencia del fenmeno de la visin es la conversin de energa luminosa en impulso nervioso. Un cromforo, el Il-cis retinol, se combina con una protena. El primero cambia de cis a hans cuando un fotn lo impresiona y ello fuerza cambios wnformacionales en la protena de la membrana de los discos. Estos cambios le permiten unirse ala protena transducina que activa a lafosfodiesterasa del GMPc. La cada en los niveles del GMPc provoca el cierre de los canales de Nai, activados por el GMPc de la membrana plasmtica. Como consecuencia tiene lugar un cambio en la permeabilidad de Lamembrana, que trae consigo La alteracin del potencial de reposo y se origina as el impulso nervioso. La visin en colores se fundamenta por la presencia en los conos de 3 tipos de opsina diferentes, con mximos de absorcin para el rojo, el verde y el a m i . El daltonismo se produce como consecuenciade la falta o disminucin de una de estas 3 protenas.

Ejercicios
1.Si la crnea y el cristalino son estruchiras avasculares i,cmo le Ilegal1los nutrientes requeridos para su metabolismo? 2. Tanto la crnea como la esclerlica poseen un estroma constituido por colageiio. Cmo se explica quela primera sea transparente y la esclertica no? 3. Normalmente, el cristalino es rico en cido ascrhico y glutatin. Cmo puede usted relacionar esto con las cataratas del anciano? 4. Explique la funcin que se le asigna al Caz+ en la fotoquimica de la visin. S. La transduciiia pertenece a la familia de protenas G como las que participan en la accin de hormonas que acta11por medio del AMPc. Haga un paralelo de esos sistemas coi1 la fotoquimica de la visin. ;,Cul es la protena de los bastones que hace la funcin del receptor Iiormonal en aquellos sistemas? 6. La diferencia entre opsina y rodopsina radica nicamente en que esta ultima se halla ligada al ll-cis retinol o existe otra diferencia? 7. Relacione3protenas con sus respectivas funciones que participen en la recuperacin delestado inicial en los bastones, despus de la respuesta al estimulo lumiooso. 8. Si el cromforo detectado en conos y bastones es el misiuo, c h o se concilia esto con la teora IricrumticadeYoung-Helmhdtz:'

Las clulas presentan diversos tipos de movimiento: de traslacin, rotacin, asimilacin, secrecin, contraccin y elongacin; sus cilios y flagelos tambin tienen movimiento, as como el material gentico durante la divisin celolar. Todos estos movimientos estn muy relacionados con el citoesqueleto, que est compuesto fundamentalmente por diferentes tipos de filamentos, entre los que se encuentran los finos (de actina), los gruesos (demiosina), los intermedios y los inicrotbulos. Durante la divisin celular estos ltimos intervienen tanto en el movimiento de los cilios y flagelos, como en el de los cromosomas. El desplazamiento y la fagocitosis dependen fundamentalmente de los filamentos de actina, los cuales,junto con los de miosina, interviene11en la contraccin muscular. En este captulo trataremos principalmente este tipo de moviniiento. En el organismo humano existen diversos tipos de te,jidos contrctiles y las clulas que lo forman noson las mismas en todos ellos. El tejido muscular estriado o esqueltico (msculo voluntario) es un sincitio; sus clulas se forman por la unin de varios nuoblastos, que son las clulas einbrionarias precursoras de este tejido, y debido a ello se caracterizan por poseer varios ncleos en el mismo citoplasma. Una vez especializada, esta clula no se volver a dividir durante toda la vida del individuo; sin embargo, cada clula del msculo cardaco o del msculo liso posee un solo ncleo. Una caracterstica comn de las clula^ de los msculos esquelticoy cardaco es que presentan estriaciones transversales, debido a la organizacin particular de los filamentos responsables del movimiento contrctil.Por otro lado,las clulas del msculo liso y las mioepiteliales, a pesar de contar tambin con los mismos tipos de proteinas que forman los filamentos de los tejidos cardaco y estriado, no poseen estras transversales porque en ellos los filamentos estn menos organizados p se disponen de manera diferente. El msculo cardaco, adems, posee como una caracteicticadistintiva una disposicin especial delas fibras conectivas de colgena y elastina que rodean a estas clulas. En este captulo se tratar primero la composicin de la clula muscular estriada y se describir la estructura y funcin de los componentes celulares, as como de las protenas especiales que la forman. Luego, se ver la interaccin entre estas protenas y cmo se logra el movimiento. Al final del captulo se describirn muy brevemente algunos aspectos distintivos del tejido muscular cardaco y del liso, as como tambin los aspectos del movimieuto en otras clulas no musculares.

C6luias del tejido muscular estriado

La unidad coniponente del tejido muscular esla clula o fibra muscular, tanihin denominada miocito. sta tiene de 10 a 100 pm de dimetro, y de varios milmetros a centmetros de largo. Como se origina de la fusin de distintas clulas embrionarias, los inioblastos, contiene varios ncleos y una gran cantidad de mitocoudrias (sarcosomas). La memhraiia plasmtica (sarcolema) delimita el sarcnplasrna (citoplasma de la clula muscular). En el organismo humano se pueden distinguir 2 tipos extremos de nisculos voluntarios, que dependen de las clulas que los forman. Unos miocitos so11ms ro,jos en su coloracin y ms abundantes en los msculos de contraccin fuerte y de respuesta rpida, pero se fatigan emeguida: otros, los ms plidos, estn presentes en los msculos de respuesta lenta que no qjercen mucha fuerza, pero s pueden mantenerse contrados mucho tiempo. Entre estos 2 extremos se encuentran muchos tipos intermedios que dependen de la proporcin de cada uno de estos tipos de clula (tahla 66.1).
Tabla66.1.

Caractersticas de las clulas del tejido muscular rqjo y blanco Fibras rpida5 Fihras lentas Ms plida Menor
No mi fuerte

Coloraan Contenidode mioglobina Fortalwade la contmcan Respuesta Fa-

Ms roj;s Mayor Fuerte InmdLlta

Rlsrpida

hla, lenta R.Isleiita

Los miocitos contienen las misnias protenas estructurales y funcionales que se encuentran en cualquier clula eucariota, as como los otros componentes que forman parte de los diferentes organelos y de los distintos procesos hioquniicos que van a tener lugar en esta clula, en especial aqullos que brindan energa. Lo que ms caracteriza a esta clula es la abundancia de miofilamentosoipnizados en forma demiofibriuss.Cada clula puede contener decientos a miles demiofibrillas y cada una tiene de 1 a 2 pm de dimetro. Las miofibrillas estn formadas por los filamentos especialirados en la contraccin, stos, a su vez, estn compuestos por protenas, de las cuales las ms importantes son la miosina y la adina. Algoms de la mitad (del 60 al 70 %)de todas las protenas del msculo pertenecen a la iniosina y del 20 a1 25 %,a la actina. Adems de las miofibrillas, el retculo sarcoplasmatico es otra de las estructuras especializadas de la clula muscular (Fig. 66.1 a).
Fig. 66.1. Esqucmn del reticulo sarcoplasnitieo: a! corte transversal de iiiia filira muscular en la que se observan: 11 miofibrillas (slo se presentan S de lai miles que puede contener tina fihra muscular), 2) tubos longitudinales del retculo sareoplasrnitico,3) iiiieleo celular, 4) niitocondrias y 5 ) membrana pI.asmtiea: b) corte longitudinal en el que se observan: 11 unin del reticulo sareoplasmtico de arenieras vcciiiaa, 2) membrana plasnitica,3) tubusiongitudiriale~ que se anastuiiiosan, 4) cisternas 5) tubos en 'r.

Retculo sarcoplasmtico El retculo sarcoplasmtico es una especializacin del retculo eudoplasmtico liso de la clula muscular. Fue descuhierto en 1902 por Veratti, pero no se le concedi ninguna impnrtaiicia hasta su posterior observacin en las tbtografias del microscopio electrnico en 1953. En stas podemos ver 2 porciones diferentes: unos tuhos longitudiuales, que corren paralelos a las miofibrillas, las rodean y se unen entre s, y una cisterna terminal aambos lados de lasarcmera. Los retculos sarcoplasmticos de sarcmeras vecinas tienen continuidad entre s. Es un sistema de endomemhranas muy extenso, de 2 m21gde te,jido(Fig. 66.1 a y h). Este sistema vacuolar almacena iones de calcio y cuando stos se liberan al citoplasma son los que inician el proceso de Ia contraccin. La liberacin ocurre cuando la despolarizacin del sarcolema es trasmitida al retculo sarcoplasmtico.

EI sarcolema no tiene continuidad con el retculo sarcoplasmtico, pero sus meinbranas se encuentran muy prximas entre s y no slo en la superficie de la fibra
muscular, ya que el sarcolema tiene prnyeccionesen forma de tuhos transversales (los tubos T), que penetran a nivel de los lmites de cada sarcmera y asalcanzan todo el espesor de la fibra muscular (Fig. 66.1 b). La memhrana de este sistema posee una proporcin de protenas a Ipidos igual a 2 : l .Del80 al YO % de todaesta protena laconstituye la hombade recaptura de ealcio, que se describir& ms adelante. Con la entrada y salida del Ca" del retculo sarcoplasmtico podran generarse potenciales de memhrana para este ion, pero estos fosfato y traspasos se compensan al salir g entrar otros iones como el Na', K*, Cl~, oxalato.

Estructura de las miofibrillas y sarcmeras

Las miofibrillas son unos elementos cilndricos de 1a 2 ym de dimetro, que se extienden desde un extremo de la clula al otro. Ellas estn compuestas por unidades llamadas sarcmeras que -unidas cabeza con cola- recorren la longitud completa de la clula muscular. Cada una de las sarcmeras est compuesta, entre otras coniponentes, por filamentos gruesos y finos: son los filamentos de miosina y actina respectivamente, los cuales se tratarn ms adelante. Ellos le dan el aspecto caracterstico a la fihra muscular cuando stase observad microscopio: lade tener bandas oestras transvedes (Fig. 66.2).

Fuente: Stryer L.: Rioquniicn (cdieiii en espaiiol), Editorial Revert, S.A., 1982. Fig. 66.2. Fotografa al rnicrartepio eleilrniri, dc uii corle lungitudiiial de un msculo esqueltico. Se uhseria" las estriachmes trniisrcrsalea (la5 hwndas claras y oscuras).

El tamao de cada sarcmera es de 2,s ym de largo y, vistas al microscopio nplico, las bandas transversales qucse observan en la fibramuscular sedeben a la existencia de estas mismas bandas en esa unidad. A grandes rasgos se observan bandas claras y oscuras transversales, a todo lo largo de la fibra muscular; a su vez, dichas bandas poseen otras estras ms finas que se aprecian cuando estas estructuras se observan coi1 mayor detenimiento y a aumentos mayores. Las bandas oscuras, tambin llamadas bandas A, se corresponden con la zona central de cada sarcmera, y las claras, llamadas bandas 1, se corresponden con los 2 extremos de las sarcmeras adyacentes. En el centro de la banda 1 se observa la Uamada contigitas. La banda A poseeen su lnea o banda 2,que es la u n i h entre la9 sarcmera~ centro una partems clara: la zona H, que est centrada, adems, por otra estnacin, la lnea M (Mg. 66.3).

Fig. 66.3. Esquema de 2 sarerrirras: dc lnea Z a lnea Z Iray 2,5 pm; banda A: zonas oscuras; banda s lnea M. 1 : zonas claras; zonas H: porcin central de la hsnda A, centrada por 1

Fig 66.4. Disposiciti de los filamentos gruesos y finos eii corfes traiisversales a la saremcra: a) filanientos grucsos a nivel de la banda H, B ambos Indes de la lnea M; h) filamentos linos y gruesos a nivel de la banda A, a ambos lados de la banda A; e) filanienlos finos a nivel de la banda 1, a ambas lados de la lnea Z.

Si realizamoscortes transversales de la sarcmera a diferentesnivele?,observamos la disposicin regular que adoptan ambos tipos de filamentos en su espesor. Un corte transversal a la miofihrilla,a nivel de la banda H y a ambos lados de la lnea M, muestra los cortes transversales de los filamentos gruesos, dispuestos en filas, y si tomamos como centro a cualqiiiera de ellos, los otros filamentos lo rodean en forman de hexgono (Hg. 66.4a). Un corte transversal a nivelde la banda A, a ambos lados de la zona H,muestra cmo se alternan los cortes transversales de los filamentos finos y gruesos. Los gruesos tienen la misma disposicin anterior, pues son la continuacin de esos mismos filamentos, pero en este caso cada uno de ellos est rodeado por fdainentos finos, de tal inanera que a su vez estos ltimos le forman nna figura hexagonal a su alrededor (Fig. 66.4b). Otro corte, transversal tambin, a nivel de la handa 1y a amhos lados de la lnea Z, nos muestra solamentelos cortes delos tlamentos finos en su misma disposiciii anterior, pero dejando en su centro el espacio vaco, correspondiente al filamento grueso (Fig. 66.4~). Los filamentos gruesos tienen 1,S ym de largo por 15nm de dimetro y atraviesan toda la longitud de la handa A. Estn compuestos por la protena miosina, pern en la Inea M tambin hay otras protenas, entre ellas las protenas M y C, que parecen mantener en posicin a los fdamentos gruesos. En cada lado, el filamento de miosina se fija por el extremo a la lnea Z por la protena tintin. sta parece formar como un muelle que controla la longitud del filamento, y mantiene, adems, su posicin en la mhnen. Los filamentosfinos tienen 1 ym de largo por 8 nm de ancho; se extienden desde la Inea Z hasta aproximadamente el centro de la banda A (no se encuentran en la zona H), por lo tanto, a lo largo de la banda1 corren solos y se iutcrdigitan con los gruesos eii una partede la banda A. Estos filameiitos estn compuestos por la proteina actiiia. Otras protenasse encuentran adosadasaellus en toda su longitud; se trata delas protenas reguladoras: la tropomiosina y la troponina. Una proteina, la nebulina, fija los filanientos finos a la lnea Z y parece recorrer al filamento fino en toda su loiigitnd. Experimentos realizados con el empleo de anticuerpos antinehulina marcan al filamento fino a todo lo largo y marcan tambin a la Inea Z. Rodeando a los filamentos y tambin en estazona Z se encuentran la alfa y beta actininaq, la desmina y la vimentina. Estas protenas parecen mantener el espaciado de los filamentos de actina, en particular la desmina, que es la que interviene en esta accin (Fig. 66.5). En la dcada del 50, dos grupos de investigadores que trabajaban independientemente (el grupo de Andrew Huxley y R. Niedergerke, y el de Hugh Huxley y Jean Hanson) hicieron una serie de mediciones al estudiar msculos por difraccin de rayos X, y inicroscopia ptica y electrnica. De estos estudios ellos

propusieron las bases del mecanismo de la contraccin muscular; observaron que la longitud de los fdamentos grnesos y fmas era la misma, tanto en el msculo contrado, como en el que estaba en estado de relajacin. Sin embargo, cuando el msculo se contraa, lo que se acortaba era la longitud de la sarcmera y la diferencia en su longitud se corresponda con el acortamiento que se produca en el msculo en contraccin. Un msculo se acorta aproximadamente hasta el 80 % de su longitud original. Si posee 10OOOsarcmeras, su largo total es de25 cm. Cuando se miden las sarcmeras en un msculo contrada, se observa que su tamao se ha reducido tambin a una longitud correspondiente, y que ahora miden aproximadamente 2 p m Adems, observaron cmola longitud de la banda Ano se modificaba y,en cambio, la banda 1 se acortaba. Estos datos slo podan explicarse por la mayor o menor interdigitacin entre ambos filamentos. Concluyeron que la fuerza de la contraccin se generaba por un proceso que el desliaamiento de un tipo de filamento sobre el otro (Fig. 66.6). El mecanismo molecular de cmo se produce este proceso se explicar ms adelante. Otros experimentos demostraron la dependencia de la contraccin con la bidrlisis del ATP. Cuando se extraan la? miofibriilai de un niscnlo y se aada ATPen el medio de disolucin, ellas mantenan su capacidad de contraccin.

Fi8. 66.5. Proteinns de la banda Z uncn las filamentos finos Entre snremeras rontigiiar. Iln filamento de cada lado de la banda Z se une a 3 protcinas. Se representa en (a) a los filanientos finos de la saremera derecha en nzul, las de la irquirrda en verde y las prutcinns de la propia hrnda en ri?jo. En (h) se ha representada, aislarla del conjunto, la disposirWn hexngonal de las pn,teinas de la banda Z, y en (e) & a se ohserrva de frente.

Los filamentos de actina se extraen con KCI, a una concentracin de 0,6 M; estn compuestos por la polimerizacin de las molculas de actina. Se han encontrado 6 tipos de actinas distintas en las diferente especies, y stas tienen altamente conservados sus locusgenticos, de tal modo que, en estudios in vitro, pueden intercambiarse las actinas de especies diversas, ya que las diferencias en cuanto a sus secuencias de aminocidos son muy pocas y su funcin es la misma. Los monmeros de actina reciben el nombre de acna G (que vienede globular); cuando stos se polimerizan se llama aetlnaF (que viene de filamento). La actina G tiene un peso molecular de 41,s kD (375residuos de aminocidos) y la molcula tiene un dimetro de 4 nm. Esta molcula globular, hilobulada, no es simtrica. Posee sitios especficos por donde se une con otra? molculas de actina; otro sitio por donde se une al filamento grueso y, adems, tiene sitios de unin para el calcio, el ATP y otras protenas especficasque regulan la contraccin. Al calcio se le atrihuye la funcin de estabilizar la forma globular. La polimenacin traecomo consecuencia la hidrlkis del ATP; el ADPpermanece unido a cada uno de los monmeros. In vitro, la polimerizacin se logra slo con aumentar la concentracin salina del medio hasta un valor cercano al fisiolgicoy no requiere de la hidrlisis del ATP. In vivo, s se hidroliza el ATP, lo que provoca, adems, un aumento en la velocidad de la polimerizacin y el producto logrado es ms estable. La actinaF es un filamento duplex. Dos hebras lineales, compuestai de actina G ,se enrollan en forma de hlice derecha. Cada vuelta de la hlice est integrada por 13,s molcnlas de acina G, con 36 nmde longitud por vuelta y 7 m de dimetro (Fig. 66.7). Como las actinas G no son simtricas, el filamento que ellas forman posee polaridad.

Fig. 66.6. Interdigititeiones que se producen durante la contraccin entre los filanicntos gruesos y finos: a) relacin entre ambos filamentos en el nisculo ( u sarr6incra) relajado; h) relacin entre ambos filamentos cn el msculo (u sarcmera) contrado. La diferencia entre ambas figuras radica en la mayor interdipitncin entre los lila me^>tu, en la figura h.

36 nin

Fig. 66.7. Artina F (filamento finoi. Se observan las 2 cadezias foniiadas por la actina G, enrolladas cn hlice. Se ha representado en rada moninere cl sitio de union ron la miosiiia.

propusieron las bases del mecanismo de la contraccin muscular; observaron que la longitud de los fdamentos grnesos y fmas era la misma, tanto en el msculo contrado, como en el que estaba en estado de relajacin. Sin embargo, cuando el msculo se contraa, lo que se acortaba era la longitud de la sarcmera y la diferencia en su longitud se corresponda con el acortamiento que se produca en el msculo en contraccin. Un msculo se acorta aproximadamente hasta el 80 % de su longitud original. Si posee 10OOOsarcmeras, su largo total es de25 cm. Cuando se miden las sarcmeras en un msculo contrada, se observa que su tamao se ha reducido tambin a una longitud correspondiente, y que ahora miden aproximadamente 2 p m Adems, observaron cmola longitud de la banda Ano se modificaba y,en cambio, la banda 1 se acortaba. Estos datos slo podan explicarse por la mayor o menor interdigitacin entre ambos filamentos. Concluyeron que la fuerza de la contraccin se generaba por un proceso que el desliaamiento de un tipo de filamento sobre el otro (Fig. 66.6). El mecanismo molecular de cmo se produce este proceso se explicar ms adelante. Otros experimentos demostraron la dependencia de la contraccin con la bidrlisis del ATP. Cuando se extraan la? miofibriilai de un niscnlo y se aada ATPen el medio de disolucin, ellas mantenan su capacidad de contraccin.

Fi8. 66.5. Proteinns de la banda Z uncn las filamentos finos Entre snremeras rontigiiar. Iln filamento de cada lado de la banda Z se une a 3 protcinas. Se representa en (a) a los filanientos finos de la saremera derecha en nzul, las de la irquirrda en verde y las prutcinns de la propia hrnda en ri?jo. En (h) se ha representada, aislarla del conjunto, la disposirWn hexngonal de las pn,teinas de la banda Z, y en (e) & a se ohserrva de frente.

Los filamentos de actina se extraen con KCI, a una concentracin de 0,6 M; estn compuestos por la polimerizacin de las molculas de actina. Se han encontrado 6 tipos de actinas distintas en las diferente especies, y stas tienen altamente conservados sus locusgenticos, de tal modo que, en estudios in vitro, pueden intercambiarse las actinas de especies diversas, ya que las diferencias en cuanto a sus secuencias de aminocidos son muy pocas y su funcin es la misma. Los monmeros de actina reciben el nombre de acna G (que vienede globular); cuando stos se polimerizan se llama aetlnaF (que viene de filamento). La actina G tiene un peso molecular de 41,s kD (375residuos de aminocidos) y la molcula tiene un dimetro de 4 nm. Esta molcula globular, hilobulada, no es simtrica. Posee sitios especficos por donde se une con otra? molculas de actina; otro sitio por donde se une al filamento grueso y, adems, tiene sitios de unin para el calcio, el ATP y otras protenas especficasque regulan la contraccin. Al calcio se le atrihuye la funcin de estabilizar la forma globular. La polimenacin traecomo consecuencia la hidrlkis del ATP; el ADPpermanece unido a cada uno de los monmeros. In vitro, la polimerizacin se logra slo con aumentar la concentracin salina del medio hasta un valor cercano al fisiolgicoy no requiere de la hidrlisis del ATP. In vivo, s se hidroliza el ATP, lo que provoca, adems, un aumento en la velocidad de la polimerizacin y el producto logrado es ms estable. La actinaF es un filamento duplex. Dos hebras lineales, compuestai de actina G ,se enrollan en forma de hlice derecha. Cada vuelta de la hlice est integrada por 13,s molcnlas de acina G, con 36 nmde longitud por vuelta y 7 m de dimetro (Fig. 66.7). Como las actinas G no son simtricas, el filamento que ellas forman posee polaridad.

Fig. 66.6. Interdigititeiones que se producen durante la contraccin entre los filanicntos gruesos y finos: a) relacin entre ambos filamentos en el nisculo ( u sarr6incra) relajado; h) relacin entre ambos filamentos cn el msculo (u sarcmera) contrado. La diferencia entre ambas figuras radica en la mayor interdipitncin entre los lila me^>tu, en la figura h.

36 nin

Fig. 66.7. Artina F (filamento finoi. Se observan las 2 cadezias foniiadas por la actina G, enrolladas cn hlice. Se ha representado en rada moninere cl sitio de union ron la miosiiia.

Estructura de los filamentosgruesos

Los filamentos gruesos, forniados por agregados de molculas de miosina, se encuentran en las clulas musciilares estriadas, intercalados entre los filanientos de actinaF y unidos aeUos. Se puedenextraer de las clulas a una concentracin salina de KCI OJ M,en la cual ellos son solubles. Su desagregacin prodiice las molculas de miosina, cuyo peso molecular es de 540 kD. El estudio de la secuencia aminoacdica de los monmeros de miosina de diferentes especies ha niostrado que los locus genticos de stos no se encuentran tan conservados como los de la actina. El monmeroes una molcula alargada qiie poseeen uno de sus extremos 2 cabezas y est constituido por 6 unidades de protenas. La separacin de stas se logra al tratar una soliicin de miosina con detergente o urea. Dos dc estay nnidades son cadenas pesadas, iguales entre si, con un peso moleciilar de 230 kD cada una. Las otras 4 son ligeras; todas tienen pesos moleculares de aproximadamente 20 kD y son iguales entre s, 2 a 2. Cada cadena pesada tiene una estnictura espacial coinpkja; un extremo es lineal en alfa hlice y el otro es globular (Fig. 66.8).

Fig. 66.8. Moleiila de rniosina. Se observa en el extremo izquierdo su porcin lineal formada por 2 cadenas enrolladas; a la dcrerha, sus 2 partcs :lobirlares (las cabezas con actividad dc ATP hidrolass). Otras 2 mwteinas. lar 2 cadenas incmres. se relacionan coneadacaliew.Tambin sc seiialun en el esquema las 4 porciones eri las que se divide la inolcula cuando es trata& coii las eiizimas tripsina y papuina.

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Cadena mayor

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En 1953, Andrew Szent-Gyorgi trat esta niolcula con encimas proteolticas. Con la tripsina la separ en 2 porciones: la LMM (ligl~t~neroniyosi~i, mero miosina ligera) y la HMM (heavy rneromyosin, mero miosina pesada). Luego, con la papana trat a la HMM y obtuvo las porciones S, y S,como se observan enlacolumna iquicrda. LaLMM se correspondecon el extremo alargado y enrollado en alfa hlice; la S, se corresponde con la parte de la alfa hlice que est ms cercana a la cabeza y es la qn forma el brazo mvil que la sostiene; la cabeza globular es la S, (Fig. 66.8). La secuenciade aminocidos de la LMM es seme,jantea las llamadas estructuras en hlices enrolladas. Siete residuos se repiten a todo lo largo de la alta hlice. En las plazas 1 y 4 se concentran aminocidos apnlares, lo que hace que en toda su longitud aparezca una banda apolar qne posibilita su asociacin y enrollamiento con otra molcula semejante. Las 2 subunidades pesadas del m o n h e r n de miosiiia se enrollan por este extremo y forman la hlice izquierda. En la cabeza (en la S,) se hallan varios sitios de reconocimicnto. Por una de sus caras, cercana al extremo, se encuentra la actividad ATPasa, descubierta en 1939 por Vladimir Engelhart y Militsa Lyuhimova. Por la otra cara est el sitio de unin, en forma de canal para la actina. En la base de la S, se encuentran los sitios de unin para las cadenas ligeras, por donde ellas abrazan parcialmente a esta estructura. Ambas tienen hoinologa estructural con L a calmoduliua; sin embargo, slo una de eUas puede unirse al Ca". Estas subunidades ligeras se fosforilan y parece que su grado de fosfriiacinmodula la actividad ATPasa de la cabeza (sobre todo en el nisculo liso). A fuerza inica y pH fisiolgico las molculas de miosina se ensamblan espontneamente. Su agregacin in vitro es diferente a la que ocurre in vivo, pues en estas ltimas condicionesse forman filamentosmayores. La a~ociacin de las molculas de miosina produce el filamento grueso. Para arribar a este Largo agrerado ~noleciilar,

las colas de las molculas, dirigidas hacia el centro del filamento, se adosan entre s y las cabezas quedan hacia los extremos, en la supericie del filamento. En su centro se observa una zona despojada olibre de cabezas. As quedan empaquetadas cientos de molculas (Fig. 66.9). Esta estructura es semejante, a ambos lados de dicho filamento, aun tallo rodeado de yemas; este filamentotambin es polar y su polaridad es contraria hacia ambos extremos.

Fig. 66.9. I'ilamento grueso forrriado por un agregado de ~iiolculaide iniusina, las cuales rc van uniendo Iiacia ambos ertrcmos y lar porciones lineales de las molculas de miosina quedan hacia el centro y las cabezas hacia los extrcrnos. El centro qiicda despol>lndode rabeLas.

Las yemas que contienen la actividad ATPasa (ATPhidrola~a), interactan con las molculas de actina y vencen el espacio de 13nm que queda entreellas. El intervalo entre 2 contactos es de 7 nm y 2 contactos seguidos se encuentran en una lnea, a lo largo del filamento, con un desplazamiento angular de 60 "C. Todos los puentes van describiendo una hlice que se completa cada 42 um; en este intervalo el filamento grueso se une con 6 filamentos finos (Fig. 66.10). 42 nrii
1

La contraccin muscular se debe, precisamente, a este tipo de interaccin entre ambos filamentos; ocurre en direcciones opuestas, a ambos extremos del filamento grueso y es la que produce la interdigitacin entre ellos, lo que se ver con mayor detalle posteriormente. La actividad ATPasa de la miosina es diferente en ausencia de las molculas de actina. En estas circunstancias dicha actividad se encuentra muy disminuida, ya que la unin con el ATP y su hidrlisis es rpida, pero los productos (el ADP y Pi) demoran unos 30 s en liherarse del centro activo. Al encontrarse ambas presentes, actina y miosina,la liheracin se favorece y entonces se observa cmo aumentala actividad de la hidrlisis que ahora es de 5 a 10 ATPpor segundo. El aumento que se produce es aproximadamente de 200 veces.

Fig. 66.10. Iisqiicrna Iiipottico de tina pequeii parte de un extremo derecho d e iiii filamento grueso. Se representa solaniente una de las calirzas en cada iiiolriila d e miosina. . A l ~ m a s se seiialan cn rqjo para hacer notar el desplammiento de 6 0 , en lii.lice, alrededor del eje cenlral.

Las protenas involucradas en la contraccin pueden rersc en la tabla 66.2. Algunas de estas protenas son reguladoras de la contraccin. En el surco que queda entre las 2 cadenas de la actina P se encuentra una protena filamentosa: la tropomiosina. Es un heterodmero que forma una hlice enrollada, rgida, la cual cubre los sitios de unin dela actina con las yemas dela miosina, cuando el msculo esten reposo. Su regulacin abarca una longitud de 7 actinas G. Las tropomiosinas se unen cabezacon cola y a nivel de cadauna deestas uniones se les asocia un complejoproteico: la hponina, que contiene 3 subunidades llamadas TnT, TnI y TnC. La primera, alargada, tiene un sitio de reconocimientopor donde se produce la unin de este complejo con la tropomiosina. La TnI se une a la actina y es la causante de la inhibicin de la contraccin. La y cuando esto TnC, semejante en el 70 % a la calmodulina, se une a 4 iones de Caz+, ocurre impide la accin inbibidora de la Tu1 y se produce la contraccin. Como este complejo proteico se asocia slo a uno de los extremos de la tropomiosina y sta

Tabla 662. P r o t e n a s involucradas en la contracciii Protena Peso molecular (kD) Localizacin Funcin Monmero de los filamentos finos Monmerode los filamentos gruesos. Adi~idad hidrolasa Abarca7 monmeros de actina, a lus que regula R e p l a la actividad inliibitoria dela tmpomiusina Une los tilamentos gruesos a la lnea Z Une los filamentosfinusa la lnea Z Mantieneal famentogmeso centrado y unido a la UneaZ y jcontrolasulougitud? Controla lalongitud del fdamentofmo Participaen el ensamblajede los filamentos gruesos Participa en elensamblajede los filamentos gruesos a b a r c a 7 actinas G, las diferentes troponinas q u e d a n a 38,s n m d e intervalo e n el filamento fiuo. Por este motivo se cree q u e u n complejo tropomiosina-troponina regule todas esas unidades ( H g . 66.11).

Filamento fmo Filamentogmeso Filamentono Filamento no Lnea Z LneaZ Aprox. 3 600 Lnea Z y f i e n t o grueso Filamento fino y lnea Z Disco M Disco M

Aprox. 800
150

1 00

Fig. 66.11. Esquema del complejo trapomiosina-troponina,dispuesto en el filarrientu de actina F: 1 ) troponina y 2) trupomiosina: a) el coniplejo tropumiosina-troponif~a inhihc las 7 unidadcs de actina y no permite 4iie se unan a la miosina. al cubrir sus sitios de unin con sta: b) esquema de cmo podran deseuhrirse los sitios de iini6n de la aetina para la miosina, al desplrrarse hacia elsurcoentre ambas cadenas de actina el complejotropomiusina-troprinina, al unirse al Caz*.As se actiwria la contraccin.

Mecanismo de la contraccin muscular

La conlraccin muscular y su regulacin es el resultado de la interaccin de todas las protenas anteriormente mencionadas. Los sucesos que ocurren en la contraccin muscular se pueden subdividir en 4. Cnmo - .- criterio de clasificacin nos basaremos en la localizacin v evolucin de los eventos. As, tendramos primero los que ocurren en la placa motora; segundo, los que tienen lugar en el retculo sarcoplasmtico;tercero, los que se producen en la miofibrilla y cuarto, los del sarcoplasma y los sarcosomas.

Eventos en la placa motora La contraccin musciilar se inicia con la propagacin del impulso nervioso, que viene por el nervio hasta su llegada a la terminal axnica en la placa motora (Fig. 66.12). La placa motora es la zona donde se produce la sinapsis entre el axn de la clula nerviosa con la ihra muscular. La despolarizacin que llega a la terniinal axnica origina cambios en la permeahilidad de los canales para el calcio, lo que provoca la entrada del Ca2'al interior de la clula presinptica. Estos canales con compuerta (captulo 64) se cierran automticamente en segundos, luego de la entrada del Ca2+. Esteion causa, a su vez, la polimerizacin de proteinas de la membrana, que cambian su conformaciii y ahren unos canales por donde se lihera la acetilcolina libre, y luego la que est contenidaen las vesculas. Normalmente, sin la llegada del estnmlo nervioso, sc estn liherando 10 000 molculas de acetilcolina (son las qiie contienen una sola vescula), debido a la existencia de potenciales de placa terminales mnimos, que siempre estn presentes. Sin embargo, la llegada del estn~ulo produce una liberacin de 4 x 10%moltculas de acetilcolina. No se conoce el mecanismo de la exocitosis de la vescula dc acetilcolina; no obstante, se pudiera producir deforma semejante al que se produce en el cerebro. Eii ste, iina protena, la siiiapsiiia, presente en las membranas de dichas vesculas, se activa en dependencia de la Ca2'-CM y de una protena quinasa AMP<dependiente. La activacin de esta protena favorece la fusin de las vesciilas a la membrana para exocitarse de esta manera al espacio sinptico (Fig. 66.12). La acetilcolina debe atravesar el espacio sinptico y unirse a su receptor, que se encuentra en la memhrana de la fibra musciilar. El receptor de la acetilcolina tiene 250 kD y lo forman Ssubuiiidades (captulo 64). La ms importante, laalfa, de 40 Id), es la que se une al neurotrasmisor. Esta unin provoca la apertura del canal por donde penetran los iones Na*, en una cuanta que supera la salida de los iones Ki. Debido a ello se despolariza la membrana, puesto qiic el gradientedel primer ion es mayor que el del segnndo. El cambio de volta,jecierra de inmediato este canal, que slo permanece abierto durante 1ms. Este receptor es un canal con compuertasensible al voltaje, por donde tambin penetra una determinada cantidad de calcio, pero estas cantidades no son las suficientespara provocarla contraccin en todaslassarcmeras del tejido muscular. Esta despolarizacin puntual provoca la apertura de otros canales de Na' circundantes, que tamhin secierran de inmediato. La apertura de estos canales depende de los camhios de i.olta,je que se estn produciendo, y de nuevo tiene lugar el paso de iones, los cuales provocan la despolimerizacin de esa zona y esto, a sii vez, provoca la apertura de ms canales, ahoraalgo ms lejos del punto inicial. As, esta despolarizacin se va propagando por todo el sarcolema, incluyendo a los tiihos T en cada extremo de las sarcmeras. En milisegiindos esta seal se trasmite por todo el msculo.

Fig. 66.12. Eventos a nivel dc la placa iiiiilora: 1) terniinal axnira, 2) \rr. ciilns de aeetileolina (AeC), 31 saicolenia, 1) receptor de .\rC ron bu sitio de u n i h p a n eitc ligmrlo y el cai~aldi. ioiies.

En esta etapa dichos procesos se revierten de la forma siguiente: una enzima presente en el espacio sinptico, la acetilcolinesterasa, hidroliza a la acetilcolina y la transforma en cido actico y colina, los que vuelven, en parte, a penetrar en la terminal axnica. All, de nuevo, se forma el neurotrasmisor, en un proceso catalizado por la colina acetiltransferasa. I,a despolarizacin se invierte nuevamente a nivel del sarcoplasma por la bomba ATPasa Na+-K* dependiente.

Eventos en el r e t d o sarcoplasmtico
Por la contigidad de ambas membranas (sarcoleniay retculo sarcoplaimtico), y por un mecanismo no bien conocido, la despolariracin provoca la salida al citoplasma del Ca" almacenado en el retculo sarcoplasmtico. Segun una teora, la propia despolarizacin producira la apertura de los canales de calcio, pero otra teora lo relaciona a la activacin por la acetilcolina de la cascada de la fosfolipasa C (captulo 59). Segn sta, el IP, sera el segundo mensajero que abrira los canales de Ca2'. La concentracin de este ion, que antesera de 10"-lW' M,ahora es de 105M. Este cambio de concentracin desencadena la interaccin entre los filamentos finos y gruesos. En esta etapa, la reversin de esta liberacin de calcio se produce por la recaptura, mediante un transportador presente en la membrana del retculo sarcoplasmtico: la ATPhidrolasa Caz' dependiente:

ADp ATP

7
Ca

2+

H20
2~a~+,,,,

2Ca

2+

LE-P L . E + Pi +

'

21

Esta protena transportadora tieneuna sola cadena de 1000 aminocidos. Durante su accin, en la cual introduce 2 Ca" al espacio interno del retculo sarcoplasmtico e hidroliza nn ATP, ella se fosforila y desfosforila, al igual que lo hace la bomba ATPasa Na+-K+ dependiente. Se ha calculado qne cada una de esas bombas de calcio introducen 20 de esos iones por segundo lo que representa una eliminacih de 200 nmoles de calciolg de tejido en 50 ms (Fig. 66.13).

Rctculo sarcoplasrnalico
a)
Fig. 66.13. Esquema dela bomba de calcio iiiiiiro del retcuii,sarcoplasrntieu: a) estado runfomaeh,nal del transportador, cuando se encuentra desfit~forilado; b) el aumento de la eoiiceiitrarin de Ca" en el citosol activa la fosforilacin del transportador, al hidrolirnrse cl T P ; c) 1 s fosforilaein produce el cambio conformacional y se lihera el Cal* Iwia e l reticulo %reoplasmtico.

c)

En su accin requiere de Mg2*y fosfolpidos. A concentraciones elevadas de calcio en el retculo sarcoplasmtico se puede invertir la reaccin y formar ATP. El calcio se almacena dentro de este espacio vacuolar, unido a la calsecuestrina, protena de 44 kD, muy cida, que posee ms de 40 centros de unin para el CaZ7.

Eventos en las miofibrillas

Escojamos para la explicacin detallada de los sucesos que ocurreu entre los filamentos finos y gruesos a unaunin entre ellos (Fig. 66.14). En el msculo estriado que el el Ca2'desempea una funcin reguladora. En 1960, Sefsuro Ebashiden~ostr efecto de calcio estaba mediado por la troponina y la tropomiosina. 111 vitro, la actina y la miosina podan interactuar en presencia de ATP y sin calcio; sin embargo, si se aada troponina y tropomiosina, la interaccin entre ellaino era posible, hasta que se aadiera Ca". En ausencia de calcio, la yema o cabeza de la miosina (S,), que tiene unido en su centro activo al ADP + Pi, est separada del filamento de actina por la tropomiosina, y su brazo presenta un ngulo de 90",coi1 respecto al filamento fino. Al incrementarse el calcio enel citoplasma,ste se une a TnC, y se produceun cambio de conformacin en la tropomiosina, la cual se desplaza al surco presente en la actina F, lo que pone al descubierto los sitios de unin de cada actina G para los sitios de reconocimiento en las S,. Esto permite la unin de ambos tlamentos (Fig. 66.15). Pero la S, unida al ADP y al Pi no tiene gran afinidad por la actina. Esta unin dbil permite, primero, la liberacin del Pi del centro activo, lo que aumenta la afinidad entre ambas protenas y luego esta afinidad ser an mayor al liberarse el ADP. La separacin de este ltimo causa un violento cambio conformacional, que ocasiona la flexin de S, y S,, y queda ahora el ngulo de 45"con respecto al filamento fino. Este cambio se traduce en un deslizamiento del filamento delgado con respecto al grueso en unos 7,5 nm. Al mismo tiempo, este cambio provoca la unin de un nuevo ATP a la cabezade miosina, y esta unin, a su vez, provoca laseparacin de ambos filamentos, pero ya la posicin entre ellos no es la misma. La S, se enfrenta ahora a un sitio eu la actina que se encuentra ms cercano al disco Z. Recomenzar el ciclo de nuevo al producirse la hidrlisis del ATP, pla S,, unida al ADPy al Pi podr volver a unirse al prximo sitio en el filamento fino. Todo esto ocurre en ambos lados de la sarcmera, y a su vez en mnchaS interacciones actina-miosina. As, los filamentos finos que se encuentran anclados en los discos Z, se van interdigitando entre los gruesos, en sentido contrario en ambos lados de la sarcmera, lo que provoca que sta se acorte. An no se tiene una certeza del nmero de puentes que se forman entre ambos famentos. Un lamento grueso contiene aproximadamente 500 yemas. Se ha calculado que una yema interacta con una actina 5 veces por segundo. En este modelo y en muchos de los que se describen, slo se utiliza una de las cabezas contenidas en el extremo del brazo mvil. Parece que la contraccin ocurre con la utilizacin de una sola de las cabezas, pero no puede excluirse un mecanismo que involucre la transicin de la unin de una de las cabezas primero, y luego de la otra. El reconocimiento actina-miosina parece producirse por interacciones inicas. Existen residuos de lisina en la S, y residuos de cido glutmico y cido asprtico en la actina, pero no faltan las asociaciones estereoespecficas en zonas hidrofhicas de ambos sitios de reconocimiento. La relajacin se produce al disminuir nuevamente las concentraciones de calcio hasta los niveles iniciales. La tropomiosina,otra vez bajo el influjo de la Tnl, vuelve a interferir en lainteraccin entre la actina y lamiosina; losfamentosvuelven a deslimrse pasivamente, peroen sentido contrario, y lasarcmera adquiere de nuevo su longitud original. Ya en la relajacin, algunos investigadores han descrito que la mayora de las cabezas se encuentran unidas al ADP y al Pi, y los brazos en ngulos de 90",separados

Fig. 66.14. Corte transversal dc la disposic i h entre los filamentos demiosina (11. actina (2) y troporniesinn (3): a l en ausencia de calcio inico, la tropoiiiiosina entorpece la unin b) el ralentre actinas y miosilia~; cio causa u n carnhiu runforniacional, de modo que alior se hiice posihle el reconneimicnto entre los filamentus fino y grueso.

de la actina. Otros han observado que por una de las cabezas se enlaza a la actina, a un ngulo de 45",pero por la otra se encuentra separada. Todava otros resultados parecen sugerir,aunquesepareceserelms probable, que en la relajacinexistenunsinnmero de posiciones de las cabezas de miosina no unidas. Eventos en el sarcoplasma y los sarcosomas. Aporte energtico para la contraccin La hidrlisis del ATPaporta la energa inmediata qoese utiliza eii la contraccin muscular. De toda la energa liberada, una parte se utiliza en este proceso y la otra se pierde como calor. Sin embargo, como ya se ha visto antes, los procesos biolgicosson muy eficientesy econmicos,si se les compara con las maquinarias fabricadas por el hombre. De toda la energa empleada por un automvil se pierde del 80 al 90 % en forma de calor y slo el resto se utiliza en la realizacin de trabajo mecnico. Como producto de la cootracciii slo se pierde como calor del 30 a 140 %. La cantidad de ATPque seencuentra en elsarcoplasma seagota rpidamente en fraccionesde segundos, y aun cuando las cantidades de ATPconsumidas por el msculo soii grandes, no se notan cambios en sus niveles celulares, ni en los del ADP y el Pi, pues los mecanismos de reposicin del ATP son muy eficientes. El ATP, en primera instancia,se repone a partir de los almacenesde creatinafosfato (05 %)del sarcoplama, en una reacciii catalizada por la creatina quiiiasa: creatina Pi

- +

ADP W creatina

ATP

Durante el reposo vuelve a almacenarse este metabolito al invertirse esta reaccin, cuando deja de consumirse ATP. Las concentraciones de creatina-fosfato en un individuo son proporcionales a la cantidad de su masa muscular, y un tanto por ciento de la creatina-fosfatose descompone diariamente por un proceso no enzimtico (Fig. 66.16). O H N-H O--P-N-0--P-N-11 l

c-N-cHrcooC N CHrCOOI

Il

oFig. 66.15. Esqucrna del ineranismo d e interaeein de filarncntos finos y gruesos durante la contraccin. Se escoge una cabeza de miosina del filamento grueso y varios sitios dc nnin en el filanicnto lino para esquematizar el mecanismo del desli~an~ientc\: 1) eahera de misina unida al ADP y al Pi (anibos filamentos estn separados); 2) la ininsina se une a la actina, al producirse un aumento del ion de calcio en el citoplasma; 3) al separarse del centro activo los productos de la hidrlisis del A'rP. se dobla la cabeza y se p m d u r e el deslizamiento; 4) al unirsc de nuevo un ATP, se separan; 5 ) al hidrolizarse el ATP se pueden unir de niicro, pera a otro sitio de iiniii en la actiiia.

lk
H-N=c
l

H
I

/
\N-C/

C=O
\
Hl

CH,

CH,

Fig. 66.16. Formacin de creatinina. La creatinina se elimina por la orina y en un indii~iduo, el total eliminado en las 24 h es casi una constante, pnes se corresponde con su cantidad de niasa muscular. Si se desea comprobar si una muestra de orina es de 24 11, b a s b determinar las conecntrariunes totales de creatiiiinii en la muestra recogida.

Los almacenes de creatina-Pi duran poco, empieza a acumularse ADP y, de inmediato. comienza la formacin de ATP al activarse los orocesos cataliticos en el msciilo: la glucogenlisis, la gluclisis, la beta oxidacin de los cidos grasos, el ciclo de Krebs y la cadena respiratoria. Estos 3 ltimos procesos ocurren en los sarcosomas (ver la jerarquizacin del metabolismo en el msculo en ejercicioen elcaptulo62). Los depsitos musculares de glucgeno, cuya degradacin es activada,representan aproximadamente del 1al 2 % de la masa total de este rgano. Otro proceso utilizado en el msculo, que aprovecha la energa contenida en el ADP, es el que lleva a cabo la eniima adenilato quiiiasa: 2 ADP W ATP

+ AMP

Estado de ttano
Se produce cuando las concentraciones de ATPdescienden por debajo de 5 mM en el sarcoplasina. En este estado, ambas cabezas de la miosina se eiicueiitraiiunidas al

filamento de actina y sin posibilidades de separarse. Se ha calculado que cuando aproximadamente la mitad de las cabezas de miosina estn unidas, solamente las 217 partes de los sitios de actina estn ocupados. Este estado a nivel molecular se traduce a nivel muscular en la imposibilidad de relajacin del msculo.

hpeetos especiales del msculo cardaco

Lacontraccin en este tejido es muy similar a la del msculo estriado; sin embargo, en este rgano las contracciones no dependen de la voluntad, pues son espontneas, aunque sobre ellas influya el sistema nervioso. El metabolismo de sus clulas es ms aerobio. Los filamentos de los que depende la contraccin tambin son filamentos finos de actina y los filamentos gruesos, de miosina; adems, ocurre por el mismo mecanismo de deslizamiento entre estos filamentos. Al microscopio, el aspecto de este tejido es semejante al msculo voluntario, al observane las estriaciones, y en l tambin seencuentran las sarcmeras. Una particularidad del deslizamiento entre las fibras de actina y miosina en la fibra muscular cardaca lo constituye el sobresolapamientode los filamentos de actina, enel centro de la sarcmera, en la banda M (Fig. 66.17), lo que produce un determinado engrosamiento de la clula en la contraccin y de nuevo regresa a su dimetro menor, al extenderse en la rela,jacin. Otra particularidad consiste en el mecanismo de extensin de la fibra muscular cardaca durante la relajacin. En los msculos esquelticos,la propia nnin de stos a los huesos y la produccin del movimiento contrario por la contraccin de otros msculos son responrables, en parte, de su extensin. Se ha sugerido que gran parte de la responsabilidad del movimiento del msculo cardaco se debe a las fibras colgenas y elsticas que rodean a las fibras musculares cardacas. Cada fibra muscular seencuentra encerrada en una malla de fibras colgenas, qne la rodean en forma de hlices izquierdas y derechas (Fig. 66.18a). A su vez, las diferentes mallas que rodean a cada clula se encuentran conectadas entre s, de tramo en tramo, por ramificaciones. Estas extensiones, como se observa en la figura, se extienden de una clula a otra y se tuercen sohre s mismas. Cuando ocurre la contraccin, se produce el acortamiento y ensanchamiento de cada sarcmera y,por ende, de todo el msculo en su conjunto. En estas condiciones, la colgena -que es una fibra inelstica- se tensa. Los espacios dejados por la red, que tienen la forma de paralelogramos, se estrechan en la direccin de la fibra y se tuercen ms las extensiones entre las clulas (Fig. 66.18 h). Al cesar la contraccin y sobrevenir la relajacin, la tensin creada en toda la red devuelve a la fibra muscular su longitud y ancho anteriores, lo que hace que los paralelogramos se anchen de nuevo en la direccin longitudinal de la fibra (Fig. 66.18 c). Asimismo, se ha observado, como componente del tejido muscular, a la elastina, que s puede estirarse hasta 170 veces, sin perder su forma. Sin dudas, esta protena tambin debe contribuir a la tensin y distensin de este tejido muscular. Se ha calculado que su nmero de contracciones, durante la vida de un individuo, es de tres billones de veces.

Fig. 66.17. Sahrelaparnientode los iilanieritus finos y gruesos en el iiiilsculo cal-dkaeo: a) sarchrncra en relajacin y b) en wntracein.

Aspedos especiales del msculo liso

Este tejido tamhin se contrae sin la intervencin de la voluntad del hombre. Se encuentra en las paredes del estmago, los intestinos y los vasos sanguneos, entre otros. Sus clulas contienen un solo ncleo y al microscopio no se observan las estriaciones caractersticas de los msculos voluntario y cardaco. No obstante, posee los mismos filamentos de actina y miosina que se extienden de extremo a extremo de estas clulas, las cuales tienen forma fusiforme. Como los filamentos no se disponen de manera regular, las estriaciones no se observan, al no coincidir en el misnio plano

transversal los centros de los filamentos de miosina. La contraccin en este tejido es ms lenta y mantenida, y el gasto de ATPes, como promedio, 7 veces menor. La estmctura polimrica de los iamentos de actina F es semejante a la del msculo esqueltico,pero la secuencia aminoacdica de la actina G vara algo. Sin embargo, no se han detectado diferencias funcionales importantes debidas a ellas. La miosina tambin es diferente a la encontrada en el tejido muscular estriado, pero es la misma que se encuentra en el resto de la$clulas nomusculares. Los filamentos gruesos que se forman no tienen un patrn repetitivo regular. La funciii ATPsica de estamiosina difiere en cuanto a su actividad,es 10 veces menos activa y est regulada por los iones de calcio. La tropomiosina se halla unida a la actina, pero no contiene troponina; est regulada por un mecanismo covalente y slo hay contraccin si ella se eucucntra en su forma activa (fosforilada). La S, interacta con la actina cuando una de sus cadenas ligeras est fosforiladaen un residuo de serina. La fosforilacin la lleva a cabo la quinasa de la cadena ligera de la iniosina (MLCK, miosin light chain kinase), cuando sta, a su vez, se uue a la Caz' -CM que la activa g entonces puede fosforilar,pero, al mismo tiempo, la MLCK se puede fosforilar por una protena quinasa dependiente de AMP; sta, fosforilada, tiene poca afinidad por la Caz+-CM y entonces ocurre la relajacibn del msculo liso. Este mecanismo es el que provoca la broncodilatacin en el asma, por la accin de la adrenalina: Cadena ligera de la miosina

Cadena ligera de la miosina - P

Pig. 66.18. &quema de la disposicin dc las fibras colgenas que rodean las fibras del inseulo cardaco: a) se observan las hCliees derechas (1) e izquierdas (2) de fibras colgenas que enrollan la fibra muscular cardaca (3). Tambin se ven los filamentos torcidos de eolgcna que unen las clulas entre si (4); b) en contraccin, se nota cmo se estrechan los paralelogranios (5) y C) cmo estos mismos se cnsaiichan en la relajacin.

Adrenalina Desencadena la contraccin

El movimiento en otras clulas

Se ha encontrado que una gran cantidad de clulas tambin contienen actina y miosina, pero al parecer stas uo forman los mismos tipos de filamentos descritos; sin embargo,sesabe que intervienen en la mayora de los diferentes tipos de movimiento existentes. Normalmente, en las clulas no musculares existe una proporcin mayor de actina que de miosina (alrededor de 10 veces). De todas las protenas celulares, el 10 % corresponde a la actina. En general, estosfilamentosseencuentran paralelos entre s y enla direccin que toma el ejc longitudinal de la clula, en dependencia del tejido del que forme parte. stas se observan bien en las microfotografas electrnicas y por microscopia de inmunofluorescencia. Por este ultimo mtodo se ha hallado, generalmente, la presenciade tropomiosina y de a-actinina, pero no la de troponina. Los movimientos celulares parecen estar regulados tambin por iones de Caz* y ATP. Es posible quela a-actininauna entre s, deforma transvenal,alos fdamentos de la actina F.

Frente a determinados estmulos, muchos de los movimientos de las clulas se producen al formarse filamentos, a partir de los monmeros de las protenas mencionadas; luego, cuando se produce el movimiento, desaparecen al desagregarse. Vamos a describir brevemente cmo se produce el movimiento de las microvellosidades de las ctlulas que revisten la luz intestinal. stas tienen 1 pm de longitud y 0,1 ym de dimetro; una sola clula posee miles de estas microvellosidades. Debido a la gran cantidad de estas prolongaciones, se le ha llamado borde de cepillo al aspecto de esta superficie, cuando es observada en un corte al microscopio. Cada microvellosidad contiene un hai de microfilamentos que se unen en su extremo libre a la membrana plasmtica de forma no conocida. Alo largo de toda la microvellosidad se encuentran aproximadamente40filamentos de actina. Hacia el interior, los filamentos se renen en una especie de malla. La direccin de los iiamentos es igxil a la de una semisarcmera; la base de la inicrovellaiidad secorrespondeconla porcin central de tula sarcmera y el extremo de eUacon la Liea 2. As,cuando se produce la contraccin, la microvellosidad se hunde hacia la clula (Fig. 66.19). En la base de los filamentos tambin se han observado otros filamentosde miosina, semejantes a los del msculo con su doble direccionalidad. Cuando stos interachan con los de actina ocurre un acercamientoentre los filamentos vecinos.

Inhibidores de los movimientos celulares

Existen drogas que interfieren los movimientos celulares. La citocalasina B se une aunode los extremos de los filamentos de actinae interfiere en el ensamblaje de stos. A su vez, la faloidina evita su despolimerizacin.La colchicina, en cambio, bloquea la polimerizacin de los microtbulos.

Distrofias musculares
Son enfermedadesraras v nrevdecen entre S a 40 nor cada millbn de habitantes: se caracterizanpor debilidad muscular,atrofiay prdida de los reflejos. Las 2 ms comunes son la deDuchene (DMD) y la de Becker (BMD); se diferencianpor la edad decomienzo dela enfermedad y su gravedad; ambasson recesivas y estn ligadas al sexo (slo los varones la padecen). El gen responsable es el de la distrofina; su protena representa el 0,002 % de toda la protena muscular y se asocia a la cara interna de la membrana plasmtica de la clula muscular, donde, probablemente, ancla a protenas como la ankirina y la espectrina del eritrocito. Las mutacionesobservada en el gen son del tipo de lai deleciones y duplicaciones. Los individuos con DMD no tienen distrofina detectable; las distrofinas de la BMD tienen tamaos alterados y son semifnncionales. La DMD se establece entrelos 2 y 5 aos, hay debilidad progresiva y mueren ms o menos a los 20 aos. La otra comienza entre los 5 y 10 aos, su evolucin es ms benigna y a veces duran toda la vida.
" A

Fig.hh.19. Keprrsentaeiii de las niicro\ellosidades del borde en cepillo de las clulas del epitclio intestinal: 1) iiiicrorellosidad. 2) filamento en corte longitiidinal, 3) red dc lilaineiitos de la base.

Resumen
En el organismo encontramos diferentestejidos wntrctiles: el msnilo estriado (tambin llamado esqueltico o voluntario), el tejido museular liso y el cardaco. Las clulas del tejido muscular voluntario tienen estructuras caractersticas de este tejido; cada una presenta varios ncleos y haces de miofibrillas, que se componen, fundamentalmente, por 2 tipos de filamentos: los finos, compuestos por la protena acna, y los gmesos, por miosina. Estos tlamentos estn organizados longitudinalmente en saremeras, y transversalmente estn dispuestos de forma tan regular que le dan un aspecto estriado a este msnilo.

Al micmsmpio ptico se observan bandas claras y oseuras, perpendiculares a las miobrillas. Las bandas oscuras o bandas A se comemonden con la parte central de la sarcmera, y las claras o bandas 1 se corresponden con los extremos de aqulla. En las bandas 1los filamentosfinos (de adina) corren solos; en las bandas A se interdigitan los lamentos 5 0 6 con los gruesos (de miosina), excepto en la regin central de la sarcmera, donde slo se encuentran los lamentos gruesos. Otra estmdura caracterstica del msculo estriado es la organizacin del retculo endoplasmtico Liso, que rodea las miofibrlas como un guante. A su vez, el sarcolema posee invaginaciones que aseguran un contacto muy ntimo, a todo lo largo de la fibra muscular con el reticulo sarcoplasmtico: son los tubos T. En la estructura del retculo sarcoplasmticose almacena el ion calcio, elemento importante en la regulacin de la contraccin muscular. Los filamentosnos y gruesos estn dispuestos de forma alque se interdigitan unos con otms. Los finos, dispuestos en 2 grupm, se encuentran anclados a ambos lados de la sarcmera y no se tocan en el centro de sta; estn constituidospor 2 largos pomems de acna G y ambos se enrollan en hlice. Los gruesos quedan al centro de la sarcmera y por sus extremos se interdigitan con los nos. Los filamentos gruesos son agregados de cientos de molculas de miosina; cada una de ellas posee un extremo alargado y por el otro extremo forman una estructura globular. Dos de &tos se enrollan por el extmmo alargado y quedan las 2 cabezas globularrs en el mismo extremo. Al agregarse, las partes globulares o eabezas quedan en la supercie del filamento grueso y dirigidas a ambos extremos del agregado, mieniras que las colas forman una porcin desprovista de cabezas hacia el centro del lamento grueso. Las cabezas de los iamentos gruesos hacen contacto con los finos y tienen la actividadATPasa. La energa liberada por la hidrlisis del ATPen estas subunidades provoca cambios conformacionales que conducen a que ambos tipos de filamento se deslicen e interdigiten, de modo que la sarcmera se acorte. Al acortarse todas las sarcmeras componentes de un msculo, se produce la contraccin de ste. La regulacin del proceso depende fundamentalmente de otras protenas: la tropomiosina y la troponina, y del ion de calcio. A concentraciones de Caz' siolgicas, la interaccin entre ambos filamentosse encuentra inbibida. A causa de un estnulo que proviene de los nervios colinrgieos se produce la liberacin de este ion (almacenado en el retculo sarcoplasmtico). ste se une a una de las subunidades de la troponina, lo que provoca cambios conformacionales que permiten la interaeein entre los lamentos y, por ende, la contraccin. La energa inmediata para la contraccin la aporta el ATP citoplasmtico. Tambin se almacena la energa en los enlaces fosfato, ricos en energa de la creana-fosfato, que mediante una reaccin reversible, catazada por la creatina a energa del enlace fosfato al ADPconfonnacin de ATP, pero quinasa, traasere l a glucogenlisis se activa, y la gluelisis y la beta oxidacin de los Bcidos luego l g m m aportan sus productos a la respiracin celular, la que produce la mayor parte de la energa para la contraccin. Los otros tejidos musculares son e1 cardaco y el liso. Cada uno posee caractersocas propias, pero en esencia el mecanismo de la contraccin muscular es el mismo.

Ejercicios
1.Haga unesquema de unasarcmera y seale enl lasdiferenteshandai y estriaciones. 2. Describa cmo estestmcturado el filamentofino. 3. Describa cmo est estructurado el filamento grueso. 4. Seale los pasos que se producen entre una interaccin de 13 S, con la actina y la siguiente interacciu. 5. Cmo se produce la relajacin?

El tejido adiposo est formado por clulas especializadas, con una tendencia particular a almacenar grasa en forma de inclusiones citoplasmticas.Estas clulas son un constituyente normal del tejido conectivo laso; predominan en determinadas zonas y se organizan en lohulillos, hasta formar el tejido adiposo, que representa, por tanto, una variante especializada del tejido conectivo laxo. La clula comienza a almacenar grasa, primeramente, en forma de pequeos cmulos aislados, los cualesse renen y forman gotas mayores. Cuando aparecen mc inclusiones en el citopla~ma, tienden afusionarse y se forman cmulostodala mayores; por ltimo, tuda la clula se transforma en una gota voluminosa y se dilata tan considerablemente que su protoplasma queda reducido a una fina pelcula, la cual rodea la acumulacin grwosa. El ncleo es rechazado hacia la periferia de la clula y experimenta una deformacin por compresin, de manera que se adelgaza y adopta una forma semilunar (Fig. 67.1). Los adipocitos son mucho ms activosmetahlicamente de lo que se supona al principio y, por tanto, necesitan una buena irrigacin sangunea. Dentro del lobulillo cada clula grasosaest d e n i d a por fibras reticdares y regada por abundantescapilares. En un individuo de complexin media, el tejido adiposo constituye, aproximadamente,el 15 % del peso total del cuerpo, aunque debe sealarse que estas citias varan deacuerdo con el estado nutricional del hombre. As,se ha demostradoque en condiciones extremas ste puede alcanzar hasta el 50 % del peso corporal (en la obesidad), y menos del 1% en estados graves de desnutricin. Aunque las clulas adiposas se encuentran en muchos te,jidos del organismo, tienden a concentrarse en determinadas localizaciones que en el hombre son, fundamentalmente, el panculo adiposo subcutneo, el intermuscular y la cavidad abdominal.

Finente: Stryer L.: Bioquiinica. 2da. edicMn, Ed. Hevert, S.A., 1982. Kg. 67.1. Micrografa electrnica d e un adipucito. Se observa el nrlco trlinlar rechazado hncia la periferia por la grasa dinacenada en el citoplasma.

Funcin biolgica
La funcin principal del te,jido adiposo es sinteti~ar y almacenar triacilglicerole,, ascomo movilizar estas reservas para satisfacer las necesidades energticas del organismo. Las grasas parecen ser la forma ms efectiva de almacenar energa en los organismos vivientes. La oxidacin de 1g de estas sustancias libera ms energa (Y3 kcal) que la producida por la oxidacih de 1g de glcidos (3,7 kcal). Por otra parte, la

insolubibdad en agua de las grasas permite almacenarlas de manera compacta,prcticamente sin agua, lo cual no es posible cuando se reservan glcidos hidrfilos, como el glncgeno. Se ha calculado que para almacenar energa en formade grasas, suficiente para 40 das de ayuno, un hombre adulto debe pesar cerca de 70 kg, mientras qne si estas reservas fueran de gluc>geno,supeso tendra que ser de 140 kg. La grasa de reserva cumple otras funciones,como son las de aislamientotrmico y amorti@ador fisico contra traumas.

Composicin qumica
El tejido adiposo es uno de los de menor contenido hidrico del organismo,con un 30 % aproximadamente. Contiene del 4 al 7 % de protenas, mientras que los Ipidos constituyen ms del 60 %.De stos, ms del 99 % est formado por triacilgliceroles. La composicin en cidos grasos de las grasas neutras en los depsitos vara con la especie y dentro de cada especie, con la dieta. As, la alimentacin prolongada de seres huinanos con dietas ricas en aceite de maz conduce a aumentos significativos del contenido de cidos grasos insaturados, al cabo de 20 semanas bajo esa dieta. Es popularmente conocido que la calidad de la grasa del cerdo difiere de acuerdo con el tipo de alimento que ha recibido durante el engorde.

Formacin de depsitos de grasa (Xpognesis)

Los adipocitos forman grasas neutras a partir de fuentes lipdicas y no lipdicas.

Formacin de depsitos de grssa a partir de fuentes tipdicas

Los triacilglicerolesllegan al tejido adiposo por va sangunea, transportados por quilomicrones (QM) y lipoprotenas de muy bajadensidad (VLDIJ(captulo 48).. Los QM se producen en las clulas intestinales y constituyenla forma principal de transporte de los triacilglicerolesingeridns con los alimentos. Las VLDL son producida? por el hgado y constituyen la forma principal de transporte de los triacilgliceroles sintetizados en este rgano. Estas lipoprotenas contienen una proporcin elevada de grasas neutras: los QM,88 % y las VLDI,,56 %. Al llegar al tejido adiposo, los triacilgliceroles constituyentes de los QM y las VLDL son hidrolizados por la enima lipasa de lipoproteinas, presente en el endotelio capilar. Los cidos grasos, productos de la hidrlisis,difunden a travs de las clulas endoteliales, atraviesan la membrana de los adipocitos y ya dentro de las clulas se reesterifican al glicerofosfato originado a partir de la fosfodihidroxiacetona de la gluclisis y se almacenan as hasta su posterior utilizacin. La glicerina,sin embargo, no se fosforila en el tejido adiposo, en el cual, a diferencia del hgado. no hay actividad significativa de gliceroquinasa. La actividad de la lipasa de lipoprotenas, tambin conncida como factor aclarante del plasma, es estimulada por la insulina, en tanto que la heparina libera a la enzima desde el endotelio capilar hacia la sangre.

Formacin de grasas a partir de fuentesw iipdicas

Las clulas adiposas cuentan con todas la5 enzimas necesarias para sintetizar las grasas neutras a partir de los glcidos. En realidad, la glucosa es uno de los precursores ms importantes de la sntesis de grasas en el tejido adiposo. Todos los elementos

necesariospara Ia sntesisde triacilglicerolespueden obteiierse a Wavs del nielaholisnio de esta siistaiicia. As, la glicerina deriva de la gliicosa mediante los fosfatos de triosa en la gluclisis:

H
I

M
I

NADPH.H~

H
NADP+
7
~

C =O
1
4

H - C OH
t
1

*
A

-~

H-Cl

OH

H - C OH

C=O

H - ~ C - OH
NADP~

CH;O---

@ . ,

CH;O-

(P,

'-\,

NADPM.II'

&H;- O

( 3

El glicerofosfato,como se vio en el capitulo 49, se esterifica con derivados de COA de los cidos grasos, que originan una grasa neutra. Los Lidos grasos tambin pueden sintelizarse a partir de la glucosa, a travs de una va nis larga, integrada por: gluclisis, descarboxilacin del cido pirivico con formacin de acetil-COA y posteriormente de cido ctrico, y biosntesis citoplasintica de cidos grasos (captulo 49). El NADPH necesario para esta sntesis puede alcanzarse mediante el catabolismo de la glucosa en la va de las pentosas y tambin por la reaccin de la eninia mlica. Finalmente,es posible obtener toda la energa necesaria para este proceso durante la oxidacin de la glucosa hasta CO, y H,O. Por esta razn,en un individuo normal toda la glucosa ingerida que sobrepase las capacidades del organismo para utilizarla o almacenarla en forma de glucgeno,es transformada y almaceiiada como grasa7 neiitras en el tejido adiposo. Tericamente, es posihle la formacin de triacilgliceroles a partir dc aminocidos. Los aminocidos glucognicos pueden aportar tanto la glicerina como la acetil-COA. Los aminocidos cetognicos originan solo acetil-COA y a partir de ste, cidos grasos. Si bien este proceso debe ser importante en los animales carnvoros, cuya alimentacin es rica en protenas, no se conoce con exactitud en qu medida los airiinocidos contribuyen ala formacin degrasas en el tejido adiposo humano, pero stano parece ser muy significativa.

Regulacin de la formacin de los depsitos de grasa

La formacin de grasas en el tejido adiposo es influida, adems de por los mecanismos de control alostrico de la sntesis de cidos grasos, por la concentracin de insulina circulante. Esta hormona estimula la entrada de la glucosa en las clulas adiposas y su posterior transformacin en grasas neutras. Por tanto, niveles elevados de insulina en sangre, como los que se observan despus de una comida rica en glcidos, conducen a un aumento de los depsitos de grasa. Por otra parte, la insulina inhibe la degradacin de los triacilglicerolesen el te.jido adiposo, mediante la activacin de lasfosfatasas de protena, con lo que predomina la forma desfosforilada de la lipasa intracelular. Este efecto de la insulina se ha utilizado para estimular el aumento de peso de individuos que, por razones mdicas o estticas, aslo requieran.

Movilizacin de las grasas del tejido adiposo (Iiplisis)

Conio sealamos anteriormente, los adipocitos no slo deben ser capaces de sintetizary almacenar gi-= neutraq, sino de movilizar estas reserva haciaotros tejidos,

siempre que sea necesario al organismo. Este proceso, tambin denominado liplisis, tiene lugar gracias a la presencia de una,lipasa intracelular que hidroliza los tiiacilgliceroles en glicerina y cidos grasas. Estos, a su vez, atraviesan la membrana plasmtica y difuiiden hacia la sangre, que los lleva hacia otros tejidos donde sern utilizados. Los cidos graios libres se transportan por la sangre, unidos a laalbmina. Durante el ayuno prolongado los niveles de cidos grasos libres eii sangre pueden aumentar considerablemeiitey ms an en la diabetes no controlada, lo que indica un predominio de la actividad lipoltica en el tejido adiposo.

Regulacin de la liplisis
La rqulacin de la liplisis se efecta principalmente en la lipasa intracelular. Se sabe que la actividad de esta enzima es estimuladapor el aumento de las concentraciones de AMPc, el cual activa a las quinasas de protena y propicia la fosforilacin de la lipasa intracelular. Las hormo~iai adrenalina, noradrenalina,somatotropinay glucagn aumentan los niveles de AMPc en los adipocitos y, por tanto, la liplisis. Durante estados en los que aumentan las secreciones de estas hormonas, como el ayuno, el estrs emocional, la actividad muscular prolongada u otros, hay un aumento de la actividad lipoltica, evidenciado por las concentraciones elevadas de cidos grasos libres y glicerina en la P . Los cidos grasos se incorporaii desde la sangre hasta los difereutes tejidos con bastante rapidez. Allpueden ser degradados y suministrar del 25 a150 % de la energa, segii el tejido y la situacin metahlica; una parte puede ser reesterificada. En las clulas musculares del corazn y el msculo esqueltico se encuentran cantidades apreciables de lpidos. En la membrana plasmica de las clulas de la niayora de los tejidos existe una protena fijadora de cidos grasos, que los interna mediante un cotransporte con sodio; se ha identificado,adems, una pmteiaZ que liga cidos grasos en el citoplasmade los principales tejidos. Se supone que cumplaintraceldarmente el conietidoque la albmina sricadeseinpeka en el transporte extracelular de los cidos grasos de cadena larga. Las hormonas tiroesimulina, ACTH y lipotropinas hipofisarias tambin son estimulantes de la liplisis. Como sealanlos antes, la insuliua ejerce un efecto inhibitorio sobre la liplisis, posiblemente por la disminucin de la concentraci~i del AMPc inti-acelular. En conclusin, el tejido adiposo es una estructura muy bien ajustada a las neccsidades fisiolgicasdel organismo. Los procesos de sntesis y degradacin de las grasas neutras estn sujetos a mltiples mecanismos de regulacin y control, que permiten una mejor adaptacin del animal a las diversas condiciones en que puede encontrarse durante su vida.

Desbalances en la regulacin de la lipognesis

El desbalance por defecto obedece, casi siempre, a insuficiencias alimeiilarias o de la absorcin; conduce a la desnutricin protenico-calricay, en su furnia ms pura, al marasmo (captulo 72). Tambin se observa en la diabetesmellitus tipo 1 (captulo 75). E1 desbalance por exceso da lugar a la obesidad.

Obesidad
El criterio ms aceptado para clasicara un sujeto como obeso es el valor porcentual del peso ideal para la talla rcal. Se considera sobrepesu cuando este valor se halla entre

11 1 y 120 %.En el obeso, el peso se excede en ms del 20 % del ideal, que aparece en las tablas, es decir, el valor porcentual del peso que le corresponde sobrepasa el 120 %. En los adultos es ms til el ndice de masa corporal (LMC), que estdado por la relacin entre la masacorporal (en Kg) y el cuadrado de la talla en metros (captulo 72). Podemos distinguir 4 causas de obesidad:
Gentica

a
Endocrina

v ............................ Obesidad i ............................

HipotalAmica

Ciertamente, la causa de la mayora "abrumadora" de los casos de obesidad es la que aparece en la porcin inferior del esquema, es decir, el exceso de ingesta calrica en relacin con el gasto. El hecho de que en la obesidad hay un componente que se trasmite hereditariamente, lo demuestra la proporcin de hijos obesos de padres que no lo han sido, es S veces menor que entre las parejas en las que al menos un miembro es obeso. En la dcada de los S0 se descubri un tipo de mutacin que produce ratones sus colaboradores localizaron el gen obesos. Ms recientemente, en 1994, I: Zhar~gy afectado (gen ob) y su homlogo humano. La intluencia del medio familiar parece de segunda importancia, tomando en cuenta esindios epidemiolgicos.As, el peso corporal de los hijos adoptivos de padres no obesos concuerda ms con el de sus padres, que con el de la pare,ja que los ha criado; adems, los gemelos univitelinos,aunque se crien por separado, tienen mayor correlacibn entre sus pesos que los mellizos o los hermanos de partos no gemelares. Las lesiones en el hipotlamo son capaces de provocar obesidad en los animales deexperimentacinye&en decenas decasos de obesidad reportados en seres humanos, debido a hunores y traumatismos craneoenceflicos. Entre las causas endocrinas figuran el sndrome de Cushing (captulo 77), los tumores activos de clulas B-pancreticas (nsulinomas) y la hiperinsulinemia de la 1(captulo 75). Sin embargo, en ms del Y 8 % de los casos de obesidad diabetes tipo 1 no parece haber otro origen que laexcesiva ingesta calbrica. Aunque de acuerdo con lo anterior, la forma ms comn de obesidad sera fcil de reducir mediante la disminucin del aporte calrico de la dieta, el incren~ento de la actividad fsica, o ambas medidas, en la practica la mayora de los obesos fracasan en sus intentos por lograrlo. Sucede que factores secundarios importantes intervienen en una amplia gama de variaciones individuales. En ocasiones, la aparente gula es determinada por causas psicolgicas, las cuales se manifiestan por una ansiedad que se atena con el acto de comer. Por otra parte, cualquier observador comn ha conocido personas que aparentemente, y de hecho, se exceden en el comer, sin que modifiquensu peso habitual, ascomo tambin sujetos obesos que disminuyen la ingesta e incrementan su actividad fsica, sin que los dividendos alcanzados en la reduccin del peso corporal sean significativos. Est bien establecido que en muchos casos de obesidad existe un aumento del nmero y el tamao de los adipocitos, o de ambos aspectos a la vez. Se trata de

hiperplasia cuando existe un aumento en el nmero de adipocitos (normal de 50 a 150 x 10').El clculo del nmero de adipocitos se basa en la relacin existente entreel peso de lagrasa corporal total y el peso de un adipocitn. Cuando el nmero de clulas adiposas es normal, pero de mayor tamao (ms de 100 mm de dimetro), existe hipertrofia. Muchos autores creen que el primer aiio de vida es decisivo en este contexto,dado que el tejido adiposo eii los seres humanos tiene un periodo finito de proliferacin, a s t a el primer ao de vida. En la comprendido desde la trigsima semana de gestacin h adolescencia hay un resurgimiento del perodo prolifcrativo, aunque de menor magnitud. La sobrealinientacin en las primeras pocas de la vida originara un increinento en el nmero de clulas adiposas y la etapa proliferativa podra prolongarse por un perodo mayor, hecho que hasido demostrado en ratas. De acuerdo con este enfoque, una parte de los casos de obesidad estara deterniiiiada por la alimenlacin durante los primeros meses de la vida.

Peculiaridades del metabolismo en la obesidad No se puede descartar, sin embargo, la existencia de caractersticas sutiles, propias del metabolismo energtico de algunos obesos. Se investiga el producto del gen ob, la protena leptina. Prod~cida~por el tejido adiposo, esta protena provoca una notable prdida de peso en ratones obesos mutantes, pero tambin en ratones norn~ales con obesidad inducida por la dieta. La leptina ejerce sus efectos de control del tejido adiposo por 2 vas: una que disminuyela ingestin de alimentos y la otra que iocrernenta el gasto energtico. La disminucin de la ingesta parece ser la consecuencia de una menor liberacin de un neurouotido - . v desde el ncleo aroueado. en las vecindades del hiootlamo. En cuanto al incremento del gasto energtico,ste parece ser mediado por receptores Iieta adreiirgicos en el tejido adiposo pardo, lo que reiulta en producciii excesiva de calor en ese tejido. El <ido adiposo pardo abunda en los animales; su funcin biolgica parece ser la generacin de calor. En los animales que salen de un perodo de hibernacin es particularmente activo. Hace poco se demmtr su presencia en s e r e hmnmosnormales (Fig. 67.2), y su ausencia eii obesos. La liplisis en el tejido adiposo pardo responde especialnieiitea la noradrenalina liberada por el sistema simptico. Lo caracterstico del metabolismo aqu es que en sus abundantes mitocondrias puede producir un consumo energtico considerable, mediante la oxidacin de sustratos eii la cadena respiratoria, sin el debido acoplamiento ala sntesis del ATP. Esta funcin termognica la posee una protena integral de la membrana interna de las mitocondrias, especfica de ese tejido, la termogenina o protena desacopladora (PDA); es un dniero de 32 kD y 306 aminocidos, que abarca 6 dominios, los cuales se expanden 6 veces a travs de la menibrand interna mitocondrial, de la cual constituye e1 17 % de las protenas totales. Se trata de im canal de protones y, por tanto, tiene la capacidad de disipar el gradiente electroqumico generado por la respiracin, lo que resulta en un exceso en la produccibn de calor. Sin embargo, la protena requiere activarse porque normalmente el canal de protones se mantiene cerrado, en virtud de la unin de nucletidos de guaniiia a la termogeiiina. Existen dudas en cuanto a la significacinde este sistema en el ser humano, por la presencia muy reducidadel tejido adiposo pardo en l; en camhio,se ha observado con inters la homologa secuencia1 que presenta el transportador de ADPIATP de las mitocondrias y la protena desacopladora del tejido adiposo pardo. Ambas protenas, adems, tienen sitios de unin para nucletidos. Finalmente, consideraciones tericas permiten prever que, bajo determinadas circunstaiicias,el transportador de ADPIA'SP podra servir como conductor de protones.

