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CENTRO NACIONAL DE METROLOGA
GUA TCNICA SOBRE TRAZABILIDAD E INCERTIDUMBRE EN LAS MEDICIONES ANALTICAS QUE EMPLEAN LA TCNICA DE ESPECTROFOTOMETRA DE ULTRAVIOLETA-VISIBLE
Mxico, Mayo de 2004

Derechos reservados
Gua Tcnica sobre Trazabilidad e Incertidumbre en las Mediciones Analticas que emplea la tcnica de Espectrofotometra de Ultravioleta-Visible 2004-06-28 Fecha de emisin 2004-05-28, fecha de entrada en vigor 2005-01-03, revisin 00. 1 de 75
PRESENTACIN
Durante la evaluacin de la competencia tcnica de los laboratorios de calibracin y de ensayo, la demostracin de la trazabilidad y la estimacin de la incertidumbre de las mediciones, requiere la aplicacin de criterios tcnicos uniformes y consistentes. Con el propsito de asegurar la uniformidad y consistencia de los criterios tcnicos en la evaluacin de la trazabilidad y la incertidumbre de las mediciones, la entidad mexicana de acreditacin, a. c., solicit al Centro Nacional de Metrologa que encabezara un programa de elaboracin de Guas Tcnicas de Trazabilidad e Incertidumbre de las Mediciones. Los Subcomits de los Laboratorios de Calibracin y de Ensayo se incorporan a este programa y su participacin est orientada a transmitir sus conocimientos y experiencias tcnicas en la puesta en prctica de las Polticas de Trazabilidad y de Incertidumbre establecidas por ema, mediante el consenso de sus grupos tcnicos de apoyo. La incorporacin de estos conocimientos y experiencias a las Guas, las constituyen en referencias tcnicas para usarse en la evaluacin de la competencia tcnica de los laboratorios de calibracin y ensayo. En este programa, el CENAM se ocupa, entre otras actividades, de coordinar el programa de las Guas Tcnicas; proponer criterios tcnicos sobre la materia; validar los documentos producidos; procurar que todas las opiniones pertinentes sean apropiadamente consideradas en los documentos; apoyar la elaboracin de las Guas con eventos de capacitacin; asegurar la consistencia de las Guas con los documentos de referencia indicados al final de este documento.
Gua Tcnica sobre Trazabilidad e Incertidumbre en las Mediciones Analticas que emplea la tcnica de Espectrofotometra de Ultravioleta-Visible 2004-06-28 Fecha de emisin 2004-05-28, fecha de entrada en vigor 2005-01-03, revisin 00.
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La elaboracin de las Guas est vinculada con la responsabilidad que comparten mutuamente los laboratorios acreditados de calibracin y de ensayo, de ofrecer servicios con validez tcnica en el marco de la evaluacin de la conformidad. La calidad de estos servicios se apoya en la confiabilidad y uniformidad de las mediciones, cuyo fundamento est establecido en la trazabilidad y en la incertidumbre de las mismas. Los que ejercitan la evaluacin de la competencia tcnica de los laboratorios, as como los que realizan la prctica rutinaria de los servicios acreditados de calibracin y ensayo, encontrarn en las Guas una referencia tcnica de apoyo para el aseguramiento de las mediciones. Las Guas Tcnicas de Trazabilidad e Incertidumbre de las Mediciones no reemplazan a los documentos de referencia en que se fundamentan las polticas de trazabilidad e incertidumbre de ema. Las Guas aportan criterios tcnicos que servirn de apoyo a la aplicacin de la norma NMX-EC-17025-IMNC-2000. La consistencia de las Guas con esta norma y con los dems documentos de referencia, permitir conseguir el propsito de asegurar la confiabilidad de la evaluacin de la conformidad por parte de los laboratorios de calibracin y ensayo.
Dr. Hctor O. Nava Jaimes Director General Centro Nacional de Metrologa
Mara Isabel Lpez Martnez Directora Ejecutiva

entidad mexicana de acreditacin, a.c.
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Grupo de Trabajo que particip en la elaboracin de esta Gua:

AGUIAR MEUGNIOT Ricardo, MOVILAB, S.A. DE C.V. AGUILAR MOLINA Rosala, IMSS. LVAREZ TAPIA Rubn, LABORATORIO SAS BECERRIL SANTA CRUZ Silvia, AUBER Y ASOCIADOS, S.A. DE C.V. BONILLA LPEZ David, SENASICA-SAGARPA CORTS COLN Roco. E. ESPARZA DE LEN Mara Griselda, ON-SITE ANALTICA DE MXICO, S.A. DE C.V. ESPINOSA SALAS Eva E., PEMEX Refinacin. ESPINOSA RODRGUEZ Irene. GARCA GMEZ Ma. De Lourdes, LABORATORIO DE CALIDAD QUMICA VERACRUZANA S.C. GARZA ULLOA Humberto Jess, ALS-INDEQUIM, S.A. DE C.V. HERNNDEZ RIVERA Rosalba, CIDESI LPEZ AGUILERA CRISTINA. MEJA SNCHEZ Dimas, SENASICA-SAGARPA MONTANTE L. Miriam E, CFPPNL Laboratorio Central Regional de Monterrey MORENO RAMREZ Ma. Genoveva, CENAM MURAIRA MARTNEZ Luca. CFPPNL Laboratorio Central Regional de Monterrey
ROSAS GARCA Eva, entidad mexicana de acreditacin a.c. SALDAA SCHELESKE Juan Francisco. SNCHEZ MEDINA Mara Esther, PEMEX Refinacin. SEGOVIANO REGALADO Francisco, CENAM SILVA BALDERAS Ma. Del Carmen, PEMEX Refinacin. TAPIA HERNNDEZ Alfredo Marcos. USTARAN CERVANTES Juan Ignacio, LABORATORIOS ABC QUMICA, INVESTIGACIN Y ANLISIS, S.A. DE C.V. VZQUEZ LOYA Ariadna, LABORATORIO SAS.
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NDICE
Pgina PRESENTACIN...2 GRUPO DE TRABAJO QUE PARTICIP EN LA ELABORACIN.....4 NDICE....6 1. PROPSITO DE LA GUA TCNICA ............................................................................ 7 2. ALCANCE DE LA GUA TCNICA ............................................................................... 8 3. MENSURANDO .............................................................................................................. 10 4. MTODO Y/O SISTEMA DE MEDICIN.................................................................... 11 5. CONFIRMACIN METROLGICA Y CALIFICACIN DE EQUIPOS.................... 14 6. TRAZABILIDAD DE LA MEDICIN........................................................................... 17 7. INCERTIDUMBRE DE MEDICIN .............................................................................. 21 8. VALIDACIN DE MTODOS ...................................................................................... 23 9. BUENAS PRCTICAS DE LABORATORIO ............................................................... 25 10. BIBLIOGRAFA ............................................................................................................ 26 11. AGRADECIMIENTOS...................................................................................................27 12. ANEXOS ........................................................................................................................ 27
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1. PROPSITO DE LA GUA TCNICA

Las medidas o resultados de medicin, son caracterizados por su trazabilidad y por un valor estimado de su incertidumbre. La confiabilidad del resultado de una medicin es el factor de mayor importancia para la toma de decisiones de los usuarios de este resultado. En el marco de la evaluacin de la conformidad, se entiende que el resultado de un ensayo es una declaracin de conformidad o no-conformidad con el requisito establecido por una norma. Este resultado puede estar soportado por: a) el examen directo de un atributo; b) la conclusin sobre un atributo a partir de resultados de medicin; o, c) la realizacin directa de mediciones. El ejercicio de la calibracin de instrumentos, patrones de medicin y materiales de referencia constituyen un elemento fundamental en la tarea de extender la trazabilidad de las mediciones, que inicia en los patrones nacionales de medida para llegar a mltiples usuarios. En las actividades de la evaluacin de la conformidad, los Institutos Nacionales de Metrologa, los Laboratorios Primarios y los Laboratorios acreditados de calibracin tienen la responsabilidad de extender la trazabilidad de las mediciones a otros usuarios. Por su parte, los laboratorios acreditados de ensayos, apoyndose en la confiabilidad de las mediciones, son responsables de la evaluacin de la conformidad de productos y servicios respecto de normas y documentos de referencia, asegurando de esta manera, la diseminacin de la trazabilidad de las mediciones. Con el objetivo de que la evaluacin de la conformidad sea realizada por estos laboratorios con un mismo nivel de rigor tcnico, se ha considerado elaborar la documentacin que permita homologar este nivel. Estos documentos se han llamado Guas Tcnicas sobre Trazabilidad e Incertidumbre en las Mediciones Analticas. El propsito de esta Gua Tcnica es establecer los criterios y requisitos en la aplicacin de la tcnica de medicin de espectrofotometra ultravioleta visible, para lograr medidas con incertidumbre de medicin y trazabilidad confiables. La Gua Tcnica sobre Trazabilidad e Incertidumbre en las Mediciones Qumicas que emplea la tcnica de espectrofotometra ultravioleta visible no reemplaza ni total, ni parcialmente, a los documentos de referencia en que se fundamentan las polticas de trazabilidad e incertidumbre de la ema. La aportacin de criterios tcnicos de esta Gua especfica, sirven de apoyo en la aplicacin de la norma NMX-17025-IMNC-2000[2]. La consistencia de esta Gua con esta norma y con los dems documentos de referencia, apoyan
a conseguir el propsito de asegurar la confiabilidad de la evaluacin de la conformidad por parte de los laboratorios de ensayo, en lo concerniente a trazabilidad e incertidumbre. Los criterios descritos en esta Gua Tcnica sern aplicados por:
a) Los evaluadores de laboratorios de ensayos que participan en el proceso de evaluacin y acreditacin de la entidad mexicana de acreditacin, a.c.
b) Los laboratorios de ensayo acreditados en procesos de continuacin a la acreditacin inicial (Renovacin de la Acreditacin). c) Los laboratorios de ensayos en preparacin para ser acreditados. d) Los interesados en iniciar un laboratorio de ensayos.
2. ALCANCE DE LA GUA TCNICA

Esta Gua Tcnica es aplicable para las mediciones en espectrofotometra ultravioleta visible la cual se describe a continuacin. 2.1. Espectrofotometra de ultravioleta visible. La espectrofotometra de ultravioleta -visible es una tcnica de medicin de concentracin de masa de elementos y compuestos (especies) qumicos (anlisis cuantitativo), cuyo principio: Es la interaccin entre la energa electromagntica con la materia. En forma ms especfica la espectrofotometra ultravioleta -visible se fundamenta en medir la radiacin monocromtica absorbida por un elemento molcula causante de desplazamientos electrnicos a capas superiores, estas transiciones determinan la regin del espectro en la que tiene lugar la absorcin. La figura 1 muestra la interaccin de la radiacin con la materia.
Radiacin policromtica Materia Espectro de absorcin
Figura 1: Interaccin de la radiacin con la materia. La ley fundamental en la que se basan los mtodos espectrofotomtricos es la de BouguerBeer, Lambert y Beer y establece:
a) La relacin entre la intensidad de la luz transmitida o energa radiante I y la energa radiante incidente I0 es una funcin del espesor de la celda b a travs del medio absorbente, de acuerdo a: = abc donde: =absorbancia b = espesor de la celda a =absortividad c = concentracin b) La cantidad de energa electromagntica monocromtica absorbida por un elemento es directamente proporcional a la concentracin de la(s) especie(s) que absorbe(n) y a la longitud de la trayectoria de la muestra para un conjunto de condiciones instrumentales establecidas. si = log(I0/I) donde: = absorbancia
entonces T = ( I/ I0) donde: T = transmitancia = -log T El intervalo de longitudes de onda consideradas para la tcnica de espectrofotometra de ultravioleta-visible son: 1. De 190 a 326 nm longitud de onda de la radiacin generada por lmpara de deuterio para la regin de ultravioleta 2. De 326 a 1100 nm longitud de onda de la radiacin generada por lmpara de tungsteno para la regin del visible. Los equipos comnmente utilizados en las tcnicas analticas de espectrofotometra son los espectrofotmetros y los fotocolormetros o fotmetros. Los espectrofotmetros son equipos que tienen en su sistema un monocromador que permite la seleccin de la longitud de onda con una alta resolucin. Un fotocolormetro a diferencia del espectrofotmetro utiliza slo sistemas de filtros para seleccionar un intervalo de longitudes de onda con una menor resolucin que el espectrofotmetro. Los componentes principales de un espectrofotmetro se muestran en la figura 2.
Amplificador y registrador y/o computadora
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Fuente de energa
Monocromador
Compartimiento de muestra
Detector
Figura 2: Diagrama de los principales componentes de un espectrofotmetro.
Existen varias formas para introducir la muestra al espectrofotmetro ultravioleta visible, entre las ms usuales se encuentran: Manual: Para esta operacin son utilizadas celdas de vidrio o de cuarzo (dependiendo de la longitud de onda que indica el mtodo) donde se coloca la muestra y sta a su vez se introduce en un compartimiento especfico del espectrofotmetro. El espesor de las celdas utilizadas comnmente es de un cm, sin embargo, es factible contar con espesores hasta de 10 cm de espesor, teniendo influencia directa en la cantidad de luz absorbida por la muestra. Flujo continuo: Los espectrofotmetros tambin cuentan con bombas peristlticas para la inyeccin de flujo continuo de muestras, sin embargo, stas slo son para facilitar la introduccin de la muestra que finalmente llega a una celda de vidrio o cuarzo que podr tener caractersticas similares a las mencionadas en el prrafo anterior.
3. MENSURANDO
Un ejemplo de mensurando que puede ser medido a travs de la tcnica de medicin de espectrofotometra ultravioleta - visible se describe en la Tabla de trazabilidad de las Mediciones Analticas de los mtodos de ensayo, Anexo 1. Los evaluadores deben solicitar a los laboratorios la identificacin clara y precisa del (los) mensurando(s) sujeto(s) al alcance de la acreditacin, incluidos en los Mtodos de Medicin que utiliza la Tcnica de Medicin objeto de esta gua, empleando el formato de la tabla del Anexo 1. En la elaboracin de los informes de resultados de ensayo, en caso de que los mtodos de ensayo o los clientes requieran la expresin del mensurando en unidades diferentes a las del SI, se debe reportar el resultado en las Unidades SI [3] y a su vez en las unidades equivalentes como parte del Informe de Resultados Ejemplo, X mg/kg (Y libras/barriles). Para mayor informacin ver captulo I, artculos 5 y 6 de la Ley Federal sobre Metrologa y Normalizacin (LFMN) y la NOM 008 SCFI 2001.
Ver Glosario de trminos (Anexo 2) para las definiciones correspondientes. 3.1 Intervalo de trabajo de los mtodos de medicin Los evaluadores deben verificar los intervalos de trabajo de los mtodos de medicin que emplea la tcnica de espectrofotometra de Ultravioleta -Visible, solicitando la documentacin que proporcione evidencia de la determinacin del intervalo de trabajo de los mtodos de medicin por parte del laboratorio, ste debe estar basado en la validacin parcial total del mtodo y debe ser coherente con la aplicacin del resultado del ensayo (ver Anexo 2, Glosario de Trminos para las definiciones correspondientes). El intervalo de trabajo de los mtodos de medicin debe tomar en cuenta los lmites mximos permisibles o las especificaciones de la Norma a la que se evale su conformidad, las especificaciones de procesos que se estn evaluando o los requerimientos de los clientes del laboratorio, los cuales idealmente deben estar en la seccin media del intervalo de trabajo. Por ejemplo: Si el limite mximo permisible para cianuros en aguas residuales es de 0,07 mg/L, el intervalo de trabajo ideal es de 0,01 a 1 mg/L 3.2 Incertidumbre Los evaluadores deben verificar que la estimacin de incertidumbre de los mtodos de medicin que emplea la tcnica de espectrofotometra de Ultravioleta -Visible, solicitando la documentacin que proporcione evidencia de la estimacin de incertidumbre por parte del laboratorio, basndose en lo que se estipula en la seccin 7 de esta Gua Tcnica. Para el caso de las acreditaciones iniciales, ampliaciones o actualizaciones de mtodos de ensayo renovaciones hacia la NMX-EC-17025-IMNC-2000[2], el laboratorio deber iniciar su proceso de estimacin de incertidumbre en la validacin parcial del mtodo y tener un plan de implantacin de acuerdo al captulo 4 inciso 4.2.3 de las Polticas Referentes a la Trazabilidad e incertidumbre de mediciones de la ema, para cuantificar todos aquellos componentes de incertidumbre que contribuyan significativamente a la incertidumbre final de la medicin. Esto ltimo debe ser realizado segn el punto 7 de esta gua.
4. MTODO Y/O SISTEMA DE MEDICIN

