DETERMINACIN DE LA MATERIA INSAPONIFICABLE 1.

INTRODUCCIN A medida que se desarrolla Ia tecnologa, se dispone de un mayor nmero de datos de calidad suficiente para las bases de informacin y las normas evolucionan. Las normas de la Comisin del Codex Alimentarius establecen una lnea bsica para la calidad de los productos que cuenta con el consenso internacional, lo cual permite dirimir los conflictos y contribuye a la proteccin del comprador. Las normas del Codex Alimentarius con respecto a las grasas y aceites han evolucionado gradualmente y estn destinadas en parte a ser cada vez ms tiles para abordar los problemas de la autenticidad. Las grasas y aceites crudos contienen algunas sustancias que hay que eliminar para conseguir buenas propiedades de elaboracin (color, olor y sabor agradables) y conservacin de los productos. stos compuestos biolgicos forman parte importante de la dieta de los seres humanos, son una fuente rica de energa en la dieta y contienen ciertos cidos grasos que son nutrientes esenciales.1 Dentro de las determinaciones que se emplean con mayor frecuencia para examinar los aceites y las grasas frente a su identificacin y calidad, se encuentra el material insaponificable. El contenido del material insaponificable de la mayor parte de las grasas naturales oscila normalmente entre 0,5 y 2,6%. El insaponificable se considera como una impureza y en los aceites marinos se han encontrado los mayores contenidos de este material.2 En este contexto, el trabajo que se presenta a continuacin rene un conjunto de datos relacionados al material insaponificable de aceites y grasas, de manera que se proporcione una gua que permita su determinacin en laboratorio.
2.

OBJETIVO

Elaborar una gua para la determinacin del material insaponificable de los aceites y grasas. 3. 3.1.
1

DEFINICIONES Grasas y Aceites

por

Extrado del Artculo sobre grasas y aceites proporcionado http://docencia.udea.edu.co/qf/grasas/material-inso.html. 2 MEDINA M. GILMA B. Aceites y Grasas Comestibles. Universidad de Antioquia

Productos de origen animal o vegetal, o sus mezclas, que renan las caractersticas y especificaciones de la Reglamentacin Tcnica Sanitaria, y cuyos componentes principales son glicridos de los cidos grasos, pudiendo contener otras sustancias en proporciones menores (ACEITES: Lquidos a 20C; GRASAS: Slidos a 20C) 3 3.2.
-

Saponificacin Reaccin de hidrlisis en medio alcalino que consiste en la

descomposicin de un ster en el alcohol y la sal alcalina del cido carboxlico correspondientes. Es la reaccin inversa a la esterificacin.4
-

Hidrlisis catalizada por bases. Los lcalis hidrolizan las grasas

fcilmente para producir jabn y glicerina. Los cidos grasos con los metales forman jabones; esta reaccin es irreversible y se verifica en caliente.5 3.3.
-

Materia Insaponificable El contenido de materia Insaponificable es una propiedad muy diferente

al Valor de Saponificacin. Mientras que esta ltima es la medida del peso molecular promedio de los glicridos o cidos grasos que lo componen, el contenido de materia Insaponificable es igual a la cantidad total de sustancias disueltas en el aceite que, despus de la saponificacin, no son solubles en soluciones acuosas pero s en solventes orgnicos usados en la determinacin. En otras palabras, el contenido de materia Insaponificable es la medida de la proporcin de material orgnico disuelto por los glicridos y cidos grasos que en general en s conforman el 95% de casi todos los aceites. Los materiales orgnicos pueden ser impurezas como aceite mineral, o de origen natural como esteroles, tocoferoles, carotenoides o pigmentos.6
-

En trminos generales la materia Insaponificable es el conjunto de

sustancias que se encuentran frecuentemente disueltas en el aceite o en la grasa que no sufren saponificacin y que son voltiles bajo las condiciones de la norma que se aplique.7
-

Material Insaponificable son aquellas sustancias que se encuentran

frecuentemente disueltas en grasas, pero que no pueden saponificar por lcalis, y son solubles en los disolventes corrientes de las grasas.
3 4 5 6 7

Reglamentacin Tcnico-Sanitaria espaola de Grasas y Aceites. Saponificacin. Microsoft Encarta 2009. Microsoft Corporation, 2008.