Fuente: Lehninger Al..: Priiiciper dc ikcliirnie. Flanmarion Medecine Scicnces, 1985. Fig. 67.2. Teiido adiposo pardo. Las zonas . . coloreadas indican la localizacin de este tejido en los seres hiiiimias.
~~~ ~ ~ ~

La insulina es la hormona ms importante en el proceso lipognico,ya que estimula la captacin de glucosa por los adipocitos, la gluclisis, la actividad de eniimas del ciclo delas pentosas,ld actividad de la acetil-COA carhoxilasa y la citrato liasa, entre otras acciones. Salvo excepciones, los valores de insulina encontrados en obesos sometidos a una sobrecarga de glucosa han sido elevados. Se han sealado otros aspectos metablicos que diferencian a los sujetos obesos de los no obesos. Se ha encontrado una menor capacidad movilizadora de grasa del tejido adiposo en obesos sometidos a ayuno, a ejercicios y a la administracin de agentes lipolticos como la adrenalina. En relacin con esto, Cuatrecasas y otros autores han involucrado a las prostaglandinas en las modificaciones del ritmo de la liplisis en el tejido adiposo. Estas modificaciones estableceran un predominio de la lipognesis sobre la liplisis en los obesos. De cualquier manera,no est claro en qu medida influyencada lino de los factores expuestos en el establecimientode la obesidad. De ahla gran diversidad de tratamientos ensayados, desde la acupuntura hasta charla$ de sugestin bajo hipnosis e infinitos regmenes dietticos. Lo sensato es estudiar cuidadosamentecada caso, a la luz de los conocimientos contemporneos, e indicar un tratamiento que se adecue a las caractersticaspsicolgicas y metablicas del paciente.

Resumen
El tejido adiposo es una variante especializada del tejido conectivo laxo. La d l d a comienza a almacenar grasa, primero en forma de pequeas gotitas aisladas, inegocreeen y se fusionan, y ocupan prcticamente todo el citoplasma. Es uno de los tejidos ms secos con slo e1 30 % de agua y ms del 60 % de ipidos, de los cuales el 99 % son triacilgceroles. La comnosicin en cidos masos va a deoender en un erado considerable de la dieta, dentro de cada especie. Los depsitos de grasa del adipocitopueden provenir de los ipidos de la dieta, pero tambin se generan a partir de fuentes no lipdicas en el propio tejido. Los triacilgiiceroles llegan al tejido adiposo en forma de quilomicrones y lipoprotenas de muy baja densidad. Una enzima que abunda en el endotelio de los c a p h , la lipasa de lipoprotenas, libera los cidos grasos, los cuales difunden libremente al interior de los adipocitos, donde son reesterificados. El glicerol pasa a la sangre y es metaboiizado en otros tejidos. En la propia clula adiposa se forman tanto la glicerina como L o s cidos grasos, a partir de la glucosa. La primera se produce como gcerofosfato por reduccin de la fnsfodihidroxiacetona, intermediario de la gluclisis. Los segundos se producen por la va de su biosntesis citoplasmtica. La insulina estimula de manera considerable la formacin de depsitos de grasa, en gran medida debido a la elevacin de la entrada de glucosa al adipocito que ella provoca. Una lipasa intracelular catalua la hidrlisis de los triacilgliceroles de las reservas. Esta enzima responde a numerosas influencias hormonales, entre ellas las de las caterolaminas, el glucagn y la ACTH; todas incrementan los niveles de AMPc en el adipocito. El tejido adiposo es un dispositivo metablico muy activo en la formacin y degradacin de combustible lipdico de reserva, con un sistema de regulacin que lo pone rpidamente en funcin de las condiciones metahlicas del organismo. En la obesidad, la lipoghesis excede lo normal y trae como consecuencia un peso superior al normal para la talla del individuo. En esta inadecuada regulacin del metabolismo intervienen factores genticos, endocrinose incluso hipotalmicos y siempre estar presente una excesiva ingesta calrica. La protena leptina, producida en el tejido adiposo, interviene en el control del desarrollo de este tejido.

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El gen que la codifica est mutado en ratones genticamente obesos y se eonoce como gen ob, del cual existe el homlogo en seres humanos. En el tejido adiposo pardo existe una protena, la termogenina, la cual desacopla el transporte eledrnico de la fosforilaein oxidativa y provoca un aumento en la produccin de calor. En la mayora de los obesos el desbalanceentre el gasto y la ingesta calrica no es fcil de.e Se han invocado diversas caractersticas, como un nmero excesivo de adipocitos, una accin insulnica demasiado mantenida, efectos provenientes de las prostapiandioas o del dfiat de lepna o termogenina. Dada la multiplicidad de factores que intervienen en el control de los procesos lipognico y lipoltico del tejido adiposo, la obesidad es un problema que debe ser estndiado y tratado por un personal competente en cada caso.

Ejercicios
1.Exprese cul es la ventaja principal que tienen las grasas como reserva energtica, en comparacin con el glucgeno. 2. ,Dequ factor depende la composicin en cidos grasos de los Ipidos del tejido adiposo en una especie dada? 3. En la formacin de los depsitos de grasa (lipognesis)se requiere la participacin de una enzima hidroltica de los triacilgliceroles. Cul es esta enzima y cmo explica su funcin en la lipognesis? 4. Qu influenciasejerce la insulina en el metabolismo del adipocito? 5. ;Qu enzima proporciona el paso determinante en la movilizacin de los Lpidos de los depsitos, y bajo qu influencias reguladoras se halla? 6. Cmo puede una sobrealimentacin,durante el perodo de Lactancia, propiciar el desarrollo de la ohesidad? 7. Qu importancia pudiera tener la carencia de tejido adiposo pardo en la propensin a la obesidad y por qu?

El tejido conectivo cumple, principalmente, una fui~cin estructural, aunque en ella se apoyan otras funciones para cuyo5 elementos bsicos este tejido proporciona el medio sustancial que permite su realizacin; es el tejido con una distribucin ms universal en el cuerpo: lo encontramos en los cartilagm, los tendones y los ligamentos, y como base material sobre la cual se depositan los minerales que constituyen los huesos. Por debajo de la piel yace una capa de eqte tejido; asimismo, proporciona la sustancia intercelular en los rganos parenquimatosos como el hgado, los msculos y otros. La composicin qumica del tejido conectivo explica las especificidades de su funcin, que si hien es estructural en general, no lo es en forma meramente pasiva. En este captulo trataremos esos constituyentes en su relacin estructura-funcin. Ellos comprenden un grupo deprotenas, entre las que predomina la colgena, y diversos tipos de proteoglicanos. Estas molculas son glicoprotenas con un elevado por ciento en glcidos, el cual puede llegar, en ocasiones, hasta el 90 % de su peso. Existen diversos tipos de tejido conectivo; aqu se toma como modelo el tejido conectivo laxo ordinario, constituidopor clulas y sustancia intercelular. Es esta ltima la que recibir nuestra mayor atencin, pues en ella radican las particularidades bioqumicas de ste.

Protenas de la sustancia intercelular

Colgeno
La protena principal de la sustancia intercelular del tejido conectivo es peculiar en muchos sentidos, pero especialmente en su composicin aminoacdica y hasta en determinadas regularidades de su secuencia de aminocidos. Alrededor de un tercio de los residuos est compuesto por glicina; la prolina y la hidroxiprolina constituyen del 21 a1 23 %. En la secuencia existe, adems, una regularidad. Ello posibilita la formacin de una triple hlice, que es el tipo de estructura secundaria que adopta esta protena. Cada tercer residuo es glicina. de modo que la secuencia es una recurrencia de una trada de aminocidos: Gli-X-Y. Las hidroxiprolinas e hidroxilisinas aparecen solamente en las posiciones Y, mientras que la prolina ocupa la posicin X. Por otro lado, los residuos

cidos y hsicos tienden a juiitarse y pueden estar iiiioliicrados eii el empaquctamiento moleciilar de las fibrillas. Existen diferentes tipos de colgeno, constituidos por 3 cadenas polipeptdicas de unos 1000 residuos cada una. Estas cadenas se enrollan en torno a un eje comn y forman una triple hlice (Fig. 68.1). Una vez siutetizadas intracelularuienle, las nioltculas de colgeno son segregadas y se ensamblan en el medio extracelular, en u11 orden superior que da lugar a las denominadas fibrillas. 1,as fihrillas se agregan y constituyen las fihrai. En los diferentes tejidos el patrn de las fibrillas y fibras vara en grosor, eii la manera de agregarse y en sus aiociaciones con otras sustancias de la matriz extracelular: por ejeinplo,en los tendones y en la piel las fibrillasse disponen paralelas unas a otras, mieiitras que en el pulmn se hallan menos ordenadas. Hemos inencionado la existencia de distintos tipos de colgeno, lo que obedece a que existen diferencias de secuencias eii las subunidades. Los 13 tipos de colgeiio coiiocidosse dehen a difercntescoiiibinacionesdelas distintas subunidades. La secuencia dc cada cadena est codificada por un geii diferente; por la homologa secuencia1 entre ellos,los genes derivan, presuniibleinente, de un ancestro comn. Algunos tipos de colgeno contienen 3 subunidades idnticas, mieiitras que otros s6lo contieiien 2 o las 3, pero diferentes. La descripcin de los 13tipos es innecesaria cn el marco de un texto general, pero en la tabla 68.1 presentamos 3 tipos, a modo de ejemplo ilustrativo.
Tabla 68.1. Algunos tipm de co1genu p sus propiedades

Tipo Suhunidades
Fuente: Stryei. l..: Rioquiniica. 2ila. ediri6ii. Ed. Reirrt, 1982. Vig. 68.1. Triplc Iilicc del rul&erio: al niodelo eii erquelelo. Sc iiiiie\tm una smueiicia repetitira de -gb-Pro-Pn,-; h) bladelu espacial.

Caractersticas estructurales Hbrido de 2 tipos de cadenas; bajoen OH-lisina (15 70); ba.jo eii glcidos; fibras gruesas Hidrowlaci6ninterniedia de lisina (50 96); todas las OHlisinas glicosiladas;fibras ms finasque el tipo 1 Alto en 3 - 0 8 prolina (1 %); laniayorade OH-lisinasliidrodadas; contienecistena; todas las OH-lisinas glicosiladas; baja en alanina; el contenido gliicidico no se h i t a a glucosa y galactosa

Distribucin Tendn,dentina, Sa5cia y ligainentol Ncleo pulposo, cam'lago, cuerpo

uhm

-1iI)

-m)
-1(IV)

IV

-Z(IV)

R.Iembrana~ba~les, glomriilos, cpsiila del rristalino, riones

En la tabla 68.2 presentamos la composiciii de las subunidades alfa, de los distintos tipos. Entre las protenas fibrosas el colgeno es una de las ms asimtricas. Es bastante irisoliihle y se puede extraer slo parcialmente por soluciones aciiosas de diversas fiierras inicas y pH. Utilizando agua hirviente, el colgeno se solubiliza y desnaturaliza; as, seohtiene una solucibn de gelatina, la cual,al enfriarse,forina un gel. Los distintos tipos de colgeno difieren en su solubilidad; el de procedencia fetal o embrionario es mucho ms soluhle que el del adulto y se le denomina tropomigeno. Es el resultado de modificaciones postraduccionales que experimenta el procolgeno, a las cuales nos referiremos ms adelante. Despus que el colgeno es segregado a la matriz extraceliilar en los te.jidos maduros, a diferenciade los einbrionarios y fetales, se producen enlaces cruzados entre las inolculas adyacentes, de modo que el tropocolgeno es el colgeno embrionario y fetal, que en la sustancia intercelolar se convierte mediante enlaces cruzados en el colgeuo del tejido conectivo maduro. Las molculas de tropocolgeno (con peso moleciilar de 300 000 D) tienen unos 150 nm de ancho y 30 000 de largo; estn constituidas, al igual que el del adulto,

~ 6032. ~ Coniposici<is I ~ eu aminocidos de las cadenas de coligeno en las subunidades alfa,

-

Aminocido

R e d i i o s del aininocidn por 1 000 resiiicioi de la cadena alfa, (1) alfa (11) alfa, (111) alEa, (IV)

por 3 cadenas polipeptdicas, pero sin los abundantes enlaces cruzados que existen en el colgeno adulto. Lascadenas individuales se Iiallan formando tina h6lice de giro izqnierdo, con 3 residuos por vuelta, los cuales se trenzan con giro a la derecha (Fig. 68.2). Esta triple hlice compacta se hace posihle porqne cada tercer residuo est presente laglicina, con su carbono alfa instalado en elinterior de la molcula, mientras que los voluminosos grnpos R de cualquier otro aminocido no podran aconlodarse. Estos grnpos R se sithan hacia el exterior de la molcula y pueden participar en interacciones no covalentes entre las molculas de una fibrilla o fibra, y contribuir as a mantener la integridad de la disposicin ordenada del colgeno.

Y-

Biosntesis del colgeno

El colgeno se sintetiza en forma de un precursor demayor peio indecular. que se denomina procolgeno; posee secuencias adicionales tanto a partir del NH,, como del COOH terminal en las 3 cadenar. Estas secuenciasconstituyen dominios que pudieran propiciar la formacin de la triple hlice. El procolgeno sale al exterior de la c&la mediante vesculas derivadas del comple,jode Golgi y es en el medio extracelular que -por accin de enzimasproteolticas-se separan los 2 dominios terminales y se convierte el procolgeno en colgeno (Fie. 68.3). Se han podido estudiar lis genes de diferentes subunidades de colgeno en fihroblastos de embrin de pollo. Las secuencias codificadoras estn interrumpidas por ms de 50 intrones. La mayora de los exones tienen una longitud idntica de 54 pares de bases, lo que sugiere que el gen del colgeno evolucion por duplicaciones repetidas de una simple unidad de exn. La molcula de colgeno experimenta varias modificaciones postradnccionales, adems de la separacin de los sectores terminales, coino: 1) la formacin de los

Cadena polipepidica simple de ~mpocol:i,oen

Fiieilte: Lrhniriger ,\l..:Rioquiniira. ?da. cdirim. Ediciones Omega, S. A,, 1978. Fig. 68.2. Cadena polipcptdica de eol6geno.

a) ARNm ARNt Ribosoinas Aiiiiiio6cidos

Traduccin

Coiiiien~a la hidi-oxilaci6ii

Ensamblaje

Eig. 68.3. Biosintesis del colgeno. Esquenia con las diferentes etapas del proceso. Hasta la etapa dc glirosilacin inclusi\e aeurrc

La enzima 4-prolilhidroxilasa,una oxigenasa de funcin mixta, localizada en el retculo endoplasmtico, cataliza la sntesis de la 4-liidroxiprolina en las cadenas de procolgeno.

H Residuo de prolina

Alfa - cetoglutrico

Succnico

Las otras oxigenacas especificas: 3-prolina hidroxilasa y lisina hidroxilasa actan deigual forma. Todas estas enzimas requieren el concurso del alfa-cetoglutrico y del cido ascrhico. Las hidroxiprolinas estabilizan la triple hlice mediante puentes de hidrgeno. Tanto es as que la temperatura de fusin del colgeno de diversas fuentes depende directamente de su contenidoen hidroxiprolina. Por otra parte, enzimas transferasa~ de galactosa y glucosa catalizan la glicosilacibn de los residuos de hidroxilisina a partir de UDP-Gai y UDP-Glu. Una vez que el trupocolgeno se segrega en la matriz extraceliilar, seestablecen enlaces covalentcs cruzados. En un inicio -por la accin de una oxidaqa de lisina- los residuos de este amiiioicido y de la hidroxilisina se convierten en alisina e hidroxialisina respectivamente. La enzima requiere de Cii2+ y fmfatu de piridoxal(Fig. 68.4).
1 I

C=O 1 CH-[cH~];NH,'

TH

O?---+

(1)

C=O 1 CH-[CH: I NFI

I

1; ? C=O
Alisina

+ NH, + H 2 0

Lisina

C H - [ < I H ~ ] ; ~ H - c H ~ N H : + O?$+ 1 OH

c=o 1

C=o

&[cH,]~- CH-CH=O I
1

+ NH, + 6 0

Fig. 68.4. Forniacim dc alisina e Iiidroaialisiria. La accin de la oxidava de la lisiiia es prrmira esencial en la fomneiit de 1 ~ enlaces 5 cruzados. [.a rnrima, que requiere Cu'y vitamina N,, catalira Ins reacciones (1) > ( 2 1 .

VH

YH

OH

Despus de formada la alisina, se establece un tipo de enlace cruzado por una condensacin aldlica no enzimtica. Tambin uueden condensarse 2 residuos de hidroxialisina o comhinaciones de alisina e hidroxialisina. El grupo imidazol de la histidina tambin participa en la formacin de enlaces cruzados.

Degradacin del colgeno

La hidrlisis del colgenoes catalizada por la9 colagenasas; son enzimasespecficas y rompen cada cadena en un sitio a unos 314 de la longitud de la molcula, dista1 al extremo NH, terminal, lo que da lugar a2fragmeiitus. El enlace pcptdicu vulnerable est formado por Gli-Leu o Gli- Ile. Las colagenasas aisladas de distintas fueiites comparten propiedades similares. Todas tienen una subunidad de 33 000 a 38 000 D, pH ptimo cercano a 8,y se inhiben por agentes quelantes de metales. Se conocen varios inhibidores de las colagenasas, entre ellos la alfa, macroglohulina (capitulo 63). Los pptidos producidos por la accin de las colagenasas son hidrolizados por diversasproteasas extracelulares.

La otra protena principal del tejido conectivo es la elastina, la cual no da lugar a la formacin de gelatina. La proporcin en que se halla varia: es poca en el tendn

calcneo (de Aquiles), en comparacin con el colgeno; sin embargo, predomina en las paredes de los grandes vasos. Se puede extraer por hidrlisis suave con lcalis, que disuelve al colgeno y a los proteoglicanos, y deja intacta la elastina. Tamhin un tercio de su composicin aminoacdica est compuesto por glicina, pero su contenido en prolina e hidroxiprolina es menor que el del colgeno. Tiene ms valina y alanina que ste. La cadena polipeptidica es la tropoelastina (con un peso molecular de 70 OUO), de unos 850 residuos; se deriva de la proelastina, un precursor con peso molecular de 120 000. La tropoelastina est contenida en la regin NH, terminal de la proelastina y seguhmente es el resultado de la protelisis postraducc~onal. Las molculas de tropoelastina se ensainhlan y forman la elastina madura, con su elasticidad caracterstica. En este proceso intervienen enlaces cruzados. La lisil oxidasa forma residuos de alisina, al igual que en el colgeno, pero sta reacciona con otro residuo delisina y se forman ladesmosina y laisodesmosina, que contienen los enlaces cruzados peculiares de la elastina (Fig. 6815).

N H , C O

'CH-[CH,];CH~ CHO
Alisina

,NI-+ CH,- [CH,]-- CZf CHO CO-

Fig. 68.5 Enlaces cruzados en la elastina. Reaccin que conduce a la formaci6n de desmosina, la cual multipliea las posibilidades dc enlaces cruzados intcrinoleculares.

En cuanto a su degradacin, el pncreas segrega un zimgeno, la proelastasa. La tripsina lo activa a elastasa y stadigiere a la elastina; las fibras desaparecen y queda una mezcla amarilla de pptidos entrelazados.

Otras protenas del tejido conectivo La fibrinilla es una glucoproteina de las microfibrillas que se encuentran en numerosos sitios. Se halla en el cristalino del ojo y en el peristeo, unida a fibras de elastina en la aorta. El sndrome de Marfan, relacbnado con inutacionesenel gen para la fibrinilla, cursa con dislocacin del cristalino, hiperextensibilidad de las articulaciones y dilatacin de la aorta ascendente, por debilidad de la tnica inedia de la arteria. La fibrnnecna, abundante en la matriz extracelular del tejido conectivo, consiste en 2 subunidades de 210 000 D cada una. En las membranas celulares existe un receptor para la fibronectina. La interaccin de la fibronectina con su receptor desempea una funcin importante en la adhesin de las clulas a la matriz extracelular. Tamhin interviene en la migracin celular, al proporcionar un sitio de fijacin para las clulas, quecontrihuye a despejar su camino a travs de la matriz.

La laminina es una protena presente en la lmina hasal dc los epitelios. La' molcula deiamininaest compuesta por 3 cadenas polipeptdicas distintas, con un peso molecular de 850 000; posee sitios de interaccin con el colgeno, la heparina y las protenas de la superficie celular. E n el glomrulo renal la laminina -junto con otras macrumolculas- confieren a ese comple,jo la estructura apropiada para la importante funcin de filtracin glomeri~lar.

El 30 % del peso seco del tejido conectivo puede ser de proteoglicanos. Se encuentran en la sustancia fundamental, extracelular, del tejido y no son ms que diferentes cadenas de heteropolisacridos, unidas covalentemente a una cadena peptdica. Contrario alas glicoprotcnas, en ellos la mayor proporcin es de la parte glucdica, la cual puede llegar al 95 % y ms. Estos polisacridos, antes denominados mucopolisacridos,se couoceii ahora conlo glimsaminoglicanos,pues todos contienen derivados de glucosamina o galactosamina. En los glicosaminoglicanospodemos encontrar 3 caractersticas estructurales:

1.Siempre aparecen unidades repetitivas de disacridos, en las cuales figura la D -glucosamina o la D- galactosamina, o sus derivados N acetilados. 2. A excepcin del queratosulfato, todos contienen un cido urnico. 3. Excepto en el cido hialurnico, estn presentes grupos sulfato esterificados.
En la tabla 68.3 presentamos los 6 tipos fundamentales de glicosaminoglicanos.
Tabla 683. Distrfiucin y propiedades de los glicosaminoplicanos

Glicosaminoglicano

Peso molecular
4 a 80 .lo6

Monosacrido repetitivo cido D-glucurnico, N-acctil-D-glucosaniina cido~-g~ucurnicu,sulfatode N-acetil-D-galactoEamla

Tejidos en que aparece Piel,humor vtrco, liquido sinovial, &lago C o , huso,paredarterid, piel

cido hialurnin,

Condmilin sulfatn

5a50.10'

Dcnnatn suliato

1 5 a 4 O 10'

cido L-idurnico,
4 sulfatode N-acetil-

Piel,tendn, vlvulas del coraWii,

paredarterial

-11-gdactosamina Qucratnsulfato 4 a 1 9 10' D-gdacto~a, 6 suliafatode N-acctil-1)-glucosanina cidoD-glucurnico, cido 2 sulfo L idurnico,2,6-sulfato de glucosamina

Crnca,cartuago cqco intervertcbral

Heparin;i

10' a 10"

Pulmones,lgado, mucosaintcstind,piel

Los proteoglicanos tienen una amplia distribucin, al igual que el colgeno, g se encuentran estrechamente asociados con ste en los cartilagos, la piel, los tendones, los huesos, lacrnea, el humor vtreo, etc.

La unin del cido hialurnico a pptidos no es covalente. Su peso molecular vara de 106alo7.Todas estas estructuras tienden a agregarse, lo cual se favorece Por cationes polivalentes como el Caz*. El cido hialurnico se enrolla de manera azarosa y ocupa un volumen, que est mayormente lleno de agua de solvatacin. A este espacio tienen acceso pequeas molculas e iones, pero las molculas mayores, como la seroalhmina,no pueden penetrarlo.
COOH CH,OH CH,OH COOH

o
H OH O HN- C - CH, Subunidad repetitiva Glucuronil p 1-3 N-acetil-glucosamina

H OH h P 1-4yhu-~up

Enlace entre subunidades N-acetil-glucosamil P I -4glucur6nico

La alta viscosidad del cido hialurnico le permite actuar como lubricante en las articulaciones. En algunas enfermedades reumticas podran estar involucradas alteraciones estructuralesde los proteoglicanos.

Estos glicosaminoglicanospresentan la estructura bsica siguiente:

Subunidades repetidas COOCondroitn sulfato H OH H HN-C -CH, HN-C-CH, N- acetil 4-S galactosamil CH,O-SO, Enlace entre subunidades CH.OH COO

OH H H OH

Glucuronil B 1-3 N-acetil6-S galoctosamina

1-4 glucurnico

CH,OH Dermatn sulfato H Iduronil OH HN-C-CH,

CH,OH

0,
HN-C-CH,
H
OH

P 1-3 N-acetil galactosamiua sulfato

4 sulfato N-acctil galactorami!

6 !-4

idur6nico

CH,OSO<
\

CH,OH H H OH

Queratn sulfato H Gaiactosarnil OH

OH H H H HN-C-CH, HN-C -CH, 6-S N acetil glusarnil

p 1-4 6-S N acetilglucosamina

P 1-3 galactosa

A la cadena del condroitn sulfato se une un residuo de serina del componente pojipeptdic~, a travs del trisacrido Gal-Gal-Xil,por medio de un enlace glicosdico. el glicosaminoglicano queda unido a una cadena polipeptdica relativamente erande y constituye un componente importante de la sustancia fundamental del Gdago. El dermain suifato, que recihi este nombre por haber sido aislado por pimera vezdela pie1,aunqueest profusamentedistribuido,seaiemeja al anterior, perocontiene cido L-idurnico, adems del glucurnico; se une a la protena en la misma forma para el condroitn sulfato. Existen 2 tipos de queratn suifato: el tipo 1se halla en la crnea, mientras que el 1 1se encuentra junto al condroitn en los proteoglicanos esquelticos. Ambos tipos contienen cido silico y forman agregados dc proteoglicanos. Se diferencian en que enel tipoIla unin al polipptidose establece a travs de la N-acetilglucosamina,que 1la unin es al hidroxilo de la se enlaza a un residuo de asparagina, mientras que en el 1 serinaola treonina y mediante la N-acetilgalactosamina.

La hepdna contiene2disacridosquese repiten: uno est formado por un derivado dela glucosamina,unido por el enlace alfa 1-4 al cido idurnico o al cido glucurnico -en menor proporcin (30 al 10 %)-,y el otro por el cido urnico en el enlace alfa o heta al derivado de la glucosamina.

CH,OSO;

CH,OSO,

COO

CH,OSO,

CH,OSO;

OSO;

HNSO;

OH

HNSO;

OH

HN C 0\ O C'H;

Se observan grupos sulfatos en la mayora de los N y los grupos 6-OH de las glucosaminas, ascomo en los 2-OH de los cidos idurnicos. Una pequea fraccin de los grupos aminos se halla N-acetilada. En la heparina, el glicosaminoglicanose une, al igual que en los condroitin sulfatos, a laprotena,a travsde la xilosa. El pptido, al que se unen 10 15 largas cadenas del oligosacrido, contiene solamente serina y glicina en posiciones alternas.

Metabolismo de los pmteogeanos La secuencia del oligosacrido caracterstico del proteoglicano se sintetiza por la accin sucesiva de una serie de glicosiltransferasas. El azcar de un nncletido se transfiere al lado no reductor de otro azcar. Se cree que el proceso de glicosilacin tiene lugar en el complejo de Golgi de clulas secretoras, como los condrocitos del cartlago. La porcin polipeptdica -una vez liberada en los ribosomas-Llega al complejo de Golgi por los canales del retculo endoplaimtico; la9 transferasas de las membranas inician su trabajo de sntesis secuencial del oligosacrido. En el captulo 46 se trata la sntesis de estos glicoconjugados. Los proteoglicanos se degradan y resintetizan constantemente. La vida media del condroitn sulfato en los cartilagos de ratas es de poco ms de una semana. Primero actan las catepsinas que hidrolizan el componente protenico; entonces los proteoglicanos, parcialmente degradados, pueden ser atacados por proteasas y glicosidasas lisosomales, o pueden difundir y pasar a la circulacin.

En los lisosomas de los Iiepatocitos el condroitin solfalo se hidroliza coniplctamente por acciones secuenciales de sulfatasas y glicosidasas. Se estima que el ser humano adnlto cataboliza, a diario, alrededor de 250 ing de proteoglicanos. Resulta de inters que la cantidad de proteoglicaiios en los tejidos vara con la edad. Por ejemplo, la concentracin de queralosulfato aiimeuta a lo largo de la vida, mientras que el contenido de condroitin snlfato en los cartlagos de los discos intervertebrales y el cido hialnrnico de la piel disminuyen en la niedida en que la edad del sujeto avanza. La hormona del crecimiento, la testostemna, los corticosteroides y otras hormonas provocan diversos cambios en el patrn de los proteoglicanos, pero an no se ha obtenido una interpretacin significativa de estas influencias.

Funciones de los proteogeanos 1,asfuncionesde los proteoglicanosdependen de sus propiedades. Una de las ms notables es que todos son polianiones que captan cationes fiierteinente. Tambin tienen tendencia a formar agregados,lo cual se facilita con el concurso de cationes polivalentes como el Ca". Anteriormente se mencion el cido hialuriiico y su alta viscosidad, que le permite lubricar las articulaciones. Los proteoglicanos impiden que el agua ceda a presiones externas y le dan resistencia a los tejidos tiente a las compresiones,adems de elasticidad.Asimismo, se comportancomo tamices moleculares, de modo que restringen los movimientos de grandes cationes e impiden la difusin de macromolcnlas del tamafio de la alhmina y las iniiiunoglobulinas.Sin emhargo, aunque se conocen estas propiedades generales, no se tiene una explicacin funcional de las diferencias en el contenido de los glicosaminoglicanos, en los distintos tejidos. Por otra parte, existen indicios de que cl cido hialurnico desempea una determinada funcin en la motiogtnesis y la embriognesis. La hialuronidasa, al catalizar su hidrlisis, promueve la agregacin y posterior diferenciacin de la$clnlas mesenquimatosas en el esqueleto del pollo en desarrollo. Adems, muy pequeas cantidades de cido hialurnico inhihen la condrognesis en cultivo de condrocitos. presumiblemente entorpeciendo la agregacin de los proteoglicanos.

Resumen
El tejido conectivo, el ms distribuido en el ser humano, est compuesto por un grupo de protenas, entre las que predomina el colgeno, y diversos tipos de proteoglicanos. El colgeno tiene una composicin aminoaudica muy peculiar, ya que cerca de un tercio de sus residuos est compuesto por glicina; la prolina e hidroxiprolina constituyen ms del 20 %. Cada tercer residuo es una glicina y esta regularidad posibilita la formacin de una triple hlice por 3 cadenas de unos 1 000 residuos cada una, que se enrollan en torno a un eje comn. Existen 13 tipos de colgeno, debido a las diferentes combinaciones de las subunidades diversas. El colgeno se sintetiza como proeolgeno, un precursor de mayor peso moleeular, el cual madura por la accin de las enzimas proteolticas que separan los sectores de ambos extremos terminales de la molcula. Tambin incluve la formicin primero y la glicosilacin despus de los residuos de hidroxiprolina e hidroxilisina. Todas estas modificaciones postraduccionales dan lugar al tropocolgeno. A nivel extracelular, el establecimiento de enlaces cruzados covalentes en las molculas de tropocolgeno origina el colgeno maduro. El colgeno se degrada por la accin de las colagenasas, enzimas de las cuales se han aislado vanos inhibidores.

Otra protena presente es la elastina, que tiene un contenido menor de prolina e hidrnxiprolina, y mayor de valina y a l b a . Las molculas de tropoelastioa se ensamblan y forman la elasna madura, con su elasticidad caracterstica. En el tejido conectivo de diversas estructuras y rganos del cuerpo humano aparecen otras protenas, entre ellas: fibrinla, fibroneetina y Laminina. Los prntengiicanos constitnyen e130 % del peso seco del tejido conecvo; son complejm de heteropolisacridos y protena, en los cuales la proporcin de esta Itima es relativamente pequea, del 5 al 10 %, o menos. La porcin glncdica se conoce ahora como glicosaminoglicano, pues todos contienen glueosamina o galactosamina o sus derivados acelados y sulfatados. Los proteoglicanos tienen una amplia distribucin, al igual que el colgeno, y se encuentran estrechamente asociados con l en los carlagos,la piel, los tendones, los huesos, la crnea,e t e Los proteoglicanos estn sometidos a un continuo recambio. El glicosaminoglicano se sintetiza por la accin de las glicosil transferasas y la porci6n pdipeptidica llega al lugar de ensamblaje: el complejo de Gol& En la degradacicin actan primero las catepsinas y luego intervienen las proteasas y glicosidasas Usosomales. Las funciones de los proteoglicanos tienen que ver con sus propiedades Mcn-qumicas; le confieren resistencia a los tejidos frente a las compresiones, bacen las veces de tamices moleeulares y desempeanalgunas fuoeiones especficas en la morfognesis y lubricacin de articulaciones, entre otras.

1. Cul regularidad de la secuencia aminoacdicadel colgeno constituye una coodicin que permite el establecimiento de la triple hlice? 2. Analice cules modiicaciones experimenta la molcula de colgeno con posterioridad a la traduccin. 3. Represente 2 tipos de enlaces cruzados, susceptiblesde establecerse entre las cadenas polipeptdicas del colgeno. 4. Haga un anlisis de cules son los elementos constantes y variables en la estructura de los proteoglicaoos. 5. Exprese 2 propiedades de los proteoglicanos, relacionadas con algnna de sus funciones.

La cavidad bucal constituye la puerta de entrada principal de los alimentos, vitaminas, lquidos, medicamentos,etc., que han de incorp<iraneal organismo. En ella tienen lugar los primeros pasos de la digestin, garantizados por una dohle accin (mecnicay qumica) sobre los alimentos: la primera la realizan las pieras dentales y la segunda, la secrecin salival. El mantenimientodela salud bucal es ohjeto de una rama de las ciencias mdicas: la Estomatologa. No poda faltar en este texto un capitulu que se ocupara de los aspectos ms relevantes, desde el punto de vista hioqumico, de los elementos que conforman la msimportante va de entrada de sustancias a nuestro organismo. Trataremos los diferentes tejidos que constituyen el diente humano y algunas concreciones que se depositan en l. La saliva, lqiiido corporal que constituye el medio fundamental en qnese hallan losintegrantes de la cavidad bucal, tambin hade ser objeto de nuestra atencin. Por ltimo, dedicanios un espacio importante para considerar la patogenia de la enfermedad ms comn de todas: la caries dental.

Saliva
A pesar de que la saliva es producida por muchas glndulas pequefias, que vierten su secrecin en la calidad biical, la mayor parte de la secrecin proviene de 3 pares de glndulas: las parti&, las sublinguaies y las submandibulares. La mezcla que se obtiene de la secrecin saliva1 contiene del 993 a1 99,7 C/o de agua, con una densidad variable de 1,002a 1,008, y la cantidad promedio diaria que produce un adulto normal es de 1500 mL. No parece existir un control hormonal sobre la secrecin salival, aunque la adrenalinaestimula la secrecin de &asa por las partidas, accin mediada por la formacin de AMPc. El ritmo de la secrecin es variadodurante el da y casi desaparece durante el sueo. La secrecin salival desempea una funcin primaria en la regulacin del medio externo de las estructuras orales, de ah su importancia en el mantenimiento de la integridad funcional y estructural de stas. Asimismo, es importante en los procws de masticaein, deglucin, digestin qumica y, ocasionalmente, en la regulacin de los lquidos y electrlitos del organismo. La saliva tambin es esencial para la sensacin gnstativa y, en algunos casos, sirve como va de excrecin. Las clulas de las glndulas salivales son ricas en adenosindifosfato (ADP), adcnosintrifosfato (ATP)y fosfocreatina; presentan, adems, una gran actividad de la

adeiiosintrifosfatasa, la dependiente de magnesio y la dependiente de sodio y potasio; almacenan glcidos en forma de glncgeno y son capaces de producir cido lctico a partir de la glucosa. Presentan una gran actividad de la enzima citocromo oxidas (cadena respiratoria) y se ha evidenciado la existencia del ciclo de los cidos tricarboxlicos. El consumo de oxgeno, as como el riego sanguneo, aumentan considerablemente durante la secrecin de saliva.

Composicin qumica de la saliva

La composicin, el pH y el volumen de la saliva son variables. Los constituyentes slidos comprenden protenas, mucina, urea, cido rico y sales iiiorgnicas. Los aminocidosy la glucosa aparecen en muy pequeas cantidades, y las concentraciones de colesterol y fosftidos son bajai, comparadas con las de lasangre. Tambin constituye una parte de la secrecin salival una enzima que degrada los almidones (a-amilasa salival), la cual da inicio a la digestin qumica de stos. Las glndulas salivales humanas tienen un sistema inmunolgico local que comprende la IgA, con pequeas cantidades de IgG e IgM. Hay evidencias de que los microorgaiiismos que proliferan en la boca estimulan especficaniente la sntesis de anticuerpos salivalesIgA. En el cuadro 69.1 aparecen los principales componentes de la saliva y se detallan, en particular, sus diferentes constituyentes.
Cuadm 69.1. Principales componentes de la saliva

Proteias

Protena?del suero Protcnasdclasgkdulas sustancia^ de los grupos sanguneos Unidos a protena (incluyesustancias de los grupos sanguneos) DiWbles

Glcidos

Lipidos Componentesorgnicos de bajo peso molecular

Uiea

cido rico Amiuocidos cidos orgnicos

Salesminerales

En la saliva se han podido identificar, por electroforesis y otros medios, decenas de protenas. Eu el cuadro 69.2 brindamos una relacin, segn su origen. La mucha es una mezcla de glicoprotcnas y aporta la mayor proporcin de los constituyentes orgnicos de lasaliva. Est compuesta por 2 3cadenas polipeptdicas y de 1 a 3 de polisacridos. Se deriva principalmente, aunque no de forma exclusiva, de las glndulas sublingual y submaxilar; su principal funcin es conferirle viscusidad a la saliva. Algunas endmas de la flora bacteriana bucal causan una rpida prdida de la viscosidad, ya que producen una ruptura de enlaces en la mucina. Tambin parece existir una enzima mucinasa en la secrecin parotdea. La lisozima es una de las diversas enzima producidas por las glndulai salivales. Elia acta restringiendola flora oral, pues produce la lisis de alpnas bacterias comunes, como los estafilococos,los estreptococos y el bacilo diftrico. Su accin se produce al catalizar la hidrlisis de los glicosaminoglicanosde la pared celular de las bacterias.

Cuadm 69.2. Protenas de la saliva segn su lugar de origen

Producidas en los cinos

partida
Masa Glumprotenascatinica9 Glucoprotenas aniniws Lactoperoxida~a Laaofenina

Submaxilar Amilasa, Caucoprotenascatinicas Glucoprotenasaninicas Lactoperoxidasa Sustancia de los grupos sanguneos

Producidas en regiones no cino o de origen desconocido Partida Seereona Ig.4 Lisoha(baja) Fosfatasas Esterasas Rglucnronidasa
Caliapia

Ribonucleasa (moderada) Deshidrogenasalctica Procedentes de la sangre Albmina Orosomucoide Igc Ceruloplasmina

Submaxiiar SecrctinaIgA Lisozima (alta) Fosfatasas E~terasas fi-glucur~~dasa Calicreia Rihonucleasa maja)

I,ipiprnteh~

Se han hecho estudios para encontrar alguna relacin entre la cantidad de lisozima en la saliva y la incidencia de la caries dental, pero los hallazgos son contradictorios. Los gi6cidos y Lpidoa de la saliva dependen mucho de la dieta. Lo ms habitual es que estn presentes el almidn, la glucosa, la sacarosa y el glucgeno, as como cantidades mnimas de colesterol y fosftidos, y, eventualmente, grasas provenientes de los alimentos. La urea parece derivar de las glndulas por filtracin directa de la sangre. La mayor parte del amonaco no parece provenir de las glndulas, sino de la accin de las enzimas bacterianes, al igual que en el intestino. La cantidad de aminoakidos libres en la saliva es de cerca de 5 mgIdL. Los principales son: cido asprtico, cido glntmico, treonina, serina, glicina, alanina, fenilalanina, leucina e isoleucina, los cuales se hallan regularmente en la saliva. En la tabla 69.1 se presentan las cifras de algunos componentes orgnicos de la saliva de la partida y de los suhmaxilares.
Isbh 69.1. Componentes orginicos de la saliva en adultos normalec jnig/dIJ

Partida
Um bmonio Acidorico Glucosa Lipidw totales Colestcrnl Acidos grasos Aminocidos Pmteinas
15,o 03 3,O <1 2,s <1 1,0 1S 250,O

Suhmaxilares

Plasma

Los componentesinorgnicos dela saliva son similares a los del plasma sdnguineo, pero aparecen en concentraciooes diferentes. En la tabla 69.2 se brinda un compendio de ellos.
Tabla 693.

Componentes inorgnicos de la saliva (rneqL,) Partida Submaxilar Plasma

Potasio Sodio Clonvos Birarhona.to Calcio Magnesio Fosfatos

20,O 23,O 23,O 2O,0 2,0 O,2

6,0

Accin amortiguadora del pH de la sava En virtud de quc las sales de los cidos dbiles forman parte de su composicin, a s como las protenas y los aminocidos,la saliva funciona como una sustancia tampn en lacandad bucal e impide qnesu pHexperimente variaciones bmscas en el sentido de la acidez o la alcalinidad, y se mantenga dentro de lmites normales. Los sistemas cido carb6nicoIbiearbonat0, cido fosfrico1 fosfato y 4cido cMdeitrato,presentes en la saliva, constituyen sistemas amortiguadores, cuya accin -unida a la de los constituyentes protenicos- contribuye a que el pH saliva1 no experimente grandes variaciones. kstas se originarm,fundamentalmente,porel efecto del metabolismo de la flora hacteriana oral, lo cual pudiera tener alguna ~ignificacin en la salud de la cavidad bucal.

Otras acciones de la saliva

La saliva contiene pequeas cantidades de enzima desramificante, maltasa, ribonucleasa y lisozima, las cuales ejercen una accin bacteriolitica en la boca. En las glndulas partidas y submandibulares tambin se ha reportado la presencia de una desyodarja, enzima que separa al iodo de sus combinacionesorgnicas y contribuye as a regular su concentracin en sangre. La salivaconstituye, adems, una va de eliminacin de algunas sustancias como la urea, la cual se encuentra en proporciones que oscilan entre el 75 y el YO % de la tasa (en mayor proporcin sangunea; los sulfocianuros,que se eliminan de manera sele~Ziva en los fumadores); y algunos medicamentos (sacarina, yoduros, sales rnercuriales y sustancias txicas diversas).

Composicin de los tejidos dentarios

Esmalte El esmalte es el tejido ms duro del organismo, con un peso especifico de 2,93, muy cercano al del mineral apatita (3,11),con el cual est relaciouado estructnralmente. En la tabla 69.3 aparecen las proporciones relativas de las sustaucias orgnicas e inorgnicas, y del agua, en los 3 te,jidos mineralizados del diente, donde se evidencia el predominio mineral en el esmalte.

mbla 693. Proporcin relativa del agua y dc los coi~sfituyerttes orgnicos e inorgd~~icas

de los tejidos dentaria calcificados

-

Tejido
Emialte Denb Cemento

Sustancia orgnica (%l

2a4 20 30

Sustancia inorgnica
(%)
95 69 S O

Agua (%l
1a3 11 20

Sushmcia orgoiCa del esmalte

El principal componente orgnico del esmalte se conoce como amelogenina;se

h-ata de una niezcla de varia?protenas. Se ha pu~tulado que los ameloblastos sintetizan

una protena, la cual -despus de ser segregada- es degradada en una variedad de fracciones que forman el sistema de la matriz del esmalte. La composicin de proteinas totales y dediversas fraccionesdel esmalte difiere de la composicin de la amelogenina del esmalte joven en desarrollo. Se aseme,ja a la de las queratinas de la epidermis y del tejido epitelial de la mucosa oral, pobres en cistina (seudoqueratinai). En el esmalte tambin estn presentes polipptidos de bajo peso molecular, que contienen fostatos unidos covalentementea los residuos de serina. Ellos parecen estar implicados en el inicio de la fbrniacin de los cristales minerales. Los anlisis numicos han deniostrado uue el material orgnico se halla ms concentrado en las porciones superficiales y llega a un mnimo en las porciones subsuperficialesdel esmalte (de aqm'va incrementndose hacia el interior, para alcaniar el mximo en el lmite amelo-dentinal). La porcin mi externa del esmalte (de 0,l a 0,2 mm) es la regin que experimenta ms canibios por la accin de la saliva. Tambin es la ms mineralizada )-es posible que una parte de los minerales provenga de los intercambios con la saliva. La permeabilidad del esmalte a los iones que se encuentranen la saliva y la pulpa, se ha demostrado con el empleo de elementos radiactivos. De los numerosos elementos traza que aparecen en el esnialte (tabla 6Y.4), algunos como el flor. zinc.plomo, hierro y manganeso estn ms concentradosen la superficie,mientras que el sodio y el magnesia, por ejemplo, se concentran ms en la porcin interior, y otros no siguen un patrn de distribucin y aparecen uniformeniente en todo el esmalte.
lSbla 69.4. Composicin iliorganica de los huesos

y tejidos dentarios en el adulto

n o d (%) Hueso Coniponentesrninerda

Calcio
57,l 22,s 10,3 2,18 0,26 0,52 0,089 3,s 0,11 0,054

Esmalte
95 39,9 17 2,11 O,42 0,55 0,17 2,35 0.27 O,01

Dentina
70 25,Y 12,6 2,06 0,82 0,25 0.09 3,17

Cemento
S0 26,2 12,2 2,08

Fsforo W Magnesio Sodio Potasio

Carbono.tos

Cloro Flor

0,02

Iiierro, zinc, plata, aluminio, >ario, nqiiel, N o h El esmalte eonticne trazas de azufre. c ~ b r e , estano, cromo, estroncio, Litnnio, molihdenu, vanadio, manganeso Y Oro.

&erazacin

del esmalte

Los elenientos mincrales dcl esmalte estn agrupados en su niayor proporcin en foniia de cristales de apatitas. Lafrniula gcnei-al de las apatitas es la siguiente:, Ca,,,(PO,), X donde X puedcser: 2(OHJ ,2kL ,2Cl-, O'-, SO:-, C0,'- y olros. I>eestossustitujenhicimxiapatita; les dependeelnombre qnese le asigna al cristal. As,si se trata de (ON) si es el cloro (cloroapatitz); si es tlior (fluorapatita), etc. Los cristales de apatita cstn constituidos por c~iglo~neracios de las celdas unitarias: ellos varan en longilnd entre 300 y 500 nm. En la figura 69.1 se representa la conformacin del cristal de apatita. El tamao pequefin de 10s cristales explica qne posean tina considerable rea snperficial por unidad de masa, lo que facilita las reacciones de intercambio fsico-qnmico qne pueden ocnrrir ann en el esmalte del adulto, de modo qne la estructura hsica de las apatitas puede experimentar cambios. Cahe destacar 2 caractersticas importantes de los cristales: su capacidad para adsorber iones sohre su superficie y la facilidad con la cnal se rodean de una fina capa de agua, denominada "vaina de hidratacin". Como consecnencia, existen 3 sitios donde los componentes minerales pneden localizarse en el esmalte: 1.En el interior de los cristales. 2. Sobre la superficie de los cristales. 3. En la vaina de hidratacin.
Capa de ioncs adsorhidos
.
\ '

C l i p o vaina de Iiidl-ataciri
,

rico;
Fig. 69.1. Diagrama de un cristal de apatita. Se niiicatrw la disposicin de la capa o vaina de Iiidrstarin y la de los iuiies ndwrbidos.

\
\

'.a~t>(p%)@w~

Claro est, las reacciones de intercambio resultan fciles en la vaina de hidratacin y muy difciles en el interior del cristal. Solamente aquellos iones con nn tamao adecuado pueden actuar como sustitutos en el interior de los cristales, a saber: los fluojuros, los de estroncio y los hidronios. Ya sobre la superficie cristalina aparecen otros ms, como el sodio, el inagnesio y los citratos. La vaina de hidratacin, por supuesto, puede contener muchos iones, adems de calcio y fosfato. El proceso de maduracin del esmalte .a partir de la matriz orginica y suconversin en el tejido ms duro del organismo- consiste en tina continua deposicin de sales minerales y su subsecuente cristalizacin. Comienza en el lmite amelo-dentina1 y contina hacia la superficie. El proceso se acompaa de 2 I~echos: la remocin del agua dealgunas protenas de la matriz y la deposicin de las sales minerales que se van cristalizando progresivamente.

Dentina
La dentina es el tejido ms abundante en el diente, pues ocnpa las porciones curonarias y radiculares de ste. Recubre una cavidad central que se denomina cmara pnlposa en la corona, y canales radicnlares en las races, donde se aloja la pulpa

observa uii alto contenido de ARN, debido a la intensa sntesis de colgeno que se lleva a cabo en ellos. Tambin existe la va de sntesis de cidos grasos, los cuales se utilizan como reserva energtica, y se ha observado que su contenido en colesterol aumenta con la edad. En la pulpa, el metabolismo glucdico comprende tanto la va glucoltica nsual, como la va de oxidacin directa o ciclode las pcntosas, y todas las enzimas necesarias en el ciclo de Krehs. El nietabolismo de los glicidos satisface varias funciones importantes: 1.Energtica, como en todas las clulas. 2. Materiales, para la sintesi, de glicosaminoglicanos,integrantes bsicos de la sustancia fundamental. 3.Aporte de esqueletos de carbono para las grandes cantidades dc prolina, hidroxiprolina y glicina, utilizadas en la sntesis de colgeno. 4. Provisin de alcoholes para formar steres de fosfatos en el proceso de calcificacibn. En cuanto a las fibras de la pulpa remitimos al lector al captulo 68. En la matriz predomina el colgeno y en las paredes de los canales vasculares, la elastina. La sustancia fuiidamental, abundante en glicosarninoglicanos,tiene un contenido alto de calcio y fostato, los cuales se unen a los primeros. El contenido de calcio aumenta con la edad; y los fluoruros, que tambin estn presentes, se Iiallan en concentraciones que dependen del contenido de este elemento en el agua potable. Entre las funciones que se le atribuyen a los glicosaminoglicanosde la sustancia fundamental de la pulpa dentaria se encuentran las siguientes: 1.Estahilizan las fihrillas de colgeno corno fibras. 2. Intervienen en el enlace del calcio en reas mineralizadas. 3. Intervienen en el enlace de agua y su retencin.

Factores que infiuyen en el metabolismo del diente

Entre los distintosfactores que intluyen en el nictabolisino del diente se refiere la participacin dc 3 vitaminas y 2 hormonas. Las vitaminas involucradas en el metaholismo del diente son la A, C y D. El dficit diettico de vitaniina 4 provoca en las ratas la atrofa de los ameloblaitos, con formacin de un esnialte incompletamente calcificado; la dentina se afecta menos. En el homhre esto no se observa y es caracterstico en esta avitaminosis la sustitucin del epitelio normal de las encas por un epitelio estratificado queratinirado. En el cobayo, el dficit de vitamina C provoca hemorragias y calcificacin de la pulpa, trastornos en los odontohlastos g retardo en el depsito de calcio en la dentina, lo que debe cstnr relacionado con la conocida afectacin de la sntesis de colgeno, provocada por la carencia de cido ascrhico. En el hombre se haobservadola atrofia del tejido seo alvenlar, as como trastornos gingivales. En las ratas, el dficit de vitamina D (ntimamente ligada al metabolismo del calcio) ocasiona trastornos en la calcificacin de la dentina y la formacin de un esmalte hipoplsico. Entre las hormonas se encnentran la tiroxina y la paratliorniona. El creciniiento dental humano requiere de una adecuada provisin de tiroxina. En los nios el hipotiroidismo provoca u11retardo marcado en el desarrollo dental, aunque no se Iian detectado trastornos estructurales. El tamao y la forma de la raz pueden alterarse, y el maxilar inferior muestra un desarrollo pbbre, que provoca barbillas fugitivas y desarticulacin de las arcadas (maloclusin).

El dficit de la parathormona puede provocar que los dientes en crecimientono se calcitiquen apropiadamente. Si esto tiene lugar durante la niez, aparecen el esmalte hipopkico y trastornos en la calciticacin de la dentina. En el hiperparatiroidismo experimental en ratas, cuyos incisivos crecen diirante toda la vida. &tos se hacen quebradizos y deformes,micntras que el esmalte y la dentina ya formados no se alteran. La administracin de la hormona paratiroidea, en ratas paratiroidectomizadas, provoca la calcificacin normal del esmalte y de la dentina que se calcificandurante el tratamiento, pero no restauran lauestmchiras quese formaron en ausencia del estinlulo dela parathormona. En el hiperparatiroidismo la eliminacin de calcio y fsforo no afecta a los dientes, contrario a lo que sucede en el tejido seo, aunque aqullos pueden aflqjarse por la reabsorcin del tejido seo alveolar.

Placa dental
La placa dental e6 el cmulo de productos no calcificados, que se adhieren firmemente a la superficiedel diente, como microorgaiiismor,restos celulares,rcsiduos almentarios, etc. En la prctica, estos cmulos contienen proporciones indefinidas de un material que se remueve con ms facilidad, conocido como materia alba. El proceso de formacin de la placa dental se efecta en 3 etapas: 1 .Formacinde una pelcula adquirida sobre la superficie del diente. 2. Colonizacin por microorganismos especficos. 3. Maduracin hacteriana y estructnral.

Peiicuia adquirida
Despus de una limpieza profesional, nn material acelular comienza a desarrollarse en pocos minutos sohre las superficies supragingivales. En las reas donde la capa no est sujeta a efectos mecnicos (masticacin,cepillado,abrasin, etc.) va a progresar y engrosarse. Diversas pmebas confirman que los primeros dephitos corresponden a la$ protenas salivales. Al cabo de 2 h aparecen peqneas cantidades de glucosamina y galactosamina, las cuales son componentes de las glicoprotenas salivales. Los cidos diaminopimlico y murmico, constituyentesde las paredes bacterianas, no se detectan hasta pasadas las 24 h, cuando comienza a colonizarse la placa. Aparentemente las protenas que ms se encuentran en la placa dental son aqullas quese pueden ligar con facilidad a la hidroxiapatitapor uniones con el calcio yes por ello que las aninicas aparecen eii mayor proporcin. Sin embargo, tambin se han detectado protenas catintcas, unidas al fosfato del esmalte. En la figura 69.2 se muestran las posibles interacciones entre los grupos de las protenas y los de la superficie del esmalte.
Protenas

Esmalte supetiiciai

Fig. 69.2. lnteracrionks entre Iiis grupos de las protcinas y los dc la siiperfiric del esmalte. El enlace B no es roiiiii en las intcrarrioner esinsltc-peliiula. En los enlaces .\, C > D se muesti.aii las interaecioiics entre las protcinas aninicas (iddas) y el Caz' del esmalte siiperficid. En el cnlace E re representa In intcrarcin eiilre una protrina , aniiiica y e fosfato s u p ~ r k i a la tra\& de un puente de calcio.

de la placa. Algunos microorganismos pueden metabolizar los cidos que se han formado por otms. Los sustratos ms fcilmente utilizables son los azcares simples. Aunque el almidn no puede penetrar la placa, la saliva contiene la ainilasa saliva1que permite la liberacin de unidades de maltosa. Como componentes glucdicos mayoritarios de la dieta, el almidn y la sacarosa son los sustratos ms importantes para el metabolismo bacteriano (el primero previa accin de la amilasa). Los estafilococos y otros muchos microorganismos metabolizan la glucosa, al igual que ocurre en el msculo en anaerobiosis relativa, demodo que la presencia de oxgeno suficiente los hace inocuos en este sentido. Sin embargo, los lactohacilos y estreptococos que carecen de los sistemas de citocromos no pueden utilizar el oxgeno, por lo que incorporan glucosa y excretan cido lctico u otros cidos. Un tercer grupo de organismos, entre los que se encuentran la Veillonella, pueden metabolizar el cido lctico. Estos aspectos, relacionados con los factores de la placa deiilal y la produccin o incluso el consumo de cidos, as como determinada capacidad buffer en la propia placa, son de inters para la comprensin de cualquier hiptesis que trate de explicar la patogenia de la caries dental.

Bioqumica de las caries

Las caries dentales constituyen la dolencia ms frecuente del gnero humano y a pesar de todos los recursas queseinvierten en la investigacin,poco es lo que se sabe con entera certeza acerca de ellas. El dato ms seguro se refiere a su causa, de la cual no existen dudas que es hacteriana. Este punto de vista se sostiene, entre otros, por los hallazgos siguientes:

1. Las bacterias de la cavidad bucal son capaces de descalcificar el esmalte y la dentina in Wtro. 2. Losdientesnoerupcionadosno desarrollan caries. 3. Los antibiticos administrados a animales de experimentacin disminuyen la incidencia y severidad de las caries. 4. Las ratas que crecen en medios lilxes de grmenes no desarrollan caries, ann cuando sean mantenidas con dietas caringnicas.
Ahora existen bastantes evidencias en animales de experimentacin que apuntan hacia la bacteria Str~ptococcusmutansromo muy efectiva en la produccin de caries dental. Los estudios epidcmiolgicosen seres humanos tambin arrojan una estrecha relacin entre la presencia de esta bacteria en la placa y la prevalencia de caries dental. La inmunizacin de animales de experimentacin con vacunas de Streptococcirs mutans ha provocado en algnnas experiencias, no en todas, una significativa reduccin de las caries. No obstante, algunos consideran -a la luzde otros experimentos- queno es el tipo de bacteria presente el aspecto ms importante, sino las enzimas que ellas pueden sintetizar y que intervienen en el proceso. Los organismos que se encuentran en la placa dental, y que pueden convertir los restos alimcntarios en cidos, dehen considerarse cariognicos. Son mltiples los mecanismos propuestos que describen el proceso de formacibii de las caries dentales: la teora del glncgeno, las teoras organotrpica, biofsica 1~ endgena, y otras. No obstante, han prevalecido fundamentalmente 2, cuyos elementos bsicos exponemos a continuacin.

Principales mecanismos bioqumicos propuestos para la produccin de las caries

Esta teora comprende los hechos principales siguieiites: 1 .En la cavidad oral existen bacterias capaces de producir cidos, especialmente el lctico, mediante la va glucoltica anaerohia, a partir de los azcares. 2. El esmalte est compuesto, en su mayor parte, por sales de calcio, las cuales pueden disolverse por la accin de los cidos orgnicos. 3. La formacin de cido en la placa dental se puede observar directamente en la boca, despus de ingerir glcidos. 4. Por la accin de estos cidos, el pH desciende por debajo de 5,5 (pH crtico), en zonas Limitadas de la superficie del esmalte y se inicia la descalcificacin. Los propugnadores de la otra teora le han hecho numerosas crticas a sta, de las cuales relacionamos las ms destacadas: 1. Cuando los cidos disuelven el diente, provocan slo erosin, que no es lo mismo que caries. 2. Se ha demostrado queel esmalte hipocalcificado es ms resistente a las caries que el normal. 3. Experimentalmente pueden producirse caries,en condiciones de hipoacidez bucal.

CH,-C- C - O
OH
,
~

11

CH,-CC-O
OH
1

11

:
C ' .:,, m'

Esta teora fue propuesta en su versin ms completa en 1962. Se basa en los hechos siguientes:
l. La existencia de una flora proteoltica oral. 2. El carcter quelante de muchos productos del metaholisino bacteriauo.

'
t

'caz'

\
S
jj

. '
8

o-C-o
1 l

,-

OH-C-H CH3

,, ,,' ,

OH 1 / CH,-C-C=O
1

0-

Fig. 69.3. Distintos quelatos dc &ido lctico y calcio. En 10s ejemplos mostrados se evidencia la posibilidad de formacin de quelatus en diversas proporciones. As, se presentaii los quelatos de mono, di y trilactafo de caleiu.

La teora de la protelisis-quelacin atribuye la caries dental a 2 reacciones interrelacionadas, que ocurren simultneamente: destruccin microhiana de la matriz orgnica del diente, mayormente protenica, y disolucin de los cristales de apatitn por la accin de los agentes de quelacin orgnicos, algunos de los cuales se origina11 como producto de la descomposicin de la matriz. E1 ataque bacteriano se iuiciaria por los organismos proteolticos, los cuales descomponen las protenas y otras sustancias orgnicas en el esmalte. La degradacin enzimticade las protenas y los glicosaminoglicanos da sustancias que forman quelatoscon calcio y disuelven elfosfato de calcio insoluble. La quelacin puede causar la snluhilizacin y el transporte del material mineral, de ordinario iusnluhle. Se produce mediante la formacin de los enlaces covalentes coordinados y las interacciones electrostticas entre el metal y el agente quelante. En la figura 69.3 se presentan alfyms ejemplos. Los agentes de quelacin, entre los que figuran animes, cidos, aminas, pptidos y glcidos, estn presentes en los alimentos, la saliva y en la costra que puede recuhrir los dientes o sarro dentario; como hemos dicho, se generan, adems, por la degradacin de la matriz orgnica. Esta teora ha recibido mltiples crticas, pero casi todas estn encaminadas a refutar los resultados experimentales demasiado minuciosos o que poueu en duda la existencia de la accin proteoltica, pues se considera que al ser la protena del esmalte una escleroprotena del grupo de las queratinas, stas son muy resistentes a la accin de las enzimas proteolticas.

prevencin de la caries dental. Accin del flor

Los mtodos que se han utilizado para prevenir la canes dental son diversos y con resultados variables y contradictorios. De todos los mtodos, se ha demostrado que el ms efectivo es la incorporacin de fliioruros al agua de beber y, en menor escala, los enjuagues bucales con soluciones fluoradas y ms aisladamente mediaute la incorporacin del elemento a tabletas, sal, harina y leche. En las ltimas dcadas los deiitfricostluorados son de uso comn en casi todo el mundo. De lo dicho anteriormente resulta imprescindible para el estomatlogo y el mdico de la familia conocer en particular el metabolismo del flor.

Metabolismo del flor

El Ilor penetra en el organismo por 3 vas diferentes:

1. Por el aparato digestivo. 2. Por las vas respiratorias. 3. A travs de la piel.

El flor se ingiere en el agua y los alimentos en forma de conipuestos de 3 grados diferentes de solubilidad, a saber:
l. Compuestos muy solubles, como el fluorurode sodio (FNa), el hexafluorsilicato de sodio (SiF,Na,) y el cido fluorhdrico (FII), los cuales su11absorbidos, casi en su totalidad, bora mucosaintestinal. 2. Compuestos medianamente solubles que se ahsorben parcialmente. 3. Compuestos prcticameute insolubles que no se absorben, como el tluoruro de calcio (F,Ca) y el de aluminio (F,Al). En este ltimo caso, los alimentos que los contienen (como la leche al F,Ca) resultan fuentes insuficieiites de este elemento. La presencia de calcio y aluininio en la dieta disminuye la ahsorcin de flor y aumenta sil eliminacin.

Los vapores de fluururo de hidrgeno (FH) pueden pasar al organismo a travs de las vas respiratorias, sobre todo en las industrias donde se produce en exceso, lo que da lugar a una enfermedad profesional, la fluorosis, cuando se inhala en cantidades excesivas. La absorcin del flor a travs de la piel tiene lugar, fundamentalmente, por la aplicacin tpica de solriciones fluoradascoi1 propsitos teraputicos.

Vas de eliminacin
El tlor se excreta por el sudor en cantidades sorprendentes (hasta el S0 % del total de la excrecin diaria bajo condiciones de sodacin excesiva). Cuando se administra una dosis nica de flior, la orina puede contener del 20 al S0 O/a de la dosis en las 24 h siguientes. Despus de dosis repetida9 duraiite meses, por esa va p~iedeexcretarsems del 50 %, y en proporciones continuadas por mayor tiempo se llegan a excreta fracciones an mayores (hasta el 80 % o ms).

Dishibucin delflor en los dientes

El contenido de flor eii los diente5 no es constante. Este clemento se encuentra en mayor concentracin en las capas externa? que en las internas; el porcentaje de prdida

del material inorgnico vara de135,7 % en las capas externasa148 % en las internas. Existe, pues, una relacin inversa cutre el contenido y la solubilidad del flor en las capas del esmalte.

Mecanismo de accin
En las distintainvestigaciones quese han realizado al efecto, se ha comprobado que cuando el fosfato y el calcio de la hidroxiapatita del esmalte y de la dentina se exponen a la accin de soluciones de flor, se descomponen en fluoruro de calcio y fosfato de sodio: a F 1 0 Ca,, (PO,),(OH), + 20 N CaF, + Na,PO,

+ 2NaOH

El fluorurode calcio precipita como un polvo fino sobre la superficiedel esmalte y los dems productos se disuelven, peru como el CaF, no se retiene por completo,una parte de este compuesto puede ser removido por la saliva y participar en una segunda reaccin. Las soluciones diluidas de flor transforman la hidroxiapatita en fluorapatita:

Tres factores distintos ouedeu contribuir al efecto beneficioso del flor en la prevencin -y quizs la reparacin- de la caries dental. El grado en que realmente cada uno de ellos contribuye al mecanismo de accin es una discusin que no ha terminado todava. El primer efecto es hacer al esmalte menos soluble. La solubilidad del esmalte formado durante la inzestin de amafluorada se reducelizeramente. debido a aue los cristales de fluorapatita son ms insolubles. Sin embargo, el fenmenodisolutivo se inhibe tanto por los fluoruros como por el zinc, pero slo aqullos han demostrado poseer actividad anticaries. El segundoefecto que se invoca postula que el flor propicia la remineralizacin. Estudios avanzadoscon tcnicas de resonancia magntica nuclear han revelado nuevos productos de la interaccindel flor con el esmalte, designados NSAF (nonspecifically adsorbed fluoride) que significa fluoruros adsorbidos no especficamente. Estas especies,junto con la fluorapatita,lafluorhidroxiapatitay el fluomro de calcio (CaF,) contribuyen a la remineralizacin de las lesiones. Finalmente, un tercer efectu es la inhibicin del metabolismo glucdico, que puede producir el flor en las bacterias de la placa. El pH de la placa bacteriana de los nios tratados con flor no desciende tanto frente a los glcidos, como lo hace en las placas de nios controles. Adems, los iones fluornro reducen el ahnacenamiento intracelular de los polisacridos por las bacterias. Es sabido que el flor inhibe las enzimas de la gluclisis. En estudioshechos en 1995 se exuuso esmalte humano a cultivos de Sireotococcus mutans, en medios ricos en sacarosa y con diferentes concentracionesdeflor aadido. Estos experimentosdemostraron que la detencin de la lesin se produca por 2 vas: primero, la inhibicin de la produccin de cido bacteriano redujo la cada del pH, lo que resulta en menor subsaturacin con respecto a la hidroxiapatita y, como consecuencia,disminuye el proceso de desmineralizacin; segundo, las interacciones del flor con el esmalte provocaron un incremento de la reprecipitacinde estemineral durantelos perodos de sobresaturaciny un mayor decremento en la desmineralizacin durante los perodos de suhsaturacin. En cuanto a la funcin del flor -alaluz delas2 teoras principales acerca de la patogenia de la caries- cada autor lo explica en el marco de sus postulados. Los partidarios de la teora acidfila se basan en el hecho de que la fluorapatita es menos
e

soluble que la hidroxiapatita y, por lo tanto, ms resistente a formar sales con el cido lctico, aun en medio cido. Los defensores de la protelisis-quelacin se hasan en el Iiecho ya demostrado de que los compuestos fluorados son capaces de inhihir la disolucin por quelacin que el poderoso agente quelante Na-EDl'A (sal sdica del cido etileildiaminotetracbtico) ejerce sobre los compueslos de calcio. Esa accin es ms efectiva sobre los fosfalos> el carbonato de calcio. En Cuba se han empleado los eojoagues con sohiciones fluoradasen forina masiva enlos escolaresyse desarrolla un programa para la fluoracibn del agua potable en los acueductos, el ciial se aplica ya en varios municipios del pas.

Resumen
La saliva, medio natural que baa la cavidad bucal, contiene ms de199 % de agua; a diario se producen, aproximadamente, 13 L;participa en los procesos de masticacin, deglucin, digestin qumica y, a veces, en la regulacin de los lquidos y eledrlitos del organismo. Los constituyentes slidos de la saliva comprenden protehas, mucha, urea, cido nco y sales inorgnicas. La amilasa saliva1 y la lisozima son enzimas relevantes, presentes en la saliva. Su viscosidad proviene de la mucha, una mezcla de glicoprotenas. La saliva ejerce una importante accin amortiguadora de los cambios de pH en la cavidad bucal, por los sistemas cido carbnico/bicarbonato,cido fosfrico/ fosfatos, cido dtrico/citratos y las protenas presentes en ella. El esmalte, tejido ms duro del organismo, tiene una matriz orgnica formada por la seudoquerana, denominada amelogenha, la cual se mineraliza en forma de cristales de apatita. Estos cristales pueden absorber iones sobre su superf~cie y rodearse de una capa de agua denominada vaina de bidrataein. La dentina, que es el tejido ms abundante del diente, es de dureza intermedia entre el esmalte y el cemento. Su matriz orgnica est formada por colgeno y glicosamiooglicanos, y su constitucin inorgnica es similar a la del esmalte. El cemento es de composicinms cercana a la del hueso. La sustancia orgnica fundamental es la colgena. La pulpa dentaria es el nico tejido blando de los dientes. Los microorganismos pueden proliferar en l y causar dao; es una variante de tejido conectivo. Su metabolismo gluddico degradativo es completo y as provee de energa, materiales para la sntesis de los piicosaminoglicanos, las cadenas carbonadas precursoras de p r o h a , bidroxiprolina y glieina (aminocidos preponderantes de la colgena), y alcoholes para formar steres de fosfatos en el proceso de calcicacin. La caries dental, la ms extendida entre todas las dolencias de la humanidad, es causada por bacterias. El Streptococcusmutans, especficamente,ha sido el ms incriminado. Dos teoras explican el proceso de formacin de la caries: la teora acidla de Miller se basa en la disolucin de las sales de calcio del esmalte y de la denna por la accin de los cidos orgnicos, producidos por las bacterias. La teora de Schatz y Marn postula como premisa Is accin pmteoitica de las enzima6 bacterianas y la desorganizacin de los cristales de apatita por la accin de agentes quelantes, producidos, en parte, por la degradacin proienica y de los glicosaminoglicanos de la matriz. El flor ha demostrado ser un agente &caz contra la d e s dental. Este elemento se absorbe por Las vas digestiva y respiratoria, y por la piel. Se elimina abundantemente por el sudor y la orina El flor hace al esmalte menos soluble, debido a que los cristales defluorapatita resisten m8s la disolucin cida que los de hidroxiapatita. Adems, el flor facilita
~

la remineraliuicin, puesto que hace precipitar el fosfao de calcio en soluciones saturadas. Por si todo esto fuera poco, es bien conocido el carcter del flor como inhibidor de la gluesis. En Cuba el flor se aplica en la pmvencin de la caries mediante el uso tpico y en el agua potable.

Ejercicios
1 .Cite las 2 enzimas de mayor significacin presentes en la saliva y sus respectivas actividades catalticas. 2. Nombre el constituyente que ms contribuye a la viscosidad de la saliva y cul es su naturaleza qumica. 3. Mencione las funciones de la saliva y explique su accin buffer. 4. Establezca un anlisis comparativo de las caractersticasde la matriz orgnica y el mineral de los 3 tejidos mineralizados del diente. 5. Describa el significadodel metabolismo glucdico de las clulas en la pulpa dentaria.

6. Analice especficamente la funcin de las protenas en el proceso de formacin de la placa dental. 7. Diga cul es la naturaleza, el origen y la funcin de las dextranas en relacin con la placa dental. 8. Argumente las propiedades del flor que pueden explicar su accin protectora contra la caries dental. Y. Sobre la base desus propiedades qu funcin fundamental se le atribuye al flor en cada una de las 2 teoras principales acerca de la gnesis de la caries? 10. En la tabla 69.1 se observa que [NH,'] es mucho mayor en la saliva que en el plasma sanguneo Existe un transporte activo? .Quexplicacin le da usted a este hecho?

Resumen de la seccin
Al trmino del estudio de esta seccin se enriquece mucho el conocimiento acerca de la enorme diversidad que est contenida en la amplia gama de tipos celulares que integran el cuerpo humano. Aunque las vas metahlicas fundamentales son compartidas en comn por los distintos tejidos, existen muchas otras fuentes de variaciones bioqumicas. La seccin representa un recorrido interesante por los puntos relevantesde este conjunto de diversidades. La funcin de la sangre, como transportadora de oxgeno, tiene de forma muy precisa su correspondencia a nivel molecular en la hemoglobina. El metabolismo del eritrocito, clula carente de ncleo, mitocondrias, ribosomas y dems organelos, presenta numerosas peculiaridades, entre ellas la regulacin de la funcin de la propia hemoglobina mediante un metabolito derivado de la gluclisis. Por otra parte, la especificidadde los gnipos sanguneos radica en los componentes glucdicos de la membrana eritrocitaria. En la sangre encontramos una serie de reacciones complicadas, que culminan con la conversin del fibringeno en fibrina, lo que constituye la coagulacin sangunea. En el tejido nervioso se genera y propaga el impulso nervioso, en virtud de las protenas especializadas que responden a pequeos cambios de voltaje o a la unin a ellas de sus ligandos especficos, abriendo canales a algunos iones que de esta forma anulan o invierten el potencial de reposo. En el cerebro, el metabolismo es fundamentalmente aerobio y en l los aminocidos libres desempekan una funcin ms relevante que en el resto de los tejidos. Las complejidades en las asociaciones que se establecen, tanto en el lugar como en el tiempo entre las neuronas, comienzan a aclararse parcialmente. Hoy por hoy, falta mucho para entender las funciones superiores del SNC, probablemente la cuestin de ms alta complejidad en las ciencias naturales. La retina es el tejido de ms alto consumo de 0, por peso seco en el cuerpo humano. La esencka del fenmeno de la visin es la conversin de la energa luminosa en impulso nervioso. Un cromforo, el 1 1 4 s retinol, se combina con una protena. Como consecuencia, se origina un cambio en la permeabilidad de la membrana, lo que altera el potencial de reposo y genera el impulso nervioso. Las protenas que constituyen los filamentos de las fibras musculares experimentan cambios conformacionales, como resultado de la energa liberada por la hidrlisis del ATP. Los filamentos se deslizan e interdigitan. Al acortarse estas estructuras se produce la contraccin del msculo.

El tejido adiposo es uno de los tejidos ms secos del organismo,por su alto contenido en lpidos (60 %). Su metabolismo se especializa en formar triacilgliceroles y acuinnlarlos, junto a los que le llegan de los quilomicrones y las lipoprotenas de muy baja densidad. Una lipasa intracclular, sujeta a la regulacin hormonal, cataliza la hidrlisis de esas reservas. El tejido adiposo representa un dispositivometablicamente muy activo en la formacin y degradacin del comhustihle lipdico de reserva, con un sistema de regulacin que lo pone rpidamente en funcin de las condiciones metablicas del organismo. El te,jido concctivo debe sus principales caractersticas a la naturaleza de la sustancia intercelnlar, compuesta por diversos tipos de proteoglicanos y un grnpo de protenas, entre las que predomina el colgeno. La estmctura de esta protena es muy peculiar, con un predominio absoluto de 3 aminocidos: glicind, alanina y pmlina o hidroxiprolina, y un tipo de estructura secundaria, propio de ella, la triple hlice del colgeno. Los proteoglicanos son complejos de heteropolisacridos y protena, en los cuales la proporcin de esta ltima es pequea (del 5 al 10 % o menos). La porcin glucdica se conoce ahora como glicosaminoglicano, pues todos contienen glucosamina o galactosamina. Las funciones de los proteoglicanos tienen que ver con sus propiedades hico-qumicas, ya que le confieren resistencia a los tejidos frente a las compresiones, hacen las veces de tamices moleculares y desempean funciones especficas en la morfognesis y lubricacin de las articulaciones. Los tejidos duros del diente tienen una matriz orgnica, que en el caso del esmalte es una seudoqueratina, y en la dentina y el cemento es el colgeno. En la cavidad bucal la saliva ejerce una importante accin amortiguadora de los cambios de pH, en virtud de su composicin. Independientemente de que existen 2 teoras diferentes para explicar la gnesis de la caries dental, el flor ha demostrado ser un agente eficaz contra ella. Este elemento hace al esmalte menossoluble, debido a que los cristales defluorapatita resisten ms la disolucin cida que los de hidroxiapatita; adems, facilita la remineralizacin e inhihe la glucblisis bacteriana.

Introduccin a la seccin
1

a nutricin es un campo de extraordinaria importancia para el profesional de la salud, pues se ocupa de la repercusin que tiene para el organismo el aporte alimentario y su adecuada utilizacin.

La nutricin inadecuada origina numerosas afecciones, ocasionadas por la deficiencia o el exceso de algn nutriente: las enfermedades carenciales,el kwashiorkor, el inarasmo, lai hipervitaminosis y la obesidad,son ejemplos claros de afecciones nutricionales. Poro~parte,unadietaadecuadaeslamejorfodeprevenuuna~nedeenfennedadts crnicas no infecciosas, como la aterosclerosis y la hipertensin, entre otras. Adems, la dieta es un importantsimo elementoen el tratamiento de diversa enfermedades, tal eselcaso de ladiabetes mellitus o dela propia hipertensin,por slo citar 2ejemplos. La composicin de la dieta es muy diferente entre un pas y otro, e incluso difiere entre los distintos sectores de una misma nacin, debido a las disponibilidades de recursos, derivadas de las diferencias socioeconmicas, y a los hbitos y tradiciones cnlturales. As, el consumo de protenas es 6 veces mayor en los paises desarrollados que cn los subdesarroUados,entanto quelos problemas delamalnutricin azotan a las poblaciones con menos recursos y conducen a graves afectacionesde su cuadro de salud, elevan la mortalidad infantil y constituyen un factor decisivo en sus bajos promedios de vida. La cifra de desnutridos en los pases del Tercer Mundo sobrepasa los 450 millones; la solucin de estos graves problemas nutricionales es nna justa demanda de estos pueblos, lo que redundara positivamente en la salud mundial. Las tradiciones y los hbitos culturales tienen una notable influencia en la nutricin de los pueblos; por ello, es importante contribuir a mqjorar la educacin de la poblacin en este campo, de manera que se logre una mejor utilizacin de los alimentos de que disponen, combinando ms apropiadamentelos distintos componentesde la dieta.
Tomada de Biochemistry. Lubert Strycr. Cuarta edicin, 1995

La dieta no es ms que la mezcla de los alimentos que ingerimos diariamente. Los alimentos son las sustancias que aportan los nutrientes,por ejemplo: el arroz, la carne, el pescado, el huevo, los vegetal*, las fruas, la leche,etc.; los nutrientes son compuestos no sustituiblesentre s, que estn contenidos en los alimentos; ellos son las protenas, los glcidos, los lpidos, las vitaminas y los minerales. En esta seccin se estudiarn las bases moleculares de la nutricin humana, con el propsito de proveer al profesional de lasalud de los conocimientos que le permitan diagnosticar las afecciones nutricionales para contribuir -mediante la educacibn nutricional-a erradicar los malos hbitos alimentarios de nuestra poblacin, y a la promocin de salud eo su radio de accin. En los captulos 70 y 71 se tratarn los requerimientosenergticosy protenicosdel ser humano. El captulo 72 est dedicado al estudio de la funcin de los glcidos y los Ipidos en la dieta humana. Las vitaminas y los minerales se desarrollan en los captulos 73 y 74, respectivamente.

El ser humano depende de una continua adquisicin de sustancias exgenaspara el crecimiento, desarrollo y normal mantenimiento de la vida. As, adems de los requerimientos energticos, necesita las fuentes de carbono, nitrgeno y azufre, los elementos inorgnicos (minerales) y un conjunto de sustancias orgnicas, ms o menos complejas (cidos grasas y aminocidosesenciales,ascomoun grnpode vitamina9,que no pueden ser sintetizadas por l y se han de obtener a partir de los alimentos de ladieta. Existen 6 componentes principales de la dieta: glcidos (o carhohidratos), Ipidos, protenas, vitaminas, minerales y agua; los 3 primeros proveen energa y constituyen las fuentes fundamentales de carbono y nitrgeno; dichos componentes son, adems, los precursores de las biomolculas, que mantienen las actividades metahlicas de los diferentes tejidos; a estos componentes (glcidos, lpidos y protenas) se les suele reconocer como los nntrientes fnndamentales. Las vitaminas, los minerales y el agua no aportan energa, pero son esencialesen los mecanismos hioqumicos de los procesos metablicos y muchos de ellos se requieren para la actividad normal de algunas enzimas y hormonas. Los minerales desempean, adems, una funcin importante en el mantenimiento del equilibrio cido-bsico del organismo. En este captulo trataremos los requerimientos nutricionales del ser humano, en general, y sus necesidades energticas, en particular. Adems, en l se estudiarn la composicin y el contenido energtico de los principales alimentos de la dieta.

Requerimientos energticos
Los requerimientos energticosdel ser humano estn dados por las necesidades de energa que l precisa para mantener su salud, garantizar su crecimiento y realizar un grado apropiado de actividad fsica. En la prctica, las estimacionesde las necesidades energticas se basan en los estndios del gasto energtico,que se hacen,frecuentemente, por el clculo de la ingesta de outrientes. La fuente energtica fundamental en la biasfera es la luz solar, que es aprovechable por los organismos vivos a travs de lafotosntesis. Como se trat en el captulo 45, dicha energa es utilizada por los organismos fotosintticos en la formacin de carbohidratos, a partir del CO,. As, pues, la energa que obtienen los animales por la ingestin de los glcidos y otros compuestos carbonadas procede, en ltima instancia, de la energa luminosa.

En el ser humano, la energa necesaria para los procesos fisiolbgicos vitales es aportada por la oxidacin de los glcidos, los Ipidos y las protenas. Los requerimientos energticos diarios o las necesidades calricas estn dados por la demanda energtica basal del individno, afectada por un factor que tiene en q ~ e n t la a actividad fiica que l desarrolla. Desde luego, existen algioias condiciones que inodifican estos requerimientos, como son los perodos de crecimiento, enibarazo o lactancia, y diirante el transcurso de alguna cnfcrmedad o cii la etapa de su convalecencia, sitnaciones stas en las qiie se precisa de iin aporte extra de energa. La deinaiida energtica hasal (tasa de metabolismo hasal ITMBI) es la energa necesaria para el mantenimiento de los procesos vitales, en condiciones de reposo total. La TMB depende principalmente del tamao y de la coniposicin del cuerpo, asi como de la edad. En la prctica, el factor mas importante para el clciilo de la TMB es el peso corporal. En los adultosmenores de 60 aos la edad modifica poco la TMB, ya que para un en cada dcada; sin embargo, en los misnlo peso aqulla disniinuye slo en el 1 70, nios e! camhio de la TWIB por kilogramo de peso, segun la edad, es mucho niayoi. (aproximadamente del 5 % cada aio. entre los 3 y 10 aos de edad). Es iniporlantc s e h l a r que no puede precisarse si este cambio se debe a la edad por siiiisma, o si es causado por el increiiiento del peso corporal, relacionado con el crecimiento qiie ocurre a estas edades. Dado que para una misma edad el aspecto determinante principal de Ia'I'MB es ei peso corporal, se Iia discutido mucho si para estas estimaciones se emplea el peso real del individuo o la mediana del margen de referencia (peso ideal para la talla); en caso de qiie se utilice el primer criterio para la determinacin de la$necesidadesenerghticas de un individuo, el efecto a esperar ser entonces el mantenimiento de sii estado actual; en caro de que se eniplce la mediana del margen de referencia, segnndo criterio, se obtendr un efecto normativo, es decir, el peso del individuo tender a alcanzar el valor de dicha mediana. La seleccih del peso a emplear en el clculo de las necesidades energticas de una persona depender del efecto qiiese desee lograr, ya sea mantener su peso actual o modificarlode manera que se acerque al peso ideal para su talla. El sexo es otro aipecto importante a tener en cuenta, a la hora de estahlecer valores de referencia de la TMB. Si bien durante la intancia (hasta los 10 aos) no se hacen distinciones entre las henihras y los varones, con la excepcin de aqullas que se derivan de las diferencias del peso corporal, en la adolescencia aparecen diferencias significativasen uno y otro sexos,en relacin con la composicin corporal y el momento en que se produceel crecimiento diirante la pubertad. La edad, y con ella el crecimiento y las modificaciones fisiolgicas que va experimentando normalmente el organismo en su desarrollo, modifica de manera considerable el gasto energtico. Las necesidades de energa para el crecimiento (excepto en los lactantes) son relativamente pequeas, en comparaciii con las que se requieren para el mantenimiento. La comprobacin de un crecimiento adecuado es itil para evaluar si el aporte energtico es o no satisfactorio. Para estimar el gaito energticoasociado al crecimiento en los nios de corta edad, se ha propuesto el valor aproximado de 5 kca1.g~'como costo energtico del crecimiento. En la tabla 70.1 se presentan los valores estimados para prematuros, lactantes normales y lactantes convalecientes. Por ser la edad un factor que influye iuarcadamente en el valor de la TMB, bien de maneradirecta o a causadelos cambiosde maiacorporal,relacionadoscon el crecimiento o el envejecimiento, se han definido intervalos principales de edad que refle,jen las caractersticas fisiolgicas de los hombres y las mujeres, e incluyan los cambios continuos en la tasa de crecimiento, la composicin del organismo y la actividad fisica, entre otros. Atendiendo todas estas consideraciones planteadas, se han establecido, para cada sexo, 6 intervalos principales de edad: de 0 a 3 aos; de 3 a 10; de 10 a 18; de 18 a 30; de 30 a 60 y de 60 aos o ms.
1224

Tabla 70.1. Estimacin

del costo energtico del increnicnto del peso" Costo energtico

Nios prematuros

Lactantenomalrr 1.actantesenrwupcracin demalnutiiciiin

5.7 5,h 7 1 :):x:

1985.

* Tornado del Rqiorte del Comit hlix, de Expertos FAOIOMS, ** SE repurtaii valores estiiiiados desde 3,s Iiasta 7.1.

El clima afecta el gasto energtico del individuo; en un clima fro se requerir la liberacin de calor adicional para el maoleniniiento de la temperatnra corporal. Se ha demostrado un incremento de la ThlB en personas con vestidos ligeros, expuestas a temperatura ambiente baja, aun cuando uo tiriten. Por otra parte, la T W B decrece en climas de altas temperatnrs. La TMB diaria se determina con el empleo de las ecuaciones de regresin que aparecen en la tabla 70.2, a partir del peso real o el recomendable, de acuerdo con lo que se desee obtener (mantener el mismo peso o lograr un efecto norinativo, como se seal anterk>riiientej. Para estimar las necesidades energticastotales por da, se moltiplicar el valor de Ia'iMK por un tactor que incluye el costo energttico de la actividad fisica desarrollada por el individuo, del incremento del tono muscular y de las necesidades de energa derivadas del crecimiento,el embarazo, la lactancia o la enfermedad, cuando proceda. Resulta interesante resaltar que el costo de energa de la actividad fsica tambin se relaciona con el peso corporal.
Tabla 70.2.

Clculo de la TMB a partir del peso corporal (P= peso en kg)"

FAad (aos)
Hombres
0-3 3-10 10-18 18-30 30-60 > 60

Mujeres
0-3 3-10 10-18 18-30 30-I;U > 60

* 'iomado del Reporte del

Comit dc Expertos FAOlOhIS, 1985.

La actividad fisica incrementa las necesidades energ6ticas. en dependencia de su intensidad y duracin. En relacin con el gaito energtico, derivado de dicha actividad, se tienen en cuenta, por separado, las actividades ocupacionalesy aqullas que suelen desarrollarse en el tiempo libre (se incluyen las tareas domsticas y las actividades sociales), las cuales pueden ser deportivas, culturales o recreativas, entre otras; a este

tipo d e actividades s e les h a llamado, por algunos especialistas, actividades discrecionales. En la tabla 70.3 se presentan ejemplos de afectacin de la TMB, provocada por la realizacin de un grupa de actividadesfsicas: actividades ocup'dcionales y actividades discrecionales. Se puede inferir fcilmente cmo la misma actividad, en ocasiones, puede considerarse ocupacional o discrecional para un individuo. Los datos expresan el valor del factor por el cual debe multiplicarse la TMB.

Tabla 703. Gasto energtico bruto en un grupo de actividades ocupacionales

discrecionales" Actividades Gasto energtico

Ocupacionales
Trabajo deofiUna: Sentadoen elescritorio De pie y movindose Indwinligera: Imprrsin
zapateiia Caipgiteda E * l

Indushl'aqunica Reparacin de vehculos Trabajodepanadetia Tiabajodelaboratorio ConshuEUn: Colocar ladrillos Decoracin y pintura Cavar hoyos
Sacaroena

Tender pisos
C l a w
AgIiNlhira: CoItaroa

Recoleccin de espigas Derbroce (segn el tipo de terreno) cortarrbole~

Pbntar

Alimentar animales Cortarhiwhamnmaehete Ordeamanual Recoleccin de cocos Trabajosde mda Desmaiezar Siembra T * Recolecciiiii de tubrculos Recoleccin de frutas de los rbo1e.s Conducir hactores
Mine*.

Trabajo de pico Trabqjodepaia Constmcun de soportes Transporte wncarreaUas Fuerimannada% Limpiezadematerial Marchaencamtera

a b ~ 703 a (continuacin)

Actividades Carreradeasalto Marcha enselras Pilotaje de helicpteros

Gasto energtico

Dormido Amtadodespierto Sentadotranquilo De pie tranquilo Bailar Caminarlentamente Caminar a velocidad n o d Caminar cuesta aniba:
Irntmte

Lentamentey con una cargade 10kg Con rapidez Caminarcu&aabajo:

Lentamente A velocidad normal

Con rapidez
Lavarlaropa

Coser Alarun machete Coanar Lipiezagera Limpieza moderada (incluye Limpieza de ventanas, etc.) Barrerla casa
Plandiar Frqarla vz+lla Cuidar n i Cacmar

Condnccin de vehculos ligeros Conduccin de camionm Remar en wnoa Pescar con caa Pesarconarpn
Ca2arpj-

cazar puercos Juegode naipes,domuiu otras actividades recmti~'d~sedentarid~ Actividadesrecreativasligeras (juego de bolos, billar, golf, navegacin a vela, etc.) Actividades recreativa% moderadas (bae,natacin,tenis, etc.) Actividades recreativas intensas (ftbol,atletismo,remou, etc.)

* Tornado del Reporte del Comit Mixto de Expertos E40/OMS,

1985.

La intensidad y duracin de la actividadfisicainfluye notoriamente en el consumo energtico de un individuo. As, se sabe que un hombre normal, de 70 kg de peso, consume 65caVhmientras duerme; 100cal/h reposando sentado; 200 c a n caminando despacio; 570 c a n corriendo y 1 100 c a n subiendo escaleras.

Las necesidadc.~ energticas dependen, por tanto,& la actividadfisica delsu.jeto, as como del tamao y composicin corporal del individuo, de la edad, del clima en el cual habite, del sexo y de las otras condiciones anteriormente sealadas, como son el crecimiento, el embarazo, la lactancia y la enfermedad o convalecencia. En las personas sanas del mismo sexo, y de edad y peso semejantes,el factor ms importante en la variacin del gasto energtico lo constituye la actividad Isica. Para estimar los requerimientos energticos de cualquier persQna se suele partir de la TMB, afectada segnlos factores que se presentan en la tabla 70.4, que como ya se explic incluyen el gasto energtico derivado de la actividad fsica. Para facilitar la estimacin del costo energtico, debido a la actividad fsica ocupacional, sta se ha clasificado en 3 grandes grupos: trabajo ligero, moderado y pesado.
Tabla 70.4. Valores medios del costo energtico de la actividad Iisica o ~ i l p a ~ i ~ n a l

(3niveles) en IosIiombres y las innjcre~" Mujeres Costo medio (factor de la TMB) Hombres Costo medio (factor de la TMB)

Tipo de trabajo Trabajoligero:75 % del tiempo sentado o de pie. 25 % del tien~po de pie y inuvindose 'l'rabajomoderado: 25 % del tienipo sentado o de pie. 75 % del tiempo en la actividad especifica Trabajo intenso: 40 % del tiempo sentado o de pie. 60 % del tiempo en la actividad ocupacionalcspecuica

1,7

2,2

28

3,s

* Tornado del Reportc de la

Carnisin Mixta de lixpcrlos FAOIOMS, 1985.

Se considera actividad ocupacional ligera la que realizan los oficinistas, los dependientes, los maestros y otros profesionales; la actividad ocupacional moderada es la que efectan los trabajadores de la industria ligera, los dependientes de almacenes, los trabajadores agrcolas y forestales, as como los profesionales de la danza y los atletas. Se clasifica como traba,jo pesado o intenso aqul que e,jeciitan los mineros, los leadores, los herreros y los obreros de la construccin. Esta clasificacin no debe emplearse de manera rgida, pues, en ocasiones, por la ndole de la labor que realiza u11trahajador agrcola, ha de ser inclnido en actividad fsica pesada: por eso, al ubicar a un individuo dentro de cada categora, ha de tenerse en cuenta el tipo de trabajo que realiza en realidad y no clasificarlo simplemente por el p e t i ~de l la actividad que desarrolla. En las tablas 70.5 y 70.6 se exponen las cifras de los requerimientos energticos promedio calculados para los lactantes y los nios de 1 a 10 aos respectivamente. Los requerimientos energticos diarios promedio para nios mayores de 10 aos, adolescentes y adultos de 18 a 30 aos (homhres y mujeres) se presentan respectivamente en las tablas 70.7 y 70.8. Los requerimientos energticos diarios, de acuerdo con el peso corporal y el factor dela TMB para los adultos comprendidos entrelos 30 y 60 aos, se presentan en la tabla 70.9.

mbls 705. Necesidades energticaspromedio, calculadaspara los lactan tes desde el

nacimiento Iiasta los 12meses de edad* Necesidades energticas diarias totales Nios Nias kcal k.1 kcal kJ

Edad (meses)

*Tomado del Reporte del ComitG Mixto de Expertos I~AOIOMS, 1985.

lhbla 70.6. Requerimientos energticos diarios proniedio de nios y niras

de 1a 10 aos* Necesidades energticas diaria5 totales Nios Nias Edad (aos) kcal
1200 1410 1 560 1 690 1810 1900 1990 2 070 2 150

kJ
5,02 S,89 6,52 7,07 737 7,94 8,32 8,66 8.99

kcal
1 140 1310 1440 1 S40 1630 1 700 1770 1830 1880

kJ
4,76 5,48 6,02 6,44 6,81 7,11 7,40 7,65 7.86

* Tomado del Reporte del Comit Mixto de Expcrtos FAOIOMS, 1985

Para edades avanzadas se estima que las necesidades de energa disminuyen en un 5 %,tanto en la dcada de los 40 aos, como en la de los 50. Entre los 60 y 69 aos la disnlinucin de las necesidades calricas es de alrededor del 10 %, y al arribar a los 70 desciende otro 10 % ms. En la tabla 70.10se resumen las requerimientasenergticas para los hombres y mujeres mayores de 60 aos, de acuerdo con el peso corporal y el factor de la TMB.

Tabla 70.7. Necesidades medias diarias de energa para los nios mayores de 10aos

y adolescentes (hasta los lSaos), de uno y otro sexos* Requerimientos medios diarios de energa*'" Muchados Muchachas Factor de Factor de la TMB kcal kJ la TMB kcal

Edad (aos)

kJ

'"*

Tomado del Rcporte del Comit Mirto de Expertos FAWOMS, 1985. Para estm valores se asumen Ins factures de la TMB que se indican en cada casa y que corresponden a factores promedio para cada edad. Si se desea un valor exacto de los requerimientos energticos, deber5 realizarse el clculo del factor de la TMB, de acuerdo con la actividad fisica del individuo.

Tabla 708. Requerimientos diarios de energa para los adultos entre 18a 30 aos, segn peso corporal y factor

dela T M ! Hombre Peso

1,4 TMB
kcal

1,6 TMB kcal MJ

1,s TMB
kcal

2,O TMB
kcal

2,2 TMB kcal

(kg)

MJ

MJ

MJ

IMJ

Mujer
40 45 50 55 1500
1600

63 67 7J 76 S,] 86
9 ,o

1700

7,2 7,7 8,2 8,6 9,2 9,s 103 108

1950 21 U O 2 200 2 350 2 500 2 600

1 850
1950

1700

1 850
1950 2 050 2 150 2 250

2 100
2 200

60
65 70 75

2 300 2 450 2 550

2 750 2 900

9,4

* Tomado del Reporte del Comit de Expertor Mixto FAOIOMS, 1985.

~ a b 70.9. h Requerimientosenergticos diarios segn el peso y el factor de la TMB en los adultos entre 30 y 60 aos*

Hombre Peso (kg) 1,4 TMB kcal MJ 1,6 TMB kcal MJ

1,s TMB
kcal MJ

2,O TMB kcal MJ

2,2 TMB kcal MJ

Mujer
40 45 50 55 60 65 70 75 1650 1700 1800 1850 1900
1950 2 050

69 73 73 7,7 7,9

1900 1950

7,9 8,3 8,s 8,s 9 , O Y , 4 Y,6 10,O

2 150 2 200

8,9 93 9.6 9,9 10,2 10,s 10,s 11,3

2 350 2 450 2 550

2 650

9,9 10,4 10,7

11,O

2 050
2 100 2 200 2 250 2 300 2 400

2 300 2 350 2 450

2 550

2 600 2 700 2 800 2 900 3000 3 100 3 200 3 300

10,9

114
11,7 12,l 12.4 12,9 13,2 13,s

8J
84 8,s

2 750 2 8 2 900 3 000

1 1 3 11,7 12,O 12,6

2 100

2 600 2 700

* Tomado del Reporte del Comit Mixto de Expertos FAOIOMS, 1985.

Los requerimientos energticos diarios se incrementan con el embarazo. Se ha calculado que en el primer trimestre aumentan en 150kcdda (630M), y en el segundo y tercer trimestres en 350 keaVda (1 465 k l ) . Sin embargo, recientemente el Comit de Expertos de la FAOIOMS consider que como al comienzo del embarazo se acumula determinada cantidad de grasa, y que tanto los ciclos de trabajo, como el apetito de la gestante varan mucho, no parece que las necesidades energticas suplementarias difieran en los 3 trimestresy e h a n que pudiera emplearseel valor de 285 k d ( 1 WO W) adicionales por da, mientras dure la gestacin;esta cifra pudiera ser menor: 200 kcal (840 U ) en mujeres sanas que reduzcan su actividad fisica. Durante la lactancia, la mujer incrementa sus necesidades calricas en dependencia de la cantidad de leche sintetizada. En la tabla 70.11 se presenta el costo energtico durante el embarazo y la lactancia; en este ltimo caso, los requenmiento~ se han calculadosobre la base de una eficienciade conversindel 80 % y de un estimado de 0,7 kcal(2,9 kJ) por mL de leche materna; si la lactante tiene cantidades elevadas de tejido adiposo, posee una reserva para el perodo de lactancia y entonces las necesidades de la cual ~ o d r disponer energtiw suplementariasseran menores.

%bla 70.10. Nece.sidades ener~dticas diarias en los adultor mayores de 60 aios, segn el peso y el factor de la TMR"

Peso (kg)

1,4 TMB kcal NlJ

1,6 TMR kcal MJ

1,s TMB
kcal MJ

2,0 TMB kcal MJ

2,2 ThlB kcal M.1

Mujer

" Tomado del Kcporte del Comit Mixto de Expertos FAOIOMS, 1985.
Tabla 70.11.

Necedades energ6tica.s suplenientarias durante el embarazo y la lactancia* Necesidades energticas suplementarias kcallda kJ/da

Condiciones

:-E
Actividad normal Actividad reducida LadnUa
285 200 500

* Tornado del

Keporte del Comit Mixto de Expcrtoa FAOIOMS, 1985.

A continuacin se muestra un ejemplo del clculo de las necesidades energticas diarias de un sujeto delsexomasculino,de 25 aos y 65 kgdepeso, quedesarrolla una actividad Esica ligera en su trahajo (oficinista). Esta persona dedica 1 h para transportarse (conduciendo l) de su casa al trabajo y viceversa. A su regreso practica nn poco de ejerciciosfisicos (marcha lenta durante 1h); dedica, adems, 1h de ayuda domstica a su compaera (fundamentalmente fregando la vajilla) y 2 h para cuidar a sus 2 hijos. Finalmente, mira la televisin 3 h y duerme 8 h. Para el clciilo se han empleado las tahlas siguientes: tahla 70.2 para el clculo dc la TMB diaria y a partir de ella se estim la TMBh; tahla 70.3 para los factores de TMBh, segn las difcrentes actividades discrecionales, y tahla 70.4 para el factor medio de la TMBh, en el caso de nn trabajo ligero.

El valor de la T M R = 15,3 P + 679 kcallda = 9943 + 679 kcallda, y, por lanto, 69,9 kcalh, aproximando a 70 kcaUh el valor de la T M B . Para calcular el factor que modifica la TMB se tienen cn cuenta: -Casto durmiendo (8 h): I,0 x T M R = 560 kcal.

- Oasto durante el trabajo (8 11): 1,7 x ?'MB = 952 kcal.

- Gasto en actividades discrecionales:

Tareas domstica5 (1 h): 1,7 x TMK = 119. Deporte (carrera lenta, 1h): 2,s x TMB = 196. Cuidar nios (2 h): 2,2 x T M B = 154. Ver televisibn (3 h):1.2 x T M R = 252. Conducir el automvil (1h):1,2 x T M B = 84. El total de requerimientos energticos diarios seria de 2 317 kcal. Si se compara el resultado hallado en este ejercicio con los valores medios estimados de requerimientos energticos para un adulto de 25 aos y 65 kg de peso de la tabla 70.9, se notar una discreta diferencia (2 350 kcal, segn el valor medio); ello es lgico porque en este caso se ha hecho un clculo detallado del gasto energtico por hora, de las actividades realmente efectuadas en el da por ese individuo. No obstante, debemos tener en cuenta que ste, probablemente, no realiza todos los das actividades similares durante el mismo tiempo. Aunque el clculo de las necesidades energticas, de acuerda con las actividadesfisicas reales, es ms exacto, para fmes prcticos resulta adecuado el empleo de las lablas que nos proporcionan las necesidades medias.

Valor calrico de los nutrientes

Lacombustin de algunos nntrientes,en presenciade oxgeno, provoca la liberacin de energa calrica ~ a ~ t i d a d d e c i lliberado or puede medime en unabumharalonmtrica ;de esta forma, puede detenunarse el valor calrico de los diferentes nutrientes, el cual seexpresa en caloras (o kilocaloras). Una calora es la cantidad decalor necesaria para elevirla temperaturade 1g deagua 1 "C(de 15 "C a 16C). ltimamente se prefiere utilizar las unidades del SMD, el jonle o el kilojoole (1 kcal = 4 184 kJ); si; embargo,esta tendencia an no se ha generalizado totalmente y. por ello en este captulo se mantiene el uso de la kilocalora en la prctica mdica . como unidad energtica, aunque en la mayora de los casos se incluye su equivalencia en kil~joule. El contenido calbrico de los 3 nutrientes principales y del etanol, determinados en una bomba calorimtrica, se muestraen la tabla 70.12. Las cifrar aproximadas que se emplean en el clculo del contenido calrico de estos nutrientes, son los valores introducidos por el investigador Atwater. los cuales se conocen, precisamente, como factom Atwater.

lsbla 70.12. Contenido calrico de los 3 nutrientes principales y del etanol" kcallg Calor de combustin Factores Atwater

" Tomada del Rcporte del Comit Mixto de Expertos I'AOIOMS, 3983

Debe aclarane que estos valores constituyen cifras promedio, yaque en unamisma dase de nutriente existen marcadas variaciones. As, el contenido calrico de los glcidos ser distinto, segn se trate de monosacridos,disacridos o polisacridos; algo similar sucede con las grasa y las protenas. Por otra parte, cuando los glcidosy las grasas se degradan oxidativamenteen el organismo, se convierten en CO, y H,O, al igual que procede su combustin oxidativa en una bomba calorimtrica; sin embargo, en el caso de las protenas no ocurre as, pues su degradacin en el organismo rinde como productos finalesprinc@cs nrea y otros compuestos, los cuaies mantienen an una cantidad de energa que no puede ser aprovecliable por el organismo y que difiere de la combustin total de estos mismos nutrientes en la bomba calorimtrica, la cual procede hasta CO, y H,O; por ello, el valor energtico del factor Atwater -en el caso de las protenas, 4 kca1.g'- tkne en cuenta el valor energtico de estas sustancias en el cuerpo humano (4,l kciilg', en vezde 5,6, obtenido en la bomba calorimtrica). Las proporciones de los diferentesnutrientes, con las cuales el hombre satisface sus necesidades energticas diarias, varan ampliamente, en dependencia de las posibilidades adquisitivas del individuo, de la sociedad en que se desenvuelve y de los hbitos alimentarios que posea; sin embargo, existe un mnimo que debecubrirse con protenas, el cual se ha estimado en, al menos, el 10 % de los requerimientos calricos. Por otro lado,debe existir un aportemayor de glcidos que de grasas, ya que una dieta excesiva en grasas puede ser causa de cetosis. En relacin con el valor calrico de los nutrientes es necesario tambin tener en cuenta al efecto,debido a la accin dinmica especifica. La accin dinmica especficade un nutriente est dada por el incremento de la absorcin de oxgeno, posterior a su ingestin; este efecto se considera como una respuesta metablica a los alimentos y depende de su composicin en nutrientes y de su contenido energtico. La causa de esta accin dinmica especfica no est an suficientemente clara, aunque s se asocia a procesos como la digestin, absorcin y acuinulacin de los nutrientes, y su valor est relacionado conel tejido en el cual se metabolizan. Por todo ello, se acosiumbra a tener en cuenta este aspectoa la hora de calcular los requerimientos energticostotales y por eso suele adicionrseleel10 5% por encima del valor estimado.

Requerimientos moleeulares