Ver definiciones de estos conceptos en el captulo de Glosario de Trminos (Anexo 2).
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4.1 Sistema de Medicin El evaluador debe solicitar una descripcin suficiente de los elementos del sistema de medicin por espectrofotometra ultravioleta -visible que influyan sobre la trazabilidad y el valor de la incertidumbre de la medicin. Ejemplos de los componentes del Sistema de medicin para cromo hexavalente en agua residual: Espectrofotmetro ultravioleta-visible. Balanza analtica calibrada Material volumtrico calibrado Materiales de Referencia Certificados Reactivo difenilcarbazida Ver ejemplo en la tabla de Trazabilidad de las Mediciones Analticas (Anexo 1) para un mtodo de ensayo (prueba) que se requiere acreditar. 4.2 Mtodo de Medicin Ver definiciones de estos conceptos en el Glosario de Trminos (Anexo 2). 4.3 Procedimiento de medicin. El evaluador debe verificar que los procedimientos de medicin (procedimientos internos, instructivos, protocolos, entre otros.) estn conformes con las especificaciones de desempeo de los mtodos de medicin del alcance de la acreditacin. Nota: Para los mtodos propios ver capitulo de validacin. Los aspectos ms comunes dentro de las etapas del procedimiento de medicin que tienen efecto en la trazabilidad y en la incertidumbre de las mediciones cuando se emplea la tcnica de espectrofotometra de ultravioleta - visible son: Etapa de submuestreo (toma de la muestra para anlisis en el laboratorio) 1. Balanza 2. Material volumtrico Etapa de preparacin de la muestra
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3. Temperatura de reaccin (cuando aplique) por ejemplo: nitratos. 4. Temperatura ambiente (con efecto en el volumen de la muestra) 5. Calidad (pureza) de los reactivos 6. Sistemas digestores (para los mtodos que aplique) 7. Sistemas de extraccin (cuando aplique, ejemplo: mtodo de SAAM, Fenoles) 8. Material volumtrico Etapa de medicin 12. Materiales de Referencia Certificados (MRC) 13. Controles de calidad, en caso aplicable (blancos, muestras de control de calidad, duplicadas, adicionadas, replicas, etc). 14. Curva de calibracin (material volumtrico, algoritmo empleado en la calibracin) 15. Confirmacin metrolgica de balanzas y dems instrumentos en donde aplique (Ver capitulo 5 de esta Gua). 16. Calificacin de Equipos e Instrumentos de Medicin Analtica (CEIMA) donde aplique (Ver capitulo 5 de esta Gua). Las magnitudes de influencia y las fuentes de incertidumbre se detallan en el captulo 7 de esta Gua Tcnica y en la Tabla de Trazabilidad de las Mediciones Analticas (Anexo 1). El evaluador debe solicitar evidencia de como el laboratorio realiza la evaluacin de los blancos de reactivos para determinar si se deben restar de los valores de las muestras o se deben utilizar como criterios de aceptacin y rechazo de los lotes analticos. Dicha interpretacin depende del mtodo de ensayo que se utilice y debe de estar fundamentado en dicho mtodo o si no est explicito en el mtodo, no se deben restar los blancos de reactivos. 4.4 Competencia Tcnica del Analista El evaluador debe solicitar los registros sobre la aptitud tcnica (anteriormente llamada Prueba Inicial de Desempeo del Analista) que incluyan al menos datos sobre su sesgo, repetibilidad, recuperacin, lmite de cuantificacin, lmite de deteccin si aplica al mtodo, recuperacin y adicionalmente si es posible, los resultados de su participacin en pruebas intralaboratorio o interlaboratorio. El evaluador debe solicitar al laboratorio los registros que demuestran la competencia tcnica de todos y cada uno de los analistas que realizan la medicin y los criterios de aceptacin y rechazo as como las evidencias de los resultados obtenidos de los analistas, basados en las especificaciones del mtodo. En caso de que el mtodo no cuente con dichas especificaciones los criterios de aceptacin o rechazo debern estar sustentados en una fuente bibliogrfica reconocida.
5. CONFIRMACIN METROLGICA Y CALIFICACIN DE EQUIPOS