Ibit pg. 2 (7)

Definicin enfocada de manera general en el anlisis de Aceites. Artculo extrado de BIOHIGER a travs de: Quimica.blogspot.

Estas sustancias incluyen: Los ms altos alcoholes alifticos

Esteroles: Alcoholes cristalinos (26 a 30 tomos de carbono). Ej. el colesterol.

Hidrocarburos: Compuestos de C e H como los carotenos

Tocoferoles: Vitamina E Vitaminas: A, D K. Aceites minerales, materia orgnica derivada del petrleo. ter de Petrleo

Otros 3.4. (Bencina, nafta) PE. 35-80C, disuelve nicamente grasas, aceites y ceras. Los cidos grasos hidroxilados y sus glicridos son prcticamente insolubles. Solubiliza menos glicridos de grasas que de aceites. Extrae impurezas no polares (clorofila y compuestos resinosos). Extremadamente flamable. Mezcla de hidrocarburos, principalmente C5-C7, con 45 a 90% de C6.8 3.5. ter Etlico (ter dietlico, ter sulfrico, ter anestsico). PE 35C. Solvente para la mayora de los lpidos. Mayor solubilidad de esfingomielinas, cerebrsidos y lecitina. Se satura con 1,2% de agua a 20C. Disuelve ms impurezas como aminocidos, carbohidratos, sales, cidos orgnicos, cetonas, aldehdos y alcoholes. Muy voltil y altamente flamable. Tiende a formar perxidos explosivos. 4. PRINCIPIO Despus de saponificada la grasa se hace una extraccin del material insaponificable con ter etlico o con ter de petrleo, purificando la capa etrea mediante lavados con agua y NaOH. El disolvente se evapora y se seca el residuo obtenido. A este residuo se le resta la cantidad en gramos de cidos grasos libres presentes, obtenidos mediante una valoracin con un lcali; y este valor corresponde al material insaponificable.9 5. PREPARACIN DE LA MUESTRA La muestra a ensayar debe ser limpia y brillante; en caso contrario se calienta al bao mara hasta unos 15C por encima de la temperatura de completa
8 9

ITURBE CHIAS FRANSISCA A. Departamento de Alimentos y Biotecnologa. UNAM. Ibit pg. 1 (2).

fusin; si a esa temperatura la muestra continua turbia se aade Na2SO4 anhidro se agita y se filtra manteniendo la muestra fundida durante la filtracin.
6. o o o

MATERIALES Y EQUIPOS Bao mara u otra fuente de calentamiento Balanza analtica (preferentemente con sensibilidad de 0.0001 g.) Matraz Erlenmeyer o matraz Soxlet, de 125 ml y 250 ml provisto de refrigerante a reflujo. Embudos de separacin de 500 ml. Sifn Micro bureta. Esptula Estufa elctrica con regulador de temperatura (105C). Desecador Vaso de precipitados Equipo usual de laboratorio. REACTIVOS

o o o o
o

o o o 7.

Los reactivos que a continuacin se mencionan deben ser analticos, a menos que se indique otra cosa. Cuando se hable de agua, se debe entender agua destilada. o
o o

Agua Solucin acuosa de Hidrxido de Potasio (KOH) al 50 % Alcohol etlico al (95%). Fenolftalena. Solucin al 1% de fenolftalena en alcohol etlico del 95% Solucin de KOH en solucin etanlica 1 M: 60gm de KOH en 50ml de agua y diluir hasta 1000 con etanol al 95%. ter de petrleo o ter dietlico. PROCEDIMIENTO Pesar 5 0,01 g de la muestra preparada y colocar en un matraz Erlenmeyer o matraz Soxhlet. Agregar 30 ml de alcohol y 5 ml de solucin de hidrxido de potasio. Al

o o
o

o 8.
a.

b.

matraz se le adapta el refrigerante en posicin de reflujo y se calienta suavemente durante 60 minutos o el tiempo necesario hasta completar la saponificacin.
c.

Transferir el contenido del matraz a un embudo de separacin, lavar el matraz primero con agua caliente y luego con agua fra, hasta obtener un volumen aproximado de 80 ml. Lavar el matraz con ter de petrleo o ter dietlico y aadir al embudo de separacin, lavar con 50 ml de alcohol etlico, luego con agua caliente y con agua fra hasta obtener un volumen aproximadamente de 80 ml.

d.

