EXTRAO E CARACTERIZAO DE ENZIMAS

SANTOS, Joandro Pandilha*

RESUMO
As enzimas so protenas especializadas na catalise de reaes biolgicas. Praticamente todas as reaes que ocorrem no metabolismo celular so catalisadas por enzimas. As enzimas aceleram a velocidade de uma reao pelo fato de diminurem a energia de ativao. Essa velocidade varia dependendo da temperatura, pH, concentrao de substrato e da prpria substncia enzimtica. Esse relatrio trata da ao da enzima envolvendo uma substncia inibidora de enzimas e da ao enzimtica sobre substrato de agua oxigenada. Palavras- chave: Enzimas, Reaes, Velocidade.

INTRODUO Praticamente toda a enorme variedade de reaes bioqumicas que constituem a vida mediada por uma srie de catalisadores biolgicos como

consideravelmente a velocidade das reaes qumicas em sistemas

biolgicos quando comparadas com reaes correspondentes no

catalisadas. Para ser classificada como enzima, uma protena deve2: Apresentar extraordinria eficincia cataltica; Demonstrar alto grau de

importantssimos,

conhecidos

enzimas. As enzimas se diferem dos catalisadores muitos qumicos comuns em As

aspectos

importantes.

principais caractersticas das enzimas so: 1) elevar a velocidade de reaes, 2) maior especificidade de reao (pelos substratos); 3) condies de reaes mais brandas; 4) capacidade de regulao; 5) saturao pelo substrato1. As enzimas so protenas com funo especifica de acelerar reaes qumicas que ocorrem sobre condies termodinmicas.
*

especificidade em relao a seus substratos (reagentes) e a seus produtos; Acelerar a velocidade das reaes em 106 a 1012 vezes mais do que as reaes catalisadas; No ser consumida ou alterada ao participar da catlise; correspondentes no

Elas

aceleram

Acadmico do Curso de (Bacharelado) em Cincias Biolgicas, 4 semestre, Bioqumica II, UNIVERSIDADE FEDERAL DO AMAP - UNIFAP

No alterar o equilbrio qumico das reaes; Ter sua atividade regulada

tridimensional especial dos aminocidos de uma determinada regio da molcula e ao lado desse stio pode haver um segundo stio, chamado stio cataltico ou stio ativo, onde se processa a reao enzimtica2,3. Co-fatores so pequenas

geneticamente ou pelas condies metablicas. A reao catalisada por enzima pode ser esquematizada como segue:

molculas orgnicas ou inorgnicas que

FIGURA 1: Esquema geral da cintica enzimtica.

podem ser necessrias para a funo de uma enzima. No esto ligados da

permanentemente enzima inativa2,4

molcula

enzima, mas, na ausncia deles, a

A temperatura, a variao do pH, a variao na quantidade de enzima e substrato, bem como a utilizao de inibidores, so fatores externos que A molcula sobre qual a enzima atua o substrato (S) que se transforma em produto (P) da reao. Na ausncia da enzima pouco (ou nenhum) formado, mas a presena da mesma, a reao se processa em alta velocidade. Como a maioria das reaes e influenciam na velocidade da reao. Quanto maior a temperatura, maior a velocidade da reao at se atingir a temperatura tima; a partir dela, a atividade volta a diminuir, por

desnaturao da molcula. Em relao ao pH, existe um pH ideal, onde as cargas eltricas da molcula da enzima e, em especial do stio cataltico, est distribuda para a catlise. Quando se

reversvel, os produtos da reao numa direo tornam-se substratos para a reao inversa2, 2. As enzimas so muito

trata de inibidores, muitos tipos de molculas inibem as enzimas e podem agir de forma reversvel ou irreversvel. Quando envolve ligaes no

especficas para os seus substratos, e pode ser relativa a somente um

substrato ou a vrios substratos ao mesmo tempo. Na superfcie da enzima existe um local denominado stio de ligao do substrato, um arranjo

covalentes reversvel, atravs da remoo do inibidor. Em alguns casos as ligaes no covalentes podem ser

irreversveis sob diferentes condies fisiolgicas2,5. J na inibio irreversvel, a ligao molecular covalente. So geralmente encontrados em reaes que apresentam toxinas especficas. OBJETIVOS - Estudar a natureza das enzimas; Reconhecer as principais