En la prctica, la seleccin de un instrumento de medicin se inicia delimitando su uso previsto y definiendo las caractersticas metrolgicas requeridas para obtener mediciones confiables. Se selecciona entonces un instrumento de medicin, mediante la comparacin de estas caractersticas metrolgicas y las declaraciones del fabricante. Es importante que los instrumentos de medicin se mantengan bajo control, con la finalidad de evaluar su desempeo y cumplir con los requisitos de la NMX-EC-17025-IMNC-2000[2], que requieren a los laboratorios de ensayo la evidencia de que los instrumentos cumplen con el propsito de uso establecido, con un estado de mantenimiento adecuado y calibrados a patrones nacionales o internacionales, esto con la finalidad de demostrar la validez de sus resultados de medicin. La presentacin de evidencia se realiza mediante los resultados de los procesos de la Confirmacin Metrolgica (CM)[6] y la Calificacin de Equipo de Instrumentos Analticos (CEIMA)[7]. El proceso de CM se aplica a los instrumentos que se utilizan en mediciones fsicas y que se calibran externamente por medio de laboratorios de calibracin acreditados, este proceso evidencia que el equipo es adecuado al uso propuesto. El proceso de CEIMA se debe aplicar a todos los instrumentos de medicin analtica. 5.1 Confirmacin Metrolgica (CM) Las caractersticas metrolgicas del equipo de medicin (CMEM) son factores que contribuyen a la incertidumbre de la medicin. Las CMEM permiten realizar la comparacin directa con los Requisitos Metrolgicos del Cliente1 (RMC) para establecer la Confirmacin Metrolgica (CM). Los RMC en este sentido se refieren normalmente a los requerimientos del mtodo de ensayo acreditado para satisfacer las necesidades del cliente del laboratorio, en cuanto al desempeo y especificaciones de los equipos a utilizarse. Ver definiciones correspondientes a la confirmacin metrolgica en el Glosario de Trminos (Anexo 2).
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El evaluador debe solicitar la documentacin que contenga los requisitos metrolgicos del cliente (RMC) considerados en el proceso de CM. Ejemplo de algunos RMC: Intervalo de trabajo, sesgo, incertidumbre, estabilidad, deriva, resolucin, entre otros. Ver en el Anexo 3 un ejemplo especfico. El evaluador debe solicitar la documentacin que contenga las caractersticas metrolgicas del equipo de medicin (CMEM) consideradas en el proceso de CM. Ejemplo de documentos que contengan CMEM: Certificado de calibracin, Informe de calibracin. El evaluador debe solicitar los registros de la verificacin metrolgica. El evaluador debe solicitar las evidencias y documentos usados para determinar los intervalos de CM y verificar que los mismos intervalos de la CM estn basados en los datos obtenidos en el historial de las confirmaciones metrolgicas. Los intervalos de CM deben ser revisados y ajustados a las necesidades de aseguramiento continuo con los RMC. Los intervalos de calibracin y de CM pueden ser iguales. l evaluador debe solicitar evidencia de que la confirmacin metrolgica (CM) sea realizada cada vez que el instrumento sea reparado, ajustado o modificado. En el Anexo 3 se encuentra un ejemplo de confirmacin metrolgica, incluye el diagrama del proceso de la confirmacin metrolgica y tablas que muestran los RMC bsicos de algunos instrumentos de medicin, para realizar el proceso de Confirmacin Metrolgica. En el caso de los siguientes componentes de los sistemas de medicin empleados en la (s) tcnica(s) de esta Gua, el laboratorio: Debe seguir los lineamientos de la CM, para los termmetros, as como para las balanzas analticas que se utilicen para pesar muestras y materiales de referencia. Debe seguir los lineamientos de la CM, para el material volumtrico que se utilice para la preparacin de los materiales de referencia (disoluciones de trabajo), salvo que dichas disoluciones sean preparadas gravimtricamente.
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Cuando no aplica la calibracin del material volumtrico (indicado en el glosario), se debern solicitar registros de los controles que permitan la verificacin contina del mismo con referencia a las especificaciones del fabricante.
5.1.1 Adicional a la CM, el evaluador debe solicitar al laboratorio los procedimientos empleados y registros (cartas de control, registros, entre otros) de los controles implementados en los equipos de medicin, con objeto de asegurar la vigencia de la confirmacin metrolgica y que los equipos estn dentro de los requerimientos de sta. 5.2 Calificacin de equipos e Instrumentos de Medicin (CEIMA) Ver definicin de CEIMA en el Glosario de Trminos (Anexo 2). El evaluador debe solicitar al laboratorio los procedimientos protocolos de Calificacin de Equipo de Instrumentacin Analtica (CEIMA) en el cual se incluyan todas las etapas, as como evidencia de su cumplimento. En el Anexo 4.1 se presenta un ejemplo de CEIMA con tablas de parmetros bsicos por etapa de calificacin de un espectrofotmetro ultravioleta -visible. El evaluador debe solicitar que los registros del CEIMA se encuentren documentados de acuerdo a las caractersticas metrolgicas del equipo, ver ejemplos del Anexo 4.1. Adicionalmente el evaluador debe solicitar la recalificacin del equipo, en los siguientes casos: Cambio de localizacin del equipo. Interrupcin prolongada de los servicios que pueda poner en duda la estabilidad del desempeo del equipo o su calibracin. Mantenimiento mayor con cambio de partes que afecten la medicin (lmparas, celda de flujo, detector). Modificacin de diseo. En el caso de los siguientes componentes de los sistemas de medicin que emplea la tcnica que se incluyen en esta Gua, se debe considerar el siguiente lineamiento: se deben seguir los lineamientos del CEIMApPara los espectrofotmetros de ultravioleta -visible, sus accesorios, sus sistemas de introduccin de muestra, y sistemas especiales de digestin.
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5.3 Casos Particulares El material volumtrico que se utilice en las diluciones de las muestras, debe ser clase A verificado considerando su estado fsico y con base a criterios estadsticamente significativos (se deben tener criterios estadsticos para el muestreo de los materiales volumtricos a verificar basados en el nmero de piezas y el tiempo entre verificaciones). La verificacin contra las especificaciones debe ser realizada por el laboratorio con un procedimiento tcnicamente vlido y registros correspondientes, sta debe ser realizada antes de ser puesto en servicio y en periodos establecidos durante su vida til. Los hornos de microondas, autoclaves, baos termostaticos, cmaras ambientales y sistemas especiales de digestin, deben ser verificados de acuerdo a su especificacin y mantenerse bajo control.
6. TRAZABILIDAD DE LA MEDICIN
6.1 Trazabilidad, calibracin, patrones y Materiales de Referencia Certificados (MRC) Consultar el Glosario de Trminos (Anexo 2) para las definiciones correspondientes. La trazabilidad del resultado de una medicin est relacionada con la diseminacin de la unidad correspondiente a la magnitud que se mide. La expresin del valor de una magnitud incluye la referencia a una unidad de medida, la cual ha sido elegida por acuerdo, y por tanto, las medidas de la misma magnitud deben estar referidas a la misma unidad. An cuando la definicin de trazabilidad no impone limitaciones sobre la naturaleza de las referencias determinadas, es conveniente lograr la uniformidad universal de las mismas mediante el uso de las unidades del Sistema Internacional de Unidades, SI, las cuales ya han sido convenidas en el marco de la Convencin del Metro. En Mxico, es obligatorio el uso del Sistema General de Unidades, el cual contiene las unidades del SI. Los elementos de la trazabilidad en este tipo de mediciones son: a. El resultado de la medicin cuyo valor es trazable. (La trazabilidad es hacia el SI, mediante los valores de los MRC con su incertidumbre) b. Las referencias determinadas a patrones nacionales o internacionales. (Los valores de los patrones de trabajo deben ser trazables a valores de los MRC nacionales o internacionales) c. Cadena ininterrumpida de comparaciones. (Contar con una carta de trazabilidad o esquema en que se evidencie la utilizacin de MRC trazables al SI)
d. El valor de la incertidumbre de las mediciones en cada comparacin. (La carta de trazabilidad debe contar con los valores y las incertidumbres estimadas en cada comparacin) e. La referencia al procedimiento de calibracin o mtodo de medicin qumica en cada comparacin preferentemente. f.. La referencia al organismo responsable de la calibracin, de la certificacin del material de referencia, de la realizacin del mtodo de referencia, o del Sistema de medicin de referencia, en cada comparacin. Existen algunos mensurandos definidos por mediciones dependientes del mtodo de medicin en tales casos la trazabilidad del valor del resultado esta establecida al mtodo, por medio de la utilizacin de MRC en la etapa de cuantificacin y trazabilidad al SI de cada una de las magnitudes que intervienen en el clculo del valor del mensurando. Por ejemplo en el caso de Cromo hexavalente CRETI (NOM-052-SEMARNAT-1993) CRETI, se debe tener trazabilidad de las magnitudes de volumen y concentracin de masa mediante la calibracin de la balanza, y material volumtrico por laboratorios acreditados, y la utilizacin de MRC para la elaboracin de las curvas de calibracin. Adicionalmente, se deber asegurar que el mtodo este bajo control mediante el uso de materiales de control de calidad, ya sean MRC MR y la participacin continua en pruebas interlaboratorio, si existen. El evaluador debe solicitar que los MRC utilizados para la medicin por espectrofotometra de ultravioleta -visible proporcionen trazabilidad a patrones nacionales certificados por el CENAM, siempre y cuando estn disponibles, o en su defecto a patrones extranjeros con la autorizacin respectiva de la Direccin General de Normas (DGN), segn lo especificado en los Art. 26 de la LFMN, 20 y 24 del Reglamento de la LFMN y la Poltica de Trazabilidad de la ema. Es importante mencionar que la mayora de los elementos qumicos incluidos en stas tcnicas de medicin, que estn sancionados por la normatividad nacional para la evaluacin de la conformidad de dichas normas, se encuentran disponibles en el CENAM, por lo que los evaluadores deben asegurarse que los laboratorios de ensayo los utilicen segn se especifica en la Poltica de Trazabilidad de la ema. (Se recomienda consultar la disponibilidad de MRC en CENAM en www.cenam.mx). Los evaluadores deben solicitar, donde aplique, lo establecido en la Tabla de Trazabilidad de las Mediciones Analticas del Anexo 1, donde indican los instrumentos y equipos de medicin que requieran calibracin externa, CM o CEIMA, y las caractersticas de los
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materiales de referencia, as como las rutas de trazabilidad para las mediciones por espectrofotometra ultravioleta -visible. El evaluador debe revisar los mecanismos que el laboratorio tiene para mantener la trazabilidad, como el uso de patrones, con los propsitos de: Asegurar el mantenimiento de la trazabilidad de las mediciones mediante la comprobacin del estado de la caducidad de los MRC, la CM o la CEIMA de los instrumentos, entre las calibraciones programadas. Evidenciar mediante criterios estadsticos los periodos de calificacin y recalibracin de los equipos e instrumentos.
El evaluador debe solicitar: La demostracin de la trazabilidad mediante el examen detallado de los certificados de calibracin de los instrumentos de medicin y de los materiales de referencia certificados asociados a cada uno de los elementos de la cadena de comparaciones, dichos documentos deben ser expedidos por Laboratorios de Calibracin Acreditados en las magnitudes especficas y en el caso de los MRC deben ser expedidos por el CENAM o por instituciones extranjeras trazables a patrones nacionales de sus respectivos pases y con la autorizacin de la DGN. La demostracin esquemtica de la trazabilidad a travs de las cartas de trazabilidad de cada uno de los mtodos de ensayo dentro del alcance de la acreditacin, (en las cuales se muestran en rectngulos: la magnitud, unidades, MRC, y la incertidumbre de medicin; y en valos: el mtodo y el modelo matemtico), basadas en los certificados o dictmenes de calibracin y de sus MRC y una tabla donde se especifiquen los analitos cubiertos por el mtodo de ensayo (prueba).
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Por ejemplo: Carta de trazabilidad para la medicin de la concentracin de masa Cromo hexavalente por espectrofotometra de ultravioleta - visible
Magnitud: cantidad de sustancia Unidad : mol
Mtodo Primario de Titulacin Coulombimtrica
MRC K2Cr2O7Cr(VI) Magnitud: fraccin de masa Unidad: g/g U rel = 0,03 %
MRC Disol. de Cr(VI) Magnitud: concentracin de masa Unidad mg/L Urel = 0,39%
Mtodo de medicin con difenil carbazida cCrVI = cx * fd
Magnitud: Concentracin de masa de Cr VI Unidad: mg/L Urel= 3%
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7. INCERTIDUMBRE DE MEDICIN
Consultar el Glosario de Trminos (Anexo 2) para las definiciones correspondientes. Los ensayos usualmente tienen el propsito de llevar a cabo la evaluacin de la conformidad con requisitos establecidos, mediante la comparacin de stos con los resultados de sus mediciones, esto no los excluye de una declaracin de la incertidumbre de medicin en los resultados, adems de ser una parte indispensable en la expresin de un resultado de medicin. Los resultados de tal evaluacin pueden ser conforme o no conforme. 7.1 Elementos de la incertidumbre[4] de la medicin El modelo matemtico de la medicin, descrito mediante una o varias expresiones matemticas acompaadas de la nomenclatura correspondiente, y la mencin explcita de las hiptesis necesarias para su validez. La lista de las fuentes de incertidumbres significativas y una descripcin, breve y suficiente de las mismas. La mencin a fuentes de incertidumbre que tpicamente no aportan contribuciones significativas, pero que pueden resultar significativas bajo condiciones que pudieran ocurrir en el transcurso de una medicin. Una tabla con los componentes de incertidumbre que contenga al menos, para cada uno de ellos la incertidumbre de la medicin, su variabilidad, la distribucin de probabilidad que se le asocie, el coeficiente de sensibilidad y su contribucin a la incertidumbre estndar combinada de la medicin. La tabla tambin debe mostrar la incertidumbre estndar combinada y expandida. Una nota relativa a la distribucin de probabilidad del mensurando. Recomendaciones sobre el clculo y la expresin de la incertidumbre expandida de la medicin, incluyendo preferentemente y cuando aplique, los grados de libertad asociados a cada contribucin y el nmero efectivo de grados de libertad. Una nota de advertencia sobre el propsito nico de ilustracin de la tabla presentada y sobre la obligacin de cada laboratorio a realizar sus propias pruebas y consideraciones sobre la estimacin de la incertidumbre de sus mediciones.
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De acuerdo a la Poltica de Trazabilidad e Incertidumbre de la ema, para mediciones por espectrofotometra ultravioleta visible, el laboratorio debe aplicar alguna de las siguientes opciones: a) Estimar la incertidumbre con base al punto 4.2.1 considerando las magnitudes de entrada del modelo matemtico, cuando el resultado de la medicin por espectrofotometra ultravioleta -visible es generado a partir de un proceso de medicin directa. Por ejemplo: Medicin de nitratos, mtodo ultravioleta -visible segn la norma SM-4500-NO3-B. b) Estimar la incertidumbre con base a lo establecido en el punto 4.2.2. cuando el mensurando depende del mtodo de ensayo (prueba), es decir, la medicin es posterior a una serie de etapas complejas de tratamiento de la muestra. Por ejemplo: Cromo hexavalente en agua, segn la norma NMX-AA-044-SCFI-2001 y Medicin de Formaldehdo en aire segn la norma NOM-010-STPS-1999 procedimiento 006. El evaluador debe revisar cmo el laboratorio determina sus principales fuentes de incertidumbre las cules deben ser al menos las sealadas en la Tabla 1, pero pueden ser ms dependiendo de los mtodos especficos contenidos en el alcance de la acreditacin. En el Anexo 5 se encuentra un ejemplo de la estimacin de incertidumbre en la medicin de Cromo en agua residual. Las principales fuentes de incertidumbre identificadas en las mediciones incluidas en esta gua son: Tabla 1 Principales fuentes de incertidumbre en Espectrofotometra de Ultravioleta Visible. Magnitudes Etapa operativa Fuentes de incertidumbre involucradas 1. Submuestreo Toma de muestra Volumen Masa 2. Mtodo de preparacin de la Secado, digestin, Masa muestra diluciones, Volumen
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3. Calibracin (Trazabilidad)
analtica MRC, pureza de los reactivos, Diluciones involucradas, Algoritmo de procesamiento de datos Repetibilidad y reproducibilidad
Volumen y/o masa concentracin de masa del MRC
4. Medicin
Concentracin de masa
Cuando se disponga de un estudio de precisin del mtodo (mediante el uso de Material de control de calidad, MCC) el cual ya incluye la incertidumbre correspondiente a las etapas 1, 2 y 4, se deber estimar adicionalmente la fuente sealada en la etapa 3. Si el laboratorio demuestra que alguna de las fuentes de incertidumbre no es significativa puede no ser considerada en su evaluacin.
8. VALIDACIN DE MTODOS
Consultar el Glosario de Trminos (Anexo 2) para su definicin. La validacin examina las caractersticas de desempeo de un mtodo para establecer cualquier limitacin que pueda esperarse del mtodo cuando se aplique a un tipo especfico de muestras [8]. Los parmetros recomendados para la validacin de un mtodo de ensayo (prueba) que incluye mediciones por espectrofotometra de ultravioleta -visible son: 1. Recuperacin 2. Sensibilidad 3. Selectividad 4. Robustez 5. Lmite de deteccin 6. Lmite de cuantificacin 7. Intervalo lineal y de trabajo 8. Reproducibilidad 9. Repetibilidad 10. Sesgo (En algunos casos evaluado a partir de recuperacin) 11. Incertidumbre (de acuerdo al punto 7 de esta Gua)
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Para el caso de los mtodos incluidos en esta Gua, los parmetros para realizar una validacin parcial son los siguientes: 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. Recuperacin Lmite de deteccin Lmite de cuantificacin Intervalo lineal y de trabajo Reproducibilidad (medicin durante al menos tres das) Repetibilidad Sesgo (En algunos casos evaluado a partir de la recuperacin) Incertidumbre (de acuerdo al punto 7 de esta gua)
Para el caso de las acreditaciones iniciales, renovaciones, ampliaciones o actualizaciones de mtodos de ensayo en la NMX-EC-17025-2000[2], el laboratorio deber iniciar su proceso de estimacin de incertidumbre en la validacin parcial del mtodo y tener un plan de implantacin de acuerdo al captulo 4 inciso 4.2.3 de las Polticas Referentes a la Trazabilidad e incertidumbre de mediciones de la ema, para cuantificar todos aquellos componentes de incertidumbre que contribuyan significativamente a la incertidumbre final de la medicin. Esto ltimo debe ser realizado segn la seccin 7 de esta gua. Nota. En el caso descrito en la seccin 7 de incertidumbre inciso b se asume que el sesgo asociado al mtodo de medicin es cero En la tabla 2 se resumen los requisitos que el evaluador deber solicitar respecto a la validacin de los mtodos de ensayo a acreditar: El evaluador debe solicitar al laboratorio la validacin de todos los mtodos (ya sea parcial completa), que son empleados en estas tcnicas de medicin, an cuando estos sean normalizados.
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Tabla 2 Principales parmetros de validacin de los mtodos SITUACIN Desarrollo de un mtodo para un problema en particular Existe un mtodo evaluado para aplicarlo en un problema en particular Un mtodo establecido, realizar una revisin para incorporar innovaciones Un mtodo establecido, extenderlo o adaptarlo a un problema nuevo Cuando el control de calidad indica que un mtodo establecido cambia con el tiempo Establecer un mtodo en un laboratorio diferente Establecer un mtodo con diferente instrumentacin Establecer un mtodo con diferente analista u operador GRADO DE VALIDACIN O REVALIDACIN REQUERIDA Completo Completo Parcial o completo Parcial o completo Parcial o completo Parcial Parcial Parcial
En el caso de realizar una validacin parcial, el evaluador deber solicitar al laboratorio la documentacin analtica y los registros que la sustenten. Para el caso donde se midan concentraciones cercanas al lmite de deteccin, se debe solicitar todos los parmetros listados para la validacin parcial.
Nota: En el caso donde no se mida a nivel de trazas, no son requisitos el lmite de cuantificacin y el lmite de deteccin. Para todos los casos deber referirse a la seccin 7 de esta gua , para la estimacin de incertidumbre.
9. BUENAS PRCTICAS DE LABORATORIO

