Virusuri

virusuri = particule infecioase cu dimensiuni foarte mici (20300 nm), alctuite dintr-un singur acid nucleic ARNsau ADN protejat de un nveli. NU au- enzime productoare de energie - capacitate de biosintez - nu cresc - nu se divid- nu se nmulesc sunt replicate de o celul gazd pe care o paraziteaz AU doar flux informaional observarea i/sau aprecierea dimensiunii particulei virale prin microscopie elecronic ultrafiltrare ultracentrifugare

Anatomia funcional a virusurilor Genomul viral - reprezentat de o molecul ARN sau ADN - deine informaia necesar replicrii - ADN are cel mai frecvent o structur bicatenar (monocatenar la parvovirusuri), liniar (circular la papovavirusuri i hepadnavirusuri) - Numrul genelor funcie de mrimea virusului - ARN are cel mai frecvent o structur monocatenar (bicatenar la reovirusuri), cu polaritate pozitiv (funcioneaz ca ARNm) (picornaviridae, togaviridae)sau polaritate negativ (are asociat o ARN-polimeraz) (rhabdoviridae, myxoviridae) constituit la unele virusuri din mai multe segmente (ortomixovirusuri, reovirusuri).

Capsida viral - constituit din molecule proteice repetitive codificate de genomul viral - -dup gruparea unitilor structurale helical, n jurul spiralei de acid nucleic (orto-i paramixovirusuri, rabdovirusuri); cubic, icosaedric pe electronomicrografii format din capsomere * pentone (n fiecare vrf al icosaedrului), * hexone (pe feele i muchiile icosaedrului); complex (poxvirusuri)- electronomicrografii nucleu flancat de 2 corpi laterali, nconjurat de o membran fin, anvelop lipoproteic format din tubuli

Funciile capsidei virale

protejeaz acidul nucleic viral confer forma caracteristic virusului fixeaz virusul la receptorii specifici de pe suprafaa celulelor conine determinani antigenici fa de care gazda reacioneaz prin rspuns imun

Anvelopa (peplos)

- prezent la virusuri cu simetrie helical i la unele

virusuri cu simetrie icosaedric deriv din sistemul membranar al celulei gazd (membrana citoplasmtic, membrana nuclear, reticul endoplasmatic); include glicoproteine codificate de genomul viral (peplomere) cu rol de

liganzi la receptori celulari (ex.hemaglutinine) receptori pentru Fc i C3b (la herpesvirusuri) enzime (ex neuraminidaza)

Replicarea virusurilor

proces desfurat numai n celula vie parazitat genomul viral subordoneaz metabolismul energetic i de biosintez al celulei pentru sinteza proteinelor virale i replicarea acidului nucleic viral - metabolismul celular poate fi subordonat total sau poate continua paralel cu sinteza componentelor virale - replicarea parcurge mai multe etape: I- adsorbia - replicarea genomului viral II- penetrarea n celul - biosinteza proteinelor tardive III - decapsidarea V - morfogeneza i eliberarea IV- sinteza componentelor virale virusurilor biosinteza proteinelor precoce

I. Adsorbia -liganzi virali - structuri virale de suprafa (capsidale sau peplomere) se ataeaz la receptori de pe suprafaa celulei. II. Penetrarea ptrunderea virusului n celul prin - translocarea direct a membranei celulare (ex picornavirusuri, papovavirusuri) - endocitoz (majoritatea virusurilor nude) - fuzionarea peplosului cu membrana citoplasmatic (majoritatea virusurilor nvelite). III. Decapsidarea pierderea nveliului proteic viral migrarea acidului nuclei viral - n nucleu, la virusurile ADN (excepie poxvirusurile) - n citoplasm, la virusurile ARN (excepie v.gripale). IV. Sinteza componentelor virale