Los requerimientos nutricionales del ser humano incluyen, adems de las necesidades energticas, el aporte de algunas molculas imprescindibles para su normal desarrollo, crecimiento y mantenimientode la salud. Entre los nutrientes se encuentran los glcidos, los Ipidos, las protenas, las vitaminas y los minerales. El agua no es propiamente un nutriente, pero a diario se consume en la dieta y constituye un requerimiento. El ser humano necesita ingerir, como promedio, 25 Lde agua cada da; esta cifra puede elevarse debido a las prdidas ocasionadas por la actividad tkica intensa, las altas temperaturasambientales opor algunas enfermedades: diarreas, vmitos, trastornos renales e intervencionesqni~rgicai, entre otras. Los minerales, aunque se necesitan en cantidades muy pequeas, son extraordinariamente importantespara el mantenimiento de la salud. Los glcidosy los Ipidos son las fuentes principales deenerga para el organismo animal. Algunos tipos de Ipidos: determinados cidos grssos poliinsaturados y las vitaminas liposolubles, son esenciales en la dieta, ya que no p"eden ser sintetizados por el hombre. Los glcidos, aunque no constituyen requerimientos moleculares, son bsicos en la dieta y constituyenlos nulrientes ms abundantes, por lo que su aporte energticoe3 fundamental y su exclusin de la dieta provoca un cuadro de cetosis metablica. Como se estudiaren los captnlos siguientes,los glcidosy las gr2sas ahorran protenas, las cuales pueden utilizarse con fines anablicos.

Una gran parte de L o s aminocidos contenidos en las protenas ingeridas es a sntesis de este mismo tipo de macromolcula del propio sujeto, imp-indihle para L de otros compuestos nitrogenados, que son fundamentales para el organismo. La ingestin de las cantidades requeridas de las diferentes vitaminas es una ,,@idad para el hombre. El dficit vitamnico provoca enfermedades carenciales y -endeterminadoscasos- su exceso puede conducir a cuadros morbosos, denominados hipervitaminosis.En el captulo 73 se tratar el estudioparticular de las vitaminas en la nutricin humana. En el cuadro 70.1 se resumen los requerimientos moleculares del ser humano
7 0 . 1 .

Requermienfosmolecularesen elserhumano
Minedes calcio Cloro
CubIv

~ ~ i n & d o esenriaies s
Iucina

Isoleucina Liiina Meionina Fenila!auina

Tremiina TnptEuio Valina

lodo Eiienn
Magnesia

Hirtidina
-a* ,. e

GLicina* Cina*

Vitaminas cido ascrbico Colina** cido flicn Niacina**" PnidoUna

RibotlaW>a

Fsforo Potasio Sodio Flor Molibdeno Selenio Cinc Manganesn Cobalto hados grasas esenuaies Linoleica Linolnico Amqnidnim

namilrA Vitamina B,, V i A VitaminaD**** V i E V % a m h K Bioh h~ido~antotnico

* **' ****

**

Aminocidos parcialmente indispensables, necesarios sobre todo en la Etapa del crecimiento. Puede obviarse si In dieta es rica en iiidionina. Puede sintetizarse a partir del triptXano de la dicta. Puede obviarse si la pcrsana cuenta can suficiente exposicin a la luz solar, pues se forma a partir de un derivado del colesteral.

Al final de este tomo aparecen como anexo 2 tablas con la composicin de los alimentos de consumo habitual por la poblacin cubana, en la cual se consigna el contenido calrico, protenico, glucdico y lipdico de stos.

Junto con los renuerimientos enemticos. el ser humaon ~recisa de la heestin de6mmponentes principales de la dieta: las protenas, los ghicidos, los I p i d ~ ,

las vitsminaS, los minerales y el agua. Los 3primeros proveen energa y son fuentes de carbono Y nitr~eno. - . en tanto une las vitaminas v los minerales no aportan energia, aunque si se requieren para la acvidad de numerosas e d m a s y otras funcionesbiolgicas. Elagua no constituye un nutriente, perusi es un requerimiento del ser humano. Las requerimientosenergticos no son ms que las necesidades de energa que el hombre necesita para mantener su salud, garantizar su crecimiento y realizar una acvidad f s i c aapropiada. ~ademandaiiergtica basal, tasa de metabolismo basal (TIMB), resulta la energia necesaria para el mantenimiento de los procesos vitales, en condiciones de reposo total. La TMB dependede la masa corporal, de la edad del individuo, del ciima y del sexo, entre otros factores, pero el peso wrporal es el factor fundamental a tener en cuenta para los efectos prcticos. Las necesidades enery!ticas demuden de la actividad &ica del sujeto. La actividad G c a puede d&fimrse e ; ocupacional y social (actividad de tiempu libre). La ocupacional,a su vez, puede subdividirsede acuerdo consu inensidad en 3 grandes grnpos: trabajo ligero, moderado y pesado. Para es0mar las necesidades energticas totales por da, se multipliearii el valor de la TMB por un factor que ineluye,fundamentalmente, el m t o energtiw de la actividad fsicadesamoliada por el individuo. Existen algunas condiciones que moditican los requerimientos energticos, como son los periodos de crecimiento, embarazo y lactancia, as como durante el transcurso de alguna enfermedad o en la etapa de su convalecencia, situaciones stas en las que se precisa de un aporte extra de enew'a El contenido &rico de los 3 &entes principales: glcidos, protenas y ipidos es de 4,l; 5,6 y 9 4 kcaI.gl, determinado en una bomba calorimtrica. Los valores, de acuerdo con los factores Atwater, son, en ese mismo orden, de 4; 4 y 9. Estos valores constituyen &as promedio, ya que dentro de una misma dase de nutriente existe una amplia variedad de wmpuestos. La ingestin de proteias se ha estimado que debe ser, al menos, la necesaria para suplir el 10 % de los requerimientos d r i w s del individuo. Las protenas de la dieta deben proveer al individuo de los amindcidos esenciales. A l p o s lipidos constuyen requerimientos del ser humano, wmo son los deidos g r a ~ o esenciales s y las vitaminas liposolubles. Por otra parte, debe existir un aporte mayor de glddos que degrasas, pues el exceso de grasa en la dieta puede conducir a una eetosis. Debe tenerse en cuenta que la ingestin de glcidos y Ipidos ahorra protenas y atss pueden uzarse fundamentalmentewn &es anabliws. Los minerales, niya ingesta se requiere wmo iones inorgnim en cantidades muy pequeas, son extraordinariamente importantes en el mantenimiento de la sslua La ingestin de las cantidades requeridas de las diferentes vitaminas es un requisito imprexhdible para el ser humano. Un dficit en su ingestin provoca enfermedades carenciales,mientras que en determinados m o s el exeeso de algunas de ellss puede provocar una bipervitaminmis.

Ejercicios
1.Enumere los diferentescomponentesde la dieta humana. 2. Qu se entiende por tasa de metabolismobasal (TMB)? 3. Mencione los diferentesfactoresque modifican la TMB. 4. Qu se entiende por factores Atwater y cules son sus valores para los diferentes

nutnentes?
5. Mencione los diferentesrequerimientos moleculares del ser humano.

6. Determine, con el auxilio de las tablas correspondientes,los valores de la TMB en los casos siguientes:
a) Un sujeto del sexo masculino, de 22 aos y 60 kg de peso. b) Uua ama de casa, de 45 aos y 55 kg de peso. c) Un joven del sexo masculino, de 17 aos y 60 kg de peso. d) Una nia de 6 aos y 18 kg de peso.
7. Calcule los requerimientos energticos diarios de un trabajador agrcola, de 32 aar y 65 kg de peso, que hxbaja 10 h diarias en el corte de caa, duerme 8 h, y el resto del tiempo lo emplea en actividades discrecionales iigeras (jugar domin, mirar televisin, etc.). Compare sus resultados con los valores medios que, de acuerdo con las caractersticasde este individuo, aparecen en la tabla 70.9. 8. Estime los requerimientos energticos diarios reales de una mujer de 25 aos y 55 kg de peso, que se encuentra en su segundotrimestre de embarazo. Ella realiza una actividad fisica moderada (gastronmica)durante 8 h; dedica 4 h a las tareas domsticas dentro de su casa (fundamentalnientecocinar); dedica 2 h en la nochea la lectura de algn libro o a mirar televisin; camina lentamente 1 h al da (de su casa al trabajo y viceversa)y finalmente duerme 9 h. Compare sus resultados con los referidos en las tablas 70.8 y 70.11. Y. Realice un clculo de los requerimientos energticos diarios de una persona del sexo masculino, de 28 aos y 70 kg de peso, que trabaja en la conshiccin 12 h diarias, dedica 1h al lavado de sus ropas y a la limpieza de su albergue; emplea 3 h i r a r tele&in en actividades discrecionales Ligeras (juegos de barajas o domin, m u or d o ) y duerme 8 h. 10.Un joven atleta de U ) am y 55 kg de peso, que estudia en la universidad, lo cual le ocupa un promedio de 10 h diarias entre clases y esiudio individual, practica sistemticamente deportes (ftbol), actividad a la que dedica 3 h diarias de entrenamiento, camina cada da (a velocidad normal) alrededor de 1h para desplazarse i & en los que realiza sus diferentes actividades; descansa 2 h hacia los dkntos s mirando televisin u oyendo msica y duerme 8 h; recibe una dieta que le aporta un promedio de 3 300 kcada. Realice los clculos correspondientes, que le permitan evaluar si la energa aportada es o no la adecuada y analice los multados a esperar, en relaan con el peso corporal de este joven @ara la asistencia a la escuela y a la actividad de estudio se ha utizado 1,6 como factor que a k a la TMB). 11. Una mujer de 37 aos, de profesin maestra, que pesa 70 kg, desea bajar de peso. Para ello se le ha recomendado que haga 2 h diarias de ejercicios fisicos (caminar rpido) y que ingiera una dieta que le aporte slo el 80 % de sus requerimientos energticos. Realice los clculos correspondientes,que permitan estimar el aporte energtico de la dieta que cumpla los requisitos recomendados a la interesada.

Los requerimientos de protenas del ser humano estn dados por la necesidad de la ingestin de los aminocidos en eUas contenidos. Como fuera ya estudiado en el captulo 55,nn gran nmero delos aminocidos constituyentes de las protenas son esenciales y es por eso que deben aportarse obligatoriamenteen los alimentos de la dieta. Adems, ellos constituyen la fuente principal del nitrgeno metablicamente aI del ser humano. La ingestin de protenas es importante tanto desde el punto de vista cuantitativo como cualitalivo,es decir, el hombre necesita ingerir, diariamente,cantidadesm'nimas de protenas, las cuales deben contener,adems,los aminocidosesenciales,de manera que no resultan de igual valor nutrivo todas las protenas y es claro que una nutricin ptima requiere de una mezcla de aminocidosadecuadamentebalanceada, que asegure el aporte delos requerimientosde cada uno de los que son esenciales. Los requerimientosdiariosde protenasse modifican en determinadas condiciones, como son el embarazo, la lactancia y los perodos de crecimiento, entre otras. Este captulo tratar la importancia y los requerimientos de las protenas en la dieta humana, y se abordar el estudio del clculo de las dosis inocnas de dichos nntrientes en diferentes condiciones, teniendo en cuenta su valor biolgico.

Requerimientos protennicm del ser humano

A pesar de que el organismo humano requiere los aminocidospara su normal desarrolloy mantenimiento, especialmente los esenciales y no las protenas, aqullos seingieren en la dieta en forma de protenas, ya que los alimentos contienen muy pocos aminocidos libres. Los aminocidos esenciales para el ser humano se relacionan en la tabla 71.1, ascomo las cantidadesquese requieren de cadauno de ellos. Aunque en la tabla no aparececonsignadoel requerimientode la histidina,eUo no implica que sta no constituya un aminocidoesencial. De hecho, est perfectamente establecida su condicin como tal, sobre todo durante el crecimiento,e inclusose ha demostrado que su exclusin de la dieta -por un tiempo prolongado-ocasiona en la sntesis de la hemoglobina y provoca la aparicin de eccema en los nios. Sin embargo, no se han establecidolos requerimientos diarios de este aminocido. En algunos casos los requerimientos de uno de los aminocidos resultan muy influidos por la disponibilidad de otro de ellos y, por ende, por la composicin de la

Tabla 71.1.

Requerimientos de los amiuoicidos esenciales para cl ser Iiirnl~mo Cantidad (mglkg de peso)

Aminocido Triptfano Fenildanina Li5iiia

Tnonina

V o L U i a
Mctionina Leucina Isoleucina Histidina

mezcla de stos, contenida en las protenas de los alimentos ingeridos. As, los requerimientos de fenilalanina y metionina se reducen marcadamente por el aporte dc tirosina y cistena, respectivamcnte, ya que aqnellos aniinocidos son precursores en la sntesis de estos ltimos, y en las cifras de requerimientos se tienen en cuenta las necesidades relativas a esta funcin de precursores, cn ambos casos. Todo ello deja claro las necesidades cuantitativas y cualitativas de protenas del ser humano. El contenido de aminocidos esenciales de una proteiia determina su valor biolgico. Entre las protenas ms completas, por contener en su composicin todos los aminocidos esenciales en cantidades suficientes para cubrir sus requerimientos, se encuentran la albmina de la leche y del huevo, la casena y las protenas musculares de distintas especies animales. Las protenas vegetales son inferiores en cuanto a su valor nutricional, tanto por contener protenas incompletas como porque stas se hallan en cantidades inferiores. En general, las protenas delas plantas son pobres en lisina, mctionina y triptfano, y son, adems, menos digeribles que las protenas animales. Es bueno tener presente que las deficiencias de una protena dada pueden compensarse por su asociacin con otra que la complemente. Dos protenas incompletas pueden formar una mezcla que cubra todos la9 requerimientos de aminocidosesenciales, si ellas no carecen de los mismos aminocidos. As, es posible lacombinacin de 2 6 3 proteinas incompletas, cuya mezcla resulte satisfactoria desde el punto de vista nutricional. No obstante, debe tenerse en cuenta que es necesario que las proteinas que componzan la mezcla estn mesentes en la misma comida, de manera que los &ocidus constituyentespuedan utilizarse de forma simultnea. Se ha comprobado que las ratas dejan de crecer, si se les alimenta cada da con todos los aminocidos esenciales en cantidades suficientes,pero ingeridos por separado, a intervalos de 3 h.

Factores que idluyen en los requerimientos pmtenieos

Los requerimientos protenicos del ser humano dependen de numerosos factores, entre ellos tenemos: 1.La ingestin total de caloras, pues cuando sta resulta insuficiente las protenas ingeridas en la dieta se utilizan en mayor grado como fuente de energa y, por ende, stas no pueden suplir las necesidades protenicas. 2. La edad del sujeto, ya que en las etapas de crecimiento se precisa de un aporte protenico suficiente para que ste resulte adecuado; por lo tanto, en el caso de los lactantes, nios y adolescentes debe evaluarse si existe un crecimiento satisfactorio,aunque al hacerlo hade tenerse en cuenta que -incluso en una poblacin bien alimentada y sana- existe un margen muy amplio de variacin de tamao en los nios, y que la talla de stos se relaciona con la de sus progenitores.

3. La actividad fsica puede, en determinadas circnnstancias, incrementar las necesidades protenicas, tal es el caso de atletas en entrenamiento, en los cnales Iiay nn anmento de la masa muscular: 4. El embarazo y la Iactancia implican necesidades suplementarias de protenas. 5. Las tensiones emocionales 1- todas las silnaciones de estrts (angustia. ansiedad, dolor, insomnio, etc.) pueden piarorar una wriacin dehasta el 15 % en los reqnernientos proteinicos. 6. El calor, el cual pucde elevar las prdidas de nitrbgcno, especialmente en indkiduosno aclimalados, es otro ljctor qiie,psiblei~ie~ite, incremente las necesidades protenicas. 7. En determinados estados patolgicos 1ambii.n se produce nn aumento de las pticlio tanto. en esas condiciones se elevarn los requerimientos das nitrogenadas y, por L proteinicos.

Determinacin de los requerimientos proteiicos y de la dosis inocua

Para estin~ar las necesidades proteinicas y establecer sus dosis inoruas es preciso tener en cuenta todos los factores que influyen en este sentido. De especial relevancia resultan las necesidades protenicas durante los perodos de creciniieuto. Dada la importancia que tiene la ingestin de pialehas para el crecimientonormal en nios y adolescentes, el CoinitG Mixto de Expertos FAOIOMS, en su reuiiin consultiva, cstirn conveniente que se evplicitara el potencial de crecimiento infantil y que ste se tuvicra en cuenta en las estimaciones de las necesidades protenicas. Ante la dificultad de calcular con exactitud las necesidades proteinicas para el crecimientoy la niaduracjn diirante los primeros 6 meses de edad, el Comit Mxto de Expertos de la FAOIOMS has sus estimaciones en datos de ingestas. As, nnmerosas ohservaciona demostraron que los nios amamantadospor madres sanas y bien nutiidai, o que toman leche materna con biberbn, crecen a un ritmo satisfactorio durante este periodo. Se estableci, por tanto, que durante los primeros 6 meses de vida las necesidades proteinicas quedarn cubiertas, si se satisfacen sus requerimientos energticos y si el alimento que aporta la energa contiene protenas en cantidad y calidad similares a la leche materna. Las necesidades protenicas de los nios (a partir de los 6 meses de edad) se ha calculado midiendo el balance de nitrgeno con varias dosis de ingestin. Se han determinado las necesidades de mantenimiento en experimentos a corto plazo, con una ingesta constante de energka, a un nivel supuestamente adecuado, y administrando protenas en dosis diferentes (cada una de estac dosis durante varios ds). %tos estudios permitieron calcular las necesidades de mantenimiento -equilibrio de nitrgeno sin crecimiento-,las cuales se calcularon en 100 mg de nitrgeno diarios por kg de peso. La tasa media de acumulacin de nitrgeno durante el crecimiento se puede estimar partiendo de la tasa diaria prevista de aumento de peso y la concentracin de nitrgeno en el organismo; sin embargo, hay que tener en cuenta que el crecimiento no siempre se prodiice con el mismo ritmo; por ello, se acepta que pueden acumularse cantidades diferentes de protenas por da, como parte del proceso normal del crecimiento. Dado que es imposible predecir la tasa diaria de crecimiento, es necesilriosuministrar cada da la cantidad sniciente para satisfacer una demanda suplementaria. Para tener un margen fisiolgicode seguridad, se decidi incrementar las necesidades tericas de crecimiento por un factor de 50 %. En la tabla 71.2 se presentan los valores de peso para la edad, recomendados por la OMS como valores de referencia para el crecimiento y basados en los resultados del National CenterforHealth Statistics (NCHS) de los EE.UU.

Tabla 711. Valores depeso para la edad, segn el National Centerfor Health Statistics

(NCHS, 1983).recomendados por la OMSpara la evaluacin delcrecimiento en los nios* Nios Mediana
3,3 60 92 1O,2 113 12,6 14,6 16,7 18,7 2O,7 22,9 253 28,l 31,4

Edad
O O,25 0,lS 18 1,S 2

- 2DT
2,4 4J 7,2 8J 9,1 9,9 11,4 12,9 14,Z 16,O 17,6 19,1 20,s 22,l

+2DT
43 797 11,3 12,4 13,9 15,2 183 208

- 2DT
2,2 3,9 64 7 ,4 8s 9P 11,2 12,6 13,8 1S,O 163 17Q 19,7 21,9

Nias Mediana
-

+2DT
~

3,2 5,4 8,6

93
10,s 11,9 14.1 16,O 17,7 193 21,8 24,s 28,s 323

4,O 78 103 11,6 13,l 143 18,O 20,7 23,2 26,2 30;2 3S,6 42,l 49,2

3
4

5 6 7
8 Y 10

23,5
26,6 3O,2 34,6 39,9 46,O

* Tomado del Reporte del Comit Mixto de Expertas FAOIOMS, 1985. Nota: La edad se expresa en aos y el peso en kilogramos. Los datas corresponden a la mediana del peso + 2 DT para la edad.
En las tablas 71.3 y 71.4 se muestran los valores de peso para la edad en nios cubanos(varonesy hembras respectivamente);estos datos -obtenidosa partir del estudio nacional de crecimiento y desarrollo, realizado en nuestro pas- nos permiten una evaluacinms acertada de este aspecto,en nuestras condiciones; sin embargo, hemos incluido los valores referativos de la OMS, dado que stos se han tomado como base para el clculo de las dosis inocuas de protenas para el crecimiento. En estas tablas se presentan los datos de las curvas en percentiles. Si buscamos en la tabla para evaluarla situacin deun nhio de 1ao,con un peso de 8 3 kg, encontramos que a ese valor corresponde un percentil de 10, lo que quiere decir que l tiene un peso mayor que 10 de cada 100 nios de la mismaedad, pero menor que los90restantes. Este nio, aunque es delgado. se encuentra dentro de loslmites normales. En el caso del peso parala edad,se considerarn normales los nios ubicados entre los percentiles 10 y 90; la. que seencuentren por debajodelpercentil10seconsiderarn como nios de bajo peso para la edad y los que quedaron ubicados por encima del percentil90, como peso excesivo para la edad. De cualquier modo, este dato aislado no deber utilizarse como criterionico para evaluar el estado nutricional del nio; para ello tambin debern valorarse los criteriosde talla para la edad,que se presentan ms adelante. En la determinacin de las dosis inocuas de ingestin de protenas en los nios se tuvieron en cuenta tanto las necesidades del mantenimiento, como las del crecimiento. Una vez determinadas las necesidades medias en este sentido, se estim la dosis inocua por la eleccin de un valor de 2 desviaciones estndar, por encima del valor de la media, de manera que se satisfagan las necesidadei de la mayora (e1 97,s %)de la poblacin. Al hacer el clculo de la ingesta protenica de los nios y adolescentes es imprescindible definirsi el crecimiento que se est experimentandoes adecuado. El indicador talla para la edad es til para evaluar el nivel de crecimiento alcanzado (tablas71.5 y 71.6).

lsbla 713. Valores de peso (kg) para la edad de 0,1 a 19aos (sexo masculino)*

Percentiles 25 50

* Tomada del Manual de Pmedirnientas de Diagnstico y Tralamiento en Pediatna, 1986.

En general, se consideran normales o tpicos -desde el punto de vista de su Crecimiento- los nios cuyos valores se encuentranentre el percentil3 y el 97,mientras qneson baja tdalos que tienen valores inferioresal percentil3, y talla elevada los que Poseen valores superioresal percentilY7; sin embargo, debe sealarse que al valorar el Crecimiento de un nio, lo ms importante no es una medicin aislada, sino el seguimiento sistemtico que permita evaluar el comportamientode su crecimiento. Para un margen determinadode edad, Las necesidades de protenas por Mogramo de peso corporal se consideran constantes; por ello, las necesidades protenicas se expresan en gramos de protenas por kilogramo de peso. La tabla 71.7 contiene las dosis inocuas de protenas para los lactantes y nios hasta los 10 aos. Las dosis inocuas de protenas para nios mayores de 10 aos y adolescentes, de ambos sexos, se presentan en la tabla 71.8.

Tabla 71.4. Valores de peso (kg)para la edad de O,1 a 19 aos (sexo femenino)"

Edad

10

25

Percentiles 50

75

90

97

* Tomado del Manual de Procedinhtos de Diagnstico y Tratamiento en Pediatra, 1986,

mbla 715. Valores de talla (cm)para la edad de 0,l a 19 aos (sexo masculino)*

Percentiles

Edad

10

25
-

* Tomado del Manual de Procedimientos de Diagnstico y Tkatamiento en Pediatda, 1986.

l s b h 71.6. Valores de talla (cm) para la edad de 0,1 a

19aos (sexo femenino)*

Edad

Percentiles 50
-

~nbian.7. Dosis inocua de ingestin

de protenas en los lactantes y nios hasta los 10aos* Edad (aos) Dosis inocua (g protenaskg pesolda)

* Tomado del Manual de Procedimientos de Diagnstico y Tratamiento en Pediatra, 1986. ** A partir de esta edad iodos los valores coinciden.

Para esharlas necesidades protenicas de adultos jvenes, la Reunin Consultiva de Expertos de la OMS examin los datos obtenidos en estudiossobre el balance de nitrgeno a corto y a largo plazos. En dichos estudios se administraron protenas en varias dosis superiorese inferiores, en unacantidad que previsiblementeproducira el equilibrio nitrogenado (balance igual a cero). Del conjunto de datos obtenidos se lleg a las conclusionessiguientes: 1 .No est justififado distinguir entre los adultosde uno y otro sexos, al establecer la dosis inocua de protenas. 2. Las necesidades medias de protenas de buena calidad, estimadasa partir de estudios de balance nitrogenado a corto y a largo plazos, fueron de 0,605 gkgtda en adultosjvenes. 3. Dado que no existen suficientesdatos experimentales, relacionados con los requerimientos protenicos en adultosmayores de 60 aos, e incluso los contados resultados que se tienen no son todos concordantes, se entiende que no se cuenta con elementos definitivosque diferencien las necesidades protenicas del anciano de las de los adultos jvenes.

* Tomado del Reporte del Comit Mixto de Expertas FAOIOMS, 1985.

4. Se consider que un valor de1 25 % (2 DE), por encima de las necesidades fisiolgicas medias, cubrira los requerimientos de197,s % de la poblacin adulta y que, por ende, poda aplicarse como la dosis inocua. 5. La dosis inocua de protenas de buena calidad (completas) y muy digeribles se estableci en 0,75 gkglda para los adultos de uno y otro sexos (en las tablas 71.9 y 71.10 se presentan las dosis inocuas de protenas para los'adultos). 6. Durante el embarazoy la laciancia se deben aportar cantidadessuplementariasde protenas, segn se indicaen la tabla 71.11. Dado quelasdosisinocuasseestimaron apartir de protenas de altacalidad y muy digerible, al uiizar otro tipo de protenas se debern hacer ajustes. La dosis se puede ajustar multiplicndola por 100 y dividindola por el cmputo (valor biolgico) de la protena del alimento, que se quiere emplear. Seguidamentese explicar la forma de estimar el valor biolgico de las protenas.

liibls 71.8. Dosis Niocua de proteuas

en los adolescentes (de 10a 18aos)' Edad (aos) Dosis inocua (g protenaskg pesolda)

Muchachas
10-11 11-12 12-13 13-14 14-15 15-16 16-17 17-18

Muchachos

Valor biolgico de las protenas

Se denomina valor biolgico de una protena al grado de eficiencia de sta para satisfacerlas necesidades del organismo. Existen varios mtodos para determinar el valor biolgico de las protenas, entre ellos:

10-11 11-12 12-13 13-14 14-15 15-16 16-17 17-18

*Tomado del Reporte del Comit deExpertos Mixto FAOIOMS, 1983.

1.Por la velocidad de crecimiento de ratas jvenes que ingieren cantidades diferentes de diversas protenas. 2. Por el establecimientode l a cantidad de una determinada protena, que permite un balance de nitrgeno normal de adultosjvenes de distintas especies. 3. Por la influencia de una cantidad dada de determinada protena en los niveles sricos de los aminocidos esenciales. 4. Por la comparacin de las distintas protenas con una protena modelo (protena completa),que se utiliza como patrn o referencia.
Detenninaan del valor biolgico de una protena, basado en el balance nimgenadn Analizaremos el procedimiento que suele emplearsepara estimar el valor biolgico delas protenas, utilizando como criterio de evaluacin su capacidad para mantener un balance nitrogenadonormal en adultosjvenes y sanos. Como se sabe, un adulto normal mantiene un equilibrio entre los procesos anablicos y catablicos, de manera que se puede asumir que el nitrgeno ingerido en la dieta es casi igual al excretado por la orina y las heces. Las protenas incompletas favorecen la instalacin de un balance nitrogenado negativo, es decir, que las prdidas por la orina y las heces superan las cantidades ingeridas; ello se debe a que al no disponerse de todos los aminocidos esenciales, los procesos de biosntesis de protenas se inhiben e, incluso, los aminocidos presentes se degradan alestar limitada su utilizacin, lo que implica que se incrementela formacin de la urea, de modo que la capacidad de una protena de la dieta para disminuir las prdidas nitrogenadaspuede servir como indicador de su eficiencia o valor biolgico. El valor biolgico (VB) est dado, entonces, por el tanto por ciento de nitrgeno retenido (NR) del total del nitrgeno absorbido (NA):

liibla 71.9. Dosis inocua de protenas para adultos (mayores de 18aos) del sexo masculino, de acuerdo con el peso*

Peso (kg)

Dosis inocua (glda)

* Tomado del Reporte del Comit Mixto de Expertos FAOIOMS, 1985.

lhbla 71.10. Dosis inocua de protenas para adultos (mayoresde 18aos) del sexofemenino, segn elpeso*

El nitrgeno absorbidose calcula por la diferencia entre el nitrgenoingerido (NI) y el nitrgenoen heces de origen alimentario (NHA): NA= NI-NHA

Peso (kg)

Dosis inocua (g/W

El nitrgeno retenido se estima por la diferencia entre el nitrgeno absorbido y el nitrgeno urinario de origen alimentario (NUA), es decir: NR = NA-NUA Existen procedimientos de laboratorio que permiten determinar tanto el nitrgeno urinario, como el de las heces de origen alimentario.

* Tomada del Reporte del Comitc Mixto de

Expertos FAOIOMS, 1985.

Mtodo del cmputo o m r e

Este mtodo consiste en la comnaracin de la orotena. a la cual se le auiere determinar su valor biolgico, con una protena de referencia adopiada como patrn por un Comit deExpertos de IaFAO. Esta protena se ha preparado teniendoen cuenta los requerimientosde los diferentes aminocidosen seres humanos; su composicin se indica en la tabla 71.12. Al evaluar una protena determinada por este mtodo, se compara su composicin aminoacdica con la de la protena patrn. En primer lugar, se analiza si cada uno de los aminocidos esenciales en la protena investigada se encuentra en cantidad igual o superior a la indicada en la protena de referencia. De ser as, se considera a la protena como completa y se le confiere un cmputo o score del 100 %. Si la protena que se valora no cumple esa condicin, se proceder a identificar a todos los aminocidosesenciales, cuya cantidad sea inferior a los valores referidos en lapmtenapatrn; estos aminocidosse conocen mmomitantes. Paracada aminocido limitante se procede a dividir la cantidad en la cual se encuentra ste en la protena investigada,entre la cantidad establecidapara ese mismo aminocidoen la protena de referencia. El cocientemenor as obtenido (primer limitante),multiplicado por 100, ser el cmputo o scorede dicha protena. A manera de ejemplo veamos la comparacin de 2 protenas con composicin aminoacdica distinta utilizando el mtodo del cmputo o score(tab1a71.13).
lhbla71.13.

Tabla 71.11.

Necesidades suplementarias media de protenas durante el embarazo y la lactancia* Protenas (g/da)

EmLramm
6

Ladanda Primeros 6 meses Despus de 6 meses

de Expertos FAOIOMS, 1985.

17,s 13,O

* Tomado del Reporte del Comit Mixta

o score *

Comparacin de Zprotenas distintas mediante el mtodo del cmputo

Tabla 71.12.

Composicin de la proAlbmina del huevo Cantidad (mglg) Glutena del trigo

tehaFAO* Aminocido

Texto de Biaqumiea. Tomo 111, 1983.

* Tomado de:

Se puede apreciar cmo todos los aminocidos esenciales se encuentran en la albmina del huevo, en cantidades superiores a los de la protena patrn; por lo tanto, es una protena completa y su cmputo o scorees de 100. En el caso de la glutena se

distinguen 3 aminocidos contenidos en una cantidad inferior a los requerimientos; para ellos calculamos los cocientes respectivos:

17,l Lisina = -- 0,31 55

Treonina =

24 1 42 2 = 0,60 Valina = A = 0,84 40 50

La Lisina ser el primer limitante por presentar el menor cociente, y el cmputo o scorede la glutena ser, por tanto, de 31 (031 x 100).

Accin suplementaria de las protenas

Con frecuencia se observa que la ingestin de una mezcla de 2 o ms protenas, suministradas simultneamente,presenta un valor biolgico superior al que deba esperarse de una adicin sencilla de los valores individualesde cada una, de acuerdo conla proporcin en que se encuentran en dicha mezcla, pues deesta foimasecompensan los Limitantes y, por lo tanto, se eleva el valor biolgico del producto obtenido; a este efecto se le conoce como a d n suplementaria de las protehas. Es conveniente tener presente que por las razones anteriormente expuestas en este captulo, es un requisito aportar de manera simultnea todos los ingredientesde la mezcla,para quese manif~este la accin suplementaria.

Digestibidad de las protenas

La digestibilidad constituye una caracterstica importante de los nutrientes y en particular de las protenas; obviamente influye en el valor nutritivo, ya que de 2oroteias similares-en cuanto asn comnosicinaminoacdica- resultaramseficiente aqulla que muestre una mayor digestibilidad. La digestibilidad se expresa por la fraccin porcentual del nitrgeno que se absorbe y se calcula de la manera siguiente:

donde NA significa nitrgeno absorbido y NI, nitrgeno ingerido. Es posible calcular la digestibilidad verdadera o la aparente. Para estimar la verdadera se ha de tener en cuenta el nitrgeno endgeno, es decir, el que resulta de la descamacin u otras causas endgenas,norelacionadas con la dieta; este valor debe ser sustrado del valor hallado del nitrgeno en las heces; por tanto, para calcular la digesiibiidad verdadera seria necesario determinar previamente el nitrgenoendgeno en las heces. Cuando no se dispone del dato del valor del nitrgeno endgeno en las heces, se considera que todo el nitrgeno fecal provienendela dieta y entonces se calcula la digestibidad aparente; obviamente, el valor de la digestibilidad aparente ser menor que el dela verdadera.

Utilizacin neta de las protenas

Con vistas a estudiar la calidad de protenas distintas, provenientes de diversas fuentes, se emplea el indicador conocido como utilizacin neta de protena (UNP), el cual se denomina porcentaje del nitrgeno ingerido que queda retenido y que puede

utilizarse por el organismo para el crecimiento, reposicin y conservacin. Dicho indicador se calcula de la manera siguiente:
- NR X 100 UNP = NI

donde NR significa nitrgeno retenido y NI, nitrgeno ingerido. Este indicador tambin puede obtenerse a partir del valor biolgico y de la diestibidad de las protenas, como puede inferirse de sus expresiones:

N ' [VB] x [DI = -x 100 n--- NA x IOO=- NR X I O O = U N P X I O O NA NI NI

La UNP depende de la composicin aminoacdica de la protena, de su digestibilidad y de otros aspectos nutritivos de la dieta, y es influida, adems, por la edad, el sexo, el estado fisiolgico y las caractersticasgenticas del organismo al que se le administrala protena.

Problemas de la malnutrici6n
Los desbalances nutricionales, por defecto y por exceso, condicionan trastornos graves en los individuos. En los captulos 73 y 74 se estudiarn los estados carenciales provocados por el dficit de algunas vitaminas y minerales, respectivamente. La obesidad se trat en el captulo 67, dedicado al tejido adiposo. En ste nos detendremos en la desnutricin proteica y en la proteico-calrica. No se conoce una enfermedad humana atribuible a la deficiencia de un determinado aminocido; sin embargo, en ratas investigadas se han observado. adems de la detencin del crecimiento, algunas alteraciones relacionadas con aminocidos especficos, las cuales se detallan en el cuadro 71.1.
Cundm 71.1. Alteraciones relacionadas con la deficiencia de aminocidos

Aminocido deficiente
Cistem Histidina

Afectacin observada en ratas jvenes Necrosisheptica aguda

Cidaia$.

Isoleucba Imcina Lisina Mebina

Anemiae hipopmteinemia Hipopmteinemia Anemia y muerte sbita Anemia,hipopmteinemia,alopecia, hemona& renal, higadograso y cirrosis
FIkm

Catarata, trastornos de la denticin, alopecia e biperplasiagshica Las ratas alas quese les suministra dietas deficitariasen aminocidosdesarrollan un sndrome que se caracteriza por la disminucin del glucgeno heptico, el incremento de los Ipidos en el hgado y la atrofia del pncreas, de las glndulas salivales, del bazo y del estmago; este cuadro clnico es similar al encontrado en el kwashiorkor humano.

El kwashiorkor es una enfermedad nutnwona1,caracterizada por un retardomarcado del crecimiento,anemia, hipoproteinemia (frecuentementeacompaada de edemas) e

infiltracin grasa del hgado, seguida de fibrosis. A menudo se observa atrofia del tejiil<i.~icinar del pncreas, diarreas fermentativas (causadas por la afectacin de la mucusi intestinal) y esteatorrea. La prdida de las secreciones pancreticas impide la utilizacin de las escasas cantidades de protenas de la dieta, lo cual agrava el dficit protenico. El dao renal presente incrementa la eliminacin de los aminocidos por la orina. Esta enfermedad se suele acompaar de la despigmentacin del pelo. Puede existir una deficienciade la vitamina A, que conduce a la ceguera. El kwashiorkor se pIPSenta en los nios que ingieren casi exclusivamente glcidos, alimentos que contienen almidn y muy poca protena, la cual es, adems, de baja calidad, como en la hananina, las tortas de maz y de yuca, etc. Los sntomas responden adecuadamente a la teraputica de una dieta rica en arotenas de alta calidad. Estos nios son suscentiblesde aadecer infeccionesv nueden morir como consecuencia de ellas. El kwashiorkor se considera como el problema nutricional principal del mundo, particularmente de los pases del Tercer Mundo.
" A

Marasmo nuidonal Esta enfermedad es ocasionada por una alimentacin pobre en protenas y contenido energtico, en la que predomina la deficiencia calrica. Aunque puede presentarse a cualquier edad, es ms frecuente que aparezca durante el primer ao de vida, como consecuenciade una lactancia prolongada, sin la suplementacinde otros dimentos. Se observauna acentuada prdida de peso y disminucin notable de los tejidos subcutneo, muscular y panculo adiposo, comprobables por la simple inspeccin o palpacin: los glteos estn extremadamentereducidos y los omplatos, salientes; el pecho es pequeo y el abdomen se encuentra distendido; en los brazos y las piernas las huesossehacen visibles y aparecen cubiertos por una delgadacapa de piel arrngada; l a fascie adquiere la apariencia de viejo, fascie senil; se observan, adems, trastornos psicomotores. El tratamiento de estos nios consistebsicamente en una dieta que les garantice el aporte de los requerimientos calricos y protenicos, adems de corregir o atenuar las complicacionesque puedan coexistir con la enfermedad nutricional.

Resumen
El ser humano requiere para su normal de88i'roUo y mantenimiento de los aminoeidos esenciales; stos se ingieren en l a dieta, fundamentalmente en forma de protenas, ya que los alimentos contienen muy pocos aminocidos Ubres. Los requerimientosproteU~8 del ser humano son cuantitativosy d t a t i v o s , pues no d o preeisa ingerir ciertas cantidades minimasal da de este unelente, sino a que la composici6n aminoacdica de las proteias ingeridas deber ineluir a l totelidad de los aminotcidos esenciales. Las defidendas de una protena dada pueden compensarse por su asdaci6u mn~quem~loaammoaeidos~tariosdeaqullaParaq~semanifIeste este efeetn suplementario de las protenas, se requiere de su hges6n simultnea L a s requerimientos protenim dependen de varios factores, como son: la iagesta cai6nca total, los perodos de crecimiento, el embarazo y la Iaetaneia, entre otros. Para garantizar el aporte de protenas que se requiere enlas disntss edades se han eamado las necesidades de dichos nuientes, reladonadas con el crecimiento y el mantenimiento. La dosis inocua se e s b 6 por la eleccin de un valor de 2

desviacionesestandar por ende la media, de manera que cubra las neoesidades de la mayora de la poblacin. Al reazar el clculo de ingestin protenica en nios y adolescentes se debe valorar el crecimiento de la persona en cuestin. Para evaluar el nivel de crecimiento aleaozado por un sujeto es til el indicador talla para la edad. Se consideran n o d e s Los sujetosque presenten un vaior de dicho indicador entre los percentlles 3y 97. Para un mismo intervalode edad, lasnecesidades de protenaspor lologramo de peso corporal se wnsideran constantes. La edad y el sexo no son factores importantes para la estimacin de les dosis i n m a s de protenas en adultos. La dosis i n m a de protenas de alta calidad (wmpletas y muy digeribles) se estableci en 0,75 pnc%da para los adultos de uno y otro sexos. Al utilizar una protenaincompleta en la dieta debern hacerse ajustes para el clculo de la d& inoeua Durante el embarau, y la lactancia se deben aportar cantidadessuplementarias de protenas, en dependencia de la etapa. Al grado de eficiencia de una protefna para satisfacer las necesidades del organismo se le denomina valor biolgico. E x i s t e n varios mtodos que permiten establecer el valor biolgico de una proteha. Un mtodo muy empleadoes el que se basa en el balance nitrogenado. El tanto por ciento de nitrgeno retenido del total absorbido es el valor biolgico calculado por este mtodo para una protena dada. El mtodo del cmputo o score wnsiste en la comparaci6nde la protena que se investiga con una protena de referencia (protena FAO). Si la protena investigada wntienetodoslos andnocidos esenciales, en cantidades miuentes, sele asigna un score de 100y se dice que es completa A los aminocidosesenciaiea que se encuentran en una protena incompleta, en candades inferiores a la de la patrn, se les conoce como limitantes. El cociente menor, obtenido al dividir la cantidad de cada aminodcido limitante en la protena investigada, entre la cantidad del mismo andno4cido en la protena patrn y multiplicado por 100, es el cmputo o scorr calculado. La digestibilidad constituye una caracterstica importante de las protenas e Muye en su vaior nutritivo; se expresa por la fraccin porcentual de nitrgeno absorbido, a parr del ingerido. La u ~ n n e i de a laproteina (UNE') es el porcentaje de nitrgeno ingerido que queda retenido. Este indicador puede obtenerse a partir del valor biolgico (calculado a parr del balance nitrogenado) y de la digestibilidad de la protena. La UNP depende de la calidad de la protena, de s u digedibidad, pero tambin depende del sujeto que la ingiera. El kwasbiorkor se considera la enfermedad nutncional ms importante del Tercer Mundo; es causada por un dcit proteico. Las manifestaciones ms reiwantes son retardo del crecimiento, edema, a n e d a , bipoproteinemia, diarreas y despigmentacin de la piel. Las pacientes responden saosfactoriamente a las dietas ricas en proteias de alta calidad. El marasmo nutricional se produce por dicit proteico-calrico, pero con predominio de este imo. No suele presentarse edema. Hay atroa del tejido muscular, del subcutneo y del pani'culo adiposo. Los huesos se marcan y apenas los cubre una fina y arrugada capa de piel. El tratamiento debe garanzar el aporte proteico y calrico necesarios.

Ejercicios
1. Explique por qu las necesidades protenicas en el ser humano incluyenrequerimientos cuantitativosy cualitativos.

2. Enmerelos factores que iniuyenenlosrequerimientos protemicos del ser humano. 3. Qu se entiende por dosis inocua de protena y c6mo ha sido estimada? 4. En relacin con una nia de 2 aos, que pesa 9,O kg, diga:

a) En qu percent se ubica? b) Si se considera normopeso, bajo peso o peso en exceso. c) Calculela dosis inocua de protenas para esa niia. 5. Para evaluar el crecimiento de un nio pequeo, se le realizaron mediciones peridicas y se obtuvieron los resultados siguientes: -A los 6 mesesmeda 59,O cm. -Al ao meda 67,2 cm. A los 2 aos meda 78,s cm.

a) Analice el desarrollo de este nio y diga si el crecimiento es o no adecuado.

6. Calculelas dosis inocuas de protenas paralos casos siguientes:

a) Lactante de 6 meses que pesa 6,4 kg. b) Nio de 10 aos que pesa 27 kg. C)Mujer de 25 aos, que pesa 55 kg y est lactando a un beb de 2 meses.

7. Qu se entiende por valor biolgico de una protena? 8. Calcule el valor biolgico (por el mtodo del cmputo o score) de una protena hipottica P, que tiene la composicin aminoacdica que aparece en la relacin (asuma que los aminocidosque no se detallan se encuentran en cantidades iguales o mayores queen la protenaFA0):

- Treonina: 50,O. - Triptfano: 10,O. - Lisina: 20,O. - Metionina-cistena: 58,O. - Fenialanina-tirosina: 60,O. - Lencina: 87,O. - lsoleucina: 30,O.
9. Explique el efecto de la accinsuplementaria de las protenas. 10. Compare las enfermedadesnutricionales de kwashiorkor y marasmo, en relacin con: cansas, manifestacionesclnicas, complicacionesy tratamiento bsico.

Los requerimientos energticasdel ser humano los aportan fundamentalmentelos gicidos y los Ipidos, ya que ambos nutrientes cubren, cuando menos, e1 75 % de las d o n a s de la dieta. Los glcidos constituyen la principal fuente de energa para el hombre, debido a qneson los nutrientes mayoritarios de su dieta, ya que existeuna mayor disponibilidad de estos compuestos, relacionada con su abundancia en la naturaleza y su menor costo. No obstante, no se conoce ningn requerimiento especfico de algn tipo de glcido en el ser humano. Los Ipidos son la segunda fuente de energa del organismo. Resultan ms eficientes como fuente energtica que los carbohidratos, pues rinden ms del doble de kilodoras por gramo que stos; son abundantes en la dieta humana, aunque, como regla, en menor grado que los glcidos. El hombre necesita ingerir algunos tipos de Ipidos en su alimentacin porque no tiene la capacidad de sintetizarlos, al menos en cantidades suficientes. Este captulo se dedicar al estudio de la participacin y la importancia de los glcidos y los Ipidos en la dieta humana.

Glbcidm en la dieta humana

Requerimientos
Conlos glcidos se cubre la mayor parte de los requerimientosenergticosdel ser humano, ya que stos suelen aportar el 50 % o ms de las caloras de la dieta; en ocasiones, pueden aportar hasta el 80 % de todos los requerimientos energticos. De manera excepcional,como es el caso de los esquimales,el consumo de carbohidratos e s d n h o , lo que pone en evidencia el carcter dispensable de estos nutrientes. En el proceso de la gluconeognesis se pueden obtener glcidos a partir de la mayora de los aminocidosy de la fraccin glicerol de las grasas. No obstante,se ha demostrado la necesidad de la ingestin de un mnimo de carbohidrato preformado, Para evitar la cetosis. A pesar del carcter dispensable de los glcidos, se considera que es necesario "gerir un mnimo de 5 g de carbohidratos por cada 100 kcal de la dieta, con vistas a "pedir la cetosis. Sin embargo, para garantizar la prevencin de todos los efectos

indeseables del ayuno o de las dietas con alto contenido en grasas, se recomienda la ingestin de, al menos, S0 a 100 g de carbohidratos digeribles por da. En las recomendaciones hechas por un grupo de expertos de la FAOIOMS, en relacin con las metas nutriciouales, se orienta la ingestin mnima de glcidos del 55 % del total de la energa ingeriddda y un mximo del 75 %. De ellos, e1 50 %, como mnimo, y el 70 %, como mximo, debe ser de carbohidratos complejos; en cuanto a los azcares refinados (simples)se plantea el 0 % como cifra mnima y slo el 10 %,como mxima. En cuanto a los glcidos no digeribles (o no absorbibles),es decir, las fibras, se recomienda un mnimo de 16 g/da y un mximo de 24 g/da. El tipo principal de fibras, celulosa y muchas hemicelulosas aumenta el bolo fecal, disminuye el tiempo del trnsito intestinal y decrece la presin intracolon, todo lo cual influyeen su funcin beneficiosa, en relacin con la enfermedad diverticular. Se sabe, adems, que la fibra de los cereales, especialmente del trigo, tiene accin laxante y aumenta los movimientos peristlticos,por lo que evita la constipacin; tal vez por ello se explique su efecto en la disminucin del riesgo de hemorroides y de cncer de colon. Las ligninar tambin contribuyen a aumentar el bolo fecal, pero, adems, absorben sustancias orgnicas como el colesterol. Por otra parte, las fibras mucilaginosas (pectina y gomas) tienen un mecanismo de accin diferente;,ellas forman geles en el estmago y el intestino, y disminuyen el tiempo de vaciamientogstrico, la velocidad de absorcin de muchos de los nutrientes, y en especial,la velocidad en la que los carbohidratos son digeridos y absorbidos; por ello, el pico de concentracinde glucosa en sangre, as como los niveles de insulina en dicho fluido, son menores si se ingiere este tipo de fibra, conjuntamentecon las comidas que contengan glcidos. Las fibras solublesen agua (peetinas, gomas y algunashemicelulosas, entre otras) contribuyen tambin a disminuir los niveles sricos de colesterol, aunque tambin disminuyen la absorcin de algunos iones. Por lo anteriormente expuestose recomienda la ingestin diaria de 400 g de frutas y hortalizas, y de 30 g de leguminosas,frutos secos y semillas (como parte de los 400 g de fmias y hortazas). Laingestin de cantidades excesivasde fibras puede provocar flatulencia,clicos y malestar abdominal generalizado.

Disponibilidady fuentes
Los glcidos principales en los alimentos son los almidones y los azcares. Los granos de cereales, los tubrculos (papa, malanga, boniato, yuca, etc.),Jas pastas (fideos, espaguetis, macarrones, etc.) y el arroz, de consumo general en muchos pases, son las fuentes principales de almidn de la dieta humana. La sacarosa es el azcar ms abundante en la dieta, debido a su empleo generalizado como edulcorante en la confeccin de diferentes alimentos, entre ellos panetelas, refrescos, helados, confituras y otros dulces. La lactosa, azcar de la leche, resulta de especial relevancia en los nios pequeos. Los vegetales, las semillas y los granos contienen celulosa, hemicelulosa y lignina insolubles en agua. Las frutas, los cereales y las legumbres son fuentes de fibras solubles en agua.

Almacenamiento de los ghados

Los animales se nutren de manera discotinua.Durante los perodos en los cuales estn ingiriendo alimentos en cantidades suficientes, se almacena glucgeno en el hgado y los msculos fundamentalmente,y este polisacrido es degradado cuando se

..

requiere por el organismo, en perodos interalimentarios y en el ayuno de corta duracin. Como fuera ya tratado (captulo 43),el hombre puede disponer rpidamente desu reserva energtica en forma de glucgeno heptico, para mantener la glicemia por un determinadonmero de horas. Las plantas sintetizan glucosa mediante la fotosntesis; este monosacrido, conjuntamente con la fmctosa, forma sacarosa, la cual es transportada a los diferentes tejidos no fotosintticos. En los vegetales, los glcidos se acumulan en forma de almidn. El almidn, reserva glucdica de muchas plantas, es un componente fundamental de la dieta humana.

Alteraciones metablicas relacionadas con la ingesia giuudica Cuando se recibe una dieta rica en carbohidratos, una parte de stos semetaboliza y rinde energa; otra parte se almacena como glucgeno,y lamayor parte se transforma en grasas y se metaboliza o almacena como tal. La cuanta en que los carbohidratos ingeridosen la dieta se transforman en grasa depende de la periodicidad con la que se ingieren los alimentos. Existen evidencias que parecen relacionar la frecuencia con la que el hombre ingiere sus alimentos y la cuanta en que los glcidos ingeridos se transforman en grasa, con la aparicin de obesidad, aterosclerosisy diabetes mellitus. Es importante tener en cuenta oue el incremento de la in~estin de !zlcidosconduce a un aumento de los requerimientos de la tiamina o vitamina B,. En ausencia de un aporte suficiente de carbohidratos, las reservas hepticas de glucgeno son capaces de mantener la concentracinde glucosa sangunea dentro de valores normales solamente durante unas pocas horas (de 18a24 h como promedio); posteriormente, si el ayuno se mantiene, el aporte de glucosa hacia la sangre depende del proceso de la gluconeognesis. Duranteun ayuno prolongadola disminucin del aporte de carbohidratos refonar la utilizacin de los cidos grasos. En dicho ayuno -cuando los depsitos de glucgeno se han gastado- la supervivenciadepende, en gran medida, de la movilizacin de los lpidos de reserva. La excesiva movilizacin de los lpidos en el ayuno conduce a una hiperlipemia y a la cetosis, e incluso puede provocar hgado graso. El cuadro de cetosis no suele ser grave, debido a la utilizacin de los cuerpos cetnicos por algunos tejidos, a travs del proceso de cetlisis.

Lfpidm en la dieta humana

Requerimientos
Normalmente, del 20 al 30 % de las caloras de la dieta se obtienen de las grasas,

es decir, de 66 a 85 g, lo cual significa alrededor de 3 000 kcal; sin embargo, las grasas
pueden aportar el 30 35 %,e incluso ms, de las caloras de la dieta. Como se sabe, las vitaminas liposolublesy algunos cidos grasos esenciales constiiuyen requerimientosobligadosde la dieta en el ser humano. Se ha observado que los animales mantenidos con dietas exentas de grasa cesan de crecer, desarrollan graves alteraciones de la piel, sufren dao renal y dejan de reproducirse. Estas alteraciones se eliminan si se le adiciona a la dieta los cidos grasos esenciales (linoleico, linolnico y araquidnico); si el aporte de linoleico es suficiente, no se requieren los otros 2 cidos grasos, ya que stos pueden formarse a partir de aqul. Entre las alteracionesprovocadaspor dietas carentes o deficitariasen cidos grasos esenciales en nios se encuentra la dermatitis escamosa. Se ha podido establecer que

ellos necesitan consumir alrededor de1 4 % de sus requerimientos energticos totales, en forma de cidos grasos esenciales, especialmentecido linoleico. En la leche materna es esa, precisamente,la proporcin en que seencuentra dicho cido. Como se seial anteriormente, entre los requerimientoslipdicos tambin se encuentran algunas vitaminas liposolnbles, aspecto que ser analizado en el captulo 73, dedicado al estudio de las vitaminas. El tipo de grasa que se ingiere reviste importancia para la salud humana. As+ ha demostrado que las grasas saturadas inhihen lacaptacin deLDL por sus receptores,lo que puede explicar su efectosobreel incrementode los nivelessanguneosde colesterol. El cido palmtico aumenta los niveles de colesterol en sangre y no se ha demostrado este efecto para el cido esterico. Los cidos poliinsaturados disminuyen la concentracin del colesterol de las LDL y las HDL, mientras que el cido oleico disminuye la concentracinde las LDL, sin afectarlasHDL. La ingestin de los cidos grasos insaturados de la serie 0-3 disminuye discretamente el colesterol sanguneo,en tanto que decrecela de triacilgliceroles. Sin embargo, el aporte en la dieta de los cidos grasos insaturados de la serie m-6 disminuye sensiblemente los niveles de colesterol sanguneo y afecta muy poco los de triacilgliceroles. En las recomendaciones del Comit de Expertos de la FAOIOMS, acerca de la dieta para mejorar la salud, se orienta que el total de las grasas sea, como mnimo, del 15 % y,como mximo,del30 %,del total del aporte energtico diario. Paralas grasas saturadas se plantea un mnimo del O % y un mximo del 10 %; en el caso de las poinsaturadas el mnimo es de13 % y el rnximo,de17 %.La relacin adecuada para grasas saturadas, monoinsaturadasy poliinsaturadassera de 1:1,5:1. En relacin con el colesterol la recomendacin es de un mnimo del O %,y un mximo de 300 mglda.

Disponibilidady fuentes
Los lpidos principales de la dieta son los triacilgliceroles y en menor cuanta el colesterol, la ledtina y otros. La mayora de los alimentos, tanto animales como vegetales, contiene alguna grasa en cantidades variables,una gran parte de ella asociada a otros constituyentes hsticos, por lo que frecnentementeresultan difcil de cuantificar en una dieta, a esta grasa se le suele reconocer como "grasa invisible", pero la contribucin ms importante de los Ipidos en la dieta humana, y aqulla que es fcilmente cuanaficable,se realiza a partir de aceites, manteca, mantequilla, margarina y algunas carnes.mnv . " ricas en masa Los cidos grasos de algunos peces y aceites de pescado son ricos en cidos grasos de la serie 0-3, sobre todo el eicosapentanoico. El aceite de las plantas y los vegetales es rico en cidos grasos de la serie w-6, especialmente el cido linoleico. Los Ipidos rinden 9 3 kca1.g-l. Debido a que la palatihilidad de los alimentos aumenta por su contenido en grasa, as como al hecho de la utilizacin de algunos tipos de grasa enla preparacin demltiples alimentos,los lpidos son abundantes en la mayora de las dietas de los seres humanos.

Almacenamiento de os ipidos

Las grasas constituyen el reseworio de energa ms poderoso del organismo. Los Ipidos se almacenan en el tejido adiposo en forma de triacilgliceroles (captulo67). Como se sabe, los triacilgliceroles son depsitos altamente concentradosde energa metablica, porque estos compuestos se encuentran en un estado muy reducido; por ser sustancias no polares, se almacenan en forma anhidra, es decir, casi totalmente exenta de agua.

Alteraciones metabiicas relacionadas con la ingesta liptdica

Esun hecho bastanteaceptado que las dietas ricas en cidosgrasos polnsatnrados y bajasen colesterol son efectivaspara prevenir algunasenfedadesmdiovasculares, particularmentela arteriosclerosis; no obstante, son muchos los aspectospolmicos en este sentido. Se sabe que la ingestin elevada de colesterol provoca hipercolesterolemia en algunas personas, pero no en otras. Evidenciasexperimentales apoyan la existencia de respuestas individualesdiferenciadas. Se ha demostrado que las dietas ricas en colesterol no afectaron los valores de colesterol total plasmtico,HDL y LDL colesterol en la mayora de las personas incluidasen un grupo experimental. Sin embargo, en una parte relativamente pequea de los sujetos investigados se observ un incremento promedio del 12 % en sus niveles de colesterolplasmtico. Estas respuestas no estuvieron relacionadascon la calidad de la icon la eficiencia de absorcin, ni con el nivel inicial de colesterol srico, en dieta, n tanto que s se demostr una relacin con la cuanta de la reduccin de la sntesis de colesterol en los tinfocitos: en e1 30 % de los suietos estudiados disminuv " ooco su biosntesis, a pesar de haber recibido dietas ricas en colesterol, contrario al otro 70 % que experiment un decrecimientomuchoms marcado de la sntesis de colesterol, aun cuando recibi la misma dieta. La calidad de la grasa de la dieta s ha demostradoafectar significativamentelos valores de colesterolplasmtico. Las dietas ricas en grasas saturadas, generalmente grasas de origen animal, tienden a incrementar los niveles sricos de colesterol,mientras que las grasas de origen vegetal, los aceites, en los cuales abundan los cidos grasos insaturados, tienden a disminuirlos. Por otra parte, se ha planteado la posible relacin de proporciones bajas de cido linoleico en las grasas del tejido adiposo, con riesgo de enfermedadcoronaria. Se ha comprobado tambin un efecto de los Ipidos de la dieta sobre el tiempo de coagulacin de la sangre: aumento de la actividad fibrinolticay del tiempo de coagulacin con dietas ricas en cidos grasos esenciales, en tanto que las dietas ricas en grasassaturadas provocan un efedo contrario. La arteriosclerosisest relacionada con las alteraciones del metabolismo iipdico, particularmente el del colesterol (captulo 53). En determinadas condiciones, las cantidades de grasa en el hgado aumentan como resultado de una movilizacin exagerada de la grasa de reserva. Esta movilizacin excesiva de grasas puede estar ocasionada por la accin de algunas hormonas u otras condiciones, como son la depauperacin, el ayuno prolongado, la diabetes incontrolada o la intoxicacin por determinadassustancias,entre ellas el tetraclornro de carbono, el cloroformo, el fsforo, el plomo o el arsnico, as como por la ingestin de dietas deficientes en factores lipotrpicos (colina, inositol y determinados aminocidos),los cuales sern objeto de estndio en los prximos captulos. Los hgados grasos pueden ser inducidospor algunas dietas, como aquellas ricas en grasa o glcidos, o deficientes en protenas. El alcoholismo predispone al individuo para experimentar ste u otros padecimientos hepticos, lo cual se desarrollar msadelante.
A

Alteraciones metablicas principales en el aleohoiismo

Eletanol es, alavez,un nutriente y una droga. Es un nutriente en el sentido de que su oxidacin libera una gran cantidad de energa (7,l kcag). Los trastornosmetablicos queproduce la intoxicacin alcohlica parecen estar relacionados con diversos factom,entrelos que merecensealarse: trastornos de la absorcin y la digestin, y desplazamiento en la utilizacin de otros nutrientes,debido asu alto contenido calrico.

El etanol altera la degradacin y metabolizacin de los principales nutrientes; puede degradarse en el organismo a travs de 2 sistemas distintos:

1.El sistema de laalcohol deshidrogenasa (ADH):

CH,CH,OH

NAD* -CH,CHO

+ NADH.H+

Esta enzima presenta una baja Km para el etanol (= 1mM). 2. El sistema microsomal oxidante del etanol (MEOS): CH,CH,OH + NADPH.H+ + 0 2 d H , C H 0 + N A D P

+ 2H,O

Este sistema presenta un valor de Km alta (= 10mM). En el alcohlico crnico, cuyas concentraciones sanguneas de etanol suelen ser elevadas, el sistema MEOS tiene una participacin importante,lo que trae como consecuencia que en vez de que se produzcan equivalentes de reduccin (como en el sistema ADH), los cuales seran oxidados en la cadena respiratoria y permitiran la sntesis de ATP, ocurra la produccin de H,O, sin formacin de equivalentesde reduccin y sin sntesis de ATP, lo que implica un cuantioso dispendio de energa. Del 15 al 41 % de las caloras de origen alcohlico reemplazan a otras fuentes energticas, provenientes de los alientos, lo que determina que la calidad de la dieta decaiga. Adems, en el alcohlico crnico se presentan una serie de alteraciones bioqumicas, entre las que deben mencionarse: la ingestin de las vitaminas A, C y tiamina desciende por debajo de las dosis recomendadas, al igual que sucede con la ingestin y absorcin de las fibras, del calcio y del hierro. Por otra parte, existe un aumento de L a s prdidas de nitrgeno por la orina. Los niveles de metionina, vitamina E, selenio y piridoxina tambin disminuyen. Durante el alcoholismo aumenta la excrecin de mamesio., lo aue conduce a la hipomagnesemia,y son frecuentes la hipocincemia y la hipercinuria. Todo lo anterior conduce a afeccioneshepticas graves y a alteraciones visuales, entre otras. El hgado graso y la cirrosis heptica son complicaciones frecuentes del alcoholismo. Sin embargo, algunos autores han recomendado la ingestin de una cantidad pequea de alguna bebida alcohlica (alrededor de 30 mWda), dado que existen evidenciasde su efecto en la elevacin de los niveles sanguneos del colesterol sanguneo de las HDL.

La dieta en la prevencin de algunas enfermedades crnicas

Las dietas conocidas como afluenteso de anuencia, que son caractersticas del desarrollo econmico y consisten, en esencia, en un aporte abundante de los diferentes nntrientes,provocan un efecto beneficioso a mediano y corto plazos (mejor crecimiento y desarrollo,menor prevalencia de enfermedades infecciosas, etc.), pero han demostrado ser perjudiciales a largo plazo, por el exceso de alimentos de gran contenido energtico,ricos en grasa y azcares refmados simples (mono y diacridos, principalmente), y el dficitde carbohidratos complejos. En diversos estudios epidemiolgicos se ha demostrado una relacin estrecha entre este tipo de dieta y la aparicin de unaseriedeenfermedades crnicas no infecciosas, como la cardiopata coronana, las enfermedadescardiovasculares,la diabetes mellitus, la hipertensin, algunos tipos de cnceres, las caries dentales, los clculos biliares y los trastornos gastrointestinales,entre otras. La ingestin excesiva de grasas saturadas y el incremento de lq concentracin sangunea de colesterol se asociancon la cardiopatacoronaria.La hipertensin arteria1 se relaciona con la obesidad, el consumo de sal y la ingestin de alcohol. A su vez, la diabetes se asocia con la obesidad.

~orotrolado,se ha demostrado unamayor incidencia de cncer demama, prstata y colon en individuos que ingeran cantidades excesivas de grasas. Tambin se ha planteado que el consumo de cerveza puede incrementar el riesgo de cncer del recto. Adems, el aumento de la incidencia de encer del estmago -en algunos pases- se ha asociado con el incremento de la ingestin de alimentos ahumados y conservados en salmuera (que pueden contener precursores de nitmsaminas). La ingestin excesiva de bebidas alcohlicasse ha relacionado con la aparicin de cnceresde la boca, la faringe, el esfago,el hgado y la parte superior de la laringe. Para evitar la obesidad se recomienda una ingesta calrica que permita el mantenimiento del peso corporal adecuado. En los nios esto se controla por el peso para la talla. En los adultos es ms til el ndice de masa corporal (IMC): IMC = masa corporal en kg (talla en metros)'

El M C medio se considera normal en valores de 20 a 22 para la poblacin adulta de todos los pases, pero se acepta como valor normal inferior hasta 18,&y superior hasta 25. A partir de estos valores se defmen los distintos grados de deficiencias calricas y de obesidad. En el caso de las deficienciasenergticas,el grado se establece de acuerdo con los valores del M C :

- De 16 a 173: grado 2.
-Menor de 16: grado 3.

-De 17,s a 185: grado 1.

En la obesidad tambin se clasifican en grados, de acuerdo con el valor del IMC: -De 25 a 30: grado 1. De 30 a 40: grado 2. -Ms de 40: grado 3.

Resumen
L o s glcidw y los Lpidos proveen la mayora de los requerimientos energhtie<w en el ser humano. Por su abundancia y menor mstolos Wbohidratos constitu-

yen la principal fuente de energa y aportan el 50 % o ms de las caloras de la dieta. Aunque en el hombreno se conoce ningn requerimientoespeeco de algun tipo de glcido, se ha demostrsdo la necesidad de ingesti6n de una cantidad nnima de gleidos, para evitar trastornos meiablieos graves, como la eetosis. Los principales glcidos de la dieta son los almidones y los azcares. Los almidones se encuentran en los gnioos de cereales, los tubrculos, las pastas y el arroz. El azcar sacarosa es abundante en la dieta por su empleo como edulcorante en la preparaci6n de alimentos. La lactosa es importante en la alimentacin de los nios pequeos. La fibra vegetal (celulosa y otms glcidos no absnrbibles) es beneficiosa para el ser hnmano, evita la constipad6n y previene la aparicin de algunas enfermedades: hemorroides y cncer de colon, entre otras. En los animales, los glcidos se almacenan en forma de gludgeno, fundamentalmente en el hgado y los msculos. El gludgeno es degradado cuando se requiere por el organismo y el gludgeno heptico constuye una reserva energtica, de la cual s t e ouede h n e r r~idamente, ante demandas de cortos perodos. Los Lpidos son 1 ; segund fuente de energa en el ser humano y aportan del U)a1 35 96 de las caloras de la dieta. Las viteminas liposolubles y dddos . algunos grms insanrados son requerimientos i n d i ~ p e n s a b l e el s~ hombre. ~

Los triseiipiicerolescontenidos en grasas y aceites son los Ipidos fundamentales de la dieta; en menor cuanta lo son el colesterol y otms Ipidos. Los Upidos se almaeenao como triaeilgeeroles en el tejido adiposo y constitnyen la reserva de energa ms cuantiosa del organismo. La d d a d de la grasa de la dieta ha demostrado tener importancia en relacin con los niveles de colesterol plasdtico. Las grasas de origen animal tienden a incrementar Los niveles s rico^ de colesterol, en tanto que las de origen vegetal e d o contrario. producen un d Los efeetoB de las dietas muy ricas en eolesterol, sobre la sntesis endgena de este compuesto, pareeen depender de condicionesindividuales. Los hgados grasos pueden ser inducidos por las dietas ricas en grasas o en glcidos, o defieitarias en p r o t e h . El alcoholismo predispone al padecimiento de sta y otrss afecciones hepticas. Loa: trastornos orovocados nor la intoxicacin alcohlica orneeen estar relacionados con la malabsorcin, los proh1emas digestivos y el desplazamiento en la utjlizacin delos otros nutrientes. En el alcohlico crnico se produce un dispendio energtico y, adems, se afeetan la ingestin y absorcin de algunas vitaminas y minerales, y aumenta la excrecin de nitrgeno. El hgado graso y la eirrosiS son complicaciones frecnentes del alcoholismo crnico. Las dietas afluentes han demasirado ser perjudiciales a largo p b y se han asociado con m mayor riesgo de algunas enfermedades crnicas no infecciosas, como las enfermedades cardiovaseulares, la hipertensin arterial, la diabetes meIlihis y algunos tipos de cnceres.

1.Mencione los glcidos ms importantes de la dieta humana. 2. Diga a cunto asciende el aporte energtico glucdico en la dieta humana. 3. Explique por qu a pesar de no conocerse ningn requerimiento especfico de algn tipo de glcido, stos deben incluirse en la dieta. 4. Cules son las formas de almacenamientode los carbobidratos? S. ;Por qu se dice que el organismo humano puede disponer del glucgeno heptico ante demandas energticas durante cortos perodos? 6. Cules son los Ipidos ms abundantes de la dieta humana? 7. Cul es la forma de almacenamiento de los Ipidos? 8. Fundamentesu mayor eficienciacomo reservorio de energa, en comparacincon el glucgeno. 9. Explique los efectos sobre el colesterol plasmtico de la calidad de L o s Ipidos de la dieta. 10. Detalle Las causas de las alteraciones metablicas en el alcoholismo crnico y mencione sus principales complicaciones. 1 1 .Describael efecto perjudicial de lasdietas aiiuentes en el ser humano. 12. Mencione Las cantidades de cada nutriente recomendadas por el Comit deExpertos de la FAOIOMS para evitar la instalacin de enfermedadescrnicas no infecciosas y preservar la salud. 13.Defma el concepto de IMC y diga los valores normales para los adultos. Clasifique los grados de obesidad, segn el IMC.

La relacin entre la dieta y algunas enfermedades es un hecho conocido desde pocas remotas. As, por ejemplo, Hipcrates saba del efecto curativo del extracto heptico en la ceguera nocturna, y desde el siglo xvru se empleaba el aceite de hgado de bacalao en el tratamiento del raquitismo. En el ao 1757, el investigador James Lh~dconrm la capacidadque tenan algunos vegetales y frniasf 4 ~ c aen s la prevencin del escorbuto. Por otra parte, M a d h a b a logrado demostrar la relacin entre algunas dietas deficientes en determinados nutrientes y la aparicin de la pelagra. En el ao 1881, el bioqumico Lunin comprob que animales alimentados con dietas compuestas nicamente de los principales nutrientes (protenas, glcidos y Ipidos)no sobrevivan, aunque stos se administraran en cantidades suficientesy se les adicionarandistintos minerales En 1887, Tskakidemostr que el beriberi se curaba con la ingestin de un polvo a cscaradel arroz. CasimmimFunkobtnvo la primera preparacin obtenido a partir de l de un factor alimentarioesencial,a partir de la cscara de arroz, y fue reconocido como una sustancia con poderosa accin antiberiberi, la cual result ser, desde el punto de vista qumico, una amina, y dada la importancia fundamental que tena para el mantenimiento de la vida, este investigador le dio el nombre de vitamina. As, qued establecido este trmino,el cual se ha aplicado a un conjunto de compuestosdismiles, tanto por sus estructuras como por sus propiedades y funciones especficas, que en muchos casos no constituyen aminas. En este captulo estudiaremos la importancia nutricional de las vitaminas, sus fuentes y requerimientos,as como las consecuencias para el ser humano del dficit de estos nutrientes o, en algunos casos, de su exceso.

Concepto de vitamina
En 1912, CasimiroFunkpostul la teora de las vitaminas por generalizacin y estableci su concepto sobre la base de las numerosas evidencias experimentales existentes hasta ese momento. El concepto qued formulado de la forma siguiente: 1.Las vitaminas no pueden ser sintetizadas (al menos en cantidades suficientes)por el organismo animal y deben ser aportadas mediante la dieta. 2. Las vitaminas se encuentran en cantidades muy pequeas en los alimentos.

3. Cuando se encuentran ausentes de la dieta, o cuando su absorcin es deficiente, se produce una determinadaenfermedad carencial.
Resulta curioso que el trmiuo de vitamina se haya continuado utilizando para un grupo numeroso de factores nutricionales esenciales, a pesar de que muchos de ellos no eran compuestos aminados, siempre que stos cumplieran con los postulados contenidos en el concepto de vitamina. Al factor vitamnico obtenido a partir de la mantequilla y la yema del huevo, el cual prevena la ceguera nocturna, se le nombr vitamina A. En un inicio muchos factores vitamnicos se identificaron errneamente como uno solo y se les design vitamina B; ms tarde,se denomin vitamina C al factor antiescorbtico y vitamina D, al antirraqutico.Algo - despus qued aclarada la naturaleza heterognea de la llamada vitamina B y se fueron aislandofactores diferentes que recibieron denominacionesde B,, B,, B,,B,,, etc. Todos estos factores se conocen como complejo vitamnico B; este trmino se sigue empleando, debido a que se encuentran frecuentemente asociados en sus fuentes y tambin porque la deficienciade muchos de ellos provoca manifestacioues similares, tal es el caso de la presencia de glositis en las papilas de la lengua, causada por el dficit de niaciua, riboflavina (vitamina B,), piridoxina (vitamina B,), cido pantotnico o cido flico, todos componentes del complejo B.

La clasificacinms empleada de las vitaminas se basa en su solubilidad en agua (Uotros solventes polares) o en Ipidos (o solventes apolares). A las vitaminas que son solubles en agua se les distingue como hidrosolubles y a las que lo son en Ipidos, como liposolubles. Es conveniente aclarar que la clasificacinen hidro y liposolubles surgi cuando tansolo se conocan los factores A (liposoluble) y B (hidrosoluble). La distincin entre las vitaminas hidro y liposolubles an se mantiene, debido a que las incluidas en cada grupo presentan determinadas caractersticas que les son comunes. As, todas las vitaminas liposolubles se absorben en el intestino, conjuntamente con los Ipidos de la dieta, y muchas de ellas se almacenan en el hgado, caractersticas que no estn presentes, como regla, en las vitaminas hidrosolubles. Las vitaminas requeridas por el ser humano, de acuerdo con su clasificacin en hidro o liposoluble, se detallan a continuacin:
l.Vitaminas hidrosolubles: -Complejo vitamnico B: Tiamina o vitaminaB,. .Riboflavina o vitamina B,. Niacina (cido nicotnico o nicotinamida). .Piridoxina o vitamina B,. Biotina. cido flico. CianocobSlamina o vitamina B,,. .cido pantotnico. .cido lipoico (no se ha demostrado su necesidad en la dieta del ser humano). cido ascrbico o vitamina C.

. .

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. .

2. Vitaminas liposolnhles: - Retinol o vitamina A. Ergo y colecalciferol o vitaminas D.

- Tocoferoles o vitaminas E. - Naftoquinonaso vitaminas K.

Es frecuente que se incluyan entre los factores hidrosoluhles al inositol y a la colina, a pesar de que la necesidad de su ingestin en el ser humano no se ha demostrado, al igual que en el caso del cido lipoico. Dado que estos compuestos desempean importantesfunciones, es posible que el hombre los sintetice en cantidades suficientes y, por lo tanto, no podra inclurseles entre las vitaminas del ser humano. La colina, particularmente, no es indispensable en la dieta, si existe un aporte suficiente de metionina. La mayora de las vitaminas son o forman parte de los cofactores enzimticos. Como el captulo 19 del tomo 1se dedic a este tema, en ste slo se recordar esa funcin cuando ello sea necesario para la comprensin del estado carencial. El lector deberremithe al captoloarriba sealadoparaprofunduar en la accin coenzimtica de las vitaminas. La cantidad precisa de cada vitamina que cubre las necesidades diarias del ser humano es dfcil de determinar, por estar sujeta a las variaciones individuales de cada organismo. Las dosis recomendadas por los Comits Mixtos de Expertos de la OMS y la FA0 se han basado en las estimacionesde las cantidades a ingerir diariamente de cada vitamina, que brinden la seguridad de no desarrollar, para todos los sujetos, un estado de hipovitarninosis. En este captulo eshidiaremos cadauna de estas vitaminas. Se har hincapi en sus fuentesy requerimientos,y se tratarn brevementelas caractersticasfundamentalesde los estados carenciales.

'Iiamina o vitamina B,
Estructura qumicay funei6n
La tiamina (C,,H,,N,OS) es la 23 dimeti16 aminopirimidima, unida mediante un enlace metilnico con el 4 meti15 hidroxietiltiazol, como se muestra a continuacin:

Latiamina, en formade pirofosfato de tiamina (PPT), acta como coenzima en reacciones de descarboxilacin oxidativa y no oxidativa, entre otras; a modo de ejemplo, recordaremos su participacin como miembro de los complejos multienzimticos de la deshidrogenasa del pirvico y del alfa cetoglutrico, y su accin como cofactor en la reaccin catalizada por la transcetolasa en el ciclode Las pentosas.

Fuentes y requerimientos
La tiamina existe, aunque en pequeas cantidades, en casi todos los tejidos vegetales y animales que se consumen como alimentos en la dieta humana. Entre las

fuentes ms importantes se encuentran el hgado, el corazn, el rin, la carne, los granosdecerealessin descascarary el pan integral,aunque en menor cantidadtambin la contienen la leche v el huevo. Los requerimientosde la tiamina dependen de los glcidos contenidos en la dieta. Sin embargo, una ingestin de 1,2mg resulta suficientepara el adulto,incluyendo a la mujer lactante. En los nios, los requerimientos son menores (entre 0 3 y 1mg, segn la edad). Durante el ejercicio fsico intenso, ascomo en estados febriles, hiperroidismo y otros estados en los cuales el metabolismo basa1 se encuentre aumentado, los requerimientosde esta vitamina se incrementan.

La deficiencia de tiamina afecta predominantemente el sistema nervioso perifrico, elaparatodigestivoy el sistema cardiovascular; sucarencia provocalaenfermedad conocidacomoberiberi, que secaracteriza por unapolineurilk con debidad muscular, hiperestesia de los pies, parlisis progresiva de las extremidades, alteraciones de la sensibilidad y puede llegar a presentarse confusin mental. Este estado carencia1se acompaa, adems, de anorexia y edemas; tambin se ha observadohipertrofiacardaca, atona gastrointestinal y constipacin. Estados leves de la hipovitaminosis pueden instalarse asociados a cuadros prolongados de vmitos, diarreas y alcoholismo. La tiamina no slo es eficaz en el tratamiento del beriberi, sino tambin en la neuritis alcohlica o del embarazo, y en la pelagra, comoseve&ims adelante.

Riboflavina o vitamina B ,
Estnictura qumica y Tuna5611
La riboflavina es la 7 , s dimetil 10 (1' D ribitil) isoaloxazina, cuya estructura qumica se presenta seguidamente:

Las formas coenzimticas de la riboflavina son el flavn mononucltido (FMN) y el flavn adenn dinncltido (FAD), los cuales constituyen los grupas prostticos delas flavoprotenas. Por la importancia de las diversas y trascendentales reacciones bioqumicas en las que sus formas coenzimticas participan, es fcil comprender el hecho de que esta vitamina resulte un factor esencial para el crecimiento.

Fuentes y requerimientos La riboflavina se encuentra ampliamente distribuida en los alimentosde origen vegetal y animal. El bgado, los riones, el corazn, la leche, el huevo, la levadura, los vegetales verdes y -en menor grado- los cereales, son alimentos ricos en esta vitamina.

Estado carenaal
La carencia de niacina provoca la pelagra, conocida tambin como la enfermedad delas 3 "D", ya que los nombres desus sntomasprincipales comienzan con esta letra: diarrea, demencia y dermatiis. Las manifestaciones clnicas ms frecuentes son: eritema de la lengua, lesiones nerviosas en el cerebro y la mdula espinal, y lesiones gastrointestinales, que pueden incluir hgado graso, dermatitis, estomatitisy glositis. Los enfermos responden favorablementeal tratamientocon esta vitamina. La pelagra, en el ser humano, no suele aparecer como una deficienciapura, sino que los enfermos pueden presentar sntomas debidos a la asociacin de otras deficiencias vitamnicas,como la polineuritis, que desaparece con la administracin de tiamina

Piridoxina o vitamina B ,

La piridoxina o vitamina B, es la 2 metil, 3 hidroxi, 4-5 metoxipiridina, que se convierte en piridoxal y piridoxamina. La vitamina B,, al como se encuentraen la naturaleza, es probablemente una mezcla de estos compuestos, cuyas frmulas qumicas son las siguientes: CHzOH CHO

Pindoxina

Piridoxal

Las formas coenzimticas de esta vitamina son fosfaadas: fosfato de piridoxal y fosfato de piridoxina. Recordemos que estas coenzimas participan en las reacciones fundamentales de los aminocidos, como son la transaminacin, la desaminacin y la descarboxacin.Estos cofactores tambin intervienen en el transporte de azufre de la metionina a la serina, en la formacin de cistena. De todo ello se infierela importancia de esta vitamina en el metabolismo de los aminocidos. El dficit de vitamina B, puede estimarse por la determinacin de la concentracin del cido xanturnico en la orina. La reaccin mediante la cual la quinurenina se convierte en cidoa n t r d c o es catalizada por la quinureninasa (reaccin perteneciente al catabolismodel triptfano); esta reaccin no ocurre si hay deficiencia de la vitamina B, y la quinurenina se convierte entonces en cido xanturnico.

Fuentes y requerimientos
Esta vitamina tiene una amplia distribucin en las plantas y los animales. El hgado, los cereales enteros, el man y los pltanos son especialmente ricos en vitamina B,, pero la mayora delos alimentos son fuentes aceptables, descartando Las grasas y los aceites, as como el azcar y el alcohol. La dosis recomendada es de 2 mg en los adultos; en el caso de las mujeres embarazadas y durante el perodo delactancia es de23 mg; en los nios se recomienda 1mg aproximadamente.

Entre las alteraciones especficas por la carencia de esta vitamina se presentan: retardo del crecimiento, acrodinia, edema del tejido conjuntiva de la piel y anemia microctica hipocrmica, con hierro srico elev~do. Es posible que la acrodinia se deba, en parte, a una deficiencia en la sntesis del cido araqnidnico, a partir del linoleico, ya que las ratas con dficit de esta vitamina acumulan slo el 10 % de los cidos grasos poliinsaturados, en comparacin con las que estn bien nutridas. La anemia parece deberse a que el dficit de vitamina B, impide la reaccin que convierte al cido beta cetoadpico en cido delta amino levulnico, compuesto precursor del grnpo hemo de la hemoglobina. El dficit deesta vitamina afectaseriamenteel sistema nervioso. As, se han podido comprobar ataques epileptiformes,con alteraciones del electr6encefalogramaen los estados carenciales. narece obedecer a aue la reaccin de descarhoxilacin del , lo uue a cido glutmico y, por ende, su conversin en cido gamma aminobutrico no ocurre, pues la enzima requiere para su accin de la forma coenzimtica de esta vitamina; como es sabido, el gamma aminobutrico es un metabolito fundamental en el tejido cerebral y en el sistema nervioso en general. En los pacientes con tuberculosis pulmonar, tratados con altas dosis de isoniacida (hidracida del cido isonicotinico), se ha podido comprobar un cuadro de deficiencia de la vitamina B,. Parece que la isoniacida forma un complejo hidraznico con el piridoxal, que interfierecon la activacin de la vitamina. Laestrnctura de la isoniacida se presenta en la columna derecha; el lector podr apreciar su similitud con las formas vitamnicas.

CONHNH,

Biotina
Estructura qumica y fund6n
La biotina (C,,H,,O,N,S) presenta la estrnctura m i que a p e e en la columna de la derecha. Esta vitamina funciona como grupo prosttico de las enzimas carboxilasas, es decir, enzimas que catalizan la fijacin del dixido de carbono (CO,), como en la sntesis del malonil COA,a partir del acetil COA,y en la carhoxilacin del p i ~ v i c o para formar el cido oxalactico; tambin participa en las reacciones mediante las cuales se fija el CO, en el aporte del C, del anillo de purina. Aunque stas constituyen los tipos de reacciones principales en las que participa la biotina, es bueno recordar que este cofactor interviene en otro tipo de reacciones.

1,k(CH
Biotina

2 .

) COOH

Fuentes y requerimientos
La biotina se encuentra ampliamente distribuida en los alimentos naturales; constituyen fuentes excelentes la yema del huevo, la leche, el riin, el hgado y la levadura Una gran proporcinde la hiona requerida como nutriente por el ser humano es suministrada por las bacterias de la nora intestinal. Los tratamientos con sdfonamida, que reducen las bacterias intestinales, pueden ocasionar una deficiencia de esta vitamina; sin embargo, es extraordinariamenterara una deficienciadiettica de hiotina en las condicioneshabituales. No se han establecido recomendacionessobre la cantidad requerida de ingestin, dada su amplia distribuciny la sntesis bacteriana intestinal. Laclara de hueve c ~ d a contiene una sustancia (avidina)que acta como antagonista de esta vitamina, ya que se combina con ella e impide su absorcin en el intestino.

Es posible provocar una deficiencia experimental de biotina por tratamientos prolongados con sulfonamidas o por la ingestin de dietas con alto contenido en claras de huevo crudas. Los sujetos con carencia provocada presentan dermatitis, prdida del apetito y dolores musculares. En el estado carencia1 provocado en los animales en desarrollo se observan, adems, retraso en el crecimiento,cada del pelo y prdida de la regulacin de los movimientos musculares.

hcido fiico

El cidoflico(cido pteroilglutmico) es un compuestoconstituido por un anillo de pteridina, cido paraminobenzoico y cido glutmico, tal como se muestra en su

Existen, por lo menos, 3compuestosqnmicamente relacionados, los cuales difieren en el nmero de residuos de cidos ~lutmicos une se encuentran unidos al uteroil. As. existen el monoglutamato (corresponde a la frmula anterior), el triglutamato (con 3 residuos de cido glutmico)y el heptaglutamato (7 residuos del aminocido). A partir del cido flico se forman, por reduccin, el cido dihidroflico(FHJ y el cido tetrahidroflico (FH,), segn las reacciones siguientes:

NADPH.H+
cido flico

NADP+
cido dihidroflico (FHJ

Reductasa

NADPH.H+
cido dihidroflico o d i c ' (FHJ

NADP+
tetrahidroflico (FH,)

Reductasa

Las coenzimas del cido flico intervienen en las reacciones de transporte y transferencia de las unidades de 1carbono. Dichos residuos monocarbonados se unen a la forma coenzimtica del cido flico por los tomos de carbono nmeros 5,10 o ambos Las coenzimas del cido ftico participan en varias reacciones biosintticas; como ejemplos podemos mencionar algunas de las ms relevantes: sntesis de purina, conversin de uracilo en timina, sntesis de N formilmetionina ARN,, formacin de senna a partir de glicina, metilacin dela homocistena para formar metionina y sntesis de colina, entre otras. La funcin fundamental del cido flico en el crecimiento y la reproduccin de las clulas parece deberse a la parcipacin de sus formas cwnnmticas en la sntesis de las bases pnrnicas y en la formacin de la timina.

mentes y requerimientos
Las fuentes fundamentales son el hgado, el rin, la levadura y las legumbres verdes,y en menor cuanta la leche y sus derivados, la carne y el pescado. La coccin y la preparacin de conservas enlatadas destruyen entre el 50 y e190 % de los derivados de cido flico contenidos en los alimentos. La dosis diaria recomendada de cido flico es de basta 200 pg para los adultos y el doble durante la segunda mitad del embarazo.

Una de las primeras alteracionesprovocadas por el dficitdel cido flico tiene lugar en laformacindelosentroritos enla mdula sea. Enel ser humano la deficiencia de esta vitamina se manifiesta como anemia macroctica; los glbulos rojos jvenes aumentan de tamao,mientrasque su divisin se enlentece y se origina un megaloblasto, con limitaciones en su capacidad reproductiva. La anemia megaloblstica, provocada por la deficienciade esta vitamina, deriva de una falla en la sntesis de ADN. La proporcin A W A D N en los macrocitos es aproximadamente de 0,85, mientras que en las clulas normales su valor es slo de O$. La esteatorrea (heces ricas en grasa) del spruees el resultadodela atrofia del yeyuno, por la carencia de los requerimientos de purinas y timina para la sntesis del ADN en estas clulas, en constante renovacin. La administracin de cido flico corrige la anemia macrocitica nutricional y tambin se ha comprobado una remisin temporal de las manife~tacionwhematol~cjls de la anemia perniciosa (no as las neurolgicas), del sprue y de otras anemias macrocfticas. Por ello, debe garantizarse la administracin de esta vitamina, pues puede encubrir la anemia perniciosa, lo que permitira su progreso hasta la aparicin de las graves lesiones neurolgicas. El tratamiento de la deficienciaespecfica de cido flico, con la administracin de300 a 500 pg/da, permite obtener una respuesta rpida satisfactoriay no infinye en un paciente con anemia perniciosa, lo cual proporciona la posibilidad de establecer un diagnstico diferencial entre las deficiencias de estas 2 vitaminas. Es conveniente sealar que la deficiencia combinada de cido flico, hierro, vitamina B,, y cido ascrbico es ms frecuente que el dficit puro de cualquiera de estos factores nutricionales aislados.

Cobalamina o vitamina B,,

La vitamina B,, es una molcula compleja, formada por un anillo de corrina, similar al de porfirina; en sn centro contiene un ion de cobalto (Col'), unido coordinadamentea 3 de los 4 tomos de nitrgenos pirrlicos (anillos 1, 11y 111);el cuarto enlace coordinado se une al nitrgeno del anillo imidazlico del 5,6 dimetilbencimidazol; los otros enlaces covalentes se establecen de la forma siguiente: uno al N pirrlico del anillo IV de la corrina y el otro a grupos distintos, que en la frmula se representan con R; Rpuede ser la 5' adenosina, un grupo metilo o hidroxilo, o el cianuro. La unin con el cianuro es un artefacto del proceso de aislamientoy purificacin de la vitamina, y por ser sta su forma ms estable, se suele presentar de esa manera el preparadocomercial,el cual recibe el nombre de cianocobalamina. La frmulaqumica general de esta vitamina se muestra en la figura 73.1

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Sistema anular de la coi-riiiii

Fuente: Lehninger M.: Bioquixiica,Zda.ed., lidiriones Oincga, S.A., Bilreelom. 1978. Vig. 73.1. Estructura de In vitamina H,,. 1.2 rohalamina est forniada por el sistema anular de eurrina -el eiial contiene un tomo dc eolialta-,el ribonuclctido 5.6 dimetilbeneirnidazol y un grupo en R que puede ser 5 ' desouiadcnosilo, cianuro, Iiidroxilo. metilo. cntre otras.

La absorcin intestinal de la vitaniina B,, es mediada por receptores especficos, ubicados en el ileon. La interaccin entre la vitamina y estos receptores requiere de la fonnacin previa de un complejo de la vitamina B,, con una glicoprotena altamente especfica (factor intrnseco), la cnal es secretada por la mucosa gastrica. La vitamina, conocida como factor extnnseco, al unirse al factor ilitriiseco fornia el complejo factor intrnseco-B,,, el cual es entonces absorhido. El factor intrnseco es liberado y la vihnina es transferida a una protenaplasmaticatransportadora,la tranicobalamiiiaU. La vitamina circulante es mayoritarianiente la metilcobalamina y, en cantidades menores, la hidroxicohalamina; sin embargo, en el Iiigado predomina la adenosilcobalamina,en tanto que la metilcobalamina slo est presente en cantidades pequeas. La metilcohalamina, unida a la transcobalamina 11, penetra en las clulas por endocitusis y la coenzima se libera en fornia de hidroxicobalainina; sta seconvierte en metilcobalaminao en desoxicobalamina, las ciiales son las formas metablicamente activas deesta vitamina. En el Iiigado se encuentra la protena transcobalamina 1, la. cual se une a la vitamina allexistente y constituye una forma de almacenamiento de sta. La capacidad de almacenamiento de la vitamina B,, es una excepcin, en relacin con el resto de las vitaminas hidrosoluhles. Las formas coenzin~aticamente activas de la vitamina B,, participan en numerosas reacciones importantes, muchas de ellas de metilacin o transmutacin de grupos -0H. Recordaremos algunas de ellas: una por su inters histrico (la reaccin mediante la cual el cido glutmicose transforma en beta metil asprtico), ya que fue la reaccin en la cual se descubri la funcin coeniimtica de los derivados de esta vitamina, y otras 2por la trascendencia que tienen en los procesos que resultan gravemente afectados anteun cnadrode deficiencia de esta vitamina. Entre lai reacciones en las cuales participan lasfonnaccoe~rimticas de la vitamina B,,merece destacarsela reaccin de transformacin del metilmalonil COA(proveniente

deladegradaciii de los cidos g r a m inipares y ramificado) en succinil COA, nietabolito i&nnediario del ciclo de Krebs y precursor del grupo herno. Iainhiii esta reaccin es importante en la formacin de las vainas miclnicas de los nervios, lo que podiera explicarlas alteraciones ncurolgicas graves qne se presentan cuando ocurre el dficit decobalamine La reaccin de la inetilacin de homocistena a nietionina requiere de cofactores B,,. Esta reaccin se produce en el citoplasma y precisa tamhin del N metilhidrofolalo. ,.omofuente dc metilo. En ausenciade la cobalamina dicha reaccin se bloquea y este ltimo cofactor se acuinula y queda "atrapado"; por tanto, se presenta una falta $ecundaria de cido fblico. En la figura 73.2 se muestra la h r m a en que ocurre la "hampadel fokaln".

5' 16 illetil~ll FH, inhibe (Irreversibic)

,-.~-.- S - adenosil iiietioiiiiia

Fuentes y requerimientos
El origen de la cobalamina eu la naturaleza tiene lugarmediante la sntesis por microorganisnios del suelo y del intestino auimal; las plantas no contienen vitamina B,,. Los productos auimales son, por tanto, la fuente diettica de esta vitamina: la leche, la carne, el huew, el hgado y los rioncs. Las dosis reconiendadas para esta vitamina son mnimas: 2 pg diarios en adultos y 3 pg en mujeres embarazadas.

Estado carencial
El dficit de vitamina K,, provoca la anemia iuegalohl.;tica, la aciduria metilmalnica y la neuropata perifrica, adems de la anemia pernicio$a, cuando es inducida por la carencia del factor intrnseco.

hcido pantotnico

El cido pantotnico (cido alfe, gamma dihidroxi- beta, beta dimetil hutiril delta amino propinico) resulta de la unibn, por mi enlace m i d a sustituida, del cido pantoico g la beta alanina. Su frmula es la siguiente:

El cido pantotnico forma parte de la coenzima A. Como ya es sabido, esta coenzima participa en numerosas reacciones importantes, en las que intervienecomo cofactor de transferencia de radicales acilos. Diversos metabolitos intermediarios importantes son tiosteres COA:acetil COA,malonil COA,succinil COAy diferentes acil COA. La coenzima A participa en reacciones Ruidamentales, como son la descarboxacin oxidativa del p i ~ v i c y o del alfa ceto glntrico, la sntesis de acetilcolina,y la degradacin y sntesis de los cidos grasos y del colesterol, entre otras. Esta coenzima interviene, adems, en algunas reacciones del metabolismo de los aminocidos; por ello se comprende que est relacionada con la utilizacin por el organismo de los glcidos, las grasas y las protenas, y con la sntesis del colesterol y las hormonas esteroideas.

Fuentesy requerimientos
Son ricos en esta vitamina el hgado, la levadura, la yema del huevo y la carne; tambin se encuentra en las frutas, los vegetales, la leche y tos granos. Las necesidades de cido pantotnico se estiman entre 5 a 10 mg diarios.

Estado carencial En los seres humanos no se ha comprobado el estado carencial, pero s se ha producido experimentalmente por la administracin de un antagonista de la vitamina, el cido w metilpantotnico, que provoca un cuadro cluico caracterizado por prdida del apetito, neuritis perifrica, insomnio, depresin mental y otras manifestaciones. En los animales de experimentacin la deficiencia del cido pantotnico ocasiona sntomas gastrointestinales(gastritisy enteritis con diarreas),as como manifestaciones cutneas (despigmentacin,descamacin y alopecia). La falta de esta vitamina tambin afecta las glndulas snprarrenales, y pueden aparecer hemorragias y necrosis de la corteza adrenal e intensicarse el apetito por la sal; estas alteraciones pueden conducir a una insuf~ciencia suprarrenal aguda.

Acido lipoico

El cido lipoico (cido 6,s ditio octanoico o cido tictico) presentala estructura qumica siguiente:

Esta vitamina tiene una funcin coenzimtica e interviene conjuntamente con el PPT en las reacciones de descarboxilacin oxidativa de los alfa ceto cidos; como

recordemos que este cofactor es un componente de los complejos mnltien&ticos de la pirvico y la alfa ceto glutrico deshidrogenasas.

mentes y requerimientos
El cido lipoico existe en una amplia variedad de productos naturales; no se ha podido demostrar su necesidad en la dieta de los~mimales superiores; tampoco ha sido posible comprobar un estado carencial en el ser humano, ni en los animales.

El inositol es un polialcohol cclico que existe en varias formas isomricas. La forma ms abundante en la naturaleza y la nica a la que se le conoce actividad biolgica es la meso inositol o mioinositol, cuya estructura qumica se presenta a continuacin:

La funcin del inositol en la nutricin humana no est totalmente esclarecida; sin embargo, est probada la necesidad de su inclusin en los medios de cultivos, como requisito para el crecimiento de diversos tipos de clulas de origen humano. En los animales de experimentacin el mioinositol tiene una accin lipotrpica, la cual parece estar relacionada con la integracin de estos compuestos a determinados Ipidos complejos. El estado carencial, provocado en animales de experimentacin,se manifiesta por varios sntomas, entre los que resaltan los llamados "ojos en gafas", la alopecia y los t&ornos del crecimientoy de la lactancia.

Colina
La frmula qumicade la colina (trimetiletanolamina)es la siguiente:

La colina tiene diversas funciones biolgicas: forma parte de varios tipos de Lpidos complejos,interviene en la formacin de la acetilcolina y suministra, adems, los grupos metilos lhiles en algunas reacciones del metabolismo. Las fuentes ms ricas de colina se encuentran en la yema del huevo, el hgado, el rin y los granos de cereales. La funcin de la colina en la nutricih fue demostrada,ya que en muchos animales su dficit en la dieta provoca, adems de hgados grasos, cirrosis heptica, as como alteracionesrenales hemorrgicas.

cido asdrbico o vitamina C

ESb~etura qumica y funcin

La estructura qumica de la vitamina C est relacionada con los glcidos,ya que es un derivado del cido L gulnico. Su frmula qumica es la siguiente:

HCHO-CH CH20H
La sustancia pnr? es pticamente activa, es soluble en agua y constituye un poderoso agente reductor. Se oxida fcilmentepor la exposicin al aire y en presencia de iones de Cu2+ o Fe3+. La funcin bioqnmicams relevante delavitamina C est dada por su participacin en la hidroxilacin de los residuos de prolina, en el proceso de sntesis del colgeno. Tambin parece intervenir en la absorcin y reduccin del hierro, en la sulfatacin del colesterol y otras sustancias para su excrecin, y como protectoradelas vitaminas A, E y otros compuestospor su accin antioxidante.Participa, adems, en algunas reacciones enzimticas, como es el caso de la oxidacin del cido hidroxifenilpirvico de la va catablica del aminocido tirosina, aunque la enzima no parece depender de esta vitamina, pues otros agentes reductores son igualmente efectivos. La formacin de la carnitina y la extraccin de hierro de la ferritina tambin son procesos que requieren del cido ascrbico.
1 1

Fuentes y requerimienioa Las fmtasfrescas y las verduras son excelentesfuentes de vitamina C, especialmente la guayaba y los frutos ctricos (naranja, uva, limn, etc.), ascomo los melones, los tomates y la col cruda. stos, cuando se cocinan, pierden la vitamina. La dosis recomendada para los adultos es de 30 mg: en los nios es de 20 mg y en las gestantes y duranfelos perodos de lactancia se eleva hasta50mg.

Estado arenaal
El escorbuto, enfermedad pro'vocadapor el dficit de vitamina C,se manifiesta por hemorragias superficiales,ascomo por trastornos delos procesos de cicatrizacin; los sntomas ms caractersticos son: inflamacin y sangramiento de las encas, y hembrragias pnntiformes en la piel, alrededor de los folculos pilosos. Los enfermos presentan poca resistencia a las infeccionesg afectacin de la regeneracin celular, lo que enlentece y agravala cicatrizacin de heridas y quemaduras. Diferentes investigadores han planteado que la ingestin de dosis elevadas de vitamina C es beneficiosa en el tratamiento de algunas cardiopatas, del resfriado comn v de determinadostinos de cncer. entre otras enfermedades: sin embarco. - , esta accin curativa -en la mayora de los casos- no ha sido demostrada. En cambio, sse ha comprobado la accin antihistamnica de altas dosis de la vitamina. Por otra parte, se ha sealado que la ingestin de dosis elevadas, por perodos prolongados, puede favorecerla formacin de clculos renales, provocados por la excrecin aumentada de los cido oxlico y rico.

Retino1 o vitamina A
mciura qumica y funcin
La vitamina A (retinol) es un Ipido isoprenoide, que contiene un anillo de ionona; s u estructura puede apreciarse a continuacin:

La vitamina A se forma a partir de los carotenos, los cuales constituyen un tipo de pigmento vegetal; ella ejerce su accin sobre los procesos visuales, el crecimiento, la reproduccin y los epitelios. La funcin del retinol en la visin es conocida; lo que no ~tesclarecido es elmodo en que la vitamina A realiza las otras funciones. La forma aldehdica de la vitamina, el 11 cis retinal, se origina por la deshidrogenacin del retinol y se une a una protena de la membrana en los bastones 1cis retinal se de L a retina (la opsiua) y constituye el pigmento visual (rodopsina); el 1 transforma por la luz en la forma todo trans (al1trans). Al formarse el todo trans se provoca la hidrlisis del enlace que une el retinal a la protena, lo cual da inicio al impulso nervioso y constituye la base bioqumica de la funcin de la vitamina A en la visin dela luz tenue qnese generaen los bastones de la retina. Por eso es importante el adecuado aporte diettico de esta vitamina para una visin nocturna normal. En el captulo 65 el lector podr ampliar los aspectos de la funcin de la vitamina A en la visin.

Fuentes y requerimientos
Las fuentes ms importantes de vitamina A la constituyen la mantequilla y la yema del huevo. Los carotenas, precursora dela vitamina,se encuentran en numerosos vegetales como la zanahoria. la calabaza y la remolacha, entre otros. La dosis recomendada es de 1 0 0 RE (equivalentesde reinol), como requerimiento mnimo diario; 1RE corresponde a 1 pg de retinol o 6 pg de heta caroteno. En los nios (hasta los 12 meses) las cantidades recomendadas de esta vitamina son de 350 pg; en los adultos, de 600 a 750 pg (2 000 a 2 500 UI); y en las mujeres que se encuentran lactando, 850 pg. El almacenamiento de la vitamina A en animales bien nutridos puede asegurar las demandas de stos durante algunos aos.

Estado careucial
La ceguera nocturna es un sntoma precoz de la deficiencia de vitamina A. Se presentan, adems, alteraciones de la conjuntiva, la cual se engruesa y reseca, y se queratiniza (xeroftalma); cuando este proceso se extiende a la crnea, sta puede ulcerarse y hasta destniine, lo cual llevara a una prdida irreparable de la visin. La hipovitaminosis A tambin produce lesiones de hiperqneratosis en la piel. El crecimientoy desarrollo en los nios se ve afectado y pueden presentar alteraciones en el esqueletoy el sistema nervioso. Por otro lado, se ha demostrado que la deficiencia de esta vitamina ocasiona la disminucin de la formacin de anticuerpos contra antgenos hacterianos.