El evaluador debe solicitar se encuentren documentadas las Buenas Prcticas de Laboratorio que sigue en su operacin el laboratorio las cuales deben estar referidas y aplicadas dentro de su sistema de calidad.
Ver Anexo 6 para un ejemplo de Buenas Prcticas de Laboratorios. Una referencia til es la publicacin de Manual de Buenas Prcticas de Laboratorio [5].
10. BIBLIOGRAFA
[1] NMX-Z-055:1996 IMNC Metrologa Vocabulario de trminos fundamentales y generales, equivalente al documento International Vocabulary of Basic and General Terms in Metrology, BIPM, IEC, IFCC, ISO, IUPAC, IUPAP, OIML, 1993. [2] NMX-EC-17025-IMNC-2000 (ISO/IEC 17025:1999) Requisitos generales para la competencia de los laboratorios de ensayo y calibracin. [3] NOM-008-SCFI 2002 Sistema General de Unidades de Medida. [4] Eurachem-Citac Guide Quantifying Uncertainty in Analytical Measurement 2nd. Edition, 2000. [5] Manual de Buenas Prcticas de Laboratorio, CENAM, CNM-MRD-PT008, 2nd. Edicin, 5 impresin, septiembre 2002. [6] PROY NMX CC 10012 IMNC 2003 (ISO 10012-2002) Sistemas de Gestin de Mediciones, -Requisitos para Procesos de Medicin y Equipos de Medicin [7] Calificacin de Calificacin de Equipo de Instrumentos Analticos, DI-2-PTC-620RAT-001-2004, CENAM, abril del 2004. [8] Mtodos analticos adecuados a su propsito. Gua de laboratorio para validacin de mtodos y tpicos relacionados. CNM-MRD-PT-030, CENAM, 1998. [9] Polticas referentes a la trazabilidad e incertidumbre de mediciones, 2002, Serie documentos, ema, http://www.ema.org.mx/ema/pdf/PROCEDIMIENTOS/TRAZABILIDAD%20E%20 INCERTIDUMBRE%20SC-2002-12-12.pdf
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11. AGRADECIMIENTOS
Agradecimiento especial a los responsables de la elaboracin de esta Gua: LVAREZ TAPIA Rubn, LABORATORIO SAS MORENO RAMREZ Ma. Genoveva, CENAM SEGOVIANO REGALADO Francisco, CENAM
12. ANEXOS
1.-Ejemplo de tabla de trazabilidad e incertidumbre de los mtodos de ensayo (prueba) que se solicita acreditar ms comnmente. 2.-Glosario de trminos 3.-Ejemplo del proceso de confirmacin metrolgica para una balanza analtica 4.-Ejemplo de Calificacin (CEIMA) para la Calificacin de Espectrofotmetros ultravioleta visible. 5.-Ejemplo de estimacin de incertidumbre 6.- Buenas prcticas de laboratorio en espectrofotometra ultravioleta visible.
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ANEXO 1 Tabla de trazabilidad e incertidumbre de los mtodos de ensayo (prueba) que se solicita acreditar ms comnmente.
MENSURANDO REFERENCIA
No. (1)
NOMBRE DE LA PRUEBA (2)
SUBCOMIT (3)
MATRIZ (4)
ANALITO, COMPUESTO PARMETRO (5) MAGNITUD (6) UNIDADES (7) NORMA (8) DOCUMENTO (9)
TCNICA DE MEDICION TCNICA ANALTICA (10)
DETERMINACIN DE CROMO HEXAVALENTE EN AGUAS NATURALES, RESIDUALES Y RESIDUALES TRATADAS
agua naturales, Agua potables, residuales, residuales tratadas volumen volumen masa CROMO HEXAVALENTE Concentracin de masa fraccin de masa mg/L
NMX-AA-044SCFI-2001 ESPECTROFOTOMETRIA
Nmero consecutivo Nombre de la prueba Nombre del subcomit Especificar la matriz en la cual se encuentra el analito o compuesto. Por ejemplo: Leche, suelo, agua, aceite, cermica, etc. (5) Nombre del analito o compuesto (6) Indicar en las filas: el nombre de la magnitud de inters, nombre de aquellas magnitudes que son medidas para determinar el valor del mensurando, nombre de aquellas magnitudes de influencia que participan en la prueba. Usar tantas filas como sea necesario. (7) Unidades correspondientes al valor del mensurando, a aquellas magnitudes que son medidas para determinar el valor del mensurando, a aquellas magnitudes de influencia que participan en la prueba. (8) Norma(s) en la que se basa la medicin de la magnitud correspondiente. (9) Nombre del (los) documento(s) (procedimiento interno, mtodo de referencia nacional o internacional), en el que se basa la medicin de la magnitud correspondiente. (10) Nombre de la tcnica de medicin o tcnica analtica utilizada para realizar la medicin de la magnitud correspondiente
(1) (2) (3) (4)
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TRAZABILIDAD (15) de Referencia MRC o Patrn SISTEMA DE MEDICIN (11) REFERENCIA MTODO DE INSTRUMENTO Y/O CALIBRADO (12) VALIDACIN MEDICIN (13) CEIMA / CONFIRMACIN METROLGICA (14) INSTRUMENT ESTIMACIN DE LA INCERTIDUMBRE O (16) OBSERVACIONES
MATERIAL V OLUMTRICO DE METODO DE
ESPECTROFOTOMETRO UV/VIS, pipeta, matrz, balanza
Si
CEIMA
Si
pipeta matraz balanza
CM CM CM
Si Si Si
(11) Nombre del instrumento o sistemas instrumentales de medicin que se utilizan para efectuar la medicin de cada magnitud. (12) Nombre del instrumento y/o material volumtrico calibrado (13) Indicar si requiere validacin (14) Instrumento o Equipo que requiere CEIMA o CM (15) Forma de establecer trazabilidad (16) Indicar si requiere estimar incertidumbre
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ANEXO 2 GLOSARIO DE TRMINOS En las reuniones y talleres realizadas en las instalaciones del CENAM para la elaboracin de las Guas Tcnicas de Trazabilidad e Incertidumbre, entre los integrantes de los Grupos de Trabajo del CENAM y la ema, se acord incluir los criterios de interpretacin a las definiciones que se utilizaran en las Guas Tcnicas con el objeto de tener ms claridad y uniformizar los conceptos entre los evaluadores que las aplicarn. Debido a la importancia de poder distinguir adecuadamente las relaciones y diferencias entre los conceptos de mtodos de medicin, mtodos de ensayo (prueba), procedimientos de medicin, procedimiento de ensayo (prueba), procedimiento interno, protocolo, entre otros, se elabor la siguiente tabla de interpretacin:
DOCUMENTO DEFINICIN Operacin tcnica que consiste en la determinacin de una o ms caractersticas o desempeo de un producto, material, equipo, organismo, fenmeno fsico, proceso o servicio dado, de acuerdo a un procedimiento especificado. Procedimiento tcnico especfico para desarrollar un ensayo (prueba). Qu solicita el evaluador? Este no se localiza en ningn documento, el evaluador no lo debe solicitar. El evaluador lo debe solicitar como documento de referencia, (generalmente una norma, indicado en el alcance de la acreditacin) para compararlo con el procedimiento interno. Se encuentra descrito generalmente dentro del documento de referencia. El evaluador no lo debe solicitar. Se encuentra descrito especficamente dentro del procedimiento interno. Este documento lo debe solicitar el evaluador para compararlo con el mtodo de ensayo (prueba) y evaluarlo en sitio.
Ensayo (Prueba)
Mtodo de ensayo (prueba)
Mtodo de medicin
Secuencia lgica de operaciones, descrita genricamente, usada en la realizacin de mediciones Conjunto de operaciones, descritas especficamente, usadas en la realizacin de mediciones particulares de acuerdo a un mtodo dado. Trascripcin especifica para las condiciones del laboratorio de lo establecido en el mtodo de ensayo (prueba).
Procedimiento de medicin Procedimiento Interno, PNT, Instructivo Tcnico, Protocolo interno, entre otros.
AJUSTE: Operacin de llevar un instrumento de medicin a un estado de funcionamiento adecuado para su uso. [VIM 4.30, NMX Z 055 IMNC 1996]
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CADENA DE MEDICIN: Serie de elementos de un instrumento de medicin o de un sistema de medicin, que constituye la trayectoria desde la entrada hasta la salida de la seal de medicin. [VIM 4.4, NMX Z 055 IMNC 1996]
EJEMPLO: en una medicin de espectrometra de absorcin atmica incluye el nebulizador, el quemador, el control de gases de la flama, el monocromador, el fotomultiplicador y el vltmetro o el transductor de la salida de la seal para la computadora personal. CALIBRACIN: Conjunto de operaciones que establecen en condiciones especificadas, la relacin entre los valores de las magnitudes indicadas por un instrumento de medicin o un sistema de medicin o los valores representados por una medida materializada o material de referencia, y los valores correspondientes de la magnitud realizada por los patrones. [VIM 6.11, NMX Z 055 IMNC 1996] CRITERIO: El trmino calibracin se utilizar en dos aplicaciones diferentes: En lo que respecta a la calibracin en las mediciones fsicas, la calibracin de los instrumentos de medicin deber ser realizada por Laboratorios de Calibracin Acreditados. En lo que respecta a la calibracin en las mediciones analticas, la realizarn los Laboratorios de Ensayo empleando Materiales de Referencia Certificados. En las mediciones qumicas se establece la trazabilidad a cantidad de sustancia a travs de la curva de calibracin, en la cul se establece la relacin entre la seal del instrumento de medicin y la concentracin del mensurando por medio de los Materiales de los Referencia Certificados. Respecto a la calibracin del material volumtrico, termmetros u otros instrumentos de medicin (manmetros, higrmetros, etc), se deber exigir su calibracin, realizada por Laboratorios de Calibracin Acreditados, slo si su influencia en la incertidumbre de la medicin es significativa, lo cul deber demostrarse documentalmente. En estos casos, el laboratorio debe tener evidencias de la verificacin peridica de la calibracin de sus instrumentos o materiales, de acuerdo a su uso.
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Los casos en los que no se requiere la calibracin de material volumtrico, termmetros u otros instrumentos, por no ser sta significativa en la incertidumbre de la medicin, an as, el laboratorio deber mostrar evidencias de la verificacin, segn las especificaciones del fabricante, antes de su uso y peridicamente, de acuerdo a su uso. NOTA: Debido a que la calibracin de instrumentos de mediciones fsicas no incluyen operaciones de ajuste, el laboratorio debe tener establecidos criterios de aceptacin y rechazo documentados para saber si los instrumentos estn dentro de las caractersticas metrolgicas originales y que son adecuadas para cumplir con los requisitos metrolgicos del uso propuesto. En el caso de mediciones qumicas lo anterior no aplica, ya que la mayora de los instrumentos de medicin qumica requieren una optimizacin de la seal de respuesta y esto se logra efectuando diferentes ajustes, dgase posicin del nebulizador, flujos de gas, alineacin de lmparas, temperatura de flama, seleccin de eluyentes, etc., siguiendo las recomendaciones correspondientes a cada tcnica de acuerdo al manual del instrumento. CALIFICACIN DE EQUIPOS E INSTRUMENTOS DE MEDICIN ANALTICA (CEIMA): Proceso general que asegura que un instrumento es apropiado para el uso propuesto y que su desempeo est de acuerdo a las especificaciones establecidas por el usuario y el proveedor. [Calificacin de Equipo de Instrumentos Analticos, DI-2-PTC-620-RAT-001-2004, CENAM, abril del 2004] NOTA: La CEIMA se compone de los siguientes procesos, la Calificacin de diseo (CD), Calificacin de instalacin (CI), Calificacin de operacin (CO) y Calificacin de desempeo (C de D). CALIFICACIN DEL DISEO (CD): Cubre todos los procedimientos previos a la instalacin del sistema en el ambiente seleccionado. La CD define las especificaciones operacionales y funcionales del instrumento y detalla las decisiones deliberadas en la seleccin del proveedor. CALIFICACIN DE INSTALACIN (CI): Cubre todos los procedimientos relacionados a la instalacin del instrumento en el ambiente seleccionado. La CI establece que el instrumento se recibi como se dise y se especific, que este instrumento fue adecuadamente instalado en el ambiente seleccionado, y que este ambiente es apropiado para la operacin y uso del instrumento.
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CALIFICACIN DE OPERACIN (CO): Es el proceso en donde se demuestra que un instrumento funcionar de acuerdo a su especificacin operacional en el ambiente seleccionado. CALIFICACIN DE DESEMPEO (C DE D): Es definida como el proceso en donde se demuestra que un instrumento se desempea consistentemente de acuerdo a una especificacin apropiada para su uso rutinario. CARACTERSTICA METROLGICA: Caracterstica identificable que puede influir en los resultados de la medicin. NOTA 1: Los equipos de medicin generalmente tienen varias caractersticas metrolgicas. NOTA 2: Las caractersticas metrolgicas pueden ser el objeto de la calibracin. CRITERIO: Este trmino se refiere a resultados de calibracin. Ref [6]
CONFIRMACIN METROLGICA: Conjunto de operaciones requeridas para asegurarse de que el equipo de medicin es conforme a los requisitos correspondientes a su uso previsto. NOTA 1: La confirmacin metrolgica generalmente incluye la calibracin y verificacin, cualquier ajuste o reparacin necesario, y la subsiguiente recalibracin, la comparacin con los requisitos metrolgicos del uso previsto del equipo, as como cualquier sellado y etiquetado requerido. NOTA 2: La confirmacin metrolgica no se logra hasta que se haya demostrado y documentado la adecuacin del equipo de medicin para el uso previsto. NOTA 3: Los requisitos para el uso previsto incluyen consideraciones tales como alcance, resolucin y error mximo permitido. NOTA 4: Los requisitos metrolgicos normalmente difieren de los requisitos para el producto y no estn especificados en stos. CRITERIO: El proceso de confirmacin metrolgica se debe aplicar solo a los instrumentos que se utilizan en mediciones fsicas tales como b balanzas analticas, termmetros, manmetros, hidrmetros, picnmetros, sonmetros, luxmetros, cronmetros y flujmetros, entre otros.
Ref [6] ENSAYO (PRUEBA): Operacin tcnica que consiste en la determinacin de una o ms caractersticas o desempeo de un producto, material, equipo, organismo, fenmeno fsico, proceso o servicio dado. [Gua ISO/IEC 2, NMX-Z-109-IMNC-1996 CRITERIO: Las Pruebas (ensayos) pueden ser cualitativas o cuantitativas, pueden tambin ser la determinacin de las caractersticas de desempeo de un proceso o servicio, sin embargo, en lo relativo a las pruebas analticas cuantitativas, la prueba (ensayo) incluye siempre un Mtodo de Medicin y por lo mismo, los conceptos de Trazabilidad e Incertidumbre se aplican a este tipo de mtodos de prueba (ensayos).
INCERTIDUMBRE DE MEDICIN: Parmetro asociado al resultado de una medicin que caracteriza la dispersin de los valores que podran razonablemente ser atribuidos al mensurando. INSTRUMENTO DE MEDICIN: Dispositivo destinado a ser utilizado para hacer mediciones, solo o asociado a uno o varios dispositivos anexos. [VIM 4.1, NMX Z 055 IMNC 1996] INTERVALO DE TRABAJO: En anlisis cuantitativo, el intervalo de trabajo es obtenido a travs de la medicin de muestras con diferente concentracin del analito, y seleccionando el intervalo de concentracin que proporciona un nivel de incertidumbre aceptable. NOTA 1: Dentro del intervalo de trabajo puede existir un intervalo de respuesta lineal. Dentro de ste intervalo lineal de respuesta habr una relacin lineal con la concentracin del analito. NOTA 2: El intervalo de trabajo es generalmente ms amplio que el intervalo lineal y puede establecerse durante la evaluacin del intervalo de trabajo. NOTA 3: El intervalo de trabajo se refiere al intervalo de valores de concentracin en las disoluciones que se miden realmente y no a la concentracin en la muestra original.
[CITAC/EURACHEM Guide to Quality in Analytical Chemistry; EURACHEM The Fitness for Purpose of Analytical Methods] LIMITE DE DETECCION: La menor concentracin del analito en una muestra que puede detectarse, pero no necesariamente cuantificarse bajo las condiciones establecidas de la prueba. [NATA Tech Note #13, EURACHEM The fitness for Purpose of Analytical Methods 1998] LMITE DE CUANTIFICACIN: Es la concentracin ms baja del analito que puede determinarse con un nivel de incertidumbre aceptable. NOTA: Debe establecerse empleando materiales de referencia o muestras apropiadas. Este lmite, generalmente es el punto ms bajo de la curva de calibracin (excluyendo el blanco). No debe ser determinado extrapolando la curva de calibracin. Algunas convenciones toman el lmite de cuantificacin como 5, 6 o 10 veces la desviacin estndar de la medicin del blanco.: xL = xbl + ksbl Donde xbl es la media de las mediciones del blanco y sbl la desviacin estndar de las mediciones del blanco, y k es un factor numrico elegido de acuerdo al nivel de confianza deseado, siendo k = 5, 6 10. [CITAC/EURACHEM Guide to Quality in Analytical Chemistry] LINEALIDAD: Define la habilidad del mtodo para obtener resultados proporcionales a la concentracin del analito en la prueba. Nota: Se infiere que el intervalo lineal es el intervalo de concentraciones del analito sobre las cuales el mtodo proporciona resultados de pruebas proporcionales a la concentracin del analito. [AOAC PVMC; EURACHEM The fitness for Purpose of Analytical Methods 1998]
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MAGNITUD: Atributo de un fenmeno, cuerpo o sustancia que puede ser diferenciado cualitativamente y determinado cuantitativamente. [VIM 1.1, NMX Z-055 IMNC 1996] MATERIAL DE REFERENCIA: Material o sustancia en el cul uno o ms valores de sus propiedades son suficientemente homogneos y bien definidos, para ser utilizadas para la calibracin de aparatos, la evaluacin de un mtodo de medicin o para asignar valores a los materiales. [VIM 6.13, NMX Z-055 IMNC 1996] CRITERIO: cuando se requiere demostrar trazabilidad, la calibracin de instrumentos empleados en las mediciones fsicas deber ser realizado por Laboratorios de Calibracin Acreditados. En lo que respecta a la calibracin en las mediciones analticas, la realizarn los Laboratorios de Ensayo empleando Materiales de Referencia Certificados. MATERIAL DE REFERENCIA CERTIFICADO: Material de referencia acompaado de un certificado, en el cul uno o ms valores de sus propiedades estn certificados por un procedimiento que establece trazabilidad a una realizacin exacta de la unidad en la cul se expresan los valores de la propiedad y en la que cada valor certificado se acompaa de una incertidumbre con un nivel declarado de confianza. [VIM 6.14, NMX Z-055 IMNC 1996] CRITERIO: Existen 2 tipos de MRC, los que se utilizan para elaborar curvas de calibracin y dar trazabilidad a las mediciones, los cuales son regularmente en matrices simples y de alta concentracin y los MRC para control de calidad los cuales son matrices reales (suelo, agua de mar, sangre humana, hgado de pato, etc) a la cual se les ha agregado o contienen una(s) sustancia(s) qumicas en concentraciones en las que se encuentran en las muestras reales y que regularmente se utilizan para control de calidad o pruebas de aptitud, los valores, incertidumbres, homogeneidad y estabilidad de ambos deben ser determinadas por un laboratorio primario o nacional o un organismo competente aprobado por ellos. Para llevar a cabo los programas de control de calidad el uso principal de los MRC de Control de Calidad es para asegurar la confiabilidad de sus mediciones con cierta periodicidad, y rutinariamente se pueden utilizar MR para llevar su control estadstico.
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Para demostrar trazabilidad en una medicin qumica el laboratorio requiere utilizar MRC para la elaboracin de curvas de calibracin (o en la ejecucin de cualquier otro mtodo de calibracin qumica). CRITERIO: El certificado de un MRC debe especificar claramente el valor certificado, la incertidumbre correspondiente con un nivel de confianza declarado. El mtodo utilizado para la determinacin del valor certificado, analito al que corresponde el valor certificado, matriz, recomendaciones de uso, limitaciones, fecha de caducidad, entre otros MENSURANDO: Magnitud particular sujeta a medicin. [VIM 2.6, NMX Z-055 IMNC 1996; ISO 34] CRITERIO: Para mayor claridad en mediciones analticas, la identificacin del mensurando debe ser acompaada por la matriz, el mtodo de prueba y la tcnica de medicin con que se determina, ya que en muchos casos existen resultados de un mismo mensurando que son diferentes y dependientes del mtodo analtico, por ejemplo calcio soluble en agua residual por la NMX AA 051 SEMARNAT 2001 (AAE) es diferente a calcio soluble en agua potable por volumetra. MEDICIN: Conjunto de operaciones que tienen por objetivo determinar el valor de una magnitud. [VIM 2.1, NMX Z-055 IMNC 1996] MTODO DE ENSAYO (PRUEBA): Procedimiento tcnico especfico para desarrollar una prueba (ensayo). NOTA: Los ensayos (pruebas s) pueden ser cualitativos, cuantitativos y la determinacin de las caractersticas de desempeo de un proceso o servicio. Los ensayos (pruebas) cuantitativos son mtodos de medicin (ver definicin); algunos de ellos estn incluidos dentro de los mtodos de ensayo (prueba). Los ensayos (pruebas) cualitativos no incluyen cuantificaciones de mensurandos, por lo que en stos no se aplican los conceptos de trazabilidad e incertidumbre. MTODO DE MEDICIN: Secuencia lgica de operaciones, descrita genricamente, usada en la realizacin de mediciones.
CRITERIO: Para los propsitos de esta Gua, los mtodos de prueba en qumica analtica cuantitativa (ver definicin), siempre incluyen un mtodo de medicin. Para los fines de acreditacin, el nombre de la identificacin del mtodo de medicin es el mismo que el empleado para el mtodo de prueba que se quiere acreditar. [VIM, NMX Z-055 IMNC 1996] METODO PRIMARIO: Por definicin un mtodo primario de medicin es un mtodo que tiene la ms alta calidad metrolgica, cuya operacin se describe y se entiende completamente, para el cual se tiene una declaracin completa de incertidumbre en trminos de unidades del SI, y cuyos resultados son, por lo tanto, aceptados sin referencia a un patrn de la misma magnitud que es medida. [Metrologa, 2001, 38, 289-296] MTODO DE REFERENCIA: es un mtodo ampliamente investigado, que describe clara y exactamente las condiciones y procedimientos necesarios, para la medicin de uno o ms valores de la propiedad, que han demostrado tener exactitud y precisin de acuerdo con su propsito de uso y que puede, por lo tanto, ser usado para evaluar la exactitud de otros mtodos por la misma medicin, permitiendo en particular la caracterizacin de un MR. [3.10 Gua ISO 30] CRITERIO: En la ema este trmino se ha aplicado a los mtodos que se acreditan. Desde el punto de vista metrolgico y en esta gua el significado es el establecido en esta definicin. PATRN: Medida materializada, instrumento de medicin, material de referencia o sistema de medicin destinado a definir, realizar, conservar o reproducir una unidad o uno o ms valores de una magnitud para servir de referencia. [VIM 6.1, NMX Z-055 IMNC 1996] CRITERIO: Para los propsitos de esta gua y en lo que se refiere a mediciones qumicas (mediciones de cantidad de sustancia), los patrones de medicin son Materiales de Referencia Certificados (MRC). PRINCIPIO DE MEDICION: Es la base cientfica de una medicin, por ejemplo, el efecto termoelctrico en la medicin de temperatura, el efecto Doppler en la medicin de velocidad, el efecto Raman en la medicin del nmero de onda de vibraciones moleculares.
[VIM 2.3, NMX Z-055 IMNC 1996] NOTA: En mediciones qumicas se utiliza el concepto de Tcnica analtica para designar el principio qumico o fsico en que se fundamenta una medicin analtica. Este principio, solo o combinado con otros, se materializa generalmente mediante un instrumento (ejemplos: espectrometra de masas, cromatografa de gases, espectrofotometra de absorcin atmica) PROCEDIMIENTO DE MEDICIN: Conjunto de operaciones, descritas especficamente, usadas en la realizacin de mediciones particulares de acuerdo a un mtodo dado. [VIM 2.5, NMX Z-055 IMNC 1996] CRITERIO: Estas operaciones estn descritas en: procedimientos o instructivos internos del laboratorio. stos deben estar basados en el Mtodo de Medicin que los laboratorios de ensayo desean acreditar. RECUPERACION (RECOBRO): Proporcin de la cantidad de analito, presente en la porcin de la muestra o adicionado a esta, que es cuantificada por el mtodo de ensayo.
