Curso de Engenharia Qumica Disciplina de Qumica Orgnica Experimental Professor Nilo Eduardo Kehrwald Zimmermann

Prticas Cromatogrficas
Cromatografia em Coluna

Gabriela Gonalves Cavalcanti Anelise Mossmann

Bag, 02 de Dezembro de 2013.

SUMRIO 1. INTRODUO....................................................................................................................3 1.1 OBJETIVOS.............................................................................................................4 2. MATERIAIS E MTODOS.................................................................................................4 2.1 MATERIAIS.............................................................................................................4 2.2 PRODUTOS E REAGENTES..................................................................................4 2.3 PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL....................................................................4 3. RESULTADOS E DISCUSSES.........................................................................................5 4. CONCLUSO........................................................................................................................6 5. ANEXO...................................................................................................................................6 5.1 QUESTIONRIO.....................................................................................................6 5. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS.................................................................................7

1. INTRODUO Cromatografia uma tcnica utilizada para analisar, identificar ou separar os componentes de uma mistura.

Para separar mistura de substncias em escala preparativa, no analtica, a cromatografia em coluna o mtodo escolhido. [1] A cromatografia em coluna uma tcnica de partio entre duas fases, slida e lquida, baseada na capacidade de adsoro e solubilidade. O slido deve ser um material insolvel na fase lquida associada, sendo que os mais utilizados so a silicagel (SiO2) e alumina (Al2O3), geralmente na forma de p. A mistura a ser separada colocada na coluna com um solvente menos polar e vai-se aumentando gradativamente a polaridade do solvente e consequentemente o seu poder de arraste de substncias mais polares. [2] Os diferentes componentes da mistura devero mover-se com diferentes velocidades dependendo de sua afinidade com a substncia a ser separada da mistura (grupos polares interagem melhor com os solventes polares). Assim, a capacidade de um determinado solvente em arrastar um composto na coluna depende quase que diretamente da polaridade do solvente com relao ao composto. Consiste em uma coluna de vidro, metal ou plstico, preenchida com um adsorvente adequado. O adsorvente pode ser colocado na coluna diretamente ou suspendido em um solvente adequado. A coluna pode ser um simples tubo de vidro, aberto em ambas as extremidades, ou semelhante a uma bureta. Quando a amostra possui cor, pode-se observar as diferentes zonas coloridas movimentando-se pela extenso da coluna. Estas so recolhidas, separadamente, pela extremidade inferior da coluna cromatogrfica. J em amostras que no possuem cor, recolhem- se uma srie de pequenas quantidades iguais, testando-as quanto presena ou no de substncias dissolvidas atravs do uso de reveladores adequados como luz UV e reveladores qumicos, por exemplo.

Figura 1. Representao da Coluna Cromatogrfica. *

Fonte: DIAS, 2004.

1.1 OBJETIVOS O objetivo desta prtica estudar o efeito da polaridade dos compostos orgnicos, bem como realizar a separao de uma mistura de compostos coloridos por meio de tcnicas cromatogrficas.

2. MATERIAIS E MTODOS 2.1 MATERIAIS

Bquer Algodo Coluna cromatogrfica Funil Vidro relgio Mangueira Papel toalha Tubo de ensaio Basto de vidro

2.2 PRODUTOS E REAGENTES

Hexano Acetato de Etila Acetona Soluo Problema lcool Etlico Silicagel

2.3 PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL Primeiramente iniciou-se a prtica experimental colocando-se um chumao de algodo no interior da coluna cromatogrfica e inseriu-se uma pequena quantidade de silicagel na mesma. O uso do algodo d-se pelo fato de que a silicagel quando suspensa em solvente tende comportar-se como areia, o que prejudicaria a realizao da prtica. Adicionou-se hexano junto slica na coluna cromatogrfica e com uma pequena mangueira deram-se leves batidas para o adsorvente compactar-se. Feito isso, adicionou-se coluna cromatogrfica uma pequena quantidade de uma soluo problema. E deu-se incio ao processo de separao dos constituintes da amostra. O primeiro solvente utilizado foi o hexano, tendo base na sua polaridade. Percebeu-se que no estava ocorrendo a separao, ento resolveu-se aumentar aos poucos a polaridade dos solventes. A principio, adicionou-se uma pequena quantidade de acetato de etila ao hexano, obtendo assim uma mistura de 50% hexano e 50% acetato. Mesmo assim a separao no ocorreu. Usou-se ento acetato puro, e a amostra comeou a aparentar colorao rosada.
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Porm a separao parou de ocorrer nos seguintes tubos de ensaios recolhidos. Sendo assim, passou-se para uma mistura 50% acetona e 50% acetato. No obtendo sucesso no processo, utilizou-se acetona pura, e o lquido apresentou aparncia azulada. Como ltima tentativa usou-se lcool etlico e ainda assim a separao no ocorreu. A substncia avermelhada presente na soluo problema apenas foi carregada pela coluna, porm no conseguiu-se sua separao.