Se han detectado casos de toxicidad por dosis excesivas de vitamina A, tanto en los nios como en los adultos. La hipervitaminosis se pone de manifiesto por la irritabilidad,laprdida del apetito,los dolores de cabeza, las alteraciones de la piel y el aumento de la fragilidad sea.

Vitaminas D
Estructura y funcin
Las vitaminas D pertenecen al grupo de los lipidos esteroides. Las formas activas dela vitamina son 2: colecalciferolo vitamina D,, y ergocolecalciferolo vitamina Dz. La sustancia designada originalmente como la vitamina D, result ser una mezcla de esteroides diversos. La vitamina D, se produce por la accin de la luzsolar sobreel 7-deshidrocolesterol, presente en la piel, y es la forma vitamnica natural. Su estructura es la siguiente:

La vitamina D, se produce al irradiar artificialmenteel ergosterol presente en las levaduras y los hongos. En su estructura se diferencia de la vitamina D, por poseer un grupo metilo y un doble enlace adicionales. La sustancia activa de la vitamina D,es el 135dihidroxicolecalciferalo 1,25 dihidroxivitamina D,, la cual presenta una accin hormonal y fue tratada en el captulo 60. La accin bioqumica de este compuesto est relacionada con el metabolismo del calcio y el fsforo. As, promueve la absorcin del calcio en el intestino delgado, mediante la induccin de la sntesisde una protena transportadora delion; promueve, adems, la absorcin del fosfato por otro mecanismo e interviene en lamovilizacin del calcio seo hacia la circulacin. En el captulo 74, al tratarse los minerales calcio y fsforo, el lector podr ampliar los detalles sobre estos mecanismos.

La fuentem& importantede la vitamina D y la ms conocida es el aceite de hgado de bacalao; algunas variedades comercialesde leche se enriquecen conesta vitamina. En los pases tropicales la fuente fundamental es la transformacin del 7-deshidrocolesterolde la piel en vitamina D,, por la accin de la luz solar, y por ello es raro el raquitismo en stos.

La dosis recomendada es de 10 pg (400 UI[unidad internacional])para los nios, ascomo paralas mujeres embarazadasy en periodos de lactancia. Los nios mayores de6 aos y los adultosslo requieren una cuarta parte de la dosis anterior (25 pg) Una U1 es definida como la actividad de 0,025 pg de colecalciferol.

Estado carenoal
El estado carencial de la vitamina D provoca bsicamente una descalcificacinde los huesos, la cual causa en los nios el raquitismo y en los adultos, la osteomalacia, debido a la funcin que tiene esta vitamina en el metabolismo del calcio y el fsforo, los cuales resultan elementos esenciales en el metabolismo seo. El raquitismo se caracteriza por un crecimiento defectuoso del hueso, como consecuencia de los retrasos del cartlago epifisario normal y de la afectacin del proceso de calcificacin.

Tocofero1es o vitaminas E
Estniehira quimica y funcin
Los tocoferoles son Ipidos isoprenoides, derivados del toco1 (el 2 metil, 2- 4', 8', 12'trimetiltridecil- cromano, 6-01). Constituyen un grupo de sustancias de estructura simar,que difieren entre s por la posicin de los sustitnyentesmeScos en la molcula. A continuacinse presenta la estructura del alfa tocoferol (5,7,8 trimetiltocol):

La vitamina E tiene una marcada accin antioxidante de los cidos grasos poliinsaturadosy deotros compuestos;protege a los hemates de la accin nociva de algunos agentes oxidantes,por lo que previene la hemlisis. Experimentalmentese ha podido comprobar que evita los abortos provocados en ratas con dietas especiales.

Fuentes y requerimientos
Las fuentes ms importantes son los aceites vegetales, de maz, de girasol, etc. Los aceites de pescado contienen poca vitaminaE. El huevo, lalechuga, la mantequilla y los cereales tambin constituyen buenas fuentes. No se han establecidodosisrecomendadas paraestas vitaminas; sin embargo, se ha h a d o q u e cantidadesde 10mgparalos hombres y 6 mgpara lasmujerescubrinan las necesidades diarias. La cantidad puede incrementarse hasta el doble durante el embarazoy la lactancia.

Estado carenosl
En el ser humano los sntomas de la deficienciano se conocen bien, debido a que es raro que sta se presente. En los recin nacidos prematuros los bemates se bemolizan

muy rpidamente, en presencia del perxido de hidrgeno; esta hemlisis puede revertirse por la administracin de la vitamina E. Se conoce el reporte de un caso con dficit de esta vitamina, provocado por la malabsorcin intestinal prolongada. El paciente presentaba signos neurolgicos, con alteraciones de la mielinkacin de los nervios perifricos.

Vitaminas K
Estructura qumica y funcin
La vitamina K existe en 3 tipos: lafloquinona o vitamina K, ( 2 metil- 3 fitil- 1,4 naftoquinona), la farnoquinoiia o vitamina K, (de la cual existen varios anlogos que se diferencian por la longitud de la cadena isoprenoide lateral) y la menadiona (vitamina K,) sinttica. La estructura de las 3 formas vitamnicas se presenta seguidamente:

Vitamina K ,

Vitamina K,

Menadioiia

La funcin de la vitamina K est relacionada con la formacin de diversos factores que intervienen enka coagulacin sangunea; se sabe que la vitamina K es necesaria para que se realice la carboxilacin de determinados residuos de cido glutmico eu la molcula de prutrombina, proceso que a la vez se requiere para su activacin. La actividad de todos esos factores de la coagulacin se encuentra disiniunida en la hipovitaminosis.

Fuentes y requerimientos La vitamiiia K, fue aislada de la alfalfa, pero est presente en casi todos los vegetales de hojas verdes, como la lechuga, la col y la espinaca. El hgado es una fuente apropiadade vitamina K,. La fuente principal en el ser humano es.la flora intestinal. No existe una dosis recomendada. debido al anorte ureoonderante de la sntesis bacteriana intestinalcomo fuente regular. En el cayo de un paciente incapaz de absorber la vitamina, se estiniaron sus requerimientos diarios en aproximadamente 40 ~ g .

. .

La deficienciade esta vitamina da lugar al desarrnilode un sndrome hemorrgico, por la carencia de prntrombma. Se puede presentar con mayor frecuencia en los recin nacidos, debido a la ausencia de la flora bacteriana normal, o tambin en nios y adultos, por el efecto indeseable de la administracin de antibiticos por perodos prolongados.

Antagonistas vitamiicos
Existen algunas sustancias que interfieren,denno u otro modo, en la funcin de detenninadas vitaminas. As, el dicumarol y la warfarina sdica son antagonistas de la vitamina K; ellos provocan unadisminucin delos niveles plasmticos de protrombina, ya que afectan la accin de la vitamina en la sntesis heptica de dicha protena. La avidina, presente en la clara de huevo cruda, inhibe a la biotina. En el cuadro 73.1 se presentan algunos de los antagonistas vitamnicos ms relevantes.
C&

73.1. Antagonistas vitamnicos

Vitamina afectada Vitamina B, VitaminaB, Niacina Bioona cido flico Vitamina B , cido pantntnico

Antagonista Pintiamina y oxidiamina Galactniavina 3-cetn-acetilpidina Andina Aminopterina y amitnpterina Desoxipiridoxinay metnxipiridoxina Omega-mei pantotnico

Inactivacin de las vitaminas

Las vitaminas pueden inactivame o quedar eliminadas de los alimentos durante su procesamiento. La vitamina C es una de las que ms fcilmente se inactiva; su oxidacin se acelera por el calor, la exposicin a la luz, los lcalis, as como por la presencia de iones de cobre o hierro. Las vitaminas liposolubles son, como regla, ms resistentes a los procedimientos usuales de coccin de los alimentos; sin embargo, la vitamina A se descompone por el efecto de la irradiacin solar. Las vitaminas del complejo B, debido a su carcter hidrosoluble, se eliminan frecuentemente en las aguas de desecho de la coccin, y es por esta razn que algunos procedimientosculinariospneden acarrear cuantiosas prdidas del contenidode stas en los alimentos; en un medio alcalino las prdidas pueden incrementame. La vitamina B, tambin se afecta por laluz solar. Los alimentos enlatados pueden sufrir las prdidas de algunas vitaminas y en especial del cido flico.

Resumen
Las vitaminas son sustanciasorgnicas que no pueden ser sintezadas por el organismo animal y deben ser aportadas enla dieta Cuando se encuentran ausentes de-la dieta o cuaiio su absorcin es deficiente, se produce una determinada enfermedad carenual.

Las vitaminas se clasifican en hidro o tiposolubles, en dependencia de su solubilidad en sustancias polares o apolares. Entre las vitaminas bidrosolubles se encuentran las wmponentes del wmplejo B, que son o forman parte de los cofadom emzktim, y la vitamina C. El grupo de las liposolubles est integrado por las vitaminas A, D, E y K. La tiamina o vitamina B, se encuentra en casi todos los tejidos vegetales y animalesingeridos enla dieta humana; su dficit provoca el benieri. Lanioflavina o vitamina B, tambin se encuentra ampliamente distribuida en los alimentos de origen animal y vegetal, el estado eareneial producido por su deficiencia es bastante benigno y se manifiesta por glosis, dermatitis sebomica, suras en las comisuras de la boca y vaseularizacin de la crnea. El pescado, las vsceras, los cereales enteros, las legumbres y la levadura son fuentes importantes de niacina. La pelagra es el estado carencial de esta vitamina La piridoxina o vitamina B,, tal como se encuentra en la naturaleza, es una mezcla de piridoxina, piridoxal y piridoxamina, con una amplia distribucin en los alimentos animales y vegetales. El dficit de esta vitamina provoca graves afectaciones del sistema nervioso. La hiotina est contenida en diversos alimentos naturales, pero la fuente principal en el ser humano es la sntesis bacteriana intestinal; por ello, los tratamientos prolongados con antibitim que afecten dicbaflora pueden provocar un estado carencial, que se caracteriza por dermatitis, prdida del apetito y dolores musculares. El dficit de cido ftico conduce a una anemia macroctica, causada por la afectacin de la sntesis del ADN. Las fuentesfundamentales de esta vitamina son el rin, la levadura y las legumbres verdes. La cobalamina o vitamina B,, se encuentra nicamente en los productos de origen animal, especialmente la leche, la carne, el huevo, el hgado y los riones. La absorcin de esta vitamina en el intesino requiere de una gcoprotena especca, secretada por la mucosa gstrica (factor intrnseco). La vitamina B,, se almacena en el tejido heptico. El dficit de cobalamina produce anemia macroctica, aciduria metilmalnica, neuropata perifrica y anemia perniciosa, inducida por la carencia del factor intrinseco. En el ser humano no se ha detectado el estado carencial provocado por el dficit del cido pantotnico; tampoco se conoce la funcin del inositol en la nutricin humana. La colina, cuya fuente ms rica es la yema del huevo, tiene diversas funciones biolgicas y ha demostrado poseer accin lipotrpica. o s El cido ascrbico o vitamina C est estructuralmente relacionado con L glddos. Su fuente principal son los vegetales y fmtos, especialmente la guayaba y los ctricos. El dficit de esta vitamina conduce al escorbuto, el cual se manifiesta por hemorragias superficiales y alteracin de los procesos de cicatrizacin. La vitamina A o retino1 es un ipido isoprenoide y puede obtenerse a partir de los carotenos. Su fuente principal la constituyen la mantequilla y la yema del huevo. Los carotenos, precursores de la vitamina, se encuentran en numerosos vegetales. La ceguera nocturna, la xeroftaima, los trastornos del crecimiento y desarrolio, y las lesiones de biperqueratosis de la piel son los sntomas de la bipovitaminosis A. La hipervitaminosis se manifiesta por irritabilidad, prdida del apetito, dolores de cabeza, alteraciones de la piel y aumento de la fragilidad sea. La forma vitamnica natural de las vitaminas D es la D, o colecalciferol y se forma por la accin de la luz solar sobre el 7 dcsbidrocolesterol presente en la piel; su producto activo es el 125 dihidroxicolecalciferol, compuesto que presenta una accin hormonal. El dficit de la vitamina D conduce al raquitismo en el nio y a la ostwmalacia en los adultos. La vitamina E, presente en los aceites vegetales, el huevo, la mantequilla y los cereales, tiene una accin antioxidante. Es raro que se presente un estado carencial en el ser humano; sin embargo, en recin nacidos prematuros se ha comprobado una tendencia a la hemlisis, ante la presencia del perxido de hidrgeno, que se

revierte por la administracin de esta vitamina. El dficit de la vitamina E se

d e s t a por signos neurolgicos.

Las vitaminas K estn relacionadas con varios de los factores que intervienen

en el proceso de la coagulacin de la sangre. La fuente principal en el ser humano e su sntesis por la Dora intestinal. La deficiencia de esta vitamina provoca un &hemorrgico por la carencia de protromb'ina.La admioistracin prolongada
de antibitiws puede conducir a la deficiencia. La funcin de las vitaminaspuede afectarse por la presencia de algunos agentes que interfieren en su accin; estos compuestos se conocen como antagonistas dtsmiicos. La avidiaa, el dicumml y la aminopterina son antagonistas de la biobina, la vitamina K y el cido fiico, respectivamente. Las vitaminas nueden inactivame o eliminarse de los alimentos oue la contienen durante la preparacin de stos. La vitamina C se inactiva por el calor y la exposicin a la luz o a determinados iones. La A y la B , se descomponen por el efedo de la radiacin solar. Las vitaminas del complejo B se eliminan frecuentemente en el agua de coccin de los alimentos.

Ejercicios
1.Exprese el concepto de vitamina. 2. Mencione las diferentes vitaminas incluidas en los grupos hidrosolubles y liposolubles. 3. Mencione las principales fuentes de las vitaminas siguientes:

a) Tiamina. b) Niacina. c) cido ascrhico.

d) Vitamina A. e) Vitamina D,. 0 Vitamina K.

4. Mencione las diferentes enfermedadescarenciales que son provocadas por el dficit de las vitaminas siguientes:

a) b) c) d)

Tiamina. Niacina. cido ascrhico. VitaminaD.

5. Mencione las alteraciones bioqumicas provocadas por la deficiencia de cido flico. 6. Explique las afectaciones fisiolgicas provocadas por la deficiencia de vitaminaR,,. 7. Exponga las bases rnoleculares de la funcin de la vitamina A en los procesos visuales. 8. Por qut en los paises tropicalesson infrecuentes los estados carencialesde vitamina D? 9. Exponga el concepto de antagonista vitamnico. Cite 2 ejemplos. 10. Explique las condiciones que favorecen la inactivacin de las vitaminas.

Los minerales ocupan un lugar muy importante en la dieta humana, por estar ntimamenterelacionados con diversasfunciones biolgicas. Adems dc los elementos fundamentales que se encuentran en las biomolculas, es decir, carhono, oxgeno, hidrgeno, nitrgeno, fsforoy aaufre, algunos otros tambin son necesarios para el mantenimento de la vida del ser humano. Lasmaonesquecumplenlos minerales abarcan un amplio espectro: estrnchirales, participacin en reacciones enninticas,formar parte de hormonas, cntre otras, y sern tratadas ms adelante con mayor detalle. La mayora de los minerales constituyen requerimientos n~oleculares para el ser humano, ya que ste est obligado a obtenerlos mediante la dieta. En este captulo se dedicar la atencin al estudiode los minerales en la nutricin humana; se har nfasis en sus funciones y requerimientos diarios, y se tratarn brevemente algunas de las afecciones que se producen por el dficit u exceso de algunos de estos elementos.

Clasificacinde los minerales

Aunque existen distintos criterios para la clasificacin de los minerales, aquse tratarnicamente la que se basa en lacuantia desus requerimientos diarios, por ser la ms empleada desde el punto de vista nutricional. De acuerdo con este criterio, los minerales se clasifican en 2 grandes grupos: los macroelementos o elementos principales, cuyos requerimientos diarios exceden los 100 mg, como el calcio, el sodio, el cloro, el potasio, el magnesio, entre otros, y los oligoelementos o elementos trazas, cuym requerimientosson del orden de las micropamos o de algunos miligramos por da, por ejemplo, el hierro, el cinc, el iodo, cl cobre, elmanganeso y el selenio, entre otros. Es bueno aclarar que estas cifras que se dan como lmites para esta clasificacin no son intlexibles, ya que no pueden considerarse vlidas para todas las condiciones; sin embargo, resultan tiles como criterio prctico para todo lo que concierne a kas consideracionesnutricionaies.

Funciones de los minerales

1.0s minerales cumplen varias funcioncs en el organismo, como son:

1.Mantienen la dureza y rigidei. de algunos tejidos, como los huesos y los dientes, los cuales poseen un elevado contenidomineral, especialmentc de calcio y fsforo. 2. Alynos forman parte de componentes bioqumicos importantes, que desempean funciones especficas,tal es el caso del hierro en la hemoglobina y otras hemoprotenas, y del iodo en las hormonas tiroideav. 3. Participan en el mantenimiento de la presin osmtica dc los lquidos corporales, como el sodio, el cloro y el potasio. 4. Intervienen en la accin de determinadas enzima$, bien porque contrihuyen a estab'iar la conformacin del centro activo,o porque forman parte de un complejo terciario enzima-mineral-sustrato,o porquemodifican la estrndnra delsustrato: el cinc, el magnesio, el cobre y el manganeso son ejemplos de minerales que participan en este tipo de funcin. 5. Contribuyen al mantenimiento del equilibrio cidn-bsico. El fosfato y el bicarbonato son ejemplos de este tipo de minerales, ya que constituyen solnciones amorti&wadoras importantes del pH (buffem)de la sangre. 6. Proveen un medio apropiado para la actividad celular. En la excitabilidad de las clulas nerviosas intervienen el sodio, el potasio y el calcio; este ltimo tambin interviene en la contraccin muscular, as como en cl proceso de coagulacin sangunea y en algunos mecanismos de regulacin enzimtica.

Elementos principales o macroelementos

A continuacin se tratarn, por separado, alguna$de los elementos principales, importantes en la nutricin humana.

Calcio

El calcio es uno de los elementos ms abundantes en el organismo humano. Aproximadamente, el 99 % se encuentra en los huesos y los dientes, unido a iones fosfato, formando la hidroxiapatita de calcio, compuesto insoluble que responde a la frmula qumica de Ca,,(PO,),(OH),, a lo que se dehe la dureza de estos tejidos. El calcio restante se Localiza en los tejidos blandos y en los distintos fluidos corporales; ste interviene en importantes y variadas funciones como la contraccin muscular, la excitabiliad de las &lulas nerviosas, la cudgulacin de la sangre y tambin participa en la accin hormonal actuando como segundo mensajero, al activar detenninadasenzimas.

El calcio es abundante en la leche, los cereales, las legumbres, las nueces y los vegetales; r$tpresente en los alimentos en forma de sales: fosfato,oxalato, carbonato y tartratode calcio. Su absorcin disminuye cuando se encuentra en forma de fitina (sal de calcio y de magnesio del fitato). La absorcin del calcio se afecta, adems de por el tipo de sal en que se ingiere, por otros factores como el pH, la presencia de cidos grasos y otros cidos vegetales, y especialmente por los niveles de 1,25dihidroxicolecalcifcrol,el cual induce la sntesis de la CaR ( calcium bindingprotein), es decir, la protena tijadora del calcio, la cual interviene en el transporte deeste mineral a travs del epiteliointestinal.

Se recomienda una dosis diaria de 800 mg para nios de 1a 10 aos y adultos mayores de 24 aos, y de 1200mg para los adolescentesy adultnsmenores de 25 aos, mujeres embarazadas y durante el perodo de lacancia, ya que se incrementan las necesidades de este mineral (tabla 74.1).
lsbInl4.1. Requerimientos(mgdia) de losmacroelementos*

Edad (aos)

Cloro

Sodio

Potasio

Calcio

Fshro

Magnesio
40 60

Nias

1-3 4-6 7-10

500-1 500 700-2 100 925-2 775

325-975 450-1 350 600-1 800

550-1 650 775-2 325

1 000-3 000

800 800 800

800 800 8W

80 120 170 280 300-400 2R0-350

* Tornada de: Murray, RK et al.: Bioquimicti dc Harper, 13ra. ed. Ed. El Manual Moderno, 1994.

Rpsuiad6n de le concentracin del calcio Serico

La regulacin del calcio srico depende fundamentalmente de 3 hormonas: la hormona paratiroidea,la calcitoninay la 12.5 dihidroxicolecalcifero1.La paratiroidea eleva la concentracin del calcio srico y disminuye la delfosfato inorgnico, ya que aumenta la reabsorcin del calcio por el rin, en tanto que disminuye la de fosfato; aumenta tambin la reabsorcjn sea y la absorcin intestinal del calcio y el fsforo mediante el incremento de la 1,25 dihidroxicolecalciferol. La calcitonina disminuve el calcio v el fosfato srico. dado uue decrece la reabsorcin del calcio y el fsforo por el rin, as como La resorcin sea, en tanto que L a 1,25dihidroxicolecalciferollos eleva por un efecto contrario sobre la resabsorcin la movilizacin del calcio del hueso, as como por el renal de estos elementos y por incremento de la absorcin intestinal del calcio y el fsforo.
~

Alteraciomspmvocadm por el d m u t o exceso de caldo

El mantenimiento de los niveles sricos del calcio, entre 8,s a 10,4 rng.d~-' (2,Z-2,6mmol.dl.'),estiindamental para evitar las graves consecuencias que se o k r v a n cuando se alteran estos valores. La hipocalcemia provoca un estado de tetania; en la hipercalcemia se presentan debilidad muscular y trastornos mentales, que pueden llegar al coma; los aumentosdel calcio srico pueden causar clculos renales de sales insolubles de este mineral.

El fsforo es un elcmento de vital importancia en el organismo humano, pues resulta indispensable en el metabolismo de los glcidos y otros compuestos; tambin e s fundamental en la formacin de los nucletidos y los cidos nucleicos. Por otra parte, el buflerfosfatoes una de las principales soluciones tampones que contribuyen

al mantenimiento del pH sanguneo. Una parte importante de este elemento (alrededor de1 85 9%) forma, junto al calcio,la estrnctnra de los huesos y los dientes.

El fsforo est presente en todos los alimentos de origen animal y vegetal. La mayor parte del fsforode la dieta se encuentra en forma de fosfato inorgnico; su absorcin se produce en el intestinodelgado. La va principal de excrecin es el rin. Los requerimientos diarios en la infancia varan entre 300 a 800 mg, segn la edad; en los adultos mayores de 24 aos tambin son de 800 mg, en tanto que en las embarazada^ y durante la Lactancia los requerimientosson mayores (1 200 mg diarios [tabla 74.11).

Regulacin de la cnneutracin del f d a t o &m

En los adultos normales la concentraciiin del fosfato inorghnico es de 3 a 4 3 mg.dL-' (de l a 4 nunol), y es algo mayor en los nios. 1.0s huesos almacenan fosfato, el cual es liberado a la sangre en condiciones en que ste es requerido. La regulacin del fosfato srico est muy relacionada con la del calcio y por ello fue iratadoen el acpite anterior. Cabe sealar,no obstante, que la hormona paratiroidea y la calcitonina disminuyen el fosfato srico y la 1,25 dihidroxicolecatdferollo eleva: por otra parte, la hormona paratiroidea provoca una marcada disminucin de la reabsorcin m 1 de este elemento, lo que condiciona una fosfaturia.

El hecho de la presencia del fsforo en todos los alimentos de origen animal y vegetal explica que no se haya detectado un cuadro de deficiencia de este elemento en los seres humanos. Sin embargo, m puede provocar una hipofosfatemia en condiciones especiales, entre ellas cuando se le aplica a un individuo la alimentacin intravenosa con glucosa, aminocidosy un bajo contenidode fosfato, o por la ingestin de cantidades elevadas de hidrxido de aluminio o de carbonato de calcio, que impiden la absorcin del fsforo.

sodlo, cloro y potasio

El sodio, el cloro y el potasio intervienen en el equilibrio hidromineral y cidobsico del organismo, y contribuyen al mantenimiento de la presin osmtica. El sodio es el principal catin extracelulary el potasiu, el intracelular. El cloro, adems, se intercamhia con el ion bicarbonato (HCOJ en los eritrocitos, lo cual es importante en el control del pH.

El sodio, el cloro y el potasio se encuentran en grandes cantidades en la mayor parte de los alimentos y los 2 primeros son abundantes en la sal de mesa. Los requerimientos diarios de sodio son de 1100 a 3 300 mg en los adultos, y en los nios y adolescentesdependen de la edad (tabla 74.1);los requerimientosde cloro para el adulto son de 1 700 a 5 100 mg, y tambin dependen de la edad en el caso de los nios.

La ingesta promedio diaria del cloruro de sodio es de 6 a 10 g, lo que sobrepasa los requerimientos de ambos iones, y el exceso se elimina por la orina. Es importante la restriccin de la sal, ya quese ha demostrado la asociacin de sningesta elevada con la hipertensin arterial. Se recomienda una dosis mxima lmite de 6 g al da. E 1 tomate, lai ctricos y el pltano son ricos en potasio. Los requerimientosdeeste elemento son, ms o menos, de 1W5 a 5 625mg por da para los adultos,nuentras que en los nios vara de acuerdo con la edad (tabla 74.1 ). Su ingesta tambin rohrepasa los reqnerimientos en condicionesnormales.

Reguiaei6n de la eoneeatrsd6n dei sodio y ei potado sriws

La regulacin de la concentracin srica de estos iunes est controlada por las hormonas mincralocorticoides. La aldosterona incrementa la entrada de sodio a la clula; el exceso de esta hormona provoca h i p o p o t a d a e hipernatremia, entre otros sntomasy signos.

Aiteraa'onesprovacsdaFpor d d&+t o exceso de sodio, doroy poWo

Las alteraciones de los niveles de estos ioner estn presentes en determinadas condiciones y como complicacin de algunos cuadros morbosos. La hipo e hipernatremia se relacionan con lai diarreas, los vmitos y como iatrogenia al realizar una hidraiacin, sin un suministroadecuado de estas minerales. Un cuadro de cetosis se suele acompaar de hiponatremia,debido a la eliminacin por la orina de este ion, conjuntamentecon los cuerpas cetnicos (cetonuria). El dficit del ion cloruro se presenta en los lactantes alimentados con frmulas exentas de sal y de manera secundaria a vmitos, tratamientos con diurticos o enfermedad renal.La hiperpotasemia y la hipopotasemia tamhi6n ron entidades nosolgicas que se observan con determinada frecuencia,especialmente la deplecin de potasio, que puede ocurrir por diarreas intensas, diabetes mellitus y tratamiento con diurticos, sin la debida reposicin de este mineral.

El magnesio se encuentra en todas las clulas del organismo, en concentraciones elevadas, pero predomina en los huesos, los dientes, las msnilos y el tejido nervioso; intervienecomo cofactor en numerosas reacciones enzimticas, particularmente en todas aquellas que requieren del ATP. Los msculos esqueltico y cardacorequieren de un adecnadoequilibrioentrelas ion- magncsio y calciopara sus funcionesnormales.

Las fuentes principales de magnesio la constituyen las hortalizas de hoja$ verdes que contengan clorofilas. Los requerimientos diarios son de 280 a 300 mg para las mujeres y de 280 a 400 mg para los hombres. En el caso de los nios, las dosis diarias recomendadas dependen de la edad (tabla 74.1).

Altenidoaes pmvoeadas por el dat o exceso de magnesia

El dficitde magnesio provoca una tetania similar a la observada por la falta de calcio, as como arritmia cardaca. Los vmitos persistentes, L a malabsorcin y la

administracin de lquidos por va parenteral, carentes de magnesio, son causas del dficit de esteelemento. Tambin se hacomprobado estadeficienciaen algunos casos de toxemia del embarazo, nefropatias graves y alcoholismo crnico, entre otras enfermedades. El exde magnesio provoca vmitos, nuseas y diarreas, as como respiracin y reflejos tendinosos profundos deprimidos. Se ha comprobado que su ingestin puede prevenir laformacin de clculos renales de oxalato de calcio.

El hierro es necesario nara la sntesis de la hemodobina v otras hemourotenas como los citwromos, la mioglobinay la atocromo oxidasa, que tienen una funcin de vitalimportancia Fn~tas protenas estn en mambio continuo,pero el hierro contenido en eUas puede ser reutilizado. En la reualizaan del hiem intervienen la femtina, la apofemna,La hemosiderina y la transferrina,entreotros factores. La femna, protena almacenadora de hierro, se halla en todas las clulas y el plasma, pero es en el hgado y la mdula sea donde se encuentra en elevadas concentraciones. La hemosiderina est presente en el bazo, la mdula sea y las clulas de Kupffer del hgado. Debe aclararseque esta protena se almacena nicamente en determinadas condiciones anormales, como en el caso de transfusiones sanguneasa repeticin, y uarece ser una forma desnainralizada de la ferritina. El hierro de la hemosidrina se moviliza mucho ms lentamente que el de La femtina. La transferrina es La protena principal transportadora del hierro del plasma.

Las fuentesde hierro son lacarne,con una absorcin ms fcil por encontrarseeste
mineral en forma de hemo; los granos de soya, con una absorcin ms difcil; y Las frutas y los granos secos, en los que el hierro se encuentra en forma inorgnica, y por e s a razn, a la hora de comerlos,deben acompaarsede fnitas frescaspara garantizarel aportede vitamina C que se requiere para su absorcin. El hierro procedente de los utensilios de cocina tambin constituye una fuente; a mucosa intestinal a la transferrina y, as, ste, al ser absorbido, es transferido en L transportado al resto de lai clulas. Los requerimientos diariosdel hierro son de 6 a 10 mglda para los nios hasta el ao de edad; para los de 1a 10 aos son de 10 mgtda. A partir de esta edad las necesidades diarias multan difereutespara el hombre y la mujer (hasta la menopausia): de 10 a 12 y 15 mg/da, respectivamente. Durante el embarazo las necesidades de del estado hierro pueden ser hasta del 60 % sumrior al basal. aunaue stas de~enden nutriuonal de la mujer antes del comienzo de la gestacin. Normalmentelas prdidas de hierro son minimas y ste es, adems,eficienternente reutilizado formando un ciclo como puede apreciarse en la figura 74.1. Enel transportedel hierro iambin participan otras protenas la haptoglobins se combinaconlahemoglobinaextradular y la hemopexina lo hace con el hemo liberado durante la hemlisis, que a su vez lo transporta hacia las clulas del sistema reticuloendotelial, donde es degradado y puede ser reutilizado. La ceruloplasmina (una cnpmpmtena) oxida al Fe", el cual es absorbido por las clulas intestinales, y lo convierte en Fe", que es La forma en la que se combina con la transferrina. En los distintostejidos existen receptoizs: para la transferrina.

1290

Estmago

' ' /

pH bajo cido aschrbico

. . . . . . . . . . . . . . . . . . -

Mucosa intestinal

Apofemtina

Transfemna ( ~ e ~ ' ) Hgado

Ji

Msculo (rnioglobina) Otros tejidos iiit-FeNH3

Hernosiderina

Ferritind

+Transfemna ( ~ e " ) A
Glbulo rojo

Figura 74.1. Reutiliaacin del hierro. El hierro absorbido se transporta en la sangre en forma de transfrrrina y se iieumuls en el hgado como fenitina o hemosidorina. El hierro encretado por prdida de sangre se une a la transferrina y PS Utilizildo de nuevo.

La velocidad de absorcin intestinal regula la captacin de hierro, de acuerdo con los requerimientos del organismo. Los mecanismos mediante los arales se produce esta regulacin no se wnocen,pero s constituyen un raso particnlar de regulacin de la captacin para estenutriente.
~~teradones provocad88 por el ddcit o exceso de bierm

El dficit de hierro provoca un tipo de anemia, la ferripnva, hipocrmica y micmctica. Por el contrario, el exceso de hierro condicionauna enfermedad conocida como hemoeromataFis, que se caracteriza por depsitos de hierro, anormalmente elevados,en varios tejidos, lo cual puede provocar disfuncin heptica, pancretica y cardaca, ascomo pigmentacin de la piel.

Iodo
El iodo fonna parte de las hormonas tiroideas y sealmacenaenla glndula tiroides, donde es uozado en lasntesisde dichas hormonas; suconcentracin en esta gindula a de lasangre. El plasma contiene,nonnalmente, de4 a 8 pg es 10000 veces superior a l de iodo, unido a la PBI (proleio bound iudine, iodo unido a protena).

fientesy requerimientos
Los requerirnientosdiariosen el adulto son de 150mg: en los nios dependen de la edad (tabla 74.2). Las fuentes principales de iodo la constituyen los pescados de agua salada, el agua corrientey la sal comn iodada.
~ a b 743. h Requerirnientus (rng/da) de los oligoelementos*

Adolescentes 11-14 12-15'* 15-18 12-E** Adultos

> 18 10-15**

150 150 150

12 12 12-]S***

13-2,s 1,5-2J 13-3,O

2,O-5,O 2,O-5,O 2,O-58

1,s-2,s 1,s-2J 13-4,O

50-200 50-200 50-200

40 50 SS****

75-250 75-250 75-250

*** La c i e n mayor corresponde al sexo msculino. M** En los hombres 18 dosis recomendada es de 70 &da.

** Los requerimientos en el sexo femenino corresponden a las cifras mliyores en cada enw.

* Tomado de: Mun'ay

RK et al.: Bioquimica de Harper, 13ra.cd. Ed. i Manual Moderno, 1994.

Alteracimes provocmiam por@dcit o excew de iodo

El d6fiWtde iodo es raro, pero a h se observa en las poblacionesalejada5 del mar, que no consumen la sal iodada. En lus nios se puede presentar cretinismo y en los adultos, la enfermedad conocida como bocio endmico, que se caracteriza por el aumento del volumen de la glndula tiroides, con hipotiroidismo y mixedema. El exceso de iodo puede provocar un cuadro de intoxicacin, caracterizado por tirotoxicosis y bocio.

Cobre
E1 cobrees un elemento muy importante en el organismo, pues forma parte de un grupo de cnpropmtenas que desempean una funcin fundamentalen el metabolismo oxidativo, como iaciiocromooxidasa del complejo IV de la cadena transportadora de electrones; las ferroxidasas,entre ellas la ceniloplasmina,con una funcin importante en el metabolismo del hierro; las aminooxidasas,enzimas dependientes del cobre, que intervienen en la formacin de los enlaces cruzados del colgenoy de la elastina; la superxido dismutasa, que cataliza la transformacin del ion superxido (O'); la tirosinasa, enzima que interviene en la sntesis de melanina, entre otras.

Las fuentes principales de cobre son el hgado de corderoy el de ternera, as como las ostras, el pescado, Las verduras frescas, las nueces y las frutas.

Los requerimientos diarios en los nios y adolescentes varan segn la edad , O mglda. (tabla 74.2); en lus adultos son de 1,sa 3 La absorcin del cobre se lleva a cabo en el estmago y la parte superior del intestino delgado. El cinc, el cadmio, el mercurio y la plata antagonizan con su absorcin. La vitamina C y otros factores como los snlfuros la disminuyen; por el ~vntrmio, los aminocidos lafavorecen. Una vez absorbido, a la sangre y se une a la albmina plasmtica y a la ceruloplasmiua; de esla manera, es transportado a los diferentes tejidos. El cobre se almacena en el hgado, donde se une a la ceruluplasmina o a la metalotionena. En dependencia de Las condicionesmetablicas puede ser liberado al plasma o excretarse por la bilis.

Alteraeion~ provocadas por el diidt o exceso de wbre

El dficitde cobre puede presentar caractersticas diversas. As, el sndrome de Menkes, de carcter gentico, se trasmite por herencia recesiva Ligada al cromusoma X, y se manifiesta como una deficiencia en la absorcin de este mineral. Los sntomas de esta enfermedad son graves: encefalopata, anomalas de las metfisis de los huesos largos, tejidos elsticos arteriales anormales, alteracin de los vasos a deficiencia de cerebralesy pelo rizado, entre otros. Adem? de este cuadro gentico, L cobre se presenta como un trastorno nutricional por baja ingesta o malabsorcin y se relaciona con la hipercolesterolemia, la leucopenia, la fragilidad de las arterias, la desmineralizacinde los huesos, 1a anemia y la desmielinizacin del tejido nervioso. Las enaimas que intervienen enla desaturacin del cido estrricoy lo convierten en oleico requieren cobre; es posible que esto pudiera explicar la hipercolesterolemia de estos pacientes. La enfermedad de Wilson est asociada a una acumulacinanormal de cobre en diversos tejidos y puede tratarse con la penicilamina,que es un agente qnelante.

Cromo
La funcin principal del cromo en el organismo parece estar relacionada con el factor de tolerancia a la glucosa (GTF [glucosetolerancefactorl), sustancia natural y los que forma un complejo de coordinacin con el cromo, el cido ~cotnico aminocidosglicina, glutmico y cistena (o glutatin). El GTF potencia el efecto de l a insulina, presumiblemente por favorecer su unin al receptor.

Las fuentes principales de cromo son la carne, el hgado, la levadura de cerveza, los cereales enteros,las nueces y el queso. Los requerimientos de cromo en el adulto son de 0,05 a 0,2 @da; en los nios y adolescentes son aproximadamentela mitad de los de los adultos (tabla 74.2).

Ahkmchm provocadas por el d W t o exfeso de momo

La deficiencia del cromo se manifiesta por la intolerancia a la glucosa, debido, a insulina. De hecho, probablemente, a la disminucin de la accin hormonal de L existen reportes decasos de diabetes que pond dieron al tratamiento con GTF,aunque en otros casos esto no ha sido efectivo, as como tampoco el tratamiento con cromo.

El exceso de cromo provoca una intoxicacin caracterizada por sntomas inespeuficos de vmitos, diarreas y naseas.

Cinc

El cinc es un componente esencial de la anhidrasa carbnica y tambin forma parte,como grnpoprosttico,de un ~wnjunto deen&nas,entrelas males se encnentran la fosfatasa alcalina,la carhoxipeptidasay la deshidrogenasa alcohlica. Algunas de las enzimas que intervienen en el metabolismo de los cidos nucleicos tambin son dependientes del cinc: las ADN y ARN polimerasas, y la timidina qninasa. Estas funciones del cinc pudieran explicar la importanciade este mineral en el crecimiento y desamUo de los animales.

Las fuentes ms importantes del cinc son la carne, la leche, el huevo, el pescado y el hgado. Los requerimientos diarios en los nios difieren segn la edad (tabla 74.2). En los adultosson de 12mglda para las mujeres y de 15mg/da para los hombres. La absorcin de este mineral tiene lugar en el duodeno v se ve afectada aor su forma qumica, por L a cantidad ingerida y por otros componentes de la dieta; as, el calcio, el cobre y el cadmiula intereren. En los seres humanos la absorcin del cinc se inhibe por la leche. De forma similar a lo que ocurre con el calcio y otros minerales, el fitatotambin afecta su absorcin.

Alteraciones provocadaspor el d&cit o e x m de cinc

El dficit de cinc provoca retardo en el crecimiento e infantilismosexual en lus adolescentes, ascomo dificultad en la cicatrizacin de las heridas que responden al tratamiento con este mineral. Otras alteracionesson la disminucin de las agudezas olfatnria (disosmia) y gustativa (hipogensia). En estos pacientes tambin se ha comprobado falta de apetito, con prdida marcada de peso, y depresin psquica que Ueva, en ocaiiones, a intentos suicidas. Laacrodennatiiis enteropticaesuna enfermedad hereditaria quese trasmite con carcter antosmicorecesivoy se asocia aun dcit de cinc. Lossntomas son rngosidad y engrosamientode la piel, y diarreas persistentes; este cuadro clnico se acompaa de retrasos del crecimientoy desarrollo, as como de infewiones. El tratamiento con cinc revierte el cuadro. El exceso de cinc (hipercincuria) se caracteriza por vmitos, irritacin gastrointestinal,hepatitis infecciosa y cirrosi.; estas 2 itimas aparecen en el cnno de tratamientos con agentes qnelantes, como la penicilarnina y el EDTA (etilen diarninn tetraceticaeid).

El molibdennesun componentefundamental de algunasenzimas,las molibdenoe n * ; una de ellas es la xantina oxidasa, que cataliza la oxidacin de las pnrinas, las pteridinas y otros compuestos heterocclicos que contienen nitrgeno; otra es la aldebdo oxidasa, enzima que interviene en los procesos de oxidacin de un grnpo de heterociclos y que son reacciones que pudieran estar relacionadascon los procesos de destoxifieacin (stas son poco especficasen relacin con sus sustratos).

Lasulfito oxidasa, la temra de estas enzimas, cataliza la formacin del snlfatoa partir del sulto e intervieneen el metabolismodegradativo de la asteinay la metionina.

Las fuentes fundamentales de molihdenoson la carne, la leche, el hgado, el rin

y los vegetales, pero su contenido en este mineral vara en dependencia de la

composicin del suelo. Los requerimientos diarios son de 75 a 250 pg en los adultos, mientras que en los nios dependen de la edad (tabla 74.2).

A l t d m m provo~~das por el d&t

o exceso de molibdmo

No se conoce en el ser humano ninguna afectacin primaria por el dficit de molihdeno, sino solamente la secundaria a la nutricin parenteral; tampoco se ha descrito un cuadro de intoxicacinpor exceso.

El selenio es un constituyente hiudamentald e h selenoprotenaspresentes en las &das de mamferos, comola glntatin oxidasa, entre otras; por ello, desempea una funcin importanteen la defensaantioxidantedelorganismo, ascomo en la accin de las hormonasroidea$;en elsistemainmune,particularmente en la inmunidadcelular; en la formacin del semen y en la funcin de la glndula prosttica.

Se encuentra en varios vegetales; en algunos suelos selenferos el contenido de estos alimentos puede tener dosis muy elevadas de este mineral, que, incluso, llegan a producir cuadros de intoxicacin. Los requerimientos diarios son de 10a 15 pg para loslactaniesde0 a 1ano; de 20 a 30 pg para los nios hasta 10 aos; de 50 a 70 pg para los hombres, y de 45 a 55 pg para las mujeres.

Se han detectado deficiencias marginales de selenio cuando el suelo es pobre en

estemineral o tambin de manera secundaria a la nutrian parenteral o a la desnutrian

proteico-calrica; las manifestaciones clnicas del dficit son cardiomiopata, enfermedades cardiovascularesy carcinognesii. Las dosis elevadas de selenio (megadosis),frecuentemente ocasionadas por la ingestin de vegetales cultivados en suelos selenferos, provoca un cuadro txico caracterizado por irritabilidad,dermatitisy prdida del cabello.

El carcter esencial del manganeso se explica por su participacin como cofactor de las metaloenzimas, por ejemplo,las fosfotransferasas y la arginasa,y delas enzimas hidroliticas, en& las que se encuentran las peptidasas y fosfatasas. El manganeso es importante en la sntesis de los mucopolisacridos.

Resumen
Los mineralesconsatuyen requerimientos mdecnlares para el ser humano, el eual e s t 4 obligado a ingerirlos en la dieta &tos ae dariean, de acuerdo con los
niveles de sus requerimientos, en mavoelementoso elementos prbcipales, niando sus requerimientos son snperiores a los 100 mg, y en ogoelementos o elementos trazas enando sus requerimientos son del orden de mimogramos o unos pocos milimamos. Los minerales esenciales,cuya fonci6n biolgica es conocida, son el calcio, el dom, el fsforo, el potasio y el sodio, entre los elementosprincipales; y el hierro, el cobre, el dnc,el m&aneso, el cobalto,e l m o i o , el seleni02 a m o , el nquel, el estano,el d c i o y el flbor, entre los ogoelemfmtos. Los minerales desempean importantes y variadas fonaones: le proporcionan dureza y rigidez a algunos tejidos, conhibnyen al mauteaimiento de la presin osm6tica de Los lquidos mrporales y pariapan en el equilibrio 4ddo-bhico, n fuaeionps biolgicas, pardpan como forman partede mdfulss~ o importaob wfactores en algunas reacdones enzim4ticas e intervienen en mecanismos de actividad celular como la mnracci6n musnilar, entre otras. El a l d o es el mineral m4s abundante; se encuentra principalmente en los huesos y los dientes,combinado con el fsforo en forma de hidroxiapatita, que es lo que le da la rigidez y d a estos tejidos. Interviene, adeuus, en la coagulad611 sanguiea, la excitacin de las chuss nerviosas y la contracd6n muscular, y coustihiye m segundo mensajero en la respuesta hormonal. Su dficit produce Msnls. La funei6u del f a o r o est ligada, en parte, a la del calcio, y la regulaci6n de ambos minerales est estrechamente relacionada mediante las hormonas Por el elevado contenido paramidea, ealeitonina y 1 3 dibidroxk01~Cife~1. de los alimentos en este minerai no se produce d6fcit. El magnosio forma parte de los msenlos esqueltico y cardaco, as como del sistema nerviom; interviene, adeuus, en numerosas reacdones enPmoeaS. Su dficit conduce a un cuadro de teiania, similar al pmvoeado por la h i p o c a l d a . El sodio y el poiasio se encuentran en grandes cantidades en la mayona de los alimentos y sus dedenuas nuhiaonales son raras. Ambm minerales participan en el equili'brio hidmmineral y en el mantenimiento de la presih osm6tiea de los lquidos corporales. El hierro se requiere para la smtesis de las hemopmtenas. Su d&& provoca l a anemia femipriva y niexreso,la hipemmatosis. Wra el fondoiipmienton o d del metabolismodel tejido amectivo se requiere el cobre, el eual forma p a & , adems, de numemsas niproprotenas que cumplen ibndones importante9 Su dficit se e a r s e t e h por hmpenia, hipercolestemlemia, agidadde las arterias y desmiwraiiza6nde los huesos. Existe una enfermedad genlica Ja eafermedad de Menlres) que se manifiesta por el dcit de cobre, y otra por w exceso Ja enfermedad de Wilson). El einc eue una funda511 biolgica kmdamental, ya que interviene en el metabolismo de los 4cidos nudeicos So d a c i t se maniesta por retardo del eredmiento (enanismo hipogonadai), trastornos del gasto y del oifato,y dermatis, entre otros sintomas y signos. El iodo se reledona con la formad611 de l a s homonas tiroideas. So dficit pmvoca bodo, hipothidiwo, eretidLsmo en el pI y &edema en el adulto. Su exee~~se~naeonlaomto~. El manganeso es un cofactor de numerosas enzimas. No se han descrito deficienck de este mineraL El cobalto tiene oomo funa6n ser ua componentede la vitemina B , y m dcit provoca un madm carencia1de esta vitamina.

E1 flor interviene en la mlneralizaein de los dientes y los huesos, y es importante en la prevend6n de las caries dentales. El selenioparticipa en los mecanismos de ddensa m i r ael esffi oxidativo; en cuanto al sido, se plantoa que se reladona con la mueralizsd6n sea. L a sobredosdp de seledo provoca un cnadro de irritabilidad, dermatitis y pmda del cabeiio. El d&dt del sllido se acompaa de retardo del erecimienio. El w m o se encuenb ampliamente d h i b n i d o en la natnrsleza. Su ddt provoca trastonios de ia toleiancia a ia glucosa,hipergUeemia y glua>suna, ya que se afecta ia d i l i d a d de las tejidos a ia msuliaa

Ejercicios
1. Clasique los mineralesde acuerdo con los niveles de sus requerimientos diarios. 2. Explique las funciones de los minerales. Diga 2 ejemplos de cada funcin. 3. Cite las fuentes principalesdel calcio y explique cmo se regula la concentracin srica de este mineral. 4. Describa los cuadros clnicos del dficit y exceso de calcio. 5. Explique la importancia biolgica delfosfato en el organismo humano. Cmo se regula el fosfatosrico? 6. Mencione la importancia biomdica del magnesio. 7. Justifiquelaimportancia biolgica del hierro. 8. Describa la reutilizacindel hierro en el organismo. 9. ;Qu funcionesdmmpem el cloro, el potasio y el sodio en el organismo humano? 10. Cules son Ias funciones del cobre y cmo se relacionan stas con el estado carenaal? 11. Explique por qu el dkficit de iodo es ms frecuente en los paises sin costas. Deseriba los sntomas del estado carencia1de este mineral. 12. Relacione la importancia biolgica del cinc con las consecuenciasde su dficit. 13.Relacione la importancia biolgica del flor con las consecuenciasde su dficit. 14. Hagaun cuadro que recoja todos los minerales esenciales e incluya paracada uno su clasificacin,fuentes, requerimientosy sntomas del estado carencial y de SU exceso.

Resumen de la seccin

El ser humano depende de una continua adquisicin de sustancias exgenas para el crecimiento, desarrollo y normal mantenimientode la vida. As, junto con los requerimientos energticos, precisa de la ingestin de protenas, glcidos, Ipidas, vitaminas, minerales y agua. Los requerimientos energticosdel ser humano son las necesidades de energa que l precisa para mantener la salud, garantizar el crecimiento y realizar una actividad fsica apropiada. La demanda energtica basal, tasa de metabolismo basa1 (TMB), es la energa necesaria para los procesos vitales, en condiciones de reposo total. La TMB depende de varios factores, pero el peso corporal es el factor fundamentala tener en cuenta para los efectos prcticos. La actividad fsica afecta los requerimientos energticos del individuo; sta se clasifica en actividad laboral u ocupacional y actividad social (o discrecional o de tiempo libre). La ocupacional incluye 3 tipos: trabajo ligero, moderado y pesado. Al estimar las necesidades energticas diarias, el valor de la TMB se multiplica por un factor que depende, fundamentalmente,de la actividad fsica desarrolladaporel hombre. El crecimiento, el embarazo y la lactancia son condiciones en las que se precisa de un aporte extra de energa. Los requerimientosenergicos son aportados principalmente por los glcidos y los Ipidos, y entre ambos cubren, al menos, e1 75 % de las caloras de la dieta. Los glcidos rinden como promedio 4 kcag y los Ipidos, 9. Para prevenir la cetosis es necesaria la ingestin de una cantidad mnima de glcidos, preferiblemente en forma de almidn. La ingestin de fibra vegetal es beneficiosa para el hombre, ya que disminuye el aporte calrico, combate la obesidad y previene algunas afecciones digestivas. El aporte de Ipidos no debe ser muy elevado y deben incluirse, preferiblemente, grasas de origen vegetal, ricas en cidos grasos mono y poliinsatnrados. Algunos derivados lipdicos, ciertos cidos grasos polnsatnrados y las vitaminas liposolubles constituyen requerimientos esenciales de la dieta. El ser humano tambin requiere, para su normal desarrollo y mantenimiento, de L o s aminocidos esenciales, los cuales son aportados por las protenas de la dieta Las necesidades de pmtenas dependen de diferentes factores: edad, embarazo y lactancia, entre otros. La dosis inocua de protenas se estima con el criterio de que sea suficiente para satisfacerlas necesidades de este nutriente en la mayora de la poblacin.

Los requerimientos protenicos tienen en cuenta la cantidad y calidad de las protenas. La calidad de una protena se mide por su valor biolgico. El valor biolgico de una protena es el grado de eficiencia de sta para satisfacer las necesidades del organismo. La digestibilidad es otra caractersticaimportante de las protenas, desde el punto de vista nutricional. Las vitaminas son sustancias orgnicas que no pueden ser sintetizadas por el organismo animal y deben ser aportadasenladieta. Cuando se encuentran ausentes de la dieta o cuando su absorcin es deficiente se produce una determinada enfermedad carencial. Las vitaminas hidrosolnbles incluyen a las que conforman el complejo vitamnico B, las cuales son o forman parte de cofactores enzimticos, y a la vitamina C. Las vitaminasliposolubles son las A,D, E y K. Los minerales se clasifican en macroelementos, que son aqullos cuyos requerimientos diarios exceden los 100 mg, y en oligoelementos, que se precisan en cantidades del orden de microgramos a unos pocos miligramos. Los minerales desempean mltiples funciones en el organismo, en el fenmeno osmtico, en el mantenimiento del equilibriocido-bsico,en la formacin de determinadas estructuras (huesos y dientes),y en la accin de algunas enzimas,entre otras. Se han descrito diferentes enfermedades provocadas por el dficit de algunos minerales; por 0h.a parte, en determinadascasos pueden presentarseafecciones causadas por el incremento de su concentracin,como ocurre en la hipercalcemia. El dficit de protena es la causa del kwashiorkor, enfermedad nutricional caracterizada,entre otras cosas,por retardo del crecimiento,hipoproteinemia,anemia, edemas, trastornos del desarrollo psicomotor y despigmentacin del cabello. El marasmo es un sndromeque se caracterizapor unamarcada prdida de peso, con atrofia de los tejidos muscular, subcutneo y panculo adiposo; los huesos se hacen prominentes y estn cubiertos por una capa de piel a r ~ g a d aes ; tpica lafascie senil. Se presenta por el dficit protenico-calrico,con predominio de la deficiencia energtica. Para evitar las afecciones nutricionales carenciales o por exceso y prevenir la obesidad, la arteriosclerosis y otras enfermedades crnicas no infecciosasse sugiere que la dieta se conforme con arreglo a las recomendaciones que se indican a continuacin:

1. Calcular los requerimientos energticos reales del individuo, de acuerdo con su actividad ikica. Aportar la energa necesaria para mantener un peso adecuado: en losnios segn el criterio del peso parala talla y en los adultos segn el valor del IMC, que debe estar entre 18J y 25. 2. Garantizar los requerimientosde vitaminas y minerales. 3. Cubrir los requerimientos energticos del sujetosegn la distribucin porcentual siguiente:
Lmite inferior en % Total de glcidos Glcidos complejos Azcares refinados (simples) Total de grasas Saturadas Polnsaturadas Monoinsaturadas (el resto) Protenas totales Lmite superior en %

55 50 0 15 O 3 10

Lo ideal es que la relacin entre los cidos grasas: saturados-monoinsaturados-polnsaturadossea de 1:1,5:1. 4. Tener en cuenta, adems,las restriccionesy recomendaciones siguientes: Lmite inferior Colesterol Sal Fibras Fmtas y hortalizas Lmite superior

O mg/da No definido 16 glda 400 g/da

300 mglda 6 g/da 24 glda

Leguminosas, frutos secos y semillas, 30 glda (como parte de los 400 g de fnib.5 y hortalizas). En los anexos que aparecen al final del tomo el lector podr seleccionar los alimentos que le permitan confeccionar una dieta sobre la base de esas recomendaciones.

Introduccin a la secci6n
a inclusin de esta seccin se fundamenta en 2 razones. Esta es una obra dedicada a estudiantes de profesiones de la salud, en cuyas especialidadesel a l m o experimentacierta desmotivacin e n l o s o s , cuando se enfrenta a las ciencias bsicas y se encuentra desvinculadodel campo ms concreto de la profesin, que fue lo que realmente movi sus intereses.

La bioqumica es uno de los, elementos de estas ciencias bsicas que se percibe desvinculada de la prctica de la profesin por nuestros estudiantes. La percepcin de una mayor vinculacin entre las ciencias bsicas y la clnica es deseable para nuestros estudiantes de medicina, de licenciatura en enfermera o de estomatologa.

Esta seccin persigue poner de manera cmoda y al alcance del estndianteuna bioqunica
ms claramente aplicada, donde los vnculos con el ejercicio de la profesin sean ostensibles. En segundo lugar, una seccin con estas caractersticas puede ser til para un campo amplio de profesionales, entre ellos el mdico general y el especialista clnico, que desean actualizar sus conocimientos bioqumicos de significacin prctica. En el primer captnio se tratan entidades nosolgicas en las cuales el nivel molecular, es decir, el hecho bioqumico, es lo sobresalienteen las manifestaciones de enfermedad. Estos morbos proveen una va impactante para demostrarle al lector que el carcter bsico de la bioqumica no significaque no existan reas de la medicina en las cuales

Tomado de Biochemistry. Lubert S v y e r Cuarta edicin, 1995

el hecho bioqnmico est ms directamenterelacionado y ocupa una posicin central en la patogenia. Le sigue el capitulo de las enfermedades molecnlares. Aau el hecho bioqumico, molecular determina el origen del morbo. Son entidades en las cuales la causa se halla claramente asociada a la deficiencia en la produccin de una molcula especfica, de ordinario una protena. La endocrinologa es un campo de la patologa con abundantes intereses bioqumicos y por ello incluimos un captulo con modelos de enfermedadesaor exceso o defecto en la produccin de hormonas. Como las enfermedades virales ocupan una parte importante de la patologa contempornea y los virus se han implicado en entidades tan variadas, que van desde la esquizofrenia hasta el cncer, presentamos un captuloacerca de estos denominados organelos extracelulares, en el que se le expone al lector una visin general de la virologa contemporneay, en particular, lo bsico de la bioqumica de los virns. Por ltimo, otra vertiente del vnculo de la bioqumica con la prctica clnica es su utilidad como medio a d a r de diagnstico,como ejemplo de lo cual presentamos un captulo que trata la significacinen la prctica mdica del estudio de las enzimas del suero.

Reunimos en este captulo una seleccin de 3 entidades nosolgicas, poseedoras en comn de un rasgo distintivo. En las 3 se encuentra como base, y tambin como espina dorsal de sus principales manifestaciones, un serio desarreglo metablico. Cualquiera de ellas pudo haberse agrupado en consideracin a otros aspectos, pero hemos querido comenzar esta seccin con un captulo integrado por enfermedadesen Las cuales se refleja muy claramente el vnculo que existe entre los conocimientos de la bioqunica y la prctica comn de la medicina. Si excluimos las enfermedadesmoleculares, que se tratan en el captulo siguiente, no encontraremos exponentesms apropiados del rasgo antedicho. La diabetes mellitus, la encefalopata heptica y el sndrome ictrico son procesos cuya comprensin no es posiblesm un conocimiento aceptable de las diversas reas del metabolismo intermediario. Es por ello que algunos aspectos de estas anormalidades se han mencionado en las secciones precedentes, que se ocupan de las reas metablicas correspondientes,pero aqu esos hechos se tratarn integralmente y se presentarn otros cambios bioqumicns que no se han abordadocon anterioridad.

DiabetesmeIlitus
La diabetes mellitus es el resultado de una accin insulnica insuficiente para responder plenamente a las necesidades; puede ser secundaria a diversos procesos, como la pancreatitis, el fencromocitoma, la acantosis nigricans, la glucogenosis tipo 1 y muchos ms. El estudio de la diabetes mellitus secundaria excede los marcos de este captulo; a relacin entrela enfermedad primaria y la diabetes baste dejar sentadoque no siemprel secundaria es tan simple como la que existe en la pancreatitis, en la cual la destrnccin del tejido pancretico provoca un dficit en la produccin de insulina. En la acantosis nigricaus, por ejemplo, se producen anticuerpos contra el receptor dela insulina y de esta forma se bloquea el efecto metablico de la hormona. 1 . La diabetesmellitus primaria apareceen 2 fonnas fundamentales: tipo 1y tipo 1 La diabetes tipo 1 es proclive a la descompensacin cetoacidsica y se presenta generalmente en las 2 primeras dcadas dela vida; precisade insulina exgena para su a secrecin control. Ladel tipo II responde amedicamentos por vaoral, que estimulan l de insulina endgena; no tiende a la cetosis y comienza a manifestarse despus de la cuarta dcada de la vida.

La diabetes tipo 1 tambin se denomina insullnodependiente y antes sola Ifamrseiediabetesjuvenil; la del tipo U es la noinsulinodepaidiente y se le nombraba diabetes del adulto. En realidad, ambas formas pueden aparecer en la edad que no les correspondera, de acuerdo con la antigua denominacin, aunque esto no es lo ms frecuente. La diahetes mellitus es una enfermedadmuy comn. En 1996,su prevalencia en Cuba fue de 193 por 1000 habitantes en la poblacin general, y vara por provincia desde 9 en Las Tunas hasta 33en Ciudad de La Habana.

Causas

La diabetes primaria obedece amltiples factores causales. En la diabetes tipo 1, no asociada a pancreatitis,puede encontrarse que la secrecin de insulma,en respuesta a aumentos de la glucosa en sangre, es menor que en los sujetos normales. En estos casos la deficiente accin insulnica se debe a una menor capacidad en la produccin de la hormona. La diabetes meUitns imuiinodependiente@MID) es una enfermedad autoinmune, caracterizada por la destruccin especficade las clulas beta del pncreas, la cual es mediada por la infiltracinlinfocitaria y por la accin de las clulas T. La interleucina 1B (IL-lB), una citotoxina secretada por los macrfagos en fase temprana de la ent"ermedad,se haimplicado en ladestruccin delasclulas beta. Tras la unin de la IL-1B a su receptor induce la transcripcin del ARNm de la enzima sintetasa del xido ntrico. ste se une a los centros hierro-azufre de las enzimas mitocondriales e inhibe tanto el transporte electrnico, como la actividad de la aconitasa,lo cual provoca una disminucin en la produccin de energa y, finalmente, la muerte de la clula beta de los islotes. 1la afectacin fundamental En la mayora de los pacientes con diabetes del tipo 1 se presenta en la respuesta a la insulina por parte de las clulas diana. Mltiplescausas pueden originar una respuesta deficiente,la mayora relacionadas con mutaciones en el gen del receptor de la hormona,pero tambin por defectos molecularesde eslabones posteriores en la cadena de transduccin de la seal, o por la presencia de inhibidores de la actividad enzimtica que posee el receptor. Aunque la elaboracin de la molcula de insulina es un proceso bastante complejo, desde su sntesis ribosomal en forma de pre-proinsulina, hasta su liberacin en forma activa en la sangre (Fig. 75.1), no se encuentran con frecuencia anormalidades en la molcula de esta hormona, a diferencia de lo que sucede, por ejemplo, con la hemoglobina,en la cual se han hallado varios cientos de tipos de molculas anormales. Seguramente, la produccin de una molcula de insulina defectuosa existe, pero se presenta muy pocas veces. Al igual que en la mayora de las enfermedades,por no decir que en todas, los factores ambientales pueden contribuir al establecimientode la diabetes, porque pueden propiciar la ruptura de un equilibrio endocrino frgil, mantenido a duras penas. Por supuesto, que la dieta es uno de los ms importantes; de hecho,su control mdico es un elemento decisivo en el tratamiento de la diabetes establecida. El estrs de origen emocional es el otro factor ambiental, notablemente influyente, a tal grado que con frecuencia es la causa de descompensacin de pacientes bien controlados con el tratamiento mdico. En medio de las diversascausas que, como hemos visto, pueden estar relacionadas coi1 la enfermedad, existen numerosas evidencias de que la potencialidad para desarrollarla diahetes se hereda.

Fig. 75.1. Produccin de insulina. Representacin de la molcula que es sintetizada en los ribosomas del retculo endaplarmtico rugosa (RER): la pre-pminsulina. El pptido adicional viabiliza que la protena atraviese la membrana del REU. Tan pronto como la pre-proinsulina alcazira lo lui del UER, la proinsulina se separa del pptido adicional mediante la accin de en?has proteolticas. La proinsulina progresa a lo largo del complejo de Golgi, desde la zona cis hasta la trans. Sale de las cisternas dentro de unas vesculas rceubiertas por la protena clatrina. En el interior de estos grnulos encapsulados es donde la proinsulina se convierte en insulina. Al perder la cubierta de clatrina los grnulos encapsulados se convierten en no encapsuladas. Junto al pptido C y pequeas cantidades residuales de proinsulina, la insulina se almacena en las grnulos no encapsulados maduros, lista para ser segregada por exoeitosis, en respuesta al estmulo apropiado.

Fig. 75.1. Produccin de insulina. Representacin de la molcula que es sintetizada en los ribosomas del retculo endaplarmtico rugosa (RER): la pre-pminsulina. El pptido adicional viabiliza que la protena atraviese la membrana del REU. Tan pronto como la pre-proinsulina alcazira lo lui del UER, la proinsulina se separa del pptido adicional mediante la accin de en?has proteolticas. La proinsulina progresa a lo largo del complejo de Golgi, desde la zona cis hasta la trans. Sale de las cisternas dentro de unas vesculas rceubiertas por la protena clatrina. En el interior de estos grnulos encapsulados es donde la proinsulina se convierte en insulina. Al perder la cubierta de clatrina los grnulos encapsulados se convierten en no encapsuladas. Junto al pptido C y pequeas cantidades residuales de proinsulina, la insulina se almacena en las grnulos no encapsulados maduros, lista para ser segregada por exoeitosis, en respuesta al estmulo apropiado.

Alteraciones en el metabolismo gluadico La alteracin primaria, y al mismo tiempo la ms significativa, que sobrevienepor el dficit de la accin insulnica es la dificultad en la entrada de la glucosa a los tejidos muscular y adiposo (captulo60). Como entre ambos representan ms de la mitad del peso corporal, la poca utilizacin del glcido para la sntesis del glucgeno muscular y de los triacilgliceroles en el tejido adiposo, representa la afectacin de una buena parte del destino metahlico del monosacrido. La glucosa puede penetrar en el hgado en ausencia de la insulina, pero en la diabetes la actividad de la glucoquinasaheptica est muy disminuida, mientras que la de la glucosa-6-fosfatasaaumenta mucho. Como la glucosa no penetra en los tejidos extrahepticos, ms significativos desde el punto de vista cuantitativo, y en el hgado se convierte lentamente en glucosa-6-fosfato,la degradacin de la glucosa en cido pirvico, la va de oxidacin directa, as como la sntesis de glucgeno muscular y heptico se hallan relativamenteanuladas en el diabtico. La gluconeognesis y la glucogenlisis estn estimuladas por la accin del glucagn que, adems de no contar con la accin opuesta de la insulina, se encuentra en niveles superiores al normal en la sangre de los diabticos, como consecuencia del estmulo que representa para las clulas alfa de los islotes la baja concentracin intracelular de la glucosa, lo cual obedece a que la entrada de sta a las clulas alfa es dependientede la insulina. Como consecuencia lgica de todo lo anterior, las concentraciones de la glucosa en la sangre se elevan considerablemente (hipergbmuh).La velocidad de reabsorcin tubular en el rin no alcanza a reincorporar las concentraciones aumentadas del azcar en el filtrado glomernlar y, por tanto, apareceglucosa en la orina (giucosuria). La excrecin de este soluto adicional incrementa la prdida de agua con la orina, es decir, se produce poliuna (el volumen diario de excrecin de orina sobrepasa lo normal). La deshidratacin estimula la sensacin de sed (polidipsia) y con frecuencia se exacerba el apetito (polifagia).

Implicadones en otros sectores del metabolismo La incapacidad para metabolizar la glucosa en cantidades adecuadas significa una cada en el suministro de energa en forma de ATP. La accin de las hormonas lipolticas, como el glucagn y la adrenalina, provoca la movilizacin de los cidos grasos delos depsitos.La concentracin de estas compuestosse eleva en la sangre y los tejidos se proveen de ellos con el consecuente incremento en la va de la beta oxidacin. El acetil-COA.generadoen grandes cantidades. no nuede oxidarse eficientemente en el ciclo de Krebs. El ciclo no cuenta, en estas condiciones, con el suministro de alimentadoresque necesitara para metabolizar todo el acetil-COA. Debe tomarse en consideracin que los intermediarios del metabolismo glncdico no se estn produciendo; es ms, en el hgado se utilizan en la gluconeoguesis,muy estimulada por el glucagn.Por otra parte, lasntesisheptica delos cidos grasos no se estimula en estas condiciones. Como consecuencia, el exceso de acetil-COA se deriva en el hgado hacia la formacin de cuerpos cetnicos y se produce el cuadro de la cetosis diabtica, ya tratado en los captulos 51 y 62. En esta complicacin de la diabetes es determinante la aceleracin excesiva de la beta oxidacin de los cidos grasos en el hgado. Se sabe que las enzimas de la beta oxidaiin estn presentes en CXC~SO, in cualquier rstadu nietahlin~ istiidiadu. b:I control de 13 vrb~iidsd de esta \ ia radica en i I inecanbino de rntruia de los cidui grasos a la mitocondria; una vez adentro, se oxidan. Los cidos grasas se transportan a travs de la membrana mitocondrial, unidos a la carnitina. El compuesto se forma por la accin de la enzima carnitina palmitil transferasa 1y, una vez en el interior de la mitocondria, el cido graso se transfiere de nuevo a lacaenzima A (captulo 50). En la diabetes, la oxidacin de los cidos grasos seve favorecida por una mayor actividad de la carnitina palmitil transferasa 1, que en estas condiciones de baja concentracin de malonil-COA no experimentael efecto inhibidor de este compuesto.

En algunos experimentos se ha revelado que el transporte de los cidos grasos al interior de las mitocondrias parece ser el factor determinante. Por ejemplo, alsuprimir un cuadro de cetosis mediante la administracin de insulina, si posteriormente se suministra cido oleico no se elevan los cuerpos cetnicos, pero si en su lugar se emplea el cido octanoico (penetra la mitocondria sin estar unido a la carnitina), entonces se reinstala el cuadro de cetosis, de manera que el efecto anticetognicode la insulina no opera contra el cido octanoico. Por otro lado, en animales de experimentacin se ha revertido la cetosis al emplear octanoil-camitina,que funciona . como inhibidor de la carniiina palmitil transferasa 1 Las relaciones que conducen a la cetosis no son las nicas implicacionesen otros procesosmetablicos, aparte de la de los glcidos. Se sabe que, adems de los cidos grasos libres, los triacilgliceroles y el colesterol tambin se elevan en la diabetes. El aumento de los triacilgliceroles se debe,supuestamente,a una reduccin en la actividad de la lipasade lipoprotenas,que es una enzima dependiente de la insulina. Por otra parte, lasntesis de las protenas enel hgadose restringe. En particular, hay un aumento de la sntesis de urea v tambin de la eluconeornesis. con una acentuada caotacin heptica de los precursores de la glucosa, especialmente de la alanina. La gluconeognesisacelerada reduce los donadores de metilo, como la metionina, necesarios en la sntesis de los fosfolpidos. Esto y la afectacin de la sntesis de protenas, que por su parte puede comprometerla produccin del componenteprotenico de las lipoprotenas, son causas que explican la infiltracin grasa que puede sobrevenir en el hgado diabtico.

Complicaciones a largo plazo La posibilidad, primero, desuperar la deficienciade insulina en el diabtico, al administrar la hormona, y luego el descubrimiento de los llamados hipoglicemiantes orales, que permiten mantener la glicemia delos enfermosdentro de lmites aceptables, hicieron pensar que el dao causado por esta enfermedad podra evitarse del todo. Aunque, efectivamente, ambos hechos permiten a muchos diabticos desarrollar una vida activa y prolongada, las complicacionestardas que se producen en la diabetes -lejos de desaparecer- tuvieron un auge, al aumentar la supervivencia y con ello la oporhmidad para que esas complicacioneslleguen a desarrollarse. Estas consecuencias tardas de la diabetes incluyen: hgado graso, ateroesclerosis,angioesclerosis renal, complicaciones oculares con cambios en la retina, complicaciones en la piel, alteraciones del SNC y perifrico, infeccionesy otras. En Cuba, en las edades comprendidas entre los 50 y los 64 aos, la diabetes mellitus ocupa el Sto. lugar entre las causas de muerte, superada tan solo por las enfermedades del corazn, el cncer, las enfermedades cerebrovasculares y los accidentes. Hay que reconocer que en 2 de las 4 que la superan, las enfermedades del corazn y cerebrovasculares,la propia diabetes mellitus, con frecuencia, ha sido un factor predisponente agregado. Se desconoce el mecanismo exacto por el cual se establecen los cambios antedichos en la diabetes de larga evolucin. No obstante, tras estos procesos degenerativosexisten, sin dudas, cambios bioqumicos que los estn determinando. Se ha estudiado el fenmeno de la glneosilacin no enzimtica de las protenas en la diabetes. La glucosa reacciona con protenas, por ejemplo, es capaz de unirse al grupo amino terminal de la cadena beta de la hemoglobina. Esta hemoglobina se designa AIc, es la fraccin menor ms ab!ndante de la hemoglobina en los eritrocitos y est aumentada al doble o al triple en los diabticos. La dosificacin de este derivado de la hemoglobina se utiliza como ndice del control que han mantenido los pacientes diabticosde su glicemia durante perodos prolongados. Otras muchas protenas tambin se modifican por la glucosilacin,entre ellas la del cristalino y la del colgeno. En las cataratas, la protena del cristalino forma

agregados de elevado peso molecular, que le dan la opacidad al rgano. Parece que la mayor glucosilacin de esas protenas las hace ms sensibles a los procesos deoxidacin de sus grupos sulfidrilos, lo que propicia L a formacin de los agregados en la diabetes. La glucosilacinda lugar a mltiples reacciones,que forman un grupo heterogneo de molculas ligadas a las protenas, las cuales se denominan productos finales de la glucosilacin avanzada (AGE). Se ha demostrado que los AGE ligados a protenas pueden reaccionar con el xido ntrico e inactivarlo. Esta inactivacin puede tener una funcin importante en la menor respuesta vasodilatadoraque se observa en las arterias de pacientes con diabetes mellitus, as como en la proliferacin de las clulas del msculo liso vascular y de las clulas mesangiales renales; ambas alteracionesson propias de la vasculopatay la glomerulopata diabticas. Otro cambio bioqumico importante, estudiado en relacin con las wnsecuencias de la diabetes, es la formacin de sorbitol. Tanto en el epitelio del cristalino como en los nervios perifricos,las papilas renales y los islotes de Langerhans,se ha encontrado una abundante actividad de la enzima aldosa reductasa, que cataliza la conversin de D-glucosa en sorbitol:

H-C=O l H-C-OH OH-C-H H-C-OH

1 4

NADPH NADP'

H, -C - O H l H-C-OH I OH-C-H H-C-OH

1

D-glucosa

D-glucocitol (sorbitol)

Esta enzima se ha encontradoen las localizaciones que coinciden con las reas de los procesos morbosos en la diabetes. como la formacin de cataratas. neuronata diabtica y angiosclerosis renal. Por otra parte, una tercera posibilidad plantea que la activacin de una isoforma de las quinasas de protenas C en los tejidos vasculares es el paso decisivo en la cadena que conduce a las complicaciones. Se ha comprobado que la hiperglicemia incrementael sistema de las enzimas quinasas de protenas en el msculoliso vascular y en las clulas endoteliales. Se identificla isoforma B, como la isoenzima que responde a la hiperglicemia. Hay que tener en cuenta que en el msculo Liso de los vasos, la quinasa de protenas C influye en la contractilidad, media las seales celulares iniciadas por hormonas 1 ,y altera la expresin de genes especicos. En como la vasopresina y la angiotensina 1 las clulas endoteliales la quinasa de protenas C influye en la permeabilidad, presumiblementea travs de efectos en el transporte endotelial. Otra evidencia significativa para esta ltima hiptesis es que con un inhibidor de esa qninasa de protena B, se normaliza la elevada acvidad de qninasa de protena en la retina y los riones de ratas diabticasy, simultneamente, ocurre la normalizacin de la velocidad con que el rin filtra la sangre y del flujo sanguneo en la retina (ambos estn alterados en los diabticos). En la figura 75.2 se muestra un resumen de los 3 caminos que se exploran actualmente para explicar la patogenia de las complicacionestardas del diabtico. Los 3 hechos hioqumicos observados dependen de la elevacin de la glucosa, la cual puede seguir caminos metablicosindeseables en los tejidos libremente permeables a ella. De cualauier modo.. lo aue s es seguro es aue la deficiencia de insulina v sus consecuenciasmetablicas son lo primordial en la patogenia de las complicacionesde la diabetes. Las evidencias acumuladas sealan que con un control excelente de la diabetes se evitan o retardan las complicaciones.

7 1 7
no enzimtica
.-

Hiperglicemia

--

Acumulacin de sorbitol; deplecin del mioinositol neurd

Secuestro e inactivacin de ON; proliferacin de clulas de msculo liso vascular y mesanginales renales

Alteracin de la contractilidad y respuestas homod e s en clulas de msculo liso; alteracin de la permeabilidadde "l"las endotelides

Fig. 75.2. Vas que podran conducir desde la hiperglieemia hasta las eomplicaeionea de la diabetes.ON: xido ntrico; PQC: quinasa dc protenas C.

Complicaciones de la diabetes

Encefalopata heptica
Los pacientes con una afeccin heptica aguda o crnica pueden presentar encefalopata metablica, caracterizada por trastornos variables de la conciencia, alteraciones psquicas, temblor con hiperreflexia, aumento del tono muscular y un mal aliento tpico. Los trastornos neuropsiquitricosde la encefalopata heptica no son especficos; Las alteracionesdel conocimientovm'an del letargoleve al coma profundo;son notables los cambios de la personalidad, con depresin o euforia, irritabilidad, ansiedad y rasgos paranoides, unidos a L a prdida del inters por las personas y las cosas. La funcin intelectual se trastorna variablemente,lo quesecomprueba por el deteriorode la memoria, la incapacidad de concentracin y la prdida de la capacidad para el pensamiento abitracto. El hedor heptico es un olor del aliento caracterstico: dulce, mohoso y atribuido aL a excrecin de mercaptanos, particularmente dimetilsulfuro. El signo neurolgico ms constanteen la encefalopataes un temblor aleteante de las manos, que se denomina asterkis.El aleteo es mximo si se coloca al paciente con las manos bien alejadas del cuerpo, con las muecas en hiperextensin y los dedos separados. La evoluan vara segnla causa (enpacientes con hepatitis fulminante es rpida). Laencefalopatacrnica,comolaquesedesarrolla enla cirrosis heptica,suelemejorar con el tratamiento, pero puede progresar hasta sndromes neuropsiquitricos pe-entes.

Aiteraeiones del metabolismo del amonaco en el coma hephtiw

Delos diversosfactores que tal vez contribuyena esta enfermedad,se han estudiado con mayor detenimiento los trastornos del metabolismo del amonaco. Adems del NH, que se forma a partir de las protenas y los aminocidos por el mecanismo de la desaminacin oxidativa,el amonacose forma tambin en el intestino de losmamferospor la accin de las desaminm y lasureams haderianasque degradan a los aminocidos y a la urea, respectivamente. El NH, as producido se absorbe del

intestino y contribuye de manera significativa al incremento en el cuerpo de esta sustancia potencialmentetxica. El amonaco sanguneo alcanza, por lo regular, una concentracin menor que 8,8 p M V . En los pacientes con enfermedad heptica grave ste puede llegar basta 29,4 WL". Esta hiperamonemia adquirida se debe a la insuficienciafuncionalde las clulas hepticas afectadaspara disponer del NH,, ya sea al convertirloen glutamina o mayormente en urea. Tambin contribuyen los cortocircuitosvasculares que se establecen entre el sistema portal y la circulacin general, los cuales incorporan,en forma directa, el amonaco de origen bacteriano a la circulacin sistmica. En la figura 75.3 se representan esquemticamente los factoresimplicadosen la hiperamonemia.

Fig. 75.3. Hiperamonernia de la insuiieieneia heptica. El esquema pone de relieve las causas del aumento en la concentracin del NH.: afectacin de la "reognesis hlptiea y establecimiento de cortos circuitos q i i t permitrn ;al hll 41, eirigrn inti\tind pavsrdircrtuiiiei>ien1.i rirciihci<iii&li.rnic.t.

Vena porta

de la circulacin colateral

Duodeno Kxisteii bastantis aideniias de que 1.1\H,ilrvadorn IU smgrecontnbu~c mucho a la inrrfalopata cararteristica de la iiisuliiicncia hephtiia, tantu es aci quc i%ir trastorno deiaconcienciarecihetambin el nombredeencefalopatia hepato-amoniacal.

1 "

Mecanismo de la toxicidad del amonaeo

Parece ser que elNH, afxta la funcin nerviosa superior de 2maneras distintas: la primera hiptesis que se plante tiene que ver con una influencia general en el metabolismo oxidativo del cerebro. Por otra parte, se conoce otro mecanismo. en este caso relacionado ms especficamentecon la bioqumica especial del sistema nervioso, ya que tiene que ver con la produccin de sustanciasneurotrasmisoras.

InBueucia del NH, en el metabolismo oxidativo cerebral

E1 cerebro tiene una velocidad de metabolismo oxidativo muy intensa. El encfalo consume el 25 % del total del oxgeno utilizado por el cuerpo en reposo. El sustrato oxidativo predominante en l es la glucosa; no obstante, entre los aminocidos el cido glutmico ucupaun lugar especial en el metabolismo enceflico. En laconversin del glutmico en cido aifa-cetoglutricoexiste un medio paracontrolar el metabolismo oxidativo, a travs del ciclo de Krehs. Est claro que esto puede influir, a su vez, en la utizacinde la glucosa. Una reaccin adicional de especial importanciaesla formacin del cido gamma-aminobutrico(GABA): NH, I HOOC-C-CH,-CH2COOH l H

---+ N H r C H , - C H r C H ,

COOH + CO,

El encfalo es el nico tejido que posee una actividad significativade glutmico descarboxilasa,la enzima que catatiza la formacin del ganuna-aminobutricoa partir del cido gluimico. El cido gamma-aminobutricoes un neurotrasmisor en el SNC y acta como inhibidor de la trasmisin sinptica (captulo 64). Por otra parte, la glutamina se sintetiza en el encfalo como en otros tejidos (captulo56), a partir del cido glutmico y el NH, por accin de la enzima glutamina sintetasa. Se ha planteado que en el metabolismo enceflico-durante la encefalopata heptica- el exceso de NH, resultante de la incapacidad del hgado para ejercer su funcin desintoxicante se utiliza en el cerebro para la sntesis de glutamina. En ese estado la cantidad de glutamina en la sangre venosa yugular se iucrementa de manera acentuada,lo que puede constituir un escape importante del cido glutmico para el encfalo. Cantidades adicionales del aminocido se obtienen por la accin cataltica de la L-glutmicodeshidrogenasa, a partir del cido alfa-cetoglutricoy el NH,, lo que podra Limitar el metabolismo oxidativo del rgano. a respiracin celular; entoncespuede sobrevenir El ciclo de Krebs decaera y con l l el coma, en este caso por la misma razn que el coma de hipoglicemia o hipoxia. En la figura 75.4 se ilustra el efecto de la hiperamonemia sobre el ciclo de Krebs.

glutlico
Krebs

cido glutmico

de Krebs en t Fig. 75.4. ~ Afectacin ~ i del ~ciclo ~

cido y- amino butrico Sin embargo, no parece que este mecanismo pueda explicar todos los hechos observados y, sobre todo, carece de base suficienteel significadodecisivo que se le da al cido glnimico para el metabolismooxidativodel encfalo. Actualmente ha cobrado vigencia otro ngulo de la toxicidad del amonaco, a la luz de importantes hallazgos en el metabolismo enceflico de los aminocidos.

el cerebro por la hiperamonemia. La necesidad de sintetizar la glutamina, corno forma de evaeuar el exceso de NH,, hace decaer el ciclo, debido al escape del cido alfa cetoglutrieo.

Ibxicidad del NH,y desbalance mtn?los aminocidos de cadena ramificada y los aromdtims
La entrada de los aminocidos al encfalo depende de varios sistemas transportadores,cada uno para un grupo de aniinocidosdiferentes. Los aminocidos aromticos (triptfano, tirosina y fenilalanina)y los de cadena ramificada (leucina, isolencinay vana) utilizan elmismo transportador. La salida de las grandes cantidades de glutamina quese producen comoconsecuenciade la hiperamonemia estara acoplada a la entrada en el encfalo de algunos de los aminocidos mencionados, pues ella utiliza el mismo sistema transportador. En el enfermocondaoheptico grave suele haber niveles aumentados de insulina en sangre, debido a que el compromiso de la funcin de este rgano trae consigo una disminucin en el catabolismode la hormona, cuya mayor parte se realiza en el hgado. Por otro lado, la insulina estimula la entrada y el catabolismo de los aminocidosde cadena ramificada (ACR) en el msculo. Los aminocidos aromticos (AAA) se degradan en el hgado y, por tanto, sus niveles sanguneos tienden a aumentar durante la insuficiencia heptica. En conclusin, en el enfermo heptico los AAA estn elevados en la sangre y los ACR, disminuidos, lo cual resulta en un decremento de la relacin ACRIAAA del plasma. En algunos estudios se ha puesto de manifiesto que la disminucin en este

valor (relacin normal ACRIAAA plasmticos=4) refleja con bastante fidelidad el grado de intensidad de la enfermedad heptica. Por todo lo anterior,y como consecuencia del aumento en la sntesis de glutamina por el encfaloy su necesaria salida ulterior hacia la circulacin,entran a este rgano cantidades elevadas de los AAA y se trastorna el balance de los neurotrasmisores centrales. Enla encefalopatiaestablecida como resultado de esta alteracin del transporte de aminocidos al encfalo, con la desmesurada entrada de AAA, se observa un "dramtico" incremento de la serotonina,del cido 5-hidroxindolactico(un derivado de la propia serotonina),de la octopamina y de la feniletanolamina (neurotrasmisores falsos producidos localmente en el cerebro) que reemplazan a la noradrenalina y la dopamina en el striatum Por consiguiente, la encefalopata resulta deun cambio en las disponibilidades relativas de un grupo de neurotrasmisores,el cual incluye un descenso de noradrenalina y dopamina, un aumento de indolaminas y neurotrasmisores no fisilogicosy una disminucin del GABA. En la figura 75.5 se representan los distintos factores que integran el mecanismo de toxicidaddel NH, asociado ala entrada de AAA al encfalo. Produccin excesiva de neurotransmisores derivados de AAA Entrada incrementada de aminocidos aromticos e acoplada a la salida de glutamina

Disminucin del catabolism

1-

:--..,:-m

del

i i'
I

de aminocidos ramificados

Fig. 75.5. Aminocidos aromticos y toxicidad del NH,. En la figura se agrupan, Igicamente, los hechos que conducen a la produccin excesiva de determinados neurotrasmisores.

Algunos estudios (primero en animales de experimentacin y despus en seres humanos) han demostrado una ostensible mejoraen los pacientes con encefalopata hepato-amoniacil, luego de administrarles solucionesenriquecidascon ACR. Existen varias formulaciones, entre ellas la solucin de dextrosa al 24 %,enriquecida con un 35 % de ACR.

Fadorea que pueden contribuir al establecimiento del coma heptico

Otros agentes, adems del NH,, que pueden afectar la funcin del SNC en los pacientes con enfermedadeshepticas graves son los cidos grasas, especialmente los

de cadena corta, provenientes de la dieta o del metabolismo bacteriano de las protenas y los aminocidos; ellos pueden tener efectos adversos directos sobre las membranas neuronales en las sinansis. Tambin son factores precipitantes el exceso de protenas en la dieta, la.infecciones y el estreimiento. En estos 3 casos se va a contar con mayor produccin o absorcin de NH, de origen intestinal. Por el mismo motivo, las hemorragias gastrointestinales copiosas pueden causar el inicio de un coma heptico.

Medicamentos que pueden contribuir al establecimiento del coma heptico La insuficiencia heptica tiene por consecuencia una sensibilidad particular a los medicamentos, los cuales se metabolizan fundamentalmente en el hgado; por ello, el coma puede precipitarse por el efecto de los medicamentos administrados a enfermos hepticos. ste es el caso de las antivitaminasK (captulos 63 y 73) y de los nenrolpticos como la cloropromazina, el paraldebdo, los barbitricos y otros. Los efectos del alcohol en el metabolismo heptico de las drogas son clnicamente importantes. El alcohol inhibe las enzimas que metabolizan a las drogas. Cuando el alcoholismo causa hepatitis alcohlica o cirrosis, el metabolismo de las drogas est frecuentementedeprimido y se propicia el establecimiento de la encefalopataheptica, con dosis de medicamentos que normalmente seran inocuas.

La bilirmbina es el oroducto final del catabolismo del anillo norfirnico de la hemoglobina y otras hemoproteinas. Cuando la bilirrnbina se produce en cantidades hallan defectuosos,su concentracin excesivas, ocuandolosmecanismosexcretoresse plasmtica se eleva. La ictericia o ctem es la acumulacin de este pigmento amarillo en la esclertica,las membranas mucosas y la piel, en cantidades suficientes para ser visualizado. Para su estudio, es absolutamente imprescindible que el lector domine el origen y metabolismo de la bilirrubina, tratado en el captulo 58. Debe tenerse presente, de manera especial, la connotacin de los trminos bilirrubina directa e indirecta, los cuales se refieren a la mayor o menor prontitud con que la bihbinapuede formar un compuestocoloreado, cuando es tratada con cido sulfancodiazotizado. ste es un procedimientoque se emplea comnmentepara determinarla cantidad de bilirmbiiia en el suero. La V i b i n a direcia, que es el glncurnido de bilirmbina, reacciona con rapidez por su mayor solubilidad,mientras que la bilimibina indirecta, que es la forma no conjugada al cido glucurnico,es mucho menos soluble y reacciona ms lentamente. Se sabe de antao que la ictericia se asocia tanto a desrdenes del eritrocito, como a trastornos hepticos. Aunque la produccin elevada de bilirrnbina es el nico mecanismo hematolgico que causa ictericia, las anormalidadeshepticas que pueden originarla son numerosas. El metabolismo de la bilirrnbina podemos separarlo en etapas:

1 . Formacin de la bilirrubina por catabolismo del hemo en las clulas reticuloendoteliales. 2. Transportacinen la sangre, unida a la albmina del plasma. 3. Captacin por el hepatocito. 4. Conjugacin en el retculo endoplasmtico del hepatocito. 5. Secrecinhacia los canalculos biliares. 6. Excrecin con la bilis al duodeno.

Clasificaci6n de Las icteridas Existen 2 clases de ctero.si atendemos al tino de bilirmbina oue ha aumentado predominantemente: con biiinubina no coqjugada elevada y con biiirrubina amjuzphelwada En ambospueden aparecer aumentosde las 2 formas de bilimbina, pero la alteracin pura original suele afeetara una sola de ellas,de acuerdo con la etapa del metabolismo de la bilirmbina en que se ennientra la falla.

En este ctero el bastarno puede estar localizado en cualesquiera de las 4 primeras etapas del metabolismo dela bilinubma, enumeradas con anterioridad, aunque la ms frecuente se origina en la primera etapa. Comola bilirmbina no conjugadacircula en la sangre unida a la albmina, en esta ictericia no hay presencia de bilirrubina en la orina (bilimbinuria), puesto que en el Nin normal la albmina no aparece en el filtrado glomenilar. Las cansas ms hpnientes son: la hiperproduccin de biiirmbina, los problemas en su captacin y retencin por el hepatocito y las deficiencias en la reaccin de conjugacin. En comn para todas ellas, lo cierto es que la bilirmbina producida no llega finalmente a conjugarse cn su totalidad.

Relacionados con la etapa 1del metabolismo de la bilirnibina, existen trastornos de los eritrocitos que acortan su vida media de 120 das y con ello se incrementa la produccin del pigmento. Las causas ms frecuentes son la drepanocitosis, la microesferocitosis hereditaria y las anemias hemolticas adquiridas. En las anemias megaloblsticas, la talasemia, la intoxicacin por plomo y otras, suele ocurrir la afectacin en estadios precoces, de modo que la destruccin de los reticulocitosy los eritrocitosdefeetuosostienelugar en la mdula sea, el hgado o el bazo. De cualquier forma. el resultado es el mismo. Raramente, en este ctero la bilirmbina sobrepasa los 68 N L - ' (normal = hasta 17 pWL-'1. El aumento en su produccin provoca una mayor captacin, coqjugacin y eliminacin por el hgado. como consec"encia, se notark aumento de la excrecin de urobilingenos por las heces fecales, por su coloracin ms oscura (pleymoma
~

fecal).

Los contrastes iodados y algunos antibiticos de uso restringido, como la rifampicina, pueden competir con el sistema de transporte de la bilirrubina al interior del hepatocito y cansar este tipo de ctero; sin embargo,los ms frecuentes obedecen a diversos trastornos congnitos. En el sndrome de Gilbert est afectada 1 ) . la captacin por el bepatocito (tipo 111) o la capacidad de almacenamiento(tipo 1 En ambos casos, muchas veces la hiperbilirrubinemia no es detectable clnicamente porque no sobrepasa las cifras de 60 a 70 p M C , en las que la coloracin amarilla es visible. El sndrome de Gilbert consta de mltiples variantes: el tipom corresponde al 20 % de los pacientes; otro 20 % corresponde al tipo 11; el resto presenta el tipo I, donde hay unadisminucin de la capacidad para la conjugacin de la bilirmbina, la cual se hace manifiesta debido a que se presenta un defectoasociado que consisteen la hiperproduccin de bilimbina.

La mayora de las alteracionesde laconjugacin de la bilirrubina son de causa hereditaria. En las afeccionescrnicas y agudas del hgado se ha encontrado, a pesar del mayor o menor compromiso de la funcin heptica, que la actividad de la reaccin de conjugacin es normal. En el sndrome de Gilbert tipo 1 hay disminucin de la actividad de la bilinvbina UDP-glncuroniltransferasa. Como en los otros tipos de este sndrome, la ictericia es leve. Una forma grave de hiperbirrnbinemia indirrda es el sndromede Crigler-Najjar, en el cual no sedetecta ninguna actividad de la bilirmbina UDP-glucuronil transferasa heptica. Ya en los primeros 3das de vida aparecela ictericia, con cifras superiores a los 340 p M V . Es inevitable el quernfctem, una encefalopata producida por los niveles exageradamenteelevadosde bilirmbina no conjugada en sangre, que es capaz de atravesar la barrera bematoenceflica cuando sus concentraciones superan la capacidad de saturacin de la albmina (13 ML-'). Los pacientes no sobrepasan las fases iniciales de la infancia.

Ictericias con bilirmbiaa coryryugada elevada

Estos cteros pueden tener su origen en dificultadesal nivel de las etapas 5 y 6 del metabolismo dela bilirrubina. El primer caso constituye el ctero hepato-celular y el segundo, el ctero obstrnctivo. Dado el carcter soluble de la bilirmbina conjugada, sta atraviesa el fdtro glomedar y en estos cteros puede haber bilirmbinuria, la cual le proporciona un tono ms oscuro al color de la orina, signo clnico denominado

coluria.

Los ms frecuentesson los de la hepatitis viral y las cirrosis consecutivas a sta,as como las causadas por drogas, alcohol y otros txicos. Existen, adems, alteraciones congnitas en las cuales se compromete la secrecin de la bilinvbina a los canalcnlos biliares, tales son los casos de los sndromesde Dubin-Jonhson y de Rotor. La hepatitis viral puede ser cansada por varios tipos de vims; el A y el B son los ms comunes. El primero es un vims de ARN que se trasmite por la va fecal-oral. El perodo deincubacinse extiendeentre 2 y 6 semanas;junto con los primeros sntomas se observan alteracionesde laactividad enel plannade determinadas enzimas (captulo 79). La enfermedad es leve y, a veces, asintomtica. El virus de la hepatitis B es de ADN y tiene forma bexagonal; en su centro se localiza una polimerasa de ADN y un tipo de antgeno. El virus est recubierto por una capa protenica externa, donde se halla el antigeno de superficie. El perodo de incnbacin oscila entre 6 y 12 semanas. La forma principal de trasmisin es la va parenteral por transfusiones, hemodilisis y tambin por pinchazos accidentalesdel personal mdico con agujas contaminadas. El virus de la hepatitis B no se halla en las heces ni en la orina de los enfermos; sin embargo,el antgenode snperciese halocalizadoen la saliva, elsemen, las secreciones vaginales, la leche materna y las lgrimas. Se comprende entonces que, adems de la v a parenteral,pueda propagarse por va sexual. Los virus C, D, E,F y G son menos comunes. A excepcin delE, quese trasmite por la va fecal-oral,los dems lo hacen por la va parenteral. La cifra de bilirrubina total en la hepatitis no complicada no es mayor que 170 ML", sobre todo aexpensasdela directa.La mayorade los enfermos se recupera en 1 2 meses. Un bajo por ciento de casos, especialmente en la hepatitis B, puede ver

retardada su recuperacin en 6 meses o 1ao, y otro grupo menor evoluciona hacia un tipo de hepatitis crnica progresiva. En este ltimo grupo la supervivencia es de unos 5 aos; la muerte sobreviene por una intensa insuficiencia heptica, la evolucin gradual de la cirrosis y sus complicaciones. La alteracin en estos cteros se establece en la etapa 6. Cualquier obstculo al libre flujo de la bilis entre los canalculos biliares y la desembocadura del rbol biliar en el duodeno produce colestasis. Las heces pueden tornarse plidas (hipocolia o acoa),de acuerdo con elgradode obstruccin queimpida la llegada de los pigmentos al intestino. Se observa un aumento de los cidos biliares y del colesterol en sangre, los cuales tampoco pueden eliminarse por las vas biliares. Si la lesin tiene lugar en los canalculos, la obstruccin es intraheptica. Puede deberse a la accin de drogas, hormonas esteroides y tambin como resultado de la hepatitis aguda. Las lesiones radicanen lasmembranas canalicularesy en las uniones estrechas pericanaliculares. Un problema en el transporte de aniones orgnicos de bajo peso molecular hacia el canaliculo esla alteracin presente en el sndrome de Dubin-Jonhson. Los enfermos presentan,adems de la elevacin discreta dela bilirrubinadirectaen sangre,el aumento III en la orina,debido a que el ismero de la re~ciucoproporf~rinaUcopropo~rina 1 1 1tiene mayores dificnltadesen su transporte a la bilis que el ismero 1. El hgado, a simple vista, aparece oscurecido y al microscopiomuestra depsitos de pigmentos, similares a la melanina en las clulas del parnquima. Estudios experimentales orientan que el pigmento puede ser un producto de oxidacin del ducurnido de metanefrina. metabolito de la adrenalina aue se excreta normalmente por la bilis, pero que los pacientes con este sndromeeliminan mal. El sndrome de Rotor parece ser una variante del anterior; en l no se observa la deposicin pigmentaria en el hgado y la afectacin parece radicar en la capacidad del hepatocito para retener la bilirmbina conjugada, antes de ser excretada en la bilis.

ICI'EROFUR ESTASE POSTHEP~CO DELFLUJO BILIAR

Cuando el obstculo est localizado fuera del hgado. en los conductos biliares ms gruesos se produce el ctem obs~~etivo. La ms relevante de las alteraciones en las enzimas del plasma es el aumento de la fosfatasa alcalina (captulo79). La ictericia suele ser intensa y aunque es a predominio dela bilirrubina conjugada, tambin se eleva la fraccin indirecta porque las beta-glucuronidasashsticas tienen una mayor cantidad de sustrato y producen bilirrubina no conjugada. Entre las causas ms frecuentes de ctero obstructivo se hallan el clculo del coldoco, el cncer de la cabeza del pncreas y la colecistitis aguda. La solucin del ctero es generalmente quirrgica.

Resumen
En algunas entermedades se advierte m a directamente el vinculo que existe entre la bioqunica y la medicina.En el centro de estas alteracionesse encuentra la deetsdn del n u ~ nonnal > del meabolismo. En el presente capitulo se exponen 3 ejemplos de procesos patolgicos de este tipo: la diabetes meihw, la eneefalopata hentica v el ctem. En la diabetes mellitus, por una causa u otra, existe una aeei6n insuliica con capacidadinsnticiente de responder en plena medida a las necesidades.Se distmguen 2 formas cnicas: la diabetes imuUnotependiente y la no insulinodependiente. La consenienda primaria del dficit en la accininsuliica en el organismo es la dldtad en la entrada de la glucosa a los tejidos muscular y adiposo. En el

bgado, donde la glucosa penetra libremente, la actividad de la gluwquinasa es pobre en la diabetes. Como m d t a d o de todolo anterior, la conversin de la glucosa en cido pirvicu, la va de oxidacin direca y la sntesis del gludgeno muscular y heptico se hallan relativamente anuladas en el diabtico. Por el contrario, la glucogenlisis y la glnconeognesis se estimulan por el exceso de glucagn. Por tanto, existen bipergcemis y glucosuria Esta ltimahace incrementar las prdidas de agua en la orina @oliuria), lo que puede conducir a la deshidratacin. Las hormonas lipoltiw prevalecen y determinan la movilizacinde los dddos grasos de los depsitos. Se incrementa, as, la beta oxidacin de los cidas grasos, favorecida adems porque la camiua palmiii trausferasa 1se haa libre de la inhibicin que ejerce indirectamente la ianiliaa ,sobre ella. El malonil-COA se encnentra en muy bajas concentraciones. Las grandescantidades de aceol-CoA, derivadas de la oxidacin de los cidos grasos, no pueden ser asimiladas por el ciclo de Krebs y este metabolito es derivado hada una mayor formacin de cuerpas cetniw en el hgado. As se produce la cetosis diabtica. Las complicaciones que sobrevienen en la diabetes de larga evolucin comprenden bgado graso, ateroesele&, angiderosis renal, complicaciones oculares con cambios en la retina, lesiones en la piel y alteraciones del SNC y perifrico, entre otras. Aunque la patogenia de estas complicaciones no est determinada, se cree que la gluwsilaciu no euzimtica de protehas, el aumento del D-sorbitol producido en la reduccin de la glucasa y la actividad de proteha quinasa C pudieran estarinvolucradosen las complicaciones tardas de la diabetes. La encefalopata heptica es un trastorno que aparece en las enfermedades graves del bgado. En ella hay diversos grados de afectacin de la conciencia, desde un letargo ligero basta el coma prohindo. El NH, parece ser un factor importaate en la afectacin de la funcin cerebral. Por una parte, para desembarazarse de las elevadas concentraciones de NH3, el endfalo agota sus disponib'idades de cido glutamico en la sntesis de glutamina, de manera que se hace necesario recurrir al cido alfa-cetoglutrico. Este e-scape continuo de un intermediario del ciclo de Krebs deprime esta va metablica que es uueial en el metaboUsmo aerobio del cerebro. Por otro lado, la salida de glutamina se acopla a la entrada de aminocidos aromticos, debido a que en las bepatopatas la relacin entre los niveles de aminocidos de cadena &cada y los aromticos se altera en detrimento de los primeros. La entrada excesiva de aminocidos aromticos provoca la siW de semtonina y otras sustancia6neumtrasmisor~~, que distorsionan el balance normal de &os compuestosen el SNC.
El ctero es la wlorafin amarilia de la piel y las mueosss, producida por el exceso de bilrnib'i, sta se origina en el catabolismo del bemo y sigue distintos pasos basta su normal excrecin por la bilis. Dificultades en cualesquiera de estss etapas pueden conducir a un exceso en la cantidad del pigmento circulante en la
San@re.

Los ctems se pueden agrupar en 2 grandes clases, segn predomine la elevacin de la b i i b i i no conjugada o la conjugada. Entre los primeros est el debido a hiperproducciu de la bilrnibina, como sucede en los procesos hemolticos. La insuficiente captacin de la bilrnibina por el bepatocito tambin puede ser la causa de esta clase de ctero, como en el sndrome de Gbert. Si la conjugacin de la billlnib'i es deficiente, tambin aumenta la b i i b ' m a indirecta en sangre. Esto es lo que acontece en el sndrome de Crigler-Naar, en el cual no se detecta la actividad de la enzima coujugante. El ctero con biiirrubina conjugada elevada puede deberse a interferencia6 i l i s hacia el duodeno. Es hepato-celularcuandola retencin con el flujo normal de la b

--~