[HARMONISED GUIDELINES FOR THE USE OF RECOVERY INFORMATION IN ANALYTICAL MEASUREMENT1999] CRITERIO: normalmente se utiliza para evaluar la recuperacin en porcentaje (% de recuperacin) del analito presente o agregado a una muestra de control de calidad, evala la eficiencia de extraccin, proceso de preparacin o interferencias que pueden existir al aplicar el mtodo de ensayo . REPETIBILIDAD (DE LOS RESULTADOS DE MEDICIONES): Proximidad de la concordancia entre los resultados de las mediciones sucesivas del mismo mensurando, con las mediciones realizadas con la aplicacin de la totalidad de las siguientes condiciones: - el mismo procedimiento de medicin; - el mismo observador; - el mismo instrumento de medicin utilizado en las mismas condiciones; - el mismo lugar; - la repeticin dentro de un perodo corto de tiempo. [VIM 3.6, NMX Z 055 IMNC 1996]
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NOTAS 1 A stas les llama condiciones de repetibilidad. 2 La repetibilidad se puede expresar cuantitativamente con la ayuda de las caractersticas de la dispersin de los resultados. REPRODUCIBILIDAD (DE LOS RESULTADOS DE MEDICIONES): Proximidad de la concordancia entre los resultados de las mediciones del mismo mensurando, con las mediciones realizadas haciendo variar las condiciones de medicin. [VIM 3.7, NMX Z 055 IMNC 1996] NOTAS 1 Para que una expresin de la reproducibilidad sea vlida, es necesario especificar las condiciones que se hacen variar. 2 Las condiciones que se hacen variar pueden ser: - el principio de medicin; - el mtodo de medicin; - el observador; - el instrumento de medicin; - el patrn de referencia; - el lugar - las condiciones de uso; - el tiempo. 3 La repetibilidad puede ser expresada cuantitativamente con la ayuda de las caractersticas de la dispersin de los resultados. 4 Los resultados considerados aqu son, habitualmente, los resultados corregidos.
REQUISITOS METROLGICOS DEL CLIENTE: Los requisitos metrolgicos del cliente son aquellos requisitos de medicin especificados por el cliente como pertinentes para el proceso de produccin del propio cliente. [NMX-CC-10012-2003] NOTA 1: El cliente puede ser interno o externo a la organizacin (apartado 3.3.5 de la Norma ISO 9000:2000). CRITERIO: Este trmino se refiere a los requisitos explcitos e implcitos definidos en el mtodo de ensayo con respecto al instrumento de medicin, como la resolucin de un termmetro, la capacidad y sensibilidad de una balanza analtica. SISTEMA DE MEDICIN: Conjunto completo de instrumentos de medicin y otro equipo, acoplados para realizar mediciones especficas.
[VIM 4.5, NMX Z 055 IMNC 1996] CRITERIO: Se refiere a todos los equipos e instrumentos de medicin, equipo de laboratorio, materiales y reactivos que intervienen en la realizacin de una medicin, por ejemplo: Sistema de medicin para la determinacin de plomo en agua potable consta de: Espectrmetro de absorcin atmica Pipetas volumtricas Matraz aforado Sistema de Medicin para la determinacin de cadmio en cermica consta de: Espectrmetro de absorcin atmica Balanza Pipetas volumtricas Matraz aforado Termmetro Solucin de cido actico al 4% ROBUSTEZ: La robustez de un procedimiento analtico, es una medida de su capacidad de permanecer inalterado por pequeas, pero deliberadas, variaciones en los parmetros del mtodo y proporciona una indicacin de su confiabilidad durante su uso normal. [ICH Q2A, CPMP/ICH/381/95] SELECTIVIDAD (O ESPECIFICIDAD): La capacidad de un mtodo para determinar exactamente y especficamente el analito de inters en la presencia de otros componentes en la matriz bajo condiciones de prueba establecidas. [NATA Tech Note #13] SENSIBILIDAD: El cambio en la respuesta de un instrumento de medicin dividido por el correspondiente cambio del estmulo (seal de entrada). [IUPAC Orange Book] NOTA: El estmulo puede ser por ejemplo: la cantidad del mensurando presente. La sensibilidad puede depender del valor de estmulo. Aunque esta definicin se aplica claramente al instrumento de medicin, tambin puede aplicarse al mtodo analtico en conjunto, tomando en cuenta otros factores como el efecto de los pasos para una concentracin.
SESGO: La diferencia entre los resultados de prueba esperados y el valor de referencia aceptado. [ISO 3534-1] NOTA: El sesgo es el error sistemtico total en contraste con el error aleatorio. Puede existir uno o ms componentes del error sistemtico que contribuyen al sesgo. Una diferencia sistemtica mayor con respecto al valor de referencia aceptado se refleja por un valor de sesgo ms grande. TITULANTE: Solucin que contiene el agente activo con el cual se lleva a cabo la reaccin de titulacin. [IUPAC Compendium of Chemical Terminology 2nd Edition (1997)] CRITERIO: el agente activo se refiere a la sustancia qumica de concentracin conocida, que reacciona con el analito bajo una estequiometra determinada, se utiliza para cuantificar el analito, normalmente los titulantes son parte de la cadena de mediciones para proporcionar la trazabilidad del valor del mensurando. TRAZABILIDAD: Propiedad del resultado de una medicin o de un patrn, tal que esta pueda ser relacionada con referencias determinadas, generalmente patrones nacionales o internacionales, por medio de una cadena ininterrumpida de comparaciones teniendo todas ellas incertidumbres determinadas. [VIM 4.5, NMX Z 055 IMNC 1996] NOTAS i. ii. iii. El resultado de una medicin o el valor de un patrn son los que estn relacionados con referencias determinadas Este concepto se expresa frecuentemente por el adjetivo trazable. La cadena ininterrumpida de comparaciones es llamada cadena de trazabilidad.
VALIDACIN: Es la confirmacin por examen y la provisin de evidencia objetiva de que se cumplen los requisitos particulares para un uso especfico propuesto. [NMX EC 17025 IMNC 2000]
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VALIDACIN DE MTODO: Es el proceso de establecer las caractersticas de desempeo y limitaciones de un mtodo de medicin y la identificacin de aquellas influencias que pueden modificar estas caractersticas y a que grado lo afectan. NOTA: Qu analitos puede determinar el mtodo?, En qu matrices, en la presencia de qu interferencias? Dentro de estas condiciones que niveles de incertidumbre pueden alcanzarse. [EURACHEM The fitness for Purpose of Analytical Methods 1998] VALOR DE BLANCO (EN MEDICIN): Una lectura o resultado originado por la matriz, reactivos y cualquier sesgo residual, en un proceso o instrumento de medicin que contribuye al valor obtenido de una magnitud en el procedimiento de medicin analtica. [IUPAC Compendium of Chemical Terminology 2nd Edition (1997)] VERIFICACIN: Existen varias definiciones que se aplican a ste trmino: La Ley Federal sobre Metrologa y Normalizacin tiene la siguiente definicin: La constatacin ocular o comprobacin mediante muestreo y anlisis de laboratorio acreditado, del cumplimiento de las normas. Asimismo indica en su glosario que las Unidades de verificacin son las personas fsicas o morales que hayan sido acreditadas para realizar actos de verificacin por la Secretara en coordinacin con las dependencias competentes. La Poltica de Trazabilidad de la ema indica en el inciso 3.2.4 que los laboratorios de calibracin y/o ensayo acreditados por ema no pueden realizar actividades de unidades de verificacin si no cuentan con la acreditacin y aprobacin correspondiente. La Gua ISO 8402 define verificacin como: Confirmacin por examen y la provisin de evidencia objetiva de que se cumplen los requisitos especificados. En el contexto de la Confirmacin Metrolgica se indica que los laboratorios de ensayo y calibracin deben realizar el proceso de Verificacin Metrolgica. CRITERIO: En el contexto de la confirmacin metrolgica, la confirmacin por examen consiste en la comparacin directa entre las caractersticas metrolgicas del equipo de medicin y los requisitos metrolgicos del cliente, esto se denomina verificacin. Ver Guas ISO 9000 e ISO 10012. Los laboratorios de ensayo no realizan actividades de verificacin en el sentido descrito en la LFMN (las responsables son las Unidades de Verificacin), realizan
actividades de comprobacin que son comnmente denominadas como de verificacin en las NMX EC 17025 IMNC 2000, NMX CC 10012 IMNC 2004 y ISO 8402.
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ANEXO 3. EJEMPLO DEL PROCESO DE CONFIRMACIN METROLGICA PARA UNA BALANZA ANALTICA Requisitos metrolgicos del cliente (RMC) El proceso de confirmacin metrolgica inicia con la identificacin de requisitos metrolgicos del cliente (RMC) (A), por ejemplo: el cliente requiere hacer mediciones de masa en un intervalo de trabajo de 30 - 180 g; por lo tanto, la balanza analtica debe ser capaz de medir en el intervalo de 20 200 g. Adicionalmente a esto, requiere medir con una con una resolucin de 0,01mg, una repetibilidad de 0,03 mg y una incertidumbre de 0,04 mg. Tambin requiere que los RMC sean consistentes en intervalos de 20 en 20 g. Se muestra el ejemplo en la tabla 1. Tabla 1 RMC Intervalo de trabajo Incertidumbre Repetibilidad Resolucin Especificaciones del proveedor. La persona encargada de hacer la compra de la balanza analtica encuentra que en el mercado puede adquirir una balanza con las siguientes especificaciones del equipo: alcance nominal de 210 g con resolucin de 0,01mg, una repetibilidad < 0,025 mg, linealidad < 0,1 mg. Como se muestra en la tabla 2 Tabla 2. Especificaciones del equipo Especificaciones Intervalo de trabajo Incertidumbre Repetibilidad Resolucin (0 210 )g < 0,000 1 g < 0,000 025 g 0,000 01 g (20 200) g < 0,000 40 g < 0,000 03 g 0,000 01 g
Caractersticas metrolgicas del equipo de medicin (CMEM)
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El equipo adquirido es enviado a calibracin solicitando que la calibracin (B) sea realizada en el intervalo de trabajo de 20 a 200 g y en intervalos de 20 g. Producto de la calibracin se obtienen las caractersticas metrolgicas del equipo de medicin (CMEM). A continuacin se muestra el ejemplo de lo que se emite en un certificado o informe de calibracin para una balanza analtica (C). Prueba de carga excntrica: Variacin mxima de lectura obtenida en la prueba de carga excntrica. Resolucin 0,02 mg Pruebas de repetibilidad: Resolucin 0,01 mg 0,01 mg Carga 100g 200g Repetibilidad 0,000 01 g 0,000 04 g Carga 100 g Variacin mxima 0,16 mg
En la tabla 3 se muestra la prueba de linealidad: (intervalo de 0 a 200 g) Carga nominal (g) 20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 Tabla 3 Prueba de linealidad. Correccin Incertidumbre (g) (g) - 0,000 06 0,000 08 -0,000 12 0,000 09 -0,000 20 0,000 09 -0,000 25 0,000 11 -0,000 29 0,000 09 -0,000 32 0,000 11 -0,000 36 0,000 12 -0,000 37 0,000 12 -0,000 36 0,000 15 -0,000 34 0,000 12
Enseguida se procede a realizar la identificacin del estado de la calibracin (D) Verificacin metrolgica
Una vez que se tienen los datos de la calibracin, se realiza la verificacin metrolgica, la cual consiste en comparar las caractersticas metrolgicas del equipo de medicin, CMEM, y los requisitos metrolgicos del cliente, RMC, (E). En la tabla 4 se muestra el ejemplo.
Tabla 4. Verificacin metrolgica RMC Intervalo de trabajo (20 200) g Incertidumbre < 0,000 40 g Repetibilidad < 0,000 03 g Resolucin 0,000 01 g CMEM (20 200 )g Mximo 0,000 15 g Mxima 0,000 04 g 0,00001 g Verificacin metrolgica Cumple Cumple No cumple Cumple
Derivado de la verificacin metrolgica anterior, se tiene que la repetibilidad no cumple los RMC, esto se documenta, se debe investigar si es posible realizar un ajuste a la balanza (G). Si es posible realizarlo se enva a ajuste (H), si no es posible se debe emitir un informe de verificacin fallida (I) y se identifica para indicar el estado del equipo (J). Una vez realizado el ajuste, la balanza es calibrada nuevamente (B) obtenindose las siguientes CMEM: Resultado de la Calibracin (C) Prueba de carga excntrica: Variacin mxima de lectura obtenida en la prueba de carga excntrica. Resolucin 0,01 mg Pruebas de repetibilidad: Resolucin 0,01 mg 0,01 mg Carga 100g 200g Repetibilidad 0,000 01 g 0,000 02 g Carga 100 g Variacin mxima 0,000 03 g
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Tabal 5 se muestra la prueba de linealidad: (intervalo de 0 a 200 g) Tabal 5 Prueba de linealidad Carga nominal (g) 20 40 60 80 100 120 140 160 180 200
Correccin (g) - 0,000 06 -0,000 12 -0,000 20 -0,000 25 -0,000 29 -0,000 32 -0,000 36 -0,000 37 -0,000 36 -0,000 34
Incertidumbre (g) 0,000 08 0,000 09 0,000 09 0,000 11 0,000 09 0,000 11 0,000 12 0,000 12 0,000 15 0,000 12
Una vez obtenidos los datos de la calibracin se realiza nuevamente la verificacin metrolgica. Verificacin metrolgica En la tabla 6 se comparan las CMEM y los RMC (E). Tabla 6 Comparacin de las CMEM y los RMC (E). RMC Intervalo de trabajo (20 200) g Incertidumbre Repetibilidad Resolucin < 0,000 40 g < 0,000 03 g 0,000 01 g CMEM (20 200 )g Mximo 0,000 15 g Mxima 0,000 02 g 0,00001 g Verificacin metrolgica Cumple Cumple Cumple Cumple
Como resultado de la verificacin metrolgica, se concluye que las CMEM cumplen los RMC, se documenta la Confirmacin Metrolgica (F), se realiza la identificacin del estado de calibracin (D) y se concluye que la balanza puede ser utilizada para el propsito para el cual fue confirmada. El la figura 1 se muestra el diagrama del proceso de confirmacin.
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DIAGRAMA DEL PROCESO DE CONFIRMACIN METROLGICA Calibracin (comparacin tcnica B del equipo de medicin con un patrn de medida) C Certificado informe de calibracin
PROCESO DE CONFIRMACIN METROLGICA
Calibracin
Necesidad Identificada: Inicio Definicin de RMC A
Identificacin del estado de calibracina
Verificacin metrolgica
F
El equipo cumple con los requisitos?
Si
Documento de verificacin/confirma cin
No No
Acciones y decisiones
Es posible ajustarlo o repararlo?
Informe de prueba: Verificacin fallida Identificacin del estado
G Si Ajuste o reparacin H
Revisin del intervalo de confirmacin
Cliente b
Devolucin al cliente Fin
a Para la identificacin ver la seccin 5.5.8 de la NMX-EC-17025-IMNC-2000. b Organizacin o persona que recibe un producto (por ejemplo: consumidor, cliente, usuario, distribuidor, beneficiario y comprador). Nota: El cliente puede ser interno o externo a la organizacin (apartado 3.3.5 de la Norma ISO 9000:2000).
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ANEXO 4 Ejemplo de calificacin del espectrofotmetro de ultravioleta Propsito de uso: Para la medicin de cromo hexavalente en agua residual (mtodo de prueba) y mtodo de prueba para la medicin de cromo hexavalente en aguas naturales, potables, residuales y residuales tratadas por espectrofotometra de ultravioleta visible (NMX-AA-044-SCFI-2001) 4.1 Ejemplo de calificacin de espectrofotmetro de ultravioleta visible. ESPECIFICACIN FUNCIONAL Intervalo de longitud de onda (175 - 3200) nm Ancho de banda (0,05 - 5,0) nm Alcance Fotomtrico en absorbancia () de 6,0 Reproducibilidad Fotomtrica en un intervalo de absorbancia () 0,0004 - 1 Exactitud fotomtrica en un intervalo de absorbancia () de 0,003 - 1 y 0,002 - 0,5 Reproducibilidad de longitud de onda 0,02 nm Exactitud en longitud de onda 0,15 nm Luz espurea 0,00008 % T a 220 nm Ruido 0,000050 a RMS a 500 nm. Estabilidad fotomtrica 0,0002 /h despus de 1 h. Instalacin elctrica Instalacin elctrica (127 10) V; Mx. VA 300 Instalacin elctrica (127 10) V; Mx. VA 300 Fuentes de energa lmpara de tungsteno y deuterio Compartimiento y/o introduccin de muestra CD x x x x x x x x x x x x x x CI x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x CO x CF
Nota: Este es un ejemplo de CEIMA para un modelo de instrumento y configuracin especfica. Cada fabricante de acuerdo con el usuario establecer las especificaciones funcionales para el uso propuesto del instrumento. - Absorbancia (), es una magnitud de dimensin uno. Este tipo de magnitudes es considerada cuando su definicin involucra, ya sea dividir un tipo de magnitud por otra del mismo tipo, tal como fracciones, cocientes, eficiencias y tipos de magnitudes relativas o una divisin multiplicacin de un tipo de magnitud convencional de base cuyos exponentes reducen a cero su dimensin tal como un nmero caracterstico. Dybkaer R. Metrologia, 41 (2004) 6973. - Las especificaciones funcionales en celdas con lneas punteadas dependen de la configuracin descrita en las celdas que contienen lneas punteadas.
4.2 Ejemplo de calificacin de diseo Configuracin del Instrumento de Medicin Fuente Monocromador Compartimiento y/o Introduccin de muestra Especificacin Funcional Intervalo de longitud de onda (175 - 3200) nm Ancho de banda (0,05 5,0) nm Alcance Fotomtrico en absorbancia () de 6,0 1 cm, 10 cm, etc Especificacin del Proveedor seleccionado. 175-3200 nm 0,05-5,0 nm 6,0 1 cm CD Cumple x x x x No cumple
Detector
Fuente de alimentacin
Reproducibilidad Fotomtrica en un 0,0004 - 1 intervalo de absorbancia () 0,0004 - 1 Exactitud fotomtrica en un intervalo de 0,003 - 1 absorbancia () de 0,002 -0,5 0,003 - 1 y 0,002 - 0,5 Reproducibilidad de longitud de onda 0,02 0,02 nm nm Exactitud en longitud de 0,15 nm onda 0,15 nm Luz espurea 0,00008 % 0,00008 % T a T a 220 nm 220 nm Ruido 0,000050 a RMS 0,000050 a RMS a 500 nm. a 500 nm. Estabilidad fotomtrica 0,0002 /h 0,0002 /h despus de 1 h. despus de 1 h. Instalacin elctrica (127 (127 10) V; 10) V; Mx. VA 300 Mx. VA 300
x x x x x x
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4.3 Ejemplo de calificacin de instalacin CI Especificacin Funcional Intervalo de longitud de onda Ancho de banda Alcance fotomtrico Reproducibilidad fotomtrica Exactitud fotomtrica Reproducibilidad de longitud de onda Exactitud en longitud de onda Luz espurea Ruido Estabilidad fotomtrica Especificacin (175 - 3200) nm (0,05 - 5,0) nm 0 - 6,0) 0,0004 - 1 0,003 - 1 0,002 - 0,5 0,02 nm 0,15 nm 0,00008 % T a 220 nm 0,000050 a RMS a 500 nm. 0,0002 /h despus de 1 h. Resultado (175 - 3200) nm 1 nm 6,0 0,005 0,005 0,05 0,02 nm 0,15 nm 0,00008 % T a 220 nm 0,000050 a RMS a 500 nm. 0,0002 /h despus de 1 h. Cumple x x x x x x x x x x No cumple
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4.4 Ejemplo de calificacin de operacin. CO Especificacin Funcional Intervalo de longitud de onda (175 - 3200) nm Exactitud fotomtrica en un intervalo de absorbancia () de 0,003 - 1 y 0,002 0,5 Exactitud en longitud de onda 0,15 nm Reproducibilidad y reproducibilidad de longitud de onda 0,02 nm Luz espuria 0,00008 % T a 220 nm Estabilidad fotomtrica 0,0002 /h despus de 1 h. 4.5 Ejemplo de calificacin de desempeo. C de D Especificacin funcional Exactitud fotomtrica en un intervalo de absorbancia () de 0,003 - 1 y 0,002 0,5 Estabilidad 0,0002 h despus de 1 h. Resultado 0,005 0,05 Cumple x No cumple Resultado (175 - 3200) nm 0,005 0,05 0,015 nm 0,02 nm 0,00008 % T a 220 nm 0,0002 /h despus de 1 h. Cumple x x x x x x No cumple
0,0002 /h despus de 1 x h. Luz espuria 0,00008 % T a 220 nm 0,00008 % T a 220 nm x * La exactitud se puede verificar con MRC por ejemplo: disolucin de xido de holmio, disolucin de platino cobalto, filtro de vidrio de didimio. Con la cual se puede realizar las cartas de control.
NOTA: Para las pruebas involucradas en la Calificacin de desempeo, se recomienda donde aplique, realizar grficos de cartas de control.
ANEXO 5 Ejemplo de estimacin de incertidumbre de la mediciones de elementos y/ o compuestos qumicos en espectrofometra de ultravioleta visible. 1. INTRODUCCIN: Estimacin de incertidumbre en mediciones de elementos y/o compuestos qumicos, de bajas concentraciones (mg/L) empleando la tcnica de espectrofotometra de ultravioleta visible. 2. ALCANCE Aplica a las mediciones de elementos y/o compuestos qumicos empleando la tcnica de espectrofotometra de ultravioleta visible, que involucra preparacin de muestra y procesos de dilucin. 3. INTRODUCCIN El mtodo se basa en una reaccin de xido reduccin donde el cromo hexavalente reacciona con la 1,5-difenilcarbazida en medio cido para dar Cr3+ y 1,5-difenilcarbazona de color violeta que se lee espectrofotomtricamente a 540 nm. La intensidad de color es directamente proporcional a la concentracin de cromo hexavalente. 4. PROCEDIMIENTO 4.1 Modelo Matemtico El clculo involucrado en la medicin de una concentracin de cualquier elemento qumico, basndose en el mtodo descrito, esta dada por la ecuacin 1:
Cr (VI ) = ( xB ) * fd n * fc
(1)
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Donde Cr(VI) (x- B) fdn fc
Es la concentracin del mesurando Es la concentracin del mesurando que se mide en el instrumento El factor de dilucin con n =1, 2, 3 ...n Es el factor de correccin NOTA. Este factor se aplica solo si el mtodo indica que se realice esta correccin. .
En la figura l se muestra el diagrama de bloques para una medicin de un mtodo en particular por la tcnica de ultravioleta -visible.
Muestra (contiene el analito de inters)
Preparacin de la disolucin de referencia certificada para control.
Tratamiento de muestra ( digestin, extraccin)
Preparacin de MRC de
Medicin en UV-Vis
Calibracin analtica UV-Vis
Resultados
Figura 1 Procedimiento general de medicin en ultravioleta visible
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Se muestran en la figura 2 las fuentes de incertidumbre involucradas en el mtodo de medicin y que afectan a cada componente de la ecuacin 1, as como aquellas que son factores de influencia.
Curva de Calibracin Cx - CB
Respuesta del Instrumento Y Material de Referencia MRC Blanco B Volumen 1 (alcuota) Calibracin especificacin de la pipeta Temperatura Repetibilidad Calibracin especificacin del matraz Temperatura Repetibilidad Calibracin especificacin de la pipeta reproducibilidad Repetibilidad Volumen 1 (alcuota)
Concentracin Concentracin Cr(VI) Cr(VI) mg/L mg/L
Factor de Dilucin fdn(muestra)
Volumen 2 (aforo)
Precisin n muestras Sn(m) Sn(m)
Temperatura Repetibilidad
Repetibilidad Preparacin de Estndar de Control (ECd)
Factor de dilucin (fd EC)
MRC de Control fC
Material de Referencia Certificado Reproducibilidad Repetibilidad
Calibracin especificacin del matraz Volumen 2 (aforo)
Temperatura Repetibilidad
Precisin
Figura 2 Diagrama de rbol para la medicin de Cr (VI)
4.2 ESTIMACION DE FUENTES DE INCERTIDUMBRE. A continuacin se enumeran las fuentes de incertidumbre que afectan en cada uno de los componentes de la ecuacin 1, son las fuentes de incertidumbre bsicas que deben estar presentes en este mtodo de medicin.
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4.2.1 Concentracin en masa (mg/L) de cromo hexavalente medido en el instrumento a travs de la curva de calibracin (x-B), para esta magnitud de entrada se identifican tres principales fuentes las cuales se muestran enseguida: 4.2.1.1.Curva de calibracin. 4.2.1.2.Material de referencia certificado. 4.2.1.3.Incertidumbre debida a la lectura del blanco. 4.2.1.4.Incertidumbre combinada. 4.2.2. Factor de dilucin. 4.2.2.1 Estimacin de incertidumbre. 4.2.3. Factor de correccin. 4.2.3.1. Estimacin de incertidumbre de la concentracin de masa del MRC. 4.2.4. Precisin de muestras. Combinacin de las fuentes de incertidumbre. Tabla de resumen de estimacin de Incertidumbre. Grafica de contribuciones 4.2.1 Concentracin de masa (mg/L) de cromo hexavalente medido en el instrumento a travs de la curva de calibracin (x-B) 4.2.1.1 Curva de calibracin. Se basa en el algoritmo matemtico de mnimos cuadrados. La incertidumbre debida a la curva de calibracin puede calcularse por varios mtodos, (Ver apndice E.3 de Eurachem/CITAC Guide Second edition 2000). La ecuacin tpica que aparece al usar la tcnica de ultravioleta -visible es la de la lnea recta como se muestra en la ec. no 2.
= b1 + b0
(2)
De la ecuacin despejamos la componente que corresponde a la concentracin, como se muestra en la ec no 3.
( b0 )
b1
(3)
Donde La concentracin de masa (mg/L) de Cr(VI), resultado de la curva de calibracin.

