FACTORES QUE AFECTAN LA ACTIVIDAD ENZIMTICA

Jos Reverol, Mara Teresa Vsquez, Lianneth Ordoez

Laboratorio de Bioqumica. Departamento de Biologa. Facultad Experimental de Ciencias. Universidad del Zulia. Maracaibo 2013. 16 de Octubre del 2013

RESUMEN METODOLGICO Se estudi el efecto de diversos factores como la concentracin de la enzima, concentracin del sustrato, el tiempo, la temperatura y el pH, sobre la actividad enzimtica y la velocidad de reaccin que esta tuvo. Primeramente se midi el efecto de la concentracin de la enzima, siendo la velocidad de la reaccin proporcional a la concentracin de la enzima, mediante la adicin de perxido de hidrogeno y la enzima en determinado tiempo. Tambin se valor los efectos de concentracin de sustrato con la utilizacin de perxido de hidrogeno, agua, cido sulfrico y la enzima, a algunas se les aadi cido sulfrico una vez ms para detener la actividad enzimtica habiendo pasado 3 minutos. Por otra parte, se valor el tiempo, la temperatura y el pH, como otros factores que afectan la actividad enzimtica. RESULTADOS Tabla 1. Efecto de la concentracin de Enzima Fiola KMnO4 (mL) meq. de H2O2 remanentes 0,9 0,6 0,3 0,3 0,15 0,05 meq. de H2O2 destruidos 0,3 0,6 0,6 0,75 0,85 Actividad enzimtica (meq/min x mL) 0,1 0,4 0,8 1,5 3,4

1 2 3 4 5 6

1,8 1,2 0,6 0,6 0,3 0,1

Grfica 1. Actividad contra mL de enzima

4 3.5 3 Actividad enzimatica 2.5 2 1.5 1 0.5 0 1 1 2 4 6 12 mL de enzima Actividad enzimatica vs mL de enzima

Tabla 2. Efecto de la concentracin de sustrato Fiola KMnO4 mL meq de H2O2 remanentes 1,25 0,5 0,8 0,7 0,9 0,7 0,35 0,1 meq de H2O2 destruidos 0,75 0,1 0,2 0,25 Actividad enzimtica (meq/min)xmL 1 0,13 0,26 0,33

1 2 3 4 5 6 7 8

2,5 1 1,6 1,4 1,8 1,4 0,7 0,2

Grafica 2. meq de H2O2 destruidos contra concentracin de H2O2

Concentracion de sustrato vs meq de sustrato destruidos

0.8 meq de H2O2 destruidos 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0 10 5 2.5 1 Concentracin de H2O2 Concentracion de sustrato vs meq de sustrato destruidos

Tabla 3. Efecto del tiempo Fiola KMnO4 meq de H2O2 remanentes meq de H2O2 destruidos Actividad enzimtica (meq/min) xmL 1,6 1 0,6 0,33

1 2 3 4 5

1,7 0,5 0,2 0,2 0,05

0,85 0,25 0,1 0,1 0,025

0,6 0,75 0,75 0,825

Grfico 3. meq de sustrato destruido vs Tiempo

0.9 0.8 meq de H2O2 destruidos 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0 1.5 3 Tiempo 5 10 meq de sutrato destruido vs Tiempo

Tabla 4. Efecto de la temperatura Fiola KMnO4 mL meq de H2O2 remanentes 0,6 0,5 0,7 0,05 0,75 0,1 0,6 0,25 meq de H2O2 destruidos 0.1 0,65 0,65 0,35 Actividad enzimtica (meq/min)xmL 0,13 0,86 0,86 0,46

1 2 3 4 5 6 7 8

1,2 1 1,4 0,1 1,5 0,2 1,2 0,5

Grfico 4. Actividad contra temperatura

Actividad contra temperatura

1 0.9 0.8 Actividad enzimatica 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0 0 amb. Temperatura 37 45 Actividad contra temperatura

Tabla 5. Efecto del pH Fiola KMnO4 mL meq de H2O2 remanentes 0,85 0,65 0,6 0,25 0,65 0,25 0,5 0,15 meq de H2O2 destruidos 0,2 0,3 0,4 0,3 Actividad enzimtica (meq/min)xmL 0,26 0,4 0,5 0,4

1 2 3 4 5 6 7 8

1,7 1,3 1,2 0,5 1,3 0,5 1 0,3

Grfico 5. Actividad contra pH

Actividad enzimatica vs pH
0.6 0.5 Activivdad enzimatica 0.4 0.3 0.2 0.1 0 3 5 pH 7 9 Actividad enzimatica vs pH

DISCUSIN Para el caso del primer ejercicio se observ el efecto de la concentracin de enzima, donde la velocidad de la reaccin es proporcional a la concentracin de la enzima, esto se ve reflejado en la grfica 1, donde, a la adicin de enzima hay mayor actividad enzimtica. En el segundo ejercicio, se plante trabajar con los efectos de la concentracin del sustrato, en donde, un aumento de sustrato, manteniendo fija la concentracin de enzima, produjo al principio un aumento considerable de la velocidad de la reaccin, pero al seguir aumentando el sustrato, la aceleracin de la velocidad de la reaccin alcanz su velocidad mxima, hasta que finalmente, al hacerse muy elevada la concentracin de sustrato, no se observ mayor cambio en la velocidad. (Ver grfica 2.) Posteriormente, se trabaj con el efecto que tiene el tiempo sobre la actividad enzimtica, tericamente mientras mayor es el tiempo de actuacin de una enzima sobre el sustrato, ms cantidad de sustrato utilizar. Esto fue lo que ocurri en la prctica de laboratorio, como se puede apreciar en el grfico 3. En el cuarto ejemplo de la variabilidad de la actividad enzimtica, se observ el efecto que tiene la temperatura con esta, cuando se ve el pico de actividad

mxima que tiene hasta cierta temperatura la enzima se puede deducir que es el rango de temperatura ideal para ella trabajar sobre el sustrato, sin embargo, al seguir aumentando la temperatura esta se desnaturaliz y comenz el descenso como se puede ver en el grfico 4. Finalmente, el pH del sustrato tiene una influencia grande en la actividad enzimtica, cuando se ve el grfico 5 se puede ver que la actividad enzimtica aumenta cuando se acerca al pH 7 mientras que al llegar a 7 se genera un pico en el cual empieza el descenso de la actividad, sugiriendo que el rango de pH ideal para la actividad enzimtica y la velocidad de catlisis que esta posee sobre el sustrato.