Se tapa y se agita vigorosamente durante 1 minuto hasta la separacin de 2 capas; se deja reposar hasta que las capas estn completamente definidas. Se usa el sifn para eliminar la capa superior sin que se incluya nada de la capa inferior.

Cuando se utilice ter dietlico, realizar un mnimo de cuatro extracciones o hasta que la prueba de reaccin negativa (vese nota 1). NOTA 1: En la prueba de reaccin se realiza otra extraccin, sta se evapora separadamente. Se pesa el residuo y cuando de menor de 0,005 g. se da por terminada las extracciones.
e.

Transferir las fracciones a un embudo de separacin de 500 ml el cual contiene 5 ml de alcohol etlico al 10% para minimizar la posibilidad de prdida del ter de petrleo (vese nota 2).

NOTA 2: En algunos casos siete extracciones no son suficientes, por lo tanto debe realizarse otra extraccin, sta se evapora separadamente. Se pesa el residuo y cuando ste sea menor de 0,005 g. se descontina la extraccin.
f.

Lavar los extractos combinados en un embudo de separacin 25 ml de alcohol etlico al 10%, agitar vigorosamente, y eliminar la capa de alcohol despus de cada lavado. El lavado se suspende cuando la solucin del lavado est neutra a la fenolftalena. Se debe tener cuidado en no eliminar nada de la capa etrea.

g.

Transferir el extracto etreo a un vaso de precipitado, previamente tarado y evaporar a sequedad en un bao de vapor. Completar el secado hasta peso constante preferentemente en una estufa de vaco a 75 C 80 C y a una presin interna no mayor de 200 mmHg o en una

estufa de aire a 105 C, a intervalos de 15 min. Enfriar en un desecador y pesar.

h.

Una vez pesado el residuo se disuelve con 50 ml de alcohol etlico (95%), calentar (aproximadamente 50 C), previamente neutralizado en presencia del indicador hasta la aparicin del color rosado y titular con la solucin de hidrxido de sodio 0,02 N hasta la aparicin del mismo color.

9.

NORMA

El presente trabajo contiene disposiciones que constituyen requisitos de la Norma Venezolana (COVENIN 635-81) y de la Norma Mexicana (NMX-K-3061972). Como todas las normas estan sujetas a revisin, y los alcances de las mismas 10. se establecen para la determinacin especfica de materia insaponificable en aceites y grasas vegetales o animales. CLCULO El contenido de materia insaponificable en tanto porciento se calcula con la siguiente frmula: G2 = V x N x 0.282 Materia Insaponificable en % = Donde: G2 = Gramos de cidos grasos en el extracto. V = Volumen de la solucin de hidrxido de sodio empleado en la titulacin de los cidos grasos, en ml. N = Normalidad de la solucin de hidrxido de sodio. G1 = Peso del residuo, en gramos. G = Peso de la muestra empleada, en gramos. 11.

OBSERVACIONES En algunos casos siete extracciones no son suficientes, por ello debe

hacerse una serie de extracciones adicionales y evaporarlas separadamente, hasta que en una se obtenga un residuo menor de 0.005 g. 12.

El ensayo se debe realizar generalmente por duplicado y los valores BIBLIOGRAFA A.O.C.S. American Oil Chemists. Method TK 1a-64T Unsaponiable

obtenidos deben concordar dentro del 0.1% aproximadamente.

material.

A.O.A.C. Association of Official Analytical Chemist. Ed. XVI, Vol. 2, Cap. ITURBE CHIAS FRANSISCA A. Departamento de Alimentos y MEDINA M. GILMA B. Aceites y Grasas Comestibles. Universidad de NMX-K-306-1972. Mtodo de prueba para la Determinacin de Materia NORMA VENEZOLANA. Aceites y Grasas Vegetales. Determinacin de Artculo sobre Grasas y Aceites

41, pg. 29, 1995. Biotecnologa. UNAM. Mxico. Antioquia- Departamento de Farmacia y Bromatologa. Insaponificable en Aceites y Grasas Vegetales o Animales.

la Materia Insaponificable. [http://docencia.udea.edu.co/qf/grasas/material-inso.html]. ENCICLOPEDIA ENCARTA. Saponificacin. Microsoft Encarta 2009. Microsoft Corporation, 2008.