Es la respuesta observada del instrumento, en este caso la unidad es la absorbancia. bo La ordenada al origen b1 La pendiente calculada.
La incertidumbre debida a la curva de calibracin puede calcularse por varios mtodos, (Ver apndice E.3 de Eurachem/CITAC Guide Second edition 2000) el que se ejemplificara aqu es la incertidumbre obtenida a partir de los datos de la curva de calibracin de una lnea recta.
El diseo tpico experimental para la estimacin de la incertidumbre es realizar una curva de calibracin con i concentraciones y j repeticiones con lo que se hace un arreglo xi, yj (i, j) como se muestra en la figura 3
Curvas de calibracin y1 y2 yj ... Concentraciones x1 x2 x1,y1
Donde n = i * j
xi
xi,yj
Figura 3 Para este arreglo se realiza la regresin lineal y calculamos b1 y bo El ejemplo mostrado esta basado en la Eurachem/CITAC Guide Second edition 2000. Con los datos obtenidos, para la elaboracin de la ecuacin de la lnea recta en la curva de calibracin, se estima la incertidumbre, de una concentracin de masa del elemento qumico a medir " " , en base al calculo de regresin lineal de la curva de calibracin, con una repuesta " ". Como se muestra en la ecuacin 4
S = b1 1 1 ( (( Cr (VI ) B MRC ) + + p n S XX
2
u ( Cr (VI ) B )
(4)
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Donde: u((Cr(VI)-B) S b1 p n
(Cr(VI)-B) MRC Sxx
Incertidumbre del mesurando obtenida por el instrumento calibrado. Desviacin estndar residual del clculo de regresin lineal La pendiente calculada El nmero de replica de la muestra en estudio. numero puntos en la curva de calibracin multiplicado por el nmero de replicas de cada punto (total de datos) (i*j) La concentracin en estudio. El promedio de las concentraciones calculadas. Suma de cuadrados de los residuales de las concentraciones obtenidas
La desviacin estndar de los residuales "s" esta dada por la ecuacin 5
S=
[y (b
n j =1
+ b1 *
)]
(5)
n2
S XX
= (
n j =1
(6)
Donde: S desviacin estndar residual del calculo dela regresin lineal. j Las "i" lectura observadas correspondientes a iMRC conocidas con las que se calibro el instrumento Las " i" lecturas ajustadas correspondientes a iMRC conocidas del instrumento en las curvas de calibracin. bo Ordenada al origen de la curva de calibracin. b1 Pendiente calculada de la curva de calibracin. n Numero total de datos ( i*j) sxx suma de cuadrados de los residuales de las concentraciones obtenidas por la curva de
calibracin. Cada una de las concentraciones de las diluciones de referencia (MRC) empleadas en la curva de calibracin. El promedio de las concentraciones de las disoluciones de referencia empleadas en cada uno de los puntos de la curva de calibracin.
En caso de que el instrumento no d valores de concentracin, a travs de un programa de computo, cada una de las lecturas yij es trasformada a concentracin mediante la ecuacin 1. 4.2.1.2. Material de referencia certificado (MRC) El valor certificado del material de referencia tiene una incertidumbre asociada que se debe considerar. Del certificado se obtiene la incertidumbre expandida, Uexp, la cual se trasforma en incertidumbre estndar uMRC empleando el factor de cobertura "k" el cual viene indicado en el certificado. Incertidumbre del material de referencia certificado
u MRC =
U EXP k
(7)
Donde: uMRC incertidumbre estndar del MRC UEXP incertidumbre expandida reportada en el certificado Factor de cobertura. k En caso que se realicen un nmero n de diluciones, para obtener la concentracin requerida del MRC en estudio en la curva de calibracin, se debe considerar la incertidumbre de las mismas y combinarse con la incertidumbre estndar del MRC en forma relativa y cuadrtica con la incertidumbre del MRC, basndose en la regla 2 indicada en el captulo 8, Seccin 8.2.6 de Eurachem/CITAC Guide Second edition 2000. Ver el punto 2 en donde se describe la estimacin de incertidumbre en un proceso de dilucin. Pueden llegar a usar una o ms diluciones con lo cual se tendran una o mas fuentes de incertidumbre, dependiendo del nmero de diluciones a realizar, el modelo matemtico para encontrar el valor del MRC se muestra en la ecuacin 8.
dilMRC = MRC * fd1 * ......... fd n
(8)
Entonces la estimacin de incertidumbre final del MRC es calculada por medio de la ecuacin 9
u fd u fd u = MRC + 1 + ............. n fd dilMRC Gua Tcnica sobre Trazabilidad e Incertidumbre enlas Mediciones Analticas fd n MRC 1 u dilMRC
que emplea la tcnica de Espectrofotometra de Ultravioleta-Visible 2004-06-28 Fecha de emisin 2004-05-28, fecha de entrada en vigor 2005-01-03, revisin 00.
2
(9)
62 de 75
u fdn Incertidumbre de la dilucin del material de referencia (cuando aplique, n = 1,2,3,4.... 4.2.1.3. Incertidumbre debida a la lectura del blanco.
NOTA. Solo si el mtodo aplica la correccin del blanco en la ecuacin de resultado final, de lo contrario este componente no es tomado en cuenta.
Una vez tomada la serie de lecturas del blanco en la magnitud a medir, por ejemplo si es concentracin se calcula su componente de incertidumbre donde:
u B =
Donde: SB N
SB n
(10)
La desviacin estndar de las lecturas en concentracin de los blancos Nmero de lecturas del blanco
4.2.1.4. Incertidumbre combinada.
u ( b ) = u ( ( B ) ) + (u B ) + (u MRC )
2 2
(11)
Donde u((-B)) Incertidumbre del mesurando por la curva de calibracin del instrumento Incertidumbre del material de referencia certificado (1.3) uMRC Incertidumbre por la correccin del blanco (Cuando aplique) (1.4) uB
NOTA IMPORTANTE: Dependiendo de cada laboratorio y su mtodo, en este punto se pueden considerar otras fuentes de incertidumbres, siempre y cuando sean significativas tales como los factores del instrumento: sensibilidad y reproducibilidad, y entonces sern combinadas de forma cuadrtica con la u((x)i 4.3.2. Factor de dilucin
63 de 75
El factor de dilucin normalmente se emplea cuando se miden elementos qumicos en muestras de concentracin de masa (mg/L) mayor al intervalo de trabajo del mtodo, este se obtiene a partir de un proceso de dilucin y pueden llevarse a cabo n diluciones de la muestra. El modelo matemtico de una dilucin esta dado por: (12) V1 fd n = V2 Donde fdn Factor de dilucin V2 Volumen de aforo V1 Volumen de alcuota En el proceso de una dilucin se identifican dos fuentes de incertidumbre, el V2 de aforo y el V1 de la alcuota de la muestra. La estimacin de incertidumbre relativa del factor de dilucin, se realiza combinando las incertidumbres de ambas mediciones: volumen de la alcuota de muestra y volumen de aforo, de forma relativa y cuadrtica, de acuerdo a la ecuacin 13,
u fd 1
u u = V1 + V 2 V V fd 1 1 2
(13)
Donde el modelo matemtico para el calculo de la incertidumbre de factores de dilucin es de la forma siguiente:
u fdn
u fdn = 1 fdn fd n
n
(14)
Estimacin de las fuentes de incertidumbre de la medicin de volumen de la alcuota V1 y aforo V2. La estimacin de incertidumbre de la medicin de volumen Vn en cualquier material volumtrico, identifica tres principales fuentes de incertidumbre que afectan esta medicin: El efecto de la variabilidad o repetibilidad del volumen medido por el analista.
64 de 75
El efecto de la variacin de la temperatura con respecto a la temperatura de calibracin del material volumtrico, que se estima a partir del factor de expansin del lquido. La tolerancia del material volumtrico. Cuando esta fuente de incertidumbre es significativa en el proceso de medicin, se recomienda calibrar el material volumtrico a emplear y tomar la incertidumbre resultado de la calibracin. Considerando estas tres fuentes de incertidumbre en la medicin de volumen, la estimacin de su incertidumbre se describe a continuacin: 4.2.2.1. Estimacin de incertidumbre 1.- Variabilidad en la medicin de volumen. Esta fuente de incertidumbre se estima realizando al menos seis mediciones (n = 6) de la masa de agua (g) contenida en el volumen asignando al material volumtrico y se estima la repetibilidad a travs del calculo de la desviacin estndar s de las mediciones de la masa en un volumen asignado.
uv =
S n
(15)
Donde S Desviacin estndar de las pesadas del volumen transferido. n Nmero de mediciones. 2. Variacin de la temperatura con respecto a la temperatura de calibracin del material volumtrico, la incertidumbre se estima sobre la base del efecto por dilatacin trmica se calculo usando el coeficiente de dilatacin trmica del material con el que est construido el recipiente, donde el coeficiente de expansin del volumen del agua por C, = 0,00021 mL/ C
3 Donde T Temperatura del agua C al momento de la medicin T20 20 C, temperatura de referencia 1 Coeficiente de expansin del volumen del agua C-1. Volumen de la pipeta V 3. Tolerancia del material volumtrico (Tol) se toma de la especificacin del material volumtrico correspondiente que proporciona el proveedor y para convertir a incertidumbre estndar se asume una distribucin rectangular dividiendo entre raz de 3.
u =
[(T T20 ) * V ]
(16)
u t1 =
Tol 3
(17 )
Donde Tol Tolerancia especificada por el fabricante. 3 Distribucin triangular. En el caso de emplear material volumtrico calibrado, este valor es sustituido por la incertidumbre del material volumtrico calibrado (UV) y se localiza en el certificado de calibracin, para convertirla a incertidumbre estndar se divide por el factor de cobertura k indicado en el certificado de calibracin.
U u = V Tol k
(18)
La estimacin de la incertidumbre relativa del Vn, se estima combinando en forma cuadrtica relativa, las tres fuentes de incertidumbres que afectan la medicin de volumen de acuerdo a la siguiente expresin.
u Vn Vn1
Donde: uVn Vn uR mm u tol Vn
u = R m m
u Exp . Liq + V n
u tol + V n
(19)
Incertidumbre del volumen 1 Volumen 1 Incertidumbre de la repetibilidad de las pesadas Promedio de las pesadas Incertidumbre debida a la especificacin del material. Volumen nominal del material.
4.2.3. Factor de correccin