se origina al nivel de los eanalculosintrahepdtim. El fctero obstnicvo e s causado i a r e s mayores. por impedimentw mecanim al flujo en las vas b Los ctem hcpato-celularesms frecuentes son los de la hepatiis y la c h i s . En trastornos congnitm, como el sndrome de Dubin-Jonbson, se produce por fallas en el transporte de la birrubha, desde el hepatocito hasta los canaculos

b i .
Los c t e m comunes ms intensos son los obstrucvos, provocados por los eleulos en el coldoco, el cncer de cabeza de pncreas y la coleeistltis aguda.

1.Mencione 3causas diferentes que puedan originar diabetes mellitus. 2. Por qu la deficiente accin insulnica origina hiperglicemia? 3. Entre los diversos factores que propician el incremento de la beta oxidacin delos cidos grasos, jcul parece ser un factor determinante, a juzgar por algunos experimentos? 4. Cules alteracionesbioqumicas podnan estar relacionadascon las complicaciones tardas de la diabetes? 5. Explique a qu se debe la hiperamonemia del enfermo heptico. 6. Cmo repercute la hiperamonemia en el metabolismo oxidativo del encfalo? 7. Explique cmo la hiperamonemia puede provocar indirectamente un trastorno en el balance normal de neurotrasmisores en el SNC. 8. Especifique,considerandolas 6 etapas del metabolismo dela birrubina, en cules de ellas una falla resulta en ictericia con bilirrubina no coniuzada elevada.. v " " en cules el aumento es predominantementede bilirrubina conjugada. 9. Cite 3 alteracionescongnitas del metabolismo de la bilirrubina que provoquen ctero y diga en qu consiste la dificultad metablica en cada caso.

En esta seccin se analizan las alteraciones metablicas que se producen en el curso de numerosas enfermedades(captulos 75 y 78), as como las alteraciones que se manifiestan a causa del disfuncionamientode las glndulas endocrinas, que repercuten de manera notable sobre el funcionamientodel metabolismo celular (cantulo77). Pero una seccin sobre aspectos bioqumicm deia patologa no estara completa si no se dedica un captulo al estudio de aquellas enfermedadescuya causa primaria radica precisamente en el aparato metablico de la clula; aqullas en las cuales todo el mecanismo patognico deriva de las alteraciones cualitativa,cuantitativa o ambas, de una molcula especfica. En las mas dcadas ha aumentado considerablementeel conocimiento sobre estas enfermedades, tanto en el nmero de las que se han descrito, como en el de aqullas en las cnales se ha podido precisar el defecto molecular. La bioqumica y la gentica molecular han desarrollado procedimientostcnicos de alta especificidad y sensibilidad, que permiten realizar el diagnstico precoz, incluso -en muchos casosen estado urenatal. como medio imnortante nara el control de estas enfermedades. Sobre la base de stos, en muchos pases -incluido el nuestro- se desarrollan programas nacionales de salud, con vistas a la eliminacin de estas enfermedades o a la reduccin de su incidencia. La exposicin de todas las enfermedades de este tipo que hoy se conocen no puede considerarsedentro de los objetivos de un texto deBioqumica; es por eso que en este captulo slo se expondr, en primer trmino, una discusin conceptual sobre el problema, y, en segundo lugar, se desarrollar el anlisis de algunas enfermedades moleculares, en las cuales sea posible evidenciar los conceptos que se discutirn a continuacin.

Fundamentos generales
En 1949, LinusPanlingy otros introdujeron en la literatura cientfica el trmino 1 1 enfermedad molecular para referirse ala sicklemia (tambin conocida como sickfe m anemia, drepanocitosis, anemia a hemates falciformes o enfermedad de Herrick). A partir de entonces, el concepto fue extendido para designar aquellas enfermedades hereditarias, en las cuales todas las manifestacionesclnicas derivan de las alteraciones cuantitativa,cualitativa o ambas de una molcula especfica, por antonomasia de una protena Esta nueva definicinincluye -como o p a c u r - q u e enfer-

medades que Archibal Garrod(1908) denominara errores congnitos del metabolismo, para el caso en que la protena alterada fuera unaenzima. De ahse deriva que la causa primaria de estas enfermedadesson alteraciones que se producen sobre el ADN celular, es decir, mutaciones. En este caso, el gen mutado debe considerarse un agente causal, lo mismo que un virus o una bacteria. Las consecuencias de estas mutaciones pueden ser diferentes,segn su extensiny localizacin. Cuando la mutacin se produce sobre un gen estructural, esto es, aqul que codifica directamente la sntesis dela protena, ocurren, por lo general, variaciones en la estructura de esa protena, que originan una modificacin dela actividad,mientras que si la alteracin afecta los genes reguladores, se producen variaciones en la cantidad de la protena sintebda. Un esquema de estas alternativasse muestra en la figura 76.1.

Zona reguladora

Zona codificante

Figura 76.1. Tipos de mutaciones pradurtaras de enfermedades moleculares. En todos los genes pueden distinguirse 2 grandes zonas: la reguladara y la codificante. En a) mutaciones en lazonarodificante afeetan generalmente la estructura del producto gnieo, aun cuando la cantidad que se produzca sea normal. Sin embargo, en b) las mutaciones en la zona regula dora provocan slteraeiones en la cantidad del wodueto eniro formado, que en la mayora de los casas es una produccin deficiente o inexistente.

Producto alterado b)

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Producto escaso o ausente Esto significa que las mutaciones pueden dar origen a protenas en las cuales exista un aumento o una disminucin de su actividad; este ltimo caso es el ms frecuente. En ocasiones se sintetizan protenas con actividad y cantidad normales, pero resultan molculas muy inestables que se degradan rpidamente. Tambin, como consecuencia de mutaciones en los genes reguladores, puede existir un aumento o una disminucin enlacantidad de protena formada; como en el caso anterior, la disminucin es lo ms comn. Por supuesto, es muy frecuente la existencia de mutaciones que no producen enfermedades y slo son descubiertas en estudios de diagnstico masivo de alguna de estas alteraciones. Recurdese que en el genoma eucarionte -entre ellos el humano- existen 2 copias de cada gen, que m p a n e l mismo locnsen cromosomashomlogos; por consiguiente, el grado de afectacin del individuo depender del nmero de genes de cada par que tenga afectado. As, cuando se habla en trminos de enfermedades moleculares, el sujeto homocigtico es aqul que posee los 2 alelos mutados y, por lo tanto, todas las molculas de protenas sintetizadas a partir de esos geues estarn alteradas; el heterocigticoser aqul que poseenn alelo mutado y el otro de tipo silvestre, por lo cual slo la mitad del producto gnico presentar la alteracibn. Cuando una alteracin se manifiesta en el heterocigtico se dice que el carcter es dominantey si slo lo hace en el homocigtico, es recesivo. El gen mutado puede localizarse tanto en los cromosomas autosmicos,como en los sexuales.

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Otra consideracin importante a tener en cuenta es que existen protenas, especialmente enzimas, que se presentan en varias formas moleculares, denominadas isoformas (como las isoenzimas), cada una de las cuales est codificada por un gen diferente. Como regla general, estas isoformas tienen una expresin diferenciada en los distintos tejidos, esto es, en cada tejido se expresa solamente una de ellas o, en ocasiones, hasta 2. Es por eso que a veces existen mutaciones que afectan el funcionamiento de una protena solamenteen un rgano y noen todos, a pesar de que la funcin de esa protena se realiza en todos los rganos, lo que explica, por ejemplo, por qu mutaciones en el gen de la glucgeno fosforilasa muscular no afectan el metabolismo del glucgeno en las clulas hepticas. Es bueno recordar que debido a los mecanismos de diferenciaciny especializacin de los organismos multicelulares,las clulas especializadas expresan un nmero limitado de genes y no todos los contenidos en el genoma. Las mutaciones que producen alteraciones en genes especficos se expresarn como trastornos en el funcionamiento slo en aquellas clulas que expresen normalmente ese gen y no en todas. De esta forma, mutaciones en el gen de la glucoquinasa podrn alterar la reaccin de fosforilacin de la glucosa solamente en el hepatocito y las clulas B de los islotes endocrinos del pncreas, que son las que expresan ese gen. El conocimiento de estos aspectos por el mdico no slo es importante desde el punto de vista terico, en el sentido de que le proporciona el fundamentodelas hterpretaciones necesarias para abordar el estudio de cada paciente, sino que tiene, adems, un valor prctico, porque permiteconocerel tipo celulara obtener, a la hora de realizar el diagnsticobioqn&o de certeza. Las protenas alteradas pueden ser estructurales, de transporte (en la sangre, a travs de membranas), agentes defensivos,agentes reguladores, receptores celulares o enzimas. Aun mando las mutaciones pueden ser de diversos tipos, las ms frecuentes suelen ser las puntuales, que producen el cambio de un aminocido por otro. Para representar estas mutaciones se ha establecidouna nomenclatura, en la cual se seala, en primer lugar, el aminocidooriginal; posteriormente, su localizacin en la cadena poiipeptdici y, por ltimo, el amiocido que aparece en esa posicin en el mutante. Los aminocidosse representan mediante el cdigo de una sola letra. As, el smbolo Q25W significa que la glutamina que ocupa la posicin 25 en la protena original ha sido sustituida por el triptfano. En las p&nas siguiCntes se analizarn un grupo de enfermedadesmoleculares, en las cuales se podrn ir ejemplificandoalgunos de los conceptos discutidos en este acpite.

Alteraciones en protehas estructurales

Las principales protehas estructurales son aqullas que forman parte del tejido con.iimtivoy especialmente la colgena, que es con mucho la protena ms abundante del organismo. Cuando existen alteraciones cualitativas o cuantitativas en protenas de este tipo, debidas a mutaciones gnicas, las manifestaciones clnicas de stas se pondrn de manifiestotanto en el homocigtico como en el heterocigtico; de ah que aparezcan personas afectadas en todas las generaciones,por lo que se dice que estas alteracionesse trasmiten como un rasgo mendeliano dominante. Si el gen cuya alteracin produce la enfermedad se encuentra en un cromosoma autosmico, entonces el patrn hereditario es del tipo autosmico dominante. Una de estas enfermedadeses el >mdrome de ~ a r f a n .

Sndromede M&
Esta enfermedadla describi inicialmente el mdico francs AntoineMarfan, en 1896. Se presenta como un trastorno generalizado del tejido conjuntivo y sus

manifestaciones clnicas principales afectan los sistemas esqueltico, ocular y cardiovascular. Los pacientes presentan extremidades largas y delgadas, de manera que la brazada es mayor que la talla. Aparecen numerosas alteracionesesquelticascomo la dolicocefaa,la aracnodaclia,e l p k s excavatum y carinahun,la escoliosis, etc. Lo ms caractersticoen el sistema ocular es la subluxacin del cristalino,debido, probablemente, a la debilidad del ligamento suspensorio del lente, lo que puede conducir a la ceguera. La debilidad de las paredes arteriales provoca la aparicin de aneurismas, especialmente en la aorta, cuya rotura suele ser la causa de muerte en muchos casos. Se observa un aumento en la excrecin urinaria de hidroxiprolina. Algunas de estas alteraciones se ilustran en la figura 76.2.

a)

c)

Fieura 76.2. Fenotim Marfan. Las mutaciones en el een de la fibrilina dan orieen al fenotioo Marfan. caracterizado oor alteraciones esauelticas.
de la aorta

Este sndromesepresenta con una frecuencia de 1,spor cada 100000 habitantes y lo ms Uamativo es que aproximadamenteel 15 % de todos los casos es motivado por mutaciones nuevas. Se trasmite como un rasgo autosmico dominante,pero con expresividad variable, es decir, no todos los pacientes desarrollan el mismo grado de gravedad. Los estudios sobre la causa del sndrome de Marfan culminaron a inicios de la dcada de los 90, cuando se pudo demostrar que se deba a mutaciones en el gen de la fibrina,loealizadoen la regin cmmosmica 15q21.1. El gen abarca una zona de 110kb y consta de 65 exones, de los cuales 60 comienzan y terminan en fase. Es curioso que de los S7 motivos EGF hay 50 codificadosen el mismo exn. Lafibriiina es uno de los componentesfibrilares menores del tejido conectivo y su distribucin en el organismo concuerda con las zonas alteradas en el sndrome. Es de destacar que la comunidad cientfica demor casi un siglo desde 1896 en que se detect por primera vez esta enfermedad, hasta 1991cuando se encontr el defecto bsico que la genera. La demostracin definitiva de que el gen de lafibrilina era el causante del sndrome de Marfan se obtuvo cuando Dietz y otros encontraron una mutacin puntual (R239P) en un paciente afectado, mientras que ninguno de sus familiares sanos la presentaba. En estndios posteriores se comprob que ms de 150cromosomasobtenidos de la poblacin general eran portadores deesa mutacin. Este cambio de arginina (R) por prolina (P) en la posicin 239 provoca alteraciones en la estructura secundaria de la protena, pues se localiza en una zona que contiene una secuencia similar a la del factor de crecimiento epidrmico (EGF)y ninguna de las protenas que contienen esa secuencia presenta la prolma en esa posicin. Subsecuentemente,se han descrito otras 7 mutaciones. En total, 6 de las mutacionesocurren en el motivo similar al EGF y en 4 de ellas son sustituidas cistinas aue. al Darecer. contribuyen al mantenimiento de estructnrassecundarias en formade hojas plegadas en esta zona. Otra mutacin consiste en la duplicacin del tetranucletico TTCA en el codon 815, que produce la aparide un codon de terminacin. Cuando el gen se transcribe y el ARNm se cin traduce,se originauna fibriiina truncada.
A ,

En ocasiones, una misma enfermedad molecular puede presentarsede formasmuy similares, pero los defectos gnicos que la ocasionan pueden ser diferentes, debido a que existen protenas que para alcanzar su estado funcional definitivo tienen que experimentarun Largo proceso de maduracin, tanto intra como extracelularmente.En todo ese largo procesamientointervienen numerosas protenas codificadas por genes especcos, cuyas mutaciones traeran como consecuencia alteraciones estmctnralesy funcionalesde la protena que se est procesando. Tal vez el ejemplo ms notorio lo sea el de L a osteognesisimperfecta,la cual se origina por alteracionesen el metabolismo del colgeno. Como puede verse en la figura 76.3, la formacin del colgeno implica,primero, la sntesisprotenica ribosomal, seguida de un primer procesamiento en el retculo endoplasmtico liso y en el aparato de Golgi, que culmina con su secrecin hacia el espacio extracelular. En este sitio las transformaciones continan hasta el proceso fmal de ensamblaje de las fbras de colgeno. En cada una de esas etapas intervienen protenas especficas, especialmente enzimas, de cuyas acciones consecutivasdepende, en ltima instancia, L a correcta formacin de las fibras colgenas y el adecuado funcionamiento del tejido conectivo. Por supuesto, que mutaciones en los genes que codifican las cadenas del colgeno pueden alterar su estructura, pero tambin puede lograrse un efecto similar con mutaciones que provoquen alteracionesen las protenas que intervienen en el procesamiento de estas molculas.

Figura 76.3. Sntesis del colgeno. El esquema -me las pasas prineipales del proceso de biosntesis del colgeno, en el cual se muestra que existen, al menos, 11 etapas distinguibles. Las alteraciones en cualquiera de ellas pueden eonducir a una alteracin funcional de la protena, que puede manifestarse con fenotipos similares. Esta situacin explica el concepto de heterogeneidad gentica.

Como en todos los casos el resultado final ser una alteracin del colgeno, exisrnmanifestaciones clnicas comunes a todas ellas, que, por lo tanto, conformarn un sndrome. Pero podrn existir manifestaciones clnicas particulares cuando se trate de un defecto o de otro, y aun cuando un sntoma o un signo aparezca siempre,ste puede manifestarse con mayor o menor gravedad, segn la naturaleza del defecto bsico. Se emplea el trmino de heterogeneidad gentica para caracterizar la causa gentica de algunas enfermedadesque -como la osteognesis imperfecta- presentan un mismo cuadro clnico, debido a mutaciones en diferentes genes.

Alteraaones en protenas de transporte

En este casodeben considerarse diferentes tipos de transporte: el quese realiza a travs de la sangre y lleva sustancias de un lugar a otro del organismo, el que se

produce a travs de capas celulares y el que se realiza a travs de las membranas celulares. Sobre el primer caso se estndiarnalgunas alteraciones de la hemoglobina y posteriormente algunos ejemplos de los otros tipos. Los trastomos debidos a Las alteraciones de la hemoglobinaconstitnyenun verdadero paradigmade las enfermedades moleculam. En esta protena se hanidentificado alteracionescualitativas, es decir, por alteracionesen su estructura, y cuantitativas, esto es, por modificaciones en la velocidad de sntesis. La estructura de la hemoglobina ya se eshidi en el captulo 63. Como consecnencia de las mutaciones se han producido ms de 600 variantes de la hemoglobina, pero no todas son patognicas, es decir, productoras de enfermedades. Todos los tipos de mutaciones qnese han descritos lo largo de este texto pueden encontrarseen algunas de esas variantes, aunque los ms frecuentesse deben al cambio de un aminocido por otro. En estos casos los efectos fisiolgicospueden entenderse teniendo en cuenta la localizacin del residuo alterado, como se resume a continuacin:

1. Cambios en los residuos superficiales. Con la excepcin de la hemoglobina S (pE6V),los cambios en los aminocidos localizadosen la superficie de la molcula no suelen tener repercusin sobre la funcin de la protena, ya que en general carecen de funcin especifica. 2. Cambios en los residuos internos. Generalmentelos rainlii% en los aminocidos que se localizan en el interior de la molcula producen ;;&n grado de desestahilizacin de la estructura molecular. Los portadores de estas hemoglobinas padecen de una anemia bemoltica, con diferentes grados de gravedad. Un ejemplode este tipo es la hemoglobina Bristol (BV67D). 3. Cambiosen residuos alrededor del hemo. Alteran el ambienteapolar que rodea al grupo hemo y propician que el Fe(U) sea oxidadoa Fe(III), al ponerse en contacto con el oxgeno. A la hemoglobina que contiene Fe(II1) se le conoce como metahemoglobina; por eso se dice que los pacientes padecen de metahemoglobinemia. Ejemplos de este tipo son la hemoglobina Boston (uH58Y) y la Milwaukee (BV67E). 4. Cambios en los residuos que participan en los contactos u-B. Limitan los cambios conformacionales uue se ooeran en la estructura cuaternaria de la protena. Si el cambio favorece la conformacin R, como en la hemoglobina Yakima (BG99H),se incrementa la afinidad de la hemoglobina por el oxgeno y, por lo tanto, disminuye la liberacin del gas en los tejidos. Sin embargo, si se favorece el estado T como en la hemoglobina Kansas (3G4T),la afinidad por el oxgeno disminuye.
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La ms sobresaliente de todas ellas es la hemoglobina S, que da origen en el estado homocigtico a la drepanocitosiso sicklemia. Fue precisamente por ella que apareci el tnnino de enfermedadmolecular.

La drepanocitosis constituye un modelo excelente de enfermedad molecular, desde los niveles de la estructura y funcin genticas, hasta el sndrome clnico final del paciente. En esta enfermedad la hemoglobina A, que es la normal de los adultos, se sustituye por la hemoglobina S, la cual se diferencia de la A en que presenta en la posicin 6 de la cadena R el aminocido valina, en tanto la A -en esa misma posicinpresenta cido glumico. Las cadenas u no presentan alteraciones. Esto significaque en una molcula de hemoglobina que posee 574 aminocidos,las hemoglobinas A y S son iguales en 572 y diferentes solamenteen 2 de ellos. Esta diferencia, mnima al parecer, es la causa de los graves trastornos que padecen las personas que llevan en su sangre solamente hemoglobina S.

Fiyra 76.4. Formacin de polmeras de la hemoglobina S. La sustitucin del glutmico par la valina en la pasicin 6 de la cadena p permite la unin de las molculas de hemoglobina cuando se encuentran desoxigenadas. La Hb S desoxigenada presenta en su superficie un pequeo bolsn hidrofbieo, capaz de alojar la valina mutante y formar polimeros, coma se muestra en el esquema.

En condicionesen las que existe un adecuado suministro de oxgeno, la hemoglobina S se comporta similar a la A, y acta como un eficaz transportador sanguneo de oxgeno; pero cuando la atmsfera es pobre en este gas, por ejemplo, en las grandes alturas, la hemoglobina S no se oxigena completamente, es decir, en su paso por los pulmones muchas de las molculas de la hemoglobina S no ligan oxgeno. La hemoglobina S desoxigenada presenta una conformacin que le permite asociarse con otras molculas de hemoglobina S desoxigenada, dando lugar largos polmeros que adoptan una estructura helicoidal, los cuales son insolubles en el citoplasma eritrocitario (Fig. 76.4). Estos largos polmeros precipitan en el interior de la clula y hacen que sta adopte la forma de una hoz, caracterstica que sirvi para denominarlos drepanocitos. Los estudios por micmscopia electrnica han revelado que estas fibras forman una especie de varilla de 22 nm de dimetro, la cual contiene 14 hebras de desoxihemoglobinaS, empaquetadashexagonabnente y enrolladas en forma helicoidal, como se muestra de manera simplificada en la figura 76.5. En estas agrupaciones la cadena lateral de la valina ocupa un pequeo bolsn hidrofbicosuperficial,ubicado en la subunidad B de otra molcula adyacente. Resub ta interesanteque esta asociacin es especfica para la valina, pues en la hemoglobina C (BE6L) no se produce. El proceso de la formacin de las fibras se favorece cuando: existe una baja presin parcial de oxgeno, las concentracionesde desoxihemoglobina S son altas o por incrementos de la temperatura. La forma de los eritrocitos es algo as como un signo de su vitalidad. Los drepanocitos,al no presentar su forma habitual, son atacados por las clulas del sistema reticuloendotelial y retirados de la circulacin; como consecuencia aparece la anemia, que es la manifestacin constante de esta enfermedad. Las manifestacionesclnicas no se presentan hasta el nal del primer ao de vida, ya que el recin nacido posee una alta concentracin de hemoglobina F, la cual va disminuyendoen la medida en que aumenta la hemoglobina A. La deformidad de los eritrocitos explica una buena parte de los sntomas de la enfermedad. Ya se seal que es la causa de la hemlisis que provoca la anemia, y secundaria a sta aparecela ictericia, por un aumento en la produccin de birnibina. Los drepanocitos tambin carecen de la elasticidad propia de los eritrocitos y cuando son llevados por la circulacin hacia un vaso de pequeo calibre, especialmente los capilares, pueden producir la obstruccin de ste, dejando sin irrigacin sangunea una zona del cuerpo, esto es, se produce un infarto. La anemia crnica y las oclnsiones vasculares provocan una gran variedad de sntomas clnicos. Se observa un deterioro de las funciones renal y heptica, lo cual

Figura 76.5. Estructuras de las fibras de desoxihemoglobina S. En medias pobres de oxgeno, la Hb S se polimeriza y da lugar a la formacin de una estructura fibdar. En a) se muestra la disposicin hexagonal de las 14 hebras que forman la fibra. En b) aparecen solamente 2 hebras donde se muestra la disposicin helicoidal de stas en la formacin de las fibras.

contribuye al desarrollo de la ictericia. El bazo, que en un inicio est agrandado, a causa de los infartos mltiples se vuelve pequeo y fibroso, y por esta razn es raramente palpable despus de los 6 aos. Hay una gran susceptibilidad a determinadas infecciones; aparecen nlceraciones, especialmente en las piernas; hay retraso del crecimiento y del desarrollo sexual; los infartos en los Iiuesos dan al esqueleto una forma caracterstica de esta enfermedad (tibia en sable, turricefalia, etc.). En la figura 76.6 se presenta un resumen de estos mecanismos. Si estos pacientes se dejan sin atencin mdica y cuidados especiales pueden morir antes de alcanzar la edad reproductiva. El diagnstico puede hacerse sellando con parafina una extensin de sangre y posteriormenteObSe~ar los drepanocitos al microscopio ptico. La electroforesis de hemoglobina puede ser til en el diagnstico del enfermo y del portador. En Cuba se est realizando el diagnsticomasivo de bemoglobinopatasen recin nacidos, por el mtodo del enfoque isoelctrico. La drepanocitosis tiene una incidencia relativamente alta en nuestra poblacin, de ah que se estn llevando a cabo varios programas parasu diagnstico masivo y, sobre todo, para la deteccin de portadores (heterocigticos)y realizar con ellos el consejo gentico. Desde hace algunos aos se cuenta, incluso, con la posibilidad del diagnstico prenatal para esta enfermedad.

Hemlisis

/ \
Anemia Ictero

Obstruccin vascular
I

Infarto

.c

i.
Dolor
Figura 76.6. Mecanismos patagnieos de la sicklemia. Al producirse la formacin de las fibras de hemoglobina

Las talasemias conforman un grupo de anemias hipocrmicas hereditarias, de diverso grado de gravedad. Los defectos genticos bsicos estn, en unos casos, en deleciones del ADN y, en otros, en trastornos de lamaduracin del ARNm, por lo cual existe una deficiencia en la sntesis de las cadenas de la hemoglobina. La manifestacin clnica ms notable es una anemia hemoltica progresiva, a partir de los 6 meses de vida. Los huesos se hacen delgados y pueden aparecer fracturas patolgicas. El bazo y el hgado estn aumentados de tamao (hepatoesplenomegalia).Hay retraso del crecimientoy rara vezse alcanza la pubertad. Las talasemias surgen como consecuencia de diferentes tipos de mutaciones que dan lugar a la aparicin de estados morbosos de gravedad clnica caracterstica.En las talasemias a' y pO la cadena identificada est ausente, mientras que en las cct y pf la sntesis est disminuida. La mayora de las talasemias de tipo a se producen por el borramiento de l o los 2 genes de la a-globina, localizados en el cromosonia 16. Al faltar lacadena a,lasotras pueden formar homotetrmeros y dar origen a la hemogloy l ) y a la hemoglobina H (M),las cuales tienen una afinidad por el O,, bina de Bart ( superior a la hemoglobina A; por esta razn se produce una deficiente liberacin de oxgeno en los tejidos. Las iakemias a' pueden presentarsecon diferentesgradas de gravedad, de acuerdo con el nmero de genes de a-globina que estn borrados. Es bueno recordar que cada cromosoma 16 contiene 2 genes para las cadenas de a-globina, pero en el cromosoma 11 slo existe un gen para la P-globina. As, en el estado de portador asintomtico slo se encuentra borrado uno de los genes, y en el llamado rasgo a-talasmico se han borrado 2. El borramiento de 3 genes da lugar a la enfermedad de hemoglohina H, con una anemiamoderada que no impide a los pacientes llevar una vida relativamente normal. Sin embargo,la ausencia de los 4 genes origina el Uamado hidropsfetalis, con carcter letal, que se manifiesta alrededor del momento del nacimiento. Las P-talaseminas,sin embargo, pocas veces se deben a borramientos de los genes de la b-globina, localizadosen el cromosoma 11.En la mayora de los casos se deben a mutaciones puntnales, de las cuales se han demostrado,al menos, 4 tipos: 1.Formacin de un codonUAG, que provoca la terminacin prematura de la cadena. 2. Alteraciones en los motivos TATA CACCC del promotor, que lo transforman en un promotor muy dbil y, por lo tanto, con muy baja frecuencia de transcripcin.

que ste adopte la forma de media luna. La alteracin de la forma es reconocida por el sistcma retieuloendotelial, que se encarga de la hemlisis. Esta hemlisis es la eausente de la anemia de los pacientes. Al destruirse grandes cantidades de Hb, se incrementa la produccin de bilirrubina que -al superar la capacidad heptica para su eliminacin -aumenta en laaangre y provoca el ctero. Por otra parte, como los drepanocitos han perdido su elasticidad, pueden dar lugar a obstrucciones vaseulares que producen zonas de infarto, las cuales en muchas ocasiones provocan dolor en los pacientes.

3. Cambios en las secuencias alrededor de los sitios de corte y empalme, que en unas ocasiones originan sitios nuevos, los cuales se usan con preferencia al normal, y en otras borran sitios normales, que obligan al uso de sitios crpticos de los exones. 4. Modificaciones de lasecuencia AAUAAA, con lo cual se producen trastornos en el procesamiento del extremo 3 4 H del ARN heterogneo nuclear, en su transformacin hacia el ARNm funcional.
En todos los casos se produce una disminucin, ms o menos marcada, de la velocidad de sntesis de las cadenas de B-globina. Si la mutacin afecta solamente a uno de los genes (hetemigtico) se habla de talasemia menor, y cuando se alteran los 2 (homocigtico), de talasemia mayor. En este acpite se ha mostrado cmo en una misma protena pueden encontrarse ejemplos de los 2 tipos de alteraciones mencionados: las alteraciones cualitativas, como es el caso de la hemoglobina S, y las alteraciones cuantitativas, como en las talasemias. Se han descrito defectos en otras protenas plasmticas que actan como transportadoras, entre ellas la albmina,las lipoprotenai, la femtina, la cemloplasmina, la transcohalamina, etc.

Alteraciones en transportadores celulares

Otro grnpo de protenas acta como transportador en diferentes rganos, a veces mediandoel paso de sustancias a travs de capas celulares, como en el rin, y otas veces el movimiento de sustancias a travs de la membrana plasmtica, permitiendo el intercambio de sustancias entre la clula y su entorno.

La fibrosis qustica es una enfermedad hereditaria que afecta principalmente los aparatos respiratorio y digestivo. Aun cuando existen reportes de nios con sntomas caractersticos de la fibrosis quistka desde la Edad Media. la primera descripcin completa de la enfermedad fue realizada por Andenon, en 1936. quien la llani fibrosis qustica del pncreas. En 1953, Di.Sant'Agnese encontr que los nios afectados presentaban una excesiva prdida de sal en el sudor. hallazgu que Ile\a la deterniinacin de electrlitosen ste, como prueba diagnstica de la enfermedad. I<II 19x3se demostr la disminucin del transporte de cloruros en los condurtos sudoriparos ) cii el epitelio respiratorio en pacientes con la enfermedad. Tambin era conocido que con frecuencia \arios mieiiihrus de tina familia eran afectados. Anlisis cuidadoso^ de rholrs geneal6girns de familias afectadas demosrrecesivo. traron que laenfermedad se tiwniite como un carcter iiiendeliano aut~wimico lo que implica que la fibrosis qustica es una enfermedad gen4tica causada por la alteracin de un locussiinple. F.1 gen fur idtmtificadi~ cii 19x9. El cuadro clnico est doniinado por la participacin del aparato respiratorio, donde la formacin de un mucu\espew? peg+joso pro\oca la obstruccin de las vas areas y propiciala posterior iiifercin,rsprcialmentc por Pwudonionriw Tambin se registran sntomas) signos dcl aparato gastr~tiritrstiiial. La ohtruccin de 10s condiirtos r\rretores drl piicrras conduce. tarde o temprano, a la insuficiencia pancretica. wii p r ~ r wcicatri~ales \ posteriores y, a la eliminacin de la hncin euocrina del ~~;iiirrew cii el85 c , de 10s pacientes. Del 5 al 10 % de los recin nacidos con fihro\ir quistica prewnta una fornia de obstruccin intestinal, llamada leo meconial. ! del 2 al 5 c pprewnta enferineddes del hgado en algn momento de la e\oluciii d i la enferniedad. lh los adultos la infertilidad es casi universal entre los honihrw !niu! frecuente entre las niu,jeres.

Como la enfermedad se trasmite de forma autosmica recesiva, los heterncigticos que conservan un alelo normal son asintomticos y se conocen como portadores. Un matrimonio de portadores tiene una probabilidad de 025 de tener un hijo afectado.La frecuencia de la enfermedad vara en los diferentes grupos tnicos (la ms alta se ha encontrado en poblaciones descendientes del norte europeo, en las cuales se calcula un valor de 1 por cada 2 500 recin nacidos). En Cuba su frecuencia se ha estimado en 1 por cada 3 862 recin nacidos. La expectativa promedio de vida es de 29 aos, aunque con cuidados especiales pueden vivir hasta alrededor de los 40. La identificacinde la protena cuya alteracin produce la fibrosis fue, durante mucho tiempo, un problema cientfico sin solucin. Una primera luzsurgi al descubrirse que el flujo de cloruros en el epitelio respitarorio, como respuesta al AMPc, estaba abolido en clulas prncedentes de pacientes con fibrosis qustica. La activacih de la protena quinasa A por el AlLlPc se produca normalmente, pero no se lograba activar el transporte del anin. Por otra parte, el uso dc niarcadi~res de ADN annimos,que segregabanjunto con el fenotipo de fibrosis qustica. se localizahan en el brazo largo del cromosoma 7. Renamientos tcnicos postiriores Ilch arnii a encontrar un gen candidato en esa zona, que seexpresaba en las glndulas sudoriparas. los pulmones y el pncreas. El gen era bastantegrande,deunos 250 000 ph, ron 27 cuones que se transcriban en un ARNm, el cual, despus de procesado, iontenia 6 500 nuclebtidos y cuya traduccin daba origen a una protena de 1 480 aminocidos. Sorpresivamente,la znna del promotor era seni+nte a la de los genes de mantenimiento, es decir, que se expresan en todos 111s tejidos. con alto contenido en G y C, ausencia del motivo TATAy varios sitios de iniciacin de la transcripcin. La prueba final de que el gen identificado era el de la fibrosis qustica fue el descubrimiento de unamutacin que difcrencialia a los si!jetos afectadosde los normales; sta consista en el borramiento de 3 pares de hases cn el exbn 10, queocasionaba la prdida del aminocido fenilalanina en la posiciiin 508, de ah la denominar de los pacientes cin AF508. Esta mutacin se encontr aproximadamente en el 70 I confibrosis quistica y nunca en persnnas normales; en Cuba su frecuenciaes de134 %. El producto protenico del gen se denominb regulador de la conductancia transmembranal de la fibrosis qustica (CFTR, *tic Ihri~sis tr-arismembrane conductance regulator) nombre algo ambiguo, dehido al desron~~cimiento de sus funciones. La expresin del gen se limita a las clulas epiteliales, donde se Incaliza en la zona apical y se transcribe a muy baja velocidad. Slo en el pncreas, las glndulas salivales, las glndulas sudorparas, el intestino y el tracto genital su expresih es relati\ amente alta. En el epitelio respiratorio su expresin es baja, pero es alta en las glndulas submucosas. El hecho de que la mutacin AF508 apareciera en el 70 % de los casos hizo sospechar que habra pocas mutacionesen el gen,idea que tuvo que ser ahandonada al detectar ms de 170. algunasde ellas en un solo individuo. De las restantes mutaciones solamente 5 tienen una frecuencia mayor que el 1 % ;ellas son (;542ter, K553ter, W1282ter, G551D y N1303K. La protena CFTR tiene un peso molecular de 170000 y est glicosilada; pertenece estructuralmente a la gran familia de protenas que actan como transportadores activos. Estas protenas tienen en comn la existencia de 1 2 dominios hidrofbicos transmembranales,cada uno de los cuales atraviesa la membrana 6 veces, y un dominio de unin a nucletidos (NBF, nucleotide bindiugfo1d)que une e hidroliza el ATP, con lo cual obtienelaenerganecesaria para el transporte. El CFTR contiene 2 de cada uno de estos dominios. Adems, posee un dominio central, rico en aminocidos con carga elctrica, y 4 residuos de serina, que sirven de sitios de fosforilacin para la protena quinasa A, y por ello se le llama dominio regulador. En la figura 76.7 se muestra un esquemadel CiTR.

Figur 76.7. Estructura del CFTR. El CFTR csunaprotcna inte~ral dela membrana, en la cual pueden distinguirse varios dominios: 2 dominios esencialmente hidrofbires que atravirsan la membrana ( 6 veces cada uno). Entre estos 2 dominios y hacia el lada citaplasmtieo se eneucntran el dominio regulador (R) y los 2 dominios dc unin a nucletidos (NBF-I > NRF-2). La protena est glico\ilada hacia el espacio extracelular.

La transfeccin con el gen del CFTR a clulas de pacientes con fibrosis qustica restablece el flujo normal de cloruros que responde al AMPc, de lo cual se puede concluir que el CFTR es un canal de cloruro, regulado por la protena quinasa A. Las serinas de las posiciones 660,737,795 y 813 son fosforiladas in vivo por la protena quinasa A y se ha observado que mutaciones en 3 de ellas no afectan la funcin del CFTR, pero cuando se mutan las 4, s. Segn el modelo ms aceptado del funcionamientodel CFTR, ste es inicialmente fosforiladoen el dominio R por la protena quinasa A, como respuesta a la elevacin de las concentraciones intracelulares de AMPc. Entonces se produce la unin a los dominiosNBF-1y NBF-2del ATP, que al hidrolizarseprovoca una transconformacin de la protena, la cual ocasiona la apertura del canal y los iones cloruro se mueven pasivamente aikvor de sugradientedeconcentracin.Por lo tanto, el CFTRno esuna bomba de iones y no existe una relacin estequiomtrica entre el nmero de iones cloruro que atraviesa la membrana y el nmero de ATP que es hidrolizado. El borramiento parcial de R origina un CFTR constitutivamente activo,sin necesidad de la protena quinasa A; por consiguiente, Rene una funcin inhibitoria en su estado no fosforilado. En la figura 76.8 se muestra un resumen del mecanismo.

Figura 76.8. Mecanismo de accin del CFTR. Activada por el AMPe, la proteda quinasa A (PK-A) fosfofila varios residuos de serina en el dominio regulador (R)del CFTR. Una vez fosforilado R, el ATPpuede unlrse a los 2 dominios NBF. La hidrlisis del ATP produce la energa necesaria para la transeon. formacin del canal que, al abrirse, permite el flujo pasivo de iones eloruras.

El transporte celular de los electrlitos es un proceso extremadamente complejo; en l intervienen numerosos canales y transportadores,cuyas acciones e interacciones son necesarias para el normal funcionamientode las clulas. Entre los factoresnecesariosse encuentran el grado de humectacin de los tejidos y la concentracin inica del espacioextracelular. E1 movimiento de los electrlitos se acompaa siempre de un movimiento de 1 transporte de cloruros,esto influye sobre el movimienagua. Al existir un defecto en e to del resto de los iones, especialmente de sodio y del agua. La poca humectacin de las secrecionesde los epitelios que rodean los conductos secretores de las glndulas exocrinasprovoca su obstrucciny crea un medio favorable para el desarrollo de infecciones, con las consiguientes lesiones, que al cicatrizar producen alteracionesestmcturales permanentes de los conductos, las cuales, -con el paso del tiempo- llevan a la eliminacin de la funcin exocrina de stos, lo que explica la situacin de los pacientes con fibrosisqustica y el origen de las manifestaciones pulmonares, sudonparas y pancreticcas. Las alteraciones del tracto genital masculino obedecen al mismo fenmeno que. en ocasiones, Ueva a la fibrosis de los conductos deferentes,esto explica la esterilidad

masculina. Las caractersticas del mucus espeso en el cuello uterino explicara los casos de esterilidad femenina. El conocimiento del defecto bsico de la fibrosis qustica abre la perspectiva del tratamiento de la enfermedad desde una nueva ptica. El empleo de inhibidores de la fosfodiesterasa, para incrementar los niveles intracelularesde AMPc, se ha ensayado con algn xito. Las membranas epiteliales contienen otros canales de clornros, diferentes del CFTR, la activacin de stos puede ser una solucin para los pacientes. La observacin de que la aplicacin del ATPo del UTPen el epitelio nasal pmvoea la aparicin de una corriente de cloruro, en pacientes con fibrosis qustica, es un dato afavor de estaidea.Por Uttimo,la donacin del gen del CETR ha hecho pensar en la posibilidad de reemplazar elgen daadopor uno normal mediante los procedimientos de la terapia gnica. Se han realizado prnebas en animales y los resultadoshan sido alentadores. Hoy en da,los anlisis del gen permiten realizar el diagnsticode certeza, incluso de la mutacin, antes y despus del nacimiento, como se hace en Cuba, en el Centro Nacional de Gentica Mdica. Como el borramiento de 3 pares de bases consecutivas es un fenmeno poco frecuente, esta mutacin AF508 debe haberse producido hace mucho tiempo y representar alguna ventaja selecva para los portadores. En verdad, el hecho de que el flujo de iones provoque un flujo simultneo de agua y que la mutacin impida ese flujo, ha hecho pensar que los pacientes presentan ventajas ante la infeccin del clera, que fue durante mucho tiempo un azote para la humanidad, especialmente en el viejo continente. Si esto es as, las poblaciones de Europa septentrional, al adquirir la mutacin, eran ms resistentes a los efectosdel clera y por ello la mutacin ha perdurado.

Alteraciones en pmteinas receptoras

Los receptores se han estudiado en varias ocasiones, a lo largo del texto. En este momento slo se tendrn en cuenta los receptores celulares que -como se ha sealadopueden estar localizados en la membrana plasmtica o ser intracelulares. Como los receptores hormonales fueron objeto de estudio en los captulos 59 y 60, se han seleccionado 2 ejemplos para las enfermedades molecularespor alteraciones de receptores: la rodopsina y el receptor de la vitamina D.

La retinosis pigmentaria es una enfermedad que afecta fundamentalmente el sistema ocular. En ella se observa una degeneracinprogresiva crnica, que consiste en la atrofia de la retina, con depsitos caractersticosde pigmentos. El cuadro clnico comienza con sntomasde ceguera noctnrna,con una creciente disminucin concntrica del campo visual y la prdida progresiva de la visin. El examen del fondo de ojo revela manehas negras en la periferia del fondo ocular, especialmente a lo largo de los vasos sanguneos,cubrindolos. Como fue estndiado en el captulo 65, la visin es un proceso complejo, en el cual intervienen numerosas protenas, cada una de ellas codificada por un gen diferente. Por lo tanto, es posible llegar a un resultado fenotpico similar por la alteracin en cualquiera de esos genes. Esta situacin se manifiesta en que, al menos desde el punto i s t a gentico, existen 3 tipos de retinosis pigmentaria, los cuales exhiben patrones de v de herencia del tipo autosmico dominante,autosmico recesivo, y recesivo ligado al cromosoma X. Incluso, en el tipo dominante parece estar involucrado ms de un gen, pues en estudios de ligamento el gen se ha localizado unas veces en el cromosoma 1y otras en el 3.

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En este momento slo se har referencia a la retinosis pigmentaria producida por mutaciones en el gen de la rodopsina, que est localizado en el cromosoma 3 y se trasmite como un carcter mendeliano autwmico dominante. La rodopsinaes una protena de 348 aminocidosy se encuentra en la membrana que forma los discos del segmento externo de los bastones; su disposicin la hace atravesar la membrana 7 veces, de modo que el extremo N terminal queda hacia el lumen del disco, y el C terminal hacia el citosol. La zona N terminal presenta glicosilaciones en las asparaginas 2 y 15. Otras modificaciones consisten en la adicin de residuos de cido palmtico en las cistinas 322 y 323, y fosforilaciones en varias serinas y treoninas en el extremo C terminal. Existe un puente disulfuro que une la cistina 110 con la 187. Est unida al 11 cis retina1 mediante una base de Schiff protonada en la lisina 296, de la cual acta como contracatin el glutmico de la posicin 113. Laretinosis pigmentaria se presenta en la poblacin con una frecuencia de 1por 4 000. E1 25 % de los pacientes con retinosis pigmentaria presenta mutaciones en el gen de la rodopsina. Se han reportado no menos de 32 mutaciones en el gen. que incluyen la delecin de los aminocidos del 68 al 71, la delecin del aminocido 255 y el cambio de una glutamina por un codon de terminacin en la posicin 344. El resto de las mutaciones son del tipo puntuales, es decir, del cambio de un aminocido por otro, por ejemplo, K296E, 6106 W, T58R, P347.3, etc. Como en la retina la zona perifhrica es rica en bastones y la central, en conos, la prdida de la visin por alteraciones de la rodopsina se va produciendo desde la periferia hacia el centro, y casi nunca llega a perderse la visin totalmente.

Raquitismo hereditario resistente a la vitamina D

En 1978, Brooks y otros encontraron un paciente con signos de deficiencia de vitamina D, pero con altos niveles plasmticos de la 1,25 dihidroxi vitamina D (1J5 (OH),D),por lo cualla denomincomo resistencia hereditaria a la vitamina D. Desde entonces, pocoms de50sujetos afectados han sido reportados, lamayora de la zona del Mediterrneo. Seha establecidoun patrn de herencia autosmico recesivo y se han identificado parientes consanguneos en el 50 % de los casos. Los heterocigticosobligados son asintomticos. La enfermedad se caracteriza por una pobre absorcin del calcio diettico, que Ueva ala hipoealcemia; un hiperparatiroidismosecundario e hipofosfatemia. Los bajos niveles de calcio y fosfato conducen a trastornos de la mineralizacin y aparece el raquitismo. E150 % de los pacientes presenta hipotricosis o alopecia completa. Otros signos son la oligodoncia y los quistes epidrmicos. Los signos de raquitismo pueden detectarsea los 2 aos. En la figura 76.9 se resumen las acciones principales de la forma bioactiva de la vitamina D. Las pmebas de laboratoriomuestran, adems de la hipoealcemia,la hipofosfatemia y el hiperparatiroidismo, una actividadincrementada de la fosfatasaalcalina del suero y especialmente niveles de 1,25 (OH),D tan elevados, que pueden ser 10 veces el nivel nonnal. La naturaleza de la resistencia perifrica a la forma hioactiva de la vitamina se ha explorado en numerosos tipos celulares. En 1998, se identific en 7 familias una mutacin en el gen del receptor de la 125(OH),D, que originaba un codon de terminacin en el exn 7, dentro del dominio de unin a los esteroides en el receptor. Posteriormente, se han descubierto otras mutaciones. La forma hioactiva de la vitamina D, una vez unida al receptor, induce en el intestino la sntesis de una protena fijadora de calcio, que intervieneen el mecanismo de su absorcin. La ausencia de esa protena determina los bajos niveles de absorcin de calcio,con laconsiguiente hipoealcemia. sta, a su vez, estimula la secrecin de la paratohormona y provoca el hiperparatiroidismosecundario.

Figura 76.9. Efectos de la vitamina D sobre el movimiento del calcio. La vitamina D,en su forma activa de 1,25dihidruxi-vitamina D, contribuye a la regulaeibn de la concentracin de los iones de Ca" en la sangre, b que se debe a que este eompuesto aumenta la absorcin intestinal de calcio, as como la reabsorcin de este catin en el rin. Por otra parte, la vitamina contribuye al deprito de caleio en el tejido seo. Al faltar el receptor para la vitamina, estas acciones dejan de producirse y rondueen a la Iiipocaleemia y a la desmineralizaein del tejido seo, rasgos caractersticos del raquitismo hereditario, resistente a la vitamina D.

La paratohormona favorece la excrecin renal de fosfato,por lo cual se produce la hipofosfatemia. Estos 3 factores combinados (hipocalcemia, hipofosfatemia e hiperparatimidismo) estimulan la actividad de la 1-mhidroxiiasarenal, que catalii la conversin de la 25-OH-vitamina D en 12.5 (OH),D, lo que explica los niveles elevados de este compuesto. Los pacientesmueren en la primera infancia, si no reciben tratamiento.La administracin de altas dosis de calcio y de calciferol para estimular la sntesis del 1,25 (OH),D ,especialmente por va endovenosa, pueden corregir los defectos metablicos, sobre todo en los pacientes sin trastornos del pelo. Los foliculospilosos tienen una alta expresin del receptor para la vitamina D, aunque la patognesis de la alopecia se desconoce. Existe otra entidad nosolgica con un cuadro clnico similar, llamada raquitismo hereditario de tipo 1, por una deficiencia de la enzima 1-a-hidroxilasarenal. El diagnstico diferencial puede hacerse por la determinacin plasmtica del 125 (OH),D que -comose vio- en la deficiencia del receptor su concentracinest muy elevada, y en la de la enzima, muy baja.

Errores congnitos del metabolismo

Los errores congnitos del metabolismo son aquellas enfermedadesmoleculares en las cuales la protena afectada es una enzima. En muchos casos se desconoce si el defecto enzimticose debe a que la enzima est alterada estnieturalmente, y por ello carece de actividad, o si es que no se sintetiza en las cantidades suficientes.

Caracterlsocna generales
Las enzimas catalizan reacciones del metabolismo y su ausencia determina la formacin de un bloqueo en esa reaccin. Este bloqueo puede dar lugar a la aparicin de manifestacionesclnicas por alguno de los mecanismos siguientes:
1.La ausencia del producto de la reaccin o de algn otro que se produce con posterioridad al punto de bloqueo.

2. La acumulacin del sustrato o de alguno de sus precursores, que, en concentraciones elevadas. pueden tener carcter txico. 3. La actividad incrementada devas secundarias, que normalmente funcionan a muy baja velocidad, pero se ven estimuladas al aumentar considerablemente la concentracin del sustrato.
Estas 3 situacionesse resumen en la figura 76.10.

Figura 76.10. Mecanismo patognico de los errores congnitos del metabolismo. En rj se representa una reaccin enzhtiea normal, donde un sustrato se transforma en producto (l),aunque existe una va alternativa que funciona a muy baja velocidad (2). En bj se ha producido el bloqueo de la reaccin (l), por la alteracin funcional de la enzima. Los sntomas de la enfermedad se deben a uno o ms de los factores siguiente: la an~encia del producto, la acumulacin del sustrato o la aparicin dealtas concentraciones del producto secundaria.

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a)
Deben distinguirse las enzimopaias verdaderascon los retardos en la maduracin de algunos sistemas enzimticos, cuyas manifestaciones desaparecen poco tiempo despus del nacimiento, como es el caso de la ictericia del recin nacido, provocada por el retardo en la maduracin de la glucuronil-transferasaheptica. Una de las manifestaciones clnicas ms frecuente y grave de los errores congnitos del metabolismo es el retardo mental, que puede ser extremadamente marcado, por lo que debe tratarse, siempre que se pueda, de realizar el diagnstico y comenzar el tratamiento precozmente. En caso de no existir tratamiento puede intentarse el diagnstico prenatal, con el objetivo de poner en conocimiento de la pareja toda la informacinnecesaria para que pueda tomar la decisin que entienda ms adecuada,sin que el mdico interfiera en sta. El respeto a la determinacinde la pareja en cuanto a qu debe hacer con su embarazo es una norma importante de la tica mdica eontempornm

E r r o r e s eonghitoa:del metabosmo de los gleidos

Numerosos son los dficits enzimticos descritos en el rea del metabolismo de los glcidos, de los cualesslo se estudiarn algunos relacionados con el metabolismo de la galactosa y del glucgeno.

En el captulo 43 se mostr que el metabolismo de la galactosa consta, en esencia, de 3 reacciones enzimticamentecatalizadas: 1) la galactosa es fosforiladaa expensas del ATP a galactosa-l-fosfato, por accin de la galactoquinasa; 2) la galactosa-lfosfatoreacciona con la UDP-glucosa y se forma UDP-galactosay glucosa-l-fosfato, por accin de la galactosa-l-fosfatouridil transferasa y 3) la UDP- galactosa se con-

vierte en UDP-glucosa, por la accin de la UDP-galactosa 4- ephnerasa, enzima que contiene NAD' firmementeunido. Se han descrito deficiencias de las 3 enzimas. La deficiencia de galactoquinasa,descrita por primera vez por GitzeJmann(19651, origina una forma moderada de galactosemia con galactosuria y cataratas, pero sin retraso mental ni aminoaciduria. Lascataratas comienzan aformarse despus del nadmiento, por la ingestin de la lactosa de la leche. Generalmente, el diagnstico causal de la catarata se hace tardamente,cuando sta ya es irreversible. La galactosuria, que aparece como una consecuencia de los elevados niveles de galactosa en sangre, debe diagnosticarse por una determinacin enzimtica especfica. El diagnsticodefinitivodela enfermedadsehace dosificando la enzima en eritrocitos. Esta enfermedad se hereda como un rasgo autosmicorecesivo y tiene una incidencia de alrededor de 1por cada 40 000 nacimientos. La galadosernia clsicafue descrita inicialmente por Rew(l908) y fue Kalckar (1956) quien estableci que se trataba de una deficiencia de la galactosa-l-fosfato uridil transferasa. Es una enfermedad grave, cuyos sntomas son precoces, e incluso, pueden desarrollarseintratero. La enfermedad puede sospecharse en recin nacidos o nios mayores con cualquiera de los signos siguientes: ictericia, hepatomegalia,vmitos, hipoglicemia, convulsiones, letargo, irritabilidad, dificultades para la alimentacin, poco aumento de peso, aminoadduria,cataratas,cinusisheptica, ascis, esplenomegaliay retrasomental. Si se demora el diagnstico, y por lo tanto el tratamiento, la cirrosis heptica y el retraso mental se hacen irreversibles. La ausenciade la enzima provoca un aumento en la concentracin de la galactosal-fosfato que resulta muy txico, especialmente para el hgado y el SNC. Tambin se produce un aumento en la reaccin de reduccin de la galactosa y se forma el polialcohol galactitol, que provoca un incremento en la captacin de agua por el cristalino, lo que da origen a la formacin de cataratas. Tambin hay oxidacin de galactosa a cido galacturnico, que se elimina por la orina. Las principales alteracionesmetablicas se resumen en la figura 76.11.

HOCH,

H O H @ o H
H OH a-D- galactosa

HOCH,

HOCH,

0-8 -M

@ ,H : o
H OH a-D- glucosa-l- @

H OH a-D- galactosa-l- @

Ei-C-OH H+OH HO-7-H HO-7-H H-C-OH

H-c-OH 1
H
galactitol La existencia de estos 2 errores confirma el carcter txico de la galactosa-lfosfato (o algn producto derivado),pues en la deficiencia de galactoquinasa, donde nose forma la galactosa-l-fosfato,no aparecen la mayora de los sntomas descritos. El diagnstico bioqumico de certeza puede hacerse por la dosificacin de la enzima en eritrocitos. Deben evitarse las pruebas de sobrecarga de galactosa, pues la

Figura 76.11. Alteraciones metablicas cn la galactosemia. La ausencia de la galactoquinasa (1) provaea solamente un aumento en las cancentraciones plasmticas de galactusa y un incremento en la formacin del galactitol que, al acumularse en el cristalino, produce las eataratas. Al faltar la galactosa uridil transferasa(2)se acumula,adems, la galaetosa-l-fasfato que a altas concentraciones es hepatotxica y al parecer es el compuesta responsable de la gravedad de esta enfermedad.

galactosa-1-fosfatoacta como un inhibidor competitivo de la fosfoglucomutasay, por ende, de la glucogenlisis, lo cual provoca la aparicin de hipoglicemia, que, aunque transitoria, puede llegar a ser grave. El diagnhtico prenatal es posible mediante la dosificacin de la enzima en clulas cultivadasde lquido amnitico. La enfermedad se trasmite como un rasgo autosmico recesivo y su incidencia aproximada es de 1por cada 50 000 nacimientos. La deficienciade UDP-galactosa -4 - epimerasa es un hallazgo de laboratorio en estudios masivos para el diagnstico de galactosemia y no presenta manifestaciones clnicas.

Las glucogenosis constituyen un grupo de alteraciones del metabolismo del glucgeno, las cuales se producen por una acumulacin de este polisacrido en los tejidos, especialmente el heptico y el muscular. La primera de estas entidades fue descrita por Edgar von Gierke, en 1929,y el defecto enzimticofue establecido por los Cori. en 1952: ste fue el ~ r i m eerror r congnito del metabolismo une tuvo un diacnstico enzimticode certeza. Desde entonces se han descrito ms de una docena de alteracionesdel metabolismo del glucgeno, las cuales se distinguen sobre la base de sus caractersticas clnicas, en losdefectos enzimticosidentificados, o en ambos. El metabolismo del glucgeno ya fue estudiado en el captulo 43. La glucogenosis tipo 1 (enfermedad de von Gierke) se debe a la ausencia en hgado, rin e intestino de la enzima glucosa-6-fosfatasa.La deficiencia de la enzima entorpece la degradacin del glucgeno y, por consiguiente, ste se acumula en la clula y puede visualizarse en estudios hitolgicos. A diferenciade otras glucogenosis, la estructura del glucgeno no est alterada. La deficiencia de la enzima impide la conversin de glucosa-6-fosfatoa glucosa y el paso de sta a la sangre, con lo cual se produce una hipoglicemia sostenida, que no responde a la administracinde glucagn o de adrenalina. En el hgado, el exceso de glucosad-fosfatoproduce un aumento dela gluclisis, con salida a la sangre decantidadesanormalmente elevadas de cidos lctico y pi~vico, que pueden conducir a la aparicin de una acidosis Ictica. Existe un aumento de la utilizacin de los Ipidos con hiperlipemia, que puede dar lugar a la formacin de xantomas cutneos. El incremento en la utilizacin de los Ipidos y la deficiencia en el metabolismo de los glcidos provocan un aumento de la sntesis de cuerpos cetnicos y de su concentracin en sangre,lo que puede llevar -en algunos casos- a un cuadro de cetosis. Los nios presentan una notable hepatomegalia, con distensin abdominal. Un hallazgo interesante es el aumento de la produccin de cidoricocon hiperuncemia, pudiendo desarrollarse gota y clculos renales. El tratamiento de eleccin es la ingestin de glcidos cada 3 4 h para evitar la hipoglicemia.En losniosdebe administrarsepor sondanasog&tricadurantela noche. La enfermedad de von Gierke se hereda como un rasgo autosmico recesivo y presenta una incidencia de 1por cada 200 000 nacimientos. No existe la posibilidad de diagnstico prenatal. Laglucogenosis tipo V (enfermedadde McArdle) fue descrita por este autor en 1951 y se debe a la deficiencia de actividad de la glucgeno fosforilasa muscular. Generalmente, comienza a manifestarseen la adolescencia por dolor y rigidez musculares durante la realizacin de esfuerzos&icos, que de ser muy intensos pueden originar mioglobinuria. Los gmpos musculares ejercitados suelen ponerse tumefactos. Ms tarde se desarrolia una debilidad muscular crnica. La ausencia de la fosforilasa impide la degradacin del glucgeno muscular durante el ejercicio fisico, que es cuando elmsculorealmente lo utiliza, lo que provoca el causantede lasmanifestaciones un dficit en lapmduccindeene~'am~~~ular,quees

clnicas. El tratamiento consiste en evitar la actividad tlsica intensa. Es una enfermedad rara que se trasmite como carcter autosmico recesivo. Se han descrito 2 variedades: una donde falta la protena enzimtica y otra donde aparece una enzima inactiva. El diagnstico prenatal no es posible. Estos 2 defectos son muy interesantes porque muestran cmo alteraciones metahlicas similarespueden manifestarse de forma tan diferente: una comoenfermedad grave, y la otra, un defecto tolerable. Desde el punto de vista de los estudios bsicos, stos demuestran, por una parte, que la funcin principal de la glucogenlisis heptica es el mantenimiento de la glicemia y que la degradacin del glucgeno muscular no es imprescindible para la vida.

Errores eonghiioa del metabolismo de los ipidos

La variedad estructural y la diversidad funcional de los compuestos lipdicos hacen que en esta rea del metabolismo se describa un elevado nmero de defectos enzimticos; casi todos originan enfermedadespor almacenamiento excesivo y afectan principalmenteal SNC.

Las esfingolipidosisson un gmpo de enfermedadescaracterizadasmolecularmente por un dficit en alguna de la enzimas del catabolismo de los esfingolpidos. Todas ellas son hidrolasas lisosomales, que tienen un complejo proceso de sntesis y direccionamiento.Generalmente, el defectoprovoca que las enzimas no lleguen a los Lisosomas, sino que queden atrapadas en el aparato de Golgi, donde son degradadas. Los genes para estas enzimas no presentan secuencias tpicas de localizacin lisosomal, pues otras protenas con funciones similares,pero con otra localizacin, presentan estructuras gnicas semejantes. Como los genes se expresan en todos los tejidos son del tipo de mantenimiento y, por lo tanto, carecen del motivo TATA y contienen una zona rica en G y C, con un posiblesitio para el factor de transcricpin SP-1:slo se excepta la glncocerebrosidasa, que, al tener expresin diferencialen los tejidos, s presenta el motivo TATA y carece de la zona rica en G y C. Por la heterogeneidad clnica de estos defectos, se sospecha que existan varios genes mutantes y que los enfermos ms que homocigticos para un alelo mutado sean heterocigticos compuestos, es decir, presentan 2 alelos mutados. Clnicamente,todas estas enfermedades se caracterizanpor trastornos graves del SNC y la muerte en la primera dhcada de la vida. Los estudios anatomopatolgicos revelan la acuniulacin de esfingolpidosen las clulas, sobre todo en las neuronas. Los ejemplos seleccionados para su estudio en este texto son la enfermedad Tay Sachs y la Gaucher. En la figura 76.12 se presenta un resumen del metabolismo de los esfingolpidosy se sealan los defectos enzimticosms sobresalientes.

E1 metabolismo de los ganglisidos ya se estudi en el captulo 58. Estos compuestos se encuentran en altas concentracionesen el SNC, especialmenteen la materia gris, donde constituyen el 6 % de todos los Ipidos. El catabolismo ocurre en los Lisosomas, y las hidrolasas que participan en l son enzima de muy alta especificidad. En esta enfermedad la enzima deficiente es la hexosaminidasa A, lacual bidroliza el enlace glicosdico que une la N-acetil-galactosamina terminal del ganglisido GM2 y lo convierte en el GM,. El resultado del dficit enzimtico es la acumulacin del ganglisido GM,, principalmente en el SNC.

' GM, gangliosidosis 'T

1
Tay Sachs

-!

Sandnoff

Cer
Fabry

SO3

'..~$&+,
11
Esfingomielina

.%&*J..

Cer

+ :

ter

.i Gaucher

1. 1

p,Cer

Leucodistrofia metacromtica

Nieman-Pick

t y -

Krahbe

4
Esfingosina

cido graso

&z&ic.= ~l~~~~~
.

,?,t.:.,' a ? .I.S> = N-acetil galactosamina

N= Enlace P-glicosdico
Cer = Ceramida

= Galactosa

= cido N-acetilneuramnico

U = Enlace a-glicosdico

Figura 76.12. Esfingolipidosis. Se muestra un resumen del metabolismo de los esfingolpidos y se sealan los puntos de bloqueo mebblico par la deficiencia de algunas de la enzimas que participan en el proceso. En cada caso se seala la enfermedad que se produce como consecuencia del bloquea.

Los recin nacidos parecen normales, pero alrededor de los 6 meses comienzan a presentar apata, hipotona muscular y retraso en el desarrollo psicomotor y, sobre todo, una exagerada respuesta a los ruidos, que generalmente es lo que motiva la intervencin del mdico. Al examen fsico se observa una mancha rojo cereza en la retina. La enfermedadprogresa rpidamente con retraso psbmotor, ceguera entre los 12 y 18 meses, y aparicin de convulsiones. El desarrollo exagerado de las glas produce macrocefalia. La muerte sobreviene a los 3 aos o antes. Aunque la enfermedad se hadescrito en todos los grupos inicos, es ms frecuente en los judos de Europa oriental (Ashkenazi),donde la frecuencia de portadores es, aproximadamente, 1de cada 30, mientras que en el resto de las poblaciones es de 1cada 300.

Varias son las mutaciones encontradas en el gen dela hexosaminidasa A, asociada al fenotipo Tay Sachs. La delecin del exn 1y de las secuencias que lo flanquean es frecuenteentre los canadiensesfranceses. La sustitucin de una base en el sitio de corte y empalme del intrn 12 que interfiere con el procesamiento del ARNhn y la insercin 1auenroduce una terminacin nrematura v un ARNm de 4 nucletidos en el exn 1 * inestableson hallazgos frecnentes en los judos Ashkenazi. Otras mutaciones puntnales han sido reportadas igualmente.La gravedad de la enfermedad depende, en gran medida, delas caracteristicas delos alelosmutados, queson menos graves en aquellos casos que presentan una actividad enzimtica residual. La enfermedad de Tay Sachs puede diagnosticarse en el perodo prenatal, por dosificacin de la hexosaminidasa A en clulas cultivadas de lquido amnitico. El conocimiento de los aspectos bsicos de la bioqumica ha permitido el diseno de una prueba para el diagnstico de esta enfermedad. Para ello, se utiliza un sustrato arfique cuando se bidroliza por accid, el 4-metilumbeliferil-B-D-N-acetilgliieos~a, cin de la enzima genera un producto fluorescente. Pero este sustrato tambin es reconocido por la hexosaminidasa B, cuya actividad es normal en los pacientes con la enfermedad La distincin entre las 2 ennmas se hace gracias a un conocimiento bsico. Se sabe que la hexosaminidasa A es ms resistente al calor que la B; por eso, la preparacin para la dosificacin de la enzima se calienta previamente, con el propsito de eliminar la forma B y que al aadir el sustratoarficial sloest p m n t e la forma A. En l a figura 76.13 aparece un esquema de la reaccin.
A

NH I C =o
1

CH3 4-metilumbeliferil-P-I)-Nacetilglucosamina

4-metilumbeliferona (fluorescente)

Figura 76.13. Prueba diagnstica de la enfermedad de Tay Sachs. El compuesto que se utiliza como sustrato no es fluorescente, pero al separarse de la N-aeetil glucosamina par la accin de la hexosaminidasa A, uno de los productos tiene carcter fluorescente. Esta reaccin permite determinar la ausencia de la enzima y por lo tanto a los pacientes que padecen la enfermedad de Tay Sachs. Puede hacerse en clulas cultivadas, obtenidas del lquido amnitico.

ste es un ejemplo claro de las alteraciones debidas a la acumulacin de un sustrato.

Esta enfermedad se origina por un dficiten la enzima glucocerebrosidasa,con la consiguiente acumulacin intracelular de glucocerebrsidos;se describipor primera vez en 1882, pero no fue hasta 1934 que se identific el material acumulado y slo en

1965 se pudo conocer el defecto enzimtico; es la ms comn de las enfermedades lisosomales. Se manifiesta en 3 formas clnicas principales: el tipo 1adulto,crnico o 1neuroptico agudo infantil y el tipo 111neuroptico subagudo no neuroptico;el tipo 1 o juvenil. El tipo adulto se caracteriza por el agrandamiento del hgado y del bazo, as como por lesiones seas que pueden ser dolorosas. En la forma infantil los trastornos del SNC son muy marcados. El diagnstico de certeza se realiza por la aspiracin de la mdula sea, donde existen las llamadas clulas Gaucher, que son histiocitos fnsiformes de 15 a 85 pm, con uno o ms ncleos pequeos, situados de forma excntrica. El citoplasma se tie de azul dandoel aspectode seda arrugada, que lo distinguede otras lipidosis. El gen de la glucocerebrosidasa se localiza en el cromosoma 1 y consta de 11 exona; el sitio activo de la enzima est codificadoen el exon 10. Este gen se transcribe en un ARNhn de7 250 nucleticos, que despus de procesado y traducido da lugar a una enzima de aproximadamente 60 kD. Las mutaciones encontradas en l son varias y estn asociadas al fenotipo Gancher. Es interesante el hecho de que, al menos en algunos casos,esds mutacionesestn correlacionadascon el tipo de enfermedad. As, la L444P est regularmenteasociada a la forma infantil aguda neuronoptica,mientras que la N370S se asocia a los casos ms moderados. Es muy probable queel conocimiento de la estructura del gen pueda contribuir -en los prximos aos- a disear medios teraputicos ms efkaces que los actuales para el tratamientode la enfermedad, especialmenteen la infantil aguda, la cual provoca la muerte antes de los 10 aos de vida.

Errores congnitos del metabolismo de los compuestos nitrogeoados

de bajo peso molecular Esta es el rea metablica donde se ha encontrado el mayor nmero de defectos enzimticos, debido a la gran diversidad estmctural de los compuestosy a lo complejo de las vas anablicas y catablicas. Baste decir que slo en lo que se refiere a los aminocidos, para cada uno de ellos se han descritos 3 4 errores congnitos del metabolismo.

Es un trastorno del metabolismo de la fenilalanina, que tiene una incidencia aproximada de 1 por 14 000 nacimientos y se debe a la ausencia de actividad de la enzima fenilalarha-hidroxilasaheptica, cuya funcin es la conversin de fenilalanina en tirosina. El nio no tratado presenta (hacia los 4 meses) evidencia de retraso en el desarrollo cerebral, que puede conducir a la microcefalia. Posteriormente aparece el retraso mental, de moderado a grave. Estos nios tienen la piel, los ojos y el pelo ms claros que sus familiares,cierto olor a almizcle y tendencia a lesiones cutneas. Aproximadamente un tercio presenta crisis convulsivas. Muchos de ellos tienen hipertonicidad o son hiperactivos. El diagnstico debe hacerse alrededor de los 7 das de nacido, pues antes los niveles de fenilalanina en sangre pudieran ser normales. En Cuba se emplea para el estudio masivo la prueba de Guthrie, de inhibicin del crecimiento bacteriano y a los casos positivos se les dosifica fenilalanina y tirosina en sangre, en un programa masivo de deteccin y tratamiento de la fenilcetonuria que lleva adelante el Centro Nacional de Gentica Mdica. Le deticiencia de fenilalanina-hidroxilasaevita la conversin de fenilalaninaen tirosina, reaccin inicial de su catahulismo,y provoca un aumento de la concentracin

de fenilalanina en todos los lquidos corporales; esto estimula la fenilalanina aminotransferasa que produce cido fenilpirvico y a partir de ste, fenilctico y fenilactico (cuya excrecin provoca el olor caracterstico). Tambin tiene lugar la descarboxilaunde la fenilalanina a feniietamina.La fenildanina inhibe la tirosinasa y por eso disminuye la formacin de melanina. El mecanismo por el cual se produce el retraso mental es desconocido. En la figura 76.14 se muestra un resumen de las alteraciones metablicas.

COOH COOH 1 H2N- C - H 4 H,N- - H 4Melanina

l l

Fenilalanina

l
1

OH Tirosina

K; (7
c =o 1
1

COOH

H-EOH
Figura 76.14. Alteraciones metablicas en la fenilcetonuria. La fenilalanina es precursora de la sntesis de tirosina y sta, as" vez,de la metionina. Al estar bloqueada la reaccin falta la tirosina y por ende la melanina lo que explica los signos de despigmentacin parcial de los pacientes. El cmulo de fenilalanina estimula vas metablicas secundarias con la formacin de cidos fenlieos que se crcretan por la orina. El mecanismo de producfin del retraso mental an permanece sin esclareeene.

COOH

cido fenilpirvico

cido fenilctico

l i
COOH

cido fenilactico La fenilcetonuria se trasmite como un rasgo autosmico recesivo y la frecuencia de portadores es de 1por 60 habitantes. El diagnsticoprenatal noes posible. El tratamiento est encaminado a evitar la aparicin del retraso mental y para eUo se utilizan dietas pobres en fenilalanina, las cuales deben Uevarse rigurosamentehasta que se complete el desarrollo del sistema nervioso. En este caso las manifestaciones clnicas se deben al cmulo del sustrato, a la falta del producto y al incremento de las vas secundarias.

La fosfo-ribosil-pirofosfatosintetasa es la enzima que cataliza la reaccin de la ribosa-5-fosfato y el ATPcon la formacin de fosfo-ribosil-pirofosfatoy AME El fosforibosil-pirofosfatoas formado es sushato de la amidotransferasaparala formacin de ribosil-amina que inicia la sntesisde nncletidospurnieos. La fosfo-ribosil-pirofosfato sintetasa es la enzima reguladora de esta va. La sntesis de nncleticos pirimidnicos y las vas de recuperacin de bases tambin utilizan el fosfo-ribosil-pirofosfato (captulo 57).

La anormalidad en la actividad de la fosfo-ribosil-pirofosfatosintetasa se descubri en pacientes con gota, por la superproduccin de cido rico. Tanto los hemaies como los fibroblastoscultivados de 2he&inos con esta enfermedad presentaban nna actividad de esta enzima, que era 3 veces la de los controles sanos u otros pacientes con gota, con produccin elevada de cido rico. Otras enzimas dela sntesisde purinas eran normales. Los estudios moleculares demostraron que se trataba de la sntesis de una enzima con alteraciones estructnrales que tenan una actividad especficaaumentada. La can3a 3 veces la normal. tidad de enzima era similar a la norma1,pero la actividad era de 2 La enzima tiene una movilidad electroforticadiferente de la normal. Esta alteracin se trasmite como un rasgo recesivo, ligado al cromosoma X.

Errores latentes
Bajo este ttulo sedescribe un defecto, aunque existen otros, que no se manifiestan en el sujeto a menos que se produzcan determinada7 alteraciones en el ambiente, generalmente la ingestin de alguna sustancia que hace que se ponga de manifiesto la existencia del defecto enzimtico. Se incluye porque constituyen ejemplos fascinantes de la interaccin genoma-ambienteen la produccin de enfermedades.

Deficiencia de glucosa--fasiatodesbidrugenasa del eritrocito

La funcin ms importante de la va de las pentosas en el eritrocito (por donde uasa ms del 10 % de la ducosa aue consume esta clula) consiste en la iiroduccin de NADPH que se u a l i en la reduccin del glutatin. Esto es esencial para lainactivacin de compuestos oxidantes. Si algunode los componentesdel sistema falla, y disminuye la concentracindel glutatin reducido, la hemoglobina puede precipitar y provocar alteraciones en la membrana del hemate. Esta distorsin estimula la eliminacin de los eritrocitos por el bazo, lo que puededar lugar a un proceso hemoltico agudo. El dficit de la glucosa-6-fosfatodeshidrogenasa (una de las productoras de NADPH) se debe alaherencia denialquiera denn grannmero dealelos anormales del gen que codifica su sntesis. Se han encontrado ms de 100 variantes de glucosa6-fosfato deshidrogenasa, asociadas con un amplio espectro de enfermedades hemolticas. La sntesis de la enzima del eritrocito est codificada uor un gen localizado en el cromosoma X, y por esta razn la enfermedad es ms comn en los varones. En el tipo de deficiencia ms frecuente la hemlisis se hace evidente entre las 48 a 96 h posteriores a la ingestin de alguna sustancia con propiedades oxidantes,entre ellas determinados frmacos(antipirticos,antipaldicos,sulfamidas, etc.). El grado de hemlisis vara de acuerdo con el agente, la cantidad ingerida y el grado de deficiencia enzimtica. Puede producirse hemoglohinuria e ictericia y en casos muy graves, la muerte. Como puede observarse el dficit enzimtico permanece latente hasta que la ingestin de las sustancias oxidantes lo ponen de manifiesto.

Alteraciones de otras protenas

Una enfermedad molecular puede producirse por la deficiencia de cualquier tipo de protena. Hasta aqu se han visto los ejemplos ms sobresalientes, pero es bueno sealar la existencia de otros defectos en protenas que desarrollan otras funciones. Es harto conocida la deficiencia de numerosas protenas que intervienen en el mecanismo de la coagulacin sangunea (ver captulo 63) lo que da lugar a la aparicin de los diferentes tipos de hemofilia. Tambin se han descrito las deficiencias de

los diferentes tipos de inmunoglobnlinas, que originan sndromes de inmunodeficiencia congnita. En el captulo 53 se estudi cmo las alteraciones de los receptores de LDL trastornan todo el mecanismo de regulacin de la sntesis del cdesterd dando lugar a la hipercolesterolemiafamiliar, una grave enfermedad que se caracteriza por la aparicin precoz de arteriosclerosis. Una protena plasmtica, conocida como alfa-1-antitripsina, que acta como inhibidoradeun grupo de proteasas, tambin puede faltar o tener una actividad disminuida y esa deficiencia desempea una funcin importante en la produccin de la enfemedadpulmonarobstructiva crnica. Como puede verse, todos los tipos de protenas pueden estar afectados por mntaciones en los genes que codifican o que regulan su sntesis y producir trastornos metablicos o de otro tipo, que si comprometen el estado de salud del sujetooriginan una enfermedad molecular.

Resumen
El nmero de enfermedades moleeulares conocidas crece constantemente, en parte por la desuipci6u clnica de nuevos sndromes y en parte por la tipficacin bioquimica de las deaeneias moleeulares. Muchas de estas enfermedadespueden diagnosticame en etapas t e m p m de la vida e incluso, en algunas ES posible el diagnstico prenatal, lo cual posibita imponer p m z m e n t e el tratamiento que en muchos casos evita la aparian de las manifestaaones ms graves, como el retraso mental. En iodos los casos es conveniente el asesoramiento gentico. En los ejemplos seleccionados se ha evidenaado e6mo vara el tipo de herenaa de acnerdo con el tipo de protena afectada, estnicwal o funaonal, e6mo alteradones en la misma va metablica pueden tener diferentes manifestaciones eliim;cmo un metabolismo puede estar afeciado en rganos con disnio grado de gravedad y wmo algunos defectosp e r m a n m latentes y se manifiestan solamente por la interaain con el ambiente. En los ltimos aos, el desarrollo de la bioteaologa ha abierto nuevas pers@vas para el diagnstico y tratamiento de estas enfermedades. En nuestro pas se Uevan adelante n u m e m programas de salud encaminados a la erradicaei6n deestas enfermedadeso,al menos, a reducir notablemente su incidentia; incluso, se r e a i h n varios procedimientos de diagn6stico prenatal

1 .Por qu la mutacin en un gen puede alterar unas veces la funcin de la protena que l codifica y otras veces no? 2. Por qu los defectos de protenas estructuralesse heredan de forma dominante y los de protenas funcionales de forma recesiva? 3 . Por qu las enfermedadesdebidas a defectosrecesivos ligados al cromosoma X son ms frecuentes en los varones aue en Las hembras? 4. Por qu la glucogenosis tipo 1 produce hipoglicemia y otros tipos no? 5. Por qu en unas enfermedadeses posible realizar el diagnstico prenatal y en otras no? 6. Puede una misma enfermedadmolecular deberse a varios defectos genticos diferentes? 7. Cmo explicara usted el hecho de que una misma enfermedad molecular se pueda p m n t a r en varias formas dediferentesgradmdegravedad?

Las endocrinopatas constituyen un grupo amplio de enfermedades, caracterizadas por unaalteracin de la funcin hormonal. Tres tipos principales de alteraciones son las que originan estas entidades: deficiencia en la produccin de una o varias hormonas (hipofuncin),exceso en la produccin hormonal (hiperfuncin) y alteracin de la respuesta de las clulas diana a los efectos de una hormona, que en la mayora delos casos se vincula con una disminucin de su funcin. En la medida que las investigaciones han permitido conocer las estructuras, los mecanismos de accin de las hormonas y sus efectos metablicos en los diferentes tejidos, se ha podido avanzar en el conocimiento de las endocrinopatas.

Hipofuna6n hormonal
La produccin deficiente de una hormona puede tener como causa un trastorno gentico o la destmccindel tejido de la glndula que la produce. El trastorno gentico puede ocurrir por la disminucin o ausencia de alguna de las enzimas que participan en su sntesis. La destruccin del tejido de laglndula que sintetiza la hormona puede ser el resultado de un tumor,nna infiamacin,una infeccin, una reseccin quirrgica o una reaccin autoinmune, entre otros. LaP,hipofuncioneshormonalespueden ser primarias, secundarias o terciarias. Las deficienciasprimarias de una hormona son aqullasprovocadas por un funcionamiento anormal o una destruccin de la glndula que la produce. Formando parte de este tipode endocrinopatas se encuentran el fallo primario de la corteza suprarrenal (enfermedad de Addison) y el hipotiroidismoprimario, que aparece como consecuencia de la afectacin de la glndula tiroides. Las deficiencias secundarias se originan en la adenohipfisispor causas diferentes, que implican una alteracin de la liberacin de una o varias de sus hormonas trficas, como ocurre, por ejemplo, en el caso de la destruccin de la pitnitaria por un tumor, lo que provoca el fallo deja tiroides, dela cortezasuprarrenal o de las gnadas: las terciarias se deben a un fallo hipotalmico. Las deficiencias primarias y secundariaspueden diagnosticarse de diferentes maneras. Una posibilidad es la determinacinde los niveles sricos de la hormona deseada y de su hormona trfica, por ejemplo, la tiroxina y la TSH; el cortisol y la ACTH. En las deficienciasprimarias el nivel de la hormona se encuentra disminuido y el de la homona trfica, extremadamenteele~~ado, debido a los mecanismos de retroali-

mentacin (captulo 59). En las deficiencias secundariaslas 2 hormonas se encuentran disminuidas. Otra posibilidad para diferenciar entre una deficienaaprimaria o secundaria es mediante la determinacinde la capacidad de una hormona trfica para estimular la secrecin de la hormona en el tejido glandular especfico. La estimulacin se produce nicamente cuando la afectacin es secundaria, no as cuando la lesin es primaria En general, los estados deficitarios se tratan mediante la administracin de la hormona natural o de un anlogo biolgicamente activo.

Hiperfuna6n hormonal
Las hiperfunciones hormonalesson ocasionadas, generalmente,por un exceso en la secrecin de un tumor benigno del tejido glandular (adenoma) que la produce. La sntesis de las hormonas por las clulas tumorales no est sujeta a los mecanismos del tejido normal que controlan la actividad secretaria.Entre estas enfermedades se encuentran los tumores de las clulas de los islotes pancreticos que producen la insulina, los adenomas tiroideos que segregan la tiroxina y los adenomas de las glndulas paratiroides, que segregan la hormona paratiroidea. Las hipersecreciones hormonales pueden ocurrir tambin como respuesta a un aumento de la sntesis de su hormona trfica correspondientepor la adenohipfisis. Entrestasseencuentra laenfermedad de Cushing, que tiene como causa el exceso en la secrecin de ACTH por la pituitaria, lo cual conduce a un exceso en la secrecin de las hormonas esteraidespor la corteza suprarrenal.

Afectaciones de la respuesta hormonal en las clulas diana

Puede darse el caso de que no exista una respuesta adecuada en los tejidos diana, a pesar de existir una concentracin normal, e incluso elevada, de la hormona. En esos casos, los mecanismos normales de retroalimentacin tienden a elevar los niveles de esa hormona, lo cual no soluciona el problema, ya que la afectacin se encuentra, precisamente,en la capacidad de la hormona para desarrollar su mecanismo regulatorio. Se han establecidonumerosos mecanismos como base causal de esta afectacin de la respuesta hormonal. stos pueden clasificarse en 3 tipos fundamentales: defectos prerreceptor, defectos a nivel del receptor y defectos postreceptor. Los defectos prerreceptor se deben, por lo general, a la presencia de anticuerpos que inactivan a la hormona. Esto se observa fundamentalmenteen el caso de pacientes tratados con hormonas, sobre todo de naturaleza peptdica, en los cuales se desencadena una respuesta inmunolgica a stas. Un ejemplotpico de esta variedad de resistencia hormonal es la que se desarrolla en pacientes quese tratan de por vida con insulina, en los cuales van a existir anicuerpos contra dicha hormona. Este trastorno condiciona que los pacientes puedan llegar a requerir dosis mucho ms elevadas de insulina, que las que se necesitaran en ausencia de la respuesta inmune. Los defectos a nivel del receptor pueden ser congnitos o adquiridos. En el cuadro 77.1 se presentan 3 categoras generales de defectos relacionados con los receptores. En la primeracategora, la causa de la enfermedad son los anticuerpos dirigidos contra un receptor hormonal especfico. Estos anticuerpos de la clase IgG pueden bloquear la fijacin de la hormona; por ejemplo, en la acantosisnigricam existen anticuerposque bloquean la fijacin de la insuliua al receptor y en la enfermedad de Graves, los anticuerpos contra los receptores de TSH "imitad'la fijacin de la hormona y provocan un estmulo al receptor. En la segundacategorano puede detectarse la fijacin de la hormona al receptor; se desconoce an si es porque no existen los receptores, o s existen, pero son anormales.

~oadro 77.1.

lkastornos relacionadoscon los receptores hormonales Receptor Problema

Enfermedad

Enfermedad de Grave9 (bipertiroidismo) Acantosisnigricamwn resktenciaalaninilina

Miasteniagravis

TSH

Anticuerpoque estimula al receptor dela TSH Anticuerpoque bloquealafijaundelaimulina al receptor Anticnerp que iutensiftca el recambio del receptor de laacekolina Anticuerpoqnebloqnealajacinde p adrenrgiws

Insulina

Acetilcolina P-adm nmo

Asma

Segunda categora
Diabetesinspida

ADH
lTH

Denenaa de receptores Deficiencia de refeptores

Anannalidadgenlicadelrrceptor

nefrognicacongnita SeudohipoparaOmidho

Sndmmedefemiuacin Andrgetesticular (varn XY con nos fenotipofemenino) Raquiosmotipoli &- Cakihiol tente ala vitamina D Sndromede Refetoff Sndromed e M n

Defectos en los receptore

H. timideas Defectosen los receptores

GH

Defectosen los receptor-

Obesidad

Insuna

Dismiuuandelafijacindela hormona Disminocindelafijacindela hormona

D i a b e t e smellitus tipo iI Insuna (nodependientede insulina)

La tereera categora est integrada por trastornos en los que existe una regulacin anormal de los receptores. Los individuos con obesidad,y los que padecen diabetesmellitus tipo 1 1 y obesidad,manifiestan, con frecuencia, intoler&ia a la glucosa y resistencia a la insulina, a pesar de tener unaconcentracin plasmtica elevada de esta hormona, debido a que el receptor de insulina presenta cooperatividad negativa. Cumpliendo una dieta adecuada logran bajar de peso; como consecuencia, los niveles de insulina plasmtica disminuyen, la sensibilidad a la insulina mejora y la intolerancia a la glucosa se reduce. Los defectos postreceptor seexpresan en muchasformasderesistenciahormonal, congnitas o adquiridas. Aunque la base de estos defectos es generalmente de natnraleza desconocida, se han sealado anormalidades en el acoplamiento de los receptores hormonales a los mecanismos de trasmisin de la seal; en algunos casos pueden estar involncradas las protenas G.

Endocrinopatas ms frecuentes
Existen numerosas alteracionesmetablicas que afectan a diversos tejidos; algunas de stas, como la diabetes mellitus (captulo 73,tienen una elevada incidencia en niiestro pas, por lo que constituyen un problema de salud, existiendo un programa para su control y prevencin a nivel de atencin primaria. Otras endocrinopatastienen una incidencia menor, pero no obstante deben tenerse en cuenta en la prctica mdica. A cnntinuaciu revisaremos las caractersticasms sobresalientesde las principales enfermedadesque afectan a las diferentes glndulas endocrinas; se har nfasis especialmente en aqullas que constituyen sus ejemplos ms notables.

Principales endocrinopatas de causa hiposaria

La prdidade la funcin de la hipfisis anterior o panhipopitnitarismo conduce a la atrofiade la glndula tiroides, de la cortezasuprarrenaiy de las gnadas. La ausencia de las hormonas secretadas por estos rganos afecta lamayor parte de los tejidos del organismo e involucra los metabolismos protenico, glncdico y lipdico, as como el equilibriohidromineral. Por otra Darte. el aumento en lasecrecin de una hormona dela adenohinfisis. como consecuencia de un trastorno propio de la glndula o de un exceso de la secrecin de la hormona hipotalrnica quela regula, provoca una estimulacin de la glndula diana correspondiente.

Hipersecreciin de la bormona del ereeimiento

En el ser humano la produccin excesiva de la hormona del crecimiento (GH) ocurre, por lo general, por un tumor acidfilo y puede provocar el gigantismo o la acromegalia. Los tumores que secretan GH son monoclonales (segn el anlisis de inactivacin del cromosoma X). Adems, en e140 % de los adenomas hipofisariosque secretanGH se ha encontradouna mutacin puntual en la subunidad a de la protena G8, cuyo resultado es la hipersecrecin autnoma de la GH y el crecimiento celular. Si la hipenecrecin de la GH ocurre antes del cierre de las placas epifisarias, se produce el gigantismo. Suele haber hipogonadismo, que origina retraso del cierre de las epfisis y, como consecuencia, un perodo de crecimiento ms prolongado. El crecimiento aceleradode los huesos largos explica que estos individuospuedan alcanzar de 7 a 8 pies de estatura o ms, y presenten los miembros desproporcionadamente largos. El paciente ms alto, segn datos publicados, meda casi 2,7 m. Si el aumento de la liberacin de la GH ocurre despus del cierre epifisario y del cese del crecimiento de los huesos largos, se produce la llamada acromegalia. La mandhula prominente y lanariz ensanchada son cambiosfaciales caractersticos en esta afeccin, debidos al crecimiento seo acral, as como el crecimiento exageradode manos, pies y crneo. Otros efectos incluyen el aumento de tamao de las glndulas, como las tiroides, paratiroidesy snprarrenales. Adems, pueden presentarse diversos problemas metablicos que se manifiestan con glucosuria e hiperglicemia, lo cual sugiere una diabetes de origen pancretico. En la acromegalia hay una prdida o disminucin de los mecanismos de regulacin que controlan la secrecin de la GH. As, la hipoglicemia no estimula la produccin de dicha hormona, y la hiperglicemia no la inhibe, como ocurre en condiciones normales.

l Z 7 . 6 1 1de la hormona del ereeimienio

E L panhipopitnitarismo o la deficiencia aislada de la GH son ms graves en la infancia, porque las cantidadesinsuficientes de esta hormona afectan el crecimiento normal del nio; los dems efectos metablicos ocasionan menos problemas y son menos "dramticos''. En contraste con lo que ocurre en los que presentan defieiencia de TSH (cretinismo), este tipo de enano no tiene deformidad, ni retardo mental, y frecuentemente no poseela apariencia de un cretino. En la edad adulta, el enano puede tener de 3 a 4pies de estatura; las proporciones relativas de las diferentes partes del esqueleto no se desvan mucho de lo normal, aunque la cabeza, en general, es grande, en relacin con el cuerpo. Estos individuos con defieiencia de la GH responden normalmente a la administracin de la GH exgena. Los enanos tipo Lamn tienen cantidadesexcesivasde GH, pero carecen de receptores hepticos para esta hormona. Los pigmeos tienen, en apariencia, un defecto postreceptor de la GH, limitado, posiblemente, a la accin que ejerce esta hormona mediante el IGF -1(somatomedina).

ipemuwido de l a hormona adrenocorhieotrbpca

La hiperproduccin de la hormona adrenocorticotrpica(ACTH)se atribuye a una hiperplasia o a un tumor de las clulas basfilas de la adenohipfisis. Varios de los rasgos clnicos de la enfermedad pueden explicarse por una produccin excesiva de estemidesadrenales, incluyendoentre stos a los andrgenos. Los pacientes pueden presentar acn y un crecimientomarcado del pelo, lo que es mucho ms notorio en el caso del vello facial en las mujeres. La actividad dbil de la hormona melanocito estimuiante (MSH) de la ACTH, o la liberacin concomitante de la $-MSH o la a - W H provocan hiperpigmentacin cutnea Las manifestaciones metablicas ms importantes son: balances negativos del nitrgeno, el potado y el fosfato; retencin de sodio, que puede provocar edema, hipertensin o ambas; intolerancia a la glucosa o diabetesmellitus franca; incremento de la concentracin de cidos grasos en el plasma sanguneo; y disminucin de los eosinfdos y linfocitas circulantes, con incremento en los lencocitos polimorfonncleares. Los pacientes con elsndrome de Cnshing pueden presentar,adems, atrofm muscular y una redistribucin peculiar de la grasa, estoes, obesidad troncal. Los individuos que padecen esta enfermedad deben diferenciarsede los pacientes con hiperfnncin corticosnprarrenal, producida por otras causas. Estas incluyen la secrecin &pica de ACTH por clulas tumorales. Una pmeba til para realizar esta diferenciacin consiste en la administracinde un glucocorticoide sinttico potente, como la dexametasona, seguida de la determinacin de la concentracin de los esteroides corticosuprarrenales en la orina o el plasma. En los sujetos normales hay una cada sensible en la produccin adrenal de cortisol, aun con dosis bajas de dexametasona. Cuandosele administra una dosis alta de este esteroidea un paciente que presenta la enfermedad de Cnshing, se produce una supresin de la sntesis de corticoides,mientras que cuando la causa no tiene un origen hipofisario, no se obtiene la respuesta supresora.

Un infarto, una infeccin o un tumor de la hipfisis pueden ser la causa de una hiposecrecin de la ACTH; tambin puede deberse a la administracin crnica de hirmonas esteroides, que provocan 1 ; supresin de la secrecin de la ACTH, lo cual conduce a la atrofia de la corteza snprarrenal y a la hipofuncin de dicha glndula.

En este tipo de afeccin se produce una insuficiencia suprarrenal secundaria. E1 dficit en la sntesis de cortisol y otros glucocorticoides provoca hipoglicemia, sensibilidad extrema a la insulina, intoleranciaal estrs,anorexia, prdida de peso, nuseas y debilidad intensa. La sht& deficientede muieralocorticoides determinala aparicin de hipotensin arterial, disminucin de la velocidad de filtracin glomernlar y reduccin de la capacidad para excretar un determinado volumen de agua suministrado. Con frecuencia, estos pacientes sienten una avidez intensa por la sal; las concentraciones plasmticas de sodio son bajas; las de potasio, altas; el nmero de linfocitos y eosinfilossan&neos se ennientra aumentado.

lRastomos de la pmdueei6n o ad6n de la hormona rohpica

La ms frecuente de las tirotoxicosis o hiperfuncionestiroideas es la enfermedad

de Graveso bnrioexoftslmico (85 %),cuya trada clnica la constituye la exoftalmia,

el bocio difuso y el hipertiroidismo. Los signos oculares son los ms caractersticos de esta enfermedad; generalmente son bilaterales, aunque a veces se afecta un solo ojo; en la mayora de los casosse debe a un exceso del tejido adiposo orbital. Como en todos lo cuadros de hipertiroidismo, existe un aumento en la velocidad de los procesos metablicos, que se expresa en una elevacin del metabolismo basal, debido probablemente al efecto desacoplador que ejerce la tiroxina sobre la cadena respiratoria Estos pacientes presentan sntomas que son comunes a otros estados de hiperfuncin tiroidea: nerviosismo, temblor, aumento de la sudacin,intoleranciaal calor, palpitaciones, taquicardia, fatiga, debilidad, aumento del apetito, prdida de peso, aumento de la frecuencia de las deposicionese hiperreflexia. Como ya se expuso, en la base causal de esta enfermedad se plantea la existencia de antinierpos que estimulan al receptor de la hormona tirotrpica. La disminucin de la liberacin de la TSH ocasiona un estado de hipofuncin tiroidea, que puede deberse a una insnicienciaen la sntesishiposifaria de la hormona (hipotiroidismo secundario) o a la secrecin insuficiente de la TSH, a partir de las clulas tirotropas hiposarias, en aparienaa normales, pero que son insuficientemente estimuladas,debido a una disminucin de la secrecin de la hormona hipotalmica liberadorade Orotrnpina (TRH). Dichos estados se manifiestanclnicamente por un conjunto de signos y sntomas indistinguiblesdel hipotiroidismo primario, como consecuencia del dficit en la produccin de hormonas tiroideas y la consiguiente disminucin de la intensidad del metabolismo hasal. Los signos y sntomas ms frecuentes del &edema (hipotiroidismo avanzado del adulto) son: fatiga, piel seca y spera, letargo, lenguaje lento, edema palpebral, sensacin de fro, disminucin de la sudacin,piel frailengua grnesa y edema facial. Tambin se presenta en estos pacientes: palidez cutnea, trastornos de la memoria, estreimiento, alopecia, disnea, edema perifrico, ronquera, menorragia, sordera y
mllWIS.

El diagnstico diferencial entre los distintos tipos de hipotiroidismo se realiza mediante la determinacin de los niveles plasmticos de tiroxina, TSH y TRH.

La diabetesfnspidaseproduce como consecuencia de anormalidades en la secrecin o en la accin de la hormona antidiurtica (ADK) y se caracteriza por la excrecin demandes volmenesde orina diluida. La diabetes inspida primaria, causada por una produccin insuficiente de la a destrnccin de la va hipotalmica-hipofisaria por hormona, se debe generalmente a l

una fractura de la base del crneo, un tumor o una infeccin, pero tambin puede ser de origen hereditario. En la diabetes inspida n e f m g h h hereditaria,la ADHes secretadaen cantidad normal, pero la clula diana es incapaz de responder, probablemente a causa de un defecto en los receptores V, que estn en los epitelios, por lo que no aumentan las concentraciones de AMPc intracelular, lo que traera como consecuencia la impermeabilidad al agua de las membranas luminales de los conductos colectores. Los efectos extrarreuales mediados por los receptores V, incluyen un aumento de los factores de la coagulacin sangunea von Wiebrand y Vm,una cada de la presin arterialdiastlica y laestimulacin de laliberacin derenina. En la mayora de los pacientes con diabetes inspida nefrgena familiar no existen respuestas extrarrenales mediadas por V,, lo que indica un efecto generalizado en la va de transduccinde seales de este receptor. Los efectos mediados por el receptor V,, como la vasoconstriccin,son normales; esta lesin hereditaria se distingue de la diabetes inspida adquirida,porque con frecuenciase debe ala administracin famacolgicade litio para tratar padecimientos manaco-depresivos; este defecto puede deberse a que el litio inhiba la acumulacin de AMPc, que es estimulada por la ADH en los conductoscolectores; tambin ocurre como consecuencia del empleo del antibitico demecldcna, que en la mdula renal inhibe no competitivamente a la adenilciclasa (la cual es activada cuando la ADHse une asu receptor)y a la protena quinasa dependientede AMPc,pemno afecta la accin de la fosfodiesterasaLa disminucin de las concentraciones de AMPc impermeabiliza a lasmembranas iubulares renales al agua. La seawi6n inadeEuada de la ADH se presenta en combinacin con la produccin ectpicapor diversos tumores (por lo general,del pulmn),perutambin puede ocurrir asociada a infeccionespulmonares, al hipotiroidismo o a trastornos cerebrales. Se le llama secrecin inadecuada, debido a quela ADHes producida a una velocidad normal o aumentada en presencia de hiposmolalidad, lo que causa una hiponatremia por dilucin persistente y progresiva, con excrecin de orina hipertnica.

El hdrome desimmondssheehan opanhipopituitarirmo se manifiesta por un conjunto de signos y sntomas que traducen el fallo secretorio de las hormonas corticotrpica, tirutrpica y gonadotropinas, elaboradaspor la adenohipfisis.Es un sndrome fisiopatolgicoy no una entidad unicansal, integrado por: adinamia, palidez, anhidrods, hipotensin arterial,frialdad corporal, amenorrea y apata, que en los casos no identificados y no tratados con la oportuna terapia sustitutiva, segn la alteracin hipofisaria, pueden conducir a un coma letal por el panhipopituitarismo; incide mucho ms en las mujeres, y su causa ms comn son las lesiones hipofisarias isqumico-necrticas,las cuales se producen tras partos que depararon grandes prdidas de sangre y se acompaaron de colapso vascular. Otro trastorno de causa hipofisaria es el hipogonadismo, que casi siempre se asocia al infantilismoo al enanismo hipof~~ario. Se descubre despus de la pubertad, al comprobar la ausencia de desarrollo genital y gonadal. Los caracteres sexuales secundarios se encuentran afectados (en los hombres: la voz grave, el pelo de la barba, el vello, la musculatura; en las mujeres: el desarrollo de las mamas, la aparicin de la menstruacin, etc.). Es ms frecuente en los varones. La excrecin de 17-cetosteroides y gonadotropinas est disminuida, contrariamente a lo que ocurre en el caso de las hipogenesias testinilares y ovrieas p r h d a s , en las que las gonadotropinas suelen estar aumentadas.

Los tumores de las clulas secretoras de pmiaciina causan amenorrea y galactorrea (descarga o escurrimiento mamario) en las mujeres. El exceso de esta hormona se ha relacionado con ginecomastia (hipertrofia mamaria) e impotencia en los varones.

Prindpaies endocrinopatas relacionadas con la ginduia timides Las enfermedades de la tiroides estn entre las afectaciones ms comunes del sistemaendocrino. Los 2 sndromesprincipales de hipertiroidismoson la enfermedad de Graves y el bocio nodular txico. El hipotiroidismoinfantil, si es congnito, da lugar al cretinismo: el del adulto se conoce como mixedema.

La hiperfnncin tiroidea se caracteriza por la elevacin anormal de lamayorade los procesos metablicos; un cuadro de bocio, producido por el agrandamiento e hiperfuncionamiento de la glndula; y el incremento del metabolismo basal, entre el 30 y e1 60 % de su valor normal. Hay, generalmente,hipocolestemlemia,debido a la disminucin de la concentracin de las poprotenas sricas, hiperglicemia, glucosuria, disminucin de la tolerancia a la glucosa y aumento del catabolismo de protenas, que se expresa en un balance nitrogenado negativo y prdida de peso. Los niveles de tiroxina en sangre pueden estar marcadamente elevados. La concentracin de esta hormona es normal, en un pequeoporcentajedelospacientes,no asila trodotironha, queseencuentra elevada. La enfermedad de Graves, tambin conocida como bocio difuso txico o bocio exoftlmico, ya fue abordada al analizar los trastornos de produccin o de accin de la hormona TSH. El bodo nodular t6xico se debe al desarrollo de uno o ms iumores benignos, secretoresde hormonas tiroideas. La acvidad deestos ndulos txicos no est regulada por la TSH, por lo que son autnomos. De esta forma, dichos ndulos continan secretando, a pesar de la supresin de la sntesis de la hormona tirotrpica, por la adenohipfisis. Debido a las elevadas concentraciones sanguneas de las hormonas tiroideas, los pacientes que presentan este sndrome tienen todos los signos y sntomas del hipertiroidismo,los cuales se relacionaron al estudiar la enfermedad de Graves, pero carecen de los trastornos oculares tpicos de sta. Los pacientes que padecen de estos trastornos pueden ser tratados con drogas antitiroideas,dosis altas de iodo radiactivo Na '"1, o mediante la reseccin quirrpica.

La hinofuncin tiroidea se caracteriza uor una baia " concentracin srica de tiroxina, un marcado enlentecimientode los procesos corporales,con disminucin del a mayora metabolismo basal y de la temperatura corporal; e hipercolesterolemia,en l de los casos. La aparicin de hipotiroidismo durante la niez ocasiona trastornos del crecimiento y el desarrollo. Siest presentedesde el nacimiento apareceelllamadocretinismo, caracterizado por una grave deficiencia mental irreversible y defectos congnitos mltiples. El cretinismo tambin puede ser provocado por una afectacin o ausencia del desarrollo de la glndula tiroidea. Como se vio anteriormente en este captulo, el trmino mixedema se utiliza para describir el estado hipotiroideo del adulto, y puede implicar un grado ms grave de