Figura 2. Representao da prtica cromatogrfica. *

* Na Figura 2 apresentado as fotografias do processo experimental seguindo respectivamente a ordem das mudanas de solventes conforme citado acima.

3. RESULTADOS E DISCUSSES

No houve sucesso nos resultados obtidos atravs desta prtica pois a grande massa do que desejvamos detectar na separao ficou impregnada na slica. Porm, no correto afirmar que a prtica deu errada, pois dentro da coluna cromatogrfica houve a separao das substncias. Vale a pena relatar que o clima influenciou a realizao da prtica, pois devido alta temperatura o solvente evaporou na coluna, formando bolhas e subsequentemente rachaduras na slica, prejudicando a prtica. Apesar de ter-se contornado a situao com o auxlio de acetona e bomba a vcuo, este problema pode ter influenciado na falha dos resultados.

Figura 3. Coluna cromatogrfica no final do experimento.

Figura 4. Resultados obtidos do experimento que foram considerados.

4. CONCLUSO A partir da realizao desta prtica pode-se concluir que possvel analisar o comportamento de alguns constituintes em relao a sua polaridade em diversos eluentes. Tambm conclui-se que a separao de mistura de diferentes polaridades por meio da cromatogrfica em coluna eficiente, pois se pode separar completamente os constituintes de uma amostra devido a sua interao com o solvente utilizado.

5. ANEXO 5.1 QUESTIONRIO 1) Compare cromatografia em papel com a cromatografia em camada delgada. Procure explicar diferentes fenmenos fsico-qumicos que reagem os dois processos.
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A cromatografia em papel utiliza dois lquidos; uma fase mvel (eluente) e uma fase estacionaria atuando sobre o papel. A fase mvel sobre por capilaridade arrastando o constituinte que tem mais afinidade, separando-os dos de menos afinidade. J a cromatografia em camada delgada realizada sobre uma placa adsorvente, onde aplicada a amostra e esta ento submetida a um solvente, novamente arrastada por capilaridade no entanto os diferentes constituintes da mistura percorrem a placa de maneiras distintas, sendo possvel assim a separao. 2) Quais os adsorventes que podem ser usados na cromatografia em camada delgada? Quais as caractersticas que eles devem possuir para seu uso nessa tcnica? Os adsorventes utilizados em cromatografia de camada delgada podem ser tambm usados em cromatografia em coluna, sendo eles silicagel, alumina, carbonato de clcio, xido de magnsio, carvo ativado, sacarose, amido de milho... O adsorvente pode ser seco ou suspendido em um solvente adequado, neste caso, deve-se compactar o adsorvente antes de prosseguir a separao, e mantes a coluna na vertical durante todo o processo. 3) Quais os principais eluentes em cromatografia e em que ordem devem ser utilizados caso no se conhece o comportamento da substncia em anlise? Os principais eluentes utilizados so teres de petrleo, ter etlico, clorofrmio, acetato de etila, acetona, etanol, metanol, gua destilada e misturas dos eluentes citados anteriormente. Sua ordem de utilizao deve ocorrer a partir da sua polaridade. Iniciando-se do menos polar para o mais polar. 4) Qual a importncia do adsorvente ser bem compactado antes da introduo da amostra na coluna? A existncia de ar entre as partculas leva formao de canais na coluna, estes alargam as bandas eludas. Por esse motivo importante compactar a camada adsorvente para que a amostra penetre bem. 5) Quais os cuidados que devem ser tomados na escolha do eluente e na quantidade de adsorvente? A escolha do eluente segue os princpios do conhecimento prvio da composio da amostra (em termos de polaridade). Se, a amostra constituda por duas substncias, uma apolar e outra polar, utiliza-se primeiramente um eluente apolar e em seguida um eluente polar. A quantidade de adsorvente utilizada depende da quantidade de amostra a ser separada e do tipo de adsorvente.

6. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS [1] DIAS, Ayres Guimares, COSTA, Marco Antnio da, Et.al. Guia Prtico de Qumica Orgnica, vol 1. RIO DE JANEIRO: Editora Intercincia, 2004, p. 115. [2] SILVA, Bruna Ferreira, SILVA, Larissa Carvalho, Et.al, Cromatografia em Coluna (CC). GOINIA, 2009. (Apostila).
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