El factor de correccin se aplica nicamente cuando el mtodo lo indica, y su incertidumbre debe ser incluida. El factor de correccin indica la prdida del mesurando por el tratamiento de muestra o interferencias al mesurando, por lo que se mide a travs de una muestra control o empleando
66 de 75
el mtodo de adicin de MRC y se calcula empleando el siguiente modelo matemtico general,

fc =
MRCp cn
ecp
( 20 )
Donde: fc Factor de correccin La concentracin del material de referencia certificado. MRC El promedio de las concentraciones resultado de las mediciones experimentales cn exp del MRC ne mg/L. La estimacin de incertidumbre relativa del factor de dilucin, se realiza combinando las incertidumbres estndar de la concentracin de masa del MRC (MRC) y la incertidumbre estndar de la concentracin de masa experimental (de n mediciones) del MRC, de forma relativa y cuadrtica, de acuerdo a la ecuacin (17).
u
prepMRC
fc
u prepMRC = prep
u exp MRC + exp
(21)
4.2.3.1. Estimacin de incertidumbre de la concentracin de masa del MRC - La incertidumbre de la concentracin de masa del MRC se localiza en el certificado del MRC, para convertir esta incertidumbre expandida a incertidumbre estndar, se divide por el factor de cobertura k, que se localiza en el certificado, uMRC = UMRC / k (22)
-Cuando el MRC a emplear requiera una preparacin preliminar, como una dilucin varias diluciones para llegar a la concentracin de masa deseada, se integrarn tantos factores de dilucin (fdn) como sea necesario al modelo matemtico que define la concentracin de masa final del MRC.
MRC prep = MRC * fd 1 * .......... * fd n
(23)
- Es este caso, la estimacin de su incertidumbre deber incluir una fuente adicional a la incertidumbre estndar calculada por la ecuacin 22, la incertidumbre del factor de
dilucin involucrada en la preparacin preliminar del MRC (ufdn), para obtener la incertidumbre relativa de la concentracin de masa preparada del MRC.
u MRC prep / MRC prep
u = MRC MRC
u u fd1 + + .......... ... fd n fd fd n 1
(24)
La estimacin de la incertidumbre del factor de dilucin(es), se describe en la seccin 4.2.2 de este anexo.
B. Lecturas de la disolucin control
La incertidumbre debida al analista y las lecturas que realiza Para ello calculamos la desviacin estndar de las lecturas entre la raz del numero de lecturas
u exp MRC =
S exp MRC n
(25)
Donde: Sexp MRC La desviacin estndar de las lecturas realizadas n Nmero de lecturas
4.2.4. Repetibilidad de muestras.
Una vez tomada la serie de lecturas de la muestra, se calcula su componente de incertidumbre donde: um = Sm n (26)
SB n
La desviacin estndar de las lecturas en concentracin de las muestras Nmero de lecturas de la muestra.
4.2.5. Combinacin de las fuentes de incertidumbre.
Podemos combinar sus factores de incertidumbre para obtener la incertidumbre estndar combinada de la concentracin deseada, basndose en el modelo matemtico.
i = ( B ) * fd n * fc
(27)
Se combinan las fuentes de incertidumbre en forma relativa cuadrtica basndose en la regla 2, indicada en el captulo 8, Seccin 8.2.6 de Eurachem/CITAC Guide Second edition 2000.
u u ( B ) l = i ( B ) l u fdn 2 u fc 2 + + fd n fc
2
(28)
Donde (-B) La incertidumbre de la curva de calibracin (punto 1) u fdn ufc La incertidumbre de las diluciones necesarias (pueden ser mas de 1) (punto 2) La incertidumbre del factor de correccin (solo si el mtodo lo aplica) (punto 3)
El modelo matemtico descrito por la ecuacin 1, se emplea para la estimacin de la incertidumbre de Cu en una muestra i. El mtodo de medicin tpicamente describe la medicin de Cu en n muestras, para efecto de obtener una mejor estimacin de Cu. Se recomienda hacer la medicin de Cu en al menos n = 6 muestras. De esta forma nuestro modelo de medicin final esta basado en la siguiente expresin. Donde i
i =i +
i
( 26 )
concentracin de masa obtenida del modelo matemtico de medicin para una muestra. fuente de incertidumbre debida a la reproducibilidad obtenida a partir de la medicin de n muestras.
Esta incertidumbre obtenida es relativa ( adimensional), para asignarle unidades se multiplica por la concentracin de la repetibilidad.
ui = ucombinada * i
U EXP = u i * k
Nota:
(29)
Considerando un nivel de confianza del 95% y un factor de cobertura de k = 2 se tiene: (30)
69 de 75
El valor del factor de cobertura cambia con el nivel de confianza considerado. 4.2.6. En la tabla 1 se muestra una propuesta de formato de informe de estimacin de incertidumbre en la medicin. Tabla 1
Tabla de fuentes de incertidumbre en la Medicin de Cromo (VI) en Aguas Residuales.
N Magnitud de Valor entrada Xi estimado Fuente de xi incertidumbre Concentracin de la muestra a partir de la curva Cx-B Concentracin del MRC a partir de la curva Concentracin de la curva Cx Concentracin del blanco a partir de la curva CB factor de dilucin, factor de correccin. Reproducibilidad de la medicin unidades Fuente de informacin Incertidumbre original Tipo de distribucin Incertidumbre Contribucin estndar u(xi) ui(y)
(x-B)
fdn fr Reprod.
En la tabla 2 se muestra el formato de informe de estimacin de incertidumbre en la medicin de cromo hexavalente.

