Desnaturalizacion de la proteina a temperaturas y ph, extremos

PRACTICA DE LABORATORIO N 04

Resumen
Posteriormente al reconocimiento de las protenas se precedi a la siguiente practica denominada desnaturalizacin de la protena por Ph extremos y temperatura , en este caso utilizamos una clara de huevo, la practica tuvo como objetivo Observar el comportamiento de una protena globular hidrosoluble en diferentes medios para relacionar los cambios con su estructura molecular, al ser expuesto a temperaturas elevadas en el bao mara y tambin estar expuestos a una dosis de alcohol etlico cuyo ph es 6 aproximadamente lo cual significa que es acido, en el primer procedimiento se coloco en un tubo de ensayo una cantidad de clara de huevo y se procedi a ponerlo en bao mara al cabo de unos minuto la protena que era de color claro y plasmoso, se transformo en un floculo de color blanco (huevo cocido) en el segundo caso se someti a la protena a una dosis de alcohol etlico, y se observo que luego de 3min aproximadamente, la protena en la parte superior se converta en una cpita blanca. Finalmente observando ambos casos se concluyo que la protena se desnaturaliza ms rpido al estar expuesto a altas temperaturas, y en ambos casos la desnaturalizacin es irreversible. PALABRAS CLAVE: desnaturalizacin, protena, temperatura, PH, irreversible ABSTRACT Following the recognition of proteins preceded the next practice known as protein denaturation by extreme pH and temperature, in this case we used an egg white, practice aimed to observe the behavior of a globular protein soluble in different ways to relate changes in its molecular structure, when exposed to elevated temperatures in the water bath and exposed to a dose of ethyl alcohol whose pH is approximately 6 which means that is acidic, the first procedure was placed in a test tube a quantity of egg white and proceeded to put in a water bath after a few minutes the protein that was colored and plasmoso, was transformed into a white floc (boiled egg) in the second case was submitted to the protein at a dose of ethyl alcohol, and observed that after approximately 3 min, the protein at the top became a white head. Finally observing both cases it was concluded that the protein is denatured quickly when exposed to high temperatures, and in both cases is irreversible denaturation. KEY WORDS: denaturation, protein, temperature, pH, irreversible

Introduccin
Desnaturalizacin de protenas Una protena es una cadena de aminocidos cuya secuencia es especfica. Se forman en los ribosomas por lectura de los genes que llevan la informacin de la secuencia concreta de aminocidos que da lugar a una determinada protena. Esta cadena de aminocidos agrega otros tomos o molculas como cobre, zinc, hierro, etc, para dar lugar a la protena final que comienza a plegarse sobre s misma para adoptar la conformacin espacial necesaria para realizar correctamente su funcin biolgica. La prdida de esta conformacin espacial hace que la protena no pueda cumplir con su funcin biolgica en el organismo y es lo que se conoce como desnaturalizacin de protenas. Por ejemplo, un enzima pierde su funcin cataltica. La desnaturalizacin de protenas es consecuencia de algn factor externo como acidez del medio, temperatura, etc. Es importante saber que la desnaturalizacin de una protena no afecta a lo que se conoce cmo estructura primaria, esto es, la secuencia de aminocidos base de la protena. Hay casos excepcionalmente raros en los que una protena desnaturalizada no pierde su funcin biolgica Agentes desnaturalizantes Los agentes desnaturalizantes son aquellos factores qumicos o fsicos que producen la desnaturalizacin de las protenas. Entre los ms comunes podemos citar: - Temperatura - Ph

- polaridad del disolvente - fuerza inica El ejemplo ms famoso para ilustrar la desnaturalizacin de protenas es la coccin del huevo. La clara del huevo est compuesta en gran parte por agua y albminas, un tipo de protenas. Al aumentar la temperatura las protenas de la clara del huevo se desnaturalizan, pierden su solubilidad y la clara del huevo deja ser lquida y transparente y pasa a ser opaca de color blanco y slida Objetivo experimental Observar el comportamiento de una protena globular hidrosoluble en diferentes medios (temperatura y PH extremos) observar los cambios en s estructura.

Materiales, equipos y mtodos

Metodologa La metodologa aplicada en este caso es la observacin. Conocimientos necesarios Composicin qumica de las protenas; propiedades fsicas y qumicas de los polipptidos; clasificacin bioqumica de las protenas. Equipos Equipo de proteccin personal - Ojos. Anteojos de policarbonato o monoggles sin ventilacin.

Piel. Guantes de neopreno para cidos y solventes orgnicos. Guantes trmicos para materiales calientes. Ropa de algodn (bata de laboratorio).