hiuotiroidismo: sin embarzo. - , esta denominacin tambin se emplea - para - describir la piel de los pacientes con un marcado hipotiroidismo, qnees tpicamente seca, spera y engrosada, debido a la infdtracin de proteoglicanos. Un grupo de defectos hereditarios en las i.as desntesis delas hormonas tiroideas puede dar origen al hipotiroidismo congnito. Entre stos podemos mencionar las afectaciones en el mecanismo de concentracindel ioduro; defectos en los mecanismos enzimticos que realizan la iodacin de la tiroglobulina,especialmente en relacin con la enzima peroxidasa; deficiencia de iodotirosina desiodinasa; defecto en la sntesis o protelisis de la tiroglobulina;y ausencia de respuesta de la glndula tiroides a la TSH, debido, posiblemente, a alteracionesgenticas de los receptores de TSH. A pesar de que existen mltiples casos identificadoscomo hipotimidismo congnito, no ha sido posible establecer en la mayora de ellos la afectacin especfica. El hipotiroidismo primario, causado por un trastorno de la glndula tiroidea, y el secundario, debidoa la secrecininsuficiente de la TSHpor la adenohipfisis,pueden diferenciarsemediante la determinacinde la concentracin de la hormona tirotrpica, por la tcnica de radioinmnnoensayo.En el tipo primario la TSH se encuentra elevada, como consecuencia de la ausencia del efecto inhibitorio aue eiercen las hormonas * tiroideas sobrela adenohipfisis,lo que conduce, a menudo, a la aparicin de bocio. En el hipotiroidismo secundario,debido ala enfermedadpituitaria, los valores de la TSH en sangre estn disminuidos y no responden a la hormona hipotalmica liberadorade TSH (TRH). Si la TSH se eleva como resultado de la infusin de TRH, el problema selocaliza presumiblemente en el hipotlamo. El hipotiroidismo, independientemente de su causa, puede ser tratado efectivamente mediante la adminktracin de L-tiroxina o L-triiodotironina. Algunos factores ambientales pueden afectar la produccin de las hormonas tiroideas, con la consiguiente activacin de los mecanismos compensatoriossiguientes: incremento en la secrecin de la TSH, hiperplasia de la tiroides y bocio. En la medida en que estos mecanismos mantengan la produccin de hormonas tiroideas dentro de los valores normales, los individuos carecern de afectacionesmetablicas, aunque padecern de bocio. Si el trastorno en la produccin de las hormonas se hace muy intenso, llegar un momento en que, adems de bocio, habr un estado de hipotiroidismo. Cuando el factor causal afecta hasta el 10o e120 % de la poblacin, se dice que existe el bocio endmico; el principal factor ambiental que lo causa es la insuficiente ingestin de iodo, lo cual afecta la sntesis de las hormonas tiroideas (captulos 59 y 74).

Principales endocrinopatias relacionadas con la corteza suprarrenal

El hiperimcionamiento de la corteza suprarrenal se expresa,de una forma u otra, en dependencia de las hormonas que se segregan con mayor predominio. El exceso de glucocorticoides,denominado comnmente sndrome de Cnshing, se debe al empleo farmacolgico de esteroides, pero puede ser consecuencia de un adenoma hipofisario secretantede ACTH, de adenomas o carcinomassuprarrenaleso de la produccin ectpica de ACTH por clulas neoplsicas. Los pacientes que padecen este sndrome pierden el patrn diurno de la secrecin de ACTH y cortisol; tienenhiperglicemia,intoleranciaa la glucosa, o ambas, debido a un estmulo intenso sobre la gluconeoenesis. Un intenso catabolismo proteico pro<. .. \.w aminucidos para dicho proceso. lo cual conduce al adel$proniiento de la piel, osteoporosis, regrcsin intensa del tejido linfi~idt. disminucin de la maia miis~ular, por lo general, un balance negativo de nitrgeno. Hay una distribucin peculiar de los tnacilgliceroles, con obesidad tmncal, y la tpica "joroba de bfalo". La resistencia a las infecciones y las respuestas inflamatoriasestn alteradas, as como lacicatrizacin de las heridas. Varios hallazgos que incluyen la hipernatremia,

!.

hipocalemia, alcalosis, edema e hipertensin, se deben a las acciones mineralocorticoides del cortisol. En la hiperplasia corticosuprarrenal con hipersecrecin de hormonas androgMe88, las manifestaciones varan con la edad y el sexo del paciente. Las mujeres adultasadquieren apariencia masculina, de ah el trmino de v h i b n o adrenal. En el hombre adulto, la virilizacin puede ser difcil de apreciar. Cuando estos tumores aparecen en nios del sexo masculino, la pubertad llega prematuramente; en las nias tienen lugar la virilizacin y la hipertrofia del cltoris. Cuando se administra a sujetos normales un potente glncocorticoidesinttico, como la dexametasona en una dosis baja, se produce una supresin de la sntesis de glucocorticoides, debido a los mecanismos de retroalimentacin ya descritos. Los pacientes con hiperplasia cortical no desarrollan supresin, al menos que se swninisreuna dosis alta de dexametasona Los individuosque tienen tumores secretores de estemides o productores de ACTH no presentan supresin,independientementede la dosis de dicho compuesto. La ACTH plasmtica est elevada en los pacientes con hiperplasia y en los que poseen una produccin ectpica de dicha hormona, pero es indetectahle en aqullos que tienen tumores corticosuprarrenales, productores de esteroides. En algunos individuos, los tumores dela corteza snprarrenal segregan principalmente aldosterona (aldosteronismoprimario, llamado tambin sndromede Conn). El aumento en la produccin de mineraiocorcoidesprovoca una retencin marcada de sodio, hipertensin, alcalosis hipopotasmica y debilidad. Estos pacientes no presentan seales de exceso de glucocorticoides, y las concentraciones plasmticas de angiotensinaU y renina son bajas. El aldostemnismosecundarioaparece en una variedad de enfermedadescaracterizadas por la retencin delquido, como la cirrosis heptica, la nefrosis y la insuficiencia cardaca congesiva. Sus sntomas se asemejan a la forma primaria, excepto en el 1son altas. hecho de que las concentracionesde renina y angiotensina 1

La sntesisinsuficiente de esteroides corticales puede ser primaria, como resultado de una enfermedadde la corteza suprarrenai (e&medaddeAddison); secundaria, debido a un trastorno de la adenohipfisis; o terciaria, debido a un trastorno hipotalmico que afecte la secrecin de ACTH. Dada la gran cantidad de efectos que ejercen los gluco mineralocorticoides,no es sorprendente que los sntomas de la insuficienciaadrenal afecten virtualmente a todos los sistemas del organismo. La afectacin de la accin mineralocorticoide se asocia con la prdida del NaCl en la orina y con la deficiencia en la excrecin de lo anterior provoca hiponatremia e hipotensin arterial; a menudo, los potasio y H+; pacientes tienenuna fuerte avidez por la sal. La alteracin de la accin de los glucocorticoides hace que aumenten estos problemas, al afectar el tono vascular y el gasto cardaco. La disminucin de estas hormonas tambin conduce a la hipoglicemia durante el ayuno, debilidad muscular, dificultad en la habilidad para excretar un exceso de agua suministrado, trastornos en la funcin gastrointestinal, astenia, prdida del apetito, y marcada susceptibilidad al estrs, que se extiende, incluso, hasta los de menor intensidad, y puede precipitar un estado de crisis y la muerte. En la insuficienciacorticosuprarrenal primaria, las concentraciones de las hormonas hipofisarias ACTH y b-lipotropina (cosecretada con la primera) se encuentran elevadas, debido a la depresin del efecto inhibitorio de los corticoides suprarrenales sohre aqullas, lo que determina que los pacientes que padecen este tipo de endocrinopata presenten oscurecimientode la piel, sohre todo de la cara, ya que las hormonas hipofisarias tienen una actividad melanocito estimulante. Este signo es

muy importante en la diferenciacin entre las insuficienciascorticosuprarrenalesprimarias y secundarias,ya que este ltimo tipo no lo presenta. La afectacin de la funcin adrenoeorticai puede diagnosticarsemediante la medicin de los corticoides plasmticos o urinarios. En la insuficiencia primaria, las infusiones intravenosas de ACTH no elevan los niveles de dichos esteroides; en la secundaria sedetectan una respuesta sec~toria a la ACTH y baja.sconcentrauonesde dicha hormona en el plasma.

La deficiencia gentica de una0 ms de las enzimas que catalizan la sntesis de las hormonas esteroideasadrenales provoca varios sndromesdiicosenel hombre. En la figura 77.1 se presentan los diferentes pasos enzimticosafectados en estas enfermedades.
Colesterol $20,22 DES 17aOH 2 preg-nolona

+ .w

$ pHSD l 7 n OH progesterona

+.

hS 17-OH preg-nolona

3 pHSD i\j 17-OH progesterona

-.-+

~'dehidroe~kindrosterona 3 DHSD i\j androstenediona

1-7 ~~
1Glucocorticoides

Corticosterona 18-OH

Estrona I

1Esteroides sexuales

18-OH corticostemna 18-oxidasa

1 Aldosterona 1
Mineralocorticoides
A
?

{( *'

Fig. 77.1. Hiperplasias suprarrenales congnitas. La deficiencia de la 21-hidroxilasa y de la 11-0-hidroxilasa son las ms frecuentes. DES:desmolssa; 0H:hidroxilasa; HSD:hidroxiestemides deshidrogenasa.

Estas enfermedades se conocen como biperplasiassuprarrenales congnitas, ya que la disminucin de k i produccin de esteroides corcales determina un incremento en la secrecinde ACT, que trae como consecuencia una hiperplasia de la corteza m p r d En cada enfermedad, el bloqueo metablico lleva a la acumulacin de los compuestossintetizados previamente ai sitio afectado por la deficiencia enzimtica, los que son secretados al torrente sanguneo. La degradacin de stos provoca la excrecin de grandes canodades de productos metablicos, caractersticosen la orina La deficienciade desmolasa es la entidad ms rara, debido, quizs, a que la incapacidad de producir hormonas esteroides es generalmenteincompatiblecon la vida extrauterina. El colesterol se acumula en las clulas de la corteza,como resultado de su deficienteutilizacin en la sntesis de esteroides. La afectacin de la enzima 3-b-hidroxiesteroidedeshidrogenasa provoca la ausencia de la sntesis de todas las hormonas gluco y mineraloeorticoides y, por tanto, se va a caracterizar por una marcada excrecin de sal en la orina. La formacin de andrgenos y estrgenos adrenales tambin se bloquea, aunque puede haber

masculimizacin en las mujeres, lo cual parece reflejar un defecto enzimticode menor intensidad de las gnadas, que continuarn produciendo andrgenos; en los varones tiene lugar la hipospadia. La deficienciade la 17-hidroxilasabloquea la formacin del cortisol, as como de los andrgenos y los estrgenos, pero no afecta la sntesis de la corticosterona y la desoxicorticosterona. El predominio de mineralocorticoidesprovoca la retencin de sodio y lquidos, as como la alcalosis hipocalmica y la hipertensinarterial. A pesar de que la produccin de aldosterona no est bloqoeada,sus niveles son bajos, debido a la inhibicin de su sntesis por la retencin de sal que causan la corticosterona y la dewxicorcosterona. Las mujeres no maduran y son amenorreicas, debido a la deficiencia de esteroides gonadales. El dficiten la sntesis de la enzima 21-hidroxilasa es la ms comn de las formas dehiperplasia suprarrenal congnita y representa ms de190 %. Laincapacidad para formar cotiisol, corticosterona, desoxicorticosteronay aldosterona, es habitualmente de carcter parcial y el aumento de la ACTH puede hacer alcanzar un nivel adecuado de dichas hormonas, al menos que el paciente se encuentre bajo estrs. El aspecto clnico dominante es comnmente la masculinizacin, debido a la elevacin de la concentracin de la progesterona y la 17-hidrompmgesterona,las cuales son precursoras de andrgenos, como la androstenediona y la testosterona. La deficiencia de la 11-P-hidroxilasa,la otra ms frecuente, al igual que la de 21-hidroxilasa, bloquea la formacin del cortisol, de la corticosterona y de la aldosterona. Sin embargo,la acumulacin de la 11-desoxicorticosteronapuede llevar eventualmente a la retencin de lquido y a la hipertensin arterial. En esta entidad tambin existe una estimulacin de la sntesis de andrgenos, lo cual provoca masculinizacin. Los defectos en la sntesis de la 18-hidroxasa y 18-hidroxi-deshidrogenasa (18-oxidasa) son extremadamente raros; se asocian a la deficiencia aislada de aldosterona,con la consiguiente prdida de sal; no causan hiperplasia suprarrenal y la formacin de glucocorticoides y andrgenos es normal.

Trasto~mos del funcionamiento de la mdula suprarrenai No se ha descrito ninguna condicin clnica ni experimental como consecuencia de un hipofuncionamiento de la mdula suprarrenal. El hiperfuncionamientode esta glndula se debe a tumores del tejido cromafn, Uamados feocromWtomas,los cuales van a provocar hipertensin arteria, elevacin del metabolismo basa1 y glucosuria. Los niveles plasmticos de noradrenalina y adrenalina pueden elevarse hasta alcanzar valores 500 veces superiores a los normales. Se piensa que la noradrenalina es la responsable primaria de la hipertensin, y la adrenalina, del hipermetabolismo.Los cidos grasos no esterificados plasmticos estn elevados, y hay un incremento marcado en la excrecin urinaria de adrenalina, noradrenalina y cido 3-metoxi-4-hidroximandlico. El diagnsticode feocromocitomase hace corrientementemediante la determinacin de los metabolitos antes mencionados en la orina.

Prinapaies endocrinopatas relacionadas con las g6nadas

E1 hipogonadismo masculino se produce debido a una deficiencia en la sntesis de testosteronapor las clulas deLeydig delos testculos, o a un defecto de la capacidad de dicha hormona para ejercer su accin en las clulas diana. 1358

Cuando estos trastornos aparecen antes de la pubertad se produce una ausencia del desarrollo de las caractersticas sexuales secundarias; si stos se presentan en la edad adulta, muchasde estas caractersticassufren regresin. El hipogonadismo primario se debe a procesos que afectan directamente a los testculos, y causan insuficienciaen dichos rganos, mientras que el hipogonadismo secundariotiene su origen enundefectode lasecreeinde gonadotropinas hipofisarias. Se han descrito 5 deficiencias enzimticas, capaces de bloquear la sntesis de testosterona. Los individuos que presentan dichas alteraciones, a pesar de ser genotpicamentemasculinos, no completan su virilizacin durante el desarrollofetal Tres de estas deficienciasafectan (son los llamados seudohermafroditasmaseulinos). l a fase de la sntesis de la testosterona, que es comn a la formacinde las hormonas corticosuprarrenales,y como ya fue analizado previamente en este captulo, provocan, adems, la aparicin de hiperplasia snprarrenal (Fig. 77.2). Colesterol 20,22 DES dpregnenolona +A' 17-OH pregnenolona b
$ 3 ,HSD
Fig. 77.2. Deficiencias en la sintesis de testosterona. Los individuos que oresentan un dficit en la sntesis

1 7 a OH

17.20 DES

$ progesterona

+A4 17-OH progesterona -b

1 7 a OH

17,20 DES

son los llamados seudahermafroditas masculinos. Las deficiencias sealadas (a) provocan, adems, aparici6n de hiperplasia suprarrenal. DES: desmolasa. OH: hidroxilasa. HSD: hidroxiestemides deshidrogwiasa.

Las enzimas afectadas en esta etapa son la 20,22-desmolasa, que convierte al colesterol en pregnenolona; la 3-P-hidroxiesteroidedeshidrogenasa,que cataliza la reaccin de conversin de la pregnenolona en progesterona; y la 17-a-hidroxilasa, que convierte la pregnenolona en 17-hidroxipregnenolona,y a la progesterona en 17-hidroxiprogesterona. El cuadro clnico que presentan estos pacientes vara en su grado de intensidad, ya que en algunos casos existe una ausencia total de una de estas enzimas, lo cual provoca L a prdida completa de la expresin de los caracteres sexuales secundarios masculimos, mientras que en otros la afectacin es ligera, debido a que la deficiencia enzimtica es parcial y sus efectosson compensados por la marcada elevacin de los niveles de la hormona luteinizante (LH), que aparece como consecuenciade la falta del efecto inhibitorio retroalimentador de los andrgenos. Las 2 deficiencias enzimticas restantes afectan exclusivamente la sntesis de andrgenosy,por tanto,no van acausar hiperplasiasupramnal. Los pasos enzimticos afectados son los catalizadospor la 17,20-desmolasa,que convierte a la 17-hidroxipregnenolona en dehidroepiandrosterona y a la 17-hidroxiprogesterona en androstenediona;y la 17-P-hidrnxiesteroidedeshidrogenasa, que reduce el grupo ceto de la plaza 17de la androstenediona para formar la testosterona. En otro tipo de afectacionesla sntesis de testosterona es normal; sin embargo, existen trastornos bioqumicos que afectan la accin biolgica de esta hormona. En estas condiciones los niveles plasmticos de testosterona son normales e incluso elevados, al igual que los de la LH, pero hay un trastorno dela virilizacin. En la figura 77.3 se presentan van'os defectos genticosque ocasionan resistencia a los andrgenos. La dekienciade la enzima 5-u-reductasaprovocauna afectacin en la sntesisde la dihidrotestosterona.Los pacientes que tienen este trastorno son genotpicamente masculinas, pern fenotpicamente son sendohermafroditas.

Clula de Leydig

Clula blanco

Deficiencias enzimticas

Deficiencia de 5 0 . reductasa

Trastornos del receptor

Resistencia poiitiva al receptor

Fie. 77.3. Resistencia a las andreenos. En las etanas oue se muestran. se han identificado mutaciareduccin de la 17-eetona; y la oxidacin del anillo A al W-3-eetostemide. T:testasterona; DHT: dihidrotestosterona; R: receptor de andrhgenas.

La forma ms frecuente de seudnhermafroditismo~nasculino de origen gentico es causada por la ausencia delos receptores de andrgenos o una anormalidad cualitativa de stos, que afecta su funcin. Este defecto da origen a la llamada feminizacin testicular: el individuo es aparentemente una mujer en todos los aspectos, aunque internamente posee testculos que no descienden a su localizacin normal. La incapacidad de la testosterona parasuprimir la liberacin de laLH, que es tambin un evento mediado por la combinacin con el receptor, determina que existan niveles muy altos de esta ltima hormona, y unaelevadacunceotracinde testosterona, todo lo cual incrementa la sntesis de estrgenos. La feminlzad6n tePonilar incompleta es similar al sndrome anteriormentedescrito, aunque es menos grave que ste; en esta enfermedad hay cierto grado de virilizacin,lo cual, al parecer, se debe a un defectode menor intensidad en el receptor de andrgenos.

El hipogonadismo femenino primario se debe a procesos que implican directamente a los ovarios y, por tanto, cansan alteraciones en su funcionamiento,como son la disminucin de la ovulacin, una escasa produccin hormonal, o ambos tipos de afectaciones. Por otra parte, el hipogonadismo secundario, como vimos en el acpite anterior, se debe a la prdida de la funcin gonadotrpica de la bipfisis. Contrastando con lo que ncurreen el hipogonadismo mascnlino, no se han detectado deficienciasgenticas que afecten la sntesis o la accin de los estrgenos,como ocurre en el caso de los andrgenos. La disgenesia gonadal o sndrome de Turner es un trastorno gentico relativamente frecuente; los pacientes tienen un cariotipo XO, genitales femeninos internos y externos, varias anormalidades del desarrollo y pubertad retardada; su manifestacin fundamental es la amenorrea primaria, asociada con enanismo. Varios sndromes se relacionan con la presencia de cantidades anormales de hormonas. El ms frecuente es el sndrome del ovario poliqustico o sndrome de Stein-Leventhal, en el cual la biperprodnccin de andrgenos provoca birsutismu, obesidad,menstniacin irregular y trastornos de la fertilidad.

Principales endOermnpatias relacionadas cnn Lss paratiroides Las desviaciones del calcio ionizado de sus lmites normales cansan numerosos trastornos que pueden amenazar la vida. Hasta e1 3 % de los pacientes que requieren hospitalizacin puede tener trastornos de la homeostasia del calcio.

Elhiperparatiroidismoprimario se caracteriza por un aumento en la secrecin de la hormona paratiroidea (PTH), debido a la existencia de un adenoma paratiroideo funcionante,la hiperplasia paratiroidea, o a la produccin ectpica de dicha hormona por un tumor maligno. Los sntomas de esta enfermedad se derivan del incremento en los efectos de la PTH, lo cual conduce a la aparicin de hipercafcemia e hipofosfateniia,y a un incremento en la reabsorcin sea. En el hiperparatiroidismocrnicose producen, adems, diversos trastornos en los riones, a causa de la hipercalciuria, como son: nefrocalcinosis, por la deposicin del calcio en el parnquima renal; nefrolitiasis, por la formacin de clculos clcicos en el sistema colector; infeccionesfrecuentes de las vas urinarias, y en los casos graves, deficiencia en la funcin renal. En esta enfermedad aparecen cambios seos caractersticos, debido al incremento de la actividad osteoclstica. Estas afectaciones provocan un aumento en la susceptibilidad a las fracturas y prdida generalizada de la masa sea (osteopenia). detectan aumenAdems de los hallazgos de laboratorio ya sealado b to de la actividad de la enzima fosfatasa alcalina en el suero, y de la excrecin de hidrnxinroha. -El hiperparatiroidismo secundariose caracteriza por la hiperplasia de las glndulas paratiroides y la hipersecrecin de la PTH, como consecueucia de determinados trastornos que provncan resistencia a la accin de dicha hormona. Un ejemplo de ste se ve en la insuficiencia renal progresiva, debido, posiblemente, a una deficiente formacin de 13-dihidroxicolecalciferol(calcitriol)en el parnquima renal enfermo, que conduce a una afectacin de la absorcin intestinal de calcio y a la liberacin secundaria de la PTH, en un mecanismo compensatorio que tiende a mantener una concentracin normal de calcio en el lquido extracelular (captulo 59).

El hipoparatiroidismo,por dficit de la produccin de la PTH, tiene como principales causas la extirpacin o el dao accidental de las glndulas paratiroides durante una intervencin q u i ~ r g i c de a cuello (hipoparatiroidismosecundario),y ms raramente la destrnccin autoinmune de las glndulas (hipoparatiroidismoprimario). Este trastorno se acompaa de la disminucin del calcio inico en el suero y el aumento de la concentracin de fosfato. Sus principales sntomas son irritabilidad neuromnscular, que cuando es leve causa calambres musculares y tetania. La hipocalcemia aguda intensa provoca la parlisis tetnica de los msculos respiratorios, laringoespasmos, convulsionesgraves y muerte. La hipocalcemia prolongada ocasiona cambios cutneos, cataratas y calcificacin de los ganglios basales del encfalo. El seudohipoparatiroidismoes una enfermedadhereditaria rara, en la cual existe una resistencia marcada a la accin de la hormona paratiroidea en los tejidos diana, a pesar de que los niveles sricos de dicha hormona son normales, o inclusoelevados.

En este trastorno se presentan, por lo general, anormalidades esquelticascongnitas, entre ellas estatura pequea y acortamiento de los huesos metacarpianos y metatarsianos, as como retraso mental. El seudohipoparatiroidismopuede asociarse, adems, con hipotiroidismo y otras anormalidades endocrinas. Se plantea que la causa molecnlar de esta enfermedad radica en una disminucin de la concentraciny capacidad funcional de la protena G, que normalmente acopla la funcin de un tipo especfico de receptores (entre los que se encuentra el de la PTH) a la activacin de la enzima aden ciclasa, la cual cataliza la formacin de AMP cclico, segundo mensajero de la accin hormonal.

Principales endocrinopatias relacionadas con el pnEn el captulo 75 se estudi la diabetes mellitus, enfermedadcaracterizadapor un conjunto de manifestaciones metablicas, que tienen como base una accin deficiente de la hormona insulina, bien como consecuencia de una insuficiencia absoluta en su produccin por las clulas P de los islotes pancreticos, o bien por un aumento en la resistencia perifrica a su accin, motivado por diferentes causas. El hiperinsulinismoprimario es originado por un hunor funcionante de las clulas de los islotes (insulinoma),que provoca un aumento en la secrecin de insulina. Tambin puede aparecer como consecuencia de una afectacin en el catabolismo de dicha hormona (hiperinsulinismosecundario),como ocurre, por ejemplo, en el caso de los trastornos hepticos graves. Esta enfermedadse caracterizapor la hipoglicemia, causada por el aumento de la utilizacin celular de la glucosa y la disminucin del proceso de la gluconeognesis que provocan los altos niveles de insulina. La disminucin rpida de la concentracin plasmtica de la glucosa provoca la activacin del sistema nervioso autnomo y un aumento en la iiberacin de adrenana. Los pacientes presentan sudacin,temblores, ansiedad, debilidad, fatiga y hambre. Si la hipoglicemia se prolonga, la disminucin del aporte dela glucosa al cerebro causadiferentestrastornos neurolgicos, que pueden llegar a ocasionar lesiones permanentes.

Resumen
Las endoerinopatasconstituyen un grupo amplio de enfermedades, caracterizadas por una alteraei6n de la fund6n hormonal, bien por deficiencia en la prodncein de una o varias hormonas, por un aumento en la secreci6n. o por una alteracin de la respuesta a la accin hormonal. La produccin deficiente de una hormona puede tener mmo causa un trastorno genco, con la masgiieniedisminucih o ausencia de alguna de las enzimas que participan en su pmeeso de sntesis,o en la destrucci6n del tejido de la ghndula que la produce. Las hipofunciones hormonales pueden ser primarias, secundarias o terciarias. Las primarias se deben al funcionamientoanormal o destniccinde la glndula que produce la hormona; las hipofunciones secundarias se originan en la adenohipsispor diferentes causas, que implican una alterad611de la sntesis de una o varias de m hormonas trficas; y las terciarias se originan en el hipotlamo. Las hiperfuaciones hormonales aparecen, generalmente, por el exceso en la d 6 n de una hormona, a causa de un tumor benigno del tejido glandular; tambih pueden ser primarias o secundarias. Las anormadades de la respuesta hormonal pueden ser de 3 tipos: defectos p r e m p t o r , defedos del receptor y defectos postreceptor. Las anormalidades pie-ptor son pmvoeadas generalmente por la pericia de antienerpos que mactivan ala hormona; los defectos relacionadas conlos receptores pueden deberse a la existencia de anticuerpas contra stos, a la ausencia de receptores, o a los

trastornos en su regulacin; los defectospostreceptor se deben a las anormalidades en el acople de los receptores a los mecanismos de trasmisin de la sefial. La prdida de la funcin de la bipfisis anterior o pauhipopitwtarismo condnce a la atrofia de la mides, de la corteza suprarrenal y de las gnadas. El aumento en la secrecin de una bormona de la adenobipsis, como consecuencia de un trastorno propio de la gindula, o de un exceso en la seereein de la hormona hipotalmea que la regula, provoca una estimulacin de la glndula diana correspondiente. La hipememwin dela hormona del ereeimientocausa gigantismo (si apantes del cierre de las placas episarias) y acromegalia (si lo bace despus del cese s t a hormona determina la del crecimiento de los bu-). La hiperreein de e aparicin del emmhno. E L aumento en la produccin de la ACTH ocasiona, por ejemplo, la enfermedad de Cushing, caraderizada por una liberacin excesiva de los esteroides adrenales. La hiposecrecin de la ACTH provoca una insueiencia miprarrenal secundaria, con disminucin de la sntesis de gluco y mineraloeoraeoides. La enfermedad de Graves o bocio exoftslmico es la ms frecuente de las i r o i d t i r o i d e a sy se plantea que su causa radica en la exismtoxic08i4 O hiperfunciones t tencia de anticuerpos que estimulan al receptor de la TSH. Por el contrario, la djsminuan de la liberacin de la hormona mtr<ipica conduce a un estado de hipofuncin midea. La diabetes inspida es producida por un dficit hereditario o adquirido de la produccin dela ACTH, y se caracteriza por la e x d n de grandesvolmenesde orina diluida. o s El hipertmidismo determina una elevacin anormal de la mayora de l pn>eesos metablicos. Sus 2 formas principales son la enfermedad de Graves y el bocio nodular txico. El hipotiroidismoprovoca un enlenterjmientodel metabolismo; su aparicin en la niez ocasiona el cretinismo; si se presenta en la adultez provoca la aparicin de mixedema. La hiperfuncin corcosup-nal conduce al establecimiento de un cuadro elinico, que vara en dependencia de si existe un predominio de la sntesis de glucocorticoides, mineraloeorcoides o andrgenos. La sntesis insuficiente de los esteroides cortieales puede ser primaria (enfermedad de Addison) o secundaria, debido aun exceso en la s e a d n de la ACTFL Existen diferenteslmstornos pentic~s que afectan la sfntesis de las enzimas de la va formadora de esteroides cormprarrenales, y producen hiperplasia suprarrenal. Losfeoemmoeitomasson tumores del tejidoemmande la mdula suprarrenal, con hiperseereein de las cateeolaminas. El hipogonadismomasnilino se debe a una deficiencia gentica de las enzimas que participan en la sntesis de la testostemna en los tesculos, o como multado de un defectn en la accin periferica de la hormona. Estos trastornos traen como consecuencia un seudohermafmdiitiFmo masculino. El hipogonadismo femenino p r o v a la disminucin de la ovulacin, la liberacin de las bomonas ovricas, o ambos tipos de afectaciones. El hiperparatimidismo determina la aparicin de la hipercalcemia y la bipofosfatemia, y el aumento de la reabsorcin sea. Puede ser primario, por un aumento en la sntesis de la PTH, o secundario a determinados trastornos que provocan resistencia a la accin de dicha hormona. El hipopararoiodismo se acompaa de la disminucin del calcio inico s k i w y la elevacin de los niveles de fosfato. El seudobipoparamidhuo es una enfermedad gentica, debida a una disminucin de la concentracin y capacidad funcional dela protena G, lo cual afecta la activacin de la enzima aden fielasa por la PTH. ' o puede ser provocado por tumores de las clulas P de los El hipe ' Motes panereticos, o puede ser consecuencia de una afectacin del catabolismo de la insulioa, como oeum en el caso de los trastonios hepticos graves.
"

E j e r c i c i o s
1 . En qu consisten los trastornos primarios y secundarios de la produccin de hormonas? nstrelo mediante ejemplos. 2. Explique las posibles causas que determinan, que aun en presencia de cantidades normales o elevadas de una hormona, no se produzca una adecuada respuesta por el rgano diana. 3. ;Mediante qu procedimientos clnicos y bioqumicos usteddeterminana si una hiperfuncin corcosuprarrenales primaria o secundaria? 4. Un paciente acude al mdico por presentar un aumento de volumen de la tiroides que le ocasiona trastorno de la deglucin. Cules podran ser las causas de esta afeccin y qu conducta seguira para realizar el diagnstico? 5. Explique los trastornos genticos que provocan la hiperplasia suprarrenal y la correlacin que existe entre las diferentes afectaciones hioqumicas y los cuadros clnicos que presentan. 6. iQ" elementoscinicosy hioqunicos le permitiran diferenciar un hipogonadiismo masculino por deficienciade la enzima 17-a-hidroxilasa,de otro provocado por el dficit de la enzima 5-a-reductasa? 7. Cmo diferenciaraun hipoparatiroidismode un seudohipoparatiroidismo? 8. Justifique bioqumicamente el cuadro clnico que presenta un paciente con panhipopituitarisrno. 9. Cules endocrinopatas pueden causar hipoglicemia? Explique. 10. Qu consecuencias traera para un feto cromosmicamentemasculino, no poseer la enzima 5-a-reductasa?Fundamente bioqumicamentesu respuesta. 11.Qu consecuenciastraera para un feto XX no poseer la enzima 21-hidroxilasa? Fundamente bioqumicamentesu respuesta. 12. Qu consecuencias traera para un feto padecer una hiperplasia snprarrenalcongnita? a) Si es cromosmicamenteunahembra. h) Si es cromosmicamenteun varn. muidamente hioqumicamente su respuesta.

Los virus constituyen una forma de existencia de la materia viva y son los agentes infetciososmspequeos que se conocen en la actualidad (de 20 a 300 nm de dimetro); contienen como genoma una clase nica de cido nucleico (ADN ARN). Se planteaque una parcula viral es unaestructura que tiene lacapacidadde transferir el &ido nucleicode una clula a otra y es considerada como un organelo extracelular. Los virns son parsitos intracelulares obligados a nivel gentico, por lo que necesitan de la maquinaria biosinttica de la clula husped para poder sintetizar sus macromolculas especfim, requehdas para la produccin de la progenie viral. En este captulo trataremos los aspectos generales de la composicin de estos organismos y estudiaremos los mecanismos de infeccin y replicacin de varios tipos de virus, ascomo la participacinde algunos de ellosen la transformacinmagnade determinadasclulas.

Definiciones en virolopa
Existen algunos conceptos importantes que deben tenerse en cuenta para poder hablar en trminos virolgicos; a continuacinmencionamos los ms frecuentes: CbpQkle. Constituye la cubierta protenica que envuelve al cido nucleico del genoma. Las cpsides vacas pueden ser subproductosdel ciclo de replicacin de los virus, con simetra icosadrica. NudeoeBpside. No es ms que la cpside con el cido nucleico encapsulado. Unidades esiruehirales. Constituyen los bloques protenicos bsicos de la envoltura. Suelen ser una acumulacin de ms de un polipptido no idntico. Capdmema Son las unidades morfolgicas que se observan al microscopio electrnico sobre la superficiede las partculas virales icosadricas. Envdtura. Membrana que contiene Upidos y circnnda a determinadaspart'cuias virales. Se adquiere durante la maduracin del virus, por un proceso de gemacin a travs de una membranacelular. En la superfkie de la envoltura quedan expuestas las gcoprotenascodicadaspor el virus. V i Es la particda vira1completa infectante,que en el caso de los virus desnudos (Adenovirus, Picornavirus, Papovavirus) puede ser idntica a la nucleocpside. Esta estmctnra, el virin, siwe para trasmitir el cido nucleico viral de una clula a otra. Virus defectuoso. No es ms que una partcula viral, que est funcionalmente deficiente en algunos aspectos de la replicacin. El virus defectuosopuede interferir enla replicacin de un virusnormal.

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Cpside
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En la figura 78.1 se muestran algunos de los componentes estructurales de un vims maduro (Adenovinis).

Clasificacin de los virus

Se han descrito diferentes propiedades que constituyen las bases para la clasificacin de los virus. La cantidad de informacin existentepara cada categora no es uniforme en todos los virus. Las principales propiedades descritas, en orden de importancia,son:

ADN

Fuente: Fields BN et al.: Virologv (Volume 1). 3rd edition. Lippineott-Raven Publishers, 1996. Fig. 78.1. Diagrama d e la particula de Adenovirus, donde se muestran las diferentes componentes de la estructura viral: ADN y cpside; formando parte de esta ltima se cncuentran las hexanas (trimeras de polipptidos) y las pentonas (constituidas por una base pentamrica y una fibra trimriea). Tanto las hexonas como las pentonas participan en la unin del virus a la clula husped.

1. Tipo de cido nucleico (ADN 6 ARN); cadena nica o doble; estrategia de replicacin. 2. Tamao y morfologa, incluyendo el tipo de simetra, el nmero de capsmerosy la presencia o ausencia de envoltura. 3. Susceptibilidad a agentes qumicos y fsicos, en especial al ter. 4. Presencia de enzimas especificas, en especial ARN y ADN polimerasas, que intervienen en la replicacin del genoma, y la neuramidinasa necesaria para la liheracin de algunas partculas virales (como es el caso del virus de la Influenza). 5. Propiedades inmunolgicas. 6. Mtodos natnrales de trasmisin. 7. Husped, tropismo y tejidos celulares. 8. Anatomopatologa, incluyendo la formacin de cuerpos de inclusin. 9. Sintomatologa (enfermedades generalizadas o localizadasen diferentes rganos como: SNC, aparatos respiratorios y digestivo, enfermedades de trasmisin sexual Y otras).

Tipos de simetra de las partculas virales

Los adelantos en las tcnicas de difraccincon rayos X, as como en la microscopia electrnica, han hecho posible la resolucin de diferencias sutiles en la morfologa bsica de los vinis. El estudio de la morfologa vira1 al microscopio electrnico se realiza mediante la tincin negativa. La arquitectura viral puede agruparse en 3tipos, sobre la base de la conformacin de las suhunidadesmotiolgicas: 1.Simetra cbica: Adenovirus, Rotavirus, Herpesvirus (Figs.78.2a y 78.2b). 2. Simetra helicoidal: Ortomixovirus, virus del mosaico del tabaco (Fig. 78.3). 3. Simetra compleja (Poxvirus).

Fuente: Firlds BN et al.: Virology (Volume 1).3rd editian. Lippineott-Raven Publishers, 1996. Fig. 78.2. Reconstruccin tridimensional de partienlas virales can simetra icosadrica a partir de mierografia electrnica: a) Rotavirus, virus de ARN, desnudo; h) Hcrpesvirus, virus de ADN, envuelto.

Composici6n qumica de los virus

Las protenas estrncturalesdelos virns desempean variasfuncionesimportantes, entre ellas facilitar la transferencia del cido nucleico viral de una clula husped a otra; sirven,al mismo tiempo, para proteger al genoma viral contra lainactivacinpor las nudeasas; participan en la adhesin de la partcula viral a una clula sensible y proporcionan la simetra estructuralde dicha partcula. Las protenas, adems, determinan las caractersticas antignicasdel virus. La reaccin inmunitaria de proteccin del husped se dirige contra los determinantes antignicos de las protenas o las glicoprotenasque se encuentran expuestas sobre la superficiede la partcula viral. Algunas protenas de superficietambin manifiestan actividades especficas, por ejemplo, la hemaglntinina del virus de la Influenza, que aglutina los eritrocitos. Existen otros virus que poseen enzimas dentro de los viriones. Las enzimas se encuentran en cantidades muy pequeas y, probablemente, carecen de importancia para la estrnctura de las part'culas virales; sin embargo, son indispensables para iniciar el ciclo de replicacin viral cuando el virin entra en la clula husped, por ejemplo: la ARN polimerasa que poseen los virus con genoma de ARN de sentido negativo (Ortomkovirw, Rabdovim),la cual se requiere paracopiarlos primeros ARNm; y la transwiptasa inversa,enzima de los retrovim que elabora una copia de ADN a partir del ARN Wal, y constituye una etapa esencial en su replicacin y en la transformacin de la clula husped.

Fuente: Fields BN et al.: Virology (Volume 1). 3rd edition. Lippincott-Raven Publishers, 1996. Fig. 78.3. Diagrama del virus del mosaico del tabaco, el cual presenta una simetra heliddal. Existen 16 lfl subunidades por vuelta de la hlice y 3 nucletidos del AKN unidos a cada subunidad.

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8
S&:

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Los virus contienen una sola clase de cido nucleico, ya sea ADN ARN, que codifica la informacin+gentica necesaria para la replicacin de ste. El genoma puede ser de una sola cadena o de doble cadena, circular o lineal, segmentadoo no. Las caractersticas principales para la clasificacin de los virns en .familiasse presentan en los cuadros 78.1 y 78.2.
cuadro 78.1. Familias de virus ARNque contienen los virusaniniales yhumanos

!l
Famia viral
- -

Caractersticas
ARN de simple cadena, positivo, no seg-

menlado,desnudo Togavindae, Elavivnidae(virus del dengue) Coronaviridae(Comnah),Arteririndae Orden Mononegavirales: Pamyxovindae, Rabdovindae, Filovindae(virusEbula) Ortom~orindae(virus de la Influenza), Bmyavidae, Amviridae Reoviridae (Rotavinis), Birnavindae
ARN de simple cadena, positivo, no seg-

mentado, envuelto
ARN de simple cadena, positivo,no seg-

mentado,envuelto. Transaipananidada
ARN de simple cadena, negativo, no segmenado, ennielto ARN de simple cadena, negativo, segmen-

tado,ennielto
ARN de doble cadena, positivo, segmentado,

desnudo
ARN de simple cadena,positivo,un paso de reh.otrdpOn a ADN en su repticaan

Cuadm (MFamilias de virus ADN que contienen los virus animales y humanos

Familia vira1 Hepadnariridae(vimsde la hepatitis B)

Caractersticas A D N de doble cadena-simplecadena,envuelto-desnudo.Paso de retmtranscripcinen su rzptiocin ADN de simple cadena, desnudo ADN de doble cadena,desnudo A D N de doble cadena,envuelto

Cimvindae, Parvoriridae(F'arvovirus B19) Papovaviiidae(wuCde ios papilomas), Adenoriridw Herpesviridae (virns del herpa simple), Poxvindae,iridoriridae

Existen, adems, otros agentes que no estn incluidos en ninguna de las familias virales conocidas y se denominan agentes subvirales; entre ellos se encuentran los virus satlites, los virioides y los agentes de las encefalitis espongiformes (priones); estos ltimos se tratarn ms adelante. Todaslas f d a s principalesde uinisde ADN, citadas en el cuadro, tienen genomas que son molculas con conf&racin lineal o circular. Los ARN virales se encuentran en varias formas. El ARN puede ser una sola molcula lineal (Pieornavims).Para otros virus (Ortomixovirus),el genoma consiste en vanos segmentos de ARN. Entre los virus de ARN existen los llamados virus de ARN de sentido positivo (Picornavirus y Togavirus), los cuales son infectantes. E 1 ARN que se asla de los virus de sentido negativo, como los Rabdovirns y Ortomixovims, no es infeccioso (ver replicacin). La secuencia y composicin de los nucletidos de cada cido nucleico viral son distintivas. Unade las propiedades para caracterizarloses su contenido en gnanina citofina Actualmente,uno de los mtodos quems se emplean para analizar y comparar los genomasvirales de ADN es el anlisis con endonucleasas de restriccin, que no son ms que euzimas que segmentan el ADN en secuencias especficas de n&letidos. Cada genomaproducir un patrn caracterstico de fragmentos de ADN, despus de la segmentacin con una enzima particular. Las tcnicasdehibridacin moleeular (ADNADN, ADN-ARN, ARN-ARN)permiten estudiar la transcripcindel genoma viral dentro de la clula infectada, lo mismo que comparar la relacin que guardan entre s diferentes virus; esto ltimo tambin se puede realizar mediante la tcnica de secuenciacin de cidos uucleicos, la cual constituye una herrramienta muy til en la epidemiologa molecular, pues nos permite conocer los cambios en la secuencia uucleotdica entre los diferentes aislamientosde un mismo virus.
~

s envolturas de Ipidos como parte de su estmctura, por Mltiples v i ~ contienen ejemplo, los Herpesvirus. El Ipido se adquiere cuando la nucleocpside vira1 experimenta una gemacin a travs dela membrana celular durantela maduracin.La gemacin ocurre solamente en los sitios de la clula husped, en los cuales se han insertado L a s protenas virales especficas en la membrana de dicha clula. La composicin especfica fosfolipdica de la cubierta de un virin se determina por el tipo particular de la membrana celular que participa en el proceso de gemacin; por ejemplo, los Herpesvirus geman a travs de la membrana nuclear de la clula husped, y la composicin defosfolpidos de los virus purificadosrevelan los Ipidos de la membrana nuclear. Los vims que contienen Ipidos (vims envueltos)son sensiblesal tratamiento C o n ter y otros solventes orgnicos, por lo que la prdida de los Ipidos va a resultar en la prdida de la infecciosidad viral.

Las cubiertas virales contienen glicoprotenas. En contraste con los Ipidos de las membranasvirales,quesederivandela clula hu&ped,las glimpmtenas de lacubierta estn coditicadas por el virus. Las glicoprotenas son las que fijan la partcula v i d aunaclula blanco (o diana) por la interaccin con un receptor celular. Ellas son, adems, angenos virales importantes y pueden constituir el blanco de los anticuerpos neutralizanles,como es el w o de la hemaglutinina y la neuraminidasa del virus de la Influenza.

Multiplicaande los v h s
Los efectos patognicos de las enfermedades causadas por virus resultan de la interrelaciu de muchos factores:

1 .Efectos txicos de los productos genticos virales en el metabolismo de las clulas infectadas. 2. Reacciones del husped a las clulas infectadas que expresan los genes virales. 3 . Medicaciones de la expresin gentica del husped por interaccionesestructurales o funcionales con el material gentico.
Para que un virus se multiplique,tienequeinfectar primeramente a m a clula. El rango de hospedero define tanto el tipo de tejido celular, como la especie animal que el virus puede infectar y en la cual ste se puede multiplicar, por lo que el rango de hospedero de los diferentes virus vara considerablemente.

Susceptibilidad
Es la capacidad que tiene una clula o un animal de ser infectado, aunque la infeccin puede no ser suficientepara causar una enfermedad clnica demostrable. La infeccin de una clula susceptible no asegura qne ocurra la multiplicacin viral y puede ser productiva, restrictiva, abortiva o latente. La infeccinproductiva tiene lugar en las clulas permisivasy se caracterizapor la produccin de una progenie viral infecciosa. La infeccinabortiva puede ocurrir porque las clulas son susceptibles, pera nopermisivas, oporquesean virus defefavos. Cuando la clula es permisiva, de manera transitoria, se denomina infeccin restrictiva, mientras que la latente es aqulla donde hay persistencia del genoma v i d , perono de lapart'daviralinfeeciocaenlasclulastransitoriamentenopermisivas,sindesmiccin de la clula infectada.

,
,)

' ,

Eventos priaupalea de la multiplica~i611 virai

Constituye la unin especfica de una protena viral (antirreceptor) a un constituyente de la superficiecelular (receptor). El ejemplo clsico de antirreceptor es la hemaglutinina del virus de la Influenza. Los v i m complejos pueden tener ms de unaespeciedemolcula antirreceptora, distribuida en la superficiev i d ; y la molcula wrreceptora puede tener,a su vez, msde un dominio,^ cada dominiopuede reaccionar con diferentes receptores. Para la adhesin se requiere una elevada concentracinde iones. Los receptores celulares estn constituidosprincipalmente por glicoprotenas.

La penetracin es un pasu dependiente de energa. sta ocurre casi instantneamente despuk de la adhesin e incluye 1de 3 mecanismos:
l. l'raslucdcin del viruscompletu a travs de la membrana plasmtica. 2. Endocitosis, con fonnachin de vesculas ciiopla~mtic;a. 3 . Fusin de la envoltura vira1 ron la n~emhrma celular.

Es el trmino aplicado a los eventos que tienen lugar despus de la penetracin. En este proceso es donde ocurre la prdida de la cubierta para los vims envueltos y la liberacin de la nucleocpside en el citoplasma (por ejemplo, Picornavirus, Ortomixovirus,Paramixovirus)o en el ncleo (Herpesvirns, Adenovinis).

Los principales eventosque deben ocurrir para que se lleve a cabo la multiplicacin vira1 son:
1.Codificacin y organizacin de los genes virales. 2. Expresin y replicacin de los genomas virales. 3. Ensamblaje y maduracin de la progenie viral.

Los genes virales se codifican en genomas de ARN ADN. Estos genomas pueden ser de simple o de doble cadena. Adems, ellos pueden ser monopartite (todos los genes del virus estn contenidos en un solo cromosoma) o multipartite (los genes virales estn distribuidos entre diferentes cromosomas que, juntos, constituyen el genoma viral). Entre los virus de ARN, slo los miembros dela familia Reovirus contienen genoma dedoble cadena y son, adems,multiparte, pues contienen de 10 a 12 segmentos. El resto de los virus es de simple cadena. Entre los virus de ADN, con excepcin de los Parvovirus, todos son de doble cadena y contienen genoma monopartite.

Virus de ARNpositivo que codificanpara un solo ARNgenmico. Los virus de ARN positivos, por convencin, son aquellos cuyos genomas sirven como ARNm (Fig. 78.4). Despus de la entrada a la clula, sus ARN genmicos se unen a los ribosomas y sus dominios codficantesson traducidos en su integridad. El producto de la traduccin es una poliprotena, la cual es escindida posteriormente. Estos ARN genmicossirven comomoldes parala sntesis de ARN de cadena negativa. La cadena de ARN negativa, a su vez, sirve de molde para otras cadenas positivas de ARN. La progenie de ARN positivo va a servir como ARNm que codificapara la sntesis de la poliprotena, para producir ms cadenas de ARN negativo o para constituir pariculas de progenie viral.

ARN parental cadena positiva b

Poliprotena codificada por el genoma completo

ARN Cadena negativa

Cadena positiva Progenie vira1

1
Fig 78.4. Esquema de la replieacin de los virus de ARN positivos.

Estos vims Vnis deARNde cadenapositiva para uno o mFARNs ~ubgen~cos. se diferencian de los anteriores en que slo uno (el extremo 5 ') del ARN genmico est disponible para la traduccin en el primer paso de la sntesis de protenas. El centro de la repiicacin de los vims ARNde cadena positiva es la capacidad del ARN genmico, de servir como ARNm despus de la infeccin. Esto provoca que las enzimas responsables de la replicacin del genoma sean sintetizadas despus de la infeccin y no necesitan ser portadas por el virin, por lo que este ARN es infeccioso. Por otro lado, pmducto de que todos los genomasde ARN positivos son monopartitos, y por ello tienen todos sus genes contenidos en un solo cromosoma. los productos iniciales de la traduccin son una sola poliprotena que posteriormente debe ser escindida, para constituir las protenas del virin. Retrovirus. Constituyen el tercer grupo de los vims de ARN de cadena simple. Caractersticamente, los genomas son monopartitos, pero diploides, y las 2 cadenas idnticas estn unidas parcialmente por puentes de hidrgeno a otra macromolcula o pares de base, de un modo no conocido an. La funcindel ARN genmico es servir como molde para la sntesis del ADN viral. El virin contiene, adems del genoma, una ADN polimerasa dependientedel ARN, denominada transcriptasa inversa (Ti) y una mezcla de ARN de transferencia del husped, de los cuales uno funciona como cebador. En la figura 78.5 se muestran los procesos esencialesdel ciclo repmductivo, que son los siguientes:

1.Unin del complejo ARNt- Ti al ARN genmico. 2. Sntesis de una copia de ADN complementaria al ARN. 3. Digestin del ARN genmica pornncleasas que atacan slo al ARN en los hbridos ADN-ARN. 4. Sntesis de la cadena complementaria del ADN viral.
Este ADN de doble cadena es transportado al ncleo de la clula huspeddonde se integra. La expresin de losgenes virales puede no ocurrir inmediatamente.Todos los r e t r h w contienen sitios cis~acti para los factorescelulares de transactivacin. Adems, la expresin de los genes de los Retrolirus puede estar influida por citoquinasy por protenas expresadaspor otros virus. W m d e ARNnegativosnosepen&dos. Las virus con este tipode ARN contienen un genoma con polaridad anlimensajera y por lo tanto no son infecciosos. Producto de que sus genomas deben ser transcritos a ARNm, y la clula carece de las enzimas apropiadas, todos los ARN negativos portan dentro del virin una transcriptasa. La transcripcindel genoma es el primer evento despus de la entrada del virus a la clula. El proceso produce mltiples ARNm funcionales (Fig. 78.6).

Enzima del virin transcriptasa inversa ADN lineal ARN parental

+ ,

Va al ncleo

ADN integrado al ADN husped

T

ARNm

6 Protenas - 4

Progenie de ARN

Fig. 78.5. Eventos en la replicacin de las Reiravirus.

Progenie viral

ARN (-) parental segmentado

Enzimas Virin

ARN (+) m b

Prptenas

segmentado

progenie Fig. 78.6. Esquema de la replieaein de las virus ARN negativos.

Progenie viral

+ it/ 44

La replicacin comienza bajo la direccin de las protenas virales recin sintetizadas; una cadena positiva larga es sintetizada y sirve como molde para la sntesis de ARNs genmicos de cadena negativa. En estos virus el ARN funciona alternando, como molde para la transcripcin y la replicacin, por ejemplo: Paramixovirus,Filovipus,Rabdovinis.E&n,adems,vinisdeARN decadenanegativa segmentados, entre ellos Ortomixovirus y Arenavim.

En el cuadro 78.3 se muestran los tipos de virus de ADN y sus miembros.

Ciiadm 783. Virus de ADNy susmiembms

Tipos de virus Vims de ADN de doble cadena que se replican en el ndeo Virns de ADN dedoble cadena quese replican enel citoplasma V i m de ADN de simple cadena

Miembros Papovavirus,Adenovi~s,Herpesvirus Poxvirus

Parvovinis

La formams comn de replicacin de los Wus de ADN es la primera; por eso slo deseribiwnos sta. Los genomas de los Papovavirns, Adenovirns y Herpesvirus son transcntos y replicados en el ncleo, por eUo ualan las emimashansciipcionaiespara la generacin de ARNm. Las ADNs de los Wus son infecciosos. El programa de transcripcinconsiste, al menos, en 2 ciclos de transcripcin para los Papovavirus, y 3 para los Herpesvirusy Adenovim. Existen 2 sitios cis-acti dentro del dominio de los genes virales. Un sitio hace posible la unin de los factores celulares transcripcionales y la iniciacin de la transcripcin.El segundositio hace pasible la interaccindeesosgenescon las protenas regulatonas virales, las cuales regulan las transcripciones positiva y negativa. En el caso de algunos Herpesvhs, una protena del virin, introducida en la clula durante la infeccin, puede traqactivar el primer grnpo de genes virales a ser expresados. Los Papovavirns codifican una protena que se une al origen de la sntesis del ADN viral, estimula el complejo de polimerasas celulares a replicar el ADN viral, y a 6 como helicasa. Los Adenouiniscodificanuna ADNpolimerw,pero dependen de laclula husped para todas las otras funciones involncradasen la sntesis de su ADN. Los Herpesvim codifican numerosas protenas que tienen que ver con la va dela sntesis de ADN. stas incluyen 7 protenas que son necesarias y suficientes para la sntesis de ADN dependiente del origen viral (Fig. 78.7).

ADN
parental

1 .
Progenie viral

\\
ARNms

ARNm

Protenas

Protenas

Fig. 78.7. Eventos en la replicacin del Herpesvirus, un virus ADN.

MADURACIN Y EGRESO DEL VTRUS DE LA CLULAINTECTADA ENSAMBLAJE,

Los virns utilizan 3 estrategias fundamentalespara su ensamblaje,maduracin y salida de la clula infectada. La primera, ejemplificada por los Picornavirus, Reovirus, Papovavirus y Adenovirns, entre otros, incluye el ensamblaje y maduracin iutracelular; ste puede realizarse en el ncleo (Adenovirus,Papovavirns)o en el citoplasma (Picornavirus, Reovirus) de la clula infectada. Como regla, todos los v i m desnudos quese ensamblan y adquieren su infectividad dentro dela clula, dependen en gran medida deladesintegracin de la clula infectada para su liberacin; en este paso participan las protenas estructuralesdel virin. La segunda estrategia es empleada por los virus envueltos. ejemplificados por todos los virns de ARN de cadena negativa, los Togavirus y los Retrovirns. Para este grupo, el ltimo paso de ensamblaje viral se encuentra ligado al egreso de stos de la clulainfectada AlgunasdelasprotenasviralesxeumentraninSertadasenlamembrana plasmtica de la clula husped; las nucleocpsidesvirales se unen a zonas especficas dela membrana celular,dondeseencuentran ancladas dichas protenas; en este pmceso el nuevo vinn es transportado o "gema" al ambiente extracelular; en algunos casos ocurren clivajes o rearreglos de algunas delas protenas de superficiedel virin durante este proceso, impartindole al nuevo vinn formado, la capacidad de infectar clulas. Estos tipos de virus pueden ser citolticoso no.

La tercera estrategia es ejemplificada por los Herpesvirus, los cuales ensamblan i m envueltos, sus nucleocpsidesen el ncleo de la clulainfectada. Contranoa otros v la adquisicin dela envoltura viral y la maduracin ocurren en la lmina interna de la membrana nuclear. Los Herpesvirus son citolticos e invariablementedestruyen las clulas en las que ellos se multiplican. Como el resto de los virus envueltos, los Herpesvims imparten a la clula infectada nuevas especficidadesantignicas, debido a la insercin de glicoprotenas virales en la superficie celular.

Interaecinvirus-clula
El estudio dela interaccin virus-clula comenz con el crecimiento delos virus en cultivos celulares, que constituyen una de las formas clsicas de detectar la replicacin viral en las clulas mediante cambios en la estructura celular o efecto citopatognico. Algunos de los ms comunes son: redondeamiento celular y desprendimiento de la superficie a la que se encuentran adheridas las clulas, lisis celular, formacin de sincitios y de cuerpos de inclusin. La infeccin de una clula por virus puede llevar a alguna de las muchas posibles vas:

1. Puede ocurrir una infeccin no productiva, en la cual la replicacin viral es hloqueada, y la clula husped puede o no sobrevivir; despus de una infeccin no productiva, el genoma virai puede perderse de la clula husped. Alternativamente, la informacin gentica viral puede integrarse al ADN de la clula o puede persistir en forma de episoma en las clulas sobrevivientes. Si las propiedades de crecimientode las clulas se alteran, esto pudiera constituir un proceso de transformacin oncognica. Por otro lado, el virus puede mantenerse con expresin de pocos genes virales, dando como resultado una infeccin latente. 2. Una infeccin virai productiva, que puede resultar en la muerte y lisis celular. 3. La clula puede sobrevivir y continuar produciendo virus a bajo nivel, dando como resultado una infeccin crnica.

Gentica viral
Algunos virus tienen una alta proporcin de mntantes, al ser pasados en el laboratorioen ausencia de ningn mutgeno conocido. Estas mutaciones espontneas se acumulan en el genoma de los virus e introducen la variacin fenotpica que est sujeta a presiones de seleccin durante la evolucin de un virus. La cuanta de mutaciones espontneas puede ser tan bajacomo 10" a lo-" por nucIeiidoincorporado en los genomas de ADN. En los genomas de ARN, la magnitud de las mutaciones es nucletido incorporado. Estas mucho ms elevada en el orden de lo-' a 10-4por diferencias se deben a que la replicacin de los genomas de ARN presenta menor fidelidad que la de los ADN. Las tcnicas de biologa molecular han permitido el examen ms directo de las mutaciones espontneas. Por otro lado, ellas tambin permiten introducir easi cualquier tipo de mutacin en muchos virus. El primer paso parala mutacin es clonar la secuencia de inters como una molcula de ADN recombinante; seguidamente,la secuencia clonada se somete a mutagnesis in vitro.El paso siguientees introducir la secuenciamutadadentro del genoma viral, lo cual permite determinar los fenotipos de las mntantes virales. Todo ello es el

Fundamento parala obtencin de vacunas recombinante (un ejemplo es la produccin de la vacuna cubana contra el virus de la hepatitis B).

Tipos de mutaciones
Existen distintos tipos de mutaciones: mutaciones nulas, donde se inactiva completamentela funcin de un gen; mutaciones sensibles a la temperatura; mutaciones sensibles al fro; mutaciones por alteracin de la morfologa de placa; mutaciones de rango de hospedero; mutaciones que producen mutantes resistentes a drogas y mutaciones de resistencia de escape a anticuerpos.

Interaccin virus-virusy virus-husped que afecta el fenotipo

Las interacciones entre diferentes virus en infecciones mixtas constituyen el fundamento para L o s anlisis genticos de recombinacin y complementacin. stos incluyen la mezcla fenotpica, la interferencia, y los defectosentre virus, as como la integracin y la persistencia entre los virus y la clula husped.

Mezcla fenotipica
Se refiere al proceso mediante el cual una progenie viral mixta contiene protenas estructurales(cpside o envoltura),derivadas de ambos Wus parentales. Esta mezcla de genomas y protenas estrncturales resulta en partculas virales, en las cuales las propiedades fenotpicas del virin no reflejan el potencial fenotpico del geuoma completo. No obstante, en infeccin subsecuente,la expresin del genoma resulta en una progenie con genotipo y fenotipocongruentes. Por ello,la mezcla fenotpica es un fenmeno transitono. Esto ha sido observado en los Enterovirus.

Interferencia
En losvirus animalesse han detectado muchos tipos de interferencia; la de ms inters es la intererencia homloga, la cual ocurre dentro de la clula y es exhibida slo contra virus homlogos o estrechamente relacionados. Un ejemplo de ello es lo que ocurre en vims que han sido pasados por el laboratorio de forma seriada y a alta multiplkidadEn estasituacin, el total de p ~ ' c u l a s virales permanece relativamente constante, pero el cultivo de virus infeccioso decae con el incremento del nmero de pases, lo que parece deberse a que existe una interferencia con el crecimiento de la porcin infecciosa de la poblacin viral. El examen de las poblaciones de virus hterferentes ha puesto de manifiesto que una elevada proporcin de los genomas virales contiene deleciones. Se ha propuesto que las mutantes de delecin interfieren con el crecimiento del virus completo, ya que compiten de manera efectiva con el aparato de replicacin.

Los virus defectivos tienen genomas que carecen de funcin adecuada en uno o

ms de los genes esenciales,requeridos para la replicacin viral antnnma. Los virus

Mecanismos de la transfomci6n celular por virus

Los virus tumorales median cambios en el comportamiento de la clula, con ayuda de un volumen limitado de informacin gentica. El proceso se efecta por 2 patrones generales:

1.El virus tumoral introduce un gen transformador nuevo a la clula. 2. El virus induce o altera la expresin de un gen celular preexistente. En uno u otro caso, el resultado es que la clula pierde el control de la regulacin normal de los procesos de crecimiento.
La induccin de la transformacin oncognica es el resultado de la funcin de 2 tipos diferentes de genes celulares y sus productos: oncogenes y genes supresores de tumor. Los oncogenes codifican componentes de seal de transduccin celular y su activacin provoca una seal de crecimiento; ste es el proceso que ocurre en el caso de los Retrovinis. En contraste,los genes supresoresde hunor codifican para reguladores negativos del crecimiento celular, particularmente del ciclo celular, y su inactivacin elimina los controles de atenuacin. Las actividades oncognicas ms frecuentes de los virus tumorales de ADN funcionan mediante los genes supresores tumorales. La activacin de los oncogenes celulares puede ocurrir por las diferentes formas de los eventos de mutagnesis, incluyendo, adems de la intervencin viral, mutaciones previrales, traslocacin cromosmica y amplificacin. Mediante las tcnicas de transfeccin de ADN se han identificado numerosos genes que pueden conferir propiedades oncognicas a las clulas receptoras. Algunos de stos, estrechamente ligados a los oncogenes, han sido identificados en los Retrovirns. No obstante, la funcin normal de todos estos genes est relacionada con el control del crecimiento celular, lo que proporciona una evidencia de su potencial oncognico. La inactivacingenticade los genes supresoresde tumores desempea una funcin determinante en la aparicin del cncer humano. La inacvaciu inducida por virus y otros mecanismos en los supresores tumorales tiene el mismo efecto neto, como ha sido comprobado en carcinomas cervicales; por ello, el estudio de los eventos que siguen a la inactivacin por protenas virales, ha sido y continuar siendo un reto importante para el estudio del cncer humano. Los virus que inducen tumores pueden ser de ADN (como los Poliomavirus, Herpesvirus y PVH) o de ARN (como los Retrovirus). La replicacin de los Retrovirus oncoguicos no es citocida y por ello la transformacin oncognica puede ocurrir coexistiendo con la produccin de una progenie viral infecciosa; sin embargo, la produccin de partculas infecciosas no es un requisito de oncognesis. En el caso de los virus tumorales ADN, la sntesis de la progenie infecciosa s est ligada a la muerte celular y, por tanto, la transformacin oncognica slo puede ocurrir si el ciclo de vida del virus resulta abortado.

Los priones son partculas protenicas pequeas que carecen de cidos nucleicos detectables, pero son trasmisibles entre las especies seleccionadas,donde inducen una enfermedad neurolgica fatal, las encefalitis espongiformes. Las fracciones microsomales de material de cerebro infectado con priones contienen numerosos microsomas, en los cuales -cuando son sometidos a protelisis limitada- se observan 1nm de dimetro y 165nm delongitud,lisas, y deforma esfrica.Estas pariculas de 1 esferas estn compuestas principalmente de una protena designada como la isoforma scrapiede la protena prin, o PrP'. Un proceso postranscripcional, no esclarecido

an, genera PrP" aparr de la isoforma normal de la protena PrF. Ambas isofonnas son codificadas por una copia sencilla de un gen cromosomal del husped. La multiplicacin e infedividad del prin incluye la conversin postranscripcional de molfulai dePrlr a molculm de PrPr ;se presume que estas ltimas se combinan con las molculas codificadas por las protenas del husped, PrP', y producen un incrementode nuevas molculas PrP'. Se ha demostrado que los priones son los causantes de diversas afecciones, entre las que pueden mencionarselas encefalitisespongiformesbovina y felina, y el scrapie de las ovejas; tambin estn asociados a infecciones humanas como el agente Kuru, enfermedadde Creuizfelt-Jacob, el sndromede Gerstmam-Strussler-Seheinker,y en el insomnio f a m i l i fatal. La trasmisin de estas enfermedades incluye el consumo de alimentos que contengan tejidos infectados; la enfermedad de KUN se piensa que es el resultado del consumo de tejido cerebral durante rituales de canibalismo. Los priones resisten la inactivacin por nucleasas, luz ultravioleta, tratamientos con psoralenos, cationesdivalentes, hidroxilamina,formaldehdo,altas tempetaturas o proteasas. Su infectividad puede verse disminuida si se les somete a la accin prolongada con proteasas o por el tratamiento con nrea, ebullicin con detergentes, lcalis (pH> 10)y autoclave a 132"Cpor ms de 2 h, entre otros.

Es frecuente que se hagan distincionesentrelos v i m que infectan clulas eucariotas y los que infectan clulas procariotas; entre estos ltimos se encuentran los fagos o hacterifagos. Gran parte dela comprensin del mecanismo deinfeccin delos virus y muchos de los conceptos fundamentales de la biologa molecular, han surgido de la investigacin de los fagos. Los fagos estn constituidospor un cido nucleico, rodeado por una cubierta de protena. Excepcionalmente, algunos fagos tambin contienen Ipidos. Muchos fagos contienen ADN de doble cadena, otros poseen ARN monocatenario y algunos, ADN de cadena simple. Muchos fagos contienen estructuras especializadas, que se adhieren a receptores de la superficie celular e inyectan el cido nucleico hacia la clula hospedera (Fig. 78.8). Los fagos, sobre la base de su propagacin, pueden dividirse en:
1. I:ago\ lticns. Producen niimeruvw copi~s de cllot iiiism~~s .! al hairrlodc\lm!.cn la c6ltil~ hu6sprd (un ejemplo di, este tipo es el f;igu 'T-lisode I;scl~rrirhiucoli).

2. Fagos moderados. Tienen la propiedad de entrar a un estado no E c o de profago, en el que la replicacin de su cido nucleico est ligada a la replicacin del ADN de la clula husped. Las bacterias que portan estos fagos se denominan lisognicas, debido a que una determinadaseal fisiolgica puede desencadenar un ciclo Itico del virus y cansar la muerte de la clula hospedera, as como la liberacin de numerosas copias delfago (un ejemplo defago moderado es elfago h de ESchenchia col1l. El ADN de doble cadena de numerosos fagostiticos es lineal, y la primera etapa en su replicacin consiste en la formacin de un ADN circular. Este proceso depende de la existencia de extremos cohesivos, con secuencias complementarias de bases nitrogenadas, que se unen por una ligasa y se forma el enlace fosfodister 3 5 , originndose un ADN circular, el cual puede replicarse de manera semejante a otros ADN circulares. La escisin del ADN circular produce de nuevo ADN Lineal, que se empaquefa dentro de la envoltura protenica y as se origina la progenie de nuevos fagos. A la recombinacin gentica de las bacterias mediada por fagos se le denomina transdnccin, y puede ser generalizada o especializada.

Placa de la base
~ i 78.8. ~ ~ . ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ t del ~ ~ i i > fago T4 donde pueden apreciarse sus estructuras fundamentales: ea. beqa, cuello, vaina y placa de la base.

Resumen
Los virus son los agentes infdosos ms pequeos que se conocen en la setualidad. F d n constituidas por una sola elase de dado nndeico, ADN 6 ARN; nna eabierta pmte(nica, que se denomina &@de y por fuera de la misma una membrana lipdica o envoltnra. Los virus son parsitos intracelnlares obligados, ya que requieren de la maquinaria gentica de la elnla husped para poder sintetizar pusmacmmoLculas @cas, requeridas para la pmduecin de la progenie viral. Existen una serie de propiedades Ww, qumicas y biolgicas que son las que permiten clasicar a los viras en familias. Los principales tipos de simera de las parti'& virales son la cbica, la helicoidal y la compleja Todos las virns estao eompuestm por protenas, cuya hincin principal es facilitar la transferencia del dcido nudeico Wal de una clula husped a otra; ellas pueden ser estrncturales y no estruetnralea; otro de los componentes es el dcido nndeico viral, el cual eodiea la iniormacin gentica necesaria para la replicacin del viras; las Ipidos, as como los carbohidratos viralfs, forman parte de la envoltura de esios agentes. Los viras 5610 se replican en las elulas vivas; los eventos esenciales son la adhesin, la penetracin y prdida de la cubierta, la mulplieaciu virsl, el ensamhwe y la maduraau viral, y la beraein de estos de la &da husped. Todas estm eventos van a variar entre las diferentes familias virales. Entre las viras ARN existen los de polaridad positiva y los de polaridad negativa, a y a s estrategias de replicacin son distintas. En el hnbped Meetado los virns pueden comportarse de diferentes formas; generalmente causan una infeeein aguda, pero tambin pueden establecer una inieeein persistente por largo tiempo,la cuai, a su vez, puede ser latenteo crnica. nimhin existen las Meccioues lenias, que son producidas por priones. En ocasiones, los virns pueden pmdudr nna transiormacin oucognica de la clula husped. La induccin de esta transformacin se debe a la accin de algunos virus sobre los oucogenes y geues s u p m r e s de tumor.

Ejercicios
1.Qu son los virus? ~ C aes l su composicin? 2. ~Cales son los tipos de simetraviral? Cite ejemplos de cada uno. 3. Culesson las funciones de las protenas virales? Mencione algn ejemplo. 4. Explique las diferencias entre la infeccin productiva, la abortiva y la latente. 5. Mencione las caractersticas que diferencian a los virus con genoma ARN positivo de los ARN nepativo. 6. Cuntos tipos de mutaciones virales existen? Nmbrelas. 7. Mencione los diferentes tipos de interaccin virus-virus y virus-clula. Explique una de ellas. 8. Qu funcin pueden tener los virus en la transformacin oncognica? Mencione 3 virus oncognicos. 9. Explique qu es un prin y mencione ejemplos de enfermedades producidas por estos agentes. 10. Qu esun fago? Cmo se clasifican?

El inters de los clnicos por las enzimas sricas empez hace aproximadamente medio siglo, con la demostracin de la utilidad de la determinacin de los niveles de fosfatasa alcalina en el diagnstico de las enfermedades seas y hepatobiliares; de los niveles de fosfatasa cida en el diagnstico del carcinoma de la prstata, y de los de amilasa y lipasa en el diagnstico de las pancreopatas. Pese a la utilidad clnica de estos parmetrosen la enfermedad y a la demostracin de un nmero determinado de otras enzimas del suero durante los siguientes 25 aos, el inters clnico de la enzimologa srica se mantuvo en un relativo letargo hasta 1953.En ese mismo ao, la demostracin deuna transaminasa (la GOT) en el suero de individuos normales, y las observaciones subsiguientes de que el aumento de los niveles de esta enzima eran tiles en el diagnstico de las enfermedadescardacas y hepticas, condujeron a una intensificacin del inters en la enzimologa. Actualmente se han identificado en el suero ms de 50 enzimas. Los niveles de muchas enzimas se han estndiado con extensin en una gran variedad de procesos. Se han aplicado algunas pruebas de enzimas sricas con tanta amplitud en algunos problemas clnicos, que se consideran como procedimientos habituales en el laboratorio. Otras,aunquemuestran claramenteser un reflejo dediversasenfermedades,seUevan a cabo en pocos laboratorios clnicos, porque la prueba en s es tcnicamente difkil o porque la informacinfacilitadaseconsideraque ayudamuy poco a la ya brindada por las enzimas del primer grupo. Otras pruebas tienen un inters de investigacin, ms que un inters clnico, o bien son importantes slo en situaciones clnicas especiales. Otro grupo incluye las enzimas que no se han estudiado suficientemente, para confirmar su utilidad clnica. En este captnlo brindaremos un panorama general de este campo y profundizaremos en algunas de las enzimas de mayor empleo en la actualidad. AdemF, se presenta una visin somera de las aplicaciones ms recientes de las determinacionesenzimticas asociadasa la prdica mdica.

Aspech sobresaentesde I s s e m h m presentes en el suero

Origen Todas las enzimas sricas tienen su origen en las clulas. Muchas proceden de numerosos tejidos, entre ellas la aldolasa, la lctico deshidrogenasa, la fosfo-

hexoisomerasa, la mlico deshidrogenasa y otras. Por otra parte, hay enzimas con una distribucin hstica ms limitada, por ejemplo: la ornitil carbamil transferasa y la alcohol deshidrogenasa se hallan casi exclusivamenteen el hgado. Naturalmente, las alteraciones en la actividad en suero o plasma, de enzimas de amplia distribucin, no aportan una orientacin tan especfica,como la que proporciona una enzima de las confinadasa 1 2 tejidos en particular. Constantemente llegan al espacio extracelular pequesimas cantidades de muchas enzimas intracelulares. En el individuo sano las enzima extracelulares tienen una actividad que vana dentro de lmites muy estrechos. En cambio, hay muchas enfermedadesorgnicas en las que est aumentadala salida de enzimas, bien por el incremento de la permeabilidad delas membranas celulares,o bien por la prdida de la estrnctura celular. Asse originan las modificaciones del nivel enzimticoen el plasma sanguneo, de indudable valor diagnstico.

Entre los espacios intra y extracelular existe un gradiente de concentracin extraordinariamentegrande. Las clulas animalesno estn limitadas, como las vegetales, por una membrana rgida. Susmembranas,entrelas que contamasnoslo la membrana ulasmtica. sino tambin el sistema de endomembranas v las de los orzanelos subcelularescomo las mitocondrias (captulos20 y 3 7 ) , presentan permeabilidad selo que un intercambio rpido lectiva para sustanciasinorgnicas y orgnicas, . permite . y diferenciado de sustancias con el entorno. No es de sorprender, dado el alto gradiente de concentracin existente, que ya con daos poco pronunciados de la membrana salgan ezimas de la clula al espacio extracelular, al lquido intersticial y al plasma sanguneo. Las enzimas que aparecen en el plasma sanguneopueden dividirse no slo por sus efectos,sino tambin por su origen. Las enzimas especficas del plasma son segregadas a stedeformaactiva, y predominantementepor el hgado. Lasendocolinesterasa o colinesterasa srica, ascomo las enzimas de la coagulacin son ejemplos importantes de enzimas que actan en el propio plasma sanguneo. El origen de las e n h inespecfkasplasmticas no siemprepuede determinarse con claridad. Cuando existen enzimas de secrecin, como la amilasa del pncreas o la fosfatasacida de la prstata, el origen es obvio. La importancia dela determinacin de las enzimas rgano-especficas para el diagnstico es fcil de comprender; sin embargo, si se determinan las enzimas ubicuas de las principales vas del metabolismo energtico, que constituyen la mayor parte de las enzimas histicas, resulta dificil la localizacin en un determinado lugar de origen. Las enzimas de secreciny las hsticas no tienen funcin bioqnmica en el plasma, ya queno disponen de sustratos nide coenzimas. Parece oue inmediatamentedesous de la salida de las enzimas de las clulas se producen modificaciones en su actividad cataltica, la cual puede disminuir o aumentar. La molcula enzimtica tambin se modifica en su camino a travs de las capas limtrofesy en el'espacio extracelular,medio extrao a ella. Estas modificaciones,por ejemplo, oxidacin reversible de grupos SH en el centro activo, pueden suprimirse parcialmente por medio de una reactivacin. Un ejemplo de ello es la reactivacin de la creatina quinasamediantela adicin de sustanciasque contienen grnpos sulfidrilos. Cuando existen condiciones patolgicas (enfermedades,intoxicaciones),la membrana celular puede lesionarsede forma reversible o irreversible. Tras una lesin irreversible de la membrana, las clulas necrticas colaboran -en muy escasa medida -en el aumento de las enzimas del suero. La parte principal procede de clulas todava vivas, y como se muestra en el ejemplo de la hepatitis vrica aguda, tambin de clulas lesionadassobrevivientes.Normalmente, en el plasma se encuentra un nivel de enzimas muy constante, con las variaciones conocidas, las cuales dependen de la edad o del

peso, y de otros factores, por ejemplo los casos de la colinesterasa srica (CES) y la glutmico pirvico transaminasa (GPT) en el hgado graso alcohlico, en el estado preclnico. La concentracin de las enzimas se mantiene mediante la desintegracin normal de las clulas, es decir, la destruccin celular fisiolgica; sin embargo, en muchos estudios clnicos se ha demostrado una coincidencia entre la gravedad de la enfermedad y el grado de aumento de la actividad enzimtica en el suero. Todas las prntenas estn sometidas a una renovacin constante. Del mismo modo las enzimasdel organismo vivo se neoforman y transformancontinuamente (porejemplo, activacin de tripsingeno en tripsina), y, por ltimo, se inactivan y descomponen. Al igual que las restantes protenas del plasma sanguneo, se supone que muchas enzimas se desintegranhasta el grado de aminocidos que despus se vuelven a utilizar. Las transformacionesestructurales de las enzimas, a su entrada en el plasma sanguneo, son todava bastante desconocidas. Actualmente se sabe que la prdida de la actividad enzimtica -a lo largo del tiempo- sigue un proceso en 2 fases: una primera fasela constituyela dilucin dela enzima en los espacios vascnlar y extravascular; a esta dispersin le sigue la fase de eliminacin propiamente dicha, la cnal tiene una duracin muy diferente, segn el tipo enzimtico.En esta fase se establece una velocidad constante en su eliminacin. Tras una salida de enzimas de clulas lesionadas, la distribncjn, el transporte y la eliminacin se solapan en procesos parcialmente opuestos. De los resultados de alynas investigaciones se desprende que muchas enzimas celulares (bajo condiciones fisiolgicas) alcanzan primero el intersticio,despus de su salida dela clula, y posteriormente son transportadasal espaciointravascular, a travs de lasvas linfticas. La dispersin de las enzimas en la totalidad del espacioextracelular se manifiesta con especial claridadpor un rpido descenso inicial de la actividad enzimtica, tras su inyeccin intravenosa. A ello le sigue una disminucin lenta del nivel de enzimas en el plasma: la fase de eliminacin enzimtica. La velocidadde la eliminacin es independiente del valor absoluto del nivel enzimtico y sigue una funcin exponencial. Ello permite un clculo sencillo de las constantes de semidesintegracin de las diversas enzimas. Las constantes de semidesintegracinen el plasma son especficaspara cada enzima de una especie, independientemente de la edad y del sexo, y variables entre horas y das. Es de destacar que tambin las isoenzimas aisladas presentan grandes diferencias. La importancia prctica de las diversas constantes de semidesintegracin se observa con claridad en las isoenzimas de la LDH, mientras que las isoenzimas 1 y 2 (tipo miocardio) se utilizan con xito en el diagnstico, debido a su prolongada constante de semidesintegracin, la LDH, (tipo del hgado y msculo esqueltico)apenas es til para el diagnstico de las hepatopatas,porque su eliminacin es tan rpida que solamente pueden esperarse aumentos significativosen las lesiones hepticas agudas y graves. Las enzimas con pesos moleculares bajos pueden entrar directamenteal espacio intravascular,por ejemplo, a travs de una membrana capilar. Otra excepcin la constitnye el hgado, en el cnal las clulas parenquimatosastienen un contacto directo con el plasma. Esto, unido a la importancia capital del hgado en el metabolismo, sus funcionesespecficasy su riqueza en enzimas, constituye uno de los motivos principales de la significacinespecial del diagnstico enzimtico en las hepatopatas. De las experiencias realizadas con enzimas marcadas radioactivamente, se desprende que en el espacio intravascular las enzimas slo se inactivan en una medida
mnima

Fundamentos de las determinaciones enzhiticas

En el captulo 16 se refiri la forma de determinar las actividades enzimticas. Segn la Comisin Internacional de Nomenclatura Bioqumica, una unidad (estndar) es aquella cantidad de enzima que transforma un micromol de sustrato por minuto.

Las actividades catalticas en los lquidos se refieren en general a 1mL 1L. En consecuencia, se expresan en mUmL-' U C ' que son, por cierto, idnticas numricamente. Enla actualidad la denominacin UL-' es la preferida al nivel internacional. El catal (cat), unidad que en unas condiciones definidas equivale a una velocidad de reaccin que transforma un m01de sustrato por segundo,no halogrado imponerse. Otros elementos acerca de las diferentes tcnicas de determinacin enzimtica fueron tratados en el captulo 16. Para poder obtener resultados comparables en las determinacionesenzimticas, la Sociedad Alemana de Qumica Clnica ha recomendado condiciones de reaccin estandarizadaspara 8 enzimas clnicamente significativas.Los autores seleccionaron una temperatura de 25 "C y fijaron, adems, el tipo de solucin amortiguadora y el valor delpH, la concentracin del snstrato, y los cofactoresy efectores. Estas recomendaciones son aplicables a las enzimas siguientes:

- Glutmicooxalactico ransaminasa (GOT).

- Creatina quinasa (CK).

- Glutmicop i ~ v i c transaminasa o (GFT). - Glutmicodeshidrogenasa(GLDH). - Lctico deshidrogenasa (LDH). - Alfa-hidroxibutricoricodeshidrogenasa (HBDH). - Fosfatasa alcalina (AP). - Leucina-aminopeptidasaCAP).

Consideraciones de inters prctico

Tantodurantela toma demuestras, como en el transporte destaspueden aparecer factores perturbadores. En el cnadro 79.1 se presentan los principales.
cwd~a79.1. Intiuenciassobre las determinacionesenzimticasde factoresdependientes

de la toma y el transporte de las muestras Factores dependientesde la toma y el transporte de las muestras
stasisvenosa

Infuencia sobre las determinaciones enzimticas

Lgin mecnica Miemhemlisis

Hipoxiay aumentodelapemeabilidaddelasclulas sanguineas Por la didadel lquidodelajeringa y mezcla de 1a sangrr. Un dficit de O, y un sustrato por abandono prolongadodelasmuestrasconduceaunaumento de la permeabilidad

CoapUiaah

Liberacin de emimas plaquetarias, por ejemplo de fosfatasa cida Prote6lisis;prdidadeestructurasterciarias: blo. que0 de grupos SH

El anlisis de otras fuentes de error se escapa de los objetivosde este libro, pero se han de tener en cuenta, a saber: concentracin insuficientede sustrato,pH errneo de la solucin tampn o capacidadamortiguadora insuciente,temperatura de incuhacin errnea, inestabilidad de los reactivos y errores de manipulacin y de medicin, ya sea por pipetas y equipos mal calibradoso poca habilidad del operador.

La conservacin de las muestras de suero tiene grados diversos de exigencia,

segn la enzima que se vaya a determinar. Aun a temperatura ambiente, algunas enzima$
tienen poca prdida de actividad, de las cuales son ejemplos relevantes la fosfatasa alcalinay la colinesterasa (CES). En la tabla 79.1 se presentan algunos datos relacionados con este aspecto.
mbh79.1. Promedio (en %)de la prdida de acvidad en la conservacin delsuero -

Enzima

Temperatura ("C)

4h

48 h

3 das

5 das

7das

m
GPT
GLDH

LDH
P-HBDH

AP

LAP

Principales enzimas de inters elllco

La a amilasa (a 1,4-glncan-4-glucanobidrolasa) acta rompiendo los enlaces

a 1-4 glicosdicos del almidn. Esta enzima est presente en la saliva y el jugo pand t i c o . La actividad de la amilasa en el sueronormal proviene (en menos de un 25 %) del

PnLa amilasa en el suero aparece despus del primer mes de edad y es al ao cuando sus valores alcanzan el rango normal del adulto. Las cras normales reportadas varan con el mtodo de determinacin. En el procedimiento de Henry y Chiamori, el cual modifica la tcnica original de Somogyi, se seala en la literatura un rango de 38 a 118 U.dL ', en los varones, y de 46 a 141 U-dL en las mujeres. Los productos reductores, liberados a partir del almidn, son determinados en un medio de pH 7. A pesar de que la contribucin del pncreas a la actividad srica normal de la amilasa no llega a un tercio del total, es en las enfermedades de este rgano donde se suele explorar. Las enfermedades pancmticas ms comunes son la pancreatitis aguda o crnica y el cncer del pncreas. En la pancreatitis aguda se produce la autodigestin del pncreas, con necrosis del tejido parenquimatoso. En personas de edad avanzada las manifestaciones clnicas de esta enfermedad, que suelen ser determinantes para su diagnstico, pueden no evidenciarseen un inicio a pesar de su gravedad. Aqu, naturalmente, el diagnstico enzimtico puede ser de gran ayuda. La amilasa puede elevarse a las pocas horas del comienzo de la enfermedad,pero estos incrementospueden ser fugaces. La determinacin en la orina de 24 h permite comprobar estas alteracionesy es el mejor procedimientopara seguir la evolucin del proceso. En los casos graves de necrosis pancretica masiva la actividad de la amilasa puede disminuir abmptamente y ello ha de tenerse en cuenta.

'

En el caso de la pancreatitis crnica se produce una prdida de la capacidad secretora del rgano y los valores sricos tienden a estar ligeramente disminuidos; recurdese la gran proporcin proveniente de las glndulas salivales. La determinacin de la actividadde laenzima enel jugoduodenal, despus dela administracin de pancreozimina, resulta un dato decisivo. En el cncer de pncreas no es comn detectar en el suero la elevacin de ta actividad de la &asa; en oeasiones,el hallazgo puede compmharseen laorina de24 h.

Esta enzima puede elevarse, al igual que la amilasa, en las horas siguientes de iniciado el ataque de pancreatitisagnda,aunque de formams lenta que la amilasa (a veces hasta 24 a 48 h despus del comienzo),pero con la ventaja de que siempre ser de causa pancretica), mientras que las afeccionesde otras glndulas del organismo pueden aumentar marcadamente a la amilasa (parotiditis).Las consideraciones en torno a la pancreatitis crnica y al carcinoma son similares a lo expuesto en relacin con la amilasa, es decir, su valor es relativamente pequeo en el diagnstico de la pancreatitis crnica y del cncer del pncreas.

Las transaminasas se estudiaron en el captulo 55. En el suero se han determinado la GPT y la GOT. Aunque los cambios electrocardiogrficosse producen con mayor rapidez que los enzimticos, en e1 10 % de los casos de infartos del miocardio los primeros pueden estar ausentes. Tambin en la recurrencia del episodio puede no detectarse un nuevo hallazgo en el electrocardiograma. El valor diagnstico de las determinacionescrece mucho cuando se trata de un conjnnto de enzima.,entre las que se encuentra la GOT. sta aumenta enlas primeras horas de instalado el proceso y es de mucha utilidad junto a la CK, la cual se eleva no slo en las afecciones del corazn, sino tambin en las enfermedades o lesiones del msculo esqueltico. Para diferenciar estas 2 posibilidades se emplea el cociente CKIGOT. Si el cociente supera a 10, la prohabilidad de lesin o enfermedad del msculo esquelticoes de1 90 %. Si como consecuenciadel infarto se instala una insuficienciacardaca derecha, la congestin del hgado por stasis no slo hace visible el aumento de la GOT, sino tambin el de la GF'T. Las transaminasas son fundamentales en el diagnstico y la evolucin de las hepatopatas; se elevan considerablemente en la hepatitisagnda (la GPT ms que la GOT). En las lesiones graves, como las de la intoxicacin por tetraclomro de carbono, la GOTaumenta m& ane la GPT, En la hepatitis vrica, de todas las enzimas elevadas la GF'T y la gamma-glutamil transpeptidasa (y-GT)son lar ltimas en retomar a suscifrasnormales,deahsu iuapreciable valor para seguir la evolucin y curacin dela enfermedad. En la cirrosis heptica alcohlica las transaminasas suelen estar elevadas, pero en lamedida en que avanza la enfermedadvuelven a diminuir. En perodos avanzados la intensa disminucin de la GPT hace que el cociente GOTIGPT sea mayor que 1, resultado aparentemente contrario a la lgica, por laconocida preponderancia de la GPT en el hgado y de la GOT en el corazn.

Es la enzima con mayor antigedad en su aplicacin al estudiode las enfermedades del hgado. Originalmente se descubri que sus niveles sricos estaban aumentados en pacientes con ctero obstmctivo (postheptico). El mtodo de determinacin ms extendido emplea el beta-glicerofosfatocomo sustrato y se determina el fsforo liberado por la incubacina pH 8,6. Las unidades definidas por el autor de la tcnica, Bodansky, equivalen a la actividad de 1dLde suero que libera 1mg de fsforoen 1h. Los valores normales oscilan entre 1 y 4 UBiunidades Bodansky). En la obstruccin completa pueden superar las 25 UB. Es curioso que, por lo general, la obstruccin biliar de compresiones por neoplasia maligna provoca valores de AP, superiores a los observados en pacientes con o b s t ~ c ~ i o de n ecausa ~ benigna. Aunque en la ictericia hepatocelular vrica o txica la AP tambin se eleva, en la inmensa mayora de los casos no sobrepasa las 15 UB y es apenas en e1 5 % de estos pacientes que pueden encontrarse valores entre 15 y 25 UB. En la ictericia hepatocanalicular,muchas veces provocada por frmacos como la cloropromazina,se encuentran valores sricos de AP tan elevados como en la ictericia ohstructiva. En cuanto a los procesos del hgado que evolucionan sin ctero, se pueden observar elevacionesimpresionantes de ms de 50 UB en las enfermedades granulomatosas, en el carcinoma heptico primario o metastsico, en los abscesos hepticos y en la amiloidosis. En la cirrosis, la afectacin de los niveles sricos de AP depende del tipo. Es en la cirrosis biliar donde casi siempre se observan valores altos, aunque inferiores a las 15 UB,si el proceso es de origen obstructivo. Si se trata de una cirrosis biliar primaria (muchos la consideran secuela de una hepatitis colangioltica) los valores pueden ser como los del ctero obstmctivo. En realidad, los primeros valores elevados de la fosfatasa alcalina se hallaron en enfermedadesseas que evolucionan con aumento de la actividad osteoblstica. En los nios en crecimientoy durante el tercer trimestre del embarazolos valores suelen ser altos. Ladeterminaan delafosfatasaaidina en las osteopatiasesl, principalmente en la idenficacin de la ostetis defonnante, el hiperparatiroidismoy las neoplasias seas.

F d a W Beida (SP)
Esta enzima se halla en concentracin elevada en la prstata. Otra isoenzima existe en los entrocitos y las plaquetas. Los mtodos de determinacin son similares a los dila fosfatasa &atina, pero en este caso apH 5. En el carcinoma prosttico localizado los niveles de la enzima suelen ser normales. En los casos en que la neoplasia se ha extendidofuera de la cpsula del rgano se hallan elevaciones en ms de la mitad de los pacientes. Si el cncer prosttico es metastizante se observan los valores elevados de SP en el suero de todos los pacientes. La hemlisis puede producir Ligeras elevaciones de esta enzima, pero slo si no se emplea el beta-glicerofosfatocomo sustrato, pues ste no es atacado por la isoenzima eritrocitaria. Conio hemos visto, la determinacin de la SP es valiosa para detectar metstasis de cncer prosttico, pero no ayuda en el diagnstico precoz de un cncer insitu.

Esta enzima es abundante en el miocardio, el rin, el hgado y los msculos. Su elevacin ocurre en mltinles enfermedades. Las valores ms altos se rehstran en el carcinoma heptico metastsico y en la anemia megaloblstica (Fig. 79.1).

Situacin normal

o~Z3g~z~-~~8m~m m m m m
N N N

0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Anemia drepanoctica Anemia hemoltica I~eficiencia de hierro Leucemia granulwtica crnic Leucemia linfoctica crnica Leucemia aguda Linfoma

Infarto de mimardio I~nsuficiencia cardaca congestiv l~nfarto pulmonar

Fuente: Dandsohn, L. Henry, JB. Diagnstico clniw por el laboratorio. Ed. Cientfico-Tcnica, p. 874, 1982. Fig.79.1. Comportamiento de la lctico deshidrogenasa srica. Grfico de los valores normales y en varias enfermedades de la lctico deshidrogenasa en miliunidades internacionales. La lnea discontinua refleja los valom nomales en nih . DMP: distrofia muscular progresiva.

1 Hepatitis
Ictericia obst~ctiva Cirrosis /Carcinomametastsico Carcinoma sin participacin heptica

Fig. 79.2. Principales alteraciones de las enzimas del suero en el infarto del mioeardio. Evolucin de los niveles de glutmieo-oxalaetico transaminasa, lctico deshidrogenasa y creatina quinasa en el infarto del mioeardio.

A pesar de ello puede ser til en asociacincon otras determinacionesenzimticas, por ejemplo,en los casosdeinfartodel miocado y pulmonar. En el primero,la LDH se elevaa las pocas horas de producirse el cuadro clnico, al igual que la GOT, aunque no tanto en cantidad, pero se prolonga ms que esta ltima (de 10 a 14 das) (Fig. 79.2). En el infarto pulmonar tambin es posible apreciar aumentos significativosde la LDH, de modo que a las pocas horas de un dolor torcico agudo la LDH elevada con una GOT normal orienta mucho hacia el infarto pulmonar. La determinacin de las isoenzimas de LDH constituye un recurso adicional para la ubicacin diagnstica. En el suero se separan por electroforesis 5 isoenzimas, numeradas del nodo al ctodo; cada isoenzima es un tetrmero. Existen 2 tipos de subunidades, ambas con un peso molecular de 34 000, que se designan H y M (del ingls: heark corazn y m u d e msculo); las 5 isoenzimas abarcan las 5 combinaciones de estas 2 subunidades en tetrmeros, a saber: H,, H,M, H,M,, HM, y M,. Cada tejido contiene las 5 isoenzimas, pero en proporciones variables. La concentracinrelativa de las isoenzimas en el suero normal es en orden decreeiente H,M, H,, H,M,, HM, y M,.

Como la H, es la que ms se acerca al nodo se designa LDH,, y la M,, que queda ms alejada, LDH,. Por supuesto,la LDH,, LDH, y LDH, denotan por el subndiceel orden de cercana al nodo. En la mezcla srica normal se supone que los eritrocitos sonlos mayorescontribuyentes.Si se observala tabla 79.2se comprobar que tanto en la mezcla de los glbulos rojos, como en la del corazn predominan las 2 isoenzimas que ms abundan en el suero normal. De los datos de esta tabla se explica que en el infarto del m i d o , las isoenzimas que predominan en la elevacinsean las ms abundantes en el suero normal (LDH, y LDHJ y que en cambio, en la hepatitis vrica predominen en el incremento la LDH, y LDH,.
mbh 79.2. Isoenzimas de la deshidrogenasa Ictica del suero, separadas por

electroforesky su composici6n segn su origen histico Contenido relativo de la enzima Mioeardio Hgado Msc. esq. Cerebro Rin
LDH,HHHH LDH,HHHM LDH, HHMM LDH, HMMM LDH,MMMM

Hemates

++++ ++++

+
O O

++ ++++

O O

+ ++ ++++

O O

++ ++ ++ ++
O

+ ++ ++ ++

+++ +++

+
O
O

No obstantelo antes expuesto, para la caracterizacin del perfil de las 5 isoenzimas en la muestra de suero el prooedimiento es complejo y costoso; sin embargo,la determinacin de la isoenzima miOerdicaLDH, se puede simplicar porque ella soporta la exposicin a 65 "C durante 30 min, de modo que el tanto por ciento de la actividad total de la LDH que resulta termoestableequivale a la determinacindela LDH, (H,).

La CES que se detecta en el suero, provenientemayormente del hgado, se denomina seudoeolmesterasapara distinguirla de La acetilcolinesterasa del sistema nervioso e intraeritroritaria. La significacin bidgica deesta seudocolinesterasase desconoce Puede detenninarsetanto por tcnicaseolorimtricas, como midiendo el cambio de pH que se produce por la liberacin de uno de los productos de la reaccin: el cido actico. La utilizacin ms especfica de la CES es en las intoxicaciones por insecticidas de fsforoorgnico, como el parathion, que son potentes inbibidores de esta enzima; se oroduce disminucin de la seudocolinesterasa v de la CES eritrocitaria.Al oareeer. los valores sricos vuelven a la normalidad, antes que los intraeritrocitarios. Las Lesiones graves y extensas de las clulas del parnquima heptico0 la intensa disminucin de las clulas hepticas traen consigo un marcado descenso de la colinesterasa. Muehos autores incluyen a la CES eon la GPT y la y-GT como la trada de enzimas, que de encontrarse normales permiten excluir, con un 95 % de probabilidad de acierto, una bepatopata inflamatoria o txica, o la participacin del hgado en o& enfermedades.

Las fluctuaciones en los valores srieos de esta enzima, una peptidasa que se determina utilizando acilnafalamida como sustrato, son paralelas a las de la fosfatasa alcalina en las afecciones hepatobiliares; sin embargo, sus valores son normales en las enfermedades de los huesos, pero como la distincin entre las enfermedadesdel hga-

do y las osteopatas comunesno presenta grandes dificultades por los datos clnicos,la determinacin de la LAP tiene una aplicacin bastante limitada.

Esta enzima aparece elevada en el infarto del miocardio,con la toma apropiadade la muestra Aunque la enzima no es especfica del miocardio (existen concentraciones relativamente altas delaenzima,sobre todoen el msculo esqueltico, pero tambin en el cerebro y la musculatura lisa), dado que la CK cerebral no traspasa la barrera hematoenceflica, sucede que las grandes elevaciones sricas slo pueden provenir del corazn o de la musculatura esqueltica. En el infarto su elevacin es muy precoz, a lo sumo a las 6 h de producirse, con un pico a las 24 h y su normalizacin entre el 4to. y el Sto. das. En la figura 79.2 se presentan los comportamientos de la CK, la GOT y el LDH en el infarto del miocardio. En la parte dedicada a la GOT se trat acerca de la ayuda del cociente CKKOT para descartar o no lesiones de la musculatura esqueltica. Ello es importante adems, pues si el paciente infartado cae en shock pueden sobrevenir lesiones hipxicas en el msculo, que se reflejaran por el incremento de un cociente que originalmente era menor que 10. La CKtambinse presenta en forma de isoenzimas y la discriminacin de sus 3tipos puede brindar informacin adicional, tal como hemos analizadoen otros casos. Este recurso no est tan difundido como la determinacin ms simple de la CK total.

Se han investigado otras enzimas que son tiles en la clnica, pero se emplean muchsimo menos que las que hemos discutido anteriormente. Entre ellas seencuentran la fosfohexoisomerasa, como ndice de metstasis en los carcinomas de mama g prstata; la aldolasa, que se eleva en miopatas, carcinomatosis, leucemia granuloctica, anemia megaloblstica, hepatopatas y otros procesos. La deshidrogenasa isochica, la ornitina-carbamilt r a n s f e r ~ a a 5', nucleotidasa y otras se han estudiado, sobre todo, por su elevacin en las afecciones hepticas muchas otras se han analizado en los laboratoriosde investigacin,a pesar de que no se emplean habitualmenteen ninguna instalacin clnica.

Enzimas en otros fluidos biolgicos

Las enzimas de la orina proceden predominantemente del rin, donde se liberan por la destniccincelular. La eliminacin de las enzimas a travs del rin sano, por ejemplo de la amilasa, la CK y la LDH, est limitada por los pesos moleculares. Las enzimas del suero son reabsorbidas m i por completo de la orina primaria en el tubo proximal. Segn el estado actual de la cuestin, la determinacin de la yGT y la LDH en la orina tiene cierta utilidad para el descubrimiento temprano de la reaccin de rechazo en el transplante de rin y, naturalmente,en algunas enfermedades renales. Ya referimos que en la pancreatitis aguda los aumentos pasajeros de las enzimas,y que pueden pasar inadvertidasen una muestra srica, se reflejanen la orina de 24 h.

Lquido cefalorraqudeo (LCR) Se han determinado muchas enzimas en el LCR. As, las isoenzimas de la lctico deshidrogenasaLDH4y LDHSaparecenen La meningitisbaderiana,mientras que en la virai se revelan IaLDH, y LDH,. Sinembargo,loscasosgravesde meningitis bacteriana, con desenlace fatal, presentan elevaciones de la LDH, y LDH,, causadas presumiblemente por lesin cerebral. En la hemorragia subaracnoidea y los cnceres primario y metastsicoque toman el cerehroo la columna vertebral tambin se presenta el incremento de la actividad de la LDH en el LCR. En todos los casos anteriores, excepto en la meningitis viral, se ha reportado el aumentode la asprtkotransferasa (AT). En general, estos incrementosno pareeen ser muy especficos, ya que los aumentosde las enzimas mencionadas pueden ocurrir en mltiples enfermedades, por lo cual no aportan mucho a los datos convencionalesde recuento de clulas, determinaciones de glucosa, protenas, etc.

otros Iquidos eorporsles

En el Lquido amnitico es posible determinar, actualmente,enfermedadescongnitas, como los defectos de cierre del tubo neural y otras muchas, pero no son precisamente determinacionesenzimticas las que ms se utilizan. En el lquido sinovial se ha descrito aumento de la fosfatasa cida en la artritis renmatoidea. En la misma enfermedad,pero adems en la artritis sptica y en la gota, puede elevarse la LDH. En la panereatitis aguda se detecta un incremento de la a amilasa en el lquido pleural, al igual que en el peritoneal. La LDH est elevada inespecficamenteen los lquidos mencionados,si los derrames son causados por cncer, o por infiamacin sptica o asptica. La determinacin de la fosfatasa cida en el aspirado vagina1 o en el lavado provee una prueba eierta de la presencia de semen,por la altsima concentracin de la enzima en el Iquido seminal, aun cuando el varn sea asprmico.

Diversos usos cinic08 de las enzimas

Algunas enzimas se utilizan teraputicamente;la quimotripsina se ha empleado para facilitar la mejor difusin de otros medicamentos,generalmente antibiticos. La estreptoquinasase utiliza en las primeras horas posteriores al infarto del miocardio para propiciar la reperfusin precoz del tejido isqnmico. En enfermedades especficas puede ser necesaria la biopsia diagnstica y la determinaein hstica i n vitrode una enzima, como sucede en las glucogenosis. Desde el punto de vista tcnico, las enzimas tambin han contribuido a desarrollar determinaciones de aplieacin clnica y a veces en pesquisajes masivos: el mtodo ELISA combina tcnicas inmunolgicas con una determinacin final enzimtica.

Resumen
