determinacin de nitritos por espectrofotometria en Vsible

OBJETIVO Determinar la concentracin de nitritos por espectroscopa UV-VIS. Conociendo la tcnica y el manejo atraves de esta practica. FUNDAMENTO: Reaccin del cido sulfanlico en medio cido, en presencia de ion amonio y fenol, que forma con los nitritos un complejo de color amarillo, cuya intensidad de color es proporcional a la concentracin de nitritos. APLICACIONES Agua cuya concentracin en nitritos est comprendida entre 0 y 0,92 mg de NO2- /l MATERIALES, INSTRUMENTOS Y REACTIVOS Denominacin | Campo de medida | Tolerancia | Clase | Marca | Nde serie | Pipeta Aforada | 5mL | 0,030mL | B | Qualicolor | - | Pipeta Aforada | 5mL | 0,015mL | A | Qualicolor | - | Pipeta Aforada | 0,5mL | 0,050mL | A | Alamo | - | Pipeta Aforada | 10mL | 0,040mL | B | Qulicolor | - | Pipeta Aforada | 15mL | 0,020mL | A | Alamo | - | Pipeta Aforada | 20mL | 0,030mL | A | Labbox | - | Micro pipeta | 1000L | 0.7% | - | Nichtpet | 00-NPX2-1000 | Matraz Af.x6 | 50mL | 0,05mL | - | labbox | - | Vaso ppdo | 100mL | - | - | Labbox | - | Vaso ppdo | 250mL | - | - | Labbox | - | Vaso ppdo | 250mL | - | - | Simax | - | Vaso ppdo | 250mL | - | - | Simax | - | Vaso ppdo | 250mL | - | - | Simax | - | Vaso ppdo | 400mL | - | - | Labbox | - | Vaso ppdo | 1000mL | - | - | Labbox | - | Erlenmeyer | 250mL | - | - | Simax | - | Cubeta Espect. | - | - | - | - | - | Pipeteador | - | - | - | - | - | Pipeta pasteur | 1mL | - | - | ICO-3 | - |Denominacin | Rango fotmetrico | Medicin | Ancho de banda espectral | Marca | Espectr.UV-Visible | UV de200-1100nm | A,%T,C | 5nm | GENESYS 5 | Denominacin | Capacidad MAX. | Tolerancia | Nserie | Marca | Balanza anaalitica | 120g | 0,0001g | - | Cobos | Balanza granataria | - | - | - | - |

Reactivo | Formula | Calidad | Conc. | Pictogr. | Peso mol | Eliminacin | Nitrito de sodio | NaNO2 | PRS | 99% | O;T;N | 68,9953 | Q+NH4Cl* | Nitrito de sodio | NaNO2 | CODEX | 97% | O;T;N | 68,9953 | Q+NH4Cl* | Acido muriatico | HCl | PA | 37% | T;C | 36,43 | neutralizar | Acido sulfanirco | C6H7NO3S | - | - | Xi | 173,2 | neutralizar | Fenol cristalizado | C6H6O | PS | 99% | T;C;Xn | 94,11 | Residuo.txico | Hidroxido de amonio | NH4OH | PA | 30% | C;N | 35,04 | Residuo.txico | Agua | H2O | desioniz | - | - | 18 | normal | *Se elimina calentado resto del NaNO2 agregando un poco de NH4Cl hasta su descomposcin, tambin la mezcla de acido sulfanilco hace descomponer la composicin. PREPARACIONES DE LOS REACTIVOS: 30/01/2012 Prepararon G1,G2 Y G3 Reactivo de Zambelli: diluir 260 ml de HCl del 37% en 500 ml de agua destilada. Aadir 5,0 g de cido sulfanlico y 7,5 g de fenol cristalizado. Calentar suavemente hasta disolucin. Dejar enfriar y aadir 135 g de cloruro de amonio. Cuando todo est disuelto, completar hasta un litro en un matraz aforado (preparar la cantidad que se vaya a usar). Amoniaco concentrado. Solucin patrn A de nitritos: disolver 0,3450 g de NaNO2 en agua destilada hasta un litro en un matraz aforado (1 ml equivale a 0,230 mg de NO2-) Esta solucin se conserva un mes en el refrigerador, si se aade 1 ml de cloroformo. En caso contrario, deber prepararse cada vez que se vaya a usar. Solucin patrn B de nitritos: tomar 1 ml de la solucin patrn A y diluir a 100 ml con agua destilada. (1ml equivale a 0,0023 mg de NO2-) Procedimiento: Curva patrn: 1. Tomar 0, 1, 5, 10, 15 y 20 ml de la solucin B en seis matraces aforados de 50 ml y enrasar con agua destilada. 2. Pasar los patrones a un vaso y aadir con pipeta 2 ml del reactivo de Zambelli, mezclar bien y esperar 10 minutos. 3. A continuacin aadir con pipeta 2 ml del amoniaco concentrado, homogeneizar bien y esperar 5 minutos. 4. Llevar las disoluciones preparadas al espectrofotmetro y leer la absorbancia a 425 nm en cubetas de 1 cm de paso de luz, calibrando previamente el cero de absorbancia con la muestra en blanco. El color es estable 24 horas.