Biosinteza proteinelor precoce transcripia ARN mesager - la v.ADN d.c. transcrierea unei catene cu participarea ARN-polimerazei celulare - la v.ADN m.c. se sintetizeaz o caten ADN complementar care este transcris n ARNm - la v.ARN(+) genomul viral funcioneaz ca ARNm - la v.ARN(-) genomul este transcris n ARNm de ARN-polimeraza viral - la v.ARN d.c., una din catene este transcris de ctre ARN-polimeraza viral ataarea ARNm la ribozomii celulei gazd - sinteza proteinelor precoce implicate n replicarea acidului nucleic viral. Replicarea acidului nucleic viral virusuri ADN - replicare identic cu a ADN bacterian; - la virusurile mici (parvovirusuri, papovavirusuri) intervine ADNpolimeraza celular; - la virusurile mari (v.herpetice, adenovirusuri, poxvirusuri) particip ADN-polimeraza viral.

 virusuri ARN - la virusuri m.c.(+) este sintetizat o caten ARN (-) cu ajutorul unei polimeraze virale (proteine precoce) pe care sunt transcrise mai multe catene ARN (+) genomice - la virusuri m.c.(-) polimeraza viral produce o caten ARN (+) pe care sunt transcrise mai multe catere ARN (-) - la virusuri ARN d.c. are loc sinteza de catene (+) care funcioneaz ca tipar pentru noi catene (-), restaurnd caracterul b.c. al genomului viral. Sinteza proteinelor tardive sunt proteine structurale la unele virusuri (picornavirusuri, parvovirusuri, retrovirusuri) sunt sintetizate ca precursori macromoleculari, clivai apoi n proteine structurale de ctre proteaze virale. V. Morfogeneza i eliberarea virusurilor asamblarea nucleocapsidelor virale; la virusuri cu simetrie icosaedric este posibil morfogeneza de capside goale (exces de proteine structurale); componente virale acumulate n exces pot genera incluzii intracelulare (intracitoplasmatice sau intranucleare).

VCM: incluzii ochi de bufni

Virusul rabic - corpusculii Babe - Negri (IC acidofile)

eliberarea la virusurile nude are loc, cel mai frecvent, prin liza celulei la virusurile nvelite prin nmugurire n zone ale membranei celulare (citoplasmatice, nucleare, reticul endoplasmatic) unde au fost implantate
glicoproteine virale, cu eliberare prin exocitoz sau prin liz.
Replicarea particular a unor virusuri Retrovirusuri - genomul viral de tip ARN (+) este transcris ntr-o caten ADN cu participarea unei reverstranscriptaze - o polimeraz celular determin sinteza unui pregenom ADN d.c. care se integreaz n genomul celulei gazd - sub efectul unor stimuli, o ARN-polimeraz celular transcrie una din catene n ARN m.c. (+) care funcioneaz att ca ARNm ct i ca genom viral. Virusul hepatitei B - genomul viral este reprezentat de ADN parial d.c. - o ADN-polimeraz viral completeaz dublul helix - replicarea genomului viral are loc cu sinteza unui pregenom ARN care servete ca tipar pentru sinteza ADN parial d.c. cu participarea unei reverstranscriptaze.

Replicarea HIV

Virusuri defective
necesit prezena unui virus ajuttor pentru realizarea ciclului replicativ intracelular - parvovirusuri din genul Dependovirus realizeaz coinfecii cu adenovirusuri; - virusul hepatitei delta realizeaz coinfecii sau suprainfecii cu virusul hepatitei B care i ofer AgHBs.

Genetica viral
variabilitatea genetic poate fi consecina unor mutaii sau recombinri genetice. mutaie - poate s apar prin substituirea unei baze azotate ntrun codon sau prin deleie; - mutani cu modificri fenotipice: mutani condiionat letali
* mutani reci (sunt replicai optim la 250C); * mutani calzi (tolereaz temperaturi peste 370C); * mutani cu scimbarea spectrului de gazd (mai puin viruleni pentru gazda natural);

mutani antigenici; mutani rezisteni la ageni terapeuti antivirali.

recombinare - schimb de material genetic ntre dou genome (o celul coinfectat de dou tulpini) care prezint omologie structural
recombinare clasic (n special la v.ADN); reasortare genomic (la v.ARN cu genom segmentat).