Respiratorio. Se recomienda (no obligatorio) respirador para cidos y solventes orgnicos (barbijo). Precauciones especiales. Bao de ojos disponible. Materiales

Tubos de ensayo Breakrer Pipetas Bao maria Lpiz indelieble Cosinilla Reactivos. Alcohol C2H5OH Muestra. Clara de huevo

Procedimiento experimental
Experimento 1 En este primer experimento se somete a la protena a temperaturas extremas en el bao mara en este caso se utiliza dos muestras en dos tubos de ensayo. Material Necesario

La clara de un huevo Tubos de ensayo Bao mara Procedimiento: Hecha la clara del huevo en el interior del tubo de ensayo y someterlo al bao mara tapa el tubo y espera A medida que pasa el tiempo observa lo que sucede en el tubo de ensayo

Fig.1 protena muestra Experimento 2

Fig.2 protena desnaturalizada en bao mara

En el segundo proceso experimental la protena es sometida al contacto del Ph del alcohol que es de 6 es decir acido. Material Necesario

La clara de un huevo Tubos de ensayo alcohol Procedimiento: Hecha la clara del huevo en el interior del tubo de ensayo con el alcohol Tapa el tubo de ensayo y espera A medida que pasa el tiempo observa lo que sucede en el tubo de ensayo

Fig.3 muestra de protena

Fig.4 protena mas alcohol. Desnaturalizacin lenta

Resultados, discusin y conclusiones

Resultados del experimento n 1 exposicin a temperaturas elevada Qu ha sucedido? Las cadenas de protenas que hay en la clara de huevo se encuentran enrolladas adoptando una forma esfrica. Se denominan protenas globulares. Al frer o en este caso cocer un huevo, el calor hace que las cadenas de protena se desenrollen y se formen enlaces que unen unas cadenas con otras. Este cambio de estructura da a la clara de huevo la consistencia y color que se observa en un huevo cocinado. Este proceso que se conoce con el nombre de desnaturalizacin se puede producir de muy diversas maneras :

calentando : cocer o frer batiendo las claras por medio de agentes qumicos como alcohol, sal, acetona, etc. Resultados del experimento n 2 exposicin a ph extremo Qu ha sucedido? Las cadenas de protenas que hay en la clara de huevo se encuentran enrolladas adoptando una forma esfrica. Se denominan protenas globulares. Al estar en contacto con un reactivo como el alcohol que tiene un ph de aproximadamente 6. Este cambio de estructura da a la clara de huevo la consistencia y color que se observa en un huevo cocinado pero al inicio es lento observndose primero una caita de color blanco al nivel del contacto. Este proceso que se conoce con el nombre de desnaturalizacin se puede producir de muy diversas maneras: Puedes realizar un experimento similar utilizando sal de cocina en lugar de alcohol Discusiones. Revise la estructura primaria de la albmina de clara de huevo de gallina. Revise las propiedades fisicoqumicas de los residuos de aminocidos de la clara de huevo de gallina. Relacione el comportamiento de la protena en funcin de las variables fisicoqumicas de las sustancias estudiadas. Conclusiones La mayora de las protenas pierden su funcin biolgica cuando estn desnaturalizadas, por ejemplo, las enzimas pierden su actividad cataltica, porque los sustratos no pueden unirse ms al centro activo, y porque los residuos del aminocido implicados en la estabilizacin de los sustratos no estn posicionados para hacerlo. Es decir la desnaturalizacin es irreversible

Bibliografa
[01] Chang, R. 1977. Physical chemistry with applications to biological systems. Macmillan Publ. Co., Inc., New York, N.Y [02] BIOQUIMICA norma julia CCOA TIONA

Cuestionario
Cules son los niveles estructurales de la protena? Son 4 estructuras estructura primaria que es la secuencia de aminocidos de la protena en forma lineal. Estructura secundaria. Es la secuencia de aminocidos en el espacio alfa hlice Estructura terciaria. Es la disposicin de la estructura secundaria de un polipeptido al plegarse sobre si misma originando una conformacin globular. Estructura cuaternaria. Esta estructura informa de la unin de enlaces no covalentes de varias cadenas polipeptidas con estructura terciaria para formar un complejo proteico. Qu le sucede cuando a una protena se le desnaturaliza?que estructuras se alteran? Una protena es una cadena de aminocidos cuya secuencia es especfica. Se forman en los ribosomas por lectura de los genes que llevan la informacin de la secuencia concreta de aminocidos que da lugar a una determinada protena. Esta cadena de aminocidos agrega otros tomos o molculas como cobre, zinc,

hierro, etc, para dar lugar a la protena final que comienza a plegarse sobre s misma para adoptar la conformacin espacial necesaria para realizar correctamente su funcin biolgica. La prdida de esta conformacin espacial hace que la protena no pueda cumplir con su funcin biolgica en el organismo y es lo que se conoce como desnaturalizacin de protenas. Por ejemplo, un enzima pierde su funcin cataltica. En qu se diferencian la desnaturalizacin reversible a la irreversible? Irreversible. La protena pierde todas sus funciones biolgicas sin poderse recuperar nunca. Reversible. La protena a pesar de que pierde su estructura n pierde sus funciones biolgicas Qu puedes decir de un liquido biolgico que l ser calentado se pone turbio y con la aadidura de una gotas de limos de vuelve claro? Que el evento sucede a causa del ph, es decir que cuando un liquido biolgico es calentado cabe la posibilidad de que sea un liquido alcalino por tanto se pone turbio entonces al agregar el limos que posee un ph acido esta base se neutraliza y queda el liquido otra vez claro. Qu diferencias hay entre coagulacin y precipitacin? Coagulacin, la materia se vuelve en una especia de estado plasmtico. Mientras que la precipitacin la materia se precipita o cae sin cambiar su estructura molecular.

Leer ms: http://www.monografias.com/trabajos93/desnaturalizacion-proteina-temperaturas-y-phextremos/desnaturalizacion-proteina-temperaturas-y-ph-extremos.shtml#ixzz2GIXflsjx