Medida de la muestra problema. Tomar entre 10 y 20 ml de muestra problema y aforar a 50 ml. Pasar a un vaso, y operar exactamente igual que con los patrones. Hallar la concentracin de ion nitrito en la muestra, a partir de la curva patrn.

CLCULOS PREVIOS: - Reactivo de Zambelli: Preparar 200ml para toda la clase Cantidades de cada componente: Reactivos | Cantidad g/mL | agua | 100mL | Acido clorhidrico al 37% | 52mL | Acido sulfanilico | 1g | Fenol crsitalizado | 1,5g | Calentar suavemente hasta su disoluciny dejar enfriar | Cloruro de amonio | 27g | Con el Agua Enrasar hasta 200mL | * Patrn A de nitritos: Preparar 100 ml para compartir entre dos grupos. No aadir cloroformo. g/NaNO2 pesado | Peso molecular del NaNO2 | Moles de NaNO2 | 0,3468g | 68,9953g/mol | 5,0264.10-4 | Moles de NO2- | Peso molecular de NO2- | Gramos de NO2- | 5,0264.10-4 | 46,01g/mol | 0,2312g | Concentracin NaNO2/ppm | Concentracin NO2/ppm | 346,8000ppm | 201,11074ppm | Patrn B de nitritos: Preparar 500 ml para compartir entre dos grupos V/mL de Patrn A tomado | VF/mL de patrn B | Concetracin inicial | Concentracin final | 5mL | 500mL | 346,8ppm/NaNO2 | 3,468ppmNaNO2 | Concentracin NO2- | Concentracin NO2- aplicando 99% de NaNO2 | 2,3127ppm | 2,2895ppm | - Concentracin de NO2- en el patn A: 201,11074ppm - Concentracin de NO2- en el patn B:2,2895ppm DATOS EXPERIMENTALES: Concentracin de patrones en ml/L de NO2- | Absorbancia a 425 nm | 0|0| 0,04578 | 0,019 |

0,2289 | 0,116 | 0,4578 | 0,184 | 0,6867 | 0,303 | 0,9156 | 0,405 | Muestra | 0,099 | Dilucin realizada a la muestra: 360,4ppm ; ; 233,125*V=0*50; V=0mL 233,125*V=0,9156*50; V=0,1964mL como no hay materiales volumetricoa esa cantidad, excepto una micropipeta de un rango de 200L, tuvimos que realizar una serie de dilucionescogimos 1mL y lo llevamos a 100mL y despues de esa dislucin cogimos 5mL y lo pasamos a 50mL REPRESENTACIN GRAFICA: ABS | ppm | 0|0| 0,019 | 0,04578 | 0,116 | 0,22890 | 0,184* | 0,45780* | 0,303 | 0,68670 | 0,405 | 0,91560 | Representacin A /Concentracin: *suplimido en la grafica para mejorar la recta de calibracin. MAX. ABS | Ecuacin de la Recta | R2 | ABS/Dilucin de muestra | 425nm | y=0,44169086199x+0,00382959049 | 0,998 | 0,099nm | CALCULOS REALIZADOS Segn la ecuacin de la recta me d una concentracin de 0,232808961ppm. Pero esta cantidad est dentro de las diluciones realizadas. Es decir nosotros hemos tomado 1mL de la muestra original y se enras a 50mL y a partir de esa disolucin, tomamos un volumen de 5mL llevando a un volumen final de 50mL y de esa diluciones analizamos las concentraciones. Por lo tanto tendremos que saber la concentracin de la muestra original. Para ello se realiza retroceso de diluciones: Ya tenemos la concetracin en ppm en la muestra original. Finalmente para conocer la pureza del Nitrito tenemos que dividir la concetracin obtenida es decir 232,808961ppm entre los gramos pesados de nitritos expresada en ppm al 97%. Y finalmente multiplicarlo por 100. Pero