Interaciuni non-genetice ntre virusuri

Interferena viral = inhibarea replicrii unui virus printr-un alt virus. Interferen omolog = este mediat de particule virale defective care interfer cu replicarea virusului omolog complet. Interferen heterolog = infecia cu un virus previne suprainfecia cu alte virusuri prin - competiie pentru receptori - inhibarea penetrrii - inhibarea mecanismelor de sintez intracelular.

Relaia virus celula gazd Celule permisive = realizeaz integral toate etapele ciclului replicativ. Celule semipermisive = replic cantiti mici de virus. Celule nepermisive = replic virusul pn la un anumit stadiu. Infecia celulelor permisive i semipermisive este productiv, difereniat n - citocid - persistent - transformant Infecia celulelor nepermisive este non-productiv i poate fi de tip - letal - latent -transformant - abortiv - lent

Taxonomia viral

Familie include n denumire sufixul -viridae; Subfamilie include n denumire sufixul -virinae; Gen include n denumire sufixul -virus. Criterii de clasificare
Proprietile genomului Replicarea Proprietile virionului Structura antigenic Tropismul celular, tisular i de gazd

Bacteriofagi

- virusuri care paraziteaz bacteriile - au o structur analog virusurilor animale - fagii T, cei mai cunoscui, sunt constituii din

cap nucleocapsida cu simetrie icosaedric avnd

n centru ADN d.c. coada cu simetrie helical, include un canal axial rigid i un manon contractil; plac bazal hexagonal , la fiecare vrf cu cte un croet i o fibr ciclul de replicare n celula bacterian este asemntor cu cel descris la virusurile de interes medical.

Relaia fag celula bacterian

Fag virulent = determin infecie de tip litic (fag vegetativ). Fag temperat = se integreaz n genomul bacterian i se replic sincron cu acesta (profag). Bacterie lizogen = celul n care profagul poate evolua n fag vegetativ sub efectul unor factori din mediu (inducie fagic).

Aplicaii medicale ale bacteriofagilor

lizotiparea (subdivizarea unei specii bacteriene n lizotipuri) identificarea unei specii depistarea unor bacterii patogene n ape de suprafa.

Simetrie binara

Bacteriofagi - ME

Chimioterapice antivirale I analogi nucleozidici II amine sintetice III ali compui

I analogi nucleozidici inhibitori ai polimerazei virale Aciclovir (1983) - herpesvirusuri - Famciclovir - Ganciclovir CMV - Inhibitor al timidinkinazei virale Idoxuridina (1963) topic n keratita herpetic - Inhibitori ai reverstranscriptazei - didanozina - stavudina - zalcitabina - zidovudina (azidotimidina, AZT)

II amine sintetice, peptide sintetice - Amantadina blocheaz decapsidarea VGA+ eliberarea - Rimantadina- derivat de amantadina mai puin toxic - Peptide sintetice inhibitori ai proteazelor virale indinavir - saquinavir - ritonavir - n asociere cu inhibitorii reverstranscriptazei tratamentul infeciei cu HIV III ali compui foscarnet derivat de pirofosfat - inhib ADN-polimeraza virusurilor herpetice+ reverstranscriptaza HIV - asociere sinergic cu aciclovir, ganciclovir, AZT - ribavirin inhib replicarea unor virusuri ARN VRS, gripal A,B, virus Lassa (arenavirus) sau ADN (virusuri herpetice)

Prionii Proteine infecioase, lipsite de secvene nucleotidice capabile s codifice descendenii Sunt izomorfe (izomeri) ale unei proteine normale codificat de o gen identic la mai multe specii i localizat la om pe braul scurt al cromozomului 20 Proteina prionic normal PrPc este ancorat n membrana extern a celulelor tuturor mamiferelor i psrilor, inclusiv la om. Funcia necunoscut. Izomorfa patogen PrPsc fixat pe membrana celular determin leziunile din bolile prionice Bolile prionice ereditare prin linia germinativ - altele se transmit i orizontal intra sau interspecific, asemntor infeciilor