Todas las enzimas presentes en el suero se originan en las dlulas. Pueden Provenir de mltiples tejidos o, en el caso de algunas, solamente de 16 2 rganos eSpedtna#l. Naturalmente, estas itimas son las de mayor utidad W c a . Al sar de las dlulas, las enzimas experimentan moditicadnnes que pueden aumentar o disminuir su acci6n c a t a l t i c a original.

Las transformaciones estmcturales de las enzimas, en su camino hacia el torrente sangnneo, parecen abarcar 2 fases: primero, la dilucin de la enzima en los compartimientos extracelulares y despus la eliminacin propiamente dicha. La velocidad de la elimioacin sigue una b d n expoueneial y en consecuencia es posible el esledo de las constantesde semidesintegracin.Aun en las isoenzimas se observa diferencia en esta constante. EUo tiene importancia prcca debido a que algunas fracciones perduran lo suficiente para ser detectadas y otras no, en casos de aumentos fugaees provocados por pmeesos nmlgieoa Las enzimas de empleo ms generalizado en la aplicacin clnica son: la amasa, i a lipasa, las traasaminasaa giutmieo-pirviea y glntmico-omelaetica, las fosbatasaa alcalina y bada, la colinesters~~ drica,la leudna amino peptidasa y la creatina quinasa La actividad de la alfa-amasaen el suero proviene en un 25 % del pncreas. Su elevacin en la panereatis aguda se detecta con seguridad en la orina de 24 h, en caso de que sea tan fgaz que no coincida can la toma de la muestra drica. Si existe una n d pancretica grave su actividad puede estar disminuida. La lipasa se comporta como la aa-amasa, con la veniaja de que no se produeeenlas~~salivalesyenmnseeuenciaesmsespeecaenlaspanere~paoaS. LastrP se utizsn monariementeen la clnica del infarto cardaco y las hepatopatas. La GOT s e elwa en las primerss horas de instalado el cuadro. W b i n se eleva notablemente la creatina quinass. Como esta ltima puede provenir adems de lesiones musculares, se ha empleado el d e n t e CKIGOT que suele ser menor que 10 en el caso de que la lesin sea cardaca En la bepatis viral las traasaminasas se elevan considerablemente (la GPT ms que la GOT). La G P i es de las limas enzimas que normaza sus niveles C I& se observa una cada en la actividad de GPT, s d m en esta afecd6a En la T e a mayor. que provoca que el inmmento de la GOT s La fosfatasa alralina es de inestimable valor en las bepatopatk obstructivas, su elevacin en los proees<is bepatocelulares es ms discreta y por lo general no rebasa las 15m. La detenninacin de la leudna aminopeptidasaen las osteopatas es iiol, principaimenteen la ostei's deformante, el hiperpmhidismo y las neoplasias seas. La fosbatasa bdda se eleva easi siempre en el carcinoma pmsttico, pero en estadios avanzados de &te. Su elevacin indica, por tanto, la existencia de metstasis. Los valores ms elevados de la actividad de la enzima lctico desbidmgenasa se regisbsnen el carcinoma beptico metasisico y en la anemia megaloblgsoca. En el infarto pulmonar, niyo sntoma principal puede ser el dolor todcico agudo, la LDH aumenta pronto, al igual que en el infarto cardaco, pero como ste se acompaa siempre del incremento de la GOT, la alteraci6n aislada de la LDH ante e s t e cuadro clnico establece con certeza la loealizaein del proceso. Un recurso adicional es la determinacin diferencial de las isoenzimas de la LDH, dada su relativamente amplia distribucin. AdemBs, la caracterizacin de la isoenzima mioesrdica no requiere de teeaieas eleetrolortieas,pues ella m i s te temperaturasde 65'C por 30 min, a derencia de las 4 iwenamasrestantes. La d v i d a d srica de la &&rasa es inapreciable en las intoxieaciones por insecticidas y otroa pmductos organofosborados.Aqu su aevidad decrecepor el efecto inhibitorio del txico. Las bepatopatlas con prdida del parnquhns funcional tambin se reflejan por la dimninuein de la CES. En las complejas mterpretadones de los cambios enzimtieos en las diversas enlemedades del hgado, se ha Uegado a establecer, por slgunos, que la normalidad de 3enzimas, entre las que se halla la CES,permite excluir la partidpaein del hgado en un profeso morboso (las otras 2 son la GPT y la gemms-glutam transpeptidaaa).

Laleueiuaminopeptidasapresenta nn perfil semejanteal de la AP en las enfermedades bepatobiares, pero no experimenta alteracione8en las osteopatias. La uvatina quinasa es una de las enPmas m& importantes en el estudio del infarto del m i d o , siempre se eleva y muy pre~nmente.Sucede que en las lesiones musnuareS tambin se eleva notablemente la aevidad srica de esta enzima. Se emplea el cociente CWGOT si es necesario disipar dudas por este motivo. En las miopatias el cociente es muy superior a 10, de ordinario mayor que 15. Lm determinaciones&ticas en la orina y otros Lquidos biolgicas tienen escasa udad, en relsdn eon otros mtodos, en los casos especficas en que pues t e hecho es el den eonh5buir a una interpretad611 clnica. Un ejemplo que ilustra e incremento de las isoenzimas LDH, y LDH, en el liquido cefalomquideo en la pero es que el meningilis baeterians y de las isoenzimas LDH, y LDH, en la M, predominio liofw'ticn en esta iilima y el de los pomorfonucleam en la primera es nn recuento ms expedito que la determinad611 de las isoeazimas de la LDH. En la famacopea se emplean unas pocas enzimas. Para la determinadhn de sustancias de significacin diagnstiea, los ensayos enzimticas asociados a otros modos han posibiiado la h p c a d 6 n , rapidez m muestra de ello. y sensibilidad de las W c a s modernas; el &tema ELISA es &

E j e r c i c i o s
1 .D ejemplosde modificacionesque pueden experimentar las enzimas en su trasiego desde las clulas de origen hasta el espacio intravascular. 2. Qu importancia, en l a aplicacinclnica de la enzimologa, puede tener el hecho de que las constantesde semidesintegracinde las enzimas sean diferentes,ineluso para isoenzimas? 3. Aborde brevemente los aspectos que se han de tener en consideracin, desde la toma de la muestra hasta el ensayo bioqumico de una determinacin enzimtica, para que el resultado de esta ltima sea confiable. 4. Exprese las alteracionesenzimticas del suero en las pancreopatias agudas. 5. Cul es la importancia del cociente CWGOT? 6. Cmo puede contribuir la enzimologa clnica en el diagnsticodiferencial del infarto puhnonar y cardaco? 7. ;Cmo se puede determinar especficamentela isoenzima de la LDH preponderante en el miocardio, sin necesidad de emplear el fraccionamientoelectrofortico?

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Resumen de la d n

En el centro dedetenninadas afeccionessehalla algn trastorno del curso normal del metabolismo. La diabetesmellitus, la encefalopata heptica y el ctero son 3 ejemplos de estos cuadros. En la diabetes -como consecuencia de un dficit en la accin insulnica- se establecen complicadas secuencias de fenmenos metablicos que intentan ser compensatorios, pero culminan frecuentementeen serias alteraciones del equilibriometablico del sujeto. En la encefalopataheptica, el metabolismo de los compuestosnitrogenados y, especialmente,los dispositivos metablicos para deshacerse del amonaco resultan insuficientesy esta molcula origina serias repercusiones, sobre todo en el encfalo. La hilirrnbina se origina en el catabolismodel hemo y sigue distintos pasos hasta su normal excrecin por la bilis. Dificultades en cualquiera de estas etapas pueden conducir a un exceso del pigmento circulante en la sangre, que se visualiza en la piel y las mucosas como ctero. La enfermedadmolecular se origina por un defecto en la sntesis de una protena determinada. Existen muchsimas enfermedades de esta naturaleza y se conocen en buena parte, pero, por suerte, se progresa tambin en la posibilidad de detectarlas durante la vida intrauterina y evitar, en lo posible, sus funestas consecuencias. El exceso o el defecto en la secrecin de una hormona se traduce en enfermedad, porque las hormonas son sustancias reguladoras y, por tanto, los niveles en que se producen deben ser determinados cuidadosamentemediante mecanismos reguladores, los cuales son muy sensibles a las condiciones cambiantes del organismo. La hiper o hiposecreqin, en ocasiones, traer consigo muchos cambios bioqumicos, en dependencia de la gludula afectada Elhiper e hipotiroidismo -por afectar a una hormona de amplio control metablico- son modelos de endocrinopatias con mltiples camhios bioqumicos. Los virns contienen una sola clase de cido nucleico, ya sea ADN o ARN, que codifica la informacin gentica necesaria para la replicacin de ste. Para que un virus se multiplique, tiene que infectar primero a una clula. La patogenia de las enfermedadesviralestiene que ver con los efectos txicos de algunos productos virales, las reacciones del husped a las clulas infectadas que estn expresando los genes del virns o, finalmente, las moditicaciones de la expresin gentica propia del husped por interaccionescon el material gentico del virns, como parece ser el caso de los virus oncognicos.

Muchas de las enzimas presentes en el suero pueden servir de indicadorespara la deteccin o el seguimiento de vanas enfermedades.Existe un gmpo de enzimas cuyo uso se halla ms generalizado en la aplicacin clnica; otras slo son de inters en los centros de investigaciones. Entre las primeras se encuentra el grnpo de enzimas que se suelen observar en los iufartos del miocardio y en las enfermedades del hgado.

n esta seccin presentamos la contribucin de la bioqumica en la interpretacinde algunosproblemas mdicos y biolgiw de gran actuadad einteri.5.

En todos los captulos se brinda una informacin inicial acerca de Las caractersticas del problema que se trata, y, posteriormente, se presentan algunos experimentos sobresalientes en el campo de estudio considerado, con lo cual se aspira a demostrar el aporte de la bioqumica experimental en la solucin de estos problemas. Se ha tomado inters enexplicar, si bien someramente,las premisas que en el orden del desarrollo de la tecnologa de la bioqumica han posibilitadoel estudio experimental de los problemas seleccionados. Tambin se presentan algunas consideracionesacerca del posible desarrollofutnro del conocimiento dentro de cada problema.
jQu6 euia e s un problema aciuai?

La actualidad en la ciencia contempornea es una caracterstica muy relativa. Especialmenteen el campo de las ciencias biomdicas, los progresos se producen con tal celeridad, que cada da un nuevo descubrimiento acapara la atencin de los cientficos, y de todos en general. Por lo antes expuesto, la seleccin de problemas para esta seccin pudiera parecer un tanto arbitraria. No obstante, se ha hecho con el nimo de exponer los aspectos de
Tornado de: Atlas de Histologa Bsica. Junqueira LC. Cuarla edicin, 1996

investigacin bsica y los de aplicacin, si bien esta distincin resulta cada vez menos relevante. La seleccin incluye 6 problemas que -en mayor o menor medida- han experimentadoavances significativosen la ltima dcada.

Caracteristicas de la investigacin bioqumica contempornea

La investigacin bioqnmica contempornea se caracteriza, en gran medida, por el desarrollo acelerado de mtodos ms poderosos, para llevar a cabo el estudio de los componentes moleculares de los organismos vivos y su funcionamiento. Otra caracterstica est dada por el solapamientode los mtodos y procederes de la bioqnmica con el de otras ciencias biolgicas, como la gentica y la inmunologa. De hecho, muchas investigaciones se realizan por equipos mnltidisciplinarios. En la interpretacinde las investigaciones bioqumicas resulta cada vez ms necesario tener en cuenta la organizacin celular en toda su complejidad, es decir, reconocer que las enzimas v otros comwnentes de la clula no se encuentran en un medio homoeneo. , sinoformandoparte de etrncturas con un alto nivel de organizacin (seccin IV). Esto explica el surgimientode nuevos trminos y especializaciones,como el de la biologa molecular, la topobioqumica y otros.

Acerca de los problemas seleccionados

Sin dudas, el cncer constituye un problema de gran inters mdico, por su elevada letalidad y las limitaciones de los recursos teraputicos disponibles para combatirlo. Una de las duicultadesfundamentales para avanzar en el tratamiento del cncer es el desconocimiento existente acerca de las causas de esta afeccin. En el captulo correspondiente a este tema se exponen algunos de los avances ms recientes en este

P o .
La forma de los seres vivos, el modo en que sus componentes moleculares determinan una organizacin espacial caracterstica,se estudia en el captulo de la morfognesis. Se trata nada menos que de explicar cmo el "acervo" gentico de los seres vivos, codificado en forma lineal en su ADN, puede explicar la estrnctura tridimensional de ellos en todos sus niveles de organizacin, desde sus componentes celulares hasta sus diferentesrganos y aparatos. El sistema inmunolgicoconstituye una adquisicin evolutiva de gran importancia en los seres vivos, pues defiende al organismo contra los efectos nocivos de sustancias extraas o grmenes patgenos. Un lugar destacado dentro del sistema inmunolgico lo ocupan las molculas especializadas, denominadas anticne os. Es realmente asombroso que un organismo sea capaz de producir ms de un mi In de anticuerpos diferentes. Acerca de los mecanismos moleculares que explican esta gran diversidad trata el captulo correspondiente.

Los 3 captulossiguientes se refieren a problemas muy relacionados entre s: elorigen, la evolucin y el envejecimiento de los seres vivos. En cuautoal origen de la vidaes difcil concebir alguna persona que no haya sentido curiosidad acerca de este tema. Aunque este problema an no ha sido resuelto en su totalidad, hoy en da se dispone de un cuadro bastante satisfactoriode los eventos que pudieron conducir al origeh de la vida. Es ms, ya hasido posible realizar experimentos relacionados con estos eventos.

La evolucin de los seres vivos ha sido muy bien documentada por ciencias como la paleonologa, la anatomacomparada y otras. Como veremos, la bioqumica tambin ha contribuido a confirmar esta concepcin, desentraando las huellas del proceso evolutivo mediante el estudio de los componentes moleculares de los seres vivos. Adicionalmente,la hioqumica ha podido brindar elementos de gran valor, en cuanto a los mecanismos que posibilitan el desarrollo evolutivo. En la actualidad, los cientficos han podido remedar, a nivel de laboratorio, procesos con significado evolutivo. Por ltimo,se trata el problema del envejecimiento. ;Por qu los seres vivos envejecen y eventualmente mueren? ;Cul es el si@cado biolgico de estos procesos? ;Cules son los mecanismos que lo determinan?En el ltimo captulo de esta seccin veremos cmo el envejecimiento est dejando de ser una preocupacin individual, para convertirseen un campo de estudio cientfico intenso, de relevante repercusin social.

A pesar de que existen enfermedades que cobran un mayor nmero de vidas cada ao, por ejemplo, la arteriosclerosis, el cncer sigue teniendo, tanto en el mbito mdico como popular, un funesto prestigio de enfermedad "terrible". Esta imagen se fundamenta en su elevada letalidad, en su rpida y habitual fatal evolucin, y en los an limitados recursos teraputicos disponiblespara curarlo. Aunque se han dedicado cuantiosos recursos al estudiodel cncer, el avance obtenido en este campo es todava limitado e insuficiente, si bien se han producido algunas contribucionesde relativa importancia en la medicina nuclear, la cimga, la farmacologa y otros. La razn fundamental de esa limitacin est dada por el desconocimientoque ha existido acerca de las causas del cncer. Su gnesis es, por tanto, uno de los enigmas ms acuciantes de la medicina y la biologa contemporneas. Dentro de este "sombro" panorama han comenzado a vislumbrarse algunos elementos esperanzadores. En este captulo se expondrn algunos de los descubrimientosms recientes en el conocimientode este problema, de trascendental importancia terica y prctica.

Concepto y caractersticas
Si bien existen muchos tipos de cncer o neoplasias malignas, en dependencia del tejido o tipo celular que le da origen, en todos los casos se presentan una serie de rasgos comunes. En este cantnio el cncer se defme como un condomerado de clulas (tumor), que crece de modo incontrolado,invade tejidos vecinos y alejados, y causa grandes daos al organismo en el que se encuenhri.Las caractersticasparticulares de cada tipo de cncer rebasan los objetivos de este libro. El cncer se diferencia de las tumores benignas,sobre todo, por su carcter invasivo, a propia definicin. El tmnor canceroso desobedece aspecto que ha sido consideradoen l todas las restricciones que elorganismoimpone al crecimientodentro de Lmitesprecisos en todos los tejidos, de modo que el cncer en su crecimiento invade los tejidos circundantesy, ms aun, sus clulas migran desde su localizacin original,hasta sitios ms o menos distantes, donde dan origen a tumores secundarios, denominados metstasis. Esta invasin progresiva del organismo Uega a interferir en sus funcionesy compromete la vida.

La clula cancerosa y sus caractersticas

Si todo tumor canceroso est formado por clulas cancerosas,debe pensarse que su comportamiento anormal es el reflejo de irregularidades en las cluliis que lo constituyen. Por tanto, se considera que, en buena medida, el conocimiento de la biologa del cncer puede circunscribirseal de la clula cancerosa. Cuando se han estudiado clulas cancerosas y se han comparado con clulas normales, se ha podido comprobar que las primeras muestran diversas diferencias, con respecto a las segundas. El hecho de presentar mltiples caractersticasdiferenciales de que el carcter transformado es pleiotrpico,trmino ha conducido a la af~rmacin que alude precisamente a esta multiplicidad de diferencias. Entre las caractersticasque distinguen a las clulas cancerosas podemos enumerar las siguientes:

1.Moltiplicacin incontrolada. Las clulas cancerosas se multiplican por divisin celular, auna velocidad mucho mayor que la habitual para el tipo celular del cual se origin. Estamultiplicacin no responde normalmente a los mecanismos que controlan la multiplicacin celular en el organismo. 2. Comportamienioinvasivo. Las clulas cancerosas, en su crecimiento, invaden los tejidos vecinos y alejados, sin respetar los lmites normales entre rganos. 3. Alto consumo energtiw. Las clulas cancerosas tienen un metabolismo muy acelerado, que se refleja, entre otras cosas, por su elevado consumo de sustratos energticos, especialmente glucosa. 4. Predominio del metabolismo anaerobio. Las clulas cancerosas obtienen su energa por vas degradativas anaerobias, lo que explica, en parte, su alto consumo energtico y la liberacin por stas de productos de oxidacin incompleta, como el cido lctico. 5. Alteracionesmorfolgicas.stas pueden ser muy variadas y afectan el tamao y la forma de la clula (Fig. 80.1). Es comn observar mitosis multipolares y otras anomalas. 6. Modificacin de las propiedades inmunolgicas. Las clulas cancerosas presentan modificaciones en los mecanismos de reconocimiento intercelular, con manifestaciones muy variadas. Estas modificaciones se explican por alteraciones de los componentesnormales de la membrana plasmtica.

Transformacin cancerosa
De acuerdo con el estado actual de nuestros conocimientos, se considera que la clula cancerosa se origina a partir de una clula normal mediante un cambio que se denomina transformacincancerosa,o simplementetransformacin. Adems, un tumor canceroso puede desarrollarsea partir de una sola clula que sufre la transformacin, de modo que en un tejido, hasta entonces normal, una clula experimenta un cambio crucial,y se transforma y convierte en cancerosa. La clula cancerosa,al multiplicarse, da origen a los millones de clulas que componen el tumor, las cuales presentan el carcter transformadoy son, por lo tanto, clulas cancerosas. El tumor experimenta un prnceso inicial de crecimiento in situ, hasta que comienza la invasin de tejidos vecinos y alejados, lo cual puede producirse -ms o menosrpidamente,segn el grado demalignidad del cncer de que se trate. Queda claro que la transformacin de la primera clula, otrora normal, es el evento desencadenante del resto de la historia natural del cncer (Fig. 80.2).

Fuente: Takahashi M.: Atlas de color. Citologia del Csncer. 2da. edicin (en esparid). Editorial CientfiroTcnica, 1982. Fig. 80.1. Alteraciones morfolgieas en clulas Cancerosas. Las clulas en (a) corresponden a un tejido normal y las que se observan en (b) son cancerosas. Ntense las diferencias morfolgicas entre unas y otras.

Tejido normal

Alteracin de una clula

-t
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Crecimiento

Multiplicacin incontrolada

Fig. 80.2. Origen y desarrollo de un tumor canceroso. Una vez ocurrida la transfomacin cancerosa de una clula, sta se multiplica de modo incontrolado. El tumor pasa par una etapa de crecimiento in .situ y posteriormente invade los tejidas circundantes, e incluso los que se encuentran alejados, y se originan las intstasis.

Careier hereditario de la transformacin

Ntese que la clula cancerosa, al multiplicarsepor sucesivas divisiones, mantiene su naturaleza anormal. El carcter transformado se comportacomo una caracterstica heredable, que se trasmite de la clula progenitora a las clulas que constituyen su descendencia.

Bsqueda de la aiteradn primaris

Desde lueeo. - . se considera une todas estas alteraciones no son indenendientes, .v " se supone que la clula cancerosa presentara una alteracin inicial (primaria),que dara origen al m t o de las anomalas. La trasmisin hereditariadel carcter transformado durante sucesivas divisiones celulares ha hecho pensar que esta alteracin primaria ocurre en el ADN celular durantela transformacin. Como se sabe, el ADN es el depositariode la informacin gentica, de n i d o que es plausible pensar que una alteracin en la informacinconducira, al expresarse sta, a un comportamiento anormal y, por lgica, esta situacin sera trasmitida a la descendencia durante las sucesivas divisiones celulares. Precisamente, uno de los terrenos en que la bioqnmica ha contribuido al conocimiento del cncer es en lo referente a la funcin del ADN en el proceso de transformacin cancerosa.

Premisas experimentales para investigar el cncer

Aunque en realidadson mltiples las mtodos experimentales quese han empleado en las investigacionessobre el cncer, aqunos referiremos al cultivo de tejidos y a las tcnicas de ingeniena gentica (tambin llamadas de ADN recombinante). Esta seleccin se debe a que estos 2 mtodos han sido los que han permitido penetrar en las bases moleculares del cncer, de modo que constituyen sus premisas experimentales.

@ Tejido

Cultivode tejidas
Las tcnicas de cultivo de tejidos tienen como objetivo mantener vivos determinadostipos de clulas y, en ocasiones, obtener su multiplicacin en condiciones controladasde laboratorio. En el caso de organismosinferiores esto resulta relativamente fcil, pues ellos suelen presentar pocos requerimientos para crecer y multiplicarse. Mucho ms dificil es obtener un cultivo de clulas de organismos superiores, por ejemplo, las de un mamfero. El medio natural de estas ltimas, en los diferentes tejidas,presenta una composicin muy especial, que se mantiene estrictamente regulada. Para obtener el cultivo primario se extrae del animal un fragmentode tejido que contengaeltipo celular de inters. ste se somete aun procesode dispersin, en el que se emplean, habitualmente,enzimas como la tripsina y la colagenasa, que degradan los componentes de la sustancia intercelular (Fig. 80.3). Posteriormente las clulas son colectadas por centrifugaciny se "siembran" en recipientes de distintos tipos, que contienen soluciones especiales (mediosde cultivo), compuestas por glucosa, aminocidos, sales minerales y otras sustancias, segn la naturaleza de las clulas que se pretenden cultivar. Durante todo el proceso se debe trabajar en condiciones de esterilidad para evitar contaminaciones; con este mismo fin se suele aadir algn antibitico al medio de cultivo. Las clulas, por lo comn, se adhieren a la superficiedel recipientey se multiplican hastaformar una capa celular simple (monolayer)que cobre toda la superficie.En esta etapa sedice que el cultivo es confluente. Generalmente, las clulas detienen aqnsu crecimiento, aunque permanecen metablicamente activas. El medio de cultivo debe cambiarse con determinada frecuencia para restituir los nutnentes consumidos y retirar las sustancias de desecho del metabolismo. Las clulas cultivadas pueden desprendersedel recipiente y volverse a sembrar. Tericamente,es posible mantener de esta forma una lnea o estirpe celular (clon)por tiempos prolongados. El lmite de vida del cultivo depende del tipo celular y de otras condiciones.

Una semana

Fig. 80.3. Mtodo empleado para la preparacin de un cultivo primario de tejidos. El tejido seleccionado se asla y somete a la accin de enzimas y otros agentes que dispersan sus clulas constituyentes. Estas clulas son colectadas y "sembradas" en un medio de eomposicin apropiada, donde se mantienen vivas y activas metablieamente, e incluso se reproducen.

Las investigaciones realizadas con cultivos de clulas Menen la ventaja de que permiten manipular un solo tipo celular homogneo y las condiciones son muy controladas. Sin embargo, se debe ser cuidadoso al extrapolar los resultados a las condiciones n situ, pues la situacin es, sin dudas, diferente. A travs de los aos, los investigadores han logrado establecer lneas de cultivo prccamente inmortales,entre ellas cabe destaw las clulas He-La, que se obtuvieron originalmentede un carcinoma uterino humano y han alcanzado una distribucin universal entre los laboratorios que utilizan cultivos de tejidos. Hoy en da existen otros tipos celulares, establecidos en lneas de cultivo. Por lo general, las clulas cancerosaspueden cultivarsecon relativa facilidad. En estos cultivos se mantienen la mayora de las caractersticas que las distinguen como clulas cancerosas. De hecho, muchas clulas cancerosas en cultivo manifiestan su exagerada tendencia a la multiplicacin,porque no detienen su crecimiento cuando el cultivo alcanza el estado de coduencia, sino que continan dividindose hasta formar capas mltiples, e inclusollegan a separarse de la superficie del recipiente para crecer suspendidasen el medio de cultivo.

M6todos de ingeniera gentica

Los mtodos de ingeniera gentica permiten manipular grandes fragmentos de cidos nucleicos, fundamentalmente ADN, de modo que se pueden "construir" molculas con las caractersticas deseadas por el investigador y multiplicarlas ilimitadamente. En estos procedimientos se hace un profuso empleo de las enzima. de restriccin, para efechiarcortesenmolculas de ADN y de la ligasa, que une entre s fragmentos de estas macromolculas. De especial importancia son los vectores (plsmidos,vims bacterianos y otros), pues posibilitan la multiplicacin de un fragmento de ADN, en cuyo estudio exista determinado inters. Para obtener ms detalles sobre estos procedimientosconsltese el captulo 35. A continuacin describiremos 2 experimentos que demuestran cmo se viene produciendo la contribucin de la bioqunica al conocimientode las bases moleculares del cncer.

Experimento No. l.lhusformaei6n de cluias normales por ADN extrado de clulas cancemsas
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Este experimento fue realizado por Shihy tena como antecedente los trabajos de Avery y otros, que lograron modificar las caractersticas genticas de neumococos mediante la transferencia de material geutico (ADN)de unas cepas a otras. Shih aprovech la capacidad que tienen las clulas normales y cancerosas de crecer en cultivo cuando estn colocadas en un medio de composicin adecuada. El ADN de clulas cancerosas cultivadas se extrajo y, despus de determinadas pnrificaciones y manipulaciones, se aadi a un cultivo de clulas normales. El sorprendente resultado fue que en el cultivo de clulas normales aparecieron clulas alteradas, con todas las caractersticasde las clulas cancerosas (Fig. 80.4). Es evidente que en este experimento se haba logradoprovncar la transformacin cancerosa utilizando el material gentico (ADN). Igualmente, se pudo comprobar que todo el proceso poda repetirse una y otra vez con los mismos resultados, en forma seriada, es decir, extrayendo en cada caso el ADN de las nuevas clulas transformadas. Asquedaba establecidoque el ADN obtenido contena la informacin para inducir la ~onnacin.

Cultivo de clula^

Cultivo de clulas

ig. 80.4. Experimento No. 1. Transforma-

cin de un cultivo de clulas normales por el ADN extrado de clulas cancerosas. Las clulas eoncerosas se tratan de moda tal que su ADN se obtiene en forma altamente purificada. Al adicionar este ABN a cultivos de clulas normatea, se observa que stas se modifican y se convierten en clulas eancerosas.

Aparicin de clulas cancerosas Sin embargo, el ADN de una clula es muy complejo y contiene informacin gentica para la sntesisde una gran cantidad de protenas y ohus componentes celulares, adems de elementos que intervienen en la regulacin del funcionamientocelular. Por ello, se pens que el efecto transformante no deba corresponder a la totalidad del ADN extrado de las clulas cancerosas, sino, muy probablemente,a un determinado sector de ste. Esta suposicin resultaba apoyada por el hecho de que el experimento relatado pudiera ser repetido de manera sucesiva,ya que en este caso no era lgico pensar que todo el ADN de la clula cancerosa original pudiera seguirse obteniendoy trasmitiendo ntegramenteen cada transformacinsucesiva. Por consiguiente, los investigadores se dieron a la tarea de aislar e identificar, dentro del complejsimogenoma celular, aquel segmento del ADN que era responsable del efectotransformante. Este tipo de investigacin slo ha sido posible en aos recientes, gracias a los avances de las tcnicas de ingeniera gentica. El problema bsico se resolvi en 3 laboratorios, en los cuales se utilizaron metodologas algo diferentes. Expondremosa continuacinel mtodo seguido por Cooper, por considerarlo el ms asequible.

Experimento No. 2. Transtnrmaci6n de ciulas normales por un segmento especfico del ADN eKtrei'dn de clulas eaoceros~s Cooper y otros extrajeron el ADN de clulas cancerosas de cultivo, y luego de fragmentarloen mltiples segmentos,con el auxilio de enzimas de restriccin,clonaron cada segmento en un vector (en este caso se utilizun virus bacteriano del tipo de los fagos) (Fig. 80.5). De esta forma, cada segmento obtenido del ADN de las clulas cancerosas pudo separarse y multiplicarse. En esta etapa del experimento corresponda e.wayar la capacidad transformante de cada fragmento, para comprobar cul era capaz de inducir la transformacin de clulas normales de cultivo. Resulta evidente que el nmero de fragmentos a estudiar era muy elevado, y su tratamiento individual hubiera enlentecido mucho el desarrollo del experimento.El equipo de Cooper resolvi esta dificultad mediante un procedimiento en el cual se ensayaba la capacidad transformante degrandes grnpos de segmentos de ADN. Cuando en uno de stos se evidenciabala canacidad transformante. el m n o se divida en otros grnpos ms pequeos, y assucesivamente. De este modo, en un tiempo relativamente cortosepudo idenoficar y aislar un segmento de ADN que tena una altsimacapacidad transformante. Este resultadopoda interpretame como el aislamiento del gen prnductor del cncer.

, - .

Cultivo de clulas cancerosas

Separacin y multiplicacin de los fragmentos por ingeniera gentica

: : = = - - - - - a -

l
l

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MUUUMbiU
Identificacin del fragmento responsable de la transformdcin

Extraccin del ADN

Fig. 80.5. Experimento No. 2. Aislamiento del fragmento de ADN responsable de la transfonnaein eancerosa. El ADN extrado de clulascancerosas es fragmentado can el empleo de enzimas de restricrin. Los fragmentos obtenidos son cloiiados en un veetor apropiado g aadidos a cultivos de clulas normales. De este modo es posible identificar el fragmenta especfico de ADN, capaz de inducir la transformacin cancerosa.

La existenciade genes productores de cncer se sospechaba desde haca algunos aos, sobre todo por experimentos que hahan realizado los virlogos que estudiaban las relaciones entre los virus y el cncer. Algunos virus son capaces de producir cncer en animales, debido a la presencia en ellos de determinados genes particulares, denominados oncogenes. Sin embargo, la identificaciny el aislamiento de oncogenes, ., a partir de clulas cancerosas, slo fueron posibles mediante los experimentos que : hemos descrito anteriormente, lo que posibilit, adems, someter dichos oncogenes a diversos estudios. Un sorprendente resultado de investigaciones posteriores fue comprobar que las clulas normales contienen en su genoma secuencias de ADN muy similares (aunque ' no siempre idnticas) a las de algunos oncogenes que para entonces haban podido ser : aislados. P' Estos estudios se realizaron buscando en los genomas de clulas normales !' segmentos de ADN que pudieran hihridar con determinado oncogn. Como se ;1 .k sabe, la hibridizacin slo se produce cuando hay una gran homologa secuencial. 1 . A este tipo de genes, presentes en las clulas normales, se les denomin proto-onco( ,1: genes.
i

Mecanismos moleeulares de la transformacin

Establecida la existencia de los oncogenes y los proto-oncogenes, se postul un mecanismo para explicar la transformacin cancerosa, el cual plantea que en las clulas normales existen determinados genes (los proto-oncogenes),que de modo espontneo o provocado pueden sufrir alteraciones en su secuencia, dando lugar as a los oncogenes, los cuales, al estar presentes en la clula, determinan el comportamiento eanc&oso (Fig. 80.6). En la actualidad se han podido identificar varios proto-oncogenes. Si bien en algunos casos la transformacin del proto-oncogn en oncogn consiste en una mutacin puntnal nica,algunos experimentos parecen indicar que se requiere ms de un cambio (mutacin)para producir la transformacin. Este hecho ha dado origen a la . teora multifsica,que se tratar ms adelante.

Alteracin estructural de los proto-oncogenes

Robert A. Weimbergy su grnpo han logrado una caracterizacin muy precisa de una mutacin puntual, presente en clulas de carcinoma de vejiga. Para conseguirlo, el oncogn y su proto-oncogn correspondiente fueron clonados, y mediante un

Clula normal

Radiaciones vims carcingenos

Clula cancerosa

i
Proto-oncogn
, .

Oncogn
t

Fig. 80.6. Mecanismo de mutacin puntual, propuesto para explicar el evento inicial de la transformacin cancerosa. Al producirse una mutacin en un proto-oneogn, su informacin se altera y se convierte en un oncogn; su transcripcin y traduccin dan lugar a una protena modificada, cuya funcin alterada ocasiona las cambios propios del cncer.

Transformacin (activacin del oncogn )

-v---.

Protena normal Funcin normal

Protena alterada Funcin anormal ( cncer )

procedimiento de empalmes entre sus diferentes segmentos se estableci que ambos diferan en solo un nucletido. En el oncogn aparecetimina, en el sitio que ocupa una guanina del proto-oncogn. En trminos de cdigo gentico,el cambio de un triplete GCG por GTC (que era el producido) implica la sustitucin en la protena correspondientede una glicina por valina.

Hiptesis de la dosis
La mutacin puntual no parece ser el mecanismoms comn para la activacin de los proto-oncogenes y la produccin de la transformacin cancerosa. En los ltimos aos han surgido otros mecanismos que se relacionan con la hiptesis de la dosis. Esta hiptesis sostiene que en toda clula normal los oncogenes se expresan en detenninada cuanta.. va " aue intervienen en imoortantes funcionescelulares. Cuando la exoresin del oncogn se realiza en demasa, ocurre la transformacin. Son 3 los procesos de transformacinque se explican a travs de la hiptesis de la dosis, y en todos existen suficientespruebas experimentales. CarIo Croce y Philip Leder han encontrado que en el linfoma de Burkitt la activacin del oncogn se produce al transferirse un segmentodel cromosoma 8 hacia el 14. Esta transferencia conduce a un acercamiento entre determinado oncogn, denominado myc, y los genes que codifican las cadenas de protenas de las inmunoglobulinas. En estas condiciones se produce una interaccin entre la zona reguladora de la produccin de inmunoglobulinasy el oncogn, lo cual determina su expresin incrementada y, por tanto, la transformacin. En otros casos, como en algunos cnceres de colon, se ha podido determinar que el gen responsable se encuentra en mltiples copias, en los diferentes cromosomasdel genoma celular, de ah su expresin en cantidades superiores a las normales. Por ltimo, en algunos cnceres animales, producidos por virus, ocurren interacciones entre el material gentico celular y el viral, de modo que el oncogn se emresa en forma anmala. En los casos en quela transformacinse produce de acuerdo con la hiptesis de la dosis, no existe, necesariamente,una alteracin estrnctnraldel gen causante del cncer. Por esa razn algunos autores no realizan una distincin absoluta entre oncogenes y proto-oncogenes.

El genoma humano posee unos 30 000 genes; de stos, se calcula que los que tienen capacidad oncogentica no deben sobrepasar el centenar. Es muy posible que la activacin de los oncogenes que producen distintos tipos de cncer presente determinadas particularidades, pero se considera que deben ser variaciones de los mecanismos ya descubiertos. Es posible tambin que algunos oncogenes se activen por varios mecanismos.

Productos de los oncogenes

Los oncogenes se han encontradoen clulas de organismos tan diferentesentre s como la mosca y el hombre. Cabra preguntarse por qu razn estos genes, que son tan peligrosos potencialmente, se han conservado en el largo proceso de la evolucin. Sencillamente,parece que son responsables de funciones de gran importancia en la actividad normal de la clula. Se ha investigado intensamente para determinar cul o cules son los productos de los oncogenes y qu funciones realizan. Existeun producto deoncognmuyestudiado. RaymondL.Ehny otroslograron identicar la protenaeodiocada por el oncogn src,el cual es de origen viral y produce en pollos nn cncer denominadosarcoma de Rous, de ahsu denominacin (sarcome Rous chicken). El oncogn src codifica una protena, la pp6Ov-src, denominacin que se refiere a la protena de peso moledar de 60 000 D producto del oncogn virai src. Esta protena posee unos 520 aminocidos, y en las clulas se localiza en la cara interna de la membrana plasmtica, ala cual se fija mediante un cido graso saturado, unido a su extremo amino terminal. Se ha descubierto que la pp60v-src tiene actividad de qninasa de protenas, es decir,fosforila protenas a expensas del ATP. Es conocidalaimportanciadelas quinasas d e p r n t e k en la regulacin de mltiples funciones metablicas. Sin embargo, result sorprendente que la pp6Ov-src introduca los grupos fosfato en residuos de tirosina, diferente a otras quinasas conocidas con anterioridad, que lo hacan en residuos de serina o treonina. La pp6Ov-srcfosforacon gran especificidadun residuo de tirobina de la vinculina, una protenaque participa en la estruciuracin del citoesqueleto. La fosforilaciu dela vinculina desorganiza las placas de adhesin, que contribuyen a la fijacin de las clulas en las superficies. Este hecho provee una explicacin para determinadas alteracionesmorfolgicas que se manifiestan en las clulas cancerosas. Las clulas transformadas poseen cantidadesincrementadasde pp6Ov-src, lo cual se ha puesto en evidencia mediante tcnicas inmunolgicas. Se piensa que la actividad aumentada de esta quinasa podra trastornar totalmente el funcionamiento celular y conducir a la aparicin del cncer. La presencia de esta protena en clulas normales indica, por su parte, que debe tener participacin en determinadasfunciones normales. Hoy en da se conocen varios oncogenes que codifican quinasas de protenas. Se sabe que varias de ellas fosforilan especficamente residuos de tirosina (tabla 80.1). Estos hechos han atrado la atencin de los investigadoreshacia las quinasas de protenas especficasde tirosina, en el supuesto de que deben intervenir en la regulacin de aspectos de suma importancia en las funciones celulares. Sin embargo, se conocen oncogenescuyo producto carece de actividad quinsica. Algunos oncogenes parecen intervenir en la codificacinde determinadas protenas, pertenecientes al grupo de las denominadas factores de crecimiento, o bien de los receptores de dichos factores. Concretamente,en sarcomas de monos producidos por virus, se ha demostrado la sntesisy excrecin de una biomolcula idntica,o al menos muy parecida, al factor de crecimiento procedente de plaquetas @latelets derived growthfactor,PDGFJ.

nibla 80.1. Oncogenes que codifian quinasas de protenas"

Oncogn vsrc v-fps v-abl

v-Tos

Localizacin de la quinasa Membranaplasmtica Membmaplasmtica Mmibranaplasmtica Mmibranapiasn~tica Desconocida Desconocida Desconocida Desconocida

Especificidad sobre residuos de tirosina S Si Si Se desconoce S Si Si Se desconoce

v-yes v-ros v-fes v-fms

'Adaptado de Bishop J Michael. "Oncogenes". Invesligaein y Ciencia. Mayo de 1982.

El producto de otro oncogn, el erh-B,presenta una gran similitnd con el receptor del factorde crecimientoepidmico (epidedgrowth factor, EGF). El descubrimiento de que el receptor de EGF posee un dominio intracelular, con actividad de quinasa de protenas especfica para tirosina, ha establecido un vnculo entre estos productos de oncogenes y los vistos anteriormente. El producto del oncogn p2lras tambin se localiza en la membrana, pero en lugar de actividad quinasa posee actividad de guanosn trifosfatasa (GTPasa). En clulas transformadasla actividad GTPasa de esta protena est muy disminuida, en relacin con las clulas normales. Varias GTPasas de membrana intervienen en la modulacin de los efectos que tienen algunas hormonas sobre las clulas. El producto de algunos proto-oncogenesacta como un factor de transcripcin nuclear y regula la frecuencia con que algunos genes son transcriptos.

Genes supresores tumorales

En los aos 70, los estudiosde determinadoscnceres, como el retinoblastonia g el tnmor de Wilms, permitieron reconocer la importancia que tienen en la carcinognesis algunos genes, denominados genes supresores tumorales o antioncogenes. Todo parece indicar que los productos de estos genes son necesarios para las funciones celulares normales, y que la prdida de dicha funcin da lugar a tumores cancerosos. En estos casos el efecto del gen tiene carcter recesivo, en el sentido de que las 2 copias de una clula diploide deben estar alteradas para que aparezca el cncer,lo que contrasta con el carcter dominante de los oncogenes y ha sido la explicacin de algunos experimentos, en los cuales, al fusionarseuna clula normal con una cancerosa, el carcter canceroso desapareci, contrariamente a lo que se hubiera podido esperar. Entrelos genes supresorestumorales, uno delos ms estudiadoses el pS3,cuya localizacin cromosmica est en 17~13; est implicado en cnceres de mama,colon, pulmn y otros, y se ha afirmadoque ms de150 % de los cnceres humanos presentan alteracionesde este gen. El producto del gen pS3 posee una accin que detiene el ciclo celular, y mantiene a la clula en G,. La entrada de la clula en fase S requiere la inactivacin del producto de pS3; tambin se ha comprobado que este producto induce la apoptosis (muerte celular),cuando las clulas presentan daos del ADN que no son reparables. Hoy se distinguen cerca de dos decenas de genessupresores tumorales y aunque en muchos casos se desconoce su funcin, algunos, al igual que pS3, regulan el ciclo celular o la adhesin entre clulas.

El conocimientode los geness u p m m tumoralesha abiertouna nueva alternativa para explicar los mecanismos de la carcinognesis, adems de la activacin de los oncogenes.

Como ha podido verse hasta aqu, las mutaciones somticas constituyen el mecanismomolecular de la transformacincancerosa. Se considera que en la mayora de los cnceres son necesarias de 2 a 7 mutaciones, para dar lugar a un cncer tpico. De lo anterior se deduce que la carcinognesisno es un evento nico y sbito, sino que es un proceso ms o menos prolongado, que atraviesa por diferentes pasos o etapas. Esta concepcin se conoce como teora muitifsica de la eareinog6nesis. Las etapas consideradas por la teora multifsicason las siguientes:

l.inieiaci6n. Se produce por cambios irreversiblesen el ADN, que son incapacesde producir el desarrollo neoplsico por ssolos. Desde el punto de vista mdico se relacionan con las acciones preventivas del cncer. 2. Promd6n. Las clulas iniciadas pueden ser inducidas a proliferar, por la accin dediferentesagentes que no son cancergenos en s mismos. Sus efectos an son reversibles. Desde el punto de vista mdico se vinculan con el diagnstico precoz de lesiones precancerosas. 3. Progresi6n. Nuevas mutaciones en clulas iniciadas y promovidas conducen a que proliferen de modo autnomo, sin la necesidad del concurso de agentes promotores. Seconsidera una fasean curable. 4. lhmsferencia. Es la fase de expansin y crecimiento celular incontrolado. El tratamiento en esta etapa suele ser paliativo.

La capacidad de crecimientoe invasin de un tumor canceroso est vinculada a cambios adicionalesen el comportamientocelular.Se ha comprobado que los tumores cancerosos suelen producir factores angiognicos,como el factor bsico de crecimiento de fibroblastos,los cuales, a su vez, estimulan el desarrollo de los vasos sanguneos que nutren la masa tumoral y proveen una va parasu extensin. Adicionalmente,las clulas cancerosas producen colagenasa y otras proteasas que degradan las membranas basales, lo cual posibilita la invasin de los tejidos adyacentes. Por otro lado, los cambios inmnnolgicos posibilitan que las clulas cancerosas del tumor original y delasmetstasisescapen a la vigilancia del sistema inmnnolgico. La disfnncin inmunolgicaexplica, en parte, la frecuente aparicin de cnceres en pacientes inmunodeprimidos, como sucede en los afectadospor el SIDA y en los que reeiben tratamientoimnunosupresor, por haber sido mptores de rganostrasplantados.

Perspectivas
En un plazo relativamente corto se completar el inventario de los principales oncogenesy genes supresorestumorales humanos, y se dilucidarn sus mecanismos de accin en el origen del cncer. Es muy probablequeen losprximosaosseUeguea tener un esquemaunificador que permita explicar, por unlado, los mecanismos normales de control del crecimiento

y la multiplicacin celular y que, por otro, brinde la clave de las alteraciones que conducen a la transformacin cancerosa. Posiblemente,la accin de la diversidad de oncogenesy de los productos de stos que se conocen en la actualidad,slo difieranen cuanto alas etapas del mecanismo de control donde actan. Los aportesde la bioqumica al conocimiento del cncer podrn contribuir a la bsqueda de mtodos de deteccin y tratamiento ms eficaces, pero tambin darn un impulso significativoa la comprensin de los mecauismosmoleculares de importantes funcionesde la materia viva, como son el crecimientoy la multiplicacin.

Resumen
El cncer se produce por la branslormad6n de&ulssmrmales en raneerosai, lo cual ocasiona mltiples alteracionesen las caracterscasde stas, en particular un crecimientoy mdtipUd6n incontrolados, y un comportamientohvasivo sobre el resto del organismo. Las causas del cncer 610 comienzana entenderse,en susa q e c b moleeulares, en aos redentes. Ha quedado daro que el carctertransformadoes heredable y se trasmite de las clulas progenitoras a su descendencia; por tanto, el ADN est involucrado en su produccin. El ADN de etulas canceramw tiene la capacidad de producir la transformacin de clulas normales. Rsta capacidad reside en segmentm especiaw del ADN, que se denominan onwgenes. En c h l a s normales sehan encontrado segmentos de ADN muy similares a los oncogenes, los cuales se denominan proto-oncogenes. El evento inicial de la trauS0rmaci6ncan~er088, en algunos tipos de cncer, consiste en la formadn de un onmgn a partir de un proto-oncogn. En determinadoscasosuna mutacin puntual resula sncientepara producir la transformacin, pero otros mecanismos pueden producir la activacin de oncogenes, por ejemplo, la transferencia de segmentos entre crommmas, la multipiidn de genes o la interaccin con ADN de origen viral. Muchos oneogenes d c a n euzimas con actividad de quinasas de protenas que fostorilan en residuos de maina. Otms producios de oncogenes se relacionan con los factores de eredmientoo sus receptores. Las genes supre80m tumoralea o antioneogenestambin tienen participacin en la aparicin de muchos tipos de cncer. Es muy probable que todas estas proteinas y sus genea participen en los mesanismos que controlan el crecimiento y la m d t i p l i d n de las dulss, tanto en condiciones normales como en el cncer. En la aciuadad se considera que la trsaslormacin cancero88 no es un proceso nico y mbito, sino que consta de mltiple8etapas,lo cuai ha dado origen a la teora multVrisica de la eardnognesis. Para que se constituya un tumor tfpico se requieren algunos cambios pcrscardnognesis. stos se reiadonan con las modificaciones inmunol6gic88 y l a seerefl6n de factores angiognlwa y proteasas.

Ejercidos
1 .Explique en qu consiste la transformacin cancerosa y cules son sus consecuencias. 2. Enumere las caradersticasde las clulascancemsas. 3. Cmo se demostr que el ADN de clulas cancerosas era capaz de inducir la transformacin de clulas normales? Qu relacin encuentraentre este hecho y el carcter informacioual de las molculas de ADN?

4. Analice el experimento nmero 2 de este captulo e indique: a) i Cul es el objetivode este experimento? b) i De qu modo intervienen las tcnicas de cultivo de tejidos y de ingeniera gentica en la realizacin del experimento? c) i Cules son los resultados del experimento?

5. Describa los mecanismos moleculares propuestos para explicar la transformacin cancerosa. 6. Un grupo de cientficosdescubri sorpresivamenteque el ADN de algunas clulas cancerosas de nilovo no presentaba ninguna alteracin eshuchiral en la secuencia de bases de sus genes. En este sentido, esas clulas cancerosas no diferan de las clulas normales. Para comprobar una hiptesis se extrajo el ADN de las clulas normales y de las cancerosas,y despus de fragmentarlacon enzimasdereshiccinse bibrid con un segmentodeADN radiactivo, capaz de unirse por complementdedad de bases con un oncogn. El ADN fragmentado e bibridado se separ por electroforesis y se determin en cada tipo celular cuntosfragmentos bioridos existan, mediante un prnceder que revela las bandas que tienen radiadividad (autorradiografa). Se encontr que el ADN de las clulas normales slo presentaba un fragmento hbrido, mientras que en las clulas cancerosasse observaban varios.
a) qu conclusiones pueden emitirse en cuanto a la composicin del genoma de las clulas normales y cancerosas en este caso? b) jQuconocimientosaportara este experimento, en relacin con los mecanismos dela transformacin cancerosa? C)Con cul hiptesis acerca de la activacin de oncogenes se relaciona el resultado de este experimento?

7. Por qu en las clulas diploidesse requiere de la alteracin deambas copias de un

gen supresor tumoral para que se produzca la transformacincancerosa? 8. Cules son las etapas consideradas en la teora multifsica de la carcinognesis? 9. icules son los principales cambios poscarcinognesis que se producen en el desarrollode un tumor canceroso?

Cuando fijamos nuestra atencin en el mundo animado, nos percatamos de que los seres vivos se caracterizan por poseer formas que les son propias, de ah que la forma constituya uno de los medios fundamentalespara disinguir unos seres vivos de otros. La forma de los seres vivos y de sus partes componentes muestra una gran variabilidad, aun dentro de la misma especie. Seguramente no existen 2 fmures humanos que sean idnticos,sin embargo, dentro de esta variabilidad existen marcadas regularidades que determinan que cada ser vivo o componente de ste sea lo que es y no otra cosa; es por ello que los anatomistaspueden estudiar la morfologa del fmur humano, pues su estudio consiste en poner de manifiesto lo que tienen en comn todos los fmures. Este hecho es una manifestacin de la relacin dialctica entre lo general, lo particular y lo singular. En todo ser vivo, y en sus componentes,se observa una marcada relacin entre la forma (o estructura) y la funcin. La morfologa general del fmur, sus accidentes anatmicos y la disposicin de las trabculas seas, se adaptan perfectamente a la funcin de sostn que ste realiza, y a la direccin de las fuerzas que habitualmente actan sobre l.

Concepto y reglas de la morfogenesis

Los cientficos se vienen preguntando de qu modo todas las partes de un ser vivo alcanzan, en su desarrollo, las formas que les son caractersticas. Este tema, de gran importancia terica y prctica, se enmarca dentro del campo de la morfognesis. Por morfognesis entendemos el profeso mediante el cual los seres vivos alcanzan una estructura tridimensional, caracterstica en sus diferentes niveles de organizacin. Como podr comprobarse, el campo de estudio de la morfognesises muy amplio, ya que debemos tratar de explicar tanto la forma de un componente molecular de las clulas, una protena, por ejemplo, como la de un organismo superior, digamos el elefante. Desde luego, entre estos 2 extremos existen numerosos niveles intermedios de organizacin, como los organelos subcelulares,las clulas, los tejidos y los rganos. Todos estos niveles plantean problemas morfogenticos de complejidad creciente.

La bioqumica se ha ocupado tambin de este complejo problema de la morfognesis. Puede decirse que los resultados obtenidos en este campo de la investigacin son, hasta ahora, limitados, pero importantes. Los conocimientos que poseemos en la actualidad acerca de la morfognesis alcanzan slo los niveles de organizacin relativamente simples, como son el molecular y el subcelular, si bien se comienza a tener elementos de los niveles celular y de tejidos. No obstante, los resultados obtenidos han permitido realizar algunas generalizaciones que pudieran tener determinada vigencia en los niveles de organizacin de orden superior. En estecaptulo se intenta dar una visin de los aportes realizados por la bioqumica al conocimiento de la morfognesis, para lo cual nos valemos de algunos experimentos muv ilustrativos. Cuando se analizan mltiples experimentos,encaminados a descifrar el problema de la morfognesis a distintos niveles,se puede identificar una seriede regularidades de estos procesos, las cuales hemos denominado reglas de la morfognesis. stas, si bien no tienen una aplicacin absoluta ni universal, se cumplen con suficiente frecuencia como para considerarlas de utilidad en el anlisis de los procesos morfogenticos. A continuacin se enuncian estas reglas con algunos comentarios: 1. Lamorfognesisest determinada genticamente. Ello quiere decir que la forma que adoptan los seres vivos y sus componentesest predeterminada por el "acervo" gentico de ellos, o lo que es igual, la informacin necesaria para el proceso morfogentico se encuentra codificada en el ADN. Debe aclararse, sin embargo, que esta determinacin est influida por la interaccin del organismo con el medio, el cual, desde luego, puede ocasionar modificaciones-ms o menos marcadas- en la morfologa de un organismo en particular. Tambin es necesario aclarar que determinados procesos morfogenticos pueden requerir de elementos de informacin adicional a la que est codificada en el ADN del organismo. 2. Las proteha8 tienen nna funcin sobresaliente en la morfognesis. La funcin sobresaliente de este tipo de macromolculas en los procesos morfogenticosparece depender de la gran variabilidad conformacional de stas, y de las mltiples interacciones aue meden establecer con molculas similares o diferentes. En las protenas se produce,de manera sobresaliente,la conversin de informacin secuencia1en informacin conformacional, por lo cual constituyen molculas idneas para expresar la informacin de carcter espacial, contenida en la estructura primaria de los genes. 3. En la morfognesis son de gran importancia las interaeeiones dbiles. Se ha podido comprobar que en diversos procesos morfogenticos la adopcin de determinadas formas y estructuras est impulsada por el establecimiento de uniones dbiles, pero mltiples, entre las cuales se incluyen los puentes de hidrgeno, las uniones hidrofbicas, los enlaces salinos y las atracciones de van der Waals. 4. La morfognesis es un proceso cooperativo. Todo evento morfogentico es un proceso que transcurre por etapasms o menosdistinguibles. La produccinde las etapas iniciales del proceso facilita la ocurrencia de las etapas sucesivas. Se plantea que la existencia de cooperatividad en los fenmenos morfogenticos posee determinadas ventajas, ya que asegura que el proceso culmine con un producto til y evita, en buena medida, el despilfarro de "sobrantes". La cooperatividad imprime al proceso morfogentico cierto carcter de todo o nada. 5. La morfognesisea un proceso espont4neo.Los componentes de una estructura morfolgica dada suelen mostrar una tendenaa marcada a adoptar dicha estructura, sin el concurso de agentes exteriores; para ello es requisito que las caractersticas del medio sean muy similares a las del correspondiente medio natural de dicha estructura. Existen, sin embargo, procesos morfogenticos que slo tienen lugar con posterioridad a determinada accin enzimtica, por lo cual, en algunos sistemas, se han descrito enzimas o protenas de accinmorfogentica.

6. La mo1fog6nesis de estnictnras complejas se realiza a partir de bloques o mi~ d e ~La estrnduracin n . de componentesms o menos comple,jos se realiza por medio de diferentes partes, que se organizan y unen para constitnir el todo. Las ventajas del uso de bloques, muchas veces idnticos, estn dadas por el hecho de que implican un ahorro de ADN codificante. Adems, se facilita la unin por interacciones dbiles y se minimiza el nmero de productos finales(no funcionales) que puedan producirse por errores en los procesos de expresin de la informacin gentica. 7. En i a morfoghesis de estnictwas complejas &te un orden de ensamblaje. Cuando un evento morfogentico incluye la participacin de diferentes partes, stas no se unen en un orden cualquiera, sino que existe un orden preferencial: determinada parte se incorpora primero; otra, despus de aqulla, y as sncesivamente, hasta formar el todo. 8. La morfognesiiests vIneulada a la funcin en cada nivel analizado. La forma definitivaque se alcanza en un proceso morfogenticopresentaun elevado nivel de adecuacinala funcin que realiza esa estrndura. Esta regla refleja la presin de la seleccin natural, que conduce a la supervivencia de las formas mejor adaptadas a la funcin correspondiente. Debe advertirse que se han encontrado excepciones en algunas de estas reglas, lo que no contradice en modo alguno su verificacin en la mayora de los casos.

Premisas experimentales para el estudio de la morfognesk

Los mtodos experimentales, cuyo desarrollo ha permitido el estudio de la morfognesis, se encuentran estrechamente vinculados a los diferentes niveles de organizacinde la materia viva que se han considerado. El principio bsico de estndio consiste en separar las partes componentes de una estructura dada, y luego experimentar sobre la posibilidad de la reconstitucin de dicha estructura, a partir de los componentes aislados; se tienen en cuenta las condiciones que pueden influir en dicha reconstitucin y la forma en que se producen (Fig. 81.1). En el estudio de macromolculas y agregados snpramacromoleculares relativamentesenciilos ha tenido una marcada inthencia el desarrollo de los mtodos de purificacin y deagregacin, que combjnan una alta capacidad de resolucin con la suficiente inocnidad como para separar y obtener determinados componentes molenilares,sin producirles alteracionesestructnralesimversibles.Entreestuimtodos se encuentran la ultracentrifugacin y las distintas modalidades de electroforesis y mmatografa. En la medida en que las estrncturas estudiadas son ms complejas se pueden requerir otros mtodos adicionales,como la obtencin de mutantes de un organismo y otros recursos de la gentica. Los estndins de reconstitucin implican el control de la estructura reconstituida y de su actividad funcional. En el primer caso se ha recurrido frecuentemente a la microscopia electrnica, que por su potencia permite, incluso, estudiar la forma de mammolculas aislada%Losestudiosfuncionales,porsu parte, van desde la actividad cataltica de una enzima hasta la capacidad infectiva de un virus, por ejemplo. Por ltimo, sealaremos que los mtodos de la ingeniera gentica han comenzado a emplearsepara producir modificaciones "a voluntad" en distintas macromolculas, lo que permitir estndiar lainfluenciade estos cambiasen los procesos de morfognesis, lo cual se avizora como un campo muy pronietedor en estos estudios. A continuacin se describen 4 experimentos que reflejan el modo en que la bioqumica ha contribuido al estudio de la morfognesis.

de componentes

Reconstitucin de la estructur

F . 81.1. Muchos experimentos de marfogGnesis siguen una lgica enmn. sta consiste en la separacin, aislamiento u purificaci6n de las partes que componen una estructura dada, y luego estudiar la posibilidad y las condiciones necesarias para reconstituir la estructura completa, a partir de sus componentes.

Experimento No. 1 .Desnahiralizaci6nreversible de uoa protena sencilla Como sabemos, las protenas presentan una conformacin que es caracterstica para cada una de ellas. Esta conformacin es, en definitiva, la forma de la molcula, y una condicin necesaria para su funcin biolgica. Se han realizado experimentosen los cuales una protena enzimtica se somete a la accin de un agente desnaturalizante (altas concentraciones de urea, de agentes reductores o de ambos). Un ejemplo bien conocido es el experimento realizado por Christian B. Anfinsen con la enzima ribonucleasa (Fig. 81.2).

Fig. 81.2. Desnaturalizacin reversible de la enzima ribonucleasa. La accin de agentes desnaturalizantes provoca un cambio estructural que Ileva a la prdida de la actividad enzimtics. Esta actividad se recupera al mtirar el agente desnaturalizante, lo cual indica que se ha reeupcrado la estructura nativa.

, Eliminacin de los agentes desnaturalizantes

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Protena nativa activa

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- I ,

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Plegamiento correcto espontneo Al someter la ribonucleasa a la accin de nrea y agentes reductores, la enzima desnaturalizadapierde su capacidad cataltica, lo cual indica que se ha modificadosu conformacin. Cuando se retira el agente desnaturalizante (por dilisis u otro procedimiento),la actividad enzimtica se recupera, lo que indica que la ribonucleasa ha adoptado nuevamente su conformacin original. Este proceso de renaturalizacin puede ser interpretado como un evento morfogentico a nivel molecular, donde la protena pasa de una conformacinms o menos azarosa, a su conformacin natural, activa. Recordando las reglas de la morfognesis que hemos enunciado,puede comprobarse el cumplimiento de stas: 1. La adopcin de la conformacin activa de la protena est determinada, como se sabe, por la secuencia de sus aminocidos constituyentes y dicha secuencia se encuentra codificada por el gen (ADN) de esa protena (regla No. 1). 2. La ~ o u u c l e a ses a una protena (regla No. 2). 3. La protena adopta su conformacin activa debido, fundamentalmente, a las interacciones dbiles que se establecen entre los residuos de aminocidos que la componen (regla No. 3). 4. Si se sigue temporalmentela recuperacin de la actividad enzimtica, se observa que esta recuperacin es lenta al principio y ms rpida despus,lo cual indica que las etapas finales de esteevento morfogentico se favorecen al ocurrir las etapas precedentes (regla No. 4). 5. La renaturalizacin no requiere de ningn agente exterior; slo es preciso que el medio simule el habitual de la protena (regla No. 5). 6. Como se sabe, la conformacin natural de la enzima se correspondecon la forma ms adecuada parala funcin que realiza, establecindose asel vnculo entre el proceso morfogentico y la funcin de la estructura dada (regla No. 8). El resto de las reglas no se aplican en este experimento.

Se han realizado experimentos similares al anterior, donde la protena utilizada presenta un grado de complejidad estructural superior, dado que se trata de enzimas formadas por subuuidades.La aldolasa,por ejemplo,que e s t formada por 4 subuuidades idnticas, y %por tanto un tetrmero. Algunos agentes desnaturalizantes son capaces de disociar las subunidades y, adems, alterar la conformacin de stas (Fig. 81.3).

Protena oligomrica nativa

Monrneros reconstituidos
Fig. 81.3. Reionatrurribn de una protena emimtieri con etruitura olipmirica. La enzima aldolasa est formada por 4 subunidades idnticas. Los agentes desiiatura.liziintes provocan la disociacin de las subuniddes y la prdida par stas de su conforrnaci6n nativa. Al retirar el agentedesnaturalizantecada subunidad recupera su eonformacin original y luego se unen cntre s para foniiarel oligbimiem; de este modo se recupera la actividad enzimtica.

Eliminacin del agente desnaturalizante Subunidades separadas y

Oligmero reconstituido activo

La eliminacin del agente desnaturalizante conduce a la recuperacin de la actividad enzimtica; de aqu se deduce que se ha reconstituido la protena en su conformacin natural. Se ha podido comprobar, adems, queeu esta reconstitucin, queno esms que un evento motiogenticomuy simple, se recupera, en primer lugar,la conformacin de las subunidadesy, posteriormente,stas se unen para constituir los tetrmeros activos. Consideremos ahora la verificacin de las reglas:

1 .En este caso debe analizarse que el ADN, al codificar la secuencia de aminocidos delas subunidades,est determiuandono slo la conformacinde cada subunidad, sinotambin la posib'idad de interactuar unas con otraspara co11stiiuirlostetrmeros (regla No. 1). 2.De nuevo se trata de una protena, aunque en este caso con una complejidad motiolgica superior (regla No. 2). 3. Las interaccionesdbiles no slo son determinantes en la conformacin queadoptan las subunidades,sino en la asociacin entre ellas (regla No. 3). 4. La cooperatividad se manifiesta no slo en la reconstitucin de cada subunidad, sino en que la asociacin entre ellas favorecela delas restantes, hasta constituir el tetrmero (regla No. 4). 5. Nose requieren agentes externos (regla No. 5). 6. Estamos en presencia de una estructura que se constituye a partir de bloques, que son,en este ejemplo,las subunidades (regla No. 6). 7. La funcin (actividad enzim6tica)se presenta en el tetrmero en su forma acabada (regla No. 8).
Es conveniente sealar que la rihonucleasa y la aldolasa son enzimas parcnlarmenteadecuadas para estos experimentosde renaturalizacin.Experimentos similares, que se han Uevado a cabo con otros sistemasenzimticos,no han conducido a resultados tan satisfactorios. Entre las explicaciones que se han brindado para estos fracasosaparentes est el conocimiento que se posee de que muchas enzimas van adoptando su conformacin

activa simultneamente con su traduccin, lo cual podra facilitar que se alcance determinada disposicin espacial cuando aun la cadena polipeptidicaest incompleta, hecho que no se producira si se partiera de una cadena totalmente acabada. En este caso, habra que considerar el proceso morfogentico desde la misma sntesis del comoonente v sobre una base esencialmente dinmica. 0 t r a ~ ~ k t e n (denominadaspm-proteias) a s sonsinteo~adascon un pesomolenilar ms elevado que elde la forma activa, y se requierede su modificacin,habitualmente por protelisis, para que se adopte su conformacin funcional. En otros casos, la interaccin con una coenzima o grupo prosttico es el evento determinante para la adoocin de la conformacin activa. Por ltimo, cierto tipo de protenas, denominadas genricamente chaperonas, contribuyen con sus interacciones a que algunas protenas adopten su configuracin activa.

Experimento No. 3 . Reconstituci6n de un organelo subcelular: el nbosoma

Mawyaw Nomura y otros han sido capaces de realizar experimentosde reconstitucin de estructuras tan complejas como los ribosomas. Los experimentos ms detallados se han realizado con las subunidades 30 S de rihnsomas de clulas pmcariotas. En esencia, el experimento consiste en disociar las subunidades 30 S en sus protenas y ARN constituyentes. Una vez aislados y separados estos componentes, se ha podido reconstituir la subunidad y comprobar que stas son funcionales e indistinguibles de las originales (Fig. 81.4). Algo similar se ha obtenido con partculas 50 S.
Fig. 81.4. Experimento de reconstitucin de ribosomas. Se ha estudiado en detalle la reconstitucin de la subunidad 30 S de ribosomas bacterianos. Las subunidades son disociadas en sus protenas y ARN constituyentes; stos son aislados y purificados, y luego se estudia elproeesoderen>nstimcinapartir de atas componentes. Se ha eamprobado la existencia de determinado orden de ensamblaje. Las subunidades reconstituidss son totalmente funcionales.

Ha sido posible verificar que los distintos componentes se van asociando en un orden preferencial, aunque no estricto; algunos componentes slo se incorporan si otro lo ha hecho con anterioridad. En resumen,existe un grupo inicial de 6protenas, las S4, S7, SS, S13, S15 y S20, quese unen al ARNr de 1 6 s y forman una partcula de rihnnucleoproteha,denominada R1. Luego se aaden otras protenas y se intepra una p a r t d a 21 S que no es funcional. Finalmente, con la adicin de las protenas restantes, se integra definitivamente la subunidad 30 S funcional. Las ltimas etapas se desarrollan con gran rapidez. Nomura ha establecido un detallado mapa de ensamblaje, donde estn definidas las precedencias exactas en el orden de incorporacin. Experimentossimareshan permitido integrar parti'das ribosomales,carentes de una u otra protena. Estas partculas no son activas y tienen alteradas ms de una funcin ribosomal; ello es prueba de la necesidad de la presencia de todos los componentespara alcanzar una funcin satisfactoria. En el experimento aqu descrito y en el que presentaremos a continuacin. invitamos al lector a reflexionar sobre la verificacin de las reglas de la morfognesis.

Experimento No. 4. Reeonshiiuci6n de un virus haderiano: el fago T ,

Los v i m han constituido modelos experimentales, muy utilizados en estndios de i m del mosaico del tabaco, el cual est morfognesis. El primero en estudiarse fue el v formado por una molcula de ARN de 6 000 nucletidos y 2 100molculas idnticas de protena. La disociacin y la asociacinde estos componentes se pueden conseguir variando la concentracin salina y el pH del medio. Algo ms complicada es la morfognesis del fago T,. El fago (o hacterifago) T, es un v i m que infecta bacterias; su estmctura es muy peniar, pues est formadopor una cabeza hexagonalque tiene una cubierta constituida por protenas, en cuyo interior se encuentra una molcula de ADN, la cual constituye el material gentico del fago. La cabeza se une por el cuello a la cola; sta termina en la placa basal, de donde parten unos filamentosdenominadosfibras de la cola. Durante su ciclo infeccioso el vims se fija a la pared bacteriana, a la cual se le introduce el ADN. Una vez que el ADN ha penetrado en la clula, ste codifica la sntesisde ARN que se traduce por el aparato biosintco de la bacteria y da lugar a las diversas protenas queconstituyenlas diferentes partes del virus; a la vez, el ADN vira1 se replica (Fig. 81.5).

Sntesis de componente?
Fig. 81.5. Cielo vital del bacterifago T4. El virus se une mediante la cola a la pared bacteriana e introduce su ADN dentro de la clula. Posteriormente, el ADN vira1 dirige la sintcsis de las protenas propias del fago, para lo cual utiliza el aparato biosinttiea de la bacteria; a su vez, el ADN vira1 se replica. Al final del procesa se forman nunirmsas pai-. tculas virales, que salen al exterior cuando se produce la lisis de la bac-

a+

i
Liberacin de vims completos

Unin e introduccin del ADN

rna.

Los ADN y las protenas virales se asocian para dar lugar a un gran nmero de nuevos V~NS, que salen al exterior de la clulaal destniirsela membrana de la bacteria. La formacin de los nuevos vims en el interior de la bacteria es un proceso morfogentico interesantsimo, que ha sido estudiado en gran detalle, sobre todo por R. S. Edgar y W . B. Wood mediante laboriosos experimentos, en los cuales se ha logrado la produccin de virus incompletos. De hecho, se consigue obtener y separar el ADN y las diferentes protenas componentes del vims. Luego se puede seguir detalladamenteel proceso de formacinde la partcula viral. Los virus T, asconstruidas son infecciososy no se distinguen de los naturales. Enla morfognesisdel T,se ha podido comprobar que sus distintaspartes (cabeza, cola y fibras)se forman por separado,a partir de sus componentes(ADN y protenas), paraluego unirse en un orden preciso y dar lugar al virus con su morfologa caractersiica (Fig. 81.6). ste es un ejemplodemorfognesisde una estmctura con un nivel de complejidad elevado. En este caso se conoce que para la formacinde la placa basal se requieren determinadasprotenas virales, que no forman parte del fago terminado y se denominan protenas de ensamblaje. Este hecho constituye cierta excepcin de la regla No. 5.

Protenas de la cabeza Protenas del cuello y la cola

m-

Protenai de

4-ZN
\

la? fibra?

- ,

, \

Fig. 81.6. klorfognesis del baeterifago T,. Las diferentes partes del virus se forman a partir de sus constituyentes (protenas y cidos nucleieas). Posteteriomente,las partes se unen en un orden precisa para dar lugar al virus completo.

Otros ejemplos de morfognesis

A lo largo de este texto el lector ha tenido oportunidadde considerar otros ejemplos de estructuras biolgicas que se asocian espontneamente, a partir de las propiedades de sus constituyentes,por ejemplo, las membranas biolgicas, los microtbulos y los nucleosomas (captulos 20,22 y 23).

Las perspectivas de la investigacin en el campo de la morfognesisse encaminan al esclarecimientode la estructuracin de componentes cada vez ms complejos. De particular inters son algunos eventos morfogenticos que parecen requerir una accin emhntica para producirse. Puede ser necesario, por ejemplo, la modificacin proteotitica de una protena, antes de que pueda ser incorporada a una estructura dada; en otros casos puede requerirse de la modificacin enzimtica de un cido nucleicn. Enigmas adicionales nos plantea la morfognesis de algunas estructuras que requieren, para formarse, de la presencia de estructuras similares, constituidas previamente. Todas estas interrogantes muestran las numerosas posibilidades de investigacin que existen en este campo. Es posible que los avances de la bioqnmica permitan, algn da, explicar la morfognesis de componentes macroscpicos de los seres vivos, en trminos molecnlares. Ya se han iniciado estudios en un organismo pluricelular muy sencillo, un vermes nematodo (Caernorhabditiselegans), que est compuesto slo por 1000 clulas somticasy 2000 clulas germinales, y del cual se poseen detalladosesquemas de organizacin. Tambin se producen avances en la determinacin del desarrollo de este organismo (desde el huevo fertilizadobasta el adulto). Otro modelo aue se estudia intensamentees el relacionadocon el desarrollode la desde el ovocito hasta el animal adulto. mosca de las frutas (Drosophilamdanogaster), En este caso las caractersticas ms sobresalientes del desarrollo embrionario estn dadas por su polaridad antero-posterior y dorso-ventral,y por su metamerismo, es decir, su divisin en segmentos. Tres grupos de genes, que actan sucesivamente, constituyen una cascada de desarrollo que garantiza la normal formacin del embrin y del adulto: los genes maternos, que determinan la polaridad del embrin; los genes de segmentacin, que determinan el metamerismo; y los genes bometicos, que determinan las caractersticas particularesde cada segmento. La morfognesis, adems de tener un alto inters terico, se relaciona con los problemas mdicos de importancia prctica, como la embriognesis y las

malformaciones congnitas,por lo cual el desarrollo fuhim del conocimiento en este campo podra redundar en determinados beneficiosde carcter mdico.

Resumen
La modognesis es el pn>ceso mediante el cual los seres vivos alcanzan su estruetnra bridimensional caraeteristica en sus diferentesniveles de organizacin. La bioqumica ha llevado a cabo el estudio d e algunos fenmenos morfogenticos, especialmente de aqullos que se desarrollan a nivel macromolecnlar o supramaeromoleeular. El estudio de diferentespmcems morfogenticos ha puesto de manifiesto una serie de regularidades, conocidas como reglas de la morfognesis que, si bien no son de aplicaci6u universal, se cumplen en la mayorla de los casos esiudiados y tienen una innegable uiidad metodol6giea. Las reglas de la morfognesis plantean que estos procesos estn determinados gencamente,y que las protehas d e s e m p h n en d o s una funcin fundamental, al ignal que las interaceiones dbiles entre sus componentes, que dichos proeesos son cooperatiw y espontnem, y en muchas ocasiones se producen mediante bloques o unidades de eonstrucci6u,existiendo cierto orden de ensamblae; y que la morfognesis de cualquier estnictura se vincuia con su funci6n. En esencia, la mayor parte de los experimentos relacionados con la morfognesis se basa en la separaciny pnricacin de los diferentescomponentes de una estrudura y en el estudioulterior dela reconstitucin de dicha estructnra, a partir de sus componentes. De ab que el desurolio de los mtodos de aislamiento y puricaei6n, como la ultracentrifugaei6u, la eledroforesis y la cromatografa, hayan constituido una premisa importante para los estudios de morfognesis. Mediante profedimientw: que tienen esta lgica experimental comn, se han estudiado: la reconstituci6u de diferentes estructuras, como las enzimas (monomricasy oligomricas), los organelos celulares (ribosomas y membranas) y los organismos simples (virus vegetales y bacterianos). Estos trabajos, adems de aportar conodmienbs sobre las estructuras concretas esiudiadas, adaran dudas acerca de los proeesos de modognesis en general. Las perspecvas en e s t e campo se encaminan al estudio de la morfognesis de estructuras cada vez ms complejas y a l a dilucidacin de a s p e c t @ s particulares de eventos morogentiws que requieren determinada accin o informaci6n exterior para producirseAdems del aporte de couodmientos fundamentales que pueden arrojar los estudios sobre morfogneds, ellos podran tener una repercusi6n en problemas de inters mdico, como la embriognesis y las malformaciones congnitas.

Ejercicios
1.Analice el concepto de morfognesisy expresecul cree usted que es su significado en la biologa contempornea. 2. Enumere las reglas de la morfognesis y explique brevemente cada una de ellas, teniendo en cuenta sus limitaciones. 3 . Describa la lgicageneralde la mayor partc d e los estudios realizados acerca de la morfognesis. 4. Analice el experimentoNa3 . "Reconstitucin de un organelo celular: el ribosoma" y especifiquelas reglas de la morfognesis que se cumplen en este caso,fundamentando su afirmacin.

5. Haga una comparacin de las reglas de la morfognesis que se cumplen en el experimento No. 4. "Reconstitucin de un virus bacteriano: el fago T,'>y las que se cumplen en los experimentos que le preceden. 6. Se ha podido comprobar que la formacin de las membranas biolgicas, as como la de los microtbulos, ocurre mediante un proceso morfogentico. .Aplicando el conocimiento que usted tiene acerca de la composicin y estructura de estos componentes celulares, haga un anlisis de las reglas de la morfognesis que se manifesaran en su formacin. 7. Mencione algunos elementos que limiten el alcance de la regla de la morfognesis que expresa que estos procesos ocurren de modo espontneo.

Las organismos superiores poseen diversos sistemasquele permiten llevar a cabo acciones de defensa contra las agresionesdel medio. La coagulacin de la sangre y la actividad fagoctica de los leucocitos son ejemplos de mecanismos de defensa. Existe un sistema defensivo que tiene gran importancia, el sistema inmunitario. stedefiendeal organismocontra Las acciones nocivas de sustancias o microorganismos.

Conceptos bsicas
Un aspecto del sistema inmunitario son los anticuerpos o inmunoglobulinas; se trata de un tipo especial de protenas, producidas por las clulas del sistema linfoide; estas molculas son capaces de reaccionar especficamentecon sustancias "extraas" a nuestro organismo. La sustanciaextrafiacontralacual reacciona un anticuerpodado se denomina aolgeno.Diversas sustancias tienen propiedades antignicas, es decir, el organismoproduce anticuerpos contra ellas, pero son ms eficaces como antgenoslos productos de elevado peso molecular, como las protenas y los cidos nucleicos. La unin que se establece entre el antgeno y el anticuerpo se denomina reacci611 anigeno-anticuerpo,y es altamente espec6ca. En la unin intervienen mltiples interacciones dbiles, existiendo una complementariedad entre el antgeno y su anticuerpoespecfico. La reaccin antgeno-anticuerpotiene caractehticas similares a las reacciones enzimticas en cuanto a la unin de la enzima y el sustrato, ya que el grado de especificidad y de a f i d a d es similar en ambos casos. Es comn que una vez ocurrida la reaccin antfgeno-anticuerpo los productos de esta unin formen grandes agregados que se toman insolubles y precipitan de la solucin en que se encuentran; de prefipiiha. a este fenmeno se le denomina formad1511

Respuesta inmunitaria
En ausencia del antgeno la cantidad de un anticnerpodado en el organismo es nfnna (no detectable).Si el antgeno ingresa en el organismo se observa que pasados varios das los niveles del anticuerpo especfico contra ese antgeno se elevan considerablemente. Comoquiera que los niveles previos eran insignificantes,es como

Niveles plasmticos del anticuerpo especfico

Nota: Las nerhas indican la administracin del antgcno. Fig. 82.1. Aparicin dc un anticuerpo especifico en respuesta a la adrninistrsein de un antigeno. Ntese e l efecto de la dosis de "recuerda".

si el anticuerpo hubiera aparecido slo despus de entrar el organismo en contacto con el anteeno. Ocurren mayores incrementos en la cantidad de anticuerpos producidos por el organismo si varias semanas despus de la dosis inicial de antgeno sta se repite con una dosisde"recuerdo". ~ s t pat& e de comportamiento de los&eles de anticnerpos ante el ingreso del antgenose denomina respuestainmunitaria,y al efecto producido por la dosis de recuerdo, reacci6n anamnsica, que es la base de la prevencin de enfermedadesmediante vacunacin (Fig. 82.1). La capacidad de un organismopara producir anticuerpos distintos,o sea, contra diferentes antgenos, es muy elevada (de ms de un milln). Si los anticuerpos son de naturaleza protenica, como liemos apuntado,cabe preguntarse jcmo se explica esta elevada potencialidad de producir protenas diferentes?Y, aun ms, jcmo se selecciona dentro de las mltiples posibilidades existentes el anticuerpo especfico que debe producirse como respuesta a un antgeno dado? Estas interrogantes han venido intrigando durante aos a cientficos de diferentes especialidades. A continuacin expondremos algunas de las contribuciones realizadas por la bioqumica al esclarecimientode estos enigmas.

Estructura de las inmunoglobulinas

Es necesario comenzar analizando con algn detalle la estructura de las inmunoglobulinas. Debe aclararse que el organismo produce 5 tipos diferentes de kunogtobulinas,lasUamadasIgA,IgD,IgE,Igce~,qu~aunque tienenunaesmictnra general similar, cumplen funcionesalgo diferentes,distinguiblessobre todo por el destino que siguen los complejos antgeno-anticuerpo por ellas formados. Por su baja concentracin plasmtica las IgD e IgE son eonucidas comoinmunoglobulinasmenores. Las caractersticas estructurales de los distintos tipos de inmunoglobulinas son muy similares. Algunas de sus particularidades se resumen en la tabla 82.1. En lo adelante nos referiremos, fundamentalmente,a las IgG, por ser bien conocidas y de estructura relativamente simple. lhbia 82.1. Algunas particularidades de los diferentes tipos de inmunoglobulinas" Tanto por ciento de glcidos
~-

Inmunoglobulina

Peso molecnlar
150 000

Funciones Fijacin del complemento; bmfe~ncia piacentaria; esmulacindernacrfagos Presente en secreciones; hansferenciaporlechematerna N.iacin del complemento; &puestainmune temprana; esthulacinde macmfagos Desconocida

Isc
k . 4

2,9

360 000-720 O00 950 000

795
11,s

kD
IgE

160 000 190 000 10,7

Esmulacinde clulascehadas

* Adaptado de: "Prineiples of F%xhemistry"

de Smith el al. Edicin de 1983.

Cada molcula de innmnoglobulina G est formada por 4 cadenas polipeptdicas iguales 2 a 2. Las cadenas de mayor tamao se denominan cadenas pesadas o H (Iieaw

el>ahs), y las de menor tamao, cadenasligeras o L (tightehaim).h cadenas pesadas poseen 446 residuos de aminocidos, mientras que las ligeras estn formadas por 214 residuos (Fig. 82.2). Aproximadamenteen la mitad desu longitud, ambas cadenaspesadas se encuentran unidas por 2 puentes disulfuro. Cada cadena pesada presenta, adems, 4 puentes disulfuro iniracatenarios que determinan otros tantos dominios. A las cadenas pesadas se unen residuos de glcidos, y por ello deben ser consideradas glicoprotenas. Cada cadenaligera se une a unade las cadenas pesidas por un puente disulfuro; la unin se produce en un punto donde los extremos amino libres de las parejas de de las ligeras se encuentranenregistro (emparejados). cadenaspesadasy los carboxiln~ Las cadenas ligeras tambin presentan puentes disulfurointracatenarios (2 en este caso), determinando 2 dominios relacionados con los 2 primeros dominios de las cadenas pesadas. El nmero y la disposicin exacta de los enlaces disolfuro son Ligeramente diferentes en las distintas subclases de IgG. La regin donde se unen las diferentes cadenas que constituyen la molcula de i s a g r a o pivote, pues se ha podido inmunoglobulina recibe el nombre de zona de b comprobar que la molcula posee cierta libertad de movimiento, por lo cual su forma general se ha coniparado con la de la letra Y, donde la separacin entre los brazos superiores puede variar. Los conocimientos acerca de la estructura tridimensional de estas protenas han confirmado esta idea. Sesabe queel sitiode unin al antigeno se localiza en los extremos amino de las 4 cadenas, por lo que existen 2 de estos sitios, cada uno formado por una pareja H-L. Esta disposicin de los sitios de unin al antigeno explica algunas delas caractersticas de la reaccin dgeno-anticuerpo. En efecto,al producirse esta reaccin tienen lugar mltiples uniones entre las molculas de antigeno y anticuerpo, y se forman grandes mallas que por sus dimensiones pierden solubilidad y precipitan (Fig. 82.3). Pero queda an por explicar cmo es posible que si todas las molculas de anticuerposprexntan la estructurageneral sealada,puedan exisir aiiticuerpos capam de reaccionar con gran especificidad,con una gran cantidad de antgenos diferentes. El estudio profundo de la propia estructura ha permitidoaclarar este punto. Se ha podido comprobar que en todos los tipos de inmunoglobulinas la secuencia deaminocidos varasegn el angenoalcualseunen.Enotras palabras,los anticuerpos especficospara los distintos antgenos son diferentesen su secuencia de aminocidos, si bien la estructura general de la molcula es la misma. Estas variaciones de secuencia no estn presentes en toda la molcula, sino que se encuentran precisamente en los extremos amino terminales que, como sealamos, constituyen la zona de unin al antgeno. Estas regiones variables, llamadas as por presentar variaciones en la secuencia de aminocidos, comprenden los primeros

HOOC

COOH

Fig. 82.2. Esquema de la estructura de una inmuneglabulina (IgG) que muestra las cadenas ligeras y pesadas, as como los enlaces disulfuro.

Fig. 823. Esquema que representa la reaccin antgeno-anticuerpo. Ntese la formacin de una malla maleeular, de grandes pruporciones (formacin de precipitina).

i82.4. ~ E~~~~~~ . de la de una inmunoglobulina (IgG), donde se setidan las mnas que ocupan las regiones constantes y variables.

107 aminocidos, tanto de las cadenas H como de las L, de modo que ambas cadenas presentan hacia los extremos amino terminales las regiones variables; por contraposicin al resto de ambos tipos de cadenas, se le denomina regin constante,ya que su secuencia de aminocidos es fija para cada tipo de inmnnoglobulina. Estas regiones constantes, sin embargo, diferen de un tipo de inmunoglobulina a otro (IgG, IgA,etc), pero queda clan, que para un mismo tipo de inmunoglobulina,por ejemplo, IgG, laeomposicin delas regiones constantes de las cadenas H y Les fija (Fig. 82.4). Recapihdando,diremos que en toda molcula de inmnnoglobulina se distinguen las regiones constantes y las regiones variables. Las primerasdifierenen losdistintos tipos de inmunoglobulinas y se relacionan con la funcin p el procesamiento de ese tipo deanticuerpoen el organismo; las segundas varan deacuerdo con laespecificidad, segn el antgeno al cual se unen, y presentan, por tanto, variacin, aun dentro del mismo tipo de anticuerpo. Estamos, pues, en p r w n a a de un nuevoejemplo de manifestacinde lo constante y lo variable en las estmcturas biolgicas. Todas las inmunoglobulinas presentan una estructurageneralcomn,locual es un elemento constante, pero, adems, las cadenas polipeptdicas que las constituyen presentan en cada tipo regiones de secuencia constante, es decir, otro elemento invariante. El elemento variable de estas molculas est representadopor las regiones variables de las cadenas H y L. Tiene un sentidoeconmico la produccin de una gran variedad de anticuerpos por el organismo, sobre la base estructural que hemos visto. Representa tambin un ejemplo de la produccin de un sin nmero de molcuias diferentes. con una temtica estrnctural comn. El sentido econmico al que hicimos referencia se comprender mejor al analizar la forma en que son sintetizadasestas protenas. Sedebeconsiderarl a p o s i b ' i de q u e e a aniicuerpos capaces de reaccionar especificamente con diferentes antgenos. Esta especificidad est dada por la composicin aminoacdicaparticular que poseen las regiones variables. Consideremosahora la interrogantesiguiente: hemos dicho que un organismo es capaz de producir ms de un milln de anticuerposdiferentes; no obstante,una clula posee informacin gentica (ADN) que codifica aproximadamente para varios miles de protenas diferentes, pero hay que tener en cuenta, adems, que la gran mayora de esas protenas son cnzimas y protenas de diversa ndole, relacionadas con el metabolismo y la estructura celular. Parece evidente, pues, que una clula productora de anticnerpos no podra llevar a cabo, por ssola,la diversa produccin de que es capaz el organismo para este tipo particular de protenas.

Premkas experimentalespara la investigacin de la produccin de anticuerpos

Los mtodos de estudiodela estructurade las protenas aportaron paulatinamente el conocimiento que hoy se tiene acerca de la estructura de las inmunoglobulinas.Al conocerse la secuencia de diversas inmunoglobulinas, por mtodos de anlisis de estructnra primaria, sali a la luz su composicin en regiones constantesy variables. Por otra parte, mediante los experimentos encaminados a dilucidar su disposicin espacial (difraccin de rayos X y otros) se estableci la estructura tridimensional de aqullas. De singular significacin para el avance del conocimientode la estructura de los anticuerpos fue el estudio de la denominada protena de Bence-Jones. Los pacientes aquejados de una afeccin conocida como mieloma mltiple excretan por la orina grandes cantidades de inmunoglobulinas (o sus cadenas constituyentes),con mayor frecuencia IgG, aunque tambin puede ser IgA u otras. Esta protena es totalmente homognea en un mismo paciente y puede ser aislada de la orina en cantidades apreciables, lo cual permite su estudio detallado. A partir del anlisis de la protena de

Bence-Jones, aislada de enfermos de mieloma, se obtuvo mucha informacin acerca de la estwctura de los aneuerpos. No obstante, el conocimiento que se alcanz en cuanto a la estructura de las inmnnoglobulinas no him sino acuciar la curiosidad de los investigadores en cuanto a su mecanismo de produccin. En la dcada de los aos 60 se elaboraron diversas hiptesis que pretendan explicar estos hechos. Slo con las tcnicas de cultivo de tejidos y los mtodos de la ingeniera gentica, ya tratadasenotrnscaptuhs, han podidoestablecerseconcertezalosprores<sgencos por medio de los cuales un organismo es capaz de producir una gran diversidad de anticuerpos. Especialmente, el empleo de las tcnicas del ADN recombinante y los poderosos mtodos de anlisis de secuencia del ADN han aportado los datos definitivos para la comprensin de estos procesos. La descripcin del experimento que sigue a continuacin nos aclarar un hecho importante

Eiq>erimentoNo. 1 .Una esOrpe o don celular produce un solo tipo de anticuerpo

El plasmacitoma es un tumor constituido por clulas plasmticas, que son las productoras de anticuerpos; stas, a su vez, se derivan de los Llamados nfocitos B. En el captulo 80 se explic cmo todas las clulas integrantes de un tumor canceroso se forman por divisin de una nica clula transformada, de modo que l a poblacin de clulas plasmticas de un plasmacitoma es homognea, todas pueden ser consideradas iguales, y constituyen una estirpe o clan celular. El plasmacitoma puede extraerse de un animal de experimentacin en el cual se haya producido, y estas clulas pueden cultivarse en un medio apropiado (Fig. 82.5).

Extraccin del plasmacitoma

ryr
A

Purificacin de anticuerpos

Mtodos analticos y estudios de secuencia

Fig. 82.5. Aislamiento de un anticuerpo de gran pureza y homogeneidad mediante el cultivo de clulas tumorales, provenientes de un plasmacitama de ratn. Las inmunoglobulinas producidas por las dlulai pasan al medio de eultivo, de donde se las puede aislar y purificar.

Separacin de las clulas y el medio de cultivo

Hay una sola especie de anticuerpos La secuencia aminoacdica es nica

En las condicionesde cultivo las clulas plasmcasdel hunor siguen produciendo anticuerpos que pasan al medio. Por centrifugacin pueden separarse las clulas del Lquido de cultivo, y a partir de ste llevarse a cabo la extraccin y puruieacin de las molculas de anticuerpo presentes en l. Cuando se anazaron la composicin y estructurade los anticuerposasobtenidos, se eomprob que se trataba de una especie molecular nica,el anticuerpoera totalmente homogneo. Todas las molculas de ancuerpopresentestienen exactamente la misma

secuenciade aminocidos, tanto en las regiones constantes como en las variables, de modo que este clan celular, el plasmacitoma, produce slo un anticuerpo. Repeticiones de este experimento y de otros similares condujeron a la conclusin general de que cada clula productora de anticuerposse especializaen la produccin de una especie molecular nica de esta protena. Como consecuencia de estos hallazgos era necesario pensar que en un organismo existiran, por tanto, un nmero elevadsimo de clulas productoras de anticuerpos, adaunadelasnialesestan'ap~adaparalaprodnccindeun anticuerpoespecco. Sin embargo, tambin se conceba que todas las clulas somticas del organismo posean exactamente la misma informacin gentica. Cmo se explica entonces que estas clulas productorasde anticuerpossinteticentantas protenas diferentes, cuando conocemos que para cada una de dichas protenas deber existir el gen que codifique su secuencia de aminocidos? Hoy se sabe que la informacin gentica para producir esta gran cantidad de anticuerposdiferentessegenera de una forma muy econmica. Los genes que codifican para las inmunoglobulinas se producen durante la maduracin de las clulas linfoides, mediante un procesocumbinatoriode unfondogenticocomn,formadopor diferentes porciones, es decir, inicialmenteno existe un gen que codifique para cada anticuerpo, sino que stos se generan en la evolucin del individuo, a partir de un nmero limitado de "bloques de construccin". Este proceso de reordenamiento y produccin de genes durante la maduracin celular es un descubrimientode gran trascendencia y se le ha denominado ren>mbinaa6n sodtica. El experimento siguiente brind alguna informacin, en cuanto a la forma en la cual el proceso se produce.

Experimento No. 2. Los genes de inmunoglobulinas de las clulas embrionarias son diferentes a los de las adultas Tonepawa y Ledertomaron clulas del sistema linfoide de un embrin de ratn y de un animal adulto. Por tcnicas de ingeniera gentica, en ambos casos, identificaron, aislaron y multiplicaron los segmentos de ADN que contenan genes para la codificacin de las cadenas ligeras de IgG (Fig. 82.6).

Okr/ %iw

clulas embrionarias

m
I
I r

Clulas plasmticas maduras

Extraccin del ADN

.
Fig. 82.6. Cuando se comparan las regiones gnieas que codifican para eadenas ligeras de IgG en clulas embfianarias y clulas maduras, se comprueba que en las ltimas se ha perdida material gentico.

J
%

Aislamiento y amplificacin de los sectores genticos de cadenas ligeras Comparacin de tamao y secuencia de bases ADN embrionario ADN maduro

'.

-%. , . * '

....'

Cuando se compararon la longitud y secuencia de bases de los ADN provenientes de las clulas embrionariasy las adultas, se pudo comprobar que en las ltimas estaba ausente un segmento de ADN bastante extenso, el cual s apareca en el ADN de la

clula embrionaria; entonces era evidente que durante la maduracin de la clula productora de anticuerpos se produce una prdida del material gentico. Estudios detallados de secuencia permiten tener una idea de la organizacin del material gentico para la produccin de anticuerpos en la clula embrionaria. Veamos cmo es esa organizacin en el caso de las cadenas L de IgG.

Estructura de los genes que codiean cadenas ligeras de IgG

En el mismo cromosoma, exactamente en el brazo corto del cromosomanmero 2 de los seres humanos, se encuentra el ordenamientosiguiente: unos 300 segmentos gnicos denominados V (VI a V300); cada uno de ellos posee la codificacin para los primeros 95 aminocidos de las cadenas ligeras, pero sus secuencias son diferentes. A cierta distancia se localizan 5 segmentos gnicos denominadosJ (J1 a J5); cada uno de ellos posee informacin para 12 aminocidos de las cadenas ligeras, pero de nuevo en cada casolas secuencias son diferentes. Un poco ms alejadose encuentraun segmento nico llamado C, el cual posee la informacin paracodifcar los 107aminocidos de la regin constante de la cadena ligera. Como se supondr V, J y C son abreviaturas que yn jt oei n t n derivan de las palabras inglesas variable= variable, c o r ~ ~ ~ t = c o n s t a (Fig. 82.7).

---

-----m---------

-m----

---m-----------

--m---

m:::

Durante la maduracin de la clula linfoide se produce la prdida del material gentico y se establecen determinadas relaciones entre un segmento gnico V , uno J y el segmento C; de este modo queda definida la secuencia especifica que tendr la cadena Ligera de inmunoglohulina que esa clula ser capaz de producir (Fig. 82.8). Se comprob as-m sus aspectos fundamentales- una hiptesis sobre la produccin de anticuerpos, formuladaen 1965 por Dreyery Benett

Fig. 82.7. Organizacin del material gentico de cadenas ligeras de IgG en clulas embrinnarias. Se distineuen unos 300 segmentos V, 5 segmentos J y un segmento C, se. parados por secuencias intercaladas.

.-

m I : : : c J
--m-----------------m--------

---m--

---m--

Recombinacin somtica

m:::
Fig. 82.8. Mecanismos maleculares que condueen a la formacin de cadenas ligeras funcionales de inmunoglobulinas (IgG). En la etapa embrionaria se produce la reeambinacin somtica; en la clula madura tienen lugar la transeripein, el procesamiento del ARNm y la traduccin.

---m----

V2 J,

, ,, ,
J4
I II

1 Transcripcin v
J,

1. . . . . -

ARNm inmaduro

ARNm maduro

C 4 Cadena ligera

Regin variable

Esta manerade generarse el gen codificadar de las cadenas L explica la constancia dela regin constante, ya que en todos los casos est codificadapor el mismo segmento

g ~ c C. o En cambio, las.regiones variables podrn presentar mltiples secuencias diferentes, en dependencia de los segmentos gnicos V y J, los cuales se hallan vinculados en cada clula durante su maduracin. Calcule cuntas regiones variables diferentes podrn originarse con las posibilidades de combinacin que brindan los genes V y J de las cadenas ligeras.

Generacin de genes funcionales de cadenas ligeras de IgG

La produccin de una molcula de anticuerpo, en este caso la cadena ligera de IgG,requiere deunaseriede eventos: la recomhinacinsomticaque ocurre durante la maduracin de la clula linfoide embrionaria, la transcripcin, el procesamiento postranscripcional del ARN y, fuialmente,la traduccin. En la propia figura 82.8 se representan secuencialmenteestas etapas. La primera ocurre en un momento de la vida muy anterior a las siguientes. Durante la maduracin del ARN se eliminan las secuencias intercaladas, quedando un ARNm maduro, con una secuenciadenida VJ-C, que ser traducido en una cadena Ligera, la cual presentar la regin constante y la reginvariable,predeterminadaspor el proceso de recombinacin somtica en esa clula. A ambos lados de los segmentos V y J existen cortas secuencias,muy conservadas, que funcionan como seales de corte y empalme para el proceso de recombinacin somtica. Por mecanismos similares,aunque algo ms complejos, se originan los genes que codifican para las cadenas pesadas. Las mltiples combinacionesde cadenas ligeras y pesadas, y las variaciones de sus regiones variables, aseguran una extraordinaria diversidad, la cual, como hemos visto, se obtiene nicamente a partir de bloques de construccin delos genes correspondientes. En el caso delas cadenas pesadas de IgG, los segmentos gnicos que codifican la regin variable son 3: V, D y J, incrementndose as las posibilidades de generar cadenas de composicin diferente; en este caso D proviene de diversiiy = diversidad. Se considera que muchas clulas linfoides,en su maduracin, no llegan a generar genes funcionalesde inmunoglobulinasy, por tanto, no producen anticuerpos. Como cada clula diploide tiene un nmero par de cromosomas, los genes de inmunoglobulinas de uno de ellos no son funcionales,fenmeno que se conoce como emelusin aleuea Actualmente se tiene algn conocimiento sobre los mecanismos nrecisos de la recombinacin somtica y las seales genticas que dirigen este proceso. Tambin existe informacin acerca de algunasfuentes adicionales de variacin en las regiones variables. As, por ejemplo, enla regin variablede las cadenas L de IgG,el amin&ido que ocupa la posicin 96 muestra hipemariabilidad, lo que se explica por ligeras variaciones que se producen en los puntos de unin V-J. La organizacin exacta de este tipo de genes muestra algunasdiferencias en las distintas especies. El lector interesado deber acudir a la bibliografa de consulta.