250 ml de gua destilada, o liquido liquidificado papel filtro. Em seguida pegaram-se dois tubos de ensaio numerado de 1 a 2, ao tubo 1 foram adicionados 5 ml de liquido filtrado (soluo de enzima) e 2 ml de gua destilada, ao tubo 2, foram adicionados somente 5 ml de gua destilada, logo aps foram adicionados aos 2 tubos 2 ml de reagente de Biureto. Seus resultados foram observados e anotados (Tabela 1). Na segunda etapa da parte experimental utilizaram-se dois tubos de ensaio foi filtrado utilizando

caractersticas das enzimas; - Conhecer a maneira atravs da qual possvel determinar qualitativamente a atividade enzimtica. MATERIAIS E REAGENTES - Pipeta Pasteur; - Pisceta; - Faca - Liquidificador; - Maa; - gua destilada; - gua oxigenada; - Reagente de Biureto. PARTE EXPERIMENTAL Ao inicio da parte experimental foi pego uma maa de tamanho mdio, ao qual foi descascado e cortado em pequenos cubos, e colocada ao liquidificador com

numerados de 3 a 4, ao tubo 3 adicionou-se 5 ml de soluo de soluo de enzima e gua oxigenada ao tubo 4 foram adicionados somente soluo de gua oxigenada. Os tubos foram

observados e seus resultados anotados (Tabela 1).

Tabela 1: Solues e Reagentes

Solues e Reagentes Soluo enzimtica gua destilada Reagente de biureto gua oxigenada

Tubo 1 5 ml 5 ml 2 ml

Tubo 2

Tubo 3 5 ml

Tubo 4

5 ml 2 ml 5 ml 5 ml

RESULTADOS E DISCUSSSO Na primeira etapa da parte experimental ao adicionarmos reagente de Biureto aos dois tubos de ensaio podemos percebe que o tubo 1 que continha soluo enzimtica aps uns dez

quando em contato com determinada substncias, (como no exemplo da agua oxigenada em contato com soluo enzimtica) aumentar a velocidade da reao oxidava e diminuir a energia de ativao. CONSIDERAES FINAIS As observaes em relao extrao e caracterizao de enzimas mostrou-nos que as enzimas so grandes

minutos apresentou em comparao com o liquido filtrado inicialmente, colorao mais clara, pelo fato do reagente de Biureto desacelerar a ao enzimtica. J no segundo tubo no apresentou nem uma reao qumica. O Biureto por desacelerar ou quase inativar a enzima, demonstra uma caracterstica inibidora em relao s enzimas. Na segunda etapa da parte experimental, ao adicionarmos a soluo de enzima ao tubo 3 que continha gua oxigenada, podemos observar aps alguns minutos a formao de uma efervescncia em toda a soluo, essa efervescncia caracteriza gotas de oxignio, indicando que a soluo de enzima por ser um catalisador aumentou a velocidade da reao e a atividade oxidativa da gua oxigenada. J no tubo 4 por no possui enzima catalisadora a velocidade de reao menor se comparada ao primeiro tubo. Como podemos ver acima, as enzimas so protenas com propriedades

catalisadores biolgicos. Elas possuem a capacidade de aumentar a velocidade de uma reao, pois necessitam de menos energia que a reao no catalisada. Existem inibidores

enzimticos, como no caso do Biureto que desaceleram de ou uma inativam a

atividade

enzima.

Demonstrando que cada reao qumica enzimtica depende do meio em que estar atuando para desenvolver ou no sua atividade ou funo catalisadora. REFERNCIAS [1] VOET, D; VOET, J. G. Bioqumica. 3 Ed. Artmed: Porto Alegre, 2006. pp. 366-368 [2] MOTTA, V.T. Bioqumica Bsica Enzimas, 2006. Disponvel em

<http://www.laboratorioautolab.com/inf omed/fulltext/3enzimas.pdf>. em 22/04/2013). (Acesso

catalticas onde possuem capacidade