Boli prionice Animale - Scrapie infecioas - Encefalopatia transmisibil a nurcilor - Encefalopatia spongiform bovin BSE boala vacii nebune Umane Kuru Creutzfeld Jacob (CJD) iatrogen sporadic familial Sdr. Gerstmann Straussler Scheincker (GSS) Insomnia fatal familial Boala Alzheimer

infecioas infecioas

infecioas infecioas necunoscut mutaie PrPc mutaie PrPc mutaie PrPc mutaie PrPc

Boala Kuru populaia Fore din Noua Guinee - 1957-1966 cea mai frecvent cauz de deces la femei - a disprut dup renunarea la ritualul canibalic de a mnca creierul rudelor moarte Boala Creutzfeld- Jacob - Forma infecioas iatrogen transplant de esuturi de la donatori infectai- cornee, duramater, timpan - intervenii chirurgicale cu instrumentar contaminat - terapie cu hormoni hipofizari - obiceiuri alimentare evreii din Liban, Israel creier i ochi de oaie inciden crescut a bolii - Forma ereditar mutaie a codonului 178 aspartat-asparagin

Evreii din Libia, Tunisia mutaie a codon 200 de la glutamat la lizin CJD sporadic necunoscut Sindromul Gerstmann Straussler- Scheincker - Toate cazurile sunt ereditare cu variaii ale simptomatologiei funcie de codonii mutaiei -ataxie mutaii de la prolin la leucin, 102 i 105 - Demen alanin la valin, 117 Boala Alzheimer - Cunoscut ca ereditar - 198 - substituia fenilalaninei prin serin - 217 glutamin prin arginin Insomnia fatal familial - Descris la 3 familii italiene cu mutaii n codon 168 -

Istoric - 80 ani controverse privind etiologia bolii scrapie - 1988 Stanley B. Prusiner descoper prionii - 1992 descoperit gena care codific prionii Au fost mai multe ipoteze - 1910 ipoteza infeciei cu un protozoar - Ipoteza unui virus filtrabil 1946 1500 oi vaccinate cu un extract formolat de esut limfoid ovin - Ipoteza bolii ereditare receptivitatea la transmiterea bolii de 100% la capre, la oi 0-80 dup ras S.B. Prusiner ambele ipoteze infecioas/boal genetic Teste biologice pentru infectivitatea prionilor Scrapie reprodus experimental la diferite animale prin injecie de extracte cerebrale de la oi bolnave dup o perioad de incubaie lung oarecii dup 1 an, hamsterii aurii sirieni cu 50% mai receptivi

n creierul de hamster mbogit pentru infeciozitatea scrapie Prusiner a descoperit particule n form de bastonae purttoare de infeciozitate - Prioni d-50nm - ultrastructur neregulat similar amiloizilor, total diferit de structura virusurilor - proteazele le distrug infectivitatea - rezisten extrem la UV cu 254 nm care inactiveaz acizii nucleici Contribuia geneticii moleculare - Descoperirea genei PrPc i a mutaiilor punctiforme din diferiii codoni Rezist la ageni inactivatori ai infeciozitii - 1340C 18-30 min, unele tulpini scrapie rezist 90 min - Deeuri solide autoclavate 2 ore

Rezistena explic transmiterea la vite epidemia de BSE Calea de transmitere fina de oase cu resturi de la oile bolnave de scrapie La om consum de carne infectat chiar prelucrat termic Patogenia - Apariia PrPsc n organism origine endogen mutaii n codonii genei care codific PrPc - origine exogen PrPc se fixeaz pe o gam mai larg de celule dar, leziuni apar acolo unde realizeaz concentraii maxime - creier ntotdeauna - scrapie - i mduva spinrii + ochi Leziunile - plci de amiloid - degenerescen spongiform - glioz - pieredere neuroni - n absena inflamaiei i rspunsuns imun

Simptomatologia declin subacut sau cronic al funciei cognitive demen i/sau motorii (ataxia) Debut 40-70 ani
Diagnostic de laborator - Intravitam imposibil - Postmortem examen histopatologic al creierului Concluzie Prionii difer de toate microorganismele Bolile determinate sunt pseudoinfecii Utilizm termenii caracteristici bolilor infecioase doar pentru c informaiile provin din protocoale experimentale ale virologiei.