Estimuiacin de la produccin de anticuerpos e8pecIscos

Resta an explicar cmo se origina el estmulo para la produccin masiva del anticuerpo adecuado, al penetrar el antgeno en el organismo, lo que se debe a la llamada seleccin clonal. El organismo maduro posee un sinnmero de clulas especializadasen la produccin de anticuerpasespeccos,pero su actividad productora es nfuna, en ausencia del antgeno. l organismo desencadenala respuesta inmunitaria de la El ingreso del antgeno a forma siguiente: la clula Linfoide tiene en su superficie una "muestra"del anticuerpo para el cual est programada. Un antgeno determinado,al encontrar una clulaque

posea en su superficie anticuerpos capaces de unrsele, forma el complejo antgeno-anticuerpoen la superficiecelular. Esto desencadena una serie de eventos conocidos como capping (encapuchamiento), que culmina con un estmulo a la multiplicacin de dicha clula y se establece as un clon que comienza a sintetizar y segregar grandes cantidades del anticuerpo especfico. Por tanto, el propio antgeno -por su afinidad por un anticuerpo dado- ha estimulado la produccin masiva del anticuerpo (Fig. 82.9).

Fig. 82.9. Formacin del "cap" durante las primerus estadios de la respuesta inmune. Los antigenos se unen de modo especfico a los anticuerpos que la clula linfoide posee en la supcrficic de su membrana. Estas complejos antgeno-anticuerpo se renen en una zona de la membrana y el cmulo formado es uitcrioiizado. Este p m acaba por esthiilar la di vi&^ c d u k y la produccin masiva del anticuerpo.

a Antgeno 4 Anticueipo especfico

Anticuerpos monodonales
Habitualmente, son ms de uno los anticuerpos capaces de reaccionar con el antgeno dado, aunque lo hacen con distintas afinidades,ya que ellos poseen algunas diferencias en las secuenciasde sus regiones variables. Lo comn es que con el ingreso de un antgeno al organismo se establezcan varios clones celulares, productores de anticuerpos contra ese antgeno. Se han desarrolladomtodos de laboratorioutilizando clulas tumorales en cultivo, en las cuales se puede inducir la formacin de una especie molecular nica de anticuerpos (recurdese el plasmocitoma del experimentoNo. 1). Las clulas tumorales productoras de anticuerpos se llaman hibridomas, nombre que alude a la forma de su obtencin en el laboratorio. Estas clulas son capaces de vivir indefinidamente en el medio de cultivo, si se tienen determinados cuidados; producen su anticuerpo caracterstico, el cual pasa al medio de cultivo de donde se le puede extraer. Estos anticuerpos -como se supondr- son totalmente homogneos, desde el puntode vista estructnral. La figura 82.10 resume nn mtodo ya tradicional de obtener hibridomas productores de anticuerpos. Los anticuerposas obtenidos se llaman monodonales y su produccin es una de las ramas de avanzada dentro de la biotecnologa. stos poseen una serie de caracteristicasque hacen deellosun recurso de extraordinaria nididad en eldiistico y tratamiento de diversas enfermedades,y un instmmento de investigacin. Como hemos podido apreciar, la bioqumica ha contribuido al conocimiento de algunos de los enigmasms intrigantes de los mecanismos inmnnolgicosdel organismo, y es de esperar que se sigan produciendo avances importantesen este campo.

Perspectivas
El conocimiento detallado de las distintas regiones gnicas que participan en la produccin de anticuerpos de las diferentesclases es,en estos momentos, slo cuestin

& Ratn inmunizado

Extraccin y obtencin de clulas del bazo
Fig. 82.10. Procedimiento para obtener hibridumas a partir de clulas del bazo de un ratn inmunizado y clulas de plasmacitoma cultivadas. Entre las hioridas formados se pueden seleccionar aqullos que producen el anticuerpo de inters y multiplicar ese clan en un anis t a ser la fuenmal o en cultiva. E te productora de los anticuerpos monoclonales.

Clulas de plasmacitoma

\/

Fusin de las clulas

Seleccin de los clones productores del anticuerpo deseado de tiempo y no pasar mucho antes de que se aclaren definitivamente los detalles que an oermanecen oscuros. Los anticuerpos monoclonales encuentrancada da mayor aplicacin, tanto en la investigacin como en la prctica mdica. A modo de ejemplo, sealaremosque estos anticuerposse emplean actualmente para el diagnstico temprano y el seguimiento de neoplasias malignas, incremenndosecada da el nmero de diferentes cnceres que pueden ser detectados con su auxilio. Ms aun, los anticuerpos monoclonales se estn incorporando al "arsenal" teraputico que se emplea en el tratamiento de muchos tumores malignos. Se considera que estos anticuerpos podrn emplearse para dirigir, con toda exactitud, diferentes drogas medicamentosas hacia las clulas malignas, evitando as los indeseables efectos secundarios que se derivan de la accin de dichas drogas sobre las clulas sanas. Los anticuerpos monoclonales tambin han resultado tiles en la abolicin de la reaccin de rechazo, en pacientes a los cuales se les ha efectuado trasplante de algn rgano. Enla medidaen que progrese el conocimientosobrelosmecanismos de produccin de anticuerpos y se descubran las posibilidades para sucontrol,se les podr dar solucin a problemas tan importantes como las enfermedadesautoinmunes,el rechazo de rganos trasplantadoso el tratamiento de pacientes aquejados del SIDA. El avance de los conocimientos en este terreno beneficiar el desarrollo de la medicina, pues, como hemos visto, esta temtica se vincula con aspectos mdicos de tanto inters como el cncer, las enfermedadesautoinmunes, las alergias y otros.

Resumen
Las inmunoglobulinas o anticuerpos son protenas especiazadas en la defensa del organismo. EUas se unen de forma altamente especca a sustancias extraas, denominadas antgenos, favoreciendo as la eliminaan de estos ltimos. La reaccin antgeno-anticuerpo se produce por interadones dbes y es muy m e s . Un anticuerpo dado se produce en cantidades apredables solamente despus del ingreso al organismo del antigeno correspondiente. IgA, IgD, IgE, IgG e IgM; las Existen diferentes tipos de i n m u n o g l o b u ~ IgG son las mejora eshidiadas y estan formadas por 2 cadenas Ligeras (L) y 2 cadenas pesadas 0, unidas por puentes disulfuro. Tanto en las cadenas Ligeras como enlas pesadas exstenregiones con secuencia constante, y otras que presentan

secuencia6 variables. Estas ltimas sou las que le coneren su espeeicidad, en cuanto al antgeno con el cual reaccionan. La unin del antgeno se produce, precisamente, por estas regiones variables. Para el avance de los eonoeimientos acerca de la estructura y produccin de aucuerpos han sido de gran importancia los anlisis Nevados a cabo sobre las protenas excretadas por enfermos afeciados de mieloma mltiple, as como los gentica mtodos de cultivo de tejidos y de ingenienena Hoy se sabe que cada ciula productora de anticuerpos sintetiza una especie homognea de inmunoglobuiina, lo que se ha podido comprobar al estudiar dones celulares en cultivo, obtenidos a partir de tumores de clulas plasm6ticas. El an8s'i detallado de las regiones gnieas, responsablesde la codificacin de la secuenciade los anticuerposen las clulasembnonarias y maduras, ha demostrado que los genes Punciodes se establecen a partir de la asociacin de bloques gentieos mediante el proceso de reeombinaciu somtiea. Estos hallazgos han permitido s capaz de producir una gran cantidad de anticuerconocer d m o un organismo e pos diferentes, de una manera muy econmica. Hoy da es posible obtener anticuerpos totalmente homogneos y con espeeacidadpara unantgeno dado, mediaute el cultivo dehibndomas. Se obtienen as los anticuerpos m o n d o d e s . Los avances que se estn produciendo en este campo aportarn grandes posibilidades en el t e m o dela investigscin y en su aplicacin pr6cea a problemas de salud tan importantes como el cncer, los trasplantes de rganos, las alergias, las enfermedades autoinmunes y otros.

1 .Haga no esquema de una molcula de inmunoglobulina (IgG) y seale sus diferent e s partes. 2. Explique el papel de las regiones constantes y variables en la funcin de las inmunoglobulinas. 3. Culeshechos apoyan la afirmacin de que cada clula productora deanticuerpos se especializa en la formacin de un solo tipo de inmunoglobulina? 4. Analice el experimento No. 2. y diga: a) Cul es el objetivo del experimento? b) De que modo intervienen los mtodos de ingeniera gentica en la realizacin del experimento? c) Cules son los resultados del experimento? d) Cules conclusionesse pueden sacar del experimento? 5. Diga a qu se denomina recombinacin somtica. 6. Diga los procesos que se pmducen en una clula Moide, desde su etapa embrionaria hasta la produccin de una cadena ligera funcional. 7. Explique cmo se produce la seleccin clonal durante la respuesta inmunitaria. 8. Qu es un anticuerpo monoclonal? Mencione algunas aplicaciones de estos anticuerpos. 9. Teniendoen cuenta las siguientes disposiciones hipotticasde segmentos gnicos, para la produccin de cadenas de inmunoglobulinas,determine cantos tipos de cadenas diferentes se podrn formar a partir de cada una de ellas. VlV2V3V4V5 JlJ2J3 C VlV2V3 D1D2 JlJ2J3 C

En el captulo 3deeste textose brindaron argumentos afavor dela teora uenh%ca del origen de la vida, a partir de la materia inerte. Como el origen de la vida sigue siendoun problema de gran actualidad en la investigacin biolgica contempornea, hemos considerado oportuno retomar el tema en esta seccin del texto, para poder emplear en su anlisislos conocimientosde bioqumica que el lector habr adquirido en Las seccionesprecedentes. En el mundo cientfico actual la discusin no se plantea sobre la disyuntiva de si la vida fue creada o surgi espontneamente, sino que partiendo de las posiciones materialistas se buscan las explicaciones a los mecanismos que, hace millones de aos, culminaron con el origen de la vida.

Dificultades para el estudio experimental del origen de la vida

La bioqumica es una ciencia experimental. Los bioqnmicos han brindado sus aportes al conocimiento del origen de la vida mediante experimentos que intentan repetir, en las condicionesde laboratorio, algunasde las etapas del proceso del origen de la vida. El tratamiento experimental de este problema presenta serias dificultades,entre las que deben destacarselas siguientes: 1. Los hechosinvestigado8ocurrieron hace muehtsimo empo y actualmente no se pmmicer Se ha estimado que las ''primeras clulas" aparecieron hace 3000000000 de aos y en la actualidad las condiciones de la tierra son tales que no permiten que el proceso se repita. 2. Los primeroa seres vivos no dejaron rastms (fsiles).Las formas primitivas de vida no posean estrncturas que permitieran la fosilicin, por tanto, hoy en da no es posible encontrar evidencias fsiles de su existencia y caractersticas. 3. Cede etupe del pmcssosedeianollenlargosintevvalaaSe calcula que entre la aparicin de las denominadasmolculas organognicas y las clulas primitivas transcurrieron unos 500 000 000 de aos. Por ello, se comprendern las dificultades que se presentan al pretender repetir algunos de los eventospostulados en un perodoextraordinariamentems corto, comomrmponde a nn experimento Uevado a cabo por un investigador.

Los cientficosno se han dejado amedrentar por estas grandes dificultadesy se han planteado con toda seriedad la posibilidad de experimentar con el origen de la vida.

Consideraciones preliminares para el estudio experimental del origen de la vida

Para encarar este problema, desde el punto de vista experimental,es necesario partir de algunas consideracionespreliminares:

1. La vida de la Tierrase origin en la propia Tierra. La alternativa de que la vida fuera trada a nuestro planeta desde el espacioexterior,si bien ha sido planteada por algunos investigadores,no hace ms que trasladar el origen de la vida a un lugar desconocido y contribuye muy poco a las posibilidades de experimentacin en este campo. 2. Se posee un conocimiento aceptable de las condiciones de la Tierra primiliva, durante el perodo de origen de la vida. Si bien el origen de la Tierra se remonta aproximadamente a 4 000 000 000 de aos, en el pasado, la observacin y el estudio de numerosos cuerpos celestes, en diferentes etapas de so evolucin, han permitido tener una concepcin-ms o menos correcta y acabada- de las condiciones ~revalecientes en la Tierra nrimitiva. en la noca aue nos interesa. Estas condiciones eran la existencia de una atmsfera reductora, compuesta fnndamentalmente por dixido de carbonoy vapor de agua, con pequeas cantidadesde otros gases, como el monxido de carbono, el metano y el nitrgeno. Se haban formado lagos y mares, en los cuales se encontraban disueltosamonaco,sulfnro de hidrgeno, cianuro y otras molculas simples. El pH de estos depsitos de agua era , s .La temperatura ambiente era slo ligeramente superior a la actual. cercano a 7 Las radiaciones ultravioletasdel sol llegaban con gran intensidad a la superficie temsh 3. La vida se origin espontueamente. Desde luego, la posicin idealista acerca de la vida como algo creado, adems de no ser aceptada cientficamente, no brinda posibilidad alguna de experimentacin. El fenmeno que nos ocupa slo puede ser investigado desde una posicin materialista. 4. Existieron fuentes de energa para el proceso. Muchas de las etapas que se han postulado para explicar el proceso del origen de la vida requieren, para producirse, un aporte energtico externo. Hoy no caben dudas de que a lo largo del perodo durante el cual se origin la vida existieron numerosas fuentes de energa, que impulsaron estos procesos. Estas fuentes de energa comprenden,en primer lugar, las radiaciones provenientes del sol, especialmente la ultravioleta, la cual -en pocas remotas- llegaba a la superficie de la Tierra con mucha mayor intensidad que hoy. Se han coniiderado,adems,las descargas elctricas,debido a las frecuentes tormentas que entonces tenan lugar, as como las erupciones volcnicas, el impacto de cometas y meteoritos, y otras. 5. Lac: binmoleulas originales eran similares a las acaiales. Si bien, como se ha sealado, no quedaron rastros de las clulas primitivas, se considera que stas posean biomolculas similares a las que poseen los seres vivos actuales, es decir, protenas, cidos nucleicos, Ipidos y sus precursores. No hay razones para pensar que las biomolculas actuales se hayan originadoa partir de biomolculas primitivas, radicalmentediferentes. Por otra parte, en cuerpos celestes que han Llegado a la Tierra se ha podido determinar la presencia de alcoholes, aldehdos, aminas, aminocidos, purinas, pirimidinas y otras biomolcuias muy similareso idnticas a las existentes en los seres vivos actuales. Este hecho se considera un argumento a favor de la posibilidad de la formacin abitica de estas sustancias en la Tierra primitiva.
1438

6. Las forma6 originales de la vida, aunque no iguales, no fueron tampoco demasiado diferentes delos m8s sencillos organismos vivos de la aehialidad. Aunque se acepta que a partir de las clulas primitivas se ha producido un prolongado y complejo proceso evolutivo hasta las clulas actuales, se considera que dichos organismos vivos primitivos posean algunas delas caractersticasms generales que los actuales. Se concibe que los organismos vivientes primitivos posean una membrana que los separaba del medio circundante, cuya composicin debi ser s i d a r a las membranas biolgicas actuales. Igualmente, se piensa que los componentes intercelulares ms importantesfueron los cidos nucleicos y las protenas.
Las formas de vida ms antiguas (de las cuales se tiene evidencia)se encuentran en formaciones de microfsiles, denominadas estromatolitos,localizados en Australia. Su edad se calcula en miles de millones de aos y, aparentemente, eran organismos muy similares a las ms primitivas clulas fotosintticas actuales.

Historia natural del origen de la vida

Se ha poshilado la existencia de etapas en el largo proceso del origen de la vida, lo cual brinda alguna orientacin ala hora de disear experimentos para su investigacin. Las etapas consideradas se representan en la figura 83.1 donde se muestra la historia nahiral del origen de la vida. Ntense los intervalos de tiempo sealados.

Formacin de la Tierra Primeras molculas orgnicas

1 Precursores de macromolculas +. Macromolculas sin molde

Macromolculas con molde 1 1 1

& T

*
+.

4 000 000 000 anos

3 500 O00 O00 aos

Fig. 83.1. Historia natural del origeii de la vida. La edad de la Tierra se caleula en unos cuatro mil millones de aos. Las primeras molculas orgnicas aparecieron hace tres mil quinientos millones dc anos. A partir deestemomento transcurrieron quinientus millones de aos hasta el surgimiento de las primeras clulas y el comienzo de In evolucin hiolgira. En este proceso los animales superiores aparccieron en un pasado relativamente reciente. A la izquierda srseiilaii las principales etapas consideradas cn el origen de la vida.

+
+.

' Interaccin cidro nucleico- protena

Formacin de pnmeras clulas Evoluc~n celular Eucanotes Animales superiores

3 O00 O00 O00 aos

+.

2 000 000 000 aos "Ayer"

El proceso global desde el origen de la Tierra hasta la aparicin de las primeras clulas se ha dividido en 3 etapas notables: 1.Desdela formacin dela Tierra hasta la aparicin de los precursores demacromoltulas. 2.Desde la aparicin de los precursoreshasta la formacin, con molde, de las macromolculas primitivas. 3.Desde la formacin de macromolculas sobre molde hasta la aparicin de las clulas primitivas.

En cada una de estas etapas se consideran eventos intermedios, algunos representados en la figura 83.1. Aunque el orden que se indica es el ms aceptado, la ocurrencia ms o menos simultnea de algunos eventos se considera posible, y muy probablemente necesaria, alo largo del proceso.

Caractersticas fundamentales de los experimentos bioqumicos sobre el origen de la vida

Desde luego, que el desarrollo actual de la bioqumica no permite repetir en el laboratorio todo el proceso del origen de la vida. Sin embargo, s ha sido posible simular algunasde las etapas de este proceso. El experimento hioqumico ms comn consiste en demostrar cmo determinado tipo de compuesto,de importancia para la vida,puede formarse a partir de otros, cuya existencia en la Tierra primitiva baya sido demostrada o se presuma. Se trata, pues,de conseguir la sntesis abitica de determinadasbiomolculas o estrncturasrelacionadas. En la figura 3.3 del captulo 3 se presenta una instalacin tpica para esta ndole de experimentos. En cualquier caso, el cientfico debe tener en cuenta los aspectos siguientes: 1. Material de @da. Se refiere a cul es la "materia prima" del experimento. Debe considerarse la posibilidad de que esas sustanciasexistieran en algn perodo de evolucin de la Tierra. 2. Fuentes de enex@. Se considerar la fuente de energa utilizada en el experimento y su posible presencia en la Tierra primitiva. 3. Presenciade catazadores o agentes condensantes. En ocasiones, los experimentos slo tienen xito cuando est presente una sustancia de este tipo. Debe considerarse su posible existenciaen la Tierra primitiva. 4. Preseneiademoleulas informaaonales. En algunos experimentos se requiere la presencia de molculas informacionales,habitualmente polinucletidos.Es necesario valorar su origen, previo a la etapa estudiada. 5. Mecanismm de concentracin. Alcunas reacciones de sntesis abitica slo se producen cuando el material de partidase encuentra auna concentracinelevada. Se considera que el principal mecanismo de concentracinen la Tierra primitiva fue la evaporacin del agua de depsitos como los lagos y las pocetas. Una vez formadoslos primeros biopolmeros, stosp u d e incrementar su concentracin e interacciones por el proceso de coacervacin (estudiado por Oparin), el cual consiste en la separacin espontnea de gotculas de elevada concentracin de soluto, a partir de una solucin diluida de ste. 6. Productosobtenidas. Los productos obtenidos en el experimento se deben comparar con sus similaresde los seres vivos actuales, en cuanto a estrnctura y propiedades. 7. Rendimiento. El rendimiento expresa la cantidad relativa del producto obtenido, en relacin con el material de partida.

Si bien los experimentos con rendimientos medios o elevados se consideran con ms fuerza, el rendimiento bajo no constituye un enorme escollo, dada la existencia de los mecanismos de concentracinya sealados. En ocasiones, el investigador indaga, adems, el mecanismo molecular de la reaccin implicada. La duracin de los experimentospuede variar desde unas horas basta semanas. A continuacin presentaremos4 experimentos que se relacionan con diferentes etapas de la historia natural del origen de la vida. Debe aclararse que el hecho de que un experimento resulte exitoso, no implica que de manera necesaria esta etapa haya ocurrido precisamente de esa forma; sin embargo, la demostracin de la posibilidad es de por s un hecho valiossimo para la interpretacin del fenmeno que nos ocupa.

.Formaan abitica de precursores de macmmoleulas Experimento No. 1

El prototipo de estos experimentos es el realizado por StanieyL. Miller, el cual se consider en sus aspectos generales en el captulo 3 y tiene un extraordinario valor

histrico, por ser el primero que demostr la posibilidad de realizar experimentosde laboratorio acerca de la formacin abitica de biomolculas. Miller investig la posibilidad de formacin de precursores de macromolculas a partir de molculas bigenas en una instalacin experimental tpica. El tipo de precursor ms estudiadohan sido los aminocidos. Para la realizacin de este experimentose toma una solucin acuosa que contiene metano, nitrgeno, y amom'aco, y se la hace circular, por ebullicin, a travs de una cmara donde se producen descargas elctricas. No se requieren agentes condensantes, ni catalizadores. Se obtienen,as, varios aminocidoscon un rendimiento ms bien bajo. %ha propuesto una posible va para la formacin de los aminocidos en estas condiciones (Fig. 83.2). Variando algo el material de partida, se han podido obtener alrededor de 10 aminocidos diferentes, entre los que se incluyen los aromticos, pero siempre en forma deuna mezcla de los ismeros Ly D. Tambin se obtienen beta aminocidos La facilidad para formar quelatos metlicos, que poseen los alfa a m i n o ~ i d se ~ considera , un posible factor en su concentracin y seleccin. Variante deestosexperimentosse han realizadouoliando oh.asfuen- de energa, como los rayos gamma,las ondas de choque y laluz ultravioleta. En todos los casos los resultados han sido parecidos. De forma similar se han podido obtener bases nitrogenadas, azcares y componentes lipdicos con rendimiento variable. Elmaterial de partida, las molculas bigenas, est ampliamente distribuido en el Universo, si bien se discuten las concentraciones de amonaco que pudieron existir en la Tierra primitiva. Ya sealamos que el bajo rendimiento no constituye un obstculo, debido a la concentracin por evaporacin y el largo tiempo disponibleen el proceso de aparicin de la vida. La formaci6n abitica de pmwaores de macromolhhs es, por tanto, un proceso perfectamente posible en las condiciones de la Tierra primitiva.

CH, + N,

+ H, + H,O

Descarga elctrica

iR-C,

+0
H

OH R-&c~N

t
H
l 1

R-C-C-N

NH,

R- C- COOH
l

'?

NH2
Fig. 83.2. Secuencia de reacciones que eonduce a la formacin de aminocidos, a partir de molculas orga nognicas en un experimento de simulacin. El proceso atraviesa varios pasos de reaeeibn y loa aminocidos formados pueden variar de acuerda can la eomposicin de la mezcla original. Sicmpre se obtiene una. cantidad equivalente de los uiantiomorfos L y D.

Experimento N a 2, Formaci6n abi6tica de macmmoleulas en ausencia de molde o patrn

Se le ha prestado atencin a la formacin de polinucletidos y polipptidos; veremos, con ms detalle, el primer caso. Por experimentossimares al deseritoanteriormente,se sahe que en las condiciones de la Tierra primitiva podan existir, en relativa abundancia,los ribonucletidos cclicos 2 ' 3 !ste ha sido el material ms empleado en el estudio de la formacin abitica de polirribonucletidos. El experimento se realiza evaporando hasta la sequedad una mezcla de estos ribonucletidos cclicos, en una solucin que contiene etilendiamina o propilendiamina. Estas m i n a s actan como agentes condensantesy su existencia en la Tierra primitiva se considera prubada. El residuo s e a se mantiene a temperatura ambiente duranteunos das (Figs. 833 y 83.4). De esta forma se obtienen polinucletidoshasta de 7 unidades nucleotdicas, con un rendimiento aceptable, pero los oligonucletidos as obtenidos presentan tanto enlaces 3 S', como 2' 5'. Conotros materiales de partida se pueden obtener poimemsmayores,hastade 13 unidades. Por mtodos similares de reaccin en fase seca se han obtenido polipptidos a partir de aminocidos. En todo easo seha evidenciadoque ia formsci6n de macromolhhs, en ~ u 8 e n d s de molde, es un proceso perfectamente posible en las condicones d e la Tierra primitiva

Fig. 83.3. Experimento para la obtencin de polirribanucletieos en ausencia de molde. El material de partida est constituido por una m a cla de ribonucletidos eiclieas 3' 5 ' y una amina de accin condensante. La reaccin de polimerizaein tiene lugar una ver evaporado todo el solvente, obtenindose polirribonucletidos de pequeiia longitud, en los que estn presentes enlaces 3 5 ' y 2'. 5'. Este tipo de maccin en fase seca es particularmente til para la obtencin abitica de polimeros.

n
w

Mezcla de ribonucletidos ciclicos 3'5' Amina condensante

4 i

Evaporacin a sequedad Temperatura ambiente vanos das

Formacin de polirribonucletidos cortos Enlaces fosfodister 3' -5'y 2' -5'

4 .

. .

o
Fig. 83.4. Reaccin de polirnerizacin entre ribonueletidos ciclicos 2 ' 3'. Las polimeros obtenidas contienen enlaces 2 ' - 5 1 adems del natural 3' - 5 'quese muestra.

rimento No. 3. F o m ~ np i ~ n

das sc)bre mi molde

El caso ms estudiado es la formacin de polinucletidos, utilizando tambin moldes de polinucletidos. Hasta el momento no se ha podido realizar ningn experimentode este tipo, donde se obedezcan fielmentelas reglas de apareamientode Watson y Crick,pero se han dado pasos de avance. Se ha utilizado como material de partida una mezcla de nucletidos cclicos 2 3: en presencia de un molde de poli U y de etilendiamina. Incubando esta mezcla a 2 "C, durante 5 das, se obtiene un rendimiento aceptable de poli A (Fig. 83.5). El error de secuencia suele ser del 10 %.Llama la atencin que los iones de cinc tienen un efecto notable en estos experimentos,ya que eUos producen un incremento sobre la velocidad de la reaccin y disminuyen el ndice de error. Curiosamente, las enzimas contemporneasque catalizan la polimerizacin de nucletidos sobre molde poseen cinc. El cinc, adems, disminuye el nmero de uniones 2 S , y favorece los enlaces "naturales" 3 5'. Hasta el momento no se conocen los detalles de la reaccin, pero se sabe que el apilamiento de bases desempea una mcin importante, y es posible que se formen estrncturashelicoidalesriples durante el proceso. Ya vimos, a propsito del experimento anterior,que los nucletidos cclicos 2 3 bdran encontrarseen relativa abundancia

Mezcla de ribonucletidos cicl~cos 2'3' Amina condensante Molde de poli-U

Fig. 83.5. Experimento para demostrar la influencia de un polirribonueletido preexistente sobre la secuencia de u n palirribunueletido formada eil eandiiioiies abitieas, a partir de los ribonucletidos cclicas 2 ' 3 ' . Si bien lm resultados nomueslranuna secuencia absolutamente predeterminada, s existe una incorporacin selectiva de las rihonucletidos complementa~os.

Incubacin varios das a 2 'C

. Formacin de poh-A (10%de errores) Enlaces fosfodister 3'-5'y 2'-5'

en la Tierra primitiva. Lo mismo se puede af~rmar sobre las aminas que actan como agentes condensantes. La reaccin transcurre a temperatura ambientey el rendiento es aceptable. Este proceso pudiera producirse en un depsito lquido que se secara por evaporacin, y luego los productos se disolvieran por la lluvia, y as sucesivamente. Muy poco se sabe sobre la formacin abitica de polipptidos con informacin predeterminada. Existe la presuncin de que esto slo puede producirse en interaccin con los cidos nucleicos. No obstante, es posible concluir que la formacin de m a e r o m o l ~ a sobre s molde er un profeso perfectamente posible en Las condicionesde la Tierra primiOva

4 .

Experimento No. 4. Formacin abitica de Lipidos complejos y vescuias membranosas Un experimento tpico es el desarrollado por Deamer y Hargraves (Fig. 83.6). Ellos sometieron mezclas de glicerol, cidos grasos y fosfatos a ciclos repetidos de calentamientoy humedad. En estas condiciones se forman pequeas cantidades de mono y diacilgliceroles,y de cido fosfatdico. Durante el propio experimento estos compuestoslipdim forman vesculas membranosas,en cnyo interior quedan encerradas porciones de la fase acuosa, con los elementos en ella disueltos. Estas vesculas se denominan liposomas.

8
O
4
R

Mezcla de cidos grasos, glicerol y fosfato

Ciclos de calentamiento y enfriamiento

Fia. 83.6. Formacin ahitica de lipidos y membranas. Cuando se somete una mezcla de cidos grasos, glicerol y fosfato a ciclos repetidos de calentamiento y enfriamiento se forman acilgliceroles y cido fosfatdico, los cuales bajo la accin de ondas de choque -se asocian y forman vesculas membranosas denominadas liporomas.

Formacin de acilgliceroles y cido fosfatdico

Formacin de vesculas membranosas: liposomas

b +

Agitacin, ondas de choque

Se han utilizado otras mezclas de partida con resultados similares, aunque es inuy trecuente que las vesculas lipdicas as formadas tengan ms de 2 capas. y con Este tipo de mecanismo podna explicar el origen de las primeras meml>ranas ello el de las clulas primitivas o protwlulas. Los investigadores conceden especial importancia a la aparicin de las membranas eu cl p r m del origen de la vida. La formacin abitica de membranas lipdieas o vesculas es un proceso perfectamente posible en las condiciones de la n e m a primitiva

Hiptesis sobre el surgimientode las vas metablicas

Desde luego, que an persisten muclios aspectos del problema del origen de la vida, los cuales se estn sometiendo a una intensa invcstigacih, y en algunos se plantean hiptesis interesantes. Por ejemplo, en cuanto al origen de las las metablicas se postula u11surgimiento "liacia atrs" (Fig. 83.7).

Fig. 83.7. Formacin "hacia atrs" de las ras metablicas. Cuando uti iiictaholifo necesario (1)) Coinicwa a agotarse en el medio, aquel orgonisnio qilc lo pueda siiititirnr a partir de otro IC) teiidra tina gran ventztja selectiva. Al escaseai-C se produce el niisim Hnnieno y de csto forma rnn origiiindose, en iiii sentido retrgrado, las secuencias o vas nirtaMlicas.

Horowitz ha planteado que al esfasear en el medio primitivo un precumr de macromolculas, aquel organismo que pudiera sintetizarlo a partir de una sustancia similar, existente en el medio, tendra una ventaja adaptativa coosiderable. El agotamiento ecalonado de las sustancias necesarias p a n a t a sntesk ira seleccionando formas de viea coi? vas metablicas cada vez ms complejas, Iiasta aqullas que uolizai~ las sustawi'a ins simple para sus proceos biosintticos. Curiosamente, los mecanismos reaccionales que se han estudiado en algunos cxperimcntos de formacin abitica de biomolculas siguen etapas muy similares a sus rutas metablicas actuales.

Algunas incgnitasadicionales
Existe un nmero de preguntas, relacionadas con el origeu de la vida, que an no Ilan sido sometidas al estudio experimental,y sobre las cuales se prodiice mi interesante debate especulativo.

En relacin con el tipo de macromolcula informacional que se origin, existen, eii primer lugar, 2 escuelas: la de "las protenas primero" y la de "los cidos nucleicos prirnern". Ambas poseen uii huen cmulo de argumentos a su favor. Resulta que las proterias pueden funcionar como maravillosos catalizadores, pero no pueden autorreplicarse, mientras que en los cidos nucleicos se da la situacin inversa. Algo similar ocurre con los 2 tipos de cidos nucleicos, ARN y ADN. La mayora aceptaqueel ARN apareci primero, entre otros argumentos porque en los experimentos de simulacin se produce ribosa, pero no desoxirribosa; otro argumento es que los organismos vivos actuales forman la desoxirribosa, a partir de la ribosa. Por otra parte, el descubrimiento de niolculas de ARN con actividad catalitica; las iiboaimas, ha reforzado extraordi~iariameiite la funcin asignada al ARN en el largo proceso del origen de la vida. Una posihilidad quese ha planteado es que a partir dela formacin ahitica delas biomolculas se originaron segmentos de ARN relativamente cortos, con secuencias azarosas. Entre estos ARN algunos presentaban la capacidad de replicarse por accibn cataitica, lo cual les proporcion una ventaja selectiva, garantizando su perpetuacin. Posteriormente, algunos ARN catalizaron la sntesis de pptidos, y stos, a su vez, fueron adquiriendo una funcin relevaute en la replicacin del AllN, de modo que se produjo una etapa de coevolucin de estos cidos nucleicos y las protenas primitivas, y se origin un equipo mdimentario de traduccin con un genoma compuestode ARN. En una etapa ms tarda, el genoma de ARN se copi en una molcula ms estable, el ADN, y aparecieron los procesos de traiiscripciny traduccin,sirnilaresa los actuales. Como puede apreciane, de acuerdo con esta hiptesisJa apariciiide los ARN antecedi a la de las protenas y a la del ADN. Este ltimo tuvo una aparicin ms bien tarda, y le aport uiia mayor estabilidad al "acervo" geiitico de los organismos vivos primitivos. No se ha brindado una explicacin adecuada de por qu los amiiioicidos protenicos actuales pertenecen a la serie L. En realidad, se han propuesto varios modelos para explicar cmo uno u otro de un conjunto de enantioinorfos pudiera concentrarse y, por tanto, verse favorecida su participacin en el resto del proceso del origen de la vida, pero esto slo brinda un argumento de "accidente" a la situaci~i actual, sin ofrecer razones del porqu. En la literatura sobre el tema se pueden analizar estas interesantes polmicas, para lo cual recomendamos la bibliografa pertinente que se da al final del tomo.

Perspectivas
Se ha venido produciendo un incremento eii la complejidad de los experimentos que se realizan acerca del origen de la vida. Actualmente es incuestionable a posibilidad de la formacin abitica de la mayora de las biomolculas que coustituyen a los organismos vivos, de ah que el quehacer cientfico va tratando de penetrar cada vez ms en los puntos controvertidos del proceso del origen de la vida. Se espera hallar, e11 un futuro ms o menos cercano, una explicacin sohre las interacciones primitivas establecidas entre las protenas y los cidos nucleicos, aspecto crucial &te, pues todos los anlisis tericos demuestran que estas inolculas slo pueden haher persistido y evolucionado en asociacin. Relaciowada con este iltiino aspecto est la investigacin acerca del origen del cdigo gentico. Durante un tiempo se pens que dicho cdigo apareci como im hecho fortuito y feliz, que por su ventaja qued "congelado". Recientes experimentos brindan algunas evidenciasacerca de uiia interrelacin directa entre los aminocidos y los primitivos ARNt. Webery Lacey han demostrado la existencia de una relacin entre la polaridad e hidrofobicidad de los aminocidos y sus respectivos anticodoiies. La relacin es muy marcada en los casos de los aminocidos cuyos anticodones estn compuestos por un solo tipo de baseAAA,UUU, GGG, CCC.

Como se sabe, en los ARNt actualcs el sitio de unin del aminocido y el triplete anticodon se encuentran muy alejados, a unos 70 A, y no es posible esperar una interaccin directa entre ellos. Hopfeld, a partir del anlisis de la secuencia de una serie de ARNt de E. coli, ha planteado una hiptesis basada en una disposicin espacial diferente a la conocida aminrvcido hoja de trbol para106 ARNtprimitivos. En estemdelo,elsi~deuniGndel al extremo 3'se encuentra muy cercano al triplete anticodon, lo cual explicara una interaccin especfica en el origen del cdigo gentico. En la actualidad,para muchos autores el origen del cdigo gentico y del proceso de traduccin son sinnimos del origen de la vida. Al niargen de estas opiniones, uii tanto extremas,se considera que el proceso de traduccin y la interaccin cooperativa, mutuamente beneficiosa, entre las protenas y los cidos nucleicos constituye una etapa crucial del proceso del origen de la vida y quesu dilucidacin contribuir muy probablemente, como ningn otro descubrimiento,al conocimiento del proceso coino un todo. Aunque an nose vihmbra el da en que pueda reproducirseen un laboratorio el origen de la vida, el conocimientode las diferentes etapas de este proceso es cada vez ms completo y convincente.

Resumen
La adupan por los investigadores de un punto de vista aenco acerca del origen de la vida, ha conducido al tratamiento experimental de esta interrogante. La repmduMn de los hechos que condujeron a la aparicin de la vida presenta especiales dieuitades, debido a que stos ocurrieron hace muchsimo tiempo y en la actualidad no se producen. A ello se aade que los primeros seres vivos no dejaron f&ies, y que cada etapa del proceso se desarroii en un largo penodo geolgico. Para enfrentar experimentalmenteel problema del origen de la vida, se hace necesario asumir que la vida de la Tierra, se origin en la Tierra de un modo espontneo; que las formas primitivas de vida y sus constituyentes fueron muy similares a los aciuales; y que el conocimiento de las condiciones de la Tierra primitiva, as como el de las fuentes de energa existentes en aquel entonces, son razonablemente aceptables. En el proceso del origen de la vida se consideran 3 etapas notables: desde la formacin de la Tierra, hasta la aparicin de los precursores de macromolculas; desde la aparicin de los precursores, hasta la Formacin, con molde, de macromol6cuiasprimitivas; y, por Imo, desde este estadio, hasia la aparicin de Isis &Idas primitivas. En general, los experimentos bioqunicos sobre el origen de la vida consisten en demostrar la formaan abitica de determinados compuestos, de importancia para la vida, a partir de otros cuya existencia en la Tierra primitiva baya sido demostrada o se presuma. Experimentos de esta naturaleza han demostrado la formacin abitica de precursores de macromolculas, macromolculas y sustancias lipidicas, en condiciones tales que puede aceptarse su posibilidad de ocurrencia en la Tierra primitiva. El &uio de experimentos de estanaturaleza, que ha resultado exitoso, constituye un poderoso argumento en Favor del origen espontneo de la vida en la Tierra. En este terreno tambin se trabaja mucho desde el punto de vista terico. Se han elaborado hiptesis acerca del origen de las vias meiablicas, la seleccin de los ismeros y la importancia y precedencia relativa de las distiotas macromoIculas informacionales.

Cada da los hechos investigados son ms complejos y ya se han obtenido datos de u n . Precisamente experimentales acerca del cdigo genticoy del p la aclaracin de los mecanismos primitivos de asociacin y cooperacin entre las protenas y los cidos nudeicos, as como la capacidad catatica de los ARN, en la aehialldad, son importantes piedras anguiare-s para el conocimiento del proceso del origen de la vida como un todo. Si bien no es posible an la creacin de la vida en el laboratorio, el conocimiento de las diferentes etapas del proceso es cada vez ms completo y convincente.

Ejercicios
1.Describa el experimento que demostr la posibilidad de la formacin abitica de los precursores de macromolculas. .Considera usted que el bajo rendimiento obtenido en ste pudierainterpretarse como una liinitante en el momento de analizar su factibilidad como etapa en el proceso del origen de la vida? 2. Compare los experimentos"Formacin abitica de precursores de macromolculas" y "Formacin ahitica de macromolculas en ausencia de molde o p.atrn", en relacin con el estudio del origen de la vida, y exponga las semejanzas y difereocias entre ellos. 3. Explique cul es la diferencia entre los experimentos "Formacin abitica de maeromolculas en ausencia de molde o patrn" y "Formacin ahitica de macroinolculassobre un molde o patrn". 4. Diga cul es el mecanismo que explica la formacin delas primeras membranas, y qu importancia tiene al interpretar el origen y la evolucin de los seres vivos. 5. Haga un resumen de los 4 experimentos que aparecen en este captulo sobre el origen de la vida, considerando los aspectos siguientes: objetivos del experimento, material de partida, fuentes de energa, presencia de cataliradores o agentes condensantes, presencia de molculas informacionales,mecanismos de concentracin, productos obtenidos, y rendimiento y conclusin principal del experimento. 6. ;En qu consiste la llamada formacin de las vas metablicas "hacia atrs"? 7.Muchos iovestigadores coinciden en afirmar que la aparicindel ARN precedi a la del ADN. Qu contradiccin encierra esta afirmacin con la hiptesis de la formacin "hacia atrs'' de las vas metablicas? 8. Se ha podido comprobar que los polipptidos que se encuentran organizados en hlice son algo ms resistentes a la hidrlisis, que aqullos que tienen una estructura espacial al azar. Por otra parte, la estmctura en hlice slo puede adquirirse cuando el polmero contiene nicamente aminocidos de la serie L o de la serie D. Considera usted que estos hechos pudieran tener algn significadoen cuanto a la seleccin de los ismeros en el proceso evolutivo?

Es conocido que diversas ciencias, como la paleontologa, la anatoma y la embriologa comparada, entre otras, han aportado elementos de gran valor para la comprensin del proceso evolutivo de los seres vivos. La bioqumica, especialmente en los ltimos aos, ha realizado aportes al conocimiento del proceso evolutivo,perosu contribucin ha adquirido una particular significacin, dado que, al penetrar el nivel molecular, analiza no slo los resultados de la evolucin, sino sus mecanismos ntimos. A esto se aade que dicha ciencia ha podido llevar al plano experimental algunas etapas del proceso de la evolucin, lo cual ha permitido someter aprueba algunas hiptesis elaboradas,en relacin con los mecanismos evolutivos. En este captulo trataremos tanto las evidencias de la evolucin que la bioqumica ha descubierto, como los logros alcanzados en el remedo experimental del proceso evolutivo.

Premisasexperimentales para el estudio bioqumico de la evolucin

b a bioqumica comparada ha puesto de manifiestolas similitudes y diferencias entre protenas homlogas (protenas que realizan la misma funcin) de diversos t l paradefinir la mayor organismos vivos. Este proceder ha resultado particularmente o menor cercana filogentica de diversas especies. Para ello ha sido necesario el desarrollo de los mtodos de anlisis estructural, en particular los relacionados con la estructura primariade las protenas. La posibilidad de establecer la estructura primaria de las protenas se inici cuando Frederick Sanger, en 1955,desentra la secuencia de la hormona insulina. Desde entonces se ha progresado extraordinariamenteen los mtodos de purificacin de protenas,ascomoenlos mtodos analiocospamdeterminarsusecuenciao estrnctnra primaiia A pesar de que hoy se cuenta con sistemasmuy poderosos, el principio general del establecimientode la secuencia de aminocidos de una protena sigue siendo similar, en sus aspectos esenciales al utilizado por Sanger: hidrlisis parcial de la protena y anlisis de la secuencia de los pptidos obtenidos. La repetici6n del proceso con distintos agentes hidmlticos permite obtener informacin suficiente para conocer la

secuencia dela protena ntegra, mediante la superposicin de las secuencias de los pequeos pptidos obtenidos por la hidrlisis (Fig. 84.1). a-b-c-d-e-f-g
I

a-b-c-d-e-f-g
1

Hidrlisis parcial
Fig. 84.1. Procedimiento general seguido en el anlisis de le secuencia de aminocidos dc una protena. Despus de oblcner pcqueos pGptidns por hidrlisis parcial, se descifra la secuencia de cada uno. Repitiendo el proceso con diferentes agentes hidroliticos se logra abtener la superposicin suficiente para establecer la secuencia original.

a-b-c d-e f-g Anlisis de los fr.'1 gnicnto~

a-b c-d

e-f-g

<.
Proposicin de la secucricia original Hoy en da existen equipos, denominados secuenciadores, capaces de realizar todo el proceso analtico en forma automatizada, y la superposicin y el ordenamiento de los pequeos pptidos se lleva a cabo mediante programas de computacin, los cuales, con gran rapidez, dan como resultado la secuencia buscada. Con el advenimiento, en aos recientes, de los mtodos de anlisis de secuencia de cidos nucleicos,contribucin que debemos al propio Sangery a Walter Gilberty Allan M . Maxam, se ha abierto otra poderosa posibilidad, dado que en muchos casos es ms fcil y preferible aislar un gen y determinar su secuencia de bases (de la cual se puede deducir la secuencia de aminocidosde la protena que codifica),que realizar el estudio directamente sobre la protena. Para el anlisis de la secuencia de los ADN hasido determinante la posibilidad de hidrolizar sus molculas en sitios especficos, accin que llevan a cabo las denominadas enzimas de restriccin, as como las tcnicas para multiplicar un segmento dado de ADN, mediante el clonaje por mtodos de ingeniera gentica Desde el punto de vista experimental, una dificultad para cualquier estudio sobre la evolucines L a velocidad de reproduccin de los organismos vivos estudiados. Slo con organismos que presentan una velocidad de reproduccin especialmente alta es posible demostrar la ocurrencia de algn cambio con significado evolutivo. Es por ello que en la realizacin de estos estudios resulta de gran valor poder contar con cultivos, en condiciones controladas, de clulas con elevada velocidad de multiplicacin, de modo que puedan ser estudiadas varias generaciones dentro de perodos razonables para un experimento de laboratorio. Sobre los cultivos celulares ya hemos tratado en el capitulo SO. Los cultivos celulares pueden ser sometidos a presiones de seleccin artificiales y partidarmente intensas, lo cual, en ocasiones, permite poner en evidencia adaptaciones de significado evolutivo. Gracias a los avances en los mtodos de aislamiento y purificacin se ha podido, incluso, remedar procesos evolutivos en sistemas compuestos por biomolculas purificadas y aisladas, en ausencia de organismos vivos.

Evidencias bioqunicas del proceso evolutivo

Las evidencias bioqumicas ms importantes del proceso evolutivo provienen de la comparacinde la estructura primaria de protenas homlogai en diferentes especies. Tambin se ha obtenido este tipo de informacin a partir del anlisis de los ADN correspondientes. La gran homologa de las secuenciasde aminocidos encontradas

en protenas homlogas de diferentes especies constituye una poderosa prueba del origen comn de stas y, por lo tanto, del origen comn de los seres vivos. Precisamente el grado de similitud de protenas homlogas de distintas especies ha permitido a la bioqnmica resolver algunos problemas de posicin en el rbol filogentico,que resultaban dudosos de acuerdo con los aportes de otras ciencias. La bioqumica comparada ha posibilitado establecer con mayor certidumbre la relacin filogentica entre diferentes especies. Para estos estudios se parte del supuesto de que la relacin filogentica entre 2 especies es tanto mscercana,cnantomenor sea el nmero de diferenciasentre protenas homlogas de ambas (o entre sus genes correspondientes). A partir de este poshilado, Occam ha establecido que de varios esquemas filogenticos posibles, el ms sencillo es el ms probable, entendiendopor ms sencillo aqul que requiere menos eventos mutacionales para ser explicado. El estudiode la secuencia de la NAD deshidrogenasa mitocondnal contribuya la aclaracin de las relaciones fdogenticas entre diferentes especies de primates. A partir de datos morfofgicos, y de otra ndole, las relaciones filogenticasentre 4 especies de primates mostraban las 2 posibilidades que se exponen en la figura 84.2.

Fig. 84.2. Los esqiicmas n la izquierda y a la derecha niiicstran 2 posihler relaciones filogenltieas entrr 1 rspedes de priinates. 1.a seal Xindira una iiiutaci6ii eii el gen de la UAI) deshidregena~a. El eFqiiema de la derecha resulta ms prohahlc porque puede ser cxpiieado can slo una mutacin, niicntras que el de la izquierda requiere 2.

El estudio de la NAD deshidrogenasa apoy decisivamente el esquema de la derecha, ya que explicaba estas relaciones con solo un evento mutacional, mientras que el de la izquierda requiere 2. Resultaba de esto una mayor cercana filogentica entre el hombre y el chimpanc, que entre el primero y el orangutn. A pesar desu gran similitud,Lasprotenas homlogas de distintasespeciesmuestran diferencias,como resultado de los cambios operadosen el material gentico durante la evolucin. Sin embargo, resulta que aun dentro de la misma especie suelen encontrarse individuos en los cuales algunasprotenas presentan pequeas, pero claras diferencias de secuencia, en relacin con las encontradas en la poblacin general de esa especie biolgica. En estos casos,la secuencia ms generalizada en la poblacin se considera la forma normal, mientras que aqullas que se observan en grupos de dicha poblacin se denominan variantes. Este fenmenode la coexistencia de diferentessecuencias para una protena. en una especie biolgica determinada,se conoce como polimorfismoy refleja parte de los

can~hios producidos de una forma continua en el genoma, por efectode las mutaciones. Su anlisis nos informa sobre el tipo de mutacin que, de manera continua, se produce durante la evolucin. Como regla, la variante que proporciona determinada ventaja selectiva se generaliza en la poblacin. Las variantes que no proporcionan ventaja selectiva o que tienen efectosnegativos tienden a desaparecer o subsisten en un nmero muy reducido de los individuos de la especie. Para que los mecanismos de la evolucin puedan operar, estos cambios son tan esencialescomo la aparente constancia del genoma de la especie. Es evidente que una especie cuyo genoma se encuentre totalmente estabilizado, se vera impedida de evolucionar, al ser imposible la aparicin de nuevos caracteres. La protena cuya secuencia ha sido estudiada en un nmero mayor de especics diferentes es el citocromo c. Se conoce la estructura primaria del citocromo c de 70 especies, entre las que se incluyen animales, plantas y microorganismos. Existe una gran homologa de secuencia entre todas estas protenas, prueba evidente de su origen comn. Las diferencias de secuencia de una especie a otra afectansolamenteunpequeo nmero de aminocidos. En la tabla 84.1 se presenta el numero de aminocidos cambiados en el citocromo c de varias especies, en relacin con la secuencia de esta protena en el ser humano. Ntese cmo el nmero de diferencias se incrementa en la medida en que la relacin filogenticaes ms lejana. Este hecho se ha tomado como una clara evidencia molecular de la evolucin.
lsbla 4.1. Diferencias en la secuencia de aniinodcidos del citocromo c en distintas

especies, en relacin con la del ser humano" Nmero de aminocidos diferentes, en relacin con el del ser humano

Especie
c l i i m p a n d Mono Rliesus Penu Caballo Pollo Ahh Tligo Levadura

'Adaptado de "Principles of Biaelierni~tr)"de Srnitli et al. Edicin de 1983

En relacin con el polimorfismo, la protena mejor conocida es la hemoglobina humana, de lacual se han descrito ms de 300 variantes. Se ha podido comprobar que la mayor parte de los cambios responden a sustituciones de aminocidos, sin que se haya detectado que estos cambios produzcau afectacin de la funcin de esta protena; es ms, su estructura tridimensional no vara sensiblemente. Parece evidente que las protenas pueden tolerar un nmero elevado de cambios en su secuencia, sin graves efectos sohre su funcin, pero esto depende de que dichos camhios no afecten a residuos esenciales para la conformacin o para la interaccin con otras biomolculas. Sin embargo, algunas protenas, como la histona H4, tienen una secuencia muy conservada a lo largo de la escala filogentica.El anlisis de sus genes revela que slo mutaciones que den lugar a codones sinnimosson toleradas. Esto refleja que no todas las protenas evolucionan a la misma velocidad, lo cual puede reflejar su grado de evolucin previa.

Si se consideran en conjunto los estudios sobre protenas de diferentes especies, p e d e concluirse que en el proceso evolutivo muchas protenas han sufrido cambios apreciablesen su secuencia, otras protenas han desaparecido, mientras que muchas nuevas protenas han aparecido.

Mecanismos molecuiares de la evolucin

Como se seal anteriormente,la evolucin slo se produce a partir de loscambios enel genoma de la especie. A continuacin consideraremos los cambios que ocurren en el material gentico, que pueden tener significadoevolutivo. Los estudios detalladosde la secuencia de protenas y genes indican que el tipo de cambio o mutacin ms frecuente en la evolucin de estas biomolculas ha sido la mutacin puntual, o sea, el cambio de un solo par de bases en la secuencia del ADN del gen correspondiente.Por lo comn,estoconduceal cambio de un solo aminocido en la protena codificada. Los cambios en el nmero de aminocidosde las protenas responden a la prdida o ganancia de uno o ms tripletes completosen la secuencia del ADN, lo cual da Ingar a adiciones o supresiones. En ocasiones, las adiciones o supresiones se producen en los extremos, lo cual obedece a alteraciones en las seales de iniciacin o de tennhacin. La duplicacin de genes es otro fenmenomuy comn. Este proceso explica, al menos parcialmente, el incremento del ADN total del genoma de los organismos superiores. La duplicacin de genes, por s sola, puede tener ventajas selectivas, ya que al existir genes mltiples, la transcripcin y la traduccin pueden ocurrir nrAs rpidamente, incrementndoseas la sntesis de una protena dada. La duplicacin degenes parece ser un evento relativamentecomn, aunque los genes supernumerarios tienden a ser inestables y a desaparecer, a menos que un factor selectivo favorezca su permanencia. En ocasiones, los genes duplicados pueden evolucionar en forma independiente por mutaciones puntuales u otras, dando lugar, eventualmente, a la aparicin de protenas con nuevas funciones. Es comn tambin que uno de los genes duplicados retenga su estructura y funcin originales, mientras el otro evoluciona adquiriendo funcionesdiferentes. En otras ocasiones se produce una duplicacin con fusin de los genes, que da lugar a productos de mayor tamao, lo cuales pueden tener nuevas propiedades y realizar nuevas funciones; estos genes suelen poseer 2 sectores de secuenciasrepetidas o parcialmente repetidas, tal es el caso de las cadenas alfa 1 y alfa 2 de la haptoglobina humana. Precisamente el fenmeno de la fusin de genes es el mecanismo molecular que explica la aparicin de enzimas multifuncionales,como la sintetasa de cidos grasas, con la correspondiente ventaja desde el punto de vista de la eficiencia. La trasiocncin de geaes es otm evento que puede contribuir a la fusin de genes de localizacin alejada en el genoma, o bien facilitar la evolucin independiente dc genes duplicados. Tambin existen evidencias de que en el proceso evolutivo ha ocurrido la adquisicin de genes. Este hecho puede obedecer a la simbiosis, tal como se plantea para la adquisicin de las mitocondrias por las clulas eucariontw o por el fenmeno de la transdudn, consistente en la transferencia de genes,la cual es llevada a cabo por virus, o inclusopor la incorporacin de virus completos al genoma celular. En la evolucin ha ocurrido prdidade genoma, razn por la cual los organismos evolucionados no pueden r e a l i r determinadasfunciones, como la sntesis de algunos aminocidos. Sin embargo, esta prdida se considera ventajosa y econmica, si dicho organismo se desarrolla en un medio donde la funcin perdida no es imprescindible. Se evitara, de este modo, el gasto de sustancia y energa que implica reproducir un gen y sintetizaruna protena,euyafunein no esdeterminanteenel desarrollodel organiin~o.

No se conoce si los organismos superiores sintetizan protenas "vestigiales", que han perdidosufuncin. Tampoco se sabe con exactitud la funcin que han desempeado en la evolucin los cambios en genes reguladores, ni el significado evolutivo del ADN no codificante, aunqne -sobre todo en el caso de los intrnnes- algunos consideran que tienen una importante funcin evolutiva como reservorio de genes o fueute de cambios en hloque, en la estructura de los genes. Es necesario destacar la importante funcin evolutiva de la repmdueein sexual. Como se sabe, en este tipo de reproduccin se lleva a cabo la recnmbmacin de los genes de los progenitores, lo que da lugar a una infinidad de combinaciones de todo el fondo gentico de la especie, y favorece el establecimiento y la propagacin de aquellas composiciones genbticas que poseen ventajas adaptativas. Como se ha sealado, los cambios o mutaciones del ADN son impresciudibles para el proceso evolutivo. Aunque todava no se ha podido precisar con exactitud la naturaleza de los agentes mutagnicos que producen todos estos cambios, se suele afirmar que aparecen espontneamente. Por otra parte, los factores selectivossuelen actuar sobre poblacionesque presentan un determinado grado de polimorfismo, por lo cual una variante de protena que se encontraba limitada a un subgrupo de la poblacin puede convertirseen L a forma m q ventajosa en las nuevas condiciones y generalizarse en la poblacin de la especie. Un ejemplo delo anterior lo constituyela generalizacin -en una gran parte de la poblacin de algunas regiones de frica- de la variante de hemoglobina denominada S. Esta hemoglobina confiere cierto grado de resistencia contra la infestacin por algunos tipos de Plasmodium, afeccin endmica en estas regiones, lo cual explicara la elevada difusin del gen de la hcmoglohinaS entre los negros africanos y sus descendientes. Los mecanismos de la evolucin, a veces, nos dan la impresin de ser "previsores" e "intencionales'". Esta apariencia se produce por la propia naturaleza de la seleccin, ya que resulta prcticamente imposible conocer el elevado nmero de eventos mutacionalcs que han desaparecido por su valor nulo o negativo, desde el punto de vista adaptativo. La naturaleza esencialmente aleatoria del proceso se pone de nianifiesto al considerar el mecanismo, ya tratado, de aparicin de nuevos caracteres.

Estudio experimental de la evolucin

En los experimentos que describiremos a continuacin se reineda el proceso evolutivo, en relacin con un carcter particular. Como quiera que los organismos vivos actuales han alcanzado un alto grado de adaptacin, en los experimentos se crea, artificialmente, un estmulo a la evolucin mediante un sistema en el cual existe un factor externo diferente a las condiciones normales para el ente biolgico estudiado. Este factor origina una presin selectiva sobre la poblacin, lo cual, eventualmente, culminar en la seleccin y generalizacin de una mutacin con determinada ventaja adaptativa. Esnecesario considerar en cada experimento cul ha sido la presin de seleccin y cul el mecanismo gentico de evolucin que ha operado.

. Evolucin molecuiar en organismos nnicelulares Experimento No. 1

Las levaduras pueden crecer indefinidamente por multiplicacin celular en un medio de flnjo continuo (en este tipo de cultivo el medio se reniieva de tina forma continua y automtica), donde las concentracionesde los nutrientes, la temperatnra, el pH y otros factoresson bptimos para dicho crecimiento.

La escasez de fosfato en el medio constituye un factor que limita la velocidad de crecimientode las levaduras. El ion fosfato puede obtenerse a partir de fosfatos orgnicos, como el glicerofosfato, por accin de enzimas fosfatasas que hidrolizan el enlace ster fosfrico. Una de estas enzimas es la fosfatasa cida, cuyo pH ptimo es 4,2. Francis y Hascheestudiaron los cambios adaptativos que ocurran en un cultivo de levaduras, donde el medio era limitado en fosfato y, adems, se mantena a un pH de 6.0. ~, De este modo. la disnonibilidad de fosfato estara dada. fundamentalmente..Dor la accin de la fosfatasa cida, pero ntese que el pH del medio es superior al pH ptimo de esta enzima. Bajo esta presin de selecciii se vera favorecido el crecimiento de mntantes de levadura, que pudiera incrementar la obtencin de fosfato en las condiciones dadas. Un cultivo en condiciones ptimas de crecimiento sirve como control. La aparicin de mutaciones ventajosas poda valorarse por un incremento producido en la velocidad de crecimiento de las colonias que se reproducan en el medio limitado (Fig. 84.3). Al cabo de 400 generaciones (unos 8 meses de cultivo) se detect una mutante que poda crecer en el medio limitado, a una velocidad mayor de lo habitual. Se pudo encontrar que estas clulas posean una actividad defosfatasa cida, en las condiciones del cultivo en medio limitado, superior a la encontrada en las clulai originales cuando se las coloca en las mismas condiciones. Cabra pensar que estas clulas posean una mayor concentracinde fosfatasa cida, o bien que la enzima haba adquirido mayor efectividad para las condiciones del medio limitado. Estudios posteriores de esta enzima pusieron de manifiestoquese haba producido un camhio en su pHptimo (desde4J hasta 4,8), 10 cualexplicabasu mayor actividad en las condiciones del medio limitado (Fig. 84.4). De este modo, una mutacin que produjo un cambio de solamente 0,6 unidades de pH, en el pH ptimo de la enzima fosfatasa cida, fue suficiente para incrementar la velocidad de crecimiento de estas clulas, en un medio limitado en fosfato. Pudiera pensarse que 8 meses es nn tiempo muy largo para poner en evidencia un camhio evolutivo, pero no se dehe perder de vista que en la naturaleza la evolucin se produce en perodos enormemente mayores.

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cultivo original de levadura

Siernhra en medio

Seleccin dc miitanrr con iiiayoi velocidad de creciiniento

Fig. 84.3. A l hacer rrcrcr la levadinra cn uii medio liriiitado en foifato, se pucde scleeeionar, de aciicrdo con su rclocidad d e rrccimierilo en ese medio, aquellas mutarites que ir.sultan ventajosas en esas condicio-

nes.

Experimento No. 2. Evoludn moleeular en clulas de mamferos

Los hepatocitosde ratn pueden crecer en un medio decultivocon condiciones apropiadas. Existen diversas sustancias que interfieren en la multiplicacin normal de las . de e s h sustancias es el metotrexato, clulas, las cuales se denominan c i ~ t i c o sUna frmaco quese ha utilizadoen el tratamiento de algunos tipos de cnceres. El metotrexato ejerce su accin inhihiendo a la enzima dihidrofolato reductasa, cuya actividad es imprescindible para la sntesis de los desoxirribonucletidos precursores de los cidos desoxirrihonucleicos.La inhibicin de la enzima condiciona, pues,la muertede las clulas. Robert T. Scliinike investig la aparicin de clulas resistentes al metotrexato. Para ello se expuso un cultivo celular a bajas concentraciones del frmaco. En efecto, casi todas las clulas murieron, pero unas pocas (1 entre cada 100 000 clulas) permanecieron vivas y pudieron multiplicarse en este medio, lo cual se detect porque deipus de una disminucin brusca del nmero de clulas en el cultivo, las clulas que permanecan vivas se mnltiplicaban y poblaban nuevamente el medio de incuhacin. Estas clulas resistentesse colectaron mediante centrifugacindel medio de cultivo y se "sembraron" nuevamente en un medio que contena una concenh.acin ms elevada de metotrexato. Como al principio, solo unas pocas clulas sobreviven y se multiplican. Este procedimientose repiti mltiples veces, hasta obtener clulai muy resistentes a altas concentraciones de metotrexato (Fig. 84.5). En estas clulas adaptadas se en-

I I .

Enzima dc la cepa oi-iginal Enzima de la cepa niutada

Fig. 84.4. En una miitante dc levadura que uiia velocidad de crccimiento acelerada, en un mcdio limitado en fosfatu y a pli 60,sc pudo comprobar q u e sc haba l~r~,diieido una mutacin tal, que el PH ptimo de la fusfatasa Aeiil.1 haba cambiado de 4 . 2 a 48.

Clulas no resistentes

Clulas poco resistentes

Slo pocas sobreviven Clulas medianamente resistentes Slo pocas sobreviven

contr que la actividad de la enzima dihidrofolato reductasa era excepcionalmente elevada, tanto que dicha enzima constitua casi el 5 % de toda la protena celular. Utilizando una sonda radiactiva, consistente en un segmento de ADNde cadena sencl)la, capaz de hibridar con el gen de la enzima dihidrofolato reductasa, y que, adems, contiene un istopo radiactivo del fsforo,se pudo comprobar que en el ADK de las clulas resistentes existan mltiples fragmentos, capaces de hibridar con esta sonda. Este resultado indic la existencia de mltiples copias (hasta 150) del gen estructural que codificapara la dihidrofolato reductasa en estas clulas, lo que explica la alta intensidad de sntesis de esta protena enzimtica en ellas (Fig. 84.6). De este modo, las clulas eran capaces de anular el efecto inhibitorio del metotrexato, debido a que lograban producir una elevada concentracin de dicha enzima, de ah que pudieran multiplicarse aun frente a elevadas concentraciones del frmaco. Los resultados slo podan reproducirse mediante el mtodo de seleccin direccional o escalonada aqu expuesto. Si el cultivo inicial se expone a las concentraciones ms elevadas de metotrexato, ninguna clula sobrevive.

Experimento No. 3. Evoluan de molculas aisladas

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Clulas muy resistentes

Fig. 84.5. Mediante iina exposicin escalonada de eluias de ciiltivo, a conccxitraeioneseadn vez ms altas de rnctotrexato, se pueden ohtcner clulas can una gran resistencia ante este frmaco.

t El proceso Algunos virus poseen ARN,en lugar Ic U > \ como material g ~ i i tiro. de replicacin en estos organismos reqoiere de la accin de la ARN replica\a, enzima de origen vira1 que cataliza la formacin de ARN utilizando la informacin de otro ARN. El virus Q-heta es uno de estos virus ARN. SolSpiegelman aisl y purific el ARN y la ARN replicasa de este virus. El ARN y la enzima se colocaron en un medio donde se encontraban los nncletidos tnfosfatados y otros elementos necesarios para la sntesis de ARN por la AKN replicasa. En estas condiciones, ocurra la replicacin del ARN del vims Q-heta g se formaban nuevas cadenas de ARN que a su vez podan servir de molde para la sntesis de otras molculas de ARN (Fig. 84.7).

ADN celular

Calentamiento

Fig. 84.6. En clulas que hahian desarrollado una alta resistencia al metotrexato mctliante crposicin escalo. nada se pudo detectar, por mtodos de hibridacin, la existencia de copias mltiples del gen que codifica para la enzima dihidrofdato redaetasa.

Enfriamiento

It

Cadacierto tiempo SpiegeIman extraa una muestra de la solucin y la aada a un medio fresco (con las concentraciones ptimas de los nucletidos requeridos para la replicacin), de modo que la replicacin continuara. Una primera observacin fue que las transferencias hacia medio fresco deban hacerse cada vez en intervalos ms cortos, debido a un incremento progresivo en la velocidad de replicacin. Al cabo de 75 transferenciasse analizaron,mediante mtodos de determinacin de secuencia, las caractersticas estructurales de los ltimos ARN producidos (Fig. 84.8). Sorprendiencontrarque los ltimos ARN eran mucho ms cortos que 1% originales (tenan slo poco ms del 10 % de la longitud inicial), lo que explica por qu se incrementaba tanto la velocidad de replicacin. La prdida de material gentico no afect las secuencias reconocidas por la ARN replicasa, lugar donde se inicia la replicacin,de modo que los ARN mutados queiban apareciendo durante los diferentes ciclos de replicacin, con una longitud inferior a la de sus progenitores, se replicaban ms rpidamente en los ciclos de replicacin sucesivos, y eran los ms "aptos", y, por tanto, los que "sobrevivan". Se produjo asun modelo de evolucin con molculas aisladas.

ii ATP

yCTP

5'
ARN QP

s1
ARN QP

Fig. 84.7. Rcplicaein in rifro dc iiialculas de ARN por accin de la enzima ARN replicasa del virus Q-heta.

El desarrollo de mtodos cada vez ms poderosos y rpidos para el anlisis de secuencia de macromolculas permite prever la acumulacin de un gran volumen de informacin, cuyo procesamiento y organizacin iran brindando nuevos conocimientos acerca de la evolucin de diferentes especies moleculares. Actualmente, se tiene ya informacin sobre la evolucin en algunas familias de protenas, como en el caso de las enzimas proteolticas, uno de los grupos enzimticos ms estudiados desde el punto de vista de la bioqumica comparada. Se obtendr as una visin del surgimientode distintas protenas a partir de otras por los diferentes mecanismos que hemos apuntado. El lmite en cuanto a extensibn y detalle de este conocimientono es posible predecirlo. Esdeesperar quese produzcan tambin nuevos avances en el terreno experimental de la evolucin, los cuales permitirn profundizar cada vez ms en los mecanismos evolutivos. Todo ello contribuir a elevar el aporte de la bioqumica al conocimiento sobre el origen y la evolucin de los organismos vivos. Echando a volar el pensamiento puede vislumbrarse la posibilidad de iitilizar el conocimientoadquirido para "dirigir" la evolucin de algunas especies en determinada direccin, con provecho en aplicaciones iridiistriales, mdicas u otras.

Sector de

ARN QP 1' Reducido

Resumen
La bioqnmica ha wntribuido, junto a otras ciencias, al conocimiento adual de la evolucin de los seres vivos, especialmente en lo que a sus mecanismos molecuiares se reere. L o s avances de la hinqumica en el estudio de la evolucin se han debido a los progresos en las tcnicas para la determinacin de la estrnctura primaria de protenas y cidos nudeieos. Desde el punto de vista experimental ha sido decisivo el uso de cultivos de clulas. El anlisii detallado de la secuencia de protenas homlogas ha puesto en evidencia las siniihides existentes, produeto de su origen comn, y tambin las diferenciasindicadoras de los cambios evolutivos. El nmero y la nahiraleza de las diferenciasde seeuenaa entre protenas homlogas de diferentes especies guardan una estrecha relacin con la proximidad o lejana filogentica de dichas especies.

Fig. 84.8. Al caho dc 75 tranrferctirias para la replieacin i i ~ vitrodd ARN del virus Q-he@ los Itinii8 ARU pruduiidos erair rriuelw iiis cortos que el ,\RN nrigitinl. El ~ e c t n r de recenaciinieiito p o r la A K N replieasa rstnha rociscrvado.

Aun dentro delamisma especie existe cierto grado de polimorsmo para diferentes protenas. Los cambios en el ADN que pueden dar origen a moditicaeiones con posible significado evolutivo son las mutaciones puntuales, adiciones y supresiones, duplicacin y fusin, traslocacin y adquisicin de genes, m como la prdida de genoma. Un significado especial posee la recombinacin gentica. Se desconoce la funcin evolutiva del ADN no codicante. Todo eUo ha conducido a que en el curso de la evolucin muchas protenas hayan snfrido cambios apreciables en s useniencia, otras hayan desaparecido, en tanto que han aparecido nuevas protenas. La evolncin a nivel rnolecular se ha podido estudiar experimentalmente, tanto en cultivos de elulas como en sistemas de biornolculas aisladas. Es de esperar que la contribucin de la hioquimica al conocimiento de la evolucin contine inerementndose en el futuro, Uegandn a encontrar incluso aplicaciones prcticas.

Ejercicios
1. Cules progresos tcnicos han tenido mayor significacinpara el estudio de la evolucin molecular? 2. Qu es el poliniorfismoy cul inforntacinnos brinda en cuanto a la evolucin? 3. Cul ha sido el mecanismo evolutivo general que han seguido las protenas? 4. Cules cambios en el ADN operan en el proceso evolutivo? 5. Por qu a pesar del altogrado de adaptacin alcanzado por los seres vivos, no e7 correcto considerar al proceso evolutivocomo intencional o previsor? 6. Cwles cambios genticos podran explicarlosresultados del experimentoNo. l. "Evolucin molecular en organisn~os unicelnlares"? 7. iPor qu en el experimentoNo. 2. "Evolucin molecular enclulasde mamferos" no es posible alcanzar una elevada resistencia al metotrexato en un solo paso de cultivo? 8. Considera usted que en el experimento No. 3. "Evolucin de molculas aisladas", se hayan producido molculas de ARN de longitud superior a la original?

El envejecimiento y la subsecuente muerte son procesos inherentes a la propia existencia de los seres vivos. h e d e afirmarse que, exceptuando los procariontes, todos los seres vivos envejecen y mueren. Desde un punto de vista biolgico general, el enve,jecimiento y la muerte constituyen factores que contribuyen al proceso evolutivo. La evolucin es favorecida por la actividad reproductora de los seres vivos, con la cual se originan nuevos individuos, potencialmente portadores de nuevas caractersticas genotpicas, y de este modo se incrementa el "acervo" de diversidad de la especie. Una especie inmortal terminara por saturar su nicho ecolgico y, por consiguiente, limitara la aparicin de nuevos individuos, y con ello las posibilidades evolutivas. Aparentemente, la vida de cada especie dura lo suficiente para asegurar una reproduccin exitosa. La Iiunianidad sostiene, desde luego, una posicin antropocentrista ante esta situacin. El envejecimiento y la muerte constituyen una preocupacin social general, y mdica, en particular. La inmortalizacin del ser humano contina siendo un terreno puramente especulativo, sin embargo, otras metas como la prolongacin de la vida til y la eliminacin o atenuacin de los inconvenientes de la llamada tercera edad, s constituyen empeos vlidos de la ciencia contempornea. Actualmente, la formacin intelectual se extiende hasta bien entrada la tercera dcada de vida, y la prolongacin de la vida til repercute en el aporte social de la existencia particular. Aesto se aadeel justoanhelo de elevar la calidad de la vida. De lo anterior se deduce que los estudios sobre el envejecimiento no son meros ejercicios intelectuales, sino la bsqueda de soluciones a problemas prcticos de nuestros das.

Caractersticasdel envejecimiento
El envejecimiento se caracteriza por un deterioro progresivo de las funciones del organismo, hastael puntoen que se hacen incompatibles con el mantenimientode la vida.Esta declinacines paulatina y se acompaa de cambios estnictnrales y funcionales evidentes. En los seres humanos el comienao del envejecimiento varia entre un individuo y otro, y por esta razn no est bien precisado, aunque se le suele situar entre los 40 y los

50 aos, pero es muy probable que cambios sutiles, diiciles de detectar, comieiicen a producirse con anterioridad. En el hombre queenvejece son notables los cambios externos que afectan la piel, el pelo y el peso corporal, y son frecuentes los trastornos neurovegetativos y las alteraciones psquicas. De este modo, el ser humano se va tornando incapaz de vivir de manera independiente y requiere del apoyo y auxilio de otras personas. Simultneamente, se produce un incremento de la trrcuencia y letalidad de algunas enfermedades, todo lo cual condiciona un aumento de la mortalidad con la edad. Estos cambios que afectan al organismoen su conjuntose consideran el resultado acumulativode alteracionescelulares. De hecho, parece ser que los diferentes tipos celulares del organismo siguen sus propias pautas de envejecimiento,por lo cual no todos los rganos envejecen con igual velocidad. Actualmentese reconoce la existenciade modificaciones celulares que progresan con la edad y vienen a constituir el envejecimientocelular.

Envejecimientocelular
En principio, los camhios que se operan en la clula, y que caracterizan cl envejecimientocelular,pueden conocerse mediantela comparacin de las caractersticas estructurales y funcionales de clulasjvenes y clulas viejas. Aunque existe espacio para la polmica, una primera aproximacin es la de considerar joven o vieja a una clula, en correspondencia con la edad del animal del cual se obtiene dicha clula. Lo cierto es que las modificaciones que se han encontrado en las clulas envejecidas constituyen ya una relacin extensa, y peridicamente se adicionan nuevos hallazgos. Intentando resumir, sealaremos que entre las caractersticas de las clulas envejecidas se encuentran las siguientes: 1. Menorvelddadde divisin celuiar. En la medida en que una clula es ms vieja, el intervalo entre una divisin mittica y otra se hace ms prolongado, lo que obedece al alargamientodel perodo G,,el cual puede llegar a ser tan extenso que la clula debe ser considerada en el perodo G,,. 2. Enlenteeimientodel recambio de protenas. Las protenas, como todos los comDonentes celulares. estn suieas a un recambio continuo uroducto de su sntesis v degradacin constantes. Estos 2 ltimos procesos estn enlentecidos en las clulas viejas, lo que trae como consecuencia que disminuya la fraccin de protenas celulares, la cual es renovadaen un tiempo dado. 3. Modificaciones estnicuraies de las protenas. Se han descrito varias alteraciones estructurales en protenas de clulas envejecidas. Se ha sealado la formacin de bases de Schiff entre residuos de aminocidosde protenas y perxidos lipdicos, desaminacin y racemizacin de residuos, as como disminucin en el grado de acetilaciii.Lgicamente, estas modificaciones estructuralessuelen acompaiarsc de serias alteraciones funcionales, con el consiguiente perjnicio a la actividad celular. 4. Alteraciones en la aevidad de algunas enzimas. Relacionado con el aspecto anterior, se han encontrado modificaciones, por ejemplo, la disminucin de la actividad de diversas enzimas en las clulas viejas. Se ha reportado una disminucin en la actividad de las enzimas superxido dismutasa y catalasa, las cuales participan en la proteccin de la clula contra los efectos dainos de los radicales libres. Otras enzimas, cuya actividad es menor en clulas viejas,son la triosafosfato isomerasa, la protena acetilasa y algunos tipos de ADN polimerasas. 5. Menor capacidad de reparacin del ADN. Las clulas envejecidas son menos eficientes que las jvenes, en la reparacin de las alteracionesproducidas en su
e

material gentico. Esta situacin parece depender de una menor capacidad funcional de los sistemas que,participan en los procesos reparativos. 6. Modicaciones en la composicin y las propiedades de las membranas. Las membranas de clulas viejas presentan una menor proporcin de cidos grasos con mltiples dobles enlaces en sus Ipidos constituyentes,lo cual altera sus propiedades fsicas. Ismbin se han encontrado alteraciones en el nmero de receptores hormonales de las membranas, casi siempre por disminucin. 7. Acumulacin de sustandas. En las clulas viejas se produce la acumulacibn de determinadas sustancias. Sobresale en este sentido el pigmento fluorescente lipofuscina. La cantidad de este pigmento acumulado en la clula guarda relacin con la edad de sta. Sin embargo, se considera que la acumulacin de lipofuscina es ms bien una consecuencia, que la causa de la senectud celular. La variedad de las modificacionesque se han detectado en las clulas viejas da una idea de la complejidad del proceso deenvejecimiento. No obstante, parece claro que algunos de estos cambios no son independientes entre s, sino que pueden estar asociados, o ser unos consecuencias de los otros. Al menos, desde un punto de vista terico, debe considerarse que los cambios iniciales en el envejecimiento se localizan en el material gentico o en las protenas, ya que pequeas alteradonesen estos compuestos, a causa de sus caractersticas,pudran resultar amplificadasy repercutir en muy diversos aspectos de la estructura y funcin celulares.

Premisas experimentales para el estudio del envejecimiento celular

Entre los mtodos que resultan tiles en el estudio del envejecimiento celular deben considerarse, en primer lugar, las tcnicas de cultivos de tejidos. Los estudiosde envejecimiento, en los quese emplean organismos ntegros, suelen ser prolongados, costosos y sujetos a una gran variabilidad, producto de mltiples factores ambientales. Las clulas en cultivo pueden mantenerse en condiciones uniformes muy controladas,son honiogneas en cuanto al tipo celular estudiadoy permiten realizar estudiosexperimentalesen perodos razonablementecortos. fundamentalesde las tcnicas En e1 captulo 80 se expusieron las caracte~sticas de cultivo de tejidos; aquenfatizaremos algunos aspectos relacionados con las resiembras sucesivas. Como se vio, a partir de un cultivo celular primario es posible realizar numeroso5 subcultivos. Cuando las clulas se '%iembran"en un frasco que contiene un medio adecuado, se adhieren a la pared y se multiplican por mitosis hasta alcanzar el estado de confluencia,momento en el cual se detienen las divisiones celulares. Pero si parte de estas clulas son desprendidas y sembradas en otro frasco, se reinicia el proceso de divisin celular, hasta alcanzarde nuevo el estado confluente.Estas operacionespueden repetirse de manera continua, lo que induce a las clulas a dividirse,prcticamente de Fnnna ininterrnmnida. Como quiera que entre una divisin mittica y otra transcurre un lapso, variable segn el tipo celular y las condicionesdel cultivo,es posible hablarde la edadde unas clulas en trminos de divisiones celulares. Asi, se comprende que para un mismo tipo celular, y en iguales condiciones de cultivo, sern ms viejas aquellas clulas que hayan efectuado un mayor nmero de divisiones celulares. Como se ver posteriormente, bajo estos razonamientos se han llevado a cabo interesantes experimentosacerca del envejecimiento celular in vitro. Una tcnica auxiliar empleada es la formacin de citoplastas. Un citoplasto es una clula que ha expulsado su ncleo (al ncleo expulsado se le denomina carioplasto).

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Clulas en cultivo

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Adicin de citocalasina B
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Expulsin de los ncleos Ceotnfugacio

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@ Citoplastos y carioplastos
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La citocalasina B es un agente muy efectivo para la induccin de la formacin de citoplastosen clulas cultivadas. Los citoplastosy carioplastos pueden separarse por mtodos de centrifugacin y se mantienen viables durante varios das (Fig. 85.1). De modo inverso, es posible reconstituir clulas ntegra a partir de citoplastwy carioplastos aislados. Desde luego que procedimientos analticos de diversa naturaleza han tenido una importancia fundamental en el establecimiento de los cambios que se operan en las clulas envejecidas. En particular, los procedimientos de la gentica molecular han aportado conocimientos fundamentales, utilizados como bases de hiptesis acerca del envejecimientocelular, que se tratarn ms adelante. A continuacin se estudiarn varios experimentas acerca del envejecimiento celular, realizados con el empleo de algunos de estos mtodos.

aislados Experimento No. 1 . EL envejecimiento se acompaa de una prdida de la capacidad de muiplicaci6n En principio, cabria pensar que cuando se establece un cultivo de un tipo celular dado y se realizan subcultivos sucesivos, dichas clulas deben ser capaces de multiplicarse indefinidamente,siempre que se las provea de medio de cultivo fresco,con las condicionesptimas para su crecimiento. En California,el grupo de Hayflick demostr que esto no es as. Estos investigadores establecieron un cultivo de clulas embrionarias de pulmn humano. Cada vez que se alcanzaba la confluencia del cultivo, las clulas eran desprendidas, diluidas y resembradas. Se pudo comprobar que en lamedida en que lar clulas del cultivo iban experimentandoms divisionesmittieas (tenan ms edad l. el tiempo necesario para alcanzar la confluenciase prolongaba, lo cual reflejaba UILI disminucin en la velocidad de divisin celular. Al cabo de los 7 a 9 meses de establecido el cultivo, las clulas se haban dividido unas 50 veces. Las clulas de los ltimos cultivos haban perdido hasta tal grado 511 capacidad de divisin, que no llegaban a alcanzar el estado confluente y terminahati por morir (Fig. 85.2). Se deduce de este resultado quelas 50 divisionesconstituyen un lmite en la vida t ede del tipo celular empleado. A este nmero de 50 divisiones se le denomin W

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Formacin de clulas reconstituidas

Fig. 85.1. Formacin de eitoplastos y eariaplastos. Las clulas en cultiyo, al ser sometidas a la accin de determinadas sustancias romo la citocalasina B, expulsan sus niielcos y dan lugar a los citoplastos y earioplaatos, los cuales pueden separarse por eentrifugacih. Ambos componentes pueden reunirse nuevamente para formar c6lulas reconstituidas.

Haynick.
El lmite de Hayflick se mantiene aun cuando en un estadio intermedio del experimentolas clulas sean conservadas en congelacin. Al descongelarselas clulas y colocarse en el medio de cultivo recuerdan cunt.as divisioneshaban realizado con anterioridad y se multiplican basta alcanzar el lmite de 50.

Experimento No. 2. El W t ede Haynick es una propiedad intrnseca de las d u i a s La posibilidad de que el medio de cultivo u otras condiciones del experimento determinaran el Imite de Hayflick fue descartada (Fig. 85.3). Setomaron2cultivos: uno de clulas masculinas, que haba experimentado40 divisiones (clulas viejas), y otro de clulas femeninas, con 10 divisiones (clulas jvenes). Se estableci un cultivo mixto de ambos tipos celulares en el mismo frasco de cultivo; en estamezcla es posible distinguir las clulasfemeninas de las masculinas, mediante el estudio de los cromoso~nas sexuales. Paralelamente se hicieron subcultivos sucesivos de cada cultivo original.

Se encontr que en los cultivos mixtos (al trmino de 20 ciclos de divisin celnlar) slo era posible detectar la presencia de clulas femeninas; las masculinas haban perecido. En el cultivo paralelo puro de clulas femeninas continuaba la divisin celular, no as en el de clulas masculinas,las cuales haban muerto. Este experimento reforz la idea de que el lmite de la vida celular es inherente a la propia clula. Experimento No. 3. Funcin del ncleo y el citoplasma en la determinacin del W t e de Hayflkck Para establecer la influencia relativa del ncleo y el citoplasma en el envejecimientocelular se realiz el experimento que se muestra en la tgura 85.4. Se tomaron 2 cultivos celulares, uno de clulasjvenes y otro de clulas viejas. Mediante la adicin de citocalasina B se obtuvieron los correspondientes citoplastos y carioplastos. Posteriormente,se reconstituyeron clulas a parir de citoplastosjvenes y carioplastos viejos, as como de citoplastos viejos con carioplastos jvenes. Se mantuvieron, adems, los cultivos de control de las clulas originales. El nmero de divisiones que se mantienen en las clulas reconstituidas guarda una relacin ms estrecha con la edad del carioplasto, que con la del citoplasto. Si bien este resultado no descarta de manera definitiva una posible influenciadel citoplasma en el establecimiento del lmite de Hayiick, la evidencia aportada apunta hacia una funcin preponderante del ncleo. Siendo el ncleo asiento celular del ADN, los cientficos se inclinan a pensar que los mecanismos molecnlares que condicionan los cambios caractersticos del envejecimiento celular estn ntimamente relacionados con la informacin gentica, mxime si se tiene en cuenta que otros eventos del desarrollo ontognico, como la embriognesis, el crecimiento y la maduracin sexual, estn determinados genticamente.

Cultivo primario de clulas embrionariai

Subcultivos sucesivos

Lai clulas se multiplican y alcanzan la confluencia

Al cabo de 50 divisiones celulares Las clulas no se multiplican. no alcanzan la confluencia y mucren

Fig. 85.2. La rapacidad de multiplicacin celular de una lnea dc cultivo es limitada. Si sc establece un cultiva de cbliilas embrionarias de pulmn y se realizan subcultivas sucesivos, llega un momento ( al cabo de unas 50 divisiones celulares ) cn el cual las clulas pierdeii su capacidad de multiplicai'sc, el cultivo iio alcanza el estado de confluencia y las clulas termiliaii por morir.

Clulas masculinas 40 duplicaciones

Clulas femeninas 10 duplicaciuoes

Control clulas masculinas

Clulas masculinas y femeninas

Control clulas femeninas

a c-3 25
AA
Control clulas masculinas Permanecen clulas femeninas

A I'L

Control clulas femenina?

Fig. 85.3. Lo limitacin de la capacidad de rcproduecin de las clulas no est determinada por el medio de Cult i w . Si se establece un ciiltirn mixto de clulas femeninas j6icncs y clulas masculinas viejas, stas ltimas cesan dc multiplicnrse y mueren mucho antes que las primeras, a pe.wr de que las condiciones del medio son las mismas en ambos casos.

Estirpe celular joven (10 divisiones)

Estirpe celular vieja (30 divisiones)

Fig. 85.4. Fiincin relativa del ncleo y el citoplasma en el lmite de la vida cdular. Si con el auxilio de la citmalasina B w preparan citoplastos y earioplastos de clula jvenes y de clulas viejas, y luego se reconstituyen nuwas clulas con estos componentes intercambiados, la supervivencia ulterior guarda una mayar corrcspandeniia con el origen del carioplasto correspondiente.

Sobrevive 40 divisiones ms

Sobrevive 20 divisiones ms

Hiptesis genticas sobre el envejecimientocelular

A continuacin expondremos 4 hiptesis acerca del envejecimiento. las cuales centran su atencin en el material gentico.

Primera hiptesis
Formulada inicialmente por Medvedev y desarrollada por Orgel, plantea que el envejecimiento celular sera la consecuencia del incremento progreiivo en los errores producidos durante el flujo de informacin en la clula. La produccin de un numero creciente de errores durante los procesos de replicacin, transcripcin y traduccin conducira a la acumulacin de protenas defectuosas,con el consiguiente deterioro de su actividad enzimtica u de otro tipo. A la larga, la capacidad funcional de la clulase veracomprometida y afectada,lo cual, eventualmente, conducira al envejecimiento y muerte celular (Fig. 85.5). En apoyo a esta hiptesis Harty Sellow realizaron algunos experimentos. Estos autores, al estudiar la capacidad de reparacin del ADN en varias especies,encontraron que sta era inversa a Laduracin habitualde lavida de la especie. El ser humano, cuya capacidad de reparacin del ADN es cerca del doble de la del chimpanc, tiene tamhin unalongevidad doble, en relacin con la de este primate. Adicionalmente, se ha encontrado que en rlulas cultivadas se produce una disminucin en la capacidad de reparacin, en la medida en que el cultivo enve,jece. Una variante de la hiptesis, expuesta por Nestor W. Flodin, fundamenta el incremento de los errores, no en una prdida de la capacidad de reparacin, sino en la acumulacin de una alteracin para la cual no se conocen mecanismos que puedan repararla, como la conversin por hidrlisis no enzimtica de la S-metil citosina del ADN en timina. Este tipo de alteracinse iraacumulando hasta interferir en los procesos normales de transferencia de la informacin.

Segunda hiptesis
Formulada tambin por Medvedev, esta hiptesis se basa en el hecho conocido de que muchos genes se encuentran repetidos en el genoina de diferentes organismos vivos.

Incremento en el numero de alteraciones acumuladas en el ADN

Fig. 85.5. La acumulacin de errores par alteracin del ADN, cualquiera que sea su origen, conduce a alteraciones en los procesas del flujo de informacin en la clula y con ello a la aparicin de las modificaciones estructurales y funcionales, propias del envejecimiento.

Conforme con esta hiptesis, de los genes idnticos que posee una clula, slo unoseraactivoen un momentodadode su vida,mientrasque el resto estara reprimido, co11stitoyendounaespeeiede'~rva". Estasituacin asegura unamayor supervivencia de la clula; si el gen que en un momento dado es funcional, resulta daado por cualquier causa, comprometindoseel funcionamiento celular, el gen alterado sera remplazado por uno de los de "resewa" y se asegura, de este modo, la continuidad de la vida celular. Con el tiempo, los genes repetidos se iran daando sucesivamente, hasta agotarse la reserva. Lasalteracionesen el flujo de informacinno podran evitarse y apareceran las moditicaciones funcionales propias del envejecimiento (Fig. 85.6). De acuerdo con esta hiptesis, se puede predecir que las especies de vida ms prolongada deben poseer mayor repetitividad de su genoma. En esta hiptesis, como en la anterior,el envejecimientoestara determinado por la acumulacin de errores en el flujo de informacin, lo que los diferencia es el mecanismo que conduce a esta acumulacin de errores.

(
(

Gen A-l

Gen A-2

1
1

8
Gen

L
Gen A-2

1'
1~

Gen A-3

1 1
(

Gen A-4
I

1
1

Gen A-5

1 A-1 1
A-1

Dao en A- 1

4
Gen A-S

Gen A-3

4 -

Gen A-4

1
(

I
Gen A-4

4 =

z e A-2 n

1 Gen

(
4. -

1 Gen 1 A-2 1

Gen A-3

Gen A-5

4 -

4 -

Fig. 85.6. La hip6tesia del agotamiento de los gencs repetidos presupone la existencia de copias mltiples de determimados genes en el gen<rina. En la medida en que, por cualquier causa, estoa xcnes sufren dao, van siendo rcmplazados por las copias correspondientes. Cuando se agotan las copias de reserva se producen alteraciones funeionates correspondientes al envejecimiento.

Strehler ha sealado los genes de ARNr como un caso tpico de genes muy repetidos, donde el mecanismo de inactivacin progresiva podra operar.

Tercera hiptesis
Genes de control temporal La tercera hiptesis se basa en el hecho observado de que a lo largo de la vida de un animal se produce una sucesin ordenada de activacin-desactivacin de genes. Estos procesos son determinantes en los cambios que se van operando desde la concepcin hasta la adultez, siguiendo un programa estricto. De acuerdo con esta suposicin, el envejecimiento sera la continuacin de este programa gentico de la vida del organismo. En el marco de esta hiptesis se ha llegado a plantear, incluso, la existencia de genes de envejecimiento, cuya activacin secuencia1en determinada etapa de la vida ocasionara modificaciones ordenadas en algunos procesos hioquimicos y conducira a los cambios propios del envejecimiento (Fig. 85.7). Esta hiptesis tambin considera que en un organismo unos tipos celulares pueden envejecerm& rpidamente que otros, de acuerdo con su "progrania". Cuando el proreso afecta a clulas claves en el funcionamiento del organismo, sobrevienen los cambios del envejecimiento y finalmente la muerte.

Expresiii

Tiempo

'

Expresin

Tiempo

Expresin
Fig. 85.7. Hipbtesis del envejecimiento programado. De acuerdo con esta Idptesis cl envejecimiento no seria ms que la continuacin del programa genGtico de desarrollo del individuo. Al igual que dctermiiiados genes son activados a inactivadas durante determinadas fases de desarrollo untognieo, como en la infancia y la adoiescencia, la vejez estara dotermina. da por lo activaei6n-desaetivaii"n de determinados gezies caracteristicos de a t e penado de la vida y esto eondueiria a Iss manifestaciones propias del envejecimiento celular y del organismo.

Cuarta hiptesis
Esta hiptesis, propngnada por I,isaSeachrist,~efundamenta en el requeriniiento de los telmeros para una adecuada replicacin de los cromosomas. Los mecanismos normales de replicacin producen un acortamiento de los telmeros en cada ciclo celular. La longitud de estos segmentos repetitivos de hDN se restaura por la accin de la enzima telomerasa. La hiptesisdeSeachrist plantea que en la mayor parte de las clulassomticas se produce una prdida de actividad de la telomerasa. Como consecuencia cada vez que se produce en estas clulas un ciclo de reproduccin celular. ocurre un acortamiento de los telmeros que no se restituye. Con el tiempo, el acortamiento progresivo de los telmeros llega a interferir en la adecuada replicacin de los cromosomas y la clula deviene incapaz de multiplicarse y, eventualmente, mueip. Esta hiptesis brinda una explicacin muy racional, a nivel molecular, del lmite de Hayflick y ya se han obtenido ciertas evidencias experimentales que la apoyan.

Otras hiptesis sobre el envejecimiento celular

Se han formulado otras hiptesis sobre los mecanismos moleculares del envejecimiento celular, pero en casi todos los casos son variantes de las hiptesis genticas antes expuestas. Una de ellas es la hiptesis que plantea la disniinuciii de la capacidad defensiva de la clula frente a radicales libres, por la prdida o disminucin de actividades enzimticas especficas, o alteraciones en el funcionamiento del aparato lisosomal. Una hiptesis no vinculada a mecanismos genticos es la que postula que las alteraciones progresivas del envejecimiento se deben a la glicosilacin no emimtica de protenas celulares. Efectivamente, se conoce que diversas protenas sufren la incorporacin no emimtica de grupos glucosilo, lo cual puede llegar a interferir en sus funciones normales. Estas modificaciones -en el caso de protenas de vida media larga-podran, incluso, conducir a las alteraciones propias del envejecimiento cclular, hasta producir la muerte celular.

Ciertamente, eii la aparicin de cataratas, que puede ser considerada como un signo de ve,jez, se ha comprobado una funcin patognica de la glicosilacin de protenas. La glicosilacin no enzimtica de protenas es dependiente de los niveles de glucosa en la sangre y los tejidos. Estas reacciones se encuentran aceleradas en los diabticos, quienes, por otra parte, sneleii envejecer precozinente.

Perspectivas
El conocimiento exacto de los mecanismos moleculares que condicionan el envejecimiento celular y del organismo parece ser una meta asequihle, pero no inmediata. Por suerte, la mayor parte de las hiptesis elaboradas en este aspecto puede someterse a pruebas experimentales,especialmente con los recorsos analticos que la ingeniera gentica ha puesto al alcance de los investigadores. Si bien hasta el momento todas las hiptesis cuentan con determinado apoyo de carcter experimental,es de esperar que un futuro cercano las evidencias se acerquen cada vez ms hacia aqullar que gnarden ms correspodencia con la realidad. Es ms, no sera de extraar que a la larga se compruebe la verdad parcial de varias de ellas, mxime si tenemos en cuenta que no son excluyentes entre s. Ms reniotamente surgir la posibilidad deintervenir en estos procesos y prolongar la vida del ser humano, y quizs de otros seres vivos. Tambin podr mejorarse la calidad de la vida, especialmente en su perodo final.

Resumen
El envejecimiento y la muerte constituyen procesos propios de muchos seres vivos. Si bien dichos procesos contribuyen a la operacin de los mecanismos evolutivos, la humanidad se ha planteado la necesidad de prolongar la vida oI de sus miembros. De aqu que los estudios acerca del envejecimiento tengan una importanda prcica concreta. El envejecimiento se caracteriza por un deterioro progresivo de las funciones del organismo. En el hombre son notables los cambios que afectan la piel y el pelo, as como los trastornos neurovegetativos y psquicos. Los cambios que conducen al envejecimiento de1 organismo parecen ser consecuencia de alteraciones producidas al nivel celular. De hecbo, es posible uolizar el trmino de envejecimientocelular para referirnos a las alteracionesque aparecen en las clulas con la edad. Entre las alteraciones que se observan en las c6lulas viejas pueden destacarse las siguientes: menor velocidad de divisin celular, enlenteeimiento del recambio de protenas, moduicaciones estmcturales de las protenas, alteraciones en la actividad de algunas enzimas, menor capacidad de reparacin del ADN, modificaciones en la composicin y las propiedades de las memhraoasy acumulacin de determinadas sustancias. El envejecimiento celular se ha podido estudiar desde el punto de vista experimentai, a travs de los mtodos de cultivo de tejidos y otros procedimientos asociados. Contrario a lo que podra pensarse, las clulas en cultivo no pueden replicarse indefmidamente, aun cuando se hagan resiembras sucesivas en medio fresco. Al cabo de cierto nmero de divisiones, que se ha denominado lmite de Haytiick, las clulas pierden su capacidad de multiplicacin y mueren. Ha podido demostrarse que el W t e de Haylick es una caracterstica propia de las clulas, y no depende del medio de cultivo u otras condiciones. Dentro de los

grandes componentes celulares el ncleo tiene una marcada influencia en el valor de este Imite. Se han elaborado diversas hiptesis acerca de los mecanismos moleculares del envejecimiento celular; muchas de ellas tienen su base en los mecanismos del flujo de informacin en la cinia. Unahiptesis plantea que en el aparato gentico celular se va produciendo una acumulacin progresiva de errores, lo cual llega a interferir en el funcionamiento celular normal. En otra. las alteracionesde las funciones celularesse nrodncen nor el agotamiento sucesivo de genes presentes en copias mltiples dentro del genoma celular. Una tercera hiptesis plantea la existencia de una programacin gentica del envejecimiento, la cual se expresara mediante la activacin-desactivacin de determinados genes en perodos claves de la vida del individuo. Por ltimo, existe una cuarta hiptesis que se basa en el acortamiento progresivo de los telmeros, lo cual llega a interferir con la divisin celular. La mayor parte de las hiptesis no genticassobre los mecanismos molecuiares del envejecimiento celular pueden ser reducidas a las genticas. Las perspectivas de progreso en este campo podrn conducir al conocimiento exacto de los procesos subyacentes en el envejecimiento de las clulas y del organismo. IMo podr dar lugar a la intervenciny modificaan de dichos procesas, con la posibilidad de que la &dad y duracin de la vida puedan incrementarse.

Ejercicios
1. Explique cules son las caractersticasgenerales del envejecimiento de los seres vivos? 2. A qu se denomina envejecimiento celular? 3. Enumere las caractersticas de las clulas envejecidas. 4. Mencione algnnos mtodos empleados en el estudio experimental del envejecimiento celular. 5. Explique en qu consiste el lmite de Hayflick y cmo surgi este concepto? 6. D una interpretaciodiferente a la que se brinda en el texto acerca de los resultados del experimento No. 2. 7. Proponga un experimento complementario al tercero que apareceen el texto para precisar an ms la funcin relativa del ncleo y el citoplasma en la determinacin del lmite de Hayflick. 8. Seale los puntos de coincidencia y de discrepancia de las 4 hiptesis genticas sobre los mecanismos moleculares del envejecimiento celular que se dan en el texto. 9. Quinters prctico tienen los estudios acerca del envejecimiento y cules son las perspectivas en este campo?