N Magnitud de entrada Valor estimado Xi Fuente de xi incertidumbre Curva de calibracin factor de dilucin, fd Incertidumbre de la concentracin de la muestra a partir de la curva Reproducibilidad de la medicin, Cm 0,1989 10 unidades Fuente de informacin Mediciones repetidas Mediciones repetidas Mediciones repetidas Mediciones repetidas 0,00079 Incertidumbre original Tipo de distribucin Incertidumbre estandar u(xi) Contribucin ui(y)
1 2
mg/L mL
0,00045 0,03672
A, normal A, normal
0,0023 0,037
0,00225 0,00367
mg/L
A, normal
0,0086
0,0008 0,000394
2,010
mg/L
A, normal
U rel Concentracin de masa, CrVI Concentracin de masa, CrVI
0,0086
2,01 2,01
mg/L mg/L
0,017 U expandida considerando un factor de cobertura K=2 0,034
4.3.7
En la figura 1 se muestra un ejemplo de la grafica de contribuciones en la medicin de Cromo (VI)

70 de 75
Contribucin de Incertidumbre
Reprod.
fd
Serie1
C(x-B) 0,00000 0,00100 0,00200 0,00300 0,00400
Contribucin ui(y)
Figura 1
5.0 Referencias
1. Polticas Referentes a la Trazabilidad e Incertidumbres de Mediciones Entidad Mexicana de Acreditacin, Enero 2002, Mxico D.F. 2. "Quantifying Uncertainty in Analytical Measurement"; Eurachem / CITAC Guide ; Second Edition; QUAM:2000.P1.
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ANEXO 6 Buenas Prcticas de Laboratorio (bpl) en Espectrofotometra Ultravioleta Visible.
A continuacin se enlistan algunas de las bpl para mediciones en ultravioleta visible, considerndolas como medidas preventivas a efectuar con el fin de minimizar la obtencin de resultados de operacin o de mediciones incorrectas, las actividades realizadas deben ser documentadas con el fin de evidenciar su cumplimiento.
1. Requisitos en el laboratorio Condiciones ambientales. Espacio Condiciones elctricas Seguridad 2. -Limpieza del material de vidrio. 3.- Limpieza y cuidados de las celdas. 4.- Cuidados del espectrofotmetro ultravioleta visible. 5. -Preparacin de muestras. 6. -Uso de Materiales de Referencia.
Las buenas prcticas de laboratorio forman parte del proceso de control de calidad, cubren aspectos sencillos del trabajo diario en el laboratorio, deben documentarse y habilitarse formalmente, cubren aspectos como: mantenimiento, registros, manejo y disposicin de muestras, control de reactivos, limpieza del material de vidrio, ambiente, etc.
1. Requisitos en el laboratorio Condiciones ambientales. En un rea libre de polvo y vapores corrosivos para instalar el instrumento para una mxima estabilidad y un mantenimiento mnimo. Mantener la humedad relativa del ambiente entre 45% y 60 % Mantener la temperatura del laboratorio entre 17 C y 25 C. Evitar la exposicin del instrumento a los rayos solares. Disponer de un cuarto bien iluminado.
Espacio Colocar el instrumento en una mesa de dimensiones adecuadas. Disponer de una mesa de preferencias antivibratoria, plana, limpia y seca.
Condiciones elctricas Consultar los requerimientos elctricos especificados en al manual del instrumento. Evitar fluctuaciones de la potencia elctrica, utilizando reguladores de poder. Disponer de conexin a tierra fsica Seguridad Utilizar guantes, bata de laboratorio, lentes de seguridad . Nunca realizar ajustes al instrumento o reemplazar partes esenciales, lo debe de hacer el tcnico de servicio. El servicio deber estar a cargo de un especialista. Almacenar residuos qumicos en lugares especiales para ello nunca en en el laboratorio Trabajar en campana de extraccin cuando sea necesario Mantener etiquetadas todas las sustancias qumicas utilizadas en el laboratorio.
2. Limpieza del material de vidrio
Analitos inorgnicos Enjuagar el material con agua (3 veces) Llenar con HNO3 20 % (v/v), dejar reposar durante toda la noche Desechar el HNO3 y enjuagar con agua (5 veces) Dejar el material lleno con agua durante toda la noche Desechar el agua y poner a secar en un rea limpia Analitos orgnicos Lavar el material con agua y jabn libre de fosfatos Enjuagar con agua; puede ser de la llave; posteriormente enjuagar con agua de medicin (3 veces) Enjuagar con acetona (2 veces) grado reactivo. Enjuagar con el disolvente que se utilizar en la medicin, por ejemplo: Medicin de sustancias activas al azul de metileno (SAAM), enjuagar el material con cloroformo. Casos especiales. En la medicin de cianuros es importante que el material no contenga restos de cido. Enjuagar con acetona si el material presenta restos de grasas, an cuando se van a medir analitos inorgnicos.
3. Limpieza de las celdas
4.
Las celdas son la base de cualquier anlisis por espectrofotometra Los residuos de anlisis previos causan desviaciones en los resultados, baja sensibilidad y precisin pobre Limpiar regularmente las celdas. Mantener juegos de celdas igualadas Utilizar guantes para su manipulacin Evitar tocar las ventanas pticas que ocasione depsitos de grasa o huellas dactilares Limpiar las celdas antes y despus de su uso. Al final de un da de medicin, limpiarlas, secarlas y guardarlas en su contenedor. Guardar las celdas en un desecador. No utilizar cepillos para la limpieza exterior de las celdas. No utilizar aire comprimido para secarlas.
5. Cuidados del Espectrofotmetro
Antes de encender el espectrofotmetro, asegurarse que el compartimiento de muestra est vaco. Si se cuenta con sistemas de muestreo (celdas de flujo o automuestreadores), verificar que no obstruyan el paso de la radiacin. Seguir el procedimiento de encendido recomendado por el fabricante por ejemplo encender el espectrofotmetro, posteriormente la computadora y finalmente la impresora. Dejar el instrumento encendido al menos 30 minutos (o lo recomendado por el fabricante), antes de empezar con las mediciones. Establecer un programa de calibraciones y verificaciones instrumentales Establecer un programa de mantenimiento preventivo Los servicios debern ser realizados por personal especializado Mantener un listado de los consumibles ms comunes Mantenerlo limpio y libre de polvo Limpiar inmediatamente cualquier sustancia que se derrame sobre el espectrofotmetro o en el compartimiento de muestra. Nunca dejar las celdas con muestra dentro del instrumentoMantener las ventanas pticas limpias, realizando la limpieza con papel para lentes utilizando un poco de alcohol etlico Establecer un programa de calificacin (CEIMA) Establecer un programa de mantenimiento preventivo
6. Preparacin de muestras. Considerar:
La naturaleza de la muestra El componentes que se desea determinar Los dems constituyentes presentes La exactitud de longitud de onda deseada. El tiempo disponible. Una disolucin del analito(s) de inters adecuada para la medicin espectrofotomtrica debe tener las siguientes propiedades: 1. Las especies absorbentes debern tener estabilidad por un periodo de tiempo razonable, que permita realizar mediciones repetibles. 2. La inestabilidad se puede deber a diferentes factores: oxidacin, descomposicin fotoqumica, disolvente, pH, temperatura 3. Disolucin: establecer un tiempo determinado y realizar todas las mediciones iguales.SolubilidadLas disoluciones deben ser totalmente solubles. Las mediciones de coloides o material insoluble, producirn resultados sin repetibilidad, debido a que sigue reaccionando o hidrolizndose el material con el disolvente. Se produce dispersin de la radiacin. Algunos productos insolubles pueden ser extrados en disolventes diferentes. Disolventes comunes Agua. Disoluciones de HCl, H2SO4, NaOH aprox. 0,1 eq/L Disoluciones amortiguadoras de pH que no contengan sustancias absorbentes por ejemplo mezclas de fosfato dicido de sodio con fosfato cido de sodio, tiles en el intervalo de 4,5 a 8,9 de pH. Disolventes orgnicos, grados espectroscpico, por ejemplo piridina, benceno, cloroformo, alcohol etlico etc.
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Mxico, Mayo de 2004

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Dr. Hctor O. Nava Jaimes Director General Centro Nacional de Metrologa

Mara Isabel Lpez Martnez Directora Ejecutiva

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Grupo de Trabajo que particip en la elaboracin de esta Gua:

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1. PROPSITO DE LA GUA TCNICA

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2. ALCANCE DE LA GUA TCNICA

Radiacin policromtica Materia Espectro de absorcin

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Figura 2: Diagrama de los principales componentes de un espectrofotmetro.

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4. MTODO Y/O SISTEMA DE MEDICIN

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5. CONFIRMACIN METROLGICA Y CALIFICACIN DE EQUIPOS

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Mtodo Primario de Titulacin Coulombimtrica

MRC K2Cr2O7Cr(VI) Magnitud: fraccin de masa Unidad: g/g U rel = 0,03 %

Mtodo de medicin con difenil carbazida cCrVI = cx * fd

Magnitud: Concentracin de masa de Cr VI Unidad: mg/L Urel= 3%

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Volumen y/o masa concentracin de masa del MRC

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9. BUENAS PRCTICAS DE LABORATORIO

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NOMBRE DE LA PRUEBA (2)

TCNICA DE MEDICION TCNICA ANALTICA (10)

DETERMINACIN DE CROMO HEXAVALENTE EN AGUAS NATURALES, RESIDUALES Y RESIDUALES TRATADAS

(1) (2) (3) (4)

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MATERIAL V OLUMTRICO DE METODO DE

ESPECTROFOTOMETRO UV/VIS, pipeta, matrz, balanza

pipeta matraz balanza

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Mtodo de ensayo (prueba)

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