para realizar los calculos las unidades ppm, pasaremos al g/L: % ~ 99,86% RESULTADO FINAL ------------------------------------------------Concentracin /Nitro:232,8089ppm ------------------------------------------------Riqueza: 99,86% Segn el protocolo seguido y los caculos realizados. Nos da una concenctracin de nitritos 232,8089ppm con su error relativo a 0,14%. Y una riqueza de 99,86% Este porcentaje comparando con la purza inicial a variado 2,86%. Esto debe ser por los calculos de las concetraciones de nitrtos realizados ya que esto vari ligeramente un error de 0,14% y esto puede que sea por los errores sistematicos cometidos en el laboratorio o incluso, en los arrastres decimales, durante el proceso de calculos matemticos. Tambin puede que la muestra nitrito de sodio, halla cogido un poco de humedad. Pero esta afirmacin no es segura y es necesrario realizar un comapracin interlaboratrio para conseguir una estadistica general y su posterior determinacin de humedad. como una prueba preconfirmativa. INTERPRETACIN DE RESULTADOS: Segn el origen de las aguas, su contenido en nitritos vara, y el mtodo utilizado para su deteminacion es distinto. As para aguas con contenido en NO2 superior a 50ppm se emplea el mtodo del reactivo de zambelli. Para contenidos inferiores a 50 ppm el mtod de la sulfalamida presenta mayor sensibilidad. En esta practica preparamos la muestra cuya concentracn de NO2 superior a 50ppm. Por esta razn elegimos el reacativo zambelli para someter en el analisis de nitritos. El reactivo zambelli. Consiste en la reaccin con acido sulfanilico en presencia de amonioy fenol, formando un compuesto de color amarillo-naranjado. La intensidad de la coloracin es proporcional a la cantidad de nitritos existente, y midiendo la intensidad de la coloracin por espectrofotometra visible a una longitud de onda 425nm determinaremos la concentracin de nitritos existente en la muestra. Por lo tanto se trata den un mtodo sensible. Otro mtodo recomendado es el de la sulfalanida o reaccion de griess. Se hace reaccionar la muestra con sulfalanida en medio cido. Su posterior trataminto con N-L- naftil-etilen diamina y deternminacin espectrofotmetrica del color desarrollado a 543nm. Es mas sensible que la del anterior. Su reaccion se fundamenta en diazotacin. En presencia de medio acido. Amina aromatica primaria como sulfaramida reacciona con el azoderivado como N-L- naftil-etilen diamina o -Naftilamina y se acopla en ella formando diazotacin de color caracteristico naranja-rojizo podiendo asi medir la absorvancia con mas sensibilidad que la del zambelli.

OBSERVACIN Utilizamos el reactivo zambelli, preparado por el grupo de la tarde Reactivo zambelli | Fecha | 25/01/2012 | Tecnico/a | Javier y Marta | Curso | 2 LACC B | ANEXO Composicin de los Nitritos Los nitritos son sales o steres del cido nitroso (HNO2). En los nitritos inorgnicos se encuentra el anin NO2. En la naturaleza los nitritos se forman por oxidacin biolgica delas

aminas y del amonaco o por reduccin del nitrato en condiciones anaerbicas. En la industria se pueden obtener al disolver N2O3 en disoluciones bsicas. Los nitritos forman parte de muchas forrmulaciones de sales para salar carnes, como nitrito potsico y nitrito sdico. Cobran importancia por su capacidad de mantener un color rojizo deseado en la materia prima ya que reaccionan con la hemoglobina. Sin embargo la concentracin debe ser baja ya que hay sospechas que favorecen el desarrollo de cncer. Adems por su interaccin con la hemoglobina resultan txicos. Pero en otras fuentes de informacin dicen que el nitrito sodico no tiene tanta toxicidad y solo esto ser cancerigeno al reaccionar a un grupo de aminoacido de una proteina formando nitrosamina*considerando compuesto daino para nuestra salud. *Nitrosamina: son compuestos orgnicos que generalmente se originan debido a la reaccin de una amina secundaria con nitritos en un medio muy cido (por ejemplo, dentro del estmago). Las temperaturas moderadamente altas tambin pueden desencadenar la formacin de nitrosaminas. Son productos carcinognicos (inductores de tumores cancergenos) y habitualmente son la causa del cncer de esfago. Las temperaturas relativamente altas, como las ocasionadas al frer, pueden desencadenar la formacin de nitrosaminas. Ciertas formas de cocinar los alimentos (exceso de frituras en la dieta) pueden ser responsables de miles de casos de cncer de colon cada ao